JP7033143B2 - Dctn1タンパク質とretタンパク質との融合タンパク質 - Google Patents
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- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
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-
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Description
しかしながら、がんの発生のドライバーとなり得る変異遺伝子や融合遺伝子等は十分に解明されておらず、薬剤の治療効果に関連し得る遺伝子異常を同定することは非常に有意義である。
項1又は2記載のポリペプチドの存在が検出されるか、かつ/又は項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの存在が検出された場合に、当該被験者に対し、RETを阻害する化合物を用いた化学療法を行う工程を含む、癌の治療方法。
(1)本発明のポリペプチド、又は本発明のポリペプチド及び/又はポリヌクレオチドを発現している細胞に試験化合物を接触する工程。
を含む方法により行うことができる。
(1)本発明のポリペプチド、又は本発明のポリペプチド及び/又はポリヌクレオチドを発現している細胞に試験化合物を接触する工程。
を含む方法により行うことができる。
(j)DCTN1タンパク質をコードするポリヌクレオチドにハイブリダイズするプローブ及びRETタンパク質をコードするポリヌクレオチドにハイブリダイズするプローブからなる群から選択される少なくとも1つのプローブであるポリヌクレオチド。
が挙げられる。
DCTN1遺伝子とRET遺伝子との融合遺伝子陽性及び/又はDCTN1タンパク質とRETタンパク質との融合タンパク質陽性の癌治療用医薬組成物の有効性分としては、RETを阻害する化合物であり、より好ましくはバンデタニブ、カボザンチニブ、レンバチニブ、国際公開第2017/043550号パンフレットに記載の一般式(1)で示される縮合ピリミジン化合物又は国際公開第2017/146116号パンフレットに記載の一般式(1)で示される縮合ピリミジン化合物であり、より好ましくは、バンデタニブ、カボザンチニブ、レンバチニブ、国際公開第2017/043550号パンフレットに記載の実施例化合物1から90又は国際公開第2017/146116号パンフレットに記載の実施例化合物1から207であり、さらに好ましくはバンデタニブ、カボザンチニブ、レンバチニブ、4-アミノ-1-(tert-ブチル)-N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-カルボキサミド、4-アミノ-7-(tert-ブチル)-N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-7-(1-フルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)―N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)―7-(1―メチルシクロプロピル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-7-(2-シクロプロピルプロパン-2-イル)-N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-N-[4-(メトキシメチル)フェニル]-7-(1-メチルシクロプロピル)-6-(3-モルホリノプロ-1-ピン-1-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-N-[4-(メトキシメチル)フェニル]-7-(1-メチルシクロプロピル)-6-((テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)エチニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、(R)-4-アミノ-N-[4-(メトキシメチル)フェニル]-7-(1-メチルシクロプロピル)-6-((テトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド又は4-アミノ-N-[4-(メトキシメチル)フェニル]-6-((1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)エチニル)-7-(1-メチルシクロプロピル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミドであり、特に好ましくは4-アミノ-1-(tert-ブチル)-N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-3-カルボキサミド、4-アミノ-7-(tert-ブチル)-N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-7-(1-フルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)―N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)―7-(1―メチルシクロプロピル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-7-(2-シクロプロピルプロパン-2-イル)-N-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-N-[4-(メトキシメチル)フェニル]-7-(1-メチルシクロプロピル)-6-(3-モルホリノプロ-1-ピン-1-イル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、4-アミノ-N-[4-(メトキシメチル)フェニル]-7-(1-メチルシクロプロピル)-6-((テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)エチニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド、(R)-4-アミノ-N-[4-(メトキシメチル)フェニル]-7-(1-メチルシクロプロピル)-6-((テトラヒドロフラン-2-イル)メトキシ)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミド又は4-アミノ-N-[4-(メトキシメチル)フェニル]-6-((1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)エチニル)-7-(1-メチルシクロプロピル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-5-カルボキサミドである。
<1-1 臨床検体由来RNAの抽出>
