JP6949012B2 - Ｂ型肝炎表面抗原に対する抗体及びその使用 - Google Patents

Ｂ型肝炎表面抗原に対する抗体及びその使用 Download PDF

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Description

本発明は、分子ウイルス学及び免疫学の分野、特にＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染の治療に関する分野に関する。特に、本発明は、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）に対する抗体（特に、ヒト化抗体）、それをコードする核酸分子、その調製方法、及びそれを含む医薬組成物に関する。医薬組成物は、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患を予防及び／又は治療するために、対象（例えばヒト）におけるＨＢＶ病原性を中和するために、又は対象におけるＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させるために使用されることができる。したがって、本発明はさらに、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防及び／又は治療するための、対象（例えばヒト）におけるＨＢＶ病原性の中和のための、又は対象におけるＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させるための医薬組成物の製造における抗体（特にヒト化抗体）及びその変異体の使用に関する。
ＨＢＶ感染、特に慢性ＨＢＶ感染は、世界中で最も重要な公衆衛生上の問題の１つである（Ｄｉｅｎｓｔａｇ ＪＬ. Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ.（Ｂ型肝炎ウイルス感染） Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２００８年１０月 ２；３５９(１４)：１４８６−１５００）。慢性ＨＢＶ感染は、慢性Ｂ型肝炎（ＣＨＢ）、肝硬変（ＬＣ）及び肝細胞癌（ＨＣＣ）のような肝臓疾患を引き起こし得る（Ｌｉａｗ ＹＦ, Ｃｈｕ ＣＭ. Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ.（Ｂ型肝炎ウイルス感染） Ｌａｎｃｅｔ ２００９年２月 １４； ３７３(９６６３)： ５８２−５９２）。ＨＢＶに感染した人は、約２０億人で、現在世界中でＨＢＶ感染者は、約３億５千万人と報告されています。これらの感染者の中でも、ＨＢＶ感染に関連する緩疾患の最終的な死亡リスクは、１５％〜２５％に達し、これらの疾患で世界中で毎年１００万人以上が死亡し得る（Ｄｉｅｎｓｔａｇ ＪＬ., 上記参照； 及び Ｌｉａｗ ＹＦら, 上記参照）。
現在、慢性ＨＢＶ感染の治療剤は、インターフェロン（ＩＦＮ）及びヌクレオシド又はヌクレオチド類似体（ＮＡ）に主に分類され得る（Ｄｉｅｎｓｔａｇ ＪＬ., ｖｉｄｅ ｓｕｐｒａ； Ｋｗｏｎ Ｈ, Ｌｏｋ ＡＳ. Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｔｈｅｒａｐｙ（Ｂ型肝炎療法）. Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ ２０１１年５月； ８(５)： ２７５−２８４；及びＬｉａｗ ＹＦら, 上記参照）。前者は、主に患者の全体的免疫能力を増強することによってＨＢＶを阻害し、ＣＨＢを治療する効果を達成する、共通のインターフェロン（ＩＦＮ）及びペグインターフェロン（Ｐｅｇ−ＩＦＮ、長時間活性インターフェロンとも呼ばれる）を含み；後者は、主にＨＢＶのポリメラーゼ活性を直接阻害することによってＨＢＶ複製を阻害する、ラミブジン（ＬＭＶ）、アデフォビルジピボキシル（ＡＤＶ）、エンテカビル（ＥＴＶ）、テルビブジン（ＬｄＴ）及びテノホビルを主に含む。ＨＢＶ感染者（例えばＣＨＢ患者）について、単独で又は併用療法で使用される前記薬剤は、インビボでウイルス複製を効果的に阻害し、ＨＢＶ ＤＮＡレベルを大幅に低下させ；特に、このような５２週間以上の治療後、ＨＢＶ ＤＮＡレベルが患者の検出限界よりも低いウイルス学的応答は４０〜８０％に達することができる（Ｋｗｏｎ Ｈら, 上記参照）。しかしながら、前記薬剤単独又は組み合わせによる治療は、感染した人のＨＢＶウイルスを完全に浄化することができず、ＨＢｓＡｇ又はＨＢｓＡｇの血清学的変換（患者におけるＨＢＶウイルスの完全クリアランスを示すマーカー）の負の変換の応答率は、一般的には５％未満である（Ｋｗｏｎ Ｈら、上記参照）。したがって、より効果的にウイルスを除去することができる、特にＨＢＶ感染患者のＨＢｓＡｇを除去することができる新規な治療方法及び薬剤を開発することが緊急かつ必要である。
それは、免疫学的手段に基づいて慢性ＨＢＶ感染を治療する新しい薬剤を開発するこの分野における重要な研究の方向性の１つである。慢性ＨＢＶ感染の免疫療法は、一般的には、２つの方法、すなわち、受動免疫療法（抗体の形態の薬剤に対応する等）及び能動免疫療法（ワクチン形態の薬剤に対応する等）を実施される。受動免疫療法（抗体を例とする）は、ＨＢＶ感染患者に治療抗体を投与し、抗体媒介性ウイルス中和によるナイーブな肝細胞のＨＢＶ感染を防止するプロセス、又は抗体媒介性免疫クリアランスによってインビボでウイルス及び感染した肝細胞を除去し、それによって治療効果を達成するプロセスに言及する。現在、Ｂ型肝炎ワクチン又はＨＢＶ感染のリハビリ（ｒｅｈａｂｉｌｉｔｅｅ）、すなわち高力価のＢ型肝炎免疫グロブリン（ＨＢＩＧ）で免疫化されたレスポンダーの血清／血漿から得られた抗ＨＢｓポリクロナール抗体は、ＨＢＶの母親の幼児の垂直方向の伝達の遮断に広く適用されており、患者を肝臓移植後のＨＢＶ再感染による慢性ＨＢＶ感染症の予防、及び感染からＨＢＶに偶然曝露された人々の予防を含む。しかしながら、ＨＢＶに感染した患者（例えばＣＨＢ患者）へのＨＢＩＧの直接投与に関する治療は、有意な治療効果を有さず、ＨＢＩＧは、高力価の血漿、高コスト、不安定な特性、及び潜在的なセキュリティの問題の比較的少ない源としての多くの側面で制限される。能動免疫療法は、治療用ワクチン（タンパク質ワクチン、ポリペプチドワクチン、核酸ワクチン等を含む）を投与するプロセスに言及し、慢性ＨＢＶ感染の患者を刺激してＨＢＶに対する細胞性免疫応答（ＣＴＬ効果等）又は／及び体液性免疫（抗体等）を与え、それによってＨＢＶを阻害又は除去する目的を達成する。現在、能動免疫療法のための薬剤／ワクチンは、確かに有効であり、慢性ＨＢＶ感染を治療にはまだ有用ではない。
したがって、ＨＢＶ感染患者のＨＢＶ感染をより効果的に治療することができる新しい治療方法及び薬剤を開発することが緊急かつ必要である。
発明の内容
１つの側面において、本発明は、以下を含む、ＨＢｓＡｇに特異的に結合することができる、抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する：
（ａ）以下からなる群から選択される重鎖可変領域（ＶＨ）の１個以上（例えば１、２又は３個）の相補性決定領域（ＣＤＲ）：
（ｉ）以下の配列：配列番号３、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２又は３個の置換、欠失又は付加）によって配列番号３と異なる配列からなるＶＨ ＣＤＲ１；
（ｉｉ）以下の配列：配列番号４、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２、３、４、５又は６個の置換、欠失又は付加）によって配列番号４と異なる配列からなるＶＨ ＣＤＲ２、及び
（ｉｉｉ）以下の配列：配列番号５、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、又は２個の置換、欠失又は付加）によって配列番号５と異なる配列からなるＶＨ ＣＤＲ３；及び／又は
（ｂ）以下からなる群から選択される軽鎖可変領域（ＶＬ）の１個以上（例えば１、２、又は３個）のＣＤＲ：
（ｉｖ）以下の配列：配列番号６、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２又は３個の置換、欠失又は付加）によって配列番号６と異なる配列からなるＶＬ ＣＤＲ１、
（ｖ）以下の配列：配列番号７、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２、３又は４個の置換、欠失又は付加）によって配列番号７と異なる配列からなるＶＬ ＣＤＲ２、及び
（ｖｉ）以下の配列：配列番号８、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２、３又は４個の置換、欠失又は付加）によって配列番号８と異なる配列からなるＶＬ ＣＤＲ３。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記のようなＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記のようなＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記のようなＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＶＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ヒト化されている。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、は少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％のヒト化度を有する。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、２０個以下、１５個以下、１４個以下、１３個以下、１２個以下、１１個以下、１０個以下、９個以下、８個以下、７個以下、６個以下、５個以下、４個以下、３個以下、２個以下、又は１個以下のマウスのアミノ酸残基を含むか、又はマウスのアミノ酸残基を含まない。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのフレームワーク領域（ＦＲ）は、２０個以下、１５個以下、１４個以下、１３個以下、１２個以下、１１個以下、１０個以下、９個以下、８個以下、７個以下、６個以下、５個以下、４個以下、３個以下、２個以下、又は１個以下のマウスのアミノ酸残基を含むか、又はマウスのアミノ酸残基を含まない。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体の重鎖可変領域は、以下から選択される重鎖可変領域との少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％のアミノ酸配列同一性を有し：
重鎖可変領域は、配列番号１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９, ２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８及び２７９に記載される。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体の重鎖可変領域は、配列番号１１〜９２及び２６３〜２７９のいずれか１つに記載される重鎖可変領域から選択される。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体の軽鎖可変領域は、以下から選択される軽鎖可変領域と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％のアミノ酸配列同一性を有し：
軽鎖可変領域は、配列番号１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７及び３０８に記載される。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体の軽鎖可変領域は、配列番号１８６〜２１４及び２９８〜３０８のいずれか１つに記載される軽鎖可変領域から選択される。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体は、上記の重鎖可変領域及び上記の軽鎖可変領域を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体は、以下を含む：
（１）配列番号１１に記載のＶＨ及び配列番号１８６に記載のＶＬ；
（２）配列番号１６に記載のＶＨ及び列番号１８７に記載のＶＬ；
（４）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２０１に記載のＶＬ；
（５）配列番号７１に記載のＶＨ及び配列番号１９９に記載のＶＬ；
（６）配列番号１７に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（７）配列番号３１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（８）配列番号６９に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（９）配列番号４４に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１０）配列番号７３に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１１）配列番号３２に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１２）配列番号７７に記載のＶＨ及び配列番号２０６に記載のＶＬ；
（１３）配列番号４５に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１４）配列番号７４に記載のＶＨ及び配列番号２０９に記載のＶＬ；
（１５）配列番号４７に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１６）配列番号９１に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１７）配列番号７３に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１８）配列番号３６に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１９）配列番号３６に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（２０）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９２に記載のＶＬ；
（２１）配列番号４６に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２２）配列番号７４に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（２３）配列番号９２に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（２４）配列番号７６に記載のＶＨ及び配列番号２０４に記載のＶＬ；
（２５）配列番号４２に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２６）配列番号４８に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２７）配列番号２０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２８）配列番号４９に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２９）配列番号１８に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３０）配列番号２４に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３１）配列番号１９に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３２）配列番号２５に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３３）配列番号２１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３４）配列番号２７に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３５）配列番号２２に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３６）配列番号２９に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３７）配列番号１２に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３８）配列番号３０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３９）配列番号３３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４０）配列番号３４に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４１）配列番号３５に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４２）配列番号２３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４３）配列番号７５に記載のＶＨ及び配列番号２０３に記載のＶＬ；
（４４）配列番号４０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４５）配列番号３７に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４６）配列番号１３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４７）配列番号１５に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４８）配列番号３８に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４９）配列番号４１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５０）配列番号３９に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５１）配列番号４３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５２）配列番号７８に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（５３）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（５４）配列番号２６に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５５）配列番号２８に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５６）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９４に記載のＶＬ；
（５７）配列番号７０に記載のＶＨ及び配列番号１９８に記載のＶＬ；
（５８）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９５に記載のＶＬ；
（５９）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９７に記載のＶＬ；
（６０）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９６に記載のＶＬ；
（６１）配列番号９０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（６２）配列番号５１に記載のＶＨ及び配列番号１８８に記載のＶＬ；
（６３）配列番号５４に記載のＶＨ及び配列番号１９０に記載のＶＬ；
（６４）配列番号８３に記載のＶＨ及び配列番号２０８に記載のＶＬ；
（６５）配列番号７９に記載のＶＨ及び配列番号１９０に記載のＶＬ；
（６６）配列番号８５に記載のＶＨ及び配列番号１９０に記載のＶＬ；
（６７）配列番号６２に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（６８）配列番号６２に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（６９）配列番号６６に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（７０）配列番号６６に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７１）配列番号６４に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（７２）配列番号６４に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７３）配列番号６７に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（７４）配列番号６７に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７５）配列番号６５に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７６）配列番号６３に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７７）配列番号８２に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（７８）配列番号８２に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７９）配列番号６０に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８０）配列番号６０に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８１）配列番号５６に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８２）配列番号５６に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８３）配列番号６１に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８４）配列番号６１に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８５）配列番号５７に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８６）配列番号５７に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８７）配列番号５８に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８８）配列番号５８に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８９）配列番号５９に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（９０）配列番号５９に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（９１）配列番号６８に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ：
（９２）配列番号５３に記載のＶＨ及び配列番号１９１に記載のＶＬ；
（９３）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９９に記載のＶＬ；
（９４）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（９５）配列番号５３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（９６）配列番号５２に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（９７）配列番号８４に記載のＶＨ及び配列番号２１０に記載のＶＬ；
（９８）配列番号８４に記載のＶＨ及び配列番号２１２に記載のＶＬ；
（９９）配列番号５０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１００）配列番号８０に記載のＶＨ及び配列番号２０７に記載のＶＬ；
（１０１）配列番号８８に記載のＶＨ及び配列番号２１４に記載のＶＬ；
（１０２）配列番号５２に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（１０３）配列番号８９に記載のＶＨ及び配列番号２１２に記載のＶＬ；
（１０４）配列番号８１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１０５）配列番号８４に記載のＶＨ及び配列番号２１１に記載のＶＬ；
（１０６）配列番号８６に記載のＶＨ及び配列番号１９０に記載のＶＬ；
（１０７）配列番号８７に記載のＶＨ及び配列番号２１３に記載のＶＬ；
（１０８）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１０９）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号３０６に記載のＶＬ；
（１１０）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（１１１）配列番号９１に記載のＶＨ及び配列番号３００に記載のＶＬ；
（１１２）配列番号９１に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（１１３）配列番号２６３に記載のＶＨ及び配列番号１９２に記載のＶＬ；
（１１４）配列番号２６４に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１１５）配列番号２６４に記載のＶＨ及び配列番号１９２に記載のＶＬ；
（１１６）配列番号２６４に記載のＶＨ及び配列番号２０１に記載のＶＬ；
（１１７）配列番号２６４に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１１８）配列番号２６５に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１１９）配列番号２６５に記載のＶＨ及び配列番号２０１に記載のＶＬ；
（１２０）配列番号２６５に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１２１）配列番号２６６に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１２２）配列番号２６６に記載のＶＨ及び配列番号１９２に記載のＶＬ；
（１２３）配列番号２６７に記載のＶＨ及び配列番号２９８に記載のＶＬ；
（１２４）配列番号２６８に記載のＶＨ及び配列番号２９９に記載のＶＬ；
（１２５）配列番号２６９に記載のＶＨ及び配列番号３０１に記載のＶＬ；
（１２６）配列番号２７０に記載のＶＨ及び配列番号３０２に記載のＶＬ；
（１２７）配列番号２７１に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１２８）配列番号２７２に記載のＶＨ及び配列番号３０３に記載のＶＬ；
（１２９）配列番号２７３に記載のＶＨ及び配列番号３０４に記載のＶＬ；
（１３０）配列番号２７４に記載のＶＨ及び配列番号３０５に記載のＶＬ；
（１３１）配列番号２７５に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（１３２）配列番号２７６に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１３３）配列番号２７７に記載のＶＨ及び配列番号３０７に記載のＶＬ；
