JP6963719B2

JP6963719B2 - 抗インフルエンザ薬の調製におけるカンナビジオールの用途

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Publication number: JP6963719B2
Application number: JP2020530715A
Authority: JP
Inventors: 張可; 譚▲しん▼; 李向東; 于朝暉
Original assignee: 漢義生物科技（北京）有限公司
Priority date: 2017-08-31
Filing date: 2017-08-31
Publication date: 2021-11-10
Anticipated expiration: 2037-08-31
Also published as: EP3677258A1; CA3073576C; WO2019041239A1; EP3677258A4; AU2017429312A1; JP2020530499A; US11452707B2; EP3677258B1; US20200360336A1; AU2017429312B2; CA3073576A1

Description

本発明は、バイオ医薬分野に属し、抗インフルエンザ薬の調製におけるカンナビジオール
の用途に関する。

流行性風邪は、インフルエンザ（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ）と略語し、インフルエンザウイル
ス（ＩｎｆｌｕｅｎｚａＶｉｒｕｓ）により引き起こされる、ヒト、家禽、家畜が共通
に罹患する急性気道感染症であり、高伝播速度、高発症率及び深刻な合併症のため、人間
の健康へ深刻な脅威を与える疾患となっている。

インフルエンザウイルスは、急性気道を介して伝播する急性インフルエンザ病原性因子で
あり、オルトミクソウイルス科に属する一本鎖マイナス鎖ＲＮＡウイルスである。その核
タンパク質（Ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ＮＰ）及びマトリックスタンパク質（Ｍａｔ
ｒｉｘｐｒｏｔｅｉｎ、Ｍ）の抗原性の違いによって、インフルエンザウイルスは、Ａ
、Ｂ、Ｃの３つのタイプに分けられる。そのうち、インフルエンザＡウイルス（Ｉｎｆｌ
ｕｅｎｚａＡＶｉｒｕｓ、ＩＡＶ）は、最も一般的であり、人間に対して脅威が一番
深刻であり、季節性及び地域的なインフルエンザの発症を引き起こす恐れがある。ヒトを
感染する以外、禽、ブタ、ウマなどのさまざまな動物を感染することもできる。

ＩＡＶは、一本鎖マイナス鎖の８つのセグメントを有するＲＮＡウイルスであり、各ＲＮ
Ａ断片がいずれも核タンパク質（Ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ＮＰ）で被覆されてリボ
ヌクレオタンパク質（Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ＲＮＰｓ）となる。ＩＡＶ
ゲノムは、少なくとも１３種類のタンパク質をコードし、それぞれＰＢ２、ＰＢ１、ＰＢ
１−Ｆ２、Ｎ４０、ＰＡ、ＰＡ−Ｘ、ＨＡ、ＮＰ、ＮＡ、Ｍ１、Ｍ２、ＮＳ１及びＮＳ２
である。ＩＡＶエンベロープの表面には、それぞれＨＡ、ＮＡ及びＭ２の３種類のタンパ
ク質が分布されている。ＩＡＶの８個のＲＮＡ断片は、すべてＮＰで被覆されている。ビ
リオンでは、ウイルスＲＮＡは、ＮＰ及びポリメラーゼの３つのサブユニットであるＰｏ
ｌｙｍｅｒａｓｅ１（ＰＢ１）、Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ２（ＰＢ２）及びＰｏｌｙｍ
ｅｒａｓｅＡ（ＰＡ）で被覆されてＲＮＰｓとなる。ＰＢ１は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポ
リメラーゼの機能を発揮する。ＰＢ２は、宿主ｍＲＮＡキャップに結合して切断しウイル
スＲＮＡを合成するためのプライマーとする。ＰＡは、宿主ＲＮＡエンドヌクレアーゼと
して機能するとともに、プロテアーゼの加水分解活性を有することがある。ＮＰは、一本
鎖ＲＮＡ結合タンパク質として機能するとともに、ＲＮＰｓにおいて構造タンパク質とし
て作用する。

ＩＡＶゲノムでは、ＰＡ、ＰＢｌ、ＰＢ２及びＮＰタンパク質をコードする遺伝子は、進
化的に高度の保存性を有するが、ＩＡＶの抗原性が極めて変異しやすい。このため、それ
が持っている外膜タンパク質の血球凝集素抗原（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ、ＨＡ）及
びノイラミニダーゼ（Ｎｅｕｒａｍｉｎｉｄａｓｅ、ＮＡ）の違いによって、複数のサブ
タイプに分けることができ、現在、１６種類のＨＡサブタイプ及び１０種類のＮＡサブタ
イプが発現しており、これらは、絶えずに変異して、配列したり組み合わせたりすること
で、自己進化を実現し、また、人間へ新しい脅威をもたらす。

その中でも、Ｈ１Ｎ１、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ２のみは、主に人間を感染し、残りの多数のサ
ブタイプは、さまざまな禽類及び動物を自然宿主とする。禽類に対して最も有害なものは
、Ｈ５、Ｈ７及びＨ９サブタイプ株である。高病原性を有するＨ５ＮＩ、Ｈ７Ｎ９、Ｈ９
Ｎ２などの鳥インフルエンザウイルスは、一旦変異してヒトとヒトの間での伝播能力を有
すると、ヒト同士の鳥インフルエンザの流行を引き起こし、それは、鳥インフルエンザウ
イルスが人間に対して大きな潜在的な脅威であることを示す。

ＩＡＶは、細胞に侵入すると、そのゲノムがそのＲＮＡ依存性ポリメラーゼ（ＲＮＡｄ
ｅｐｅｎｄｅｎｔＲＮＡｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ、ＲｄＲＰ）の作用を利用して複製及
び転写を行い、感染性を有するウイルス粒子に翻訳される。該ポリメラーゼが活性を失う
と、ウイルスは、複製及び転写を行って完全なウイルス粒子を生成できなくなる。

臨床的研究の結果から明らかなように、ＩＡＶの潜伏期間は、通常３〜４日間、最大７日
間である。患者は通常、症状として発熱、咳、少量の痰を示し、また、頭痛、筋肉痛、下
痢などの全身症状を伴うことがある。この疾患の治療が間に合わない場合、病気は急速に
進行し、重症患者の場合は、重度の急性肺損傷（Ａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ、
ＡＬＩ）が発生し、たとえば急性肺炎、気管支炎、うっ血性心不全、胃腸炎、失神、幻覚
などの重篤な合併症を引き起こす可能性があり、重篤な場合に死を引き起こすことがある
。ＡＬＩとは、重度の感染が発生した後、肺胞毛細血管損傷によって引き起こされる肺水
腫や微小な無気肺などの病理学的特徴が生じることを指す。急性呼吸窮迫症候群（Ａｃｕ
ｔｅｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｔｒｅｓｓｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＲＤＳ）は、
重度のＡＬＩ（Ｂｅｒｎａｒｄｅｔａｌ．，１９８７）であり、また、全身性炎症反応症
候群（Ｓｙｓｔｅｍｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅｓｐｏｎｓｅｓｙｎｄｒｏ
ｍｅ、ＳＩＲＳ）を引き起こすことがある。ＡＲＤＳの死亡率は４０％〜５０％と高いた
め、これもＩＡＶによる死亡の重要な原因の１つである。

現在、世界の各国にて承認された抗インフルエンザウイルス薬は、主に、イノシン一リン
酸デヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）阻害剤であるリバビリン（ｒｉｂａｖｉｒｉｎ）、イ
ンターフェロン誘導剤であるアルビドール塩酸塩（ａｒｂｉｄｏｌｈｙｄｒｏｃｈｌｏ
ｒｉｄｅ）、Ｍ２イオンチャネルタンパク質阻害剤であるアマンタジン塩酸塩（ａｍａｎ
ｔａｄｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）及びリマンタジン塩酸塩（ｒｉｍａｎｔａ
ｄｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ノイラミニダーゼ阻害剤であるオセルタミビ
ルリン酸塩（ｏｓｅｈａｍｉｖｉｒｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、及びザナミビル（ｚａｎａ
ｍｉｖｉｒ）の、４種類のクラスに属する６つの品種（Ｇｌｅｚｅｎ，２００６；Ｋｏｌ
ｏｃｏｕｒｉｓｅｔａｌ．，１９９６）である。

Ｍ２イオンチャネルブロッカーには、アマンタジン及びリマンタジンを含み、これらは、
Ｍ２イオンチャネルタンパク質をブロックしてウイルスの脱殻を阻害することによって、
ウイルスＲＮＡが細胞質に放出されることを防止し、ウイルスの初期複製を中断すること
により、インフルエンザウイルスに抵抗する役割を果たす。しかし、アマンタジン系医薬
品は、インフルエンザＢに対して効果がなく、且つ神経毒性があり、投与後の数時間で不
眠症、注意散漫や不安などの副作用が発生する可能性があり、且つ実験条件下および臨床
応用において薬剤耐性株を産生しやすい。さらに、現在のインフルエンザ株のほとんどは
、これら２つの薬剤に耐性があり、且つインフルエンザＡウイルスのみがＭ２イオンチャ
ネルタンパク質を持っているため、その臨床的使用は広範であると言えない。