Asterand Bioscienceより購入したヒト甲状腺がん組織から、RNeasy Mini Kit(Qiagen)を用いて以下の方法によりRNAを抽出した。甲状腺がん組織にBuffer RLTを600μL加え、QIAshredderスピンカラムにアプライした後遠心し (16,000 rpm、2分、室温)、濾液を回収した。回収した濾液に同量の70%エタノール水溶液を加え混和した後に、RNeasy Miniカラムにアプライし遠心した(10,000 rpm、15秒、室温)。RNeasy Miniカラムに700μLのBuffer RW1を添加し遠心した (10,000 rpm、15秒、室温)。さらに500μLのbuffer RPEを加え遠心した(10,000 rpm、15秒、室温)。同様に再度500μLのbuffer RPEを加え遠心した (10,000 rpm、2分、室温)。再度RNeasy Miniカラムを遠心(16,000 rpm、1分、室温)し、持ち越したbufferを取り除いた。RNeasy MiniカラムにRNase free waterを40μLアプライした後、遠心(10,000 rpm、1分、室温)し、濾液をtotal RNAとして回収した。
上記1-1で得られたtotal RNAから、SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit(invitorgen)を用いて、以下の方法によりcDNAを合成した。500ngのtotal RNAを容量が14μLになるようにRNAse free waterで調製し、4μLの5× VILO Reaction Mix及び2μLの10× SuperScript Enzyme Mixを加え混和した。25℃で10分間保温しその後42℃で60分保温した。反応を停止させるために最後に85℃で5分間インキュベートし、cDNAを得た。
DCTN1-RET融合遺伝子を増幅させるため、表1に示すように、センスプライマーとしてPrimer1(配列番号33)とアンチセンスプライマーとしてPrimer2(配列番号34)、さらにnested PCRに用いるセンスプライマーとしてPrimer3(配列番号35)とアンチセンスプライマーとしてPrimer4(配列番号36)を設計した。
上記1-3で得られたプラスミドDNAをテンプレートにして、表2に示したシークエンス用プライマーPrimer5からPrimer36を用い、BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kitを用いシークエンス反応を行い、Applied Biosystems 3730xl DNA Analyzerを用いてシークエンス解析を実施した。シークエンス解析の結果、DCTN1-RET融合遺伝子は、DCTN1 variant 5(GenBankアクセッション番号:NM_001190836)のexon1~exon27の3'側の下流にRET variant 2(GenBankアクセッション番号:NM_020975)のexon12~exon20が融合した遺伝子(配列番号17)であった。
Asterand Bioscienceより購入したヒト正常甲状腺組織由来RNAと前記1-1で得られたヒト甲状腺がん組織由来RNAからSuperScript VILO cDNA Synthesis Kit(invitorgen)を用いて、以下の方法によりcDNAを合成した。280ngのTotal RNAを 容量が14μLになるようにRNAse free waterで調製し、5× VILO Reaction Mixを4μL、10× SuperScript Enzyme Mixを2μLそれぞれ加え混和した。25℃で10分間保温しその後42℃で60分保温した。反応を停止させるために最後に85℃で5分間インキュベートした。
発現ベクター構築のため、表4に示すように、センスプライマーとしてPrimer40(配列番号72)とアンチセンスプライマーとしてPrimer41(配列番号73)を設計した。
<4-1 細胞の樹立>
DCTN1-RET融合遺伝子発現細胞の樹立のための宿主細胞として、マウス胎児線維芽細胞NIH/3T3細胞(American Type Culture Collection)を選択し、上記にて作製したDCTN1-RET融合遺伝子が組み込まれた発現ベクターをトランスフェクションすることにより、DCTN1-RET融合遺伝子発現細胞を樹立した。詳細な方法は以下に示すとおりに実施した。NIH/3T3細胞は、通常の培養(2次元培養)のために、D-MEM(高グルコース)(L-グルタミン、フェノールレッド、ピルビン酸ナトリウム、1500mg/L炭酸水素ナトリウム含有)(WAKO)に10%となるようにNewborn Calf Serum(NBCS)(GIBCO)を添加したものを2次元培養用の培地として使用し、37℃、5%CO2にて培養したものを使用した。トランスフェクションを行う前日に、NIH/3T3細胞を1.5×105cells/2mLにて、6well plate(IWAKI)に播種し、37℃、5%CO2にて、一晩インキュベートした。1.5μgのDCTN1-RET融合遺伝子発現ベクター、1.5μgのpJTI phiC31 integrase vectorを混合した混合液に、その混合液の6倍量のViaFect Transfection Reagentを添加した後、全量が300μLとなるようにOpti-MEMを添加し、室温にて5分間インキュベートすることによりトランスフェクション溶液を作製した。NIH/3T3細胞が播種されているwellから培地を300μL除去し、上記で作製したトランスフェクション溶液を300μL添加し、37℃、5%CO2にて、一晩インキュベートした。翌日、トランスフェクション溶液を除去するために、培地を交換した。培地を交換する際に、新しい培地には、ハイグロマイシンB(ナカライテスク)を500μg/mLとなるように添加した。ハイグロマイシンBにより、DCTN1-RET融合遺伝子導入発現ベクターが導入されていない細胞を除去した。
トランスフェクション後、1週間に2回程度の培地交換をしながら、細胞が増殖するまで、培養を行った。トランスフェクション22日後に、細胞をトリプシンにて回収し、以下の方法にてシングルセルクローニングを行った。回収した細胞の細胞数を測定し、1cell/200μLとなるように培地を添加した。96well Plate(ThermoFisher)に200μL/1wellとなるように細胞を播種した。播種後、日々観察を行い、シングルセルから増殖してきた細胞を取得し、DCTN1-RET融合遺伝子発現細胞(DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞)とした。
得られたDCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞におけるDCTN1-RET融合タンパク質の発現を、ウエスタンブロット法にて確認した。すなわち、培養フラスコから培地を除去し、PBSにて1度洗浄した。培養フラスコ内にPhosphatase inhibitor(ロシュ)とProtease inhibitor(ロシュ)を含有したSample Diluent Concentrate 2(R&D SYSTEMS)を添加し、スクレイパーにて細胞溶解液を回収した。回収した細胞溶解液から遠心分離により、タンパク質サンプルを得た。タンパク質サンプルは、タンパク質定量を行い、タンパク質濃度を一定にした。一定濃度のタンパク質サンプルに対して、Sample Buffer Solution with Reducing Reagent(6x) for SDS-PAGE(ナカライテスク)を加え、95℃にて5分間インキュベートすることにより、タンパク質を変性させ、ウエスタンブロッティング用のサンプルを得た。なお、ネガティブコントロール用のサンプルとして、親株であるNIH/3T3細胞を用いて、同様の方法にてウエスタンブロティング用のサンプルを得た。上記サンプルを用いて、以下に示す方法にて、タンパク質の発現を確認した。4-15パーセント Acrylamide gel(BIO―RAD)および1× Tris/Glycine/SDS Bufferを用いて、SDS-PAGE電気泳動(200Vで30分)にて、タンパク質を分離した。