JP7026755B2

JP7026755B2 - 髪のダメージを修復し、頭皮の老化を遅らせる松茸発酵物、組成物及びその使用

Info

Publication number: JP7026755B2
Application number: JP2020192283A
Authority: JP
Inventors: 孝子堺; リーヨン; ウェイジェームズ
Original assignee: オクスロ株式会社
Priority date: 2020-07-30
Filing date: 2020-11-19
Publication date: 2022-02-28
Anticipated expiration: 2040-11-19
Also published as: CN111904901A; JP2022027391A; CN111904901B

Description

CCTCC

CCTCC M 2016001

本発明は、松茸の使用との技術分野に関与し、具体的には、松茸発酵物の調製方法、当該調製方法により調製された松茸発酵物、当該松茸発酵物を含む組成物及びその使用に関与する。

社会の発展と生活ペースの加速に伴い、人々の生活と仕事のプレッシャーの増加は、頭皮と髪の健康に悪影響を及ぼしている。また、近年、カラーリングやパーマをする人が増えてきているが、カラーリングやパーマは、髪や頭皮にダメージを与え、髪の毛の強度を低下させ、頭皮の老化を加速させる。髪と頭皮の健康に対する人々の懸念に応えて、髪と頭皮に対して滋養・ケア機能を備える洗髪製品・ヘアケア製品を開発することは重要な意味を持つ。

松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｍａｔｓｕｔａｋｅ）は、学名がトリコローマ・マツタケであり、「松蕈、合菌、台菌」とも呼ばれ、担子菌門、キシメジ科に属し、松やクヌギなどの樹木と相利共生する外生菌根菌であり、独特の濃厚な香りを持つ。松茸は、さまざまな栄養素や機能性活性成分が豊富な野生の食用・薬用菌であり、キノコ中の珍宝とみなされ、「キノコの王様」や「山のダイヤモンド」という美称があり、抗腫瘍、免疫力の強化、血糖値の制御、コレステロールと血中脂質レベルの低下など、多くの生理機能を備えている。

現在、松茸は、直接使用されるか、または溶媒や超音波により有効成分を抽出して使用される場合が多く、例えば、中国特許出願ＣＮ１０２１４０１４２Ａでは、洗浄、破砕、脱脂、水浸、濃縮、およびアルコール抽出などの抽出ステップによってマツタケにおける多糖類成分を抽出する、純度の高いマツタケ多糖類の抽出プロセスが開示されている。従来技術において、松茸を生物学的に発酵させる高付加価値加工に関する研究や報道が少ないため、松茸の機能性成分の使用が制限されている。従って、松茸を生物学的に発酵させる高付加価値加工の方法の開発、特に髪と頭皮に対して滋養・ケア効果を持つ松茸発酵物の開発は、松茸の使用価値の向上、そして、髪のダメージや頭皮の老化などの髪や頭皮の問題の緩和にとって重要な意味を持っている。

本発明の目的は、松茸発酵物の調製方法、及び当該方法により調製された松茸発酵物を提供することであり、本発明の別の目的は、当該松茸発酵物の組成物及びその使用を提供することである。

本発明は、頭皮と髪を滋養・ケアし、傷んだ髪を修復する機能を有する松茸由来製品を得ることを目的とし、微生物を利用して松茸を発酵させ、松茸における有効成分を放出させ、さらに松茸における吸収・利用されにくい高分子有効成分を分解することで、松茸発酵物の頭皮と髪を滋養し、傷んだ髪を修復し、頭皮の老化を遅らせる作用を向上させる。

具体的には、本発明の技術案は、以下のとおりである。

まず、本発明は、ラクトバチルス属細菌で松茸を発酵させることを含む松茸発酵物の調製方法を提供する。

本発明は研究過程において、発酵菌株が、松茸の発酵後の発酵物における有効成分の組成、含有量、及びそれの頭皮における経皮吸収効率や利用効率を大きく影響し、適切な発酵菌株は、成長と代謝において松茸の成分による阻害を少なく受けるべきであり、これにより、松茸の構造及びその中の高分子有効物質を分解する機能を有し、さらに松茸を含む発酵システムで上記の機能を効果的に発揮できることを見出した。本発明は、発酵菌株に対する持続的なスクリーニングや検証により、松茸を含む発酵システムで迅速に成長・増殖でき、高い代謝活性を有し、松茸を効果的に分解して有効成分を放出させ、そして、発酵物の頭皮と髪を滋養し、傷んだ髪を修復し、頭皮の老化を遅らせる作用を向上させる発酵菌株を発見した。