ＮＡ阻害剤には、現在、ザナミビル及びオセルタミビル（Ｏｓｅｌｔａｍｉｖｉｒ、タミ
フル）の２種、及び静脈内注射剤であるペラミビル（ｐｅｒａｍｉｖｉｒ）だけが２０１
０年１月に日本で承認された。それらは、ＮＡ活性を阻害することにより、感染細胞の表
面のシアル酸が切断されるのを防ぎ、感染細胞の表面から新しいウイルスが放出されるこ
とを防止し、それによって、ウイルスが他の細胞をさらに感染することを防止する。しか
し、タミフルを利用した場合にも、Ｈ５Ｎ１鳥インフルエンザの患者の死亡率は高く、タ
ミフル耐性株も絶えず分離されている。現在、流行しているＩＡＶには、ノイラミニダー
ゼ阻害剤に対する耐性が既に発生している。さらに、タミフルは、突然の呼吸困難などの
深刻な副作用を引き起こす可能性があり、たとえば、日本の非営利団体「メディカルアラ
ートセンター」による研究によれば、タミフルを投与された１１９人の死亡患者のうち、
３８人には投与してから１２時間内で重篤な状態または死亡が発生した。

カンナビジオール（Ｃａｎｎａｂｉｄｉｏｌ、ＣＢＤ）は、カンナビノイド系物質のうち
の１種であり、その構造式が下記式Ｉに示される。

式Ｉ

カンナビノールは、天然植物である大麻から抽出され、精神的な効果がなく、不安、抑う
つ、けいれんや腫瘍などに対して治療効果を示している。研究から明らかなように、ＣＢ
Ｄには、優れた抗炎症効果がある。２０００年に、『米国科学アカデミー紀要』（Ｐｒｏ
ｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅ
ｎｃｅｓ）には、イギリスのロンドンにあるケネディ・リウマチ研究所のＭ．フェルドマ
ン博士が、ＣＢＤの経口投与及び全身投与のいずれも関節損傷の重症度及び関節炎の急性
や慢性の進行を著しく軽減できることを発見したことが報告された。２０１５年の『Ｉｍ
ｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌＩｍｍｕｎｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ』雑誌には、ＣＢＤは
、ＬＰＳにより誘発された急性肺損傷を抑制する（Ｒｉｂｅｉｒｏｅｔａｌ．，２０１５
）ことが報告された。

したがって、現在、新規抗インフルエンザ薬の研究開発が求められる。

本発明者は、鋭意研究及び創造的な労働を行った結果、驚くべきことに、カンナビジオー
ルが、インフルエンザウイルス及びインフルエンザウイルスのＲＮＡポリメラーゼを効果
的に抑制することができ、インフルエンザの予防及び治療における用途が期待できること
を見出した。それによって、下記発明を提供することに至った。

本発明の一態様は、インフルエンザを治療又は予防する医薬品又はインフルエンザの症状
を緩和させる医薬品の調製における、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の用途に関する。

本発明の一実施形態では、前記インフルエンザは、インフルエンザＡウイルス、インフル
エンザＢウイルス及びインフルエンザＣウイルスから選ばれる１種又は複数種のインフル
エンザウイルスにより引き起こされ、好ましくは、前記インフルエンザＡウイルスは、Ｈ
１Ｎ１サブタイプ、Ｈ２Ｎ２サブタイプ、Ｈ３Ｎ２サブタイプ、Ｈ５ＮＩサブタイプ、Ｈ
７Ｎ９サブタイプ又はＨ９Ｎ２サブタイプのインフルエンザＡウイルスである。

本発明の一実施形態では、前記インフルエンザの罹患対象は、哺乳動物（たとえば、ヒト
、類人猿、サル、ブタ、ウシ又はヤギ）又は禽類（たとえば、ニワトリ、アヒル又はガチ
ョウなどの家禽、又は、たとえば、野生禽類）である。

本発明の一実施形態では、前記インフルエンザの症状は、インフルエンザにより引き起こ
される、発熱、せき、頭痛、筋肉痛及び下痢の症状から選ばれる少なくとも１種である。

本発明の一実施形態では、前記医薬組成物は、
イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）阻害剤、インターフェロン誘導剤、Ｍ
２イオンチャネルタンパク質阻害剤及びノイラミニダーゼ阻害剤から選ばれる１種又は複
数種の成分をさらに有効量で含み、
好ましくは、前記イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤は、リバビリン（ｒｉｂａｖ
ｉｒｉｎ）であり、
好ましくは、前記インターフェロン誘導剤は、アルビドール塩酸塩（ａｒｂｉｄｏｌｈｙ
ｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）であり、
好ましくは、前記Ｍ２イオンチャネルタンパク質阻害剤は、アマンタジン塩酸塩（ａｍａ
ｎｔａｄｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）又はリマンタジン塩酸塩（ｒｉｍａｎｔ
ａｄｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）であり、
好ましくは、前記ノイラミニダーゼ阻害剤は、オセルタミビルリン酸塩（ｏｓｅｈａｍｉ
ｖｉｒｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、オセルタミビル（Ｏｓｅｌｔａｍｉｖｉｒ、タミフル）
、ザナミビル（ｚａｎａｍｉｖｉｒ）又はペラミビル（ｐｅｒａｍｉｖｉｒ）である。

本発明の別の態様は、抗インフルエンザウイルス薬（たとえば、インフルエンザウイルス
の宿主細胞での複製を抑制する）の調製における、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の用途に関する。

本発明の一実施形態では、前記インフルエンザウイルスは、インフルエンザＡウイルス、
インフルエンザＢウイルス及びインフルエンザＣウイルスから選ばれる１種又は複数種で
あり、好ましくは、前記インフルエンザＡウイルスは、Ｈ１Ｎ１サブタイプ、Ｈ２Ｎ２サ
ブタイプ、Ｈ３Ｎ２サブタイプ、Ｈ５ＮＩサブタイプ、Ｈ７Ｎ９サブタイプ又はＨ９Ｎ２
サブタイプのインフルエンザＡウイルスである。

本発明の一実施形態では、前記宿主細胞は、哺乳動物（たとえば、ヒト、類人猿、サル、
ブタ、ウシ又はヤギ）の細胞又は禽類（たとえば、たとえば、ニワトリ、アヒル又はガチ
ョウなどの家禽、又は、たとえば、野生禽類）の細胞である。

本発明の一実施形態では、前記医薬組成物は、
イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、インターフェロン誘導剤、Ｍ２イオンチャネ
ルタンパク質阻害剤及びノイラミニダーゼ阻害剤から選ばれる１種又は複数種の成分をさ
らに有効量で含み、
好ましくは、前記イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤は、リバビリンであり、
好ましくは、前記インターフェロン誘導剤は、アルビドール塩酸塩であり、
好ましくは、前記Ｍ２イオンチャネルタンパク質阻害剤は、アマンタジン塩酸塩又はリマ
ンタジン塩酸塩であり、
好ましくは、前記ノイラミニダーゼ阻害剤は、オセルタミビルリン酸塩、オセルタミビル
、ザナミビル又はペラミビルである。

本発明のさらなる態様は、インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼの複製を抑制する
医薬品、インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼの発現レベルを抑制する医薬品又は
インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼの活性を抑制する医薬品の調製における、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の用途に関する。

本発明の一実施形態では、前記インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼは、インフル
エンザＡウイルスＲＮＡポリメラーゼ、インフルエンザＢウイルスＲＮＡポリメラーゼ及
びインフルエンザＣウイルスＲＮＡポリメラーゼから選ばれる１種又は複数種であり、好
ましくは、前記インフルエンザＡウイルスＲＮＡポリメラーゼは、Ｈ１Ｎ１サブタイプ、
Ｈ２Ｎ２サブタイプ、Ｈ３Ｎ２サブタイプ、Ｈ５ＮＩサブタイプ、Ｈ７Ｎ９サブタイプ又
はＨ９Ｎ２サブタイプのインフルエンザＡウイルスのＲＮＡポリメラーゼである。

本発明の一実施形態では、前記したインフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼを抑制す
る発現レベルとは、たとえば、インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼのタンパク質
のレベル又はインフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼをコードするｍＲＮＡレベルで
ある。

本発明の一実施形態では、前記インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼの発現レベル
は、インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼの３つのサブユニットＰＢ１、ＰＢ２及
びＰＡのうちのいずれか１つ又は複数の発現レベルによって決定できる。

本発明のさらなる態様は、有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又は
エステル、及び１種又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物に関す
る。

本発明の一実施形態では、前記医薬組成物において、カンナビジオールは、唯一な活性成
分である。本発明の別の実施形態では、カンナビジオールは、インフルエンザを予防及び
治療するためのほかの既知の活性成分と併用する。