（１３４）配列番号２７８に記載のＶＨ及び配列番号３０８に記載のＶＬ；又は
（１３５）配列番号２７９に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗体結合フラグメントは、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントが、対象においてＨＢｓＡｇに特異的に結合し、ＨＢＶ病原性を中和し、及び／又はＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させることができる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖフラグメント、ダイアボディ、二重特異性抗体、及び多特異性抗体からなる群から選択される。好ましくは、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ｓｃＦｖ抗体である
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＩｇＧ１アイソタイプの抗体又はその抗原結合フラグメントである。例えば、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２の又はＩｇＧ４アイソタイプの抗体、又はそれらの抗原結合フラグメントである。
別の側面において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメント、その重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域コードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸分子を提供する。
別の側面において、本発明は、本発明に係る単離された核酸分子を含む、ベクター（例えばクローニングベクター又は発現ベクター）を提供する。
別の側面において、本発明は、本発明に係る単離された核酸分子又は本発明に係るベクターを含む、宿主細胞を提供する。
別の側面において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを調製する方法を提供し、抗体又はその抗原結合フラグメントの発現を可能にする条件下で、本発明に係る宿主細胞を培養し、培養された宿主細胞の培養から抗体又はその抗原結合フラグメントを回収することを含む。
別の側面において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを含むキットを提供する。好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、検出可能なマーカーをさらに含む。好ましい態様において、キットは、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを特異的に認識する第２の抗体をさらに含む。好ましくは、第２の抗体は、検出可能なマーカーをさらに含む。当業者に周知である、そのような検出可能なマーカーは、放射性同位元素、蛍光物質、発光物質、発色物質及び酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ）等を含むが、これらに限定されない。
別の側面において、本発明は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを使用することを含む、サンプル中のＨＢｓＡｇタンパク質の存在又はレベルを検出する方法を提供する。好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその結合フラグメントは、検出可能なマーカーをさらに含む。別の好ましい態様において、この方法は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを検出するための検出可能なマーカーを担持する第２の抗体を使用することを、さらに含む。本発明の方法は、診断目的又は非診断目的（例えば、前記サンプルが、患者のサンプルではなく細胞試料である）に使用され得る。
別の側面において、本発明は、本発明に係る抗体又は抗原結合フラグメントを使用して、対象のサンプル中のＨＢｓＡｇタンパク質の存在を検出することを含む、対象が、ＨＢＶに感染しているかどうかを診断する方法を提供する。好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、検出可能なマーカーをさらに含む。別の好ましい態様において、本発明の方法は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを検出する検出可能なマーカーを担持する第２の抗体を使用することをさらに含む。
別の側面において、サンプル中のＨＢｓＡｇの存在又はレベルを検出するための、又は対象がＨＢＶに感染しているかどうかを診断するためのキットの製造における本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの使用を提供する。
本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防又は治療するために、インビトロ又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ病原性を中和するために、対象（例えばヒト）において及びＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させるために使用されることができる。
したがって、別の側面において、本発明は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメント、及び薬学的に許容可能な担体及び／又は添加剤を含む、医薬組成物を提供する。好ましい態様において、本発明に係る医薬組成物は、追加の薬学的に活性な薬剤をさらに含み得る。好ましい態様において、追加の薬学的に活性な薬剤は、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防又は治療するための薬剤であり、例えば、インターフェロン又はペグ化インターフェロンなどのインターフェロン型薬剤である。
別の側面において、対象（例えばヒト）においてＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防又は治療するための、インビトロ又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ病原性を中和するための、及び／又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させるための医薬の製造における本発明又は本発明に係る抗体若しくはその抗原結合フラグメント又は本発明に係る医薬組成物の使用を提供する。
別の側面において、本発明は、対象（例えばヒト）においてＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防又は治療するための、対象（例えばヒト）においてＨＢＶ病原性を中和するための、及び／又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させるための方法を提供し、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの有効量をそれを必要とする対象に投与することを含む。
本発明で提供される医薬及び医薬組成物は、単独又は組み合わせて使用され得、又は追加の薬学的に活性な薬剤（例えば、他の抗ウイルス剤、例えばインターフェロン又はペグ化インターフェロンなどのインターフェロン型薬剤）と組み合わせて使用され得る。
本発明の態様を、以下の図面及び実施例を参照して詳細に説明する。しかしながら、当業者であれば、以下の図面及び実施例は、本発明の範囲を規定するのではなく、単に本発明を説明すること意図していることを理解するであろう。以下の図面及び好ましい態様の詳細な説明によれば、本発明の様々な目的及び利点は、当業者に明らかである。
図１Ａ〜１Ｂは、例１における２０個のヒト化抗体の配列情報を示し、図１Ａは、ヒト化抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列を示し；図１Ｂは、ヒト化抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を示し；「．」は、その位置のアミノ酸残基が、抗体Ｂ−Ｓ３−４５の対応する位置のアミノ酸残基と同一であることを意味する。 図２は、ｓｃＦｖ抗体をコードする組み換えベクター（ｐＣＧＭＴ−ｓｃＦｖ）のマップを示し、ｓｃＦｖの構造は、ＮＨ２−ＶＨ−リンカー−ＶＬ−ＣＯＯＨである。 図３は、ｓｃＦｖ抗体及び抗原ＨＢｓＡｇを提示するファージのＥＬＩＳＡ結果を示す。その結果は、本発明に係るｓｃＦｖ抗体を提示するファージは、ＥＬＩＳＡによって測定されるような反応性を有し；構築された全ての２０個のヒト化ｓｃＦｖ抗体は、抗原ＨＢｓＡｇに結合することができたことを示した。 図４は、抗体Ｂ−Ｓ３−４５のＨＣＤＲ３の第１のアミノ酸残基（Ｈ９５）の単一部位突然変異のＰＣＲ戦略の概略図を示す。 図５Ａ〜５Ｉは、抗原ＨＢｓＡｇのＥＬＩＳＡ結果及びＣＤＲの単一部位突然変異を含むｓｃＦｖを提示するファージを示し、横軸は、ｓｃＦｖ抗体の単一部位突然変異の位置及びタイプを示し（例えば、「Ｈ３１−Ｒ」は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによる位置Ｈ３１のアミノ酸残基は、アミノ酸残基はＲに変異していることを示し）、縦軸は、抗原ＨＢｓＡｇと単一部位突然変異を含むｓｃＦｖ抗体を提示するファージの間の反応性を表す。図５Ａ〜５Ｉの実験結果は、抗原ＨＢｓＡｇに対する抗体の結合親和性を妨害することなく、抗体Ｂ−Ｓ３−４５のＣＤＲのアミノ酸残基に対して行われることができることを示す。 図６Ａ〜６Ｊは、例３における１１５個のヒト化抗体に対する配列情報し示し、図６Ａ〜６Ｅは、ヒト化抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列を示し；図６Ｆ〜６Ｊは、ヒト化抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を示し；「．」は、抗体Ｂ−Ｓ３−４５の対応する位置のアミノ酸残基と同一であることを意味する。 図７Ａ〜７Ｗは、抗原ＨＢｓＡｇに対する１２５個のヒト化抗体の結合活性に対するＥＬＩＳＡ結果を示し、横軸は抗体濃度（ｌｏｇ１０ ｎｇ／ｍｌ）を表し、縦軸は、蛍光強度（ｌｏｇ１０ ＲＬＵ）を表す。結果は、全ての試験されたヒト化抗体は、良好な抗原結合活性を有したこと、抗原ＨＢｓＡｇに対する親和性に関して６Ｄ１１−ｍＡｂ及び６Ｄ１１−ｃＡｂよりも優れているか、又は６Ｄ１１−ｍＡｂ及び６Ｄ１１−ｃＡｂに少なくとも匹敵したことを示す。 図８Ａ〜８Ｇは、３６個のヒト化抗体のＨＢＶ中和活性の結果を示し、横軸は、抗体濃度（ｌｏｇ１０ ｎｇ／ｍｌ）を表し、縦軸は、蛍光強度（ｌｏｇ１０ ＲＬＵ）を表す。結果は、全ての試験されたヒト化抗体が、良好なウイルス中和活性を有したこと、ＨＢＶ中和活性に関して、キメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂより優れていたこと、及びいくつかの中和抗体は、中和活性に関して、６Ｄ１１−ｍＡｂにさえ匹敵していたことを示す。 図９Ａ〜９Ｂは、異なるヒト化抗体で処理されたマウスのＨＢｓＡｇの血清レベルの変化を示し、横軸は、ヒト化抗体の注射後の日数を示し、縦軸は、マウス血清のＨＢｓＡｇレベル（ｌｏｇ１０ ＩＵ/ｍｌ）を表す。結果は、全ての試験されたヒト化抗体は、全ての動物において良好なウイルス除去能力を有したこと、及び動物のＨＢｓＡｇ除去の能力に関して、キメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂより優れていたことを示す。 図１０は、ヒト化抗体１６２の等電点を決定するためのキャピラリー等電点フォーカシング（ｃＩＥＦ）電気泳動の結果を示す。結果は、ヒト化抗体１６２は、７．７８のｐｌ値（７．０３〜７．８７の範囲）を有したことを示し、塩基性ピークは、０．９９％、メインピークは５５．８７％、酸性ピークは４３．１４％であった。 図１１は、ヒト化抗体１１６、１１０、１５３及び１３８のキャピラリー等電泳動結果を示す。 図１２は、示差走査熱量測定（ＤＣＳ）によるヒト化抗体１６２の安定性に関する実験結果を示す。 図１３は、ヒト化抗体１１６、１１０、１５３及び１３８のＤＳＣ実験結果を示す。 図１４Ａ〜１４Ｆは、異なる保存条件下でのヒト化抗体１６２のｐＨ値（図１４Ａ〜１４Ｃ）及びタンパク質濃度（図１４Ｄ〜１４Ｆ）の変化を示す。結果は、ヒト化抗体１６２は、４週間、異なる温度で、異なる緩衝液に保存した後、ｐＨ値（図１４Ａ〜１４Ｃ）及びタンパク質濃度（図１４Ｄ〜１４Ｆ）の有意な変化はなかったことを示す。 図１４Ｇ〜１４Ｉは、異なる保存条件下でのヒト化抗体１６２の流体力学的直径の変化を示す。結果は、異なる緩衝液に溶解されたヒト化抗体１６２は、５℃で安定であったこと；緩衝液２（ｐＨ６．０）に溶解されたヒト化抗体は、緩衝液１又は３に溶解したものよりも安定であったことを示した。 図１４Ｊ〜１４Ｌは、異なる条件下で保存されたヒト化抗体１６２のサンプルのＳＥＣ−ＨＰＬＣ結果を示す。結果は、異なる保存条件下（異なる緩衝液、異なる温度、及び異なる保存期間）で、ヒト化抗体１６２を含む全てのサンプルは、８５％を超えるメインピークを有したことを示す。これは、ヒト化抗体１６２が安定であったことを示す。 図１５は、加速安定試験後の抗体１６２、１１６、１５３及び１３８の還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥのエレクトロフェログラムを示す。結果は、加速安定試験後、抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８は、安定なままであったことを示した。 図１６は、５％スクロース及び０．０２％ＰＳ８０を含む２５ｍＭヒスチジン溶液（ｐＨ６．０、緩衝液２）に溶解されたヒト化抗体１６２の粘度の測定結果を示す。結果は、緩衝系において、ヒト化抗体１６２は、１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で、９．６６ｃｐ（１ｃＰ＝１ｍＰａ．ｓ）の粘度、及び１６０ｍｇ／ｍｌの濃度で１１．７３ｃｐの粘度を有したことを示した。 図１７は、５％スクロース及び０．０２％ＰＳ８０を含む２５ｍＭヒスチジン溶液（ｐＨ６．０、緩衝液２）に溶解されたヒト化抗体１１６、１１０、及び１５３の粘度の測定結果を示す。 図１８は、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び／又はヒト化抗体１６２の単回静脈注射後の異なるグループ対時間のオスのカニクイザルの血清におけるＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及びヒト化抗体１６２の平均血中濃度の曲線を示す。 図１５は、３ｍｇ／ｋｇの用量でのＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの単回静脈内注射後の各カニクイザル（グループ１）対時間の血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの血中濃度の曲線を示す。 図１９は、３ｍｇ／ｋｇの用量でのＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの単回静脈内注射後の各カニクイザル（グループ１）対時間の血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの血中濃度の曲線を示す。 図２０は、２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１６２の単回静脈内注射後、各カニクイザル（グループ２）対時間の血清中のヒト化抗体１６２の血中濃度の曲線を示す。 図２１は、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量でヒト化抗体１６２の投与後、各カニクイザル（グループ３）対時間の血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの血中濃度の曲線を示す。 図２２は、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１６２の投与後、各カニクイザル（グループ３）対時間の血清中のヒト化抗体の血中濃度の曲線を示す。 ３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇのヒト化抗体１１６、１１０又は１５３の投与後、各グループ（グループ３）対時間のカニクイザルの血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの血中濃度の曲線を示す。 図２４は、２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１１６、１１０又は１５３の投与後、各グループ対時間のカニクイザルの血清中のヒト化抗体１１６、１１０及び１５３の血中濃度の曲線を示す。 図２５は、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇのヒト化抗体の投与後、各グループ対時間のカニクイザルの血清中のヒト化抗体１１６、１１０及び１５３の血中濃度の曲線を示す。
配列情報
配列番号1
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配列番号2
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配列番号3
SGYHWN
配列番号4
YISYDGSDHYNPSLEN
配列番号5
GFDH
配列番号6
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配列番号7
KVSNRFS
配列番号8
SQNTHVPYT
配列番号9
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配列番号10
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配列番号11
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配列番号12
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配列番号13
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配列番号14
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配列番号15
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配列番号16
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配列番号17
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配列番号18
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配列番号19
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配列番号20
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配列番号21
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配列番号25
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配列番号26
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配列番号27
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配列番号28
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSITRGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDYWGQGTTLTVSS
配列番号29
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASITYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDTWGQGTTLTVSS
配列番号30
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITNFYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号31
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASITYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号32
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITRGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号33
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASITHGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDYWGQGTTLTVSS
配列番号34
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSITSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号35
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTARYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号36
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号37
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSITRGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGNILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDYWGQGTTLTVSS
配列番号38
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWVRQFPGNKLEWIGYISYDGTNLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号39
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASITHGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号40
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASITHGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSNLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDYWGQGTTLTVSS
配列番号41
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITRGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTNLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号42
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITHGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号43
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDYWGQGTTLTVSS
配列番号44
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASISYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVHYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号45
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSITNFYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGNVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDYWGQGTTLTVSS
配列番号46
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASITRDYHWNWIQQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号47
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSITRYYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTIRYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号48
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVHYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDYWGQGTTLTVSS
配列番号49
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGGSITRDYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号50
EVQLQESGPGLVKASQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQLPGNKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRITISRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAKYFCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号51
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYPITSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号52
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号53
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYFCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号54
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYPISSGYHWNWIRQFPGKKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYFCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号55
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISYGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号56
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSITRGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号57