以上の方法に記載のラクトバチルス属細菌は、好ましくはラクトバチルス・ペントーサスである。

本発明の好ましい一実施態様として、前記ラクトバチルス属細菌は、受託番号がＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１であるラクトバチルス・ペントーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｅｎｔｏｕｓ）ＧＵＦＨＳＬ－６９菌株である。

ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９菌株は、既に中国発明特許ＣＮ１０５９６９６８０Ｂに開示されており、当該菌株は、貴州の伝統料理である発酵米麺から分離されたものであり、２０１６年１月４日付で中国典型培養物保蔵センター（略称：ＣＣＴＣＣ、寄託機関の住所：中国、武漢、武漢大学、受託番号：ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１）に寄託された。中国特許ＣＮ１０５９６９６８０Ｂでは、当該菌株がコレステロールと亜硝酸塩を低下させる機能を持つことが開示されているが、本発明において、同じ属、同じ種または性能の近い他の菌株と比較して、当該菌株が、松茸を含む発酵システムで迅速に成長・増殖でき、高い代謝活性を有し、松茸を効果的に分解して有効成分を十分に放出させ、発酵物の頭皮と髪を滋養し、傷んだ髪を修復し、頭皮の老化を遅らせる作用を向上させることが予期せずに発見された。

以上に記載の松茸は、松茸のいかなる部位、例えば、松茸の子実体や菌糸体に由来してもよい。松茸の子実体と比較して、松茸の菌糸体は生物学的発酵などの再生可能な方法で入手でき、かつ有効成分の含有量が高い。本発明に記載の松茸は、好ましくは、松茸菌糸体である。

本発明において、松茸は発酵システムにおいて発酵基質として使用され、松茸菌糸体は不活化処理をしてから発酵システムに添加する必要がある。

本発明に記載の松茸菌糸体は、好ましくは受託番号がＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１４６７１である松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｍａｔｓｕｔａｋｅ）Ｔ３５菌株の菌糸体である。ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９を利用して、以上に記載の方法により、松茸Ｔ３５菌糸体を発酵させて得られる発酵物は、低分子有効成分が豊富で、頭皮での経皮吸収性が良好で、より優れる頭皮と髪を滋養し、傷んだ髪を修復し、頭皮の老化を遅らせる機能を有する。

受託番号がＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１４６７１である松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｍａｔｓｕｔａｋｅ）Ｔ３５菌株は、すでに中国特許ＣＮ１０５０３９１７０Ａにより開示され、当該菌株は、生物学的発酵法により大量の菌糸体を得ることができる。松茸を発酵基質とすること以外にも、本発明に記載の発酵物の発酵基質は、発酵菌株によって利用される炭素源及び窒素源を含む。

本発明は、発酵基質における松茸、窒素源、及び炭素源の割合（特に松茸と窒素源の割合）を合理的に制御することで、発酵菌株の成長をより良く促進できるとともに、発酵菌株の松茸およびその有効成分に対する分解活性を向上できることを見出した。

以上に記載の発酵の培地は、松茸と、炭素源と、窒素源とを含み、前記培地において、前記松茸と前記窒素源の質量比は１：（８～１６０）である。

以上に記載の発酵の培地において、前記松茸と前記炭素源の質量比は１：（５～１００）である。

以上に記載の発酵の培地において、前記松茸の質量体積百分率は０．１～１０％である。本発明は、松茸の過剰な添加により、発酵物における有効成分の含有量がさらに増加することはなく、反って発酵菌株の代謝および分解活性に悪影響を及ぼしやすいことを見出した。