前記医薬組成物の製剤形態は、製薬上許容される任意の剤形であってもよく、これら剤形
には、錠剤、糖衣錠剤、フィルムコーティング錠、腸溶性コーティング錠、カプセル剤、
ハードカプセル剤、ソフトカプセル剤、経口液剤、トローチ剤、顆粒剤、細粒剤、丸剤、
散剤、ペースト剤、丹剤、懸濁剤、粉末剤、溶液剤、注射剤、座剤、軟膏剤、硬膏剤、ク
リーム剤、スプレー剤、滴剤、貼付剤が含まれ、たとえば、カプセル剤、錠剤、経口液剤
、顆粒剤、丸剤、散剤、丹剤、ペースト剤などの経口投与剤形が好ましい。前記経口剤形
には、一般的な賦形剤、たとえば、粘着剤、充填剤、希釈剤、圧縮錠剤、潤滑剤、崩壊剤
、着色剤、香味剤及び湿潤剤を含んでもよく、必要に応じて錠剤をコートすることができ
る。適切な充填剤としては、セルロース、マンニトール、乳糖及びほかの類似した充填剤
、適切な崩壊剤としては、澱粉、ポリビニルピロリドン、及び澱粉誘導体たとえばデンプ
ングリコール酸ナトリウム、適切な潤滑材としては、たとえばステアリン酸マグネシウム
が含まれる。薬学的に許容される適切な湿潤剤として、ラウリル硫酸ナトリウムが含まれ
る。

好ましくは、前記医薬組成物は、経口製剤である。

被験者に投与するカンナビジオールの好適な用量は、好ましくは、０．１−５０ｍｇ／ｋ
ｇ体重／日、より好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ−３０ｍｇ／ｋｇ体重／日、０．５ｍｇ
／ｋｇ−２０ｍｇ／ｋｇ体重／日、５ｍｇ／ｋｇ−３０ｍｇ／ｋｇ体重／日又は５ｍｇ／
ｋｇ−２０ｍｇ／ｋｇ体重／日、さらに好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ−１０ｍｇ／ｋｇ
体重／日、特に好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ−５ｍｇ／ｋｇ体重／日である。

本発明のさらなる態様は、独立して包装した製品１及び製品２を含む複合製品に関し、
前記製品１は、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、及び
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
であり、
前記製品２は、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、インターフェロン誘導剤、Ｍ
２イオンチャネルタンパク質阻害剤及びノイラミニダーゼ阻害剤から選ばれる１種又は複
数種の成分を有効量で含み、
好ましくは、前記イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤は、リバビリンであり、
好ましくは、前記インターフェロン誘導剤は、アルビドール塩酸塩であり、
好ましくは、前記Ｍ２イオンチャネルタンパク質阻害剤は、アマンタジン塩酸塩又はリマ
ンタジン塩酸塩であり、
好ましくは、前記ノイラミニダーゼ阻害剤は、オセルタミビルリン酸塩、オセルタミビル
、ザナミビル又はペラミビルである。

本発明は、さらに以下の態様に関する。

本発明は、インフルエンザを治療又は予防する又はインフルエンザの症状を緩和させるた
めの、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の製品に関する。

本発明は、さらに、抗インフルエンザウイルス（たとえば、インフルエンザウイルスの宿
主細胞における複製を抑制する）のための、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の製品に関する。

本発明の一実施形態では、前記宿主細胞は、哺乳動物（たとえば、ヒト、類人猿、サル、
ブタ、ウシ又はヤギ）の細胞又は禽類（たとえば、ニワトリ、アヒル又はガチョウなどの
家禽、又は、たとえば、野生禽類）の細胞である。

本発明は、さらに、インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼの複製、インフルエンザ
ウイルスＲＮＡポリメラーゼの発現レベル又はインフルエンザウイルスＲＮＡポリメラー
ゼの活性を抑制するための、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の製品に関する。

本発明は、さらに、インフルエンザを治療又は予防する又はインフルエンザの症状を緩和
させる方法に関し、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の製品を有効量で必要とする被験者に投与するステップを含む。

本発明の一実施形態では、前記被験者は、哺乳動物（たとえば、ヒト、類人猿、サル、ブ
タ、ウシ又はヤギ）又は禽類（たとえば、ニワトリ、アヒル又はガチョウなどの家禽、又
は、たとえば、野生禽類）である。

本発明は、さらに、抗インフルエンザウイルス（たとえば、インフルエンザウイルスの宿
主細胞における複製を抑制する）のための方法に関し、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の製品を有効量で必要とする被験者に投与するステップを含む。

本発明は、さらに、インフルエンザウイルスＲＮＡポリメラーゼの複製、インフルエンザ
ウイルスＲＮＡポリメラーゼの発現レベル又はインフルエンザウイルスＲＮＡポリメラー
ゼの活性を抑制する方法に関し、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有す
る大麻抽出物、好ましくは、カンナビジオールを含有する産業用大麻抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物から選ばれるいずれか１種
の製品を有効量で必要とする被験者に投与するステップを含む。

なお、活性成分であるカンナビジオールの使用量及び使用方法は、患者の年齢、体重、性
別、自然な健康状態、栄養状態、化合物の活性強度、投与時間、代謝速度、病気の重症度
、及び診断と治療をする医師の主観的判断など、多くの要因に依存する。本発明のいずれ
か１項に記載の方法では、カンナビジオールの用量は、０．１−５０ｍｇ／ｋｇ体重／日
、より好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ−３０ｍｇ／ｋｇ体重／日、０．５ｍｇ／ｋｇ−２
０ｍｇ／ｋｇ体重／日、５ｍｇ／ｋｇ−３０ｍｇ／ｋｇ体重／日又は５ｍｇ／ｋｇ−２０
ｍｇ／ｋｇ体重／日、さらに好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ−１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、
特に好ましくは、０．５ｍｇ／ｋｇ−５ｍｇ／ｋｇ体重／日である。

本発明のいずれか１項に記載の方法では、経口方式により投与される。

本発明では、前記カンナビジオール、即ち式Ｉの化合物は、市販品として購入し（たとえ
ば、Ｓｉｇｍａなどから購入）又は市販されている原料を用いて従来の技術で合成するこ
とができる。合成したものについてカラムクロマトグラフィー、液液抽出法、分子蒸留法
又は結晶化などの手段によりさらに精製することができる。そのほか、カンナビジオール
は、大麻、特に産業用大麻から抽出されてもよい。

カンナビジオールの薬学的に許容される塩は、有機アンモニウム塩、アルカリ金属塩（ナ
トリウム塩、カリウム塩）、アルカリ土類金属塩（マグネシウム塩、ストロンチウム塩、
カルシウム塩）などを含むが、これらに制限されない。

本発明のいくつかの実施形態では、カンナビジオールの薬学的に許容される塩は、カンナ
ビジオール（ＣＢＤ）と、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸
化マグネシウム、水酸化アルミニウム、水酸化リチウム、水酸化亜鉛、水酸化バリウム、
アンモニア、メチルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、メチルピリジン、エタノ
ールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、リジン、
アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ，Ｎ′−ジフェニルメチルエチレンジアミン、クロ
ロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−フェニルメチルフェネチルアミン
、Ｎ−メチルグルカミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタンなど
と、が形成する塩であってもよい。

本発明のいくつかの実施形態では、カンナビジオールの薬学的に許容されるエステルは、
カンナビジオールと１つのＣ_０−Ｃ_６アルキルカルボン酸とが形成するモノエステルであ
ってもよく、カンナビジオールと同じ又は異なる２つのＣ_０−Ｃ_６アルキルカルボン酸と
が形成するジエステルであってもよく、前記Ｃ_０−Ｃ_６アルキルカルボン酸は、直鎖状ア
ルキルカルボン酸、分岐状アルキルカルボン酸又は環状アルキルカルボン酸、たとえば、
ＨＣＯＯＨ、ＣＨ_３ＣＯＯＨ、ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＯＯＨ、ＣＨ_３（ＣＨ_２）_２ＣＯＯＨ、Ｃ
Ｈ_３（ＣＨ_２）_３ＣＯＯＨ、ＣＨ_３（ＣＨ_２）_４ＣＯＯＨ、（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＯＯＨ、
（ＣＨ_３）_３ＣＣＯＯＨ、（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＨ_２ＣＯＯＨ、（ＣＨ_３）_２ＣＨ（ＣＨ_２
）_２ＣＯＯＨ?、（ＣＨ_３）_２ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨＣＯＯＨ、（ＣＨ_３）_３ＣＣＨ_２ＣＯ
ＯＨ、ＣＨ_３ＣＨ_２（ＣＨ_３）_２ＣＣＯＯＨ、シクロプロパンカルボン酸、シクロブタン
カルボン酸、シクロペンタンカルボン酸であってもよい。

前記大麻抽出物は、カンナビジオールを含有する大麻、特に産業用大麻の抽出物、たとえ
ば、エタノール抽出液、エキスなどであってもよい。なお、カンナビジオールの含有量に
ついて特に限定がなく、当業者が公知する手段、たとえば濃縮などにより大麻抽出物にお
けるカンナビジオールの含有量をより高めることができる。本発明の一実施形態では、前
記大麻抽出物は、エキスであり、好ましくは、そのカンナビジオールの含有量は、１８％
−２５％である。

本発明のいくつかの実施形態では、前記大麻抽出物は、大麻の茎、葉、果実、果殻、根及
び花から選ばれるいずれか１種又は複数種を原料として得られた抽出物である。好ましく
は、前記大麻抽出物は、大麻葉抽出物である。