Trans-Blot Turb RTA Midi PVDF Transfer Kit(BIO―RAD)とTransblot Turbo 転写システム(BIO―RAD)を用いてPVDF膜にタンパク質を転写し、PVDF膜をBlocking One-Pに1時間浸漬した。Blocking One-Pが10%となるようにTBS-Tで希釈した溶液で一次抗体(Phospho-Ret (Tyr905) Antibody(CST)、Ret (C31B4) Rabbit mAb(CST)及びAnti-Dctn1 Antibody(ATLAS ANTIBODIES))を1/1000濃度になるように希釈し、PVDF膜を浸漬させ、4℃にて一晩インキュベートした。TBS-Tにて洗浄後、Anti-rabbit IgG,HRP-linked Antibody(CST)を1/2000濃度になるようにTBS-Tにて希釈した2次抗体希釈液にて、PVDF膜を浸漬させ、室温にて1時間インキュベートした。TBS-Tにて洗浄後、SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate(ThermoFisher)及びルミノ・イメージアナライザー Amersham Imager 600(GEヘルスケア)を用いてタンパク質の検出を行った。なお、検出タンパク質の分子量は、プレシジョン Plusプロテイ カレイドスコープスタンダード(BIORAD)により確認した。
その結果、図4a)及びb)に示すように、抗pRET抗体と抗RET抗体を用いたところ内在性のRET(150及び175kDa)は検出されなかった。一方、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞においてのみ、175kDa付近にDCTN1-RET融合タンパク質と推測されるバンドが確認できた。
また、図4c)に示すように抗DCTN1抗体を用いたところ、150kDa付近に内在性のDCTN1が検出された。一方、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞においてのみ、内在性の150kDaのDCTN1のバンドの上の175kDa付近にバンドが検出された。すなわち、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞においてのみ、RETに対する抗体及びDCTN1に対する抗体の両方で175kDa付近のバンドが検出されたことから、作成したDCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞では、DCTN1とRETが融合したタンパク質が発現していることが明らかとなった。
NIH/3T3細胞は、2次元培養条件では良好な増殖を示すが、3次元培養条件では、ほとんど増殖しない。一方で、NIH/3T3細胞に癌遺伝子を発現させることにより、3次元培養条件でも増殖することが知られている。その性質を利用し、DCTN1-RET融合遺伝子が癌遺伝子であるかの確認を行った。37℃、5%CO2にて、2次元培養で培養したDCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞及びNIH/3T3細胞をトリプシンにて回収し、細胞数を測定した。3次元培養を行うために、FCeM series Preparation kit(日産化学工業株式会社)とD-MEM(高グルコース)(L-グルタミン、フェノールレッド、ピルビン酸ナトリウム、1500mg/L炭酸水素ナトリウム含有)(WAKO)とNewborn Calf Serum(NBCS)(GIBCO)を用いて、3次元培養用の培地を作製した。作製した3次元培養用の培地に、細胞を1000cells/90μLとなるように懸濁し、96 Well Clear Black Round Bottom、Spheroid Microplate(Corning)に90μL/1wellとなるように播種し、37℃、5%CO2にてインキュベートした。播種翌日(Day1)及び播種8日後(Day8)に細胞内ATP発光検出試薬であるCelltiter-Glo 2.0Reagent(Progema)及びルミノメーター(EnSpire, PerkinElmer)を用いて発光量(counts per second:cps)を測定し、生細胞数の指標とした。Day1での測定結果とDay8での測定結果から各細胞の増殖率を算出した(N=3)。
その結果、図5に示すように、NIH/3T3細胞では、Day8の細胞数はDay1の細胞数と比較して2.4倍であったのに対して、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞では、20.9倍であった。また、NIH/3T3細胞は、3次元培養において細胞の凝集塊は形成されないが、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞では、3次元培養により細胞の凝集塊が形成されていることが確認された。
すなわち、DCTN1-RET融合遺伝子を導入することにより、細胞の増殖が亢進したことが明らかとなり、DCTN1-RET融合遺伝子が癌遺伝子であることが示唆された。
DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞のin vivoにおける造腫瘍性を確認するために、ヌードマウスを用いた移植実験を行った。なお、親株であるNIH/3T3細胞は、ヌードマウスの皮下では増殖しないことが、一般的に知られており、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞をヌードマウスの皮下に移植することにより、DCTN1-RET融合遺伝子が造腫瘍性に寄与するか、すなわち癌遺伝子であるかの確認ができる。被移植動物としては、ヌードマウス(BALB/cAJcl-nu/nu、日本クレア)を用いた。DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞をトリプシンにて回収し、最終的に1×108cells/mLとなるようにPBSに懸濁し、同量のマトリゲル基底膜マトリックス(Corning)を加え、5×107cells/mLにしたものを移植用細胞液とした。25G注射針と1mLシリンジを用いて、移植用細胞液をヌードマウス(N=10)の右側胸部の皮下に0.1mLずつ移植した。電子ノギス(ミツトヨ)を用い、移植後、10、13、17日目に、1匹ずつ腫瘍の長径及び短径を測定し、以下の式を用いて腫瘍体積を算出した。
腫瘍体積(mm3)=(長径、mm)×(短径、mm)×(短径、mm)/2
腫瘍体積の測定結果を図6に示す。その結果、ヌードマウスの皮下に移植されたDCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞は、腫瘍を形成し、良好に増殖することが確認され、in vivo実験においてもDCTN1-RET融合遺伝子が癌遺伝子であることが示唆された。
DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞に対するsiRNA処理による影響を確認した。用いたsiRNAは、下記の表5に示した3種類のRET siRNAとネガティブコントロールとしてSilencer Select Negative Control #1 siRNA(Ambion)を使用した。なお、3種類のRET siRNAは、いずれもヒトRETを標的とするsiRNAであるが、RET siRNA1及びRET siRNA2はDCTN1-RET融合遺伝子内のRET部分に結合する配列を含み、RET siRNA3はDCTN1-RET融合遺伝子内に結合する配列を含まない。すなわち、RET siRNA1及びRET siRNA2はDCTN1-RET融合遺伝子の発現を抑制するが、RET siRNA3はDCTN1-RET融合遺伝子の発現を抑制しないことが想定された。以下にsiRNAを用いた実験の方法について記載した。