以上に記載の発酵の培地において、前記松茸の質量体積百分率（ｇ：ｍｌ）は、好ましくは０．１～５％である。

以上に記載の発酵培地の炭素源は、糖を含み、窒素源は、有機窒素源を含む。

具体的には、炭素源は、好ましくは、グルコース、リボース、ラクトース、ガラクトース、フラクトース、スクロース、マルトース、マンノース、トレハロース、マンニトール、ソルビトールから選択される１種又は複数種である。有機窒素源は、好ましくは、ペプトン、ラブ－レムコ末、酵母エキス粉末から選択される１種又は複数種である。

松茸及び発酵菌株とより良く配合できる、好ましい炭素源と窒素源の組み合わせについては、炭素源はグルコースであり、窒素源はペプトン、ラブ－レムコ末、酵母エキス粉末である。

以上に記載の発酵培地において、さらに無機塩等を含んでも良い。

具体的には、発酵培地は、以下のような成分（ｇ：ｍｌ）を含む：松茸０．１～１０％、グルコース５～３０％、ペプトン５～１５％、ラブ－レムコ末５～１５％、酵母エキス粉末２～８％、リン酸二カリウム０．１～０．５％、硫酸マグネシウム０．１～０．５％、硫酸マンガン０．１～０．３％。当該培地は、発酵菌株の成長・代謝活性を確保するとともに、発酵菌株による松茸基質の分解を促進して、頭皮と髪を滋養し、傷んだ髪を修復し、頭皮の老化を遅らせる機能を有する低分子有効成分を生成させることができる。

具体的には、前記方法は、前記ラクトバチルス属細菌を発酵培地に接種して、２５～４０℃で発酵させることを含む。本発明では、発酵菌株が、高温条件に耐えて成長・発酵できるが、発酵温度を２５～４０℃に制御すると、発酵物における低分子有効成分の含有量を確保するのに、より有利であることが発見された。

以上に記載の発酵温度は、発酵菌株の適切な成長温度に応じて調整することができる。例えば、ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９について、発酵温度は、好ましくは３０～３７℃である。

以上に記載の発酵過程において、前記ラクトバチルス属細菌の接種量は１×１０^６～１×１０^７ｃｆｕ／ｍｌ前記培地であり、前記発酵は１２～７２ｈの静置発酵である。

本発明は、以下のステップを含む松茸発酵物の調製方法を提供する。
（１）ラクトバチルス・ペントーサス種液を調製する；
（２）ラクトバチルス・ペントーサスの種液を１×１０^７ｃｆｕ／ｍｌ培地の接種量で上述発酵培地に接種し、３０～３７℃の二酸化炭素インキュベーターで３６～４８ｈ静置発酵する；
（３）滅菌した後、発酵液を固液分離して、分離された発酵上澄み液又は発酵上澄み液の乾燥物を、前記松茸発酵物とする。

本発明は、さらに以上に記載の調製方法により調製された松茸発酵物を提供する。

本発明は、頭皮と髪に対するケア効果をさらに向上させるために、以上に記載の松茸発酵物に基づき、当該松茸発酵物を含有する組成物をさらに開発した。本発明は、上述微生物発酵法により調製される松茸発酵物が、オキナワモズク（ＣＬＡＤＯＳＩＰＨＯＮＯＫＡＭＵＲＡＮＵＳ）抽出物と相乗作用を発揮でき、両者の組み合わせにより、頭皮と髪に対する滋養・修復効果が顕著に向上することを見出した。

この知見に基づき、本発明は、質量比が（５～１）：１である松茸発酵物とオキナワモズク（ＣＬＡＤＯＳＩＰＨＯＮＯＫＡＭＵＲＡＮＵＳ）抽出物を含む、頭皮と髪に用いる組成物を提供する。当該質量比で併用することで、両者はより優れる相乗作用を発揮できる。

オキナワモズク（ＣＬＡＤＯＳＩＰＨＯＮＯＫＡＭＵＲＡＮＵＳ）抽出物と併用する松茸発酵物は、好ましくは受託番号がＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１４６７１である松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｍａｔｓｕｔａｋｅ）Ｔ３５の発酵物であり、両者は、明らかな相乗作用を発揮でき、より優れる頭皮と髪を滋養し、傷んだ髪を修復し、頭皮の老化を遅らせる機能を有する。