本発明では、用語「有効量」とは、被験者において本発明の前記疾患又は病症を治療、予
防、低減及び／又は緩和できる用量である。

用語「被験者」とは、患者又は本発明の組成物を受けて本発明の前記疾患又は病症を治療
、予防、低減及び／又は緩和させるための動物、特に哺乳動物、たとえば、ヒト、イヌ、
サル、ウシ、ウマなどである。

用語「疾患及び／又は病症」とは、本発明の前記疾患及び／又は病症に係る前記被験者の
１つの身体状態である。

本発明では、特に断らない限り、前記製品１、製品２は、明確に説明するために過ぎず、
順番を示すものではない。

本発明では、特に断らない限り、大麻は、産業用大麻が好ましく、大麻抽出物は、産業用
大麻抽出物が好ましい。

カンナビジオールは、インフルエンザウイルスを効果的に抑制することができ、インフル
エンザを治療又は予防する医薬品の調製又はこの医薬品としての用途が期待できる。

ＷＳＮ感染マウスの体重変化である。マウスにＷＳＮを感染させた後、体重を１１日間連続的に監視する。データを平均値±標準誤差で表す。各点は、マウスの体重変化の当日の平均値を表す（ｎ＝２０／群）。ｐｏｓｔｈｏｃ方法を用いて差異について有意性分析を行い、有意差を＊で表す。＊＊ｐ＜０．０１。ＷＳＮ感染マウスの体温変化である。マウスにＷＳＮを感染させた後、体温を１２日間連続して監視する。データを平均値±標準誤差で表す。各点は、マウスの体温変化の当日の平均値を表す（ｎ＝１５−２０／群）。ｐｏｓｔｈｏｃ方法を用いて差異について有意性分析を行い、有意差を＊で表す。＊ｐ＜０．０５。ＷＳＮ感染マウスの挙動変化である。マウスにＷＳＮを感染させた後、挙動を１０日間連続的に監視する。データを平均値±標準誤差で表す（ｎ＝５／群）。ｐｏｓｔｈｏｃ方法を用いて差異について有意性分析を行い、有意差を＊で表す。＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１。図３Ａは、Ｈ１Ｎ１感染後の６日目である。図３Ｂは、Ｈ１Ｎ１感染後の８日目である。ＷＳＮ感染マウスの死亡率変化である。マウスにＷＳＮを感染させた後、生存数を１２日間連続的に監視する。データを平均値±標準誤差で表す。各点は、マウスの生存数を表す（ｎ＝２０／群）。ｐｏｓｔｈｏｃ方法を用いて差異について有意性分析を行う。ＷＳＮ感染マウスの肺指数変化である。感染後の８日目のマウスについて、肺部感染の状況を検出する。データを平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５。ＷＳＮ感染マウスの肺の病理学的変化である。感染後の８日目のマウスについて、肺の病理学的分析の状況を検出する。図６Ａは、野生対照であり、図６Ｂは、インフルエンザ感染肺の対照であり、図６Ｃは、タミフル処理群であり、図６Ｄは、ＣＢＤ処理群である。ＷＳＮ感染マウスの肺指数の変化である。感染後の８日目のマウスについて、肺血管透過性検出を行う。データを平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１。ＷＳＮ感染マウスの肺細胞灌流液中の好中球の変化である。ＤＰＩ８日目のマウスについて、肺細胞灌流液中の好中球の数を検出する。データを平均値±標準誤差で表す。＊＊＊ｐ＜０．００１。ＷＳＮ感染マウスの肺細胞灌流液中のリンパ球の変化である。ＤＰＩ８日目のマウスについて、肺細胞灌流液中のリンパ球の数を検出する。データを平均値±標準誤差で表す。＊＊ｐ＜０．０１。ＷＳＮ感染マウスの肺細胞灌流液中のマクロファージの変化である。ＤＰＩ８日目のマウスについて、肺細胞灌流液中のマクロファージの数を検出する。データを平均値±標準誤差で表す。＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１。図１１Ａは、ＣＢＤで処理されたＷＳＮ感染マウスのＢＭＤＭ細胞中のＰＡ遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ１Ｎ１感染マウスのＢＭＤＭ細胞を処理してから２４ｈ後、ＰＢ１遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５。図１１Ｂは、ＣＢＤで処理されたＷＳＮ感染マウスのＢＭＤＭ細胞中のＰＢ１遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ１Ｎ１感染マウスのＢＭＤＭ細胞を処理してから２４ｈ後、ＰＢ１遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５。図１２Ａは、ＣＢＤで処理されたＨ１Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９中のＮＰ遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ１Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９を処理してから２４ｈ後、ＮＰ遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊＊＊ｐ＜０．００１。図１２Ｂは、ＣＢＤで処理されたＨ１Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９中のＰＡ遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ１Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９を処理してから２４ｈ後、ＰＡ遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊＊ｐ＜０．０１。図１２Ｃは、ＣＢＤで処理されたＨ１Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９中のＰＢ１遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ１Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９を処理してから２４ｈ後、ＰＢ１遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊＊ｐ＜０．０１。図１２Ｄは、ＣＢＤで処理されたＨ１Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９中のＰＢ２遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ１Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９を処理してから２４ｈ後、ＰＢ２遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊＊ｐ＜０．０１。Ｈ５Ｎ１感染マウスの体重変化である。マウスにＨ５Ｎ１を感染させた後、体重を１２日間連続的に監視する。データを平均値±標準誤差で表す（ｎ＝１０／群）。Ｈ５Ｎ１感染マウスの体温変化である。マウスにＨ５Ｎ１を感染させた後、体温を１１日間連続的に監視する。データを平均値±標準誤差で表す（ｎ＝１０／群）。Ｈ５Ｎ１感染マウスの挙動変化である。マウスにＩＡＶを感染させた後、９日目の挙動を監視する。データを平均値±標準誤差で表す（ｎ＝５／群）。ｐｏｓｔｈｏｃ方法を用いて差異について有意性分析を行い、有意差を＊で表す。＊＊＊ｐ＜０．００１。Ｈ５Ｎ１感染マウスの死亡率である。図１７Ａは、ＣＢＤで処理されたＨ５Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９中のＮＰ遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ５Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９を処理してから２４ｈ後、ＮＰ遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５。図１７Ｂは、ＣＢＤで処理されたＨ５Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９中のＰＡ遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ５Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９を処理してから２４ｈ後、ＰＡ遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５。図１７Ｃは、ＣＢＤで処理されたＨ５Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９中のＰＢ１遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ５Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９を処理してから２４ｈ後、ＰＢ１遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。図１７Ｄは、ＣＢＤで処理されたＨ５Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９中のＰＢ２遺伝子発現の変化である。ＣＢＤでＨ５Ｎ１感染ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９を処理してから２４ｈ後、ＰＢ２遺伝子発現の変化である。データを平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。

以下、実施例を参照しながら本発明の実施形態について詳細に説明するが、当業者であれ
ば、以下の実施例は、本発明を説明するために過ぎず、本発明の範囲を限定するものでは
ないことを理解できる。実施例において、具体的な条件が明記されない場合、一般的な条
件又はメーカが推薦した条件で行う。用いる試薬又は器具は、メーカが記載されていない
場合、市販品として入手される通常の製品である。
以下の実施例では、特に断らない限り、ＩＡＶのＨ１Ｎ１ＷＳＮ（Ａ／ＷＳＮ／３３）
株、及びＨ５Ｎ１Ａ／ｇｒｅａｔｂｌａｃｋ−ｈｅａｄｅｄｇｕｌｌ／Ｑｉｎｇ
ｈａｉ／２００９（Ｈ５Ｎ１）株は、中国科学院微生物研究所より提供される。

Ｈ１Ｎ１に係る実験は、すべてＰ２バイオセーフティ実験室において行われ、Ｈ５Ｎ１に
係る実験は、すべてＰ３バイオセーフティ実験室において行われる。

実施例１：カンナビジオールの抗インフルエンザＡウイルスＨ１Ｎ１についての動物実験

１．実験動物及び事前準備
６週齢の昆明系オスマウスは、ＢｅｉｊｉｎｇＶｉｔａｌＲｉｖｅｒＬａｂｏｒａ
ｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ．，Ｌｔｄ．から購入される。
動物を中国科学院微生物研究所Ｐ２及びＰ３動物センター（Ｂｉｏｓａｆｅｔｙｌｅｖ
ｅｌ２ａｎｄ３、Ｐ２／Ｐ３）において一般に飼育し、照明周期を１２時間の明
期／１２時間の暗期とし、動物に自由に摂食、飲水させた。動物を新しい環境において１
日間適応させた後、関連実験を行った。中国農業大学及び農業生物技術国家重点実験室動
物論理委員会（ＳＫＬＡＢ−２０１７−３−００２）により動物実験が承認された。
９−１１日齢のＳＰＦニワトリ胚は、ＢｅｉｊｉｎｇＶｉｔａｌＲｉｖｅｒＬａｂ
ｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ．，Ｌｔｄ．から購入さ
れる。