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGNSISRWYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号58
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISHGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号59
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASITRDYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号60
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号61
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASITRWYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDYWGQGTTLTVSS
配列番号62
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITNGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号63
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISHGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号64
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSITRGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSILYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号65
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGNSISRWYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTVLYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号66
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSVLYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号67
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITRGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTNLYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号68
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISHGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号69
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGYPITSGYHWNWIRQFPGNKLVWMGYISYDGSDHYNPSLENRVSISRDISKNQFFLKLSSVTAADTAVYFCASGFDHWGQGTMLTVSS
配列番号70
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISYGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKGRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号71
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISNGYHWNWIRQFPGKSLEWIGYIAYDGVQSYNPSLKGRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号72
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号73
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号74
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISNGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号75
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYIGYDGAVQYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号76
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISHGYHWNWIRQFPGKSLEWIGYISYNGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号77
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSRLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号78
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISNGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYNGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号79
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITSGYHWNWIRQFPGKRLEWMGYISYDGSDHYNPSLENRITITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号80
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYPITSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRVSITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYFCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号81
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITSGYHWNWIRQFPGNELEWIGYISYDGSDHYNPSLENRITITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号82
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITNGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGTILYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号83
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGNRLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号84
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号85
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGNRLEWMGYISYDGSDHYNPSLENRISITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYFCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号86
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRITITRDTSKNQFSLKLRSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号87
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITSGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSDHYNPSLENRVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号88
QVQQQESGPGQVKPSQTLSLTCAVSGYPISSGYHWNWIRQFPGNKLEWMGYISYDGSDHYNPSLENRITITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号89
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSITSGYHWNWIRQFPGNKLEWMGYISYDGSDHYNPSLENRITITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号90
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGNELEWIGYISYDGSDHYNPSLENRITITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAKYYCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号91
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号92
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISHGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号93
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSIS
配列番号94
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSIT
配列番号95
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSIT
配列番号96
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGNSIS
配列番号97
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASIT
配列番号98
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSIT
配列番号99
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASIS
配列番号100
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGGSIT
配列番号101
EVQLQESGPGLVKASQTLSLTCAVSGYSIS
配列番号102
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYPIT
配列番号103
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSIT
配列番号104
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYPIS
配列番号105
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSIS
配列番号106
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSIT
配列番号107
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGNSIS
配列番号108
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSIS
配列番号109
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGASIT
配列番号110
HVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSIT
配列番号111
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSIT
配列番号112
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSIS
配列番号113
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGTSIT
配列番号114
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGNSIS
配列番号115
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSIT
配列番号116
DVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGYPIT
配列番号117
EVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYPIT
配列番号118
QVQQQESGPGQVKPSQTLSLTCAVSGYPIS
配列番号119
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSIT
配列番号120
SGYHWN
配列番号121
RGYHWN
配列番号122
HGYHWN
配列番号123
NGYHWN
配列番号124
YGYHWN
配列番号125
RDYHWN
配列番号126
RWYHWN
配列番号27
NFYHWN
配列番号128
RYYHWN
配列番号129
WIRQFPGNKLEWIG
配列番号130
WVRQFPGNKLEWIG
配列番号131
WIQQFPGNKLEWIG
配列番号132
WIRQLPGNKLEWIG
配列番号133
WIRQFPGKKLEWIG
配列番号134
WIRQFPGKGLEWIG
配列番号135
WIRQFPGNKLVWMG
配列番号136
WIRQFPGKSLEWIG
配列番号137
WIRQFPGKRLEWMG
配列番号138
WIRQFPGNELEWIG
配列番号139
WIRQFPGNRLEWIG
配列番号140
WIRQFPGNRLEWMG
配列番号141
WIRQFPGNKLEWMG
配列番号142
YISYDGSDHYNPSLEN
配列番号143
YISYDGSVFYNPSLEN
配列番号144
YISYDGSILYNPSLEN
配列番号145
YISYDGTILYNPSLEN
配列番号146
YISYDGTVLYNPSLEN
配列番号147
YISYDGNVLYNPSLEN
配列番号148
YISYDGTSLYNPSLEN
配列番号149
YISYDGSVLYNPSLEN
配列番号150
YISYDGNILYNPSLEN
配列番号151
YISYDGTNLYNPSLEN
配列番号152
YISYDGSNLYNPSLEN
配列番号153
YISYDGTVHYNPSLEN
配列番号154
YISYDGTIRYNPSLEN
配列番号155
YISYDGSVLYNPSLKS
配列番号156
YISYDGSVLYNPSLKG
配列番号157
YIAYDGVQSYNPSLKG
配列番号158
YIGYDGAVQYNPSLKS
配列番号159
YISYNGSVLYNPSLKS
配列番号160
YISYDGSRLYNPSLKS
配列番号161
RITITRDTSKNQFSLILRSVTAEDTAIYYCAS
配列番号162
RVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYYCAS
配列番号163
RVTITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTARYYCAS
配列番号164
RITISRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAKYFCAS
配列番号165
RVSITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCAS
配列番号166
RVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYYCAS
配列番号167
RVSITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYFCAS
配列番号168
RVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYFCAS
配列番号169
RVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCAS
配列番号170
RVSISRDISKNQFFLKLSSVTAADTAVYFCAS
配列番号171
RITITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAVYYCAS
配列番号172
RVSITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAIYFCAS
配列番号173
RITITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAKYYCAS
配列番号174
RVTITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAKYYCAS
配列番号175
RVTITRDTSKNQFFLKLRSVTAEDTAKYYCAS
配列番号176
RISITRDTSKNQFFLKLSSVTAEDTAKYFCAS
配列番号177
RITITRDTSKNQFSLKLRSVTAEDTAVYYCAS
配列番号178
RITITRDTSKNQFFLILRSVTAEDTAIYYCAS
配列番号179
RVTISVDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCAS
配列番号180
GFDH
配列番号181
GFDY
配列番号182
GFDT
配列番号183
WGQGTTLTVSS
配列番号184
WGQGTLVTVSS
配列番号185
WGQGTMLTVSS
配列番号186
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSNQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDVGVYYCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号187
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYYCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号188
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDVGVYYCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号189
DIVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDVGVYYCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号190
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYYCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号191
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYYCSQNTHLPYTFGGGTKLEIKR
配列番号192
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号193
DVVMTQTPLSLPVNLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号194
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQNAKTPYTFGQGTKLEIKR
配列番号195
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQNARVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号196
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNSYVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号197
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTIPPYTFGQGTKLEIKR
配列番号198
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQNSMAPYTFGQGTKLEIKR
配列番号199
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGPTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSKRNSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号200
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGPTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号201
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHTYGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号202
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGSTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号203
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHRYGTTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号204
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGATYLHWYLQKPGQSPQLLIYKASQRNSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号205
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号206
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGPTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCGQNAHLPYTFGQGTKLEIKR
配列番号207
DIVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYFCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号208
DIVMTQSPLSLPVTLGEQASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYFCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号209
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGRTYLHWYLQKPGQSPQLLIYRSSHRNSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号210
DIVMTQSPLSLPVTLGEQASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYFCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号211
DIVMTQSPLSLPVTLGEQASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVDTEDLGVYFCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号212
DIVMTQSPLSLPVTLGEQASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYYCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号213
DVVMTQSPLSLPVTLGEQASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYYCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号214
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDVGVYFCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
配列番号215
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISC
配列番号216
DIVMTQSPLSLPVTLGEPASISC
配列番号217
DVVMTQTPLSLPVNLGEPASISC
配列番号218
DIVMTQSPLSLPVTLGEQASISC
配列番号219
DVVMTQSPLSLPVTLGEQASISC
配列番号220
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISC
配列番号221
WYLQKPGQSPKLLIY
配列番号222
WYLQKPGQSPQLLIY
配列番号223
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDVGVYYC
配列番号224
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYYC
配列番号225
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYC
配列番号226
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFC
配列番号227
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYFC
配列番号228
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVDTEDLGVYFC
配列番号229
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDVGVYFC
配列番号230
FGGGTKLEIKR
配列番号231
FGQGTKLEIKR
配列番号232
RSNQSLVHSYGDTYLH