本発明に記載のオキナワモズク抽出物は、当分野の常法により抽出して得られるか、又は市販で購入できる。

さらに、本発明は、頭皮と髪のケア製品の調製における、前記調製方法、或いは前記松茸発酵物、或いは前記組成物の使用を提供する。

本発明は、前記松茸発酵物又は前記組成物を含む製品を提供する。

本発明に記載の製品は、好ましくは、洗髪製品又はヘアケア製品であり、シャンプー、ヘアトニック、染毛剤、コンディショナー、整髪料、ヘアクリーム、ヘアローションを含むが、これらに限定されるものではない。

好ましくは、前記松茸発酵物の前記製品における質量百分率は０．１～１５％である。

本発明の一実施態様として、前記製品は洗髪製品であり、前記洗髪製品は、さらに当分野で許容される洗髪製品のベースを含む。

好ましくは、前記ベースは、重量部が下記の通りの成分を含む：陰イオン界面活性剤１０～２０部、両性界面活性剤１～１０部、コカミドＭＥＡ０．５～５部、ナトリウムジリノレアミドプロピルＰＧ－ジモニウムクロリドホスフェート０．１～３部、昆布抽出物０．１～２部、グアーヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド０．１～２部、ステアラミドプロピルジメチルアミン０．１～２部、ポリクオタニウム１～６部、ココイル加水分解ダイズタンパク質０．１～０．５部、香料０．０５～０．５部、防腐剤０．０１～０．２部、脱イオン水４０～８０部。

以上に記載の洗髪製品において、前記陰イオン界面活性剤は、好ましくは、ラウレス硫酸アンモニウム、ミリストイルメチルタウリンナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウムの１種又は複数種であり、前記両性界面活性剤は、好ましくは、ラウラミドプロピルベタイン、ジメチルドデシルベタイン、イミダゾリンの１種又は複数種であり、前記ポリクオタニウムは、好ましくは、ポリクオタニウム－５３とポリクオタニウム－４７の１種又は複数種である。

本発明の有益な効果は、下記の通りである。

１）本発明は、微生物を利用して松茸菌糸体を発酵させ、松茸における頭皮と髪を滋養し、パーマやカラーリングなどにより損傷した髪を修復する等の機能を有する有効成分を十分に放出させ、松茸の有効成分の利用率を向上させる、松茸資源をより深く開発する新たな方法を提供する。

２）本発明は、微生物発酵により松茸菌糸体及びそれにおける高分子物質の効率的な分解を実現でき、得られた松茸発酵物は、頭皮での経皮吸収が可能な低分子有効成分が豊富で、頭皮と毛包の代謝に十分な栄養素を提供し、効果的に頭皮と髪を滋養し、損傷した髪を修復し、頭皮の老化を遅らせることができ、ヘアケア製品における使用価値が高く、頭皮と髪の健康問題の解決にとって重要な意味を持っている。

３）本発明は、松茸発酵物とオキナワモズク（ＣＬＡＤＯＳＩＰＨＯＮＯＫＡＭＵＲＡＮＵＳ）抽出物を配合することにより頭皮と髪に用いる組成物を得ており、当該組成物において、松茸発酵物とオキナワモズク（ＣＬＡＤＯＳＩＰＨＯＮＯＫＡＭＵＲＡＮＵＳ）抽出物が相乗的に作用して、頭皮と髪に対する滋養・修復効果をさらに向上させる。

以下の実施例は、本発明を説明するためのものであり、本発明の範囲を制限するためのものではない。

以下の実施例において、特に説明のない限り、使用される実験方法は、いずれも常法である。

以下の実施例において、特に説明のない限り、使用される材料は、いずれも商業ルートから入手できるものである。以下の実施例及び比較例で使用される松茸菌糸体は、中国特許出願ＣＮ１０２８０５２８１Ｂに開示された受託番号がＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１４６７１である松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｍａｔｓｕｔａｋｅ）Ｔ３５菌株の菌糸体である。受託番号がＣＧＭＣＣＮｏ１．１２９３５であるラクトバチルス・プランタルム、受託番号がＣＧＭＣＣＮｏ１．３６３７であるラクトバチルス・ペントーサス、及び受託番号がＣＧＭＣＣＮｏ１．１２９３５であるラクトバチルス・プランタルムは、中国微生物菌種寄託管理委員会普通微生物センター（ＣｈｉｎａＧｅｎｅｒａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒ）から購入できる。