２．実験方法
（１）ニワトリ胚によるＨ１Ｎ１インフルエンザウイルスの増幅
９−１１日齢のＳＰＦグレードのニワトリ胚を用いて、鶏卵を照射して、気室の位置をマ
ークし、血管の少ない部分においてラインを描いた。
ポビドンヨード及び７０％エタノールを用いて鶏卵の外殻を消毒し、ラインを描いた部位
から２−３ｍｍの上方に孔を開け、ＰＢＳで適切に希釈されたインフルエンザウイルス２
００μｌをニワトリ胚の尿膜腔に注入し、開けられた孔をワックスでシールした。
鶏卵を３７℃で４８ｈ−７２ｈ培養し、２４ｈごとにニワトリ胚の生存状況を１回観察し
、ニワトリ胚が死亡したことを観察すると、ニワトリ胚を４℃で一晩放置した後、尿膜腔
液を収集し、７２ｈに達すると、残りのニワトリ胚をすべて４℃で一晩放置して尿膜腔液
を収集した。
尿膜腔液の収集方法：無菌ピンセットで鶏卵の気室の上方における鶏卵殻を壊して、次に
、気室の上方における尿膜を剥離し、１ｍｌのピペットで尿膜腔液を軽く吸い取った。
得られた尿膜腔液を２０００−３０００ｒｐｍで１０ｍｉｎ遠心分離して、上澄みを吸い
取り、ウイルスを得た。使用時まで−８０℃で保存した。
（２）ＭＤＣＫ細胞系を用いたＨ１Ｎ１インフルエンザウイルス力価検出
ＭＤＣＫ細胞（Ｍａｄｉｎ−Ｄａｂｙｃａｎｉｎｅｋｉｄｎｅｙｃｅｌｌ、イヌ腎
細胞、米国ＡＴＣＣから購入）を培養し、コンフルエンスが９５％に達すると、上記ニワ
トリ胚で増幅させたウイルスのＨ１Ｎ１株を用いて感染させて増幅し、遠心分離して、上
澄みを収集し、ウイルス原液を得て、ウイルス力価を測定した。
（３）動物の群分け
本発明者による初期の６回のパイロット試験の結果から明らかなように、タミフル群（２
０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）及び２群のＣＢＤ注射液群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ及び６０ｍｇ／ｋ
ｇ／ｄ）は、ＩＡＶ感染により引き起こされるマウスの死亡率を有意的に抑制できた。Ｈ
１Ｎ１（１２０００ｐｆｕ）を点鼻投与して感染させる場合、９５％のマウスの死亡を引
き起こし、且つ２群のＣＢＤ注射液群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ及び６０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）
は、ＩＡＶ感染により引き起こされるマウスの死亡に対する抑制率が同じであった。Ｈ５
Ｎ１（１０００ｐｆｕ）を点鼻投与して感染させる場合、９５％のマウスの死亡を引き起
こし、且つ２群のＣＢＤ注射液群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ及び６０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）は、
ＩＡＶ感により引き起こされるマウスの死亡に対する抑制率が同じであった。
このため、安全上の理由から、本実験の群別の投与及びモデル作成において、Ｈ１Ｎ１
ＷＳＮウイルスを感染株として、昆明系オスマウスを４群にランダムに分けて、１群に２
０匹のマウスとし、感染後の４日目から、毎日１回腹腔内注射により投与して、５日間連
続的に投与した。空白群、１２０００ｐｆｕインフルエンザ群について等量の生理食塩水
を注射した。群分けは、具体的には、以下のおとりである。
空白群（野生型）：感染させず、４日目から等量の生理食塩水を注射し始めた。
１２０００ｐｆｕインフルエンザ群（高毒性群）：感染後の４日目から、等量の生理食塩
水を注射し始めた。
タミフル群：感染後の４日目から投与し始めた（タミフル、２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）。
ＣＢＤ群：感染後の４日目から投与し始めた（カンナビジオール、２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）
感染のステップ：エチルエーテルでマウスを軽度で麻酔した後、Ｈ１Ｎ１インフルエンザ
ウイルス液（上記で使用時まで−８０℃で保存したウイルス原液を、１：１２０でＰＢＳ
に希釈したもの）を０．０５ｍｌ／匹で点鼻投与によりマウスを感染させ、空白群につい
ては、等量の生理食塩水を点鼻投与した。
（４）マウスの生理学的特徴及び発症の症状の観察と記録
各時間でのマウスの体重、温度を記録し、マウスの発症の症状を観察して、マウスの死亡
時間及び死亡数を記録した。感染後の１４ｄまで観察した。
１）体重の測定：電子天秤に適切なビーカーをセットして、読み取り値をゼロに設定し、
マウスを入れて、読み取り値が安定的になると記録した。マウスの体重を２４時間ごとに
１回量った。
Ｈ１Ｎ１（ＷＳＮ）でマウスを感染させる当日（Ｄａｙｏｆｐｏｓｔｉｎｆｅｃｔ
ｉｏｎ、ＤＰＩ０）から感染後の１０日目まで（ＤＰＩ１０）、毎日体重を量り、当日
の体重からＤＰＩ０の体重を減算したものを、ＤＰＩ０の体重で割って、体重変化百分率
を算出した。
２）体温の測定：Ｈ１Ｎ１により引き起こされる体温低下
また、体温測定だけのために、８０００ｐｆｕインフルエンザ群を設置した。８０００ｐ
ｆｕ用量のＷＳＮで感染させて、体温の変化を監視した。各群ごとに５匹のマウスを感染
させて、ＤＰＩ０〜ＤＰＩ１２に亘って、直腸温度を毎日測定し、当日の直腸温度からＤ
ＰＩ０の直腸温度を減算したものを、ＤＰＩ０の直腸温度で割って、体温変化百分率を算
出した、
正確な操作方法でマウスを掴み、即ち、その腹部を操作者に対向させ、植物油を付けた電
子体温計のプローブをマウスの肛門から直接挿入し、プローブが完全に肛門に入ったとき
に測定を行った。マウスの体温は、２４時間おきに１回測定された。
３）各群のビデオ（１群ごとに２分間、ｎ＝６）を定期的に録画した。マウスの活動状況
の定量化については、以下の表１を参照した。
表１ＰＡＰＩＤ挙動動作分類法による挙動動作の操作説明

チャレンジ後の６日目（ＤＰＩ）及び８日目（ＤＰＩ）に、マウスの活動状況について録
画、検出及び定量化をそれぞれ行い、マウスの挙動変化が主動作と修飾動作（立ち、座り
、立ち上がり、歩き、横たわり、頭の回転、眺め、嗅ぎ、顔を洗うことなど）に分けられ
ており、詳細については、実験材料の方法の部分を参照すればよい。代表的な２分間内の
挙動活動を選択した。
４）生存率の計算
毎日、各群のマウスの生存数を観察して記録した。
各群の生存率＝各群の生存個体数（匹）／各群の全個体数（匹）×１００％
各群のマウスの毎日の生存率を算出した後、まとめてプロットして、その死亡の傾向を分
析した。
（５）マウスの肺指数及び脾指数
感染後ＤＰＩ８目では、各群ごとに５匹のマウスについて肺指数及び脾指数の検出を行っ
た。ＩＡＶ感染８日目に、マウスをペントバルビタール１５０−２００μｌで麻酔して、
マウスの体重を測定し、眼球から採血して、次に、マウスを解剖学的プレートに固定して
、腹部正中線に沿ってマウスを解剖し、心臓、脾臓、肝臓、脾臓及びリンパ節を順次取り
出し、半分の肺を取って肺重量を測定し、脾については全重量（測定には肺臓、脾臓の表
面についた水分を吸水紙でできるだけ除去した）を測定し、その後、パラホルムアルデヒ
ドに固定して切片に供した。
肺指数及び抑制率は、以下の式により計算される。
肺指数＝マウスの肺重量（ｇ）／マウスの体重（ｇ）×１００％
肺指数の抑制率＝（モデル群の肺指数−実験群の肺指数）／モデル群の肺指数×１００％
（６）肺組織の病理切片の観察
肺重量を秤量した後、肺組織を１０％ホルムアルデヒドに含浸して固定した後、濃度勾配
を有するアルコールにおいてそれぞれ２−４ｈ浸漬することで組織塊中の水分を除去し、
透明化剤であるキシレンに入れて０．５−２ｈ放置した。透明になった組織塊をパラフィ
ンで包埋してスライサーに固定し、薄切り（厚さ約４−５μｍ）に切った。次に、キシレ
ンで切片中のパラフィンを除去した後、ヘマトキシリンーエオシン（ＨＥ）で染色し、光
学顕微鏡ＯｌｙｍｐｕｓＣＸ４１（Ｏｌｙｍｐｕｓ、日本）下で肺組織の形態学的な
病理学的変化を観察した。
（７）血管透過性の検出
感染後ＤＰＩ８目では、各群ごとに５匹のマウスについて肺血管透過性の検出を行った。
マウスを麻酔して、尾静脈を介してエバンスブルー溶液を注射し、５ｍｉｎ後、肺細胞灌
流液を取り、１５００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心分離し、上澄み液について５９０ｎｍでの
吸光度ＯＤを分光光度計で検出した。
（８）マウスの肺細胞灌流液の取得及びＤｉｆｆ−Ｑｕｉｃｋ染色
感染後ＤＰＩ８目では、各群ごとに５匹のマウスについて肺細胞灌流液の炎症細胞数を測
定した。高毒処理群に比べて、ＣＢＤ群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）は、Ｈ１Ｎ１ＷＳＮ
感染により引き起こされるマウスの肺細胞灌流液中の好中球の数を有意的に低下させた。
マウスを麻酔して、眼球から放血し又は心臓から採血した。
マウスの首部の皮膚を切り開いて、気管を露出させた。
気管において小さな開口を切り、０．１ｍＭＥＤＴＡ含有のＰＢＳを１ｍＬ注入し、
１０ｍＬ遠心処理管に吸い戻し、３回繰り返して収集し、合計約３ｍＬの灌流液を得た
。
１５００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心処理して、上澄みを新しい１０ｍＬ遠心処理管に移して−
８０℃で凍結保存し、細胞沈殿をｄｄＨ_２Ｏ４５０μｌで再懸濁させて、軽く振とうさ
せ、１ｍｉｎ内で赤血球が素早く分解した直後、１０×ＰＢＳ５０μＬを加えた。
１５００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心分離して、上澄みを除去し、ＰＢＳで再懸濁させた。
血球計で計数した。
計数終了後、上澄みを遠心処理により除去し、血清に細胞を再懸濁させて、塗抹した。
Ｄｉｆｆ−Ｑｕｉｃｋ染色：スミアを湿潤したまま（乾燥させず）エタノールエチルエー
テル溶液に浸漬して１５ｓ固定し、エッジ部の固定液を僅かで除去して、Ｄｉｆｆ−Ｑｕ
ｉｃｋＩ、Ｄｉｆｆ−ＱｕｉｃｋＩＩ溶液に挿入してそれぞれ１５ｓ放置し、余分な染料
を流水で洗い落とした。
湿潤したまま（乾燥させず）で顕微鏡下で検出して計数し、各細胞の割合を統計した。
（９）以上の実験結果のデータの統計学的分析
ＳＰＳＳ１２．０．１データ処理ソフトウェア（ＳＰＳＳＩｎｃ．，Ｃｈｉｃａｇ
ｏ，ＩＬ）を用いて一元配置分散分析により行った結果、データは、正規分布に合致し、
有意性検定には、ｔ検定が使用された。データを平均値±標準誤差で表し、ｐ＜０．０５
では、差異が有意的であり、ｐ＜０．０１では、差異が極めて有意的であった。