配列番号233
RSSQSLVHSYGDTYLH
配列番号234
RSSQSLVHPYGPTYLH
配列番号235
RSSQSLVHTYGNTYLH
配列番号236
RSSQSLVHPYGSTYLH
配列番号237
RSSQSLVHRYGTTYLH
配列番号238
RSSQSLVHPYGATYLH
配列番号239
RSSQSLVHPYGRTYLH
配列番号240
KVSNRFS
配列番号241
KVSKRNS
配列番号242
KASQRNS
配列番号243
RSSHRNS
配列番号244
SQNTHVPYT
配列番号245
SQNTHLPYT
配列番号246
GQNAKTPYT
配列番号247
GQNARVPYT
配列番号248
SQNSYVPYT
配列番号249
SQNTIPPYT
配列番号250
GQNSMAPYT
配列番号251
GQNAHLPYT
配列番号252-262, プライマー配列(表５参照)
配列番号263
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号264
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号265
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号266
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSITYGYHWNWIRQFPGNKLEWIGYISYDGSVLYNPSLENRVTITRDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号: 267
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDRSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号268
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTVSVDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号269
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTTEDSAVYYCSSGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号270
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCASGFDHWGHGTLVTVSS
配列番号271
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQYPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVAISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号272
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLSCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKGRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号273
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWLGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号274
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISEDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号275
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISMDTSKNHFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号276
QVQLQESGPGRVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号277
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配列番号278
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLSCAVSGYSISSGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTIGVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号279
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGYSISRGYHWNWIRQFPGKGLEWIGYISYDGSVLYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLRSVTDEDSAVYYCASGFDHWGQGTLVTVSS
配列番号280
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAVSGSSIT
配列番号281
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLSCAVSGYSIS
配列番号282
QVQLQESGPGRVKPSQTLSLTCAVSGYSIS
配列番号283
WIRQYPGKGLEWIG
配列番号284
WIRQFPGKGLEWLG
配列番号285
YISYDGSVLFNPSLKS
配列番号286
RVTITRDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCAS
配列番号287
RVTITRDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCAS
配列番号288
RVTISVDRSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCAS
配列番号289
RVTVSVDTSKNQFSLKLSSVTTEDTAVYYCAS
配列番号290
RVTISVDTSKNQFSLKLSSVTTEDSAVYYCSS
配列番号291
RVAISVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCAS
配列番号292
RVTISEDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCAS
配列番号293
RVTISMDTSKNHFSLKLSSVTAEDTAVYYCAS
配列番号294
RVTIGVDTSKNQFSLKLSSVTAEDTAVYYCAS
配列番号295
RVTISVDTSKNQFSLKLRSVTDEDSAVYYCAS
配列番号296
WGHGTLVTVSS
配列番号297
WGPGTQVTVSS
配列番号298
DVVMTQSPISLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGSTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号299
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGSTYLHWYLQKPGQPPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号300
DVVMTQSPLSLSVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGPTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDYTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号301
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDYTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号302
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGPTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTEFTLKISRVEAEDVGAYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号303
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPFGPTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号304
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLAHPYGSTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号305
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTRLEIKR
配列番号306
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGPTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGGGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号307
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGPTYLHWYLQKPGQSPQLLVYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号308
DVVMTQSPLSLPVTLGEPASISCRSSQSLVHPYGSTYFHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDGGVYYCSQNTHVPYTFGQGTKLEIKR
配列番号309
DVVMTQSPISLPVTLGEPASISC
配列番号310
DVVMTQSPLSLSVTLGEPASISC
配列番号311
WYLQKPGQPPQLLIY
配列番号312
WYLQKPGQSPQLLVY
配列番号313
GVPDRFSGSGSGTDYTLKISRVEAEDVGVYYC
配列番号314
GVPDRFSGSGSGTEFTLKISRVEAEDVGAYYC
配列番号315
GVPDRFSGGGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYC
配列番号316
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDGGVYYC
配列番号317
FGQGTRLEIKR
配列番号318
RSSQSLVHPFGPTYLH
配列番号319
RSSQSLAHPYGSTYLH
配列番号320
RSSQSLVHPYGSTYFH
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本発明の詳細な説明
用語の定義
本発明において、他に特定しない限り、本明細書中で使用される科学用語及び技術用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有する。さらに、本明細書中で使用される細胞培養、分子遺伝学、核酸化学及び免疫学の実験室操作は、対応する分野で広く使用されるルーチン操作である。一方、本発明をよりよく理解するために、関連用語の定義及び説明は、以下のように提供される。
本明細書中で使用される場合、用語「抗体」は、一般的には、二対のポリペプチド鎖（各対は軽（Ｌ）鎖及び重（Ｈ）鎖を有する）からなる免疫グロブリン分子を指す。抗体の軽鎖は、κ及びλ軽鎖に分類され得る。重鎖は、抗体のアイソタイプをそれぞれＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＥとして定義するμ、δ、γ、α及びεに分類され得る。軽鎖及び重鎖において、可変領域は、約１２個以上のアミノ酸の「Ｊ」領域を介して定常領域に連結され、重鎖はさらに、約３個以上のアミノ酸の「Ｄ」領域を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域（ＣＨ）からなる。重鎖定常領域は、３個のドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）からなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域（ＣＬ）からなる。軽鎖定常領域は、ドメインＣＬからなる。抗体の定常領域は、免疫系の種々の細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分の種々の細胞（Ｃ１ｑ）を含む、宿主組織又は因子への免疫グロブリンの結合を媒介することができる。ＶＨ及びＶＬ領域は、比較的保存的領域（フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる）によって間隔を空けられた超可変領域（相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる）に分けることができる。各ＶＨ及びＶＬは、以下の順で３つのＣＤＲ及び４つのＤＲからなる：Ｎ末端からＣ末端にＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。各重／軽鎖対の可変領域（ＶＨ及びＶＬ）は、それぞれ抗原結合部位を形成する。様々な領域又はドメインにおけるアミノ酸の分布は、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（免疫学的目的のタンパク質配列） (Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ, Ｂｅｔｈｅｓｄａ, Ｍｄ. (１９８7年及び１９９１年))、又はＣｈｏｔｈｉａ ＆ Ｌｅｓｋ (１９８７年) Ｊ. Ｍｏｌ. Ｂｉｏｌ. １９６：９０１−９１７; Ｃｈｏｔｈｉａら, (１９８９年) Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７８−８８３の配列のＫａｂａｔの定義に従う。
本明細書中で使用される場合、用語「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」は、抗体可変領域における抗原結合に関与するアミノ酸残基を指し、これは、一般的には、軽鎖可変領域における残基２４−３４ {ＬＣＤＲ１}, ５０−５６ {ＬＣＤＲ２}, ８９−９７ {ＬＣＤＲ３}及び重鎖可変領域における残基３１−３５ {ＨＣＤＲ１}, ５０−６５ {ＨＣＤＲ２}, ９５−１０２ {ＨＣＤＲ３}（例えば、Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｌｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｌｎｔｅｒｅｓｔ（免疫学的目的のタンパク質配列, 第５版, Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ, Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ, Ｂｅｔｈｅｓｄａ, Ｍａｒｙｌａｎｄ (１９９１年)), 又は軽鎖可変領域における残基２６−３２ {Ｌｌ}, ５０−５２ {Ｌ２}, ９１−９６ {Ｌ３}及び重鎖可変領域における残基２６−３２ {Ｈ１}, ５３−５５ {Ｈ２}, ９６−１０１ {Ｈ３} (Ｃｈｏｔｈｉａ及び Ｌｅｓｋ Ｊ. Ｍｏｌ. Ｂｉｏｌ. １９６： ９０１−９１７ (１９８７年)参照)を含む。
本明細書中で使用される場合、用語「フレームワーク領域」又は「ＦＲ」残基は、抗体可変領域において、上記に定義されるＣＤＲ残基以外のアミノ酸残基を指す。
用語「抗体」は、抗体を産生するための任意の特定の方法によって制限されない。例えば、抗体は、組換え抗体、モノクロナール抗体及びポリクロナール抗体を含むことができる。抗体は、異なる抗体のアイソタイプ、例えば、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４サブタイプ）、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、ＩｇＥ又はＩｇＭ抗体であり得る。
本明細書中で使用される場合、用語「抗原結合フラグメント」は、完全長抗体の断片を含むポリペプチドを指し、これは、完全長抗体が、抗原に特異的に結合する能力を保持し、及び／又は「抗原結合部位」としても知られている同じ抗原への結合についての完全長抗体と競合する。一般的には、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ, Ｃｈ. ７ (Ｐａｕｌ, Ｗ., ｅｄ., 第２版, Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ, Ｎ.Ｙ. (１９８９年)を参照されたく、これは、全ての目的について参照によって取り込まれる。抗体の抗原結合フラグメントは、組換えＤＮＡ技術によって、又はインタクトな抗体の酵素的又は化学的切断によって産生され得る。いくつかの条件下で、抗原結合フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ(ａｂ’)２、Ｆｄ、Ｆｖ、ｄＡｂ及び相補決定領域（ＣＤＲ）断片、一本鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、キメラ抗体、ダイアボディ及びポリペプチドに対して特異的抗原結合能力を付与するのに十分な抗原の少なくとも一部を含むそのようなポリペプチドを含む。
本明細書中で使用される場合、用語「Ｆｄフラグメント」は、ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなる抗体フラグメントを指し；用語「ｄＡｂフラグメント」は、ＶＨドメインからなる抗体フラグメントを指し（Ｗａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４ ５４６ (１９８９年)）；用語「Ｆａｂフラグメント」は、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる抗体フラグメントを指し：用語「Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、ヒンジ領域上のジスルフィド架橋（複数可）を介して互いに連結された２つのＦａｂフラグメントを含む抗体フラグメントを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「Ｆｖフラグメント」は、抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなる抗体フラグメントを指す。Ｆｖフラグメントは、一般的には、完全な抗原結合部位を形成することができる最小限の抗体フラグメントとみなされる。６つのＣＤＲは、抗体に対して抗原結合特異性を付与すると一般的には考えられる。しかしながら、完全な結合部位の親和性よりも低い親和性ではあるが、１つの可変領域（例えば、抗原に対して特異的な３つのＣＤＲを単に含むＦｄフラグメント）はまた、抗原を認識し結合することができる。
いくつかの条件下で、抗体の抗原結合フラグメントは、一本鎖抗体（例えばｓｃＦｖ）であり、ここでＶＬ及びＶＨドメインが対になって、それらが単一のポリペプチド鎖を産生することを可能にするリンカーを介して一価分子を形成する（例えば、Ｂｉｒｄら, Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３-４２６ （１９８８年）及びＨｕｓｔｏｎら, Ｐｒｏｃ. Ｎａｔｌ. Ａｃａｄ. Ｓｃｉ. ＵＳＡ ８５：５８７９-５８８３ (１９８８年)）。そのようなｓｃＦｖ分子は、一般的には、共通の構造を有する：ＮＨ２−ＶＬ−リンカー−ＶＨ−ＣＯＯＨ又はＮＨ２−ＶＨ−リンカー−ＶＬ−ＣＯＯＨ。先行技術における適切なリンカーは、ＧＧＧＧＳ又はその変異体の繰り返しアミノ酸配列からなる。例えば、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）４を有するリンカーが使用され得、その変異体はまた使用され得る（Ｈｏｌｌｉｇｅｒら, （１９９３年）, Ｐｒｏｃ. Ｎａｔｌ. Ａｃａｄ. Ｓｃｉ. ＵＳＡ ９０： ６４４４−６４４）。本発明において使用され得る他のリンカーは、Ａｌｆｔｈａｎら, （１９９５年), Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ. ８：７２５−７３１, Ｃｈｏｉら, （２００１年）, Ｅｕｒ. Ｊ. Ｉｍｍｕｎｏｌ. ３１： ９４−１０６, Ｈｕら, (１９９６年), Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ. ５６：３０５５−３０６１, Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖら, （１９９９年）, Ｊ. Ｍｏｌ. Ｂｉｏｌ. ２９３：４１−５６及びＲｏｏｖｅｒｓら,（２００１年）, Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌによって記載される。
本明細書中で使用される場合、用語「一本鎖抗体−Ｆｃ」又は「ｓｃＦｖ−Ｆｃ」は、ｓｃＦｖを抗体のＦｃフラグメントに連結することによって形成される操作された抗体を指す。本明細書中で使用される場合、用語「Ｆｃフラグメント」は、ジスルフィド結合を介して第２の重鎖の第２及び第３の定常領域に対して第１の重鎖の第２及び第３の定常領域を連結することによって形成される抗体フラグメントを指す。抗体のＦｃフラグメントは、様々な機能を有するが、抗体結合には関与しない。
いくつかの条件下で、抗体の抗原結合フラグメントは、ダイアボディ、すなわち、ＶＨ及びＶＬドメインが単一ポリペプチド鎖上に発現される二価抗体であり得るが、使用されるリンカーは短すぎて、同じ鎖上の２つのドメインの対合を可能にし、ドメインは、２つの抗原結合部位を生成するために別の鎖上で相補的ドメインと対合させなければならない（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ Ｐ.ら, Ｐｒｏｃ. Ｎａｔｌ. Ａｃａｄ. Ｓｃｉ. ＵＳＡ ９０：６４４４−６４４８ （１９９３年）,及びＰｏｌｊａｋ Ｒ. Ｊ.ら, Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ２：１１２１−１１２３（１９９４年）参照）。
抗体の抗原結合フラグメント（例えば上記の抗体結合フラグメント）は、当業者（例えば、組換えＤＮＡ技術又は酵素的技術又は化学的切断方法）によって公知の従来技術によって所定の抗体（例えば、本発明で提供されるモノクロナール抗体）から得られ得、抗体がスクリーニングされるのと同様の方法で特異性についてスクリーニングされ得る。
本発明において、明確に特定されていない限り、用語「抗体」が言及される場合、それはインタクトな抗体だけでなく、抗体の抗原結合フラグメントも含む。
本明細書中で使用される場合、用語「ｍＡｂ」及び「モノクロナール抗体」は、高度に相同的な抗体分子の集団、すなわち、自発的に起こりうる天然の突然変を除いて抗体分子に完全に一致する集団からの抗体又は抗体のフラグメントを指す。モノクロナール抗体は、抗原の単一のエピトープに対して高い特異性を有する。モノクロナール抗体と比較して、ポリクロナール抗体は、一般的には、抗原上の異なるエピトープを認識する少なくとも２つ以上の異なる抗体を一般的には含む。モノクロナール抗体は、一般的には、Ｋｏｈｌｅｒら、ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｔｉｍｅ （Ｎａｔｕｒｅ, ２５６：４９５, １９７５年）によって報告されたハイブリドーマ技術によって得られ、組換えＤＮＡ技術によっても得られることができる（例えば、Ｕ.Ｓ.Ｐ ４，８１６，５６７参照）。
例えば、モノクロナール抗体は、以下のようにして調製され得る。最初に、マウス又は他の適切な宿主動物を、免疫原の注射によって免疫化する（必要な場合、アジュバントを添加する）。免疫原又はアジュバントの注射手段は、一般的には、皮下多点注射又は腹腔内注射である。いくつかの既知のタンパク質（例えば、血清アルブミン又は大豆トリプシン阻害剤）に対する免疫原の予備結合は、宿主における抗原の免疫原性を促進し得る。アジュバントは、フロイントアジュバント又はＭＰＬ−ＴＤＭ等であり得る。動物の免疫後、免疫原に特異的に結合する抗体を分泌するリンパ球が、動物において生産される。さらに、リンパ球はまた、インビトロでの免疫化によって得られ得る。目的のリンパ球を回収し、適切な融合剤（例えば、ＰＥＧ）を使用して骨髄腫細胞に融合させ、ハイブリドーマ細胞を得る（Ｇｏｄｉｎｇ, Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ及びＰｒａｃｔｉｃｅ, ｐｐ.５９−１０３, Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ, １９９６年）。上記で調製したハイブリドーマ細胞を適切な培地に播種し、培地中で増殖させ、培地は、好ましくは、融合していない親骨髄腫細胞の増殖を阻害することができる１つ以上の物質を含む。
例えば、ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨＰＲＴ）を欠く親骨髄腫細胞の場合、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖は、培地に対してヒポキサンチン、アミノプテリン及びチミジン（ＨＡＴ培地）などの物質の添加によって阻害される。好ましい骨髄腫細胞は、高い融合速度、抗体を分泌する安定した能力を有し、ＨＡＴ培地等に感受性であるべきである。骨髄腫細胞の第１の選択は、ＭＯＰ−２１又はＭＣ−１１マウス腫瘍由来細胞株（ＴＨＥ Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ, Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ, Ｃａｌｉｆ. ＵＳＡ）、及びＳＰ−２／０又はＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞株（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ, Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ, Ｍｄ. ＵＳＡ）などのマウス骨髄腫である。また、ヒト骨髄腫及びヒト−マウス異種骨髄腫細胞株を使用してヒトモノクロナール抗体を調製し得る（Ｋｏｚｂｏｒ, Ｊ. Ｉｍｍｕｎｏｌ., １３３： ３００１ (１９８４年); Ｂｒｏｄｅｕｒら, Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ, ｐｐ. ５１−６３, Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ, Ｉｎｃ., Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ, １９８７年）。ハイブリドーマ細胞の増殖のための培地は、特定の抗原に対するモノクロナール抗体の生成を検出するために使用される。以下の方法を使用して、ハイブリドーマ細胞、免疫沈降又は例えばラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）及び酵素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ）などのインビトロ結合アッセイによって産生されたモノクロナール抗体の結合特異性を決定し得る。例えば、Ｍｕｎｓｏｎら, Ａｎａｌ. Ｂｉｏｃｈｅｍ. １０７： ２２０ (１９８０年)に記載されるＳｃａｔｃｈａｒｄアッセイは、モノクロナール抗体の親和性を決定するために使用され得る。ハイブリドーマによって産生された抗体の特異性、親和性及び反応性を決定した後、目的の細胞株は、Ｇｏｄｉｎｇ, Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ, ｐｐ. ５９−１０３, Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ, １９９６年に記載される標準限界希釈法によってサブスクリーングされ得る。適切な培地は、ＤＭＥＭ又はＲＰＭＩ−１６４０等であり得る。また、ハイブリドーマ細胞は、動物体内の腹水腫瘍の形態で増殖し得る。プロテインＡアガロースゲル、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析及びアフィニティークロマトグラフィーなどの免疫グロブリンを精製するための従来の方法を使用することによって、サブクローン細胞によって分泌されたモノクロナール抗体を細胞培養物、腹水又は血清から単離し得る。