以下の実施例で使用されるオキナワモズク抽出物は、ＸＩＹＡＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＣＯ．, ＬＩＭＩＴＥＤから購入したものである。

実施例１
本実施例では、以下の方法により調製された松茸発酵物を提供する。
（１）ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９の種液の調製
ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９（ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１）を液体ＭＲＳ培地に接種して、３７℃の二酸化炭素インキュベーターで２０ｈインキュベートした。
４０００ｒ/ｍｉｎ、４℃の条件で１０ｍｉｎ遠心させて集菌し、最後に同体積のＰＢＳ保護剤（ＮａＣｌ０．８％、ＫＨ_２ＰＯ_４０．０２％、Ｎａ_２ＨＰＯ_４０．１１５％、トリプトン１％、及びグルタミン酸ナトリウム０．１％）で菌体を再懸濁させた。
（２）発酵
ステップ（１）で得られた種液を１×１０^７ｃｆｕ/ｍｌ培地の接種量で発酵培地に接種して、３７℃の二酸化炭素インキュベーターで４８ｈ静置培養した。
発酵培地は、松茸菌糸体０．５％を含有する発酵培地であり、発酵培地の組成（質量体積百分率、ｇ：ｍｌ）は、松茸菌糸体０．５％、グルコース１０％、ペプトン８％、ラブ－レムコ末５％、酵母エキス粉末３％、リン酸二カリウム０．１％、硫酸マグネシウム０．２％、硫酸マンガン０．１％であった。
（３）発酵物の抽出
発酵が完了した後、滅菌して、１２０００ｒ/ｍｉｎ、４℃で２０ｍｉｎ遠心させ、上澄み液を取り出した。

実施例２
本実施例では、以下の方法により調製された松茸発酵物を提供する。
（１）ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９の種液の調製
ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９（ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１）を液体ＭＲＳ培地に接種して、３７℃の二酸化炭素インキュベーターで２０ｈインキュベートした。
４０００ｒ/ｍｉｎ、４℃の条件で１０ｍｉｎ遠心させて集菌し、最後に同体積のＰＢＳ保護剤（ＮａＣｌ０．８％、ＫＨ_２ＰＯ_４０．０２％、Ｎａ_２ＨＰＯ_４０．１１５％、トリプトン１％、及びグルタミン酸ナトリウム０．１％）で菌体を再懸濁させた。
（２）発酵
ステップ（１）で得られた種液を１×１０^７ｃｆｕ/ｍｌ培地の接種量で発酵培地に接種して、３０℃の二酸化炭素インキュベーターで４８ｈ静置培養した。
発酵培地は、松茸菌糸体２％を含有する発酵培地であり、発酵培地の組成（質量体積百分率、ｇ：ｍｌ）は、松茸菌糸体２％、グルコース１０％、ペプトン８％、ラブ－レムコ末５％、酵母エキス粉末３％、リン酸二カリウム０．１％、硫酸マグネシウム０．２％、硫酸マンガン０．１％であった。
（３）発酵物の抽出
発酵が完了した後、滅菌して、１２０００ｒ/ｍｉｎ、４℃で２０ｍｉｎ遠心させ、上澄み液を取り出した。