３．実験結果
（１）図１に示すように、ＣＢＤ注射群は、Ｈ１Ｎ１による体重低下を有意的に抑制でき
た。
図から明らかなように、最初のマウス体温の変動は、実験用のために購入したマウスが新
しい環境に適応するときに生じるストレス反応によるものであり、しかし、各群のマウス
の初期体重百分率の曲線がほぼ同じであるため、このストレス反応による変化を無視でき
る。マウスには、インフルエンザウイルス感染後の３日目から顕著な体重低下が認められ
、約７−８日目に最低となり、それ以降、上昇し始め、７日目に生存した個体の体重が顕
著に上昇した。高毒性群に比べて、タミフル群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）及びＣＢＤ群（２
０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）は、体重の低下を有意的に抑制できた（ｐ＜０．０１）。
（２）図２に示すように、ＣＢＤ注射群は、Ｈ１Ｎ１による体温低下を有意的に抑制でき
た。
ＤＰＩ７−９目のマウスの体温変化には、有意差があり、ＤＰＩ７−８目には、変化が最
大になった。図から明らかなように、マウスには、ＩＡＶ感染後４日目から顕著な体温低
下が認められ、約７−８日目に最低となり、それ以降、上昇し始め、７日目に生存した個
体の体温が顕著に上昇した。高毒性群に比べて、タミフル群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）及び
ＣＢＤ群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）は、体温の低下を有意的に抑制できた。
（３）図３Ａ及び図３Ｂに示すように、ＣＢＤ群は、Ｈ１Ｎ１感染群のインフルエンザの
症状及び不快な挙動を有意的に低下できた。
感染後のＤＰＩ６−９目では、マウスの挙動変化には、有意差があり、ＤＰＩ８では変化
が最大となった。高毒処理群に比べて、タミフル群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）及びＣＢＤ注
射液群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）は、感染マウスの活動能力を顕著に高めて、インフルエン
ザによる不快さを低減できた。
（４）図４に示すように、ＣＢＤ注射群は、Ｈ１Ｎ１感染群の死亡率を有意的に低下でき
た。
高毒処理群に比べて、タミフル群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）及びＣＢＤ群（２０ｍｇ／ｋｇ
／ｄ）は、Ｈ１Ｎ１ＷＳＮ感染により引き起こされるマウスの死亡率（タミフル群：
Ｐ＜０．００１、ＣＢＤ群：Ｐ＜０．００１）を有意的に低下できた。タミフル処理群で
は、９匹（９／２０）、ＣＢＤ群では、１０匹（１０／２０）が死亡し、ＣＢＤ群には、
非常に顕著な治療効果が認められた。タミフル群（９／２０）及びＣＢＤ群（１０／２０
）の死亡率には、有意差がなかった。
（５）図５及び図６Ａ−６Ｄに示すように、ＣＢＤ群は、Ｈ１Ｎ１感染群の肺損傷を有意
的に低下できた。
高毒性群に比べて、タミフル群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）及びＣＢＤ群（２０ｍｇ／ｋｇ／
ｄ）は、Ｈ１Ｎ１ＷＳＮ感染により引き起こされるマウスの肺損傷指数（タミフル群
：Ｐ＜０．０５、ＣＢＤ群：Ｐ＜０．０５）を有意的に低下でき、ＣＢＤ群には、非常に
顕著な治療効果が認められた。タミフル群（９／２０）及びＣＢＤ群（１０／２０）の肺
指数には、有意差がなかった。タミフル及びＣＢＤ処理群では、浸潤炎症細胞の数を顕著
に減少させた。
（６）図７に示すように、ＣＢＤ群は、Ｈ１Ｎ１感染群の肺血管透過性を有意的に低下で
きた。
高毒性群に比べて、タミフル群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）及びＣＢＤ群（２０ｍｇ／ｋｇ／
ｄ）は、Ｈ１Ｎ１ＷＳＮ感染により引き起こされるマウスの肺毛細血管の透過性を有
意的に低下させて、肺の損傷を減少できた。タミフル群：＊Ｐ＜０．０５、ＣＢＤ群：
＊＊Ｐ＜０．０１。
（７）図８に示すように、ＣＢＤ群は、Ｈ１Ｎ１感染群の肺細胞灌流液の炎症細胞数を有
意的に低下できた。ＣＢＤ群、Ｐ＜０．００１。タミフル群に比べて、ＣＢＤ群では、肺
細胞灌流液中の好中球の数が顕著に減少した。
図９に示すように、ＩＡＶ処理群に比べて、ＣＢＤ群は、Ｐ＜０．０１であり、肺細胞灌
流液中のリンパ球の数が顕著に減少した。
図１０に示すように、タミフル群はＰ＜０．０１であり、ＣＢＤ群は、Ｐ＜０．００１で
あり、肺細胞灌流液中のマクロファージの数が顕著に減少した。タミフル群に比べて、Ｃ
ＢＤ群にも、肺細胞灌流液中のマクロファージの数が減少し、Ｐ＜０．０５であった。
以上の実験結果から明らかなように、ＣＢＤは、Ｈ１Ｎ１ＷＳＮ感染により引き起こさ
れるマウスのインフルエンザの症状及び不快さを有意的に低下させ、マウスの体重、体温
の低下を有意的に抑制することができ、インフルエンザにより引き起こされるマウスの死
亡率を低下させた。ＣＢＤは、また肺血管の透過性を低下させて、インフルエンザ感染マ
ウスの肺組織での炎症細胞（好中球、リンパ球、マクロファージ）の浸潤を減少させ、急
性肺損傷ＡＬＩを低下させた。