翌日、一部は、タンパク質発現解析用にサンプリングを行い、一部については、細胞増殖確認用に再播種を行った。タンパク質発現解析用のサンプリング及びタンパク質発現解析は、一次抗体として、Phospho-Ret (Tyr905) Antibody(CST)、Ret (C31B4) Rabbit mAb(CST)及びGAPDH (D16H11) XP Rabbit mAb(CST)を用いた以外は、上記<4-2 目的タンパク質の発現確認>と同様の方法で実施した。その結果、図7に示すように、siRNA処理していない細胞(無処理)に比べ、ネガティブコントロールsiRNA(NC)を処理した細胞において、DCTN1-RET融合タンパク質の発現は抑制されていないことが確認できた。一方、RET siRNA1及びRET siRNA2を処理した場合、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞のDCTN1-RET融合タンパク質の発現が抑制されることが確認され、RET siRNA3では抑制されないことが明らかとなった。
次に細胞増殖抑制効果の確認のために、無処理又はsiRNA処理されたwellからトリプシンにより細胞を回収し、細胞数を測定した。上記実施例5と同様の方法で3次元培養を行い、播種当日(Day0)及び播種4日後(Day4)に実施例5と同様の方法で生細胞数を測定した。Day0での測定結果とDay4での測定結果から各細胞における増殖率を算出した。
その結果、図8に示すように、siRNAを処理していない細胞(無処理)及びネガティブコントロールsiRNA(NC)を処理した細胞では、Day4の細胞数は、Day0の細胞数と比較して、4.9倍及び3.6倍であったのに対して、RET siRNA1及びRET siRNA2で処理した細胞では、2.0倍及び2.4倍程度の増殖であり、顕著に増殖率が低下した。一方、RET siRNA3はで処理した細胞では、3.7倍の増殖であり、ネガティブコントロールsiRNAと同程度の増殖率であり、増殖率の低下は見られなかった。これらの結果から、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞の増殖は、siRNAによってRETの発現を阻害した場合にも抑制されることが明らかとなった。
DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞に対するin vitro細胞増殖試験を行った。上記実施例5と同様の方法で、3次元培養及び播種を行った。播種後37℃、5%CO2にて一晩インキュベートした(Day0)。RETを阻害すると報告されているカボザンチニブ、バンデタニブ、アレクチニブ、レンバチニブ、縮合ピリミジン化合物(Compound1から9;表6に示す)をジメチルスルホキシドにて10 mmol/Lの濃度に溶解し、さらに3次元培養用の培地を用いて、これらの化合物の最終濃度がそれぞれ1000、333、111、37.0、12.3、4.12、1.37、0.457nmol/Lになるように希釈を行った。これを先に述べた細胞が播種されたプレートの各Wellに0.01mLずつ加え(Day1)、37℃、5%CO2にて7日間インキュベートした。培養後(Day8)、全てのWellに細胞内ATP発光検出試薬であるCelltiter-Glo 2.0Reagent(Progema)を添加し、ルミノメーター(EnSpire、PerkinElmer)を用いて発光量(counts per second:cps)を測定した。Tday8とCday1の値の大きさに応じて、以下の式より化合物の各濃度におけるDay1からの増殖率を算出し、細胞増殖を50%抑制する被験化合物の濃度(GI50(nM))を求めた。
1)Tday8≧Cday1の場合
増殖率(%)=(Tday8-Cday1)/(Cday8-Cday1)×100
T:被験化合物を添加したWellのcps
C:被験化合物を添加しなかったWellのcps
Day1:被験化合物を添加した日
Day8:評価日
2)Tday8<Cday1の場合
増殖率(%)=(Tday8-Cday1)/(Cday1)×100
T:被験化合物を添加したWellのcps
C:被験化合物を添加しなかったWellのcps
Day1:被験化合物を添加した日
Day8:評価日
DCTN1-RET融合遺伝子発現細胞におけるRETのリン酸化が、RETを阻害すると報告されている既存の薬剤で阻害されるかについて以下の方法にて検討した。
DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞は、2次元培養用の培地を使用し、37℃、5%CO2にて培養したものを使用した。薬剤処理を行う前日に、各細胞を3×105cells/2mLにて、6well plate(IWAKI)に播種し、37℃、5%CO2にて、一晩インキュベートした。カボザンチニブ、バンデタニブ、アレクチニブ、レンバチニブをジメチルスルホキシドにて10mmol/Lの濃度に溶解し、さらにPBSを用いて、これらの化合物の最終濃度がそれぞれ1000、100、10nmol/Lになるように希釈を行った。これを先に述べた細胞が播種されたプレートの各Wellに20μLずつ加え(Day1)、37℃、5%CO2にて1時間インキュベートした。インキュベート後、上記実施例7に記載されている方法と同様の方法でタンパク質発現解析用のサンプリングを行い、タンパク質発現解析を実施した。
その結果、図9に示すように、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞のリン酸化RETレベルがカボザンチニブ及びレンバチニブにより顕著に減少することが確認された。また、上記と同様の方法で、縮合ピリミジン化合物を用いて、RETのリン酸化阻害を評価した結果、縮合ピリミジン化合物においてもRETのリン酸化が顕著に減少することが確認できた。
以上の結果から、リン酸化RETレベルを顕著に減少させる薬剤は、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞の増殖を抑制できる化合物であり、DCTN1-RET融合遺伝子が検出されたがんに対する治療薬として有用である可能性が示唆された。また、DCTN1-RET融合遺伝子発現NIH/3T3細胞のリン酸化RETレベルを用いることでRET阻害剤のスクリーニングが可能であることが示唆された。