実施例３
本実施例では、以下の方法により調製された松茸発酵物を提供する。
（１）ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９の種液の調製
ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９（ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１）を液体ＭＲＳ培地に接種して、３７℃の二酸化炭素インキュベーターで２０ｈインキュベートした；
４０００ｒ/ｍｉｎ、４℃の条件で１０ｍｉｎ遠心させて集菌し、最後に同体積のＰＢＳ保護剤（ＮａＣｌ０．８％、ＫＨ_２ＰＯ_４０．０２％、Ｎａ_２ＨＰＯ_４０．１１５％、トリプトン１％、及びグルタミン酸ナトリウム０．１％）で菌体を再懸濁させた。
（２）発酵
ステップ（１）で得られた種液を１×１０^７ｃｆｕ/ｍｌ培地の接種量で発酵培地に接種して、３０℃の二酸化炭素インキュベーターで４８ｈ静置培養した。
発酵培地は、松茸菌糸体０．１％を含有する発酵培地であり、発酵培地の組成（質量体積百分率、ｇ：ｍｌ）は、松茸０．１％、グルコース１０％、ペプトン８％、ラブ－レムコ末５％、酵母エキス粉末３％、リン酸二カリウム０．１％、硫酸マグネシウム０．２％、硫酸マンガン０．１％であった。
（３）発酵物の抽出
発酵が完了した後、滅菌して、１２０００ｒ/ｍｉｎ、４℃で２０ｍｉｎ遠心させ、上澄み液を取り出した。

実施例４
本実施例では、重量部が下記の通りの成分、即ち、実施例１の松茸発酵物１．５部、オキナワモズク（ＣＬＡＤＯＳＩＰＨＯＮＯＫＡＭＵＲＡＮＵＳ）抽出物０．５部からなる、頭皮と髪に用いる組成物を提供する。

実施例５
本実施例では、組成（質量百分率）が、実施例１の松茸発酵物２％、シャンプーベース９８％であるシャンプーを提供する。
ただし、シャンプーベースの組成（質量百分率）は、以下の通りであった。
ラウレス硫酸アンモニウム１５％、ミリストイルメチルタウリンナトリウム３％、ラウラミドプロピルベタイン６％、ステアラミドプロピルジメチルアミン０．２％、コカミドＭＥＡ０．５％、ポリクオタニウム－４７２％、昆布（ＬＡＭＩＮＡＲＩＡＪＡＰＯＮＩＣＡ）抽出物１％、ココイル加水分解ダイズタンパク質０．１％、ナトリウムジリノレアミドプロピルＰＧ－ジモニウムクロリドホスフェート０．２％、グアーヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド０．２％、香料０．１％、ブチルカルバミン酸ヨウ化プロピニル０．１％、脱イオン水７２％。

実施例６
本実施例では、組成（質量百分率）が、実施例２の松茸発酵物０．５％、シャンプーベース９９．５％であるシャンプーを提供する。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

実施例７
本実施例では、組成（質量百分率）が、実施例３の松茸発酵物１０％、シャンプーベース９０％であるシャンプーを提供する。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

実施例８
本実施例では、組成（質量百分率）が、実施例４の組成物２％、シャンプーベース９８％であるシャンプーを提供する。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

比較例１
松茸菌糸体を取り、その重量の６倍の脱イオン水を加え、３７℃で抽出し、抽出時間を１２ｈとした。濾過して上澄み液を取り、その重量の２倍のエタノールを添加して３０℃で３６ｈ静置沈殿させた。１２０００ｒ/ｍｉｎで２０ｍｉｎ遠心させ、上澄み液を取り出した。

比較例２
本比較例では、松茸発酵物を提供するが、その調製方法と実施例１の相違点は、ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９（ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１）を受託番号がＣＧＭＣＣＮｏ１．１０６３６であるラクトバチルス・ペントーサスに置き換えたことだけであった。

比較例３
本比較例では、松茸発酵物を提供するが、その調製方法と実施例１の相違点は、ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９（ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１）を受託番号がＣＧＭＣＣＮｏ１．３６３７であるラクトバチルス・ペントーサスに置き換えたことだけであった。

比較例４
本比較例では、松茸発酵物を提供するが、その調製方法と実施例１の相違点は、ラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９（ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１）を受託番号がＣＧＭＣＣＮｏ１．１２９３５であるラクトバチルス・プランタルムに置き換えたことだけであった。

比較例５
本比較例では、シャンプーを提供するが、その組成（質量百分率）は、比較例１の松茸抽出物２％（実施例５のシャンプーと比較して、抽出と発酵に用いる松茸菌糸体の質量が等しく、そして、抽出された上澄み液に、発酵上澄み液の体積と同様になるまでに水を加えた）、シャンプーベース９８％であった。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