実施例２：カンナビジオールによるインフルエンザＡウイルスＨ１Ｎ１のＲＮＡポリメラ
ーゼの抑制についての生体外実験
継代したマウス骨髄由来のマクロファージ（ｂｏｎｅ−ｍａｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄ
ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ、ＢＭＤＭ）及びヒト非小細胞肺癌細胞系Ａ５４９（ＡＴＣＣR
ＣＣＬ−１８５?）を、６ウェルプレートに接種して、以下のような４群に分けた。
対照群（高糖培地ＤＭＥＭ、Ｓｉｇｍａ製、品目番号Ｄ５６４８−１Ｌ、実験前に純水で
１Ｌとなるように希釈）、
Ｈ１Ｎ１感染対照群、
ＣＢＤ群（５μＭ）及び
タミフル群（１０μＭ）。
以上の４群をすべて３７℃で一晩培養し、１８−２４ｈ後、細胞コンフルエンスが１００
％となり細胞の間に隙間がなくなると、Ｈ１Ｎ１ＷＳＮを感染させた。ＭＯＩ＝０．０
１で細胞を１ｈ感染させた。
上澄み液を吸い取って捨てて、各群に対して、同じ体積のＰＢＳ含有、タミフル含有及び
ＣＢＤ含有の無血清培地をそれぞれ加え、ここで、各無血清培地に含まれるＰＢＳ、タミ
フル及びＣＢＤの濃度が同じであり、ＣＯ_２インキュベータにおいて３７℃で２４ｈイン
キュベートした。
ＲＮＡを抽出して、逆転写をし、ｑＲＴ−ＰＣＲでウイルスｍＲＮＡの発現状況を検出し
た。Ｈ１Ｎ１のＮＰ、ＰＡ、ＰＢ１及びＰＢ２遺伝子発現の検出には、ＲＴ−ＰＣＲプラ
イマーは、以下のとおりである。
ＮＰ−Ｆ１：ＣＧＧＧＧＡＧＴＣＴＴＣＧＡＧＣＴＣＴＣ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１
）
ＮＰ−Ｒ１：ＴＴＧＴＣＴＣＣＧＡＡＧＡＡＡＴＡＡＧＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２
）
ＰＡ−Ｆ１：ＡＴＧＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＴＧＣＧＡＣＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）
ＰＡ−Ｒ１：ＴＧＡＣＴＣＧＣＣＴＴＧＣＴＣＡＴＣＧＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：４
）
ＰＢ１−Ｆ１：ＴＡＣＣＧＧＴＧＣＣＡＴＡＧＡＧＧＴＧＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：
５）
ＰＢ１−Ｒ１：ＣＧＣＣＣＣＴＧＧＴＡＡＴＣＣＴＣＡＴＣ（ＳＥＱＩＤＮＯ：
６）
ＰＢ２−Ｆ１：ＧＣＧＡＴＴＧＡＡＴＣＣＣＡＴＧＣＡＣＣ（ＳＥＱＩＤＮＯ：７
）
ＰＢ２−Ｒ１：ＴＣＣＧＣＧＣＴＧＧＡＡＴＡＣＴＣＡＴＣ（ＳＥＱＩＤＮＯ：
８）
実験結果は、それぞれ図１１Ａ、図１１Ｂ（マウスのＢＭＤＭ細胞）及び図１２Ａ−図１
２Ｄ（ヒト肺上皮細胞系Ａ５４９）に示された。
結果から分かるように、タミフル群（１０μＭ）は、Ｈ１Ｎ１ＷＳＮのＮＰ、ＰＡ、Ｐ
Ｂ１及びＰＢ２遺伝子の発現には、顕著な作用がなかったが、驚くべきことに、ＣＢＤ群
（５μＭ）は、Ｈ１Ｎ１ＷＳＮのＮＰ、ＰＡ、ＰＢ１及びＰＢ２遺伝子の発現を有意
的に低下できた。結果から明らかなように、ＣＢＤは、インフルエンザウイルスＨ１Ｎ１
のＲＮＡポリメラーゼの複製を効果的に抑制できた。
ＣＢＤは、インフルエンザウイルスＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼの発現を抑制し、Ｉ
ＡＶの宿主細胞での複製を抑制する可能性があり、インフルエンザの感染を低下させた。
本発明は、将来性が期待できる広域スペクトルの抗インフルエンザウイルス薬を提供した
。

実施例３：カンナビジオールによる抗インフルエンザＡウイルスＨ５Ｎ１の実験

１．実験動物及び事前準備
６週齢のＣ５７ＢＬ／６オスマウスは、ＢｅｉｊｉｎｇＶｉｔａｌＲｉｖｅｒＬａ
ｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ．，Ｌｔｄ．から購入
される。
実例１の条件と同じであった。動物を中国科学院微生物研究所Ｐ２及びＰ３動物センター
（Ｂｉｏｓａｆｅｔｙｌｅｖｅｌ２ａｎｄ３、Ｐ２／Ｐ３）において一般に
飼育し、照明周期を１２時間の明期／１２時間の暗期とし、動物に自由に摂食、飲水させ
た。動物を新しい環境において１日間適応させた後、関連実験を行った。中国農業大学及
び農業生物技術国家重点実験室動物倫理委員会（ＳＫＬＡＢ−２０１７−３−００２）に
より動物実験が承認された。
Ｃ５７ＢＬ／６オスマウスを２群にランダムに分け、各群に１０匹のマウスとし、感染後
の４日目から、毎日１回腹腔内注射により投与し、連続的に５日間投与した。１０００ｐ
ｆｕインフルエンザ群について等量の生理食塩水を注射した。群分けは、具体的には、以
下のとおりである。
インフルエンザ群（Ｈ５Ｎ１１０００ｐｆｕ）：感染後の４日目から等量の生理食塩水
を注射し始めた。
ＣＢＤ群：Ｈ５Ｎ１１０００ｐｆｕ感染後の４日目から投与し始めた（カンナビジオー
ル、２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）。

２．実験方法
Ｈ５Ｎ１ウイルスの増幅方法及び力価の検出方法は、ウイルスサブタイプがＨ５Ｎ１であ
る以外、実施例１と同様であった。
マウスの生理学的特徴及び発症の症状の観察及び記録は、実例１と完全に同じであった。
Ｈ５Ｎ１でマウスを感染させる当日（Ｄａｙｏｆｐｏｓｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎ、
ＤＰＩ０）から感染後の１１日目まで（ＤＰＩ１０）、毎日体重を量り、当日の体重から
ＤＰＩ０の体重を減算したものを、ＤＰＩ０の体重で割って、体重変化百分率を算出した
。
各群ごとに、Ｈ５Ｎ１（１０００ｐｆｕの用量で感染させて、体温の変化を監視する
）でマウスを１０匹感染させて、ＤＰＩ０〜ＤＰＩ１２に亘って、直腸温度を毎日測定し
、当日の直腸温度からＤＰＩ０の直腸温度を減算したものをＤＰＩ０の直腸温度で割って
、体温変化百分率を算出した。
チャレンジ後の９日目（ＤＰＩ）に、マウスの活動状況について録画、検出及び定量化を
それぞれ行い、マウス挙動の変化が主動作と修飾動作（立ち、座り、立ち上がり、歩き、
横たわり、頭の回転、眺め、嗅ぎ、顔を洗うことなど）に分けられており、詳細について
は、実験材料の方法の部分を参照すればよい。代表的な１分間内の挙動活動を選択して計
数した。
毎日、Ｈ５Ｎ１感染マウスの死亡状況を記録した。

３．実験結果
（１）図１３に示すように、ＣＢＤ群は、Ｈ５Ｎ１による体重低下を顕著に抑制できた。
図から明らかなように、最初のマウス体温の変動は、実験用のために購入したマウスが新
しい環境に適応するときに生じるストレス反応によるものであり、しかし、各群のマウス
の初期体重百分率の曲線がほぼ同じであるため、このストレス反応による変化を無視でき
る。マウスには、インフルエンザウイルス感染後の６日目から顕著な体重低下が認められ
、約１０日目に最低となり、それ以降、上昇し始めるものの、１２日目に、すべて死亡し
た。
（２）図１４に示すように、ＣＢＤ群は、Ｈ５Ｎ１による体温低下を顕著に抑制できた。
ＤＰＩ９目のマウスの体温変化には、有意差があり、インフルエンザ群に比べて、ＣＢＤ
群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）は、体温の低下を顕著に抑制できた。９目にマウスの半分が死
亡したため、統計学的分析ができなくなった。
（３）図１５に示すように、ＣＢＤ群は、Ｈ５Ｎ１感染群のインフルエンザの症状及び不
快な挙動を顕著に低下できた。感染後ＤＰＩ９目（ｎ＝５／群）では、マウスの挙動変化
には、有意差があった（ｐ＜０．００１）。インフルエンザ群（ｎ＝５／群）に比べて、
ＣＢＤ群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）（ｎ＝５／群）は、感染マウスの活動能力を顕著に高め
て、インフルエンザによる不快さを低減できた。
（４）図１６に示すように、ＣＢＤ群は、Ｈ５Ｎ１感染群の生存時間を顕著に延長できた
。インフルエンザ群（１０／１０）に比べて、ＣＢＤ群（１０／１０）の死亡率には、有
意差がなかったが、ＣＢＤ群（２０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）では、各時間にＨ５Ｎ１感染後のマ
ウスの生存時間を２４時間（ＣＢＤ群ｖｓ．インフルエンザ群、Ｐ＜０．０５）に延長
できた。
また、昆明系マウスは、クローズドコロニーであり、Ｃ５７ＢＬ／６ｓは、近交系である
ため、医薬品に対する感度及び反応程度が異なり、また２種の異なる品系であるので、別
の点からＣＢＤの広域スペクトルが示された。