モノクロナール抗体はまた、遺伝子操作組換え技術によって得られ得る。ＭＡｂ重鎖及び軽鎖の遺伝子に特異的に結合する核酸プライマーは、ＰＣＲ増幅に供され、ハイブリドーマ細胞からＭＡｂ重鎖及び軽鎖をコードするＤＮＡ分子を得る。得られたＤＮＡ分子を発現ベクターに挿入し、宿主細胞（例えば、Ｅ. ｃｏｌｉ（大腸菌）細胞、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、又は免疫グロブリンを産生しない他の骨髄腫細胞）は、それらで核酸を導入し、適切な条件下で培養して、組換え発現によって目的の抗体を得る。
本明細書中で使用される場合、用語「抗原エピトープ」及び「エピトープ」は、免疫グロブリン又は抗体が特異的に結合する抗原上の部分を指す。「エピトープ」は、「抗原決定基」としても知られている。エピトープ又は抗原決定基は、一般的には、アミノ酸、炭化水素又は糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面基からなり、一般的には、特異的な三次元構造及び特異的な電荷特性を有する。例えば、エピトープは、一般的には、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４又は１５個の連続又は非連続アミノ酸をユニークな立体配座で含み、これは、「線状」又は「立体配座」であり得る。例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Biology（分子生物学の方法におけるエピトープマッピングプロトコル）, Ｖｏｌ. ６６, Ｇ. Ｅ. Ｍｏｒｒｉｓ, Ｅｄ. （１９９６年）を参照されたい。線状エピトープにおいて、タンパク質と相互作用分子（例えば抗体）との間の全ての相互作用部位は、タンパク質の一次アミノ酸配列に沿って直線的に存在する。立体配座エピトープにおいて、相互作用部位は、タンパク質中で互いに相互作用部位を分離するアミノ酸残基にわたる。抗体は、当業者に公知の従来技術によって同じエピトープへの結合の競合性に応じてスクリーニングされ得る。例えば、競合又は交差競合に関する研究は、抗原に結合するために互いに競合又は交差競合する抗体を得るために行われ得る。それらの交差競合に基づく、同じエピトープに結合する抗体を得るためのハイスループット法は、国際特許出願ＷＯ０３／４８７３１に記載される。
本明細書中で使用される場合、用語「特異的に結合する」まてゃ「特異的に結合」は、抗体と抗原の間の反応が指向するなど、非ランダムな方法で２つの分子の結合を指す。いくつかの態様において、抗原に特異的に結合する抗体（又は抗原に特異的な抗体）は、約１０−５Ｍ未満、例えば約１０−６Ｍ、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ又は１０−１０Ｍ以下の親和性（ＫＤ）を有する抗原に結合する抗体を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「ＫＤ」は、特異的抗体−抗原相互作用の解離定数を指し、これは抗原に対する抗体の結合親和性を記載するために使用される。解離定数が小さいほど、抗体はより強く結合し、抗体と抗原の間の親和性は高くなる。一般的には、抗体（例えば、本発明に係る抗体）は、例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ装置中の表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定される、約１０−５Ｍ未満、例えば１０−６Ｍ、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、１０−９Ｍ又は１０−１０Ｍ以下のＫＤを有する抗原（例えばＨＢｓＡｇ）に結合する。
本明細書中で使用される場合、用語「免疫原性」は、生物における特異的抗体又は感作リンパ球の形成を刺激する能力を指す。特定の免疫細胞を刺激して、増殖及び分化を活性化させて、最終的には、抗体及び感作リンパ球などの免疫エフェクター物質を発生させるだけなく、抗体又は感作Ｔリンパ球が、抗原の刺激後に生物の免疫システムを形成することができる特定の免疫応答も指す。異種抗体が対象に適用される場合、異種抗体の免疫原性は、対象において望ましくない。そのような免疫原性は、対象の免疫系／免疫細胞によって異種抗体の拒絶をもたらし、それにより、対象における異種抗体の低下した効力又は対象における望ましくない副作用をもたらすことができる。したがって、ヒト対象に投与される前に、異種抗体（例えばマウス抗体）は、一般的には、その免疫原性をできるだけ減少させるように操作される必要がある。
本明細書中で使用される場合、用語「キメラ抗体」は、抗体が、目的の抗原に結合する活性を保持したままである場合、その軽鎖及び／又は重鎖の一部が抗体（特定の種に由来し得るか、又は特定の抗体のタイプ又はサブタイプに属する）に由来する、その軽鎖及び／又は重鎖の他の部分が、別の抗体（同じ又は異なる抗体種に由来し得るか、また同じ又は異なる抗体のタイプ又はサブタイプに属する）に由来するそのような抗体を指す（Ｃａｂｉｌｌｙらの米国特許第４，８１６，５６７号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら, Ｐｒｏｃ. Ｎａｔｌ. Ａｃａｄ. Ｓｃｉ. ＵＳＡ, ８１： ６８５１−６８５５ （１９８４年））。例えば、用語「キメラ抗体」は、抗体の重鎖及び軽鎖可変領域が第１の抗体（例えばマウス抗体）に由来するが、抗体の重鎖及び軽鎖定常領域が第２の抗体（例えばヒト抗体）に由来するそのような抗体（例えばヒト−マウスキメラ抗体）を含み得る。
本明細書中で使用される場合、用語「ヒト化抗体」は、ヒト免疫グロブリン（レセプター抗体）の全てのＣＤＥ領域又はＣＤＲ領域の一部が、非ヒト抗体（ドナー抗体）のＣＤＲ領域で置換される抗体又は抗体フラグメントを指す。ヒト化抗体は、一般的には、抗原特異性、親和性、反応性、ウイルス中和能力及び／又はウイルス除去能力等を含む、期待される特性を維持するが、これらに限定されない。ドナー抗体は、期待される特性（例えば、抗原特異性、親和性、反応性、ウイルス中和能力及び／又はウイルス除去能力）を有するマウス、ラット、ウサギ又は非ヒト霊長類抗体であり得る。
ヒト化抗体は、非ヒトドナー抗体（例えばマウス抗体）の期待される特性だけでなく、ヒト対象における非ヒトドナー抗体（例えばマウス抗体）の免疫原性を効果的に低下させることができるので、特に好ましい。しかしながら、ドナー抗体のＣＤＲとレセプター抗体のＦＲの間のマッチングの問題により、ヒト化抗体の期待される特性（例えば抗原特異性、親和性、反応性、ウイルス中和能力及び／又はウイルス除去能力）は、一般的には、非ヒトドナー抗体（例えばマウス抗体）のものよりも低い。したがって、ヒト化抗体が可能な限りドナー抗体の特性（抗原特異性、親和性、反応性、ウイルス中和能力及び／又はウイルス除去能力を含む）を維持するために、いくつかの場合において、ヒト化抗体のフレームワーク領域（ＦＲ）におけるいくつかのアミノ酸残基には、非ヒトドナー抗体の対応するアミノ酸残基で置換される。
また、非ヒトアミノ酸残基に起因する免疫原性をできるだけ低下させるヒト化度をさらに高めるために、いくつかの場合において、ヒト化抗体のドナー抗体に由来するＣＤＲのいくつかのアミノ酸残基は、例えば、ヒト免疫グロブリン、又は他のアミノ酸残基のＣＤＲ中の対応するアミノ酸残基で置換されることができる。
また、ヒト化抗体の特性をさらに改善又は最適化するために、ヒト化抗体の重鎖及び軽鎖可変領域中のいくつかのアミノ酸残基はまた、例えばレセプター抗体由来でもドナー抗体でもないアミノ酸残基で置換されることができる。
当該技術の研究者は、抗体のヒト化について深く研究し、いくつかの進歩を遂げているが（例えば、Ｊｏｎｅｓら, Ｎａｔｕｒｅ, ３２１：５２２ ５２５ （１９８６年）； Ｒｅｉｃｈｍａｎｎら、 Ｎａｔｕｒｅ, ３３２：３２３ ３２９ （１９８８年）； Ｐｒｅｓｔａ, Ｃｕｒｒ. Ｏｐ. Ｓｔｒｕｃｔ. Ｂｉｏｌ., ２：５９３ ５９６ (１９９２年)；及び Ｃｌａｒｋ, Ｉｍｍｕｎｏｌ. Ｔｏｄａｙ ２１： ３９７ ４０２ (２０００年)）、得られるヒト化抗体が、ドナー抗体の期待される特性を可能な限り保持しながら、できるだけ高いヒト化度を有することを可能にするために、特定のドナー抗体を十分にヒト化する方法に関して、先行技術において、詳細な指針は提供されていない。当業者は、特定のドナー抗体を調査し、検索し、操作しなければならず、高いヒト化度（例えば少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％のヒト化度）を有するだけではなく、ドナー抗体の期待される特性を維持するヒト化抗体を得るために多くの創造的な仕事をしなければならない。
本願出願において、発明者らは、良好な特性を有するマウス抗体（その重鎖及び軽鎖可変領域が、それぞれ配列番号１及び２に記載される）を最初に開発した：マウス抗体は、ＨＢｓＡｇを特異的に認識／結合し、ＨＢＶ病原性を中和するだけではなく、対象におけるＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させ、インビボでＨＢＶ及びＨＢＶ感染細胞を効果的に除去する。したがって、マウス抗体は、ＨＢＶ感染及びＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）の予防及び治療において潜在力を有する。
これに基づいて、発明者は、マウス抗体を深く研究し、操作する多くの創作力をさらに払い、したがって、マウス抗体のヒト化抗体を開発した：本発明に係るヒト化抗体は、マウス抗体及びヒト−マウスキメラ抗体（マウス抗体として完全に一致する重鎖及び軽鎖可変領域を有する）として、非常に高いヒト化度（９７％までのヒト化度）を有するだけではなく、実質的に同じ（又はより良好な）期待される特性（ＨＢｓＡｇ結合活性、ＨＢＶ中和能力、インビボでＨＢＶ ＤＮＡ又はＨＢｓＡｇを除去する能力、又はインビボでＨＢＶ及びＨＢＶ感染細胞を除去する能力等を含むが、これらに限定されない）を有する。
したがって、本発明に係る抗体（特にヒト化抗体）は、親マウス抗体の機能及び特性を保持することができ、したがって、ＨＢＶ感染及びＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防及び治療する潜在力を有するので、非常に好ましいことができ；さらに、抗体は、非常に高いヒト化度（９７％までのヒト化度）を有することができ、したがって、免疫原性応答を上昇させることなく、ヒト対象に安全に投与することができる。本発明に係る抗体（特にヒト化抗体）は、重要な臨床的価値を有することができる。
本願出願において、本発明に係る抗体の期待される特性は、ＨＢｓＡｇに特異的に結合する活性、ＨＢＶを中和する活性、インビボでＨＢＶ ＤＮＡ又はＨＢｓＡｇを除去する活性、及び／又はインビボでＨＢＶ及びＨＢＶ感染細胞を除去する活性を含む。本発明に係るヒト化抗体は、親マウス抗体の期待される特性の１つ以上を保持することができ、好ましくは、親マウス抗体の全ての上記の期待される特性を保持する。
本願出願において、本発明に係る親マウス抗体及びヒト化抗体は、例えば、それらのＣＤＲ及びＦＲのいくつかのアミノ酸残基が置換（例えば、保存的置換）に供されるように、さらに操作される。そのような置換は、例えば、（１）タンパク質分解に対する抗体の感受性を低下させる；（２）酸化に対する抗体の感受性を低下させる；（３）抗体の抗原結合親和性を変化させる（例えば増強する）；（４）抗体のＨＢＶ中和活性を変化させる（例えば増強する）；（５）抗対のＨＢＶ除去活性を変化させる（例えば増強させる）；（６）抗体の免疫原性を低下させる抗体のヒト化度をさらに増強する；又は（７）抗体の他の生物学的特徴又は機能的特性を変化させることができるが；依然として、抗体の期待される特性を保持する。そのような置換は、ＣＤＲ及び／又はＦＲに存在することができ、単一のアミノ酸置換又は複数のアミノ酸置換であることができる。
本明細書中で使用される場合、用語「ヒト化度」は、ヒト化抗体の非ヒトアミノ酸残基の数を示す指標である。ヒト化抗体のヒト化度は、例えば、以下の式で計算されることができる：ヒト化度＝（ＦＲ中のアミノ酸の数−ＦＲ中の非ヒトアミノ酸の数）／ＦＲ中のアミノ酸の数×１００％。
本明細書中で使用される場合、用語「中和抗体」は、標的ウイルスの病原性（例えば細胞を感染させる能力）を有意に低下させるか、又は完全に阻害することができる抗体又はその抗原結合フラグメントを指す。一般的には、中和抗体は、標的ウイルスを認識して結合することができ、標的ウイルスが対象において細胞に侵入／感染するのを防ぐ。本発明に係る抗体は、中和抗体である。
しかしながら、本願出願において、抗体のウイルス中和能力は、抗体のウイルス除去能力に直接的に同等でないことを理解するべきである。本明細書中で使用される場合、「中和ウイルス」は、標的ウイルスの病原性は、標的ウイルスを対象の細胞に侵入／感染させることから阻害することによって、中和される（すなわち、標的ウイルスの病原性を有意に低下させるか、又は完全に阻害する）ことを意味する。本明細書中で使用される場合、「ウイルスを除去する」は、標的ウイルス（細胞に感染していてもしていなくても）は、生物から排除され、したがって、ウイルスによって感染前の状態になることを意味する（例えば、ウイルスの血清学的試験結果は、負になる）。したがって、一般的には、中和抗体は、必ずしもウイルス除去能力を有するとは限らない。しかしながら、本願出願において、発明者は、本発明に係る抗体は、ＨＢＶを中和するだけではなく、ウイルスを除去し（すなわち、インビボでＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇを除去することができ、インビボでＨＢＶ及びＨＢＶ感染細胞を除去することができる）、したがって重要な臨床的価値を有することを驚くべきことに発見した。
本明細書中で使用される場合、用語「単離された」は、人工的手段による自然状態から得られる状況を指す。特定の「単離された」物質又は成分が自然に存在する場合、その自然環境が変化するか、又は物質が自然環境から単離されるか、又はその両方のため、可能である。例えば、特定の非単離ポリヌクレオチド又はポリペプチドは、特定の動物の体に自然に存在し、自然状態などから単離された高い純度を有する同じポリヌクレオチド又はポリペプチドは、単離されたポリヌクレオチド又はポリペプチドと呼ばれる。用語「単離された」は、混合された人工又は合成物質も、単離された物質の活性に影響を与えない他の不純な物質も除外しない。
本明細書中で使用される場合、用語「ベクター」は、その中に挿入されたポリヌクレオチドを有することができる核酸賦形剤を指す。ベクターが、その中に挿入されたポリヌクレオチドによってコードされるタンパク質の発現を可能にし、ベクターは、発現ベクターと呼ばれる。ベクターは、形質転換、形質導入、又は宿主細胞へのトランスフェクションによって、宿主細胞において発現される遺伝物質の要素を運ぶことができている。ベクターは当業者によって周知であり、プラスミド、ファージ、コスミド、酵母人工染色体（ＹＡＣ）、細菌人工染色体（ＢＡＣ）又はＰ１−由来人工染色体などの人工染色体；λファージ又はＭ１３ファージ及び動物ウイルスなどのファージを含むが、これらに限定されない。ベクターとして使用されることができる動物ウイルスは、レトロウイルス（レンチウイルスを含む）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス（単純ヘルペスウイルスなど）、ボックスウイルス、バキュロウイルス、パピローマウイルス（例えばＳＶ４０）を含むが、これらに限定されない。ベクターは、プロモーター配列、転写開始配列、エンハンサー配列、選択エレメント及びレポーター遺伝子を含むが、これらに限定されない発現を制御するための複数のエレメントを含み得る。また、ベクターは、複製の複製起点を含み得る。
本明細書中で使用される場合、用語「宿主細胞」は、Ｅ. ｃｏｌｉ（大腸菌）又は Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ（枯草菌）などの原核細胞及び酵母細胞又はアスペルギルスなどの真菌細胞、Ｓ２ショウジョウバエ細胞又はＳｆ９などの昆虫細胞、又は線維芽細胞、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＮＳＯ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＢＨＫ細胞、ＨＥＫ２９３細胞又はヒト細胞などの動物細胞を含むが、これらに限定されない、ベクターを導入することができる細胞を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「同一性」は、２つのポリペプチドの間又は２つの核酸の間の適合度を指す。比較のための２つの配列が、特定の部分に塩基又はアミノ酸の同じモノマーサブユニットを有する場合（例えば、２つのＤＮＡ分子のそれぞれが、特定の部分のアデノシンを有するか、又は２つのポリペプチドのそれぞれが、特定の部分でリシンを有する）、２つの分子は、その部分で同一である。２つの配列間の同一性パーセントは、比較のための部分の総数×１００に対して２つの配列によって共有される同一のサイトの数の関数である。例えば、２つの配列の１０の部分のうちの６つが一致する場合、これらの２つの配列は、６０％の同一性を有する。例えば、ＤＮＡ配列：ＣＴＧＡＣＴ及びＣＡＧＧＴＴは、５０％の同一性を共有する（６つの部分のうち３つが一致する）。一般的には、２つの配列の比較は、同一性を最大にするように行われる。そのようなアラインメントは、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎらの方法（Ｊ. Ｍｏｌ. Ｂｉｏｌ. ４８：４４３−４５３, １９７０年）に基づくＡｌｉｇｎプログラム（ＤＮＡｓｔａｒ, Ｉｎｃ）などのコンピュータプログラムを用いて行うことができる。２つのアミノ酸配列の間の同一性パーセントは、ＰＡＭ１２０重量残基表、１２のギャップ長ペナルティ及び４のギャップペナルティを使用する、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれているＥ. Ｍｅｙｅｒｓ及びＷ. Ｍｉｌｌｅｒのアルゴリズム（Ｃｏｍｐｕｔ. Ａｐｐｌ. Ｂｉｏｓｃｉ., ４：１１−１７ (１９８８年)）を使用して決定されることもできる。また、２つのアミノ酸配列の間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ ６２マトリックス又はＰＡＭ２５０マトリックス、及び１６、１４、１２、１０、８、６、又は４のギャップ重量及び１、２、３、４、５、又は６の長さ重量のいずれかを使用する、ＧＣＧソフトウェアパッケージのＧＡＰプログラム（ｈｔｔｐ：//ｗｗｗ.ｇｃｇ.ｃｏｍで利用可能）に組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈのアルゴリズム (Ｊ. Ｍｏｌ. Ｂｉｏｌ. ４８：４４４−４５３ (１９７０年))によって、決定されることができる。
本明細書中で使用される場合、用語「保存的置換」及び「保存的アミノ酸置換」は、アミノ酸配列を含むタンパク質／ポリペプチドの期待される特性に不都合な影響を与えないか、又は変化させないアミノ酸置換を指す。例えば、保存的置換は、部位特異的突然変異誘発及びＰＣＲ媒介突然変異誘発などの当該分野で公知の標準的技術によって導入され得る。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が、類似の側鎖を有する別のアミノ酸残基、例えば、対応するアミノ酸残基に対して物理的又は機能的に類似の残基（例えば、類似のサイズ、形状、電荷、共有結合又は水素結合を形成する能力を含む化学的特性等）で置換される置換を含む。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野で定義されている。これらのファミリーは、塩基側鎖を有するアミノ酸（例えば、リシン、アルギニン及びヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸及びグルタミン酸）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β−分枝側鎖を有するアミノ酸（スレオニン、バリン、イソロイシンなど）及び芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を含む。したがって、対応するアミノ酸残基は、好ましくは、同じ側鎖ファミリー由来の別のアミノ酸残基で置換される。アミノ酸保存的置換を同定するための方法は、当該技術分野で週知である（例えば、参照により本明細書中に組み込まれている、Ｂｒｕｍｍｅｌｌら, Ｂｉｏｃｈｅｍ. ３２： １１８０−１１８７ (１９９３年)； Ｋｏｂａｙａｓｈｉら, Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ. １２(１０)：８７９−８８４ (１９９９年);及びＢｕｒｋｓら, Ｐｒｏｃ. Ｎａｔｌ Ａｃａｄ. Ｓｅｔ ＵＳＡ ９４： ４１２−４１７ (１９９７年)を参照されたい）。
本明細書中に含まれる２０個の従来のアミノ酸は、常法に従って発現される。例えば、参照により本明細書中に組み込まれるＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ−Ａ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ (第２版, Ｅ. Ｓ. Ｇｏｌｕｂ及びＤ. Ｒ. Ｇｒｅｎ, Ｅｄｓ., Ｓｉｎａｕｅｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ, Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ, Ｍａｓｓ. (１９９１年))を参照されたい。本発明において、用語「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、同じ意味を有し、互換的に使用されることができる。さらに、本発明において、アミノ酸は、一般的には、１文字コード及び３文字コードとして表される。例えば、アラニンは、Ａ又はＡｌａとして表され得る。また、本明細書中で使用される場合、用語「モノクロナール抗体」及び「ｍＡｂ」は、同じ意味を有し、互換的に使用することができ；用語「ポリクロナール抗体」及び「ｐＡｂ」は、同じ意味を有し、互換的に使用することができる。
本明細書中で使用される場合、用語「薬学的に許容可能な担体及び／又は添加剤」は、当該技術分野で周知である、対象及び活性薬剤と薬理学的及び／又は生理学的に適合する担体及び／又は添加剤を指し（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ. Ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｇｅｎｎａｒｏ ＡＲ, 第１９版 Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ： Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ, １９９５年）、ｐＨ調整剤、界面活性剤、アジュバント、イオン強度増強剤、希釈剤、浸透圧調節剤、吸収遅延剤、及び防腐剤を含むが、これらに限定されない。例えば、ｐＨ調節剤は、リン酸緩衝液を含むが、これに限定されない。表面活性剤は、カチオン性、アニオン性又は非イオン性界面活性剤、例えばＴｗｅｅｎ−８０を含むが、これらに限定されない。イオン強度増強剤は、塩化ナトリウムを含むが、これに限定されない。防腐剤は、パラベン、クロロブタノール、フェノール、及びソルビン酸などの様々な抗菌剤及び抗真菌剤を含むが、これらに限定されない。浸透圧調節剤は、糖、ＮａＣｌ及びその類似体を含むが、これらに限定されない。吸収遅延剤は、モノステアレート及びゼラチンを含むが、これらに限定されない。
本明細書中で使用される場合、用語「アジュバント」は、抗原と一緒に抗原に送達されるか、又は生体に予め送達される場合、抗原に対する免疫応答を増強するか、又は生体における免疫応答のタイプを変化させることができる、非特異的免疫賦活剤を指す。アルミニウムアジュバント（例えば、水酸化アルミニウム）、フロイントアジュバント（例えば、フロイント完全アジュバント及びフロイント不完全アジュバント）、コリネバクテリアパルブムパルブム、リポ多糖、サイトカインなどを含むが、これらに限定されない。フロイントアジュバントは、現在、動物実験で最も一般的に使用されているアジュバントである。水酸化アルミニウムアジュバントは、臨床試験においてより一般的に使用される。
本明細書中で使用される場合、用語「予防／予防する」は、対象において、疾患、傷害又は症状（例えばＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患）の発生を抑制又は遅延させるために実施される方法を指す。本明細書中で使用される場合、用語「治療／治療する」は、有益な又は望ましい臨床結果を得るために実施される方法を指す。本発明の目的のために、有益な又は望ましい臨床結果は、症状の緩和、疾患の範囲の狭小化、疾患の状態の安定化（すなわち悪化させない）、疾患の進行を遅延又は遅らせること、及び症状（部分的又は完全に）症状を緩和し、検出可能又は検出不可能にすることを含むが、それらに限定されない。また、「治療」はまた、予想される生存期間（治療が受け入れない場合）と比較して、延長された生存期間を指す。本願出願において、本発明に係る抗体は、ＨＢＶを中和する能力を有し、したがって、ＨＢＶによる感染から影響を受けない対象又はその細胞を予防／保護するために使用されることができる。また、本発明に係る抗体は、ＨＢＶを除去する能力（すなわちインビボで、ＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇ、インビボでＨＢＶ及びＨＢＶによって感染した細胞を除去する能力）を有し、したがって、感染した対象においてＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患を治療するために使用されることができる。
本明細書中で使用される場合、用語「対象」は、哺乳類、例えば、ヒトなどの霊長類の哺乳動物を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「有効量」は、期待される効果を達成するか、又は少なくとも部分的に達成するのに十分な量を指す。例えば、疾患（例えばＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患）を予防するのに有効な量は、疾患（例えばＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患）の発生を予防、抑制、又は遅延するために有効な量を指す。疾患を治療するのに有効な量は、疾患を有する患者における疾患及びその合併症を治癒又は少なくとも部分的に遮断するために有効な量を指す。そのような有効量の決定は、当業者の能力の範囲内である。例えば、治療的使用に有効な量は、治療される疾患の重症度、患者における免疫系の一般的状態、年齢、体重及び性別などの患者の一般的状態、薬物の投与手段、同時に使用される追加の治療法などに依存する。
本発明に係る抗体
本願出願において、本発明者は、良好な特性を有するマウス抗体（その重鎖及び軽鎖可変領域は、それぞれ配列番号１及び２に記載される）を最初に開発した：マウス抗体は、ＨＢｓＡｇを特異的に認識／結合することができるだけではなく、ＨＢＶ病原性を中和し、対象のＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させ、インビボでＨＢＶ及びＨＢＶ感染細胞を効率的に除去する。したがって、マウス抗体は、ＨＢＶ感染及びＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）の予防及び治療において潜在力を有する。