比較例６
本比較例では、組成（質量百分率）が、比較例２の松茸発酵物２％、シャンプーベース９８％であるシャンプーを提供する。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

比較例７
本比較例では、組成（質量百分率）が、比較例３の松茸発酵物２％、シャンプーベース９８％であるシャンプーを提供する。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

比較例８
本比較例では、組成（質量百分率）が、比較例４の松茸発酵物２％、シャンプーベース９８％であるシャンプーを提供する。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

比較例９
本比較例では、組成（質量百分率）が、オキナワモズク（ＣＬＡＤＯＳＩＰＨＯＮＯＫＡＭＵＲＡＮＵＳ）抽出物２％、シャンプーベース９８％であるシャンプーを提供する。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

実施例９
本実施例では、組成（質量百分率）が、実施例１の松茸発酵物１．５％、アナメ（ＡＧＡＲＵＭＣＲＩＢＲＯＳＵＭ）抽出物０．５％、シャンプーベース９８％であるシャンプーを提供する。
シャンプーベースの処方は実施例５と同じである。

実験例１松茸発酵物における低分子ペプチドの含有量の分析
本実験では、実施例１～３及び比較例１～４の松茸発酵物又は松茸抽出物における低分子有効成分の含有量を、具体的に以下のように分析した。
実施例１～３の松茸発酵物及び比較例１の松茸抽出物、比較例２、３及び４の松茸発酵物を取り、分画分子量が１０００である濾過膜を採用して濾過した後、クーマシーブリリアントブルーキットにより濾液における低分子ペプチドの含有量を測定した。

低分子ペプチドの含有量の測定結果を表１に示した。表１の結果から明らかなように、実施例１の松茸発酵物における低分子ペプチドの含有量は、比較例１の松茸抽出物、ならびに、比較例２、３及び４の松茸発酵物より顕著に高く、これは、実施例１～３の調製方法を採用することで、松茸菌糸体における低分子ペプチドをより十分に放出させることができることを示している。

実験例２松茸発酵物の頭皮滋養・保湿効果の分析
本実験例は、実施例１～３及び比較例１～４の松茸発酵物の頭皮滋養・保湿効果を、具体的に以下の方法により分析した。
パネラー７０名を選択して、群あたり１０名として７群に分け、頭皮において５*５ｃｍを選択して髪を削げ、実験用の頭皮を露出させ、ドイツのＣＫ社製の皮膚水分量計ＣｏｒｎｅｏｍｅｔｅｒＣＭ８２５により、上述の実施例１～３の松茸発酵物、並びに、比較例１の松茸抽出物及び比較例２～４の松茸発酵物を、露出した頭皮に使用した。使用を開始する前に、皮膚水分量計により、一定の温度と一定の湿度(２１℃と４０％湿度)の条件で、各被験者の頭皮の水分含有量を測定し、使用した後の初期値(Ｔ０)、及び使用した３０分(Ｔ１)後と８時間(Ｔ２)後の頭皮の水分含有量の変化を測定し、その測定結果を表２に示した。表２の測定結果から明らかなように、実施例１～３の松茸発酵物を使用する場合、使用した３０ｍｉｎ後の皮膚の水含有量は、比較例１～４と比べた顕著に高くなっており、そのうち、実施例１の効果は最も良好であり、これは、松茸発酵物が、頭皮を滋養・保湿でき、頭皮に十分な水分を与え、頭皮の老化を遅らせることを示している。

実験例３シャンプーのパーマやカラーリングによって損傷した髪に対する修復効果の実験
実施例及び比較例のシャンプーのパーマやカラーリングにより損傷した髪に対する修復効果を検証するため、２５－６０歳の過去１年間にパーマやカラーリングをして、髪がパーマやカラーリングの過程で損傷したパネラー１００名を選択して、群あたり１０名として１０群に分け、それぞれ実施例５～８及び比較例５～９、実施例９のいずれかのシャンプーを提供し、使用時間を２ヶ月、使用頻度を、２日おきに１回使用するにして、当該シャンプーの髪を強化する効果を検討した。実験を開始する前に、パネラーの髪の破断強度を測定し、シャンプーを２ヶ月使用した後、髪の破断強度を測定して、髪の強度の変化を比較した。実験では、インストロン５５６５万能材料試験機により髪の強度を測定した。具体的な測定方法は、測定しようとする髪のサンプルを取り、まず、温度２０±２℃、相対湿度６５±３％の大気雰囲気で２４ｈ平衡化した後、当該大気雰囲気で、髪チャック部長さ１５０ｍｍ、引張速度５００ｍｍ／ｍｉｎで測定を行い、パネラー一人あたり２０本の髪サンプルに対してそれぞれ測定を行って、各群のパネラーの平均値を取るであった。その結果を表３に示した。

