JP6979149B1 - Tarcを含有する組成物、及びtarcの保存安定性向上方法 - Google Patents
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Abstract
Description
具体的に、本発明は以下のとおりである。
<1>TARC(Thymus and activation−regulated chemokine)を含む組成物であって、TARC、並びに、糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上を含み、そして液状である、前記組成物。
<2>TARCを測定するための校正用試料溶液である、<1>に記載の組成物。
<3>保存容器に充填されている、<1>又は<2>に記載の組成物。
<4>保存容器が、プラスチックである、<3>に記載の組成物。
<5>TARCの濃度が、前記組成物に対して、10pg/mL〜1μg/mLである、
<1>〜<4>のいずれかに記載の組成物。
<6>前記糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上の濃度が、前記組成物に対して、0.00001質量%〜1質量%である、<1>〜<5>のいずれかに記載の組成物。
<7>糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤である、<1>〜<6>のいずれかに記載の組成物。
<8>TARCの濃度が、前記組成物に対して500pg/mLの場合に、37℃で28日間、プラスチック容器において保存した後のTARCの残存率が、80%以上である、<1>〜<7>のいずれかに記載の組成物。
<9>TARCの濃度が、前記組成物に対して500pg/mLの場合に、4℃で28日間、プラスチック容器において保存した後のTARCの残存率が、90%以上である、<1>〜<8>のいずれかに記載の組成物。
<10>糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアート、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレン(20)硬化牛脂アミン、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリエチレングリコールモノーp−イソオクチルフェニルエーテル、及びn−ノナノイルーN−メチルーD−グルカミンである、<1>〜<9>のいずれかに記載の組成物。
<11><1>〜<10>のいずれかに記載の組成物を使用する、TARCの測定方法。
<12><1>〜<10>のいずれかに記載の組成物を含む、TARCの測定キット。
<13>糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上を含む溶液にTARCを接触させる工程を含む、TARCの保存安定性向上方法。
<14>前記TARCの濃度が、前記溶液に対して、10pg/mL〜1μg/mLとなるように調整する、<13>に記載のTARCの保存安定性向上方法。
<15>前記溶液中の糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上の濃度が、前記溶液に対して、0.00001質量%〜1質量%である、<13>又は<14>に記載のTARCの保存安定性向上方法。
<16>糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤である、<13>〜<15>のいずれかに記載のTARCの保存安定性向上方法。
<17>糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアート、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレン(20)硬化牛脂アミン、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリエチレングリコールモノーp−イソオクチルフェニルエーテル、及びn−ノナノイルーN−メチルーD−グルカミンである、<13>〜<16>のいずれかに記載のTARCの保存安定性向上方法。
<18>TARCを含む溶液中のTARCの容器への吸着防止剤であって、糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上を有効成分として含有する前記吸着防止剤。
<19>前記TARCを含む溶液中のTARCの濃度が、前記溶液に対して、10pg/mL〜1μg/mLである、<18>に記載の吸着防止剤。
<20>前記界面活性剤の濃度が、前記溶液に対して、0.00001質量%〜1質量%となるように使用する、<18>又は<19>に記載の吸着防止剤。
<21>糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤である、<18>〜<20>のいずれかに記載の吸着防止剤。
<22>糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアート、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレン(20)硬化牛脂アミン、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリエチレングリコールモノーp−イソオクチルフェニルエーテル、及びn−ノナノイルーN−メチルーD−グルカミンである、<18>〜<21>のいずれかに記載の吸着防止剤。
本明細書において「TARC」は、Thymus and activation−regulated chemokine(CCL17)を意味する。TARCは、白血球遊走作用を持つケモカインの一種である。TARCは、リンパ球の1つであるTh2細胞を病変局所に引き寄せて、IgE産生又は好酸球を浸潤・活性化する機能を有する。TARCをバイオマーカーとして使用することで、アトピー性皮膚炎に対する治療薬を選択又は変更する際に、客観的に且つ迅速に重症度を把握することができる。
本発明の組成物に含まれるTARCの濃度としては、以下に限定されるものではないが、TARCの安定性を考慮して、組成物に対して、好ましくは10pg/mL〜1μg/mL、より好ましくは50pg/mL〜500ng/mL、さらに好ましくは100pg/mL〜100ng/mL、最も好ましくは100pg/mL〜50ng/mLである。