配列番号2は、DCTN1 v1とRET v2との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号3は、DCTN1 v1とRET variant 4(v4)[配列番号32の一部]との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号4は、DCTN1 v1とRET v4との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号5は、DCTN1 variant 2(v2)[配列番号26の一部]とRET v2との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号6は、DCTN1 v2とRET v2との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号7は、DCTN1 v2とRET v4との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号8は、DCTN1 v2とRET v4との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号9は、DCTN1 variant 3(v3)[配列番号27の一部]とRET v2との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号10は、DCTN1 v3とRET v2との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号11は、DCTN1 v3とRET v4との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号12は、DCTN1 v3とRET v4との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号13は、DCTN1 variant 4(v4)[配列番号28の一部]とRET v2との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号14は、DCTN1 v4とRET v2との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号15は、DCTN1 v4とRET v4との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号16は、DCTN1 v4とRET v4との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号17は、DCTN1 variant 5(v5)[配列番号29の一部]とRET v2との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号18は、DCTN1 v5とRET v2との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号19は、DCTN1 v5とRET v4との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号20は、DCTN1 v5とRET v4との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号21は、DCTN1 v6とRET v2との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号22は、DCTN1 v6とRET v2との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号23は、DCTN1 v6とRET v4との融合ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列を示す。
配列番号24は、DCTN1 v6とRET v4との融合ペプチドのアミノ酸配列を示す。
配列番号33は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号34は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号35は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号36は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号37は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号38は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号39は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号40は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号41は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号42は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号43は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号44は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号45は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号46は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号47は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号48は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号49は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号50は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号51は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号52は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号53は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号54は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号55は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号56は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号57は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号58は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号59は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号60は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号61は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号62は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号63は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号64は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号65は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号66は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号67は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号68は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号69は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号70は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号71は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号72は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号73は、プライマーの塩基配列を示す。