表３の結果から明らかなように、実施例５～８及び９のシャンプーのパーマやカラーリングにより損傷した髪に対する修復効果は、比較例５～９より顕著に優れており、これは、実施例１～３の松茸発酵物及び実施例４の組成物が、パーマやカラーリングにより損傷した髪の強度を顕著に向上させることができることを示している。

実験例４シャンプー試用効果の実験
各実施例及び比較例のシャンプーの髪・頭皮に対する滋養効果を検証するため、２５－６０歳のパネラー１００名を選択して、群あたり１０名として１０群に分け、それぞれ実施例５～８及び比較例５～９、実施例９のいずれかのシャンプーを提供し、使用時間を２ヶ月、使用頻度を、２日おきに１回使用するにして、当該シャンプーの指通り、柔軟性、保湿性、かゆみ止め、及び汚れ除去効果を測定した。測定した性能を６つのレベルに設定した。具体的には、６は極めて良好を、５は良好を、４はやや良好を、３は普通を、２はやや不良を、１は不良を示す。各群のパネラーの測定結果の平均値を取り、測定指標と結果を表４に示した。

表４の結果から明らかなように、実施例５～８及び９のシャンプーは、指通り、柔軟性、保湿性、かゆみ止め、及び汚れ除去効果における試用効果が、比較例５～９より顕著に優れており、これは、実施例１～３の松茸発酵物及び実施例４の組成物が、シャンプーの洗髪効果を顕著に向上でき、頭皮及び髪に対して効果的な滋養、保湿および抗菌等のケア効果を発揮でき、髪の質と健康状態を顕著に改善できることを示している。

上記において、一般的な説明及び具体的な実施形態で本発明を詳しく説明したが、本発明に基づき、いくつかの補正や改善を行い得ることは、当業者にとって明らかである。従って、本発明の趣旨から逸脱しない範疇で行われるこれらの補正や改善は、いずれも本発明の保護しようとする範囲に属する。

Claims

ラクトバチルス属細菌で松茸を発酵させることを含み、
前記ラクトバチルス属細菌はラクトバチルス・ペントーサスであり、それは、受託番号がＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１６００１をもつラクトバチルス・ペントーサスＧＵＦＨＳＬ－６９を含むことを特徴とする松茸発酵物の調製方法。
前記松茸は松茸菌糸体であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
前記発酵の培地は、松茸と、炭素源と、窒素源とを含み、前記培地において、松茸と窒素源の質量比は１：（８～１６０）であることを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
前記炭素源は、糖を含み、前記窒素源は、有機窒素源を含むことを特徴とする請求項３に記載の方法。
前記発酵の培地は、松茸０．１～１０％、グルコース５～３０％、ペプトン５～１５％、ラブ－レムコ末５～１５％、酵母エキス粉末２～８％、リン酸二カリウム０．１～０．５％、硫酸マグネシウム０．１～０．５％、硫酸マンガン０．１～０．３％といった質量体積百分率の成分を含むことを特徴とする請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
請求項１～５のいずれか１項に記載の方法により調製された松茸発酵物。
頭皮と髪に用いる組成物であって、質量比が（５～１）：１である松茸発酵物とオキナワモズク抽出物を含み、前記松茸発酵物は請求項６に記載の松茸発酵物であることを特徴とする前記組成物。
頭皮と髪のケア製品の調製における、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法、或いは請求項６に記載の松茸発酵物、或いは請求項７に記載の組成物の使用。
請求項６に記載の松茸発酵物又は請求項７に記載の組成物を含むことを特徴とする頭皮と髪のケア製品。