本明細書では、水に溶解した時に、イオン化しない親水基を有する界面活性剤を、非イオン性界面活性剤と称する。
糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤とは、親水性部分として糖を、疎水性部分として長鎖脂肪酸を有する非イオン性界面活性剤であり、多価アルコール型と呼ばれることもある。糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤としては、ショ糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤が挙げられる。ショ糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤は、親水性部分としてショ糖を、疎水性部分として長鎖脂肪酸を有する非イオン性界面活性剤である。ソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤は、ソルビトール又はソルビタンと、長鎖脂肪酸との部分エステルであるソルビタン脂肪酸エステルを含む非イオン性界面活性剤である。
疎水性部分の長鎖脂肪酸の炭素数は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、炭素数12〜30、好ましくは炭素数12〜24、より好ましくは炭素数12〜20、さらに好ましくは炭素数12〜18である。
中でも、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタントリステアラート、及びポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアートからなる群から選択される少なくとも1つを使用することが好ましく、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート及びポリオキシエチレン(20)ソルビタントリステアラートからなる群から選択される少なくとも1つを使用することがより好ましく、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラートを使用することが最も好ましい。
・ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート(Tween 20)〔CAS番号:9005−64−5〕
・ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアラート(Tween 60)〔CAS番号:9005−67−8〕
・ポリオキシエチレン(20)ソルビタントリステアラート(Tween 65)〔CAS番号:9005−71−4〕
・ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアート(Tween 80)〔CAS番号:9005−65−6〕
なお、Tweenは登録商標である。
ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤とは、ポリプロピレングリコールを疎水基としてエチレンオキシドを付加した非イオン性界面活性剤であり、一般式(I)で表される。
[式(I)]
HO(C2H4O)a−(C3H6O)b−(C2H4O)cH
但し、a、b、cは重合度。
疎水基であるプロピレングリコール(C3H6O)鎖の分子量は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、200〜10000、好ましくは500〜5000、より好ましくは800〜4000、さらに好ましくは900〜4000である。また、付加されたエチレンオキシドの全分子中に占める質量%は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、1〜95%、好ましくは5〜90%、より好ましくは5〜80%、さらに好ましくは10〜80%である。
ポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤とは、親水性部分としてポリオキシエチレン鎖を、疎水部分として長鎖脂肪酸を有するアミン型非イオン性界面活性剤である。疎水部分の長鎖脂肪酸の炭素数は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、炭素数12〜30、好ましくは炭素数12〜24、より好ましくは炭素数12〜20、さらに好ましくは炭素数12〜18である。親水部分としてのポリオキシエチレン鎖長は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、5〜50、好ましくは5〜40、さらに好ましくは7〜30である。
本発明の組成物において、糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤の濃度は、以下に限定されるものではないが、TARCの安定性を考慮して、組成物に対して、好ましくは0.00001質量%〜1質量%、より好ましくは0.0001質量%〜1質量%、さらに好ましくは0.001質量%〜0.5質量%、最も好ましくは0.001質量%〜0.1質量%である。
本発明の組成物は、好ましくは、保存容器に充填されている。保存容器の材質は、本発明の効果を得ることができ、そして密封ができれば特に限定されないが、少なくとも組成物との接触部分の一部又は全部が、プラスチック[例えば、オレフィン系樹脂、スチレン系樹脂、アクリル系樹脂、ポリエステル系樹脂、ポリカーボネート系樹脂、フッ素樹脂、塩素系樹脂(ポリ塩化ビニルなど)、ポリアミド系樹脂、ポリアセタール系樹脂、ポリフェニレンエーテル系樹脂(変性ポリフェニレンエーテルなど)、ポリアリレート、ポリスルホン、ポリイミド系樹脂、セルロース系樹脂(セルロースアセテートなど)、炭化水素系樹脂(ハロゲン原子置換品を含む)など]、金属(アルミニウムなど)、ガラスなどである。中でも、校正用試料の製造、輸送、保管の観点からプラスチック又はガラスが好ましく、プラスチックの中ではオレフィン系樹脂が好ましく、ポリプロピレンがより好ましい。
保存容器の形態としては、ハードタイプまたはソフトタイプのいずれでもよく、アンプル、バイアル、ソフトバッグ、注射型容器、ガラス瓶などが例示される。保存容器は、容器本体部分とキャップ部分を含む、プラスチック製の点眼瓶の形態、特に円筒形状の点眼瓶の形態であることが、使用しやすさ及びTARCの安定性の観点から好ましい。