これに基づいて、発明者は、マウス抗体を深く研究し、操作するための多くの創作的作業をさらに行い、マウス抗体のヒト化抗体を開発した：本発明に係るヒト化抗体は、非常に高いヒト化度（９７％までのヒト化度）を有することができるだけではなく、マウス抗体及びヒト−マウスキメラ抗体（マウス抗体のものと完全に一致する重鎖及び軽鎖可変領域）として、実質的に同じ（又はより良好な）期待される特性（ＨＢｓＡｇ結合活性、ＨＢＶ中和活性、インビボでＨＢＶ ＤＮＡ及びＨＢｓＡｇの除去の活性、インビボでＨＢＶ及びＨＢＶ感染細胞の除去の能力等を含むがこれらに限定されない）を有する。
したがって、本発明に係る抗体（特にヒト化抗体）は、その親マウス抗体の機能及び特性を保持するので非常に好ましく、したがって、ＨＢＶ感染及びＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防及び治療する潜在力を有し；さらに、非常に高いヒト化度（９７％までのヒト化度）を有し、したがって、免疫原性応答を上昇させることなく、ヒト対象に安全に投与することができる。本発明に係る抗体（特にヒト化抗体）は、重要な臨床的価値を有する。
したがって、１つの側面において、本発明は、以下を含むＨＢｓＡｇに特異的に結合することができる、抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する：
（ａ）以下からなる群から選択される重鎖可変領域（ＶＨ）の１個以上（例えば１、２又は３個）の相補性決定領域（ＣＤＲ）：
（ｉ）以下の配列：配列番号３、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２又は３個の置換、欠失又は付加）によって配列番号３と異なる配列からなるＶＨ ＣＤＲ１；
（ｉｉ）以下の配列：配列番号４、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２、３、４、５又は６個の置換、欠失又は付加）によって配列番号４と異なる配列からなるＶＨ ＣＤＲ２、及び
（ｉｉｉ）以下の配列：配列番号５、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、又は２個の置換、欠失又は付加）によって配列番号５と異なる配列からなるＶＨ ＣＤＲ３；及び／又は
（ｂ）以下からなる群から選択される軽鎖可変領域（ＶＬ）の１個以上（例えば１、２、又は３個）のＣＤＲ：
（ｉｖ）以下の配列：配列番号６、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２又は３個の置換、欠失又は付加）によって配列番号６と異なる配列からなるＶＬ ＣＤＲ１、
（ｖ）以下の配列：配列番号７、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２、３又は４個の置換、欠失又は付加）によって配列番号７と異なる配列からなるＶＬ ＣＤＲ２、及び
（ｖｉ）以下の配列：配列番号８、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２、３又は４個の置換、欠失又は付加）によって配列番号８と異なる配列からなるＶＬ ＣＤＲ３。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記のようなＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記のようなＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記のようなＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＶＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ１は、配列番号３であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２又は３個の置換）によって配列番号３と異なり：
（０１）Ｈ３１のＲ、Ｙ、Ｈ、又はＮ；
（０２）Ｈ３２のＹ、Ｆ、Ｗ、又はＤ；
（０３）Ｈ３４のＮ、又はＬ；
（０４）Ｈ３５のＹ、Ｈ、又はＰ；及び
（０５）Ｈ３５ＡのＩ、Ｓ、Ｐ、Ｇ、又はＨ
ここで、（０１）〜（０５）に記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ１は、配列番号３であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１又は２個の置換）によって配列番号３と異なり：
（０１）Ｈ３１のＲ、Ｙ、Ｈ、又はＮ（好ましくは、Ｒ又はＹ）；及び
（０２）Ｈ３２のＹ、Ｆ、Ｗ、又はＤ（好ましくは、Ｗ又はＤ）；
ここで、（０１）〜（０２）に記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ１は、配列番号３であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１又は２個の置換）によって配列番号３と異なり：
（０１）Ｈ３１のＲ又はＹ；及び
（０２）Ｈ３２のＷ；
ここで、（０１）〜（０２）に記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメンのＶＨ ＣＤＲ１は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）；
ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）；
ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）；
ＮＧＹＨＷＮ（配列番号１２３）；
ＲＤＹＨＷＮ（配列番号１２５）；
ＲＷＹＨＷＮ（配列番号１２６）；
ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４）；
ＮＦＹＨＷＮ（配列番号１２７）；及び
ＲＹＹＨＷＮ（配列番号１２８）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ１の配列は、以下からなる群から選択される：
ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）；
ＲＷＹＨＷＮ（配列番号１２６）；
ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）；
ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４）；
ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）；
ＮＧＹＨＷＮ（配列番号１２３）；及び
ＲＤＹＨＷＮ（配列番号１２５）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ１の配列は、以下からなる群から選択される：
ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）；
ＲＷＹＨＷＮ（配列番号１２６）；
ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２５）；及び
ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗体結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ２は、配列番号４、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３、４、５又は６個の置換）によって配列番号４と異なり：
（０６）Ｈ５０のＲ、Ｇ，Ｌ、Ｆ、Ｓ、又はＶ；
（０７）Ｈ５１のＶ、Ｍ、Ｌ、Ｔ，Ｆ、又はＣ；
（０８）Ｈ５２のＤ、Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｆ、又はＰ；
（０９）Ｈ５３のＰ、Ｎ、Ｓ、Ｅ、Ｌ、Ｆ、Ｋ、又はＩ；
（１０）Ｈ５４のＶ、Ｔ、Ｎ、Ｌ、Ａ、Ｓ、Ｉ、又はＦ；
（１１）Ｈ５５のＩ、Ｈ、Ｓ、Ｆ、Ｃ、Ｅ、Ｌ、又はＶ；
（１２）Ｈ５６のＮ、Ａ、Ｍ、Ｌ、Ｑ、Ｇ、Ｆ、Ｔ、Ｐ、Ｖ、又はＲ；
（１３）Ｈ５７の任意の天然に存在するアミノ酸；
（１４）Ｈ５８のＳ、Ｔ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｖ、Ｇ、Ｅ、Ｌ、Ｑ、又はＲ；
（１５）Ｈ６１のＳ、Ａ、Ｌ、又はＤ；
（１６）Ｈ６２のＧ、Ｅ、又はＲ；
（１７）Ｈ６３のＨ、又はＦ；
（１８）Ｈ６４のＬ、Ａ、Ｉ、Ｔ、Ｇ、Ｋ、又はＶ；及び
（１９）Ｈ６５のＧ、Ｒ、Ｓ、Ｗ、Ｈ、Ｄ、Ａ、又はＹ；
ここで、（０６）〜（１９）の記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又は抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ２は、配列番号４であるか、又は以下の群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３、４、５、又は６個の置換）によって配列番号４と異なり：
（０８）Ｈ５２のＡ、又はＧ；
（０９）Ｈ５４のＮ；
（１２）Ｈ５６のＮ、Ａ、Ｔ、又はＶ；
（１４）Ｈ５７のＶ、Ｉ、Ｓ、Ｎ、Ｑ、又はＲ；
（１８）Ｈ６４のＫ；及び
（１９）Ｈ６５のＧ、又はＳ；
ここで、上記のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ２は、配列番号４であるか、又は以下の群から選択される１個以上の置換（例えば、１、２又は３個の置換）によって配列番号４と異なり：
（１２）Ｈ５６のＴ；
（１３）Ｈ５７のＶ、Ｉ、又はＮ（好ましくはＶ又はＮ）；及び
（１４）Ｈ５８のＬ；
ここで、上記のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ２は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＹＩＳＹＤＧＳＤＨＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号４）；
ＹＩＳＹＤＧＳＶＦＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４３）；
ＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４４）；
ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）；
ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）；
ＹＩＳＹＤＧＮＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４７）；
ＹＩＳＹＤＧＴＳＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４８）；
ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４９）；
ＹＩＳＹＤＧＮＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５０）；
ＹＩＳＹＤＧＴＮＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５１）；
ＹＩＳＹＤＧＳＮＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５２）；
ＹＩＳＹＤＧＴＶＨＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５３）；
ＹＩＳＹＤＧＴＩＲＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５４）；
ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５５）；
ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＧ（配列番号１５６）；
ＹＩＡＹＤＧＶＱＳＹＮＰＳＬＫＧ（配列番号１５７）；
ＹＩＧＹＤＧＡＶＱＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５８）；
ＹＩＳＹＮＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５９）；
ＹＩＳＹＤＧＳＲＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１６０）；及び
ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＦＮＰＳＬＫＳ（配列番号２８５）；。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ２の配列は、以下からなる群から選択される：
ＹＩＳＹＤＧＳＤＨＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号４）；
ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）；
ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）；
ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４９）；
ＹＩＳＹＤＧＴＮＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５１）；及び
ＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４４）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ２の配列は、以下からなる群から選択される：
ＹＩＳＹＤＧＳＤＨＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号４）；
ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）；
ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４９）；及び
ＹＩＳＹＤＧＴＮＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５１）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ３は、配列番号５、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１又は２個の置換）によって配列番号５と異なり：
（２０）Ｈ１０１のＮ；及び
（２１）Ｈ１０２のＹ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｌ、又はＩ；
ここで、（２０）〜（２１）に記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＣＤＲ３は、配列番号５あるか、又はＨ１０２でＹ又はＴ（好ましくは、Ｙ）によって配列番号５と異なる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＧＦＤＨ（配列番号５）；
ＧＦＤＹ（配列番号１８１）；及び
ＧＦＤＴ（配列番号１８２）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ１は、配列番号６であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２又は３個の置換）によって配列番号６と異なり：
（２２）Ｌ２４のＨ、Ｌ、Ｗ、Ｓ、Ｔ、又はＣ；
（２３）Ｌ２５のＬ、Ｖ、Ｐ、又はＮ；
（２４）Ｌ２６のＧ、Ｅ、Ｖ、Ｙ、Ａ、Ｎ、又はＤ；
（２５）Ｌ２７のＴ、Ｒ、Ｈ、Ｍ、Ｙ、Ｖ、又はＡ；
（２６）Ｌ２７ＡのＱ、又はＦ；
（２７）Ｌ２７ＣのＥ、Ｆ、Ｎ、Ｗ、Ｇ、又はＬ；
（２８）Ｌ２７ＤのＬ、Ｖ、Ｇ、Ｗ、Ｙ、Ｓ、Ｆ、又はＮ；
（２９）Ｌ２７ＥのＰ、Ｒ、Ｖ、Ｔ、又はＭ；
（３０）Ｌ２８のＦ、Ｗ、Ｇ、Ｄ、Ａ、Ｅ，Ｒ、Ｌ、Ｓ、Ｖ、又はＫ；
（３１）Ｌ２９のＦ、Ｉ、Ｙ、Ｄ、Ｖ、又はＬ；
（３２）Ｌ３０のＥ、Ｓ、Ｃ、Ｆ、Ｒ、Ａ、Ｑ、Ｌ、Ｐ、Ｎ、Ｍ、又はＴ
（３３）Ｌ３１のＩ、Ｖ、Ｑ、Ｆ、Ｍ、Ａ，Ｃ、Ｒ、Ｓ、又はＬ；
（３４）Ｌ３２のＷ、Ｆ、Ｇ、又はＬ；
（３５）Ｌ３３のＲ、Ｖ、Ｆ、Ｓ、Ｍ、Ａ。Ｐ、又はＹ；及び
（３６）Ｌ３４のＦ、Ｎ、Ｒ、Ｑ、又はＧ；
ここで、（２２）〜（３６）に記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号６であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１又は２個の置換）によって配列番号６と異なり：
（２９）Ｌ２７ＥのＰ、Ｒ、又はＴ；及び
（３２）Ｌ３０のＳ、Ｒ、Ａ、Ｐ、Ｎ、又はＴ；
ここで、上記のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ１は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）;
ＲＳＮＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号２３２）;
ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＰＴＹＬＨ（配列番号２３４）;
ＲＳＳＱＳＬＶＨＴＹＧＮＴＹＬＨ（配列番号２３５）;
ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＳＴＹＬＨ（配列番号２３６）;
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＹＧＴＴＹＬＨ（配列番号２３７）;
ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＡＴＹＬＨ（配列番号２３８）;
ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＲＴＹＬＨ（配列番号２３９）;
ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＦＧＰＴＹＬＨ（配列番号３１８）;
ＲＳＳＱＳＬＡＨＰＹＧＳＴＹＬＨ（配列番号３１９）;及び
ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＳＴＹＦＨ（配列番号３２０）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ１の配列は、配列番号６である。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ２は、配列番号７であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３又は４個の置換）によって配列番号７と異なり：
(３７)Ｌ５０のＮ、Ｒ、Ｆ、Ｓ、Ｔ又はＬ；
(３８)Ｌ５１のＣ、Ａ、Ｎ、Ｄ、Ｓ、又はＬ；
(３９)Ｌ５２のＬ、Ｖ、Ｍ、Ｗ、Ａ、又はＦ；
(４０)Ｌ５３のＣ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｐ、Ｑ、又はＳ；
(４１)Ｌ５４のＩ、Ｆ、Ｎ、Ｍ、又はＬ；
(４２)Ｌ５５のＲ、Ｎ、又はＣ；及び
(４３)Ｌ５６のＬ、Ｆ、Ｗ、Ｔ、Ｋ、Ｒ、又はＱ；
ここで、（３７）〜（４３）に記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ２は、配列番号７であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３又は４個の置換）によって配列番号７と異なり：
(３７)Ｌ５０のＲ；
(３８)Ｌ５１のＡ又はＳ；
(４０)Ｌ５３のＨ、Ｋ、又はＱ；及び
(４２)Ｌ５５のＮ；
ここで、上記のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ２は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）;
ＫＶＳＫＲＮＳ（配列番号２４１）；
ＫＡＳＱＲＮＳ（配列番号２４２）；及び
ＲＳＳＨＲＮＳ（配列番号２４３）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ２の配列は、配列番号７である。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ３は、配列番号８であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３又は４個の置換）によって配列番号８と異なり：
(４４)Ｌ８９のＬ、Ｇ、Ｎ、Ｔ、又はＶ；
(４５)Ｌ９０のＨ、又はＳ；
(４６)Ｌ９２のＡ、Ｓ、又はＰ；
(４７)Ｌ９３のＡ、Ｓ、Ｋ、Ｒ、Ｌ、Ｔ、Ｙ、Ｆ、Ｗ、Ｎ、Ｍ、Ｖ、Ｉ、又はＥ；
(４８)Ｌ９４のＴ、Ｎ、Ｄ、Ｋ、Ｆ、Ｙ、Ｐ、Ｈ、Ｌ、Ｒ、Ｓ、Ａ、又はＧ;
(４９)Ｌ９５のＡ、Ｉ、Ｓ、Ｃ、又はＶ；
(５０)Ｌ９６のＮ、Ａ、Ｖ、Ｒ、Ｔ、又はＨ；及び
(５１)Ｌ９７のＳ；
ここで、（４１）〜（５１）に記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくついかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ３は、配列番号８であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３又は４個の置換）によって配列番号８と異なり：
（４４）Ｌ８９のＧ；
（４６）Ｌ９２のＡ、又はＳ；
（４７）Ｌ９３のＫ、Ｒ、Ｙ、Ｍ、又はＩ；及び
（４８）Ｌ９４のＴ、Ｐ、Ｌ、又はＡ
ここで、上記のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
好ましくは、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ３は、配列番号８であるか、又はＬ９４で配列番号８と異なる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ３は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）；
ＳＱＮＴＨＬＰＹＴ（配列番号２４５）；
ＧＱＮＡＫＴＰＹＴ（配列番号２４６）；
ＧＱＮＡＲＶＰＹＴ（配列番号２４７）；
ＳＱＮＳＹＶＰＹＴ（配列番号２４８）；
ＳＱＮＴＩＰＰＹＴ（配列番号２４９）；
ＧＱＮＳＭＡＰＹＴ（配列番号２５０）；及び
ＧＱＮＡＨＬＰＹＴ（配列番号２５１）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＣＤＲ３の配列は、以下からなる群から選択される：
ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）;及び
ＳＱＮＴＨＬＰＹＴ（配列番号２４５）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下（１）〜（１６）のいずれか１つから選択されるＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３の組み合わせを含むＶＬを含む：
Figure 0006949012
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下を含むＶＬを含む：
（ａ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１；ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２；及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３；
（ｂ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１；ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２；及び、ＳＱＮＴＨＬＰＹＴ（配列番号２４５）に記載のＶＬ ＣＤＲ３；
（ｃ）ＲＳＮＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号２３２）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｄ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１; ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＧＱＮＡＫＴＰＹＴ（配列番号２４６）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｅ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＧＱＮＡＲＶＰＹＴ（配列番号２４７）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｆ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＳＹＶＰＹＴ（配列番号２４８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｇ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＩＰＰＹＴ（配列番号２４９）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｈ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＧＱＮＳＭＡＰＹＴ（配列番号２５０）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｉ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＰＴＹＬＨ（配列番号２３４）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＫＲＮＳ（配列番号２４１）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｊ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＰＴＹＬＨ（配列番号２３４）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｋ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＴＹＧＮＴＹＬＨ（配列番号２３５）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｌ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＳＴＹＬＨ（配列番号２３６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｍ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＹＧＴＴＹＬＨ（配列番号２３７）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｎ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＡＴＹＬＨ（配列番号２３８）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＡＳＱＲＮＳ（配列番号２４２）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;
（ｏ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＰＴＹＬＨ（配列番号２３４）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＧＱＮＡＨＬＰＹＴ（配列番号２５１）に記載のＶＬ ＣＤＲ３;又は