実施例４：カンナビジオールによるインフルエンザＡウイルスＨ５Ｎ１のＲＮＡポリメラ
ーゼの抑制についての生体外実験
ヒト非小細胞肺癌細胞系Ａ５４９（ＡＴＣＣR ＣＣＬ−１８５?）を、６ウェルプレート
に接種して、下記４群に分けた。
対照群（高糖培地ＤＭＥＭ、Ｓｉｇｍａ製、品目番号Ｄ５６４８−１Ｌ、実験前に純水で
１Ｌとなるまで希釈）、
Ｈ５Ｎ１感染対照群、
ＣＢＤ群（１μＭ）及び
タミフル群（１μＭ）。
以上の４群をすべて３７℃で一晩培養し、１８−２４ｈ後、細胞コンフルエンスが１００
％となり且つ細胞の間に隙間がなくなると、Ｈ５Ｎ１を感染させた。ＭＯＩ＝０．０１で
細胞を１ｈ感染させた。
上澄み液を吸い取って捨てて、各群に対して、同じ体積のＰＢＳ含有、タミフル含有及び
ＣＢＤ含有の無血清培地をそれぞれ加え、ここで、各無血清培地に含まれるＰＢＳ、タミ
フル及びＣＢＤの濃度が同じであり、ＣＯ_２インキュベータにおいて３７℃で２４ｈイン
キュベートした。
ＲＮＡを抽出して、逆転写をし、ｑＲＴ−ＰＣＲでウイルスｍＲＮＡの発現状況を検出し
た。Ｈ５Ｎ１のＮＰ、ＰＡ、ＰＢ１及びＰＢ２遺伝子発現の検出には、ＲＴ−ＰＣＲプラ
イマーは、以下のとおりである。
ＮＰ−Ｆ１：ＧＴＧＧＣＣＣＡＴＡＡＧＴＣＣＴＧＣＴＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：９
）
ＮＰ−Ｒ１：ＧＧＴＣＧＣＴＣＴＴＴＣＧＡＡＧＧＧＡＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１
０）
ＰＡ−Ｆ１：ＧＣＣＧＣＡＡＴＡＴＧＣＡＣＡＣＡＣＴＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１
１）
ＰＡ−Ｒ１：ＴＴＧＡＴＴＣＧＣＣＴＣＧＴＴＣＧＴＣＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１
２）
ＰＢ１−Ｆ１：ＡＧＡＣＴＡＣＣＡＧＧＧＣＡＧＡＣＴＧＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１
３）
ＰＢ１−Ｒ１：ＣＡＡＣＴＧＧＣＣＴＣＣＧＡＴＡＣＧＡＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：
１４）
ＰＢ２−Ｆ１：ＧＣＡＧＣＡＡＴＧＧＧＴＣＴＧＡＧＧＡＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１
５）
ＰＢ２−Ｒ１：ＣＡＡＴＧＴＴＴＧＧＡＧＧＴＴＧＣＣＣＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：
１６）
実験結果は、それぞれ図１７Ａ、図１７Ｂ、図１７Ｃ及び図１７Ｄに示された。
結果から分かるように、タミフル群（１μＭ）及びＣＢＤ群（１μＭ）は、Ｈ５Ｎ１のＮ
Ｐ、ＰＡ、ＰＢ１及びＰＢ２遺伝子の発現を有意的に低下できた。結果から明らかなよう
に、ＣＢＤは、インフルエンザウイルスＨ５Ｎ１のＲＮＡポリメラーゼの複製を効果的に
抑制できた。
ＣＢＤは、インフルエンザウイルスＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼの発現を抑制し、Ｉ
ＡＶの宿主細胞での複製を抑制する可能性があり、インフルエンザの感染を低下させた。
本発明は、将来性が期待できる広域スペクトルの抗インフルエンザウイルス薬を提供した
。

参考文献
Hay, A.J., Gregory, V., Douglas, A.R., and Lin, Y.P. (2001). The evolution ofhum
an influenza viruses. Philosophical transactions of the Royal Society of London
Series B, Biological sciences 356, 1861-1870.
Bernard, G.R., Luce, J.M., Sprung, C.L., Rinaldo, J.E., Tate, R.M., Sibbald, W.J
., Kariman, K., Higgins, S., Bradley, R., Metz, C.A., et al. (1987). High-dose c
orticosteroids in patients with the adult respiratory distress syndrome. The New
England journal of medicine 317, 1565-1570.
Glezen, W.P. (2006). Influenza control. The New England journal of medicine 355,
79-81.
Kolocouris, N., Kolocouris, A., Foscolos, G.B., Fytas, G., Neyts, J., Padalko, E
., Balzarini, J., Snoeck, R., Andrei, G., and De Clercq, E. (1996). Synthesis an
d antiviral activity evaluation of some new aminoadamantane derivatives. 2. J Me
d Chem 39, 3307-3318.
Ribeiro, A., Almeida, V.I., Costola-de-Souza, C., Ferraz-de-Paula, V., Pinheiro,
M.L., Vitoretti, L.B., Gimenes-Junior, J.A., Akamine, A.T., Crippa, J.A., Tavar
es-de-Lima, W., et al. (2015). Cannabidiol improves lung function and inflammati
on in mice submitted to LPS-induced acute lung injury. Immunopharmacology and im
munotoxicology 37, 35-41.

参考文献本発明の特定の実施形態を詳細に説明したが、当業者であれば、既に開示されて
いるすべての教示に基づいて、これら詳細についてさまざまな修正及び置換を行うことが
でき、これら変化は、すべて本発明の特許範囲に属することを理解できる。本発明全体の
範囲は、添付した特許請求の範囲及びその任意の同等物により限定される。

［配列表］
SEQUENCE LISTING

<110> HANYI BIO-TECHNOLOGY COMPANY LTD.

<120> USE OF CANNABIDIOL IN PREPARATION OF DRUGS FOR RESISTING AGAINST INFLUENZ
A

<130> IEC170075PCT

<160> 16

<170> PatentIn version 3.2

<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 1
cggggagtct tcgagctctc 20

<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 2
ttgtctccga agaaataaga 20

<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 3
atggaagatt ttgtgcgaca 20

<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 4
tgactcgcct tgctcatcga 20

<210> 5
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 5
taccggtgcc atagaggtga 20

<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 6
cgcccctggt aatcctcatc 20

<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 7
gcgattgaat cccatgcacc 20

<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 8
tccgcgctgg aatactcatc 20

<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 9
gtggcccata agtcctgctt 20

<210> 10
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 10
ggtcgctctt tcgaagggaa 20

<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 11
gccgcaatat gcacacactt 20

<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 12
ttgattcgcc tcgttcgtca 20

<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 13
agactaccag ggcagactgt 20

<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 14
caactggcct ccgatacgaa 20

<210> 15
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 15
gcagcaatgg gtctgaggat 20

<210> 16
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial

<220>
<223> Primer

<400> 16
caatgtttgg aggttgcccg 20

Claims

以下の（１）〜（３）から選ばれるいずれか１項の、インフルエンザを治療又は予防する
医薬品の調製における使用であって、
（１）カンナビジオール、又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物
前記インフルエンザは、インフルエンザＡウイルスにより引き起こされ、前記インフルエ
ンザＡウイルスは、Ｈ１Ｎ１サブタイプ又はＨ５ＮＩサブタイプのインフルエンザＡウイ
ルスである、
インフルエンザを治療又は予防する医薬品の調製における使用。
前記インフルエンザの罹患対象は、哺乳動物又は禽類である請求項１に記載のインフルエ
ンザを治療又は予防する医薬品の調製における使用。
前記インフルエンザの症状は、インフルエンザにより引き起こされる、発熱、せき、頭痛
、筋肉痛及び下痢の症状から選ばれる少なくとも１種である、請求項１に記載のインフル
エンザを治療又は予防する医薬品の調製における使用。
前記医薬組成物は、
イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、インターフェロン誘導剤、Ｍ２イオンチャネ
ルタンパク質阻害剤及びノイラミニダーゼ阻害剤から選ばれる１種又は複数種の成分をさ
らに有効量で含み、
前記イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤は、リバビリンであり、
前記インターフェロン誘導剤は、アルビドール塩酸塩であり、
前記Ｍ２イオンチャネルタンパク質阻害剤は、アマンタジン塩酸塩又はリマンタジン塩酸
塩であり、
前記ノイラミニダーゼ阻害剤は、オセルタミビルリン酸塩、オセルタミビル、ザナミビル
又はペラミビルである、請求項１に記載のインフルエンザを治療又は予防する医薬品の調
製における使用。
以下の（１）〜（３）から選ばれるいずれか１項の、抗インフルエンザウイルス薬の調製
における使用であって、、
（１）カンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、
（２）カンナビジオールを含有する植物抽出物、
（３）有効量のカンナビジオール又はその薬学的に許容される塩又はエステル、及び１種
又は複数種の薬学的に許容される添加物を含有する医薬組成物、
前記インフルエンザウイルスは、インフルエンザＡウイルスであり、前記インフルエンザ
Ａウイルスは、Ｈ１Ｎ１サブタイプ又はＨ５ＮＩサブタイプのインフルエンザＡウイルス
である、
抗インフルエンザウイルス薬の調製における使用。
前記宿主細胞は、哺乳動物の細胞又は禽類の細胞である請求項６に記載の抗インフルエン
ザウイルス薬の調製における使用。
前記医薬組成物は、
イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、インターフェロン誘導剤、Ｍ２イオンチャネ
ルタンパク質阻害剤及びノイラミニダーゼ阻害剤から選ばれる１種又は複数種の成分をさ
らに有効量で含み、
前記イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤は、リバビリンであり、
前記インターフェロン誘導剤は、ルビドール塩酸塩であり、
前記Ｍ２イオンチャネルタンパク質阻害剤は、アマンタジン塩酸塩又はリマンタジン塩酸
塩であり、
前記ノイラミニダーゼ阻害剤は、オセルタミビルリン酸塩、オセルタミビル、ザナミビル
又はペラミビルである請求項６に記載の抗インフルエンザウイルス薬の調製における使用
。