配列番号74は、RET siRNAの塩基配列を示す。
配列番号75は、RET siRNAの塩基配列を示す。
配列番号76は、RET siRNAの塩基配列を示す。
配列番号77は、RET siRNAの塩基配列を示す。
Claims (23)
- DCTN1タンパク質のN末端側にあるコイルドコイルドメインの一部又は全部を含むポリペプチドと、RETタンパク質のC末端側にあるキナーゼドメインを含むポリペプチドとが融合しているポリペプチド。
- 以下の(a)~(c)から選択される請求項1記載のポリペプチド。
(a)配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、又は配列番号24で示されるアミノ酸配列からなるポリペプチド。
(b)配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、又は配列番号24で示されるアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸が置換、欠失、又は付加されたアミノ酸配列からなるポリペプチド。
(c)配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、又は配列番号24で示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列からなるポリペプチド。 - 請求項1又は2記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
- 以下の(d)~(f)から選択される請求項3記載のポリヌクレオチド。
(d)配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、又は配列番号24で示されるアミノ酸配列からなるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
(e)配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、又は配列番号24で示されるアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸が置換、欠失、又は付加されたアミノ酸配列からなるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
(f)配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、又は配列番号24で示されるアミノ酸配列と90%以上の同一性を有するアミノ酸配列からなるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。 - 以下の(g)~(i)から選択される請求項3記載のポリヌクレオチド。
(g)配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、又は配列番号23で示される塩基配列からなるポリヌクレオチド。
(h)配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、又は配列番号23で示される塩基配列と相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド。
(i)配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、又は配列番号23で示される塩基配列と90%以上の同一性を有するポリヌクレオチド。 - 請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
- 請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドを導入した細胞。
- 請求項1又は2記載のポリペプチドにおけるDCTN1タンパク質のN末端部分とRETタンパク質のC末端部分との融合点を含むアミノ酸配列に特異的に結合する抗体。
- 請求項8に記載の抗体であって、前記DCTN1タンパク質のN末端部分とRETタンパク質のC末端部分との融合点が、
配列番号2における1-1233番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号2における1234-1635番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号4における1-1233番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号4における1234-1593番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号6における1-1099番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号6における1100-1501番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号8における1-1099番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号8における1100-1459番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号10における1-1208番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号10における1209-1610番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号12における1-1208番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号12における1209-1568番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号14における1-1094番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号14における1095-1496番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号16における1-1094番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号16における1095-1454番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号18における1-1191番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号18における1192-1593番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号20における1-1191番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号20における1192-1551番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号22における1-1226番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号22における1227-1628番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;又は