（ｐ）ＲＳＳＱＳＬＶＨＰＹＧＲＴＹＬＨ（配列番号２３９）に記載のＶＬ ＣＤＲ１;ＲＳＳＨＲＮＳ（配列番号２４３）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬは、ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＹＧＤＴＹＬＨ（配列番号６）に記載のＶＬ ＣＤＲ１；ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）に記載のＶＬ ＣＤＲ２;及び、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）又はＳＱＮＴＨＬＰＹＴ（配列番号２４５）に記載のＶＬ ＣＤＲ３（好ましくは、ＳＱＮＴＨＶＰＹＴ（配列番号８）に記載のＶＬ ＣＤＲ３）を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下の（１）〜（４８）のいずれか１つから選択されるＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２及びＶＨ ＣＤＲ３の組み合わせを含むＶＨを含む：
Figure 0006949012
Figure 0006949012
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは以下を含むＶＨを含む：
（ａ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＤＨＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３；
（ｂ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１; ＹＩＳＹＤＧＳＶＦＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４３）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｃ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｄ）ＮＧＹＨＷＮ（配列番号１２３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｅ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ （配列番号１４４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｆ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｇ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｈ）ＲＤＹＨＷＮ（配列番号１２５）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｉ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＮＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４７）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｊ）ＲＷＹＨＷＮ（配列番号１２６）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｋ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｌ）ＲＤＹＨＷＮ（配列番号１２５）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｍ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｎ）ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４） に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２；及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｏ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＳＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４８）に記載のＶＨ ＣＤＲ２; 及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｐ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１; ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｑ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１；ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１)に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｒ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｓ）ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＴ（配列番号１８２）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｔ）ＮＦＹＨＷＮ（配列番号１２７）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４９）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｕ）ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｖ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｗ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｘ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｙ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ｚ）ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４)に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４９）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａａ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１; ＹＩＳＹＤＧＮＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５０）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｂ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＮＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５１）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｃ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＮＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５２）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｄ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＮＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５１）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｅ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｆ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｇ）ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＶＨＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５３）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３；
（ａｈ）ＮＦＹＨＷＮ（配列番号１２７）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＮＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４７）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｉ）ＲＹＹＨＷＮ（配列番号１２８）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＩＲＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｊ）ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４）に記載のＶＨ ＣＤＲ１；ＹＩＳＹＤＧＴＶＨＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５３）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｋ）ＲＤＹＨＷＮ（配列番号１２５）に記載のＶＨ ＣＤＲ１；ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３；
（ａｌ）ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｍ）ＲＷＹＨＷＮ（配列番号１２６）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及びＧＦＤＹ（配列番号１８１）に記載のＶＨ ＣＤＲ３；
（ａｎ）ＹＧＹＨＷＮ（配列番号１２４）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＧ（配列番号１５６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｏ）ＮＧＹＨＷＮ（配列番号１２３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＡＹＤＧＶＱＳＹＮＰＳＬＫＧ（配列番号１５７）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｐ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｑ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｒ）ＮＧＹＨＷＮ（配列番号１２３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３；
（ａｓ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＧＹＤＧＡＶＱＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５８）に記載のＶＨ ＣＤＲ２; 及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｔ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＮＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５９）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;
（ａｕ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１;ＹＩＳＹＤＧＳＲＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１６０）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３;又は
（ａｖ）ＮＧＹＨＷＮ（配列番号１２３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１；ＹＩＳＹＮＧＳＶＬＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号１５９）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;及び、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載のＶＨ ＣＤＲ３。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨは、ＧＦＤＨ（配列番号５）に記載されるＶＨ ＣＤＲ３、及び以下から選択されるＶＨ ＣＤＲ１及びＶＨ ＣＤＲ２を含む：
（ａ）ＳＧＹＨＷＮ（配列番号３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１およＲ２;及びＹＩＳＹＤＧＳＤＨＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号4) に記載のＶＨ ＣＤＲ２；
（ｄ）ＮＧＹＨＷＮ（配列番号１２３）に記載のＶＨ ＣＤＲ１及びＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;
（ｅ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１及びＹＩＳＹＤＧＳＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４４）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;
（ｊ）ＲＷＹＨＷＮ（配列番号１２６）に記載のＶＨ ＣＤＲ１及びＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;
（ｋ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１及びＹＩＳＹＤＧＴＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４６）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;
（ｌ）ＲＤＹＨＷＮ（配列番号１２５）に記載のＶＨ ＣＤＲ１及びＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;
（ｍ）ＨＧＹＨＷＮ（配列番号１２２）に記載のＶＨ ＣＤＲ１及びＹＩＳＹＤＧＴＩＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４５）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;
（ｚ）ＹＧＹＨＷ（配列番号１２４）に記載のＶＨ ＣＤＲ１及びＹＩＳＹＤＧＳＶＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１４９）に記載のＶＨ ＣＤＲ２;又は
（ａｄ）ＲＧＹＨＷＮ（配列番号１２１）に記載のＶＨ ＣＤＲ１及びＹＩＳＹＤＧＴＮＬＹＮＰＳＬＥＮ（配列番号１５１）に記載のＶＨ ＣＤＲ２。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントに含まれるＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２及び／又はＶＨ ＣＤＲ３は、それぞれ配列番号１１〜９２及び２６３〜２７９のいずれか１つに含まれるＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２及びＶＨ ＣＤＲ３から選択される。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントに含まれるＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及び／又はＶＬ ＣＤＲ３は、配列番号１８６〜２１４及び２９８〜３０８のいずれか１つに含まれるＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３から選択される。
いくつかの好ましい態様において、ＶＨが配列番号１及びＶＬが配列番号２である抗体と比較して、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＶＨ ＣＤＲ１〜３及びＶＬ ＣＤＲ１〜３において１、２、３、４、５又は６個の置換のみを含む。いくつかの好ましい態様において、ＶＨが配列番号１及びＶＬが配列番号２である抗体と比較して、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＶＨ ＣＤＲ１〜３及びＶＬ ＣＤＲ１〜３において１つの置換のみを含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記で定義されるようなＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２及びＶＨ ＣＤＲ３を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記で定義されるようなＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記で定義されるようなＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＶＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下から選択される抗体の重鎖及び軽鎖可変領域からの６つのＣＤＲを含む：
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントがヒト化されている。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％又は少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％ののヒト化度を有する。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、２０個以下、１５個以下、１４個以下、１３個以下、１２個以下、１１個以下、１０個以下、９個以下、８個以下、７個以下、６個以下、５個以下、４個以下、３個以下、２個以下、又は１個以下のマウスのアミノ酸残基を含むか、又はマウスのアミノ酸残基を含まない。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＦＲは、２０個以下、１５個以下、１４個以下、１３個以下、１２個以下、１１個以下、１０個以下、９個以下、８個以下、７個以下、６個以下、５個以下、４個以下、３個以下、２個以下、又は１個以下のマウスのアミノ酸残基を含むか、又はマウスのアミノ酸残基を含まない。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下を含む：
（ａ）以下からなる群から選択される重鎖可変領域（ＶＨ）の１個以上（例えば１、２、３、又は４個）のフレームワーク領域（ＦＲ）：
（ｉ）次の配列：ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２、３、又は４個の置換、欠失又は付加）によって配列番号９３と異なる配列からなる、ＶＨ ＦＲ１；
（ｉｉ）次の配列：ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２又は３個の置換、欠失又は付加）によって配列番号１２９と異なる配列からなる、ＶＨ ＦＲ２；
（ｉｉｉ）次の配列：ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＳＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６１）、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個の置換、欠失又は付加）によって配列番号１６１と異なる配列からなる、ＶＨ ＦＲ３；及び
（ｉｖ）次の配列：ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、又は２個の置換、欠失又は付加）によって配列番号１８３と異なる配列からなる、ＶＨ ＦＲ４；及び／又は
（ｂ）以下からなる群から選択される軽鎖可変領域（ＶＬ）の１個以上（例えば１、２、３又は４個）のフレームワーク領域（ＦＲ）：
（ｖ）次の配列：ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１５）、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２又は３個の置換、欠失又は付加）によって配列番号２１５と異なる配列からなる、ＶＬ ＦＲ１；
（ｖｉ）次の配列：ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、又は２個の置換、欠失又は付加）によって配列番号２２１と異なる配列からなる、ＶＬ ＦＲ２；
（ｖｉｉ）次の配列：ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２３）、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、２又は３個の置換、欠失又は付加）によって配列番号２２３と異なる配列からなる、ＶＬ ＦＲ３；及び
（ｖｉｉｉ）次の配列：ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）、又は１個又は複数の置換、欠失又は付加（例えば１、又は２個の置換、欠失又は付加）によって配列番号２３０と異なる配列からなる、ＶＬ ＦＲ４。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記で定義されるようなＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＦＲ２、ＶＨ ＦＲ３及びＶＨ ＦＲ４を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記で定義されるようなＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＦＲ２、ＶＬ ＦＲ３及びＶＬ ＦＲ４を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記で定義されるようなＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＦＲ２、ＶＨ ＦＲ３、ＶＨ ＦＲ４、ＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＦＲ２、ＶＬ ＦＲ３及びＶＬ ＦＲ４を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号９３であであるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３又は４個の置換）によって配列番号９３と異なり：
（０１）Ｈ１のＱ、Ｈ、又はＤ；
（０２）Ｈ４のＱ；
（０３）Ｈ１１のＱ；
（０４）Ｈ１４のＡ；
（０５）Ｈ２３のＴ；
（０６）Ｈ２７のＴ、Ｎ、Ａ、Ｓ、又はＧ；
（０７）Ｈ２８のＰ；及び
（０８）Ｈ３０のＴ；
ここで、（０１）〜（０８）に記載のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ１は、配列番号９３であるか、以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３又は４個の置換）によって配列番号９３と異なり：
（０１）Ｈ１のＱ又はＤ；
（０４）Ｈ１４のＡ；
（０５）Ｈ２３のＴ；
（０６）Ｈ２７のＴ、Ｎ、Ａ、又はＳ；
（０７）Ｈ２８のＰ；及び
（０８）Ｈ３０のＴ；
ここで、上記のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられている。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ１は、配列番号９３であるか、以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３又は４個の置換）によって配列番号９３と異なり：
（０１）Ｈ１のＤ；
（０４）Ｈ１４のＡ；
（０５）Ｈ２３のＴ；
（０６）Ｈ２７のＮ又はＳ；
（０７）Ｈ２８のＰ；及び
（０８）Ｈ３０のＴ；
ここで、上記のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ１は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＴＳＩＴ（配列番号９５）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号９６）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＴ（配列番号９７）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号９８）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＳ（配列番号９９）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＧＳＩＴ（配列番号１００）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０１）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１０２）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１０３）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＳ（配列番号１０４）；
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０５）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＴＳＩＴ（配列番号１０６）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号１０７）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０８）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＴ（配列番号１０９）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号１１０）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１１１）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１１２）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＴＳＩＴ（配列番号１１３）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号１１４）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号１１５）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１７）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１６）；
ＱＶＱＱＱＥＳＧＰＧＱＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＳ（配列番号１１８）；及び
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１１９）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ１の配列は、以下からなる群から選択される：