本発明の組成物は、TARCの測定において、校正用試料溶液として用いることができる。本明細書において、校正用試料溶液とは、測定対象物質の測定を正確に行うために使用する、測定対象物質を一定の濃度で含有する試料溶液を意味し、標準物質、キャリブレーター、コントロール、及び内部標準物質などが該当する。本発明の組成物の供給の形態としては、TARCと糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤とを溶媒に混合した、あらかじめ溶液状態にした形態が挙げられる。
なお、TARCの測定方法において「組成物を使用する」とは、TARCの測定を正確に行うために組成物を使用することを意味し、例えば、TARCを含む液状組成物を校正用試料溶液(標準物質、キャリブレーター、コントロール、及び内部標準物質など)として使用することを意味する。
pHの調整は、当業者に周知のpH調整用試薬、例えば水酸化ナトリウム又は塩酸などを用いて行うことができる。
より具体的には、「保存安定性向上」又は「保存安定性が向上する」とは、例えば、濃度が10pg/mL〜1μg/mLのTARCを含む溶液中に含有されるTARCの80%以上が、37℃で28日間の間分解されずに、構造を変化させずに、又は容器に吸着せずに維持されることにより、37℃で28日間のプラスチック製容器における保存後の当該溶液中のTARCの測定値が、初期値の80%以上となることを意味することができる。
また、「保存安定性向上」又は「保存安定性が向上する」とは、例えば、濃度が10pg/mL〜1μg/mLのTARCを含む溶液中に含有されるTARCの90%以上が、4℃で28日間の間分解されずに、構造を変化させずに、又は容器に吸着せずに維持されることにより、4℃で28日間のプラスチック製容器における保存後の当該溶液中のTARCの測定値が、初期値の90%以上となることを意味することができる。
TARCの測定を行うための生体試料としては、TARCの測定が可能であれば特に限定されることはないが、血液、血清、又は血漿を用いることが好ましい。生体試料には、必要に応じて適宜前処理を実施してもよい。生体試料は、好ましくは、ヒトから採取された生体試料である。
本発明のTARCの測定キットでは、本発明の組成物を使用することにより、TARCの測定を簡便に及び正確に行うことが可能である。TARCの測定キットとしては、例えば免疫学的手法を用いたキットを挙げることができる。本発明のTARCの測定キットは、免疫学的手法によりヒト体内のTARCの濃度を測定するための試薬を含むことができる。免疫学的手法としては、ELISA、酵素免疫測定法、表面プラズモン共鳴法、ラテックス凝集免疫測定法(LTIA)、化学発光免疫測定法、電気化学発光免疫測定法、蛍光抗体法、放射免疫測定法、ウエスタンブロット法、イムノクロマトグラフィー法、及び高速液体クロマトグラフィー法(HPLC法)等が挙げられる。
本発明のTARCの測定キットは、アトピー性皮膚炎の治療方法又は薬の選択のために、そして治療の効果を判定する際に、アトピー性皮膚炎の重症度を把握するために用いることができる。
本発明のTARCの保存安定性向上方法は、糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤を含む溶液にTARCを接触させる工程を含む。溶液に糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤を添加した後に、TARCを添加してもよく、TARCを溶液に添加した後に、糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤を添加してもよい。溶液は、PBS、HEPES、MES、CHES及びTris等の緩衝液であることが好ましい。pHが6.5〜8.0のPBSを用いることがより好ましい。
本発明のTARCの保存安定性向上方法において、溶液に含まれるTARCの濃度としては、以下に限定されるものではないが、TARCの安定性を考慮して、好ましくは10pg/mL〜1μg/mL、より好ましくは50pg/mL〜500ng/mL、さらに好ましくは100pg/mL〜100ng/mL、最も好ましくは100pg/mL〜50ng/mLである。
本発明のTARCの保存安定性向上方法において使用できる糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤としては、ショ糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤が挙げられる。
疎水性部分の長鎖脂肪酸の炭素数は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、炭素数12〜30、好ましくは炭素数12〜24、より好ましくは炭素数12〜20、さらに好ましくは炭素数12〜18である。
中でも、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタントリステアラート、及びポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアートからなる群から選択される少なくとも1つを使用することが好ましく、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート及びポリオキシエチレン(20)ソルビタントリステアラートからなる群から選択される少なくとも1つを使用することがより好ましく、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラートを使用することが最も好ましい。
ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤とは、ポリプロピレングリコールを疎水基としてエチレンオキシドを付加した非イオン性界面活性剤であり、一般式(I)で表される。
[式(I)]
HO(C2H4O)a−(C3H6O)b−(C2H4O)cH
但し、a、b、cは重合度
疎水基であるプロピレングリコール(C3H6O)鎖の分子量は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、200〜10000、好ましくは500〜5000、より好ましくは800〜4000、さらに好ましくは900〜4000である。また、付加されたエチレンオキシドの全分子中に占める質量%は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、1〜95%、好ましくは5〜90%、より好ましくは5〜80%、さらに好ましくは10〜80%である。
ポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤とは、親水性部分としてポリオキシエチレン鎖を、疎水部分として長鎖脂肪酸を有するアミン型非イオン性界面活性剤である。疎水部分の長鎖脂肪酸の炭素数は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、炭素数12〜30、好ましくは炭素数12〜24、より好ましくは炭素数12〜20、さらに好ましくは炭素数12〜18である。親水部分としてのポリオキシエチレン鎖長は、本発明の効果が得られる限りにおいて限定されないが、例えば、5〜50、好ましくは5〜40、さらに好ましくは7〜30である。
本発明のTARCの保存安定性向上方法において、糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤の濃度は、以下に限定されるものではないが、TARCの安定性を考慮して、溶液に対して、好ましくは0.00001質量%〜1質量%、より好ましくは0.0001質量%〜1質量%、さらに好ましくは0.001質量%〜0.5質量%、最も好ましくは0.001質量%〜0.1質量%である。
本発明のTARCの吸着防止剤は、糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤を含む。保存容器にTARCを含む溶液を接触させる前に糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤を含むTARC吸着防止剤を添加してもよく、TARC含有溶液に吸着防止剤として糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤を添加しておき、これを保存容器に添加してもよい。
・Tween(登録商標)20 成分名:ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、富士フイルム和光株式会社
・Tween(登録商標)80 成分名:ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアート、富士フイルム和光株式会社
・プルロニック(登録商標)F−68 成分名:ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物、株式会社ADEKA
・アミート(登録商標)320 成分名:ポリオキシエチレン(20)硬化牛脂アミン、花王株式会社
・エマノーン(登録商標)1112 成分名:ポリエチレングリコールモノラウレート、花王株式会社
・Brij(登録商標)35 成分名:ポリオキシエチレンラウリルエーテル、キシダ化学株式会社
・Triton(登録商標)X−100 成分名:ポリエチレングリコールモノーp−イソオクチルフェニルエーテル、キシダ化学株式会社
・MEGA−9 成分名:n−ノナノイルーN−メチルーD−グルカミン、株式会社同仁化学研究所
プラスチック製点眼瓶におけるTARCの保存安定性を試験した。試験方法及び評価方法は以下のとおりである。保存液としては以下の組成の溶液を使用した。
・PBS(pH7.2)
・1質量% BSA
・界面活性剤(濃度、製品名、種類は表1、表4に記載)
各濃度のTARCの液状保存液をプラスチック製点眼瓶に0.5mLずつ分注し、37℃で28日間、あるいは4℃で28日保存した。TARCの濃度は、500pg/mL、2000pg/mL、及び10000pg/mLで試験した。
2種類の抗体を使用するラテックス免疫比濁法により測定した。以下に試薬の組成および測定方法を示す。第一試薬と第二試薬を用い、日立自動分析装置により測定した。
・第一試薬
100mM MOPS−NaOH(pH7.5)
500mM NaCl
0.5% BSA
・第二試薬
抗ヒトTARCモノクローナル抗体感作ラテックス(2種類)
5mM MOPS−NaOH(pH7.0)
なお、抗ヒトTARCモノクローナル抗体は、市販のTARC抗原を使用し、当業者周知の方法にて取得した。市販のTARC抗原には、CCL17, thymus and activation regulated chemokine(Shenandoah Biotechnology,Inc.)、CCL17/TARC, Human(LifeSpan Biosscience,Inc.)、Human TARC(CCL17)(Abeomics,Inc.)があった。さらに、TARC抗原に対してサンドイッチ測定が可能であるモノクローナル抗体の組み合わせを、当業者周知の方法にて選定した。抗ヒトTARCモノクローナル抗体感作ラテックスは、特開2017−181377記載の方法を参考に調製した。
まず、各濃度のTARCの液状保存液2.4μLに、第一試薬を120μLずつ加えた。37℃で5分間加温後、第二試薬を40μLずつ加えて攪拌した。その後、5分間の吸光度変化を、主波長570nm、副波長800nmにて測定した。測定された吸光度の変化量を濃度既知の標準物質を測定して得られる検量線を用いてTARC濃度に換算した。
37℃で28日間、あるいは4℃で28日保存後の各TARCの液状保存液のTARCの濃度について、次式を用いて、TARC残存率(%)を算出した。
以上より、糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤とTARCとを共存させることで、プラスチック製点眼瓶保存時におけるTARCの保存安定性が改善することが示された。これは、残存率が改善された条件では、糖脂肪酸エステル型、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型、またはポリオキシエチレンアルキルアミン型の非イオン性界面活性剤の添加により、容器の壁面へのTARCの吸着を防止できたため、または保存中のTARCの構造変化を抑制できたためと考えられた。
続いて、糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤であるTween20を使用して、TARCの保存安定性向上に効果を示す界面活性剤濃度を、前述と同様の方法で検証した。各条件において使用した界面活性剤の濃度を表4に、評価結果を表5及び表6に示した。なお、TARC残存率(%)は、3回の実験の平均値を元に算出した。