配列番号24における1-1226番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号24における1227-1586番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点である、抗体。 - 試料中の、請求項1又は2記載のポリペプチドの存在を検出する方法。
- 試料中の、請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの存在を検出するためのプライマー又はプローブであって、当該プライマー又はプローブが請求項1又は2記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドにおけるDCTN1とRETとの融合点を含む領域にハイブリダイズするポリヌクレオチドである、プライマー又はプローブ。
- 試料中の、請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの存在を検出する方法。
- 試料中の、請求項1若しくは2記載のポリペプチド又は請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの存在を検出することにより、試料の由来となる患者が癌であることの指標とする方法。
- RETを阻害する化合物を有効成分とする、請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドにおける融合点の遺伝子発現が陽性及び/又は請求項1又は2記載のポリペプチドにおける融合点の発現が陽性である癌治療用医薬組成物。
- 請求項14に記載の組成物であって、DCTN1タンパク質をコードするポリヌクレオチドとRETタンパク質をコードするポリヌクレオチドとの融合点が、配列番号1における1-3699番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号1における3700-4905番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号3における1-3699番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号3における3700-4779番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号5における1-3297番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号5における3298-4503番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号7における1-3297番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号7における3298-4377番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号9における1-3624番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号9における3625-4830番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号11における1-3624番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号11における3625-4704番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号13における1-3282番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号13における3283-4488番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号15における1-3282番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号15における3283-4362番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号17における1-3573番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号17における3574-4779番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号19における1-3573番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号19における3574-4653番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;
配列番号21における1-3678番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号21における3679-4884番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点;又は
配列番号23における1-3678番目のDCTN1をコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドと配列番号23における3679-4758番目のRETをコードするポリヌクレオチド由来の塩基配列を有するポリヌクレオチドが融合した点である、組成物。 - 請求項14又は15に記載の組成物であって、前記DCTN1タンパク質のN末端部分とRETタンパク質のC末端部分との融合点が、
配列番号2における1-1233番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号2における1234-1635番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号4における1-1233番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号4における1234-1593番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号6における1-1099番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号6における1100-1501番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号8における1-1099番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号8における1100-1459番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