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号９６）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号９８）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１０２）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１７）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０１）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＳ（配列番号１０４）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１０３）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＴＳＩＴ（配列番号１０６）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号１０７）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０８）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号１１０）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１１１）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号１１５）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１６）；及び
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＴ（配列番号：１０９）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ１の配列は、以下からなる群から選択される：
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号９６）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号９８）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１７）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０１）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＳ（配列番号１０４）；及び
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１６）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ２は、配列番号１２９であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２又は３個の置換）によって配列番号１２９と異なり：
（０９）Ｈ３７のＶ；
（１０）Ｈ３８のＱ；
（１１）Ｈ４０のＬ；
（１２）Ｈ４３のＫ；
（１３）Ｈ４４のＲ、Ｓ、Ｅ、又はＧ；
（１４）Ｈ４６のＶ；及び
（１５）Ｈ４８のＭ；
ここで、（０９）〜（１５）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ２は、配列番号１２９であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２又は３個の置換）によって配列番号１２９と異なり：
（１１）Ｈ４０のＬ；
（１２）Ｈ４３のＫ；
（１３）Ｈ４４のＲ又はＥ；
（１４）Ｈ４６のＶ；及び
（１５）Ｈ４８のＭ；
ここで、上記アミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ２は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）；
ＷＶＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３０）；
ＷＩＱＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３１）；
ＷＩＲＱＬＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３２）；
ＷＩＲＱＦＰＧＫＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３３）；
ＷＩＲＱＦＰＧＫＧＬＥＷＩＧ（配列番号１３４）；
ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＶＷＭＧ（配列番号１３５）；
ＷＩＲＱＦＰＧＫＳＬＥＷＩＧ（配列番号１３６）；
ＷＩＲＱＦＰＧＫＲＬＥＷＭＧ（配列番号１３７）；
ＷＩＲＱＦＰＧＮＥＬＥＷＩＧ（配列番号１３８）；
ＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＩＧ（配列番号１３９）；
ＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧ（配列番号１４０）；及び
ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＭＧ（配列番号１４１）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ３は、配列番号１６１であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個の置換）によって配列番号１６１と異なり：
（１６）Ｈ６７のＶ；
（１７）Ｈ６８のＳ；
（１８）Ｈ７０のＳ；
（１９）Ｈ７１のＶ；
（２０）Ｈ７３のＩ；
（２１）Ｈ７９のＦ；
（２２）Ｈ８１のＫ；
（２３）Ｈ８２ＡのＳ；
（２４）Ｈ８４のＴ；
（２５）Ｈ８５のＡ；
（２６）Ｈ８９のＶ又はＫ；及び
（２７）Ｈ９１のＦ；
ここで、（１６）〜（２７）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ３は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＳＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６１）；
ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）；
ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＲＹＹＣＡＳ（配列番号１６３）；
ＲＩＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６４）；
ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６５）；
ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡ（配列番号１６６）；
ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６７）；
ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＳ（配列番号１６８）；
ＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１６９）；
ＲＶＳＩＳＲＤＩＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＦＣＡＳ（配列番号１７０）；
ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１７１）；
ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＳ（配列番号１７２）；
ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１７３）；
ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１７４）；
ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１７５）；
ＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１７６）；
ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１７７）；
ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１７８）；及び
ＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１７９）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１８３であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１又は２個の置換）によって配列番号１８３と異なり：
（２８）Ｈ１０８のＬ又はＭ；及び
（２９）Ｈ１０９のＶ；
ここで、（２８）〜（２９）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ４は、配列番号１８３であるか、又はＨ１０８のＭによって配列番号１８３と異なる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ４は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）；
ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１８４）；及び
ＷＧＱＧＴＭＬＴＶＳＳ（配列番号１８５）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨ ＦＲ４の配列は、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）;及び ＷＧＱＧＴＭＬＴＶＳＳ（配列番号１８５）からなる群から選択される。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ１は、配列番号２１５であるか、又は以下からなる群から選択されれる１個以上の置換（例えば１、２、又は３個の置換）によって配列番号２１５と異なり：
（３０）Ｌ２のＩ；
（３１）Ｌ７のＴ；
（３２）Ｌ１４のＮ；
（３３）Ｌ１５のＰ；及び
（３４）Ｌ１８のＱ；
ここで、（３０）〜（３４）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ１は、配列番号２１５であるか、又は以下からなる群から選択されれる１個以上の置換（例えば１又は２個の置換）によって配列番号２１５と異なり：
（３０）Ｌ２のＩ；
（３１）Ｌ７のＴ；及び
（３２）Ｌ１４のＮ；
ここで、上記のアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ１は、配列番号２１５であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１又は２個の置換）によって配列番号２１５と異なり：
（３０）Ｌ２のＩ；及び
（３４）Ｌ１８のＱ；
ここで、上記アミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ１は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１５）；
ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１６）；
ＤＶＶＭＴＱＴＰＬＳＬＰＶＮＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１７）；
ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＱＡＳＩＳＣ（配列番号２１８）；
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＱＡＳＩＳＣ（配列番号２１９）；及び
ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＰＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２２０）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ２は、配列番号２２１であるか、又は次の置換：（３５）Ｌ４５のＱによって配列番号２２１と異なり、
ここで、（３５）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ２は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）；及び
ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ３は、配列番号２２３であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２又は３個の置換）によって配列番号２２３と異なり：
（３６）Ｌ７９のＤ；
（３７）Ｌ８０のＡ；
（３８）Ｌ８３のＬ；及び
（３９）Ｌ８７のＦ；
ここで、（３６）〜（３９）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ３は、配列番号２２３であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１、２又は３個の置換）によって配列番号２２３と異なり：
（３７）Ｌ８０のＡ；
（３８）Ｌ８３のＬ；及び
（３９）Ｌ８７のＦ；
ここで、（３７）〜（３９）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ３は、配列番号２２３であるか、又は以下からなる群から選択される１個以上の置換（例えば１又は２個の置換）によって配列番号２２３と異なり：
（３８）Ｌ８３のＬ；及び
（３９）Ｌ８７のＦ；
ここで、（３８）〜（３９）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ３は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２３）；
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ（配列番号２２４）；
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２５）；
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２６）；
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２７）；
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＤＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２８）；及び
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＦＣ（配列番号２２９）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ３の配列は、以下からなる群から選択される：
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２３）；
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ（配列番号２２４）；
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２７）；及び
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２６）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ３の配列は、以下からなる群から選択される：
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２３）；
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ（配列番号２２４）；及び
ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２７）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ４は、配列番号２３０であるか、又は次の置換：（４０）Ｌ１００のＱによって配列番号２３０と異なり、
ここで、（４０）に記載されるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔの番号付けシステムに従って番号が付けられる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ４は、以下からなる群から選択される配列を有する：
ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）；及び
ＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３１）。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬ ＦＲ４の配列は、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）である。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下の（１）〜（１４）のいずれか１つから選択される、ＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＦＲ２、ＶＬ ＦＲ３及びＶＬ ＦＲ４の組み合わせを含むＶＬを含む：
Figure 0006949012
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下を含むＶＬを含む：
（ａ)ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１５）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＹＣ(配列番号２２３)に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
(ｂ)ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１５）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ（配列番号２２４）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４;
（ｃ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１６）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２３）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
（ｄ）ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１５）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ（配列番号２２４）に記載されたＶＬ ＦＲ３;及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
（ｅ）ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１５）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２５）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ （配列番号２３１）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
（ｆ）ＤＶＶＭＴＱＴＰＬＳＬＰＶＮＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１７）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されたＶＬ ＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２６）に記載されたＶＬ ＦＲ３;及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
(ｇ)ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１５）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２５）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲ （配列番号２３１）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
（ｈ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１６）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２７）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
(ｉ)ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＱＡＳＩＳＣ（配列番号２１８）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２７）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
（ｊ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＱＡＳＩＳＣ（配列番号２１８）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＶＬ ＦＲ３ ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２７）に記載されたＶＬ ＦＲ２；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
（ｋ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＱＡＳＩＳＣ（配列番号２１８）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＤＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２８）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
（ｌ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＱＡＳＩＳＣ（配列番号２１８）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ（配列番号２２４）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４；
（ｍ）ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＱＡＳＩＳＣ（配列番号２１９）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ（配列番号２２４）に記載されれたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４;又は
（ｎ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＰＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号：２２０）に記載されたＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１)に記載されたＶＬ ＦＲ２；ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＦＣ（配列番号２２９）に記載されたＶＬ ＦＲ３；及び、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されたＶＬ ＦＲ４。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＬは、ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２３０）に記載されるＶＬ ＦＲ４；及び以下からなる群から選択されるＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＦＲ２及びＶＬ ＦＲ３を含む：
（ｂ）ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ(配列番号２１５)に記載されるＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されるＶＬ ＦＲ２;ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ （配列番号２２４）に記載されるＶＬ ＦＲ３;
（ｃ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１６）に記載されるＶＬ ＦＲ１;ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されるＶＬ ＦＲ２;ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＶＧＶＹＹＣ（配列番号２２３）に記載されるＶＬ ＦＲ３);
（ｄ）ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１５）に記載されるＶＬ ＦＲ１；ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されるＶＬ ＦＲ２； ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＹＣ（配列番号２２４）に記載されるＶＬ ＦＲ３;
（ｆ）ＤＶＶＭＴＱＴＰＬＳＬＰＶＮＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１７）に記載されるＶＬ ＦＲ１;ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹ（配列番号２２１）に記載されるＶＬ ＦＲ２;ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２６）に記載されるＶＬ ＦＲ３;
（ｈ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＰＡＳＩＳＣ（配列番号２１６）に記載されるＶＬ ＦＲ１;ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されるＶＬ ＦＲ２;ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２７）に記載されるＶＬ ＦＲ３;及び
（ｉ）ＤＩＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＥＱＡＳＩＳＣ(配列番号２１８)に記載されるＶＬ ＦＲ１;ＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹ（配列番号２２２）に記載されるＶＬ ＦＲ２;ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＴＥＤＬＧＶＹＦＣ（配列番