4℃で保存した場合(表6)、TARC濃度が500pg/mLの場合に、界面活性剤を添加していない条件1では、28日経過後の残存率が65.7%となり、著しく低い結果となった。糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤を0.0016〜0.20%添加した条件10〜13では、28日経過後の残存率は98.0〜109.5%であり、いずれの界面活性剤濃度においても28日経過後の残存率が改善された。同様に、初期濃度が2000pg/mL、10000pg/mLの場合においても、糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤を添加した条件10〜13において、28日経過後の残存率が改善された。
以上より、0.0016〜0.20%の糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤をTARC組成物へ添加することで、プラスチック製点眼瓶保存時におけるTARCの保存安定性が改善することが示された。これは、糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤の添加により、容器の壁面へのTARCの吸着を防止できたため、または保存中のTARCの構造変化を抑制できたためと考えられた。
Claims (20)
- TARC(Thymus and activation−regulated chemokine)を含む組成物であって、
TARC、並びに、
糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上
を含み、そして
液状である、前記組成物。 - TARCを測定するための校正用試料溶液である、請求項1に記載の組成物。
- 保存容器に充填されている、請求項1又は2に記載の組成物。
- 保存容器が、プラスチックである、請求項3に記載の組成物。
- TARCの濃度が、前記組成物に対して、10pg/mL〜1μg/mLである、請求項1〜4のいずれかに記載の組成物。
- 前記糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上の濃度が、前記組成物に対して、0.00001質量%〜1質量%である、請求項1〜5のいずれかに記載の組成物。
- 糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤である、請求項1〜6のいずれかに記載の組成物。
- TARCの濃度が、前記組成物に対して500pg/mLの場合に、37℃で28日間、プラスチック容器において保存した後のTARCの残存率が、80%以上である、請求項1〜7のいずれかに記載の組成物。
- TARCの濃度が、前記組成物に対して500pg/mLの場合に、4℃で28日間、プラスチック容器において保存した後のTARCの残存率が、90%以上である、請求項1〜8のいずれかに記載の組成物。
- 糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアート、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレン(20)硬化牛脂アミン、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリエチレングリコールモノーp−イソオクチルフェニルエーテル、及びn−ノナノイルーN−メチルーD−グルカミンである、請求項1〜9のいずれかに記載の組成物。
- 請求項1〜10のいずれかに記載の組成物を使用する、TARCの測定方法。
- 請求項1〜10のいずれかに記載の組成物を含む、TARCの測定キット。
- 糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上を含む溶液にTARCを接触させる工程を含む、TARCの保存安定性向上方法。
- 前記TARCの濃度が、前記溶液に対して、10pg/mL〜1μg/mLとなるように調整する、請求項13に記載のTARCの保存安定性向上方法。
- 前記溶液中の糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上の濃度が、前記溶液に対して、0.00001質量%〜1質量%である、請求項13又は14に記載のTARCの保存安定性向上方法。
- 糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤である、請求項13〜15のいずれかに記載のTARCの保存安定性向上方法。
- 糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアート、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレン(20)硬化牛脂アミン、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリエチレングリコールモノーp−イソオクチルフェニルエーテル、及びn−ノナノイルーN−メチルーD−グルカミンである、請求項13〜16のいずれかに記載のTARCの保存安定性向上方法。
- TARCを含む溶液中のTARCの保存安定化剤であって、糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤からなる群より選択される1種以上を有効成分として含有する前記保存安定化剤。
- 糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤である、請求項18に記載の保存安定化剤。
- 糖脂肪酸エステル型非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロック共重合型非イオン性界面活性剤、及びポリオキシエチレンアルキルアミン型非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレアート、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン縮合物、ポリオキシエチレン(20)硬化牛脂アミン、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリエチレングリコールモノーp−イソオクチルフェニルエーテル、及びn−ノナノイルーN−メチルーD−グルカミンである、請求項18又は19に記載の保存安定化剤。
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