号10における1-1208番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号10における1209-1610番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号12における1-1208番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号12における1209-1568番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号14における1-1094番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号14における1095-1496番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号16における1-1094番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号16における1095-1454番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号18における1-1191番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号18における1192-1593番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号20における1-1191番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号20における1192-1551番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;
配列番号22における1-1226番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号22における1227-1628番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点;又は
配列番号24における1-1226番目のDCTN1のN末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドと配列番号24における1227-1586番目のRETのC末端部分由来のアミノ酸配列を有するポリペプチドが融合した点である、組成物。 - 以下の(1)及び(2)の工程を含む請求項1又は2記載のポリペプチドの発現及び/又は活性、又は請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの発現を抑制する化合物をスクリーニングする方法。
(1)請求項1又は2記載のポリペプチド、請求項1若しくは2記載のポリペプチド又は請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドを発現している細胞、又は請求項7に記載の細胞に試験化合物を接触する工程。
(2)上記工程(1)において、請求項1又は2記載のポリペプチドの発現及び/又は活性、又は請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの発現が抑制されるか測定する工程、又は上記工程(1)記載の細胞の増殖が抑制されるか測定する工程。 - 請求項1若しくは2記載のポリペプチド又は請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドを、RETを阻害する化合物を用いた化学療法が有効であるか否かの指標とする方法であって、請求項10記載の検出方法により、試料中から、請求項1若しくは2記載のポリペプチドを検出した場合、及び/又は請求項12記載の検出方法により、試料中から、請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの存在を検出した場合に、RETを阻害する化合物を用いた化学療法が有効であると判定する方法。
- 請求項1又は2記載のポリペプチドにおけるDCTN1タンパク質のN末端部分とRETタンパク質のC末端部分との融合点を含むアミノ酸配列に特異的に結合する抗体、及び請求項1又は2記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドにおけるDCTN1とRETとの融合点を含む領域にハイブリダイズするポリヌクレオチドの一方又は両方を含む、癌を検出するための組成物。
- 請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドにおける融合点の遺伝子発現が陽性及び/又は請求項1又は2記載のポリペプチドにおける融合点の発現が陽性である癌患者を治療するための癌治療用医薬組成物を製造するための、RETを阻害する化合物の使用。
- 試料中の請求項1又は2記載のポリペプチドの存在を検出するための手段及び/又は試料中の請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの存在を検出するための手段の、RETを阻害する化合物を用いた化学療法が有効であるか否かの判定薬を製造するための使用であって、該判定薬が、該手段を、該判定に用いる成分として含む、使用。
- 請求項1又は2に記載のポリペプチドの存在を検出するためのキットであって、前記DCTN1タンパク質のN末端部分と前記RETタンパク質のC末端部分との融合点を含むアミノ酸配列に特異的に結合する抗体を含む、キット。
- 請求項1若しくは2記載のポリペプチド又は請求項3から5のいずれかに記載のポリヌクレオチドの存在を検出するための検出薬を製造するための、請求項8若しくは9記載の抗体、請求項22記載のキット又は請求項11記載のプライマー若しくはプローブの使用。
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Citations (1)
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DK3269370T3 (da) | 2016-02-23 | 2020-04-06 | Taiho Pharmaceutical Co Ltd | Hidtil ukendt kondenseret pyrimidinforbindelse eller salt deraf |
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WO2014130975A1 (en) | 2013-02-22 | 2014-08-28 | Bastian Boris C | Fusion polynucleotides and fusion polypeptides associated with cancer and particularly melanoma and their uses as therapeutic and diagnostic targets |
Non-Patent Citations (2)
Title |
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Human Pathology,2012年,Vol.43,p.2047-2052 |
The Journal of Cell Biology,1995年,Vol.131, No.6, Part 1,p.1507-1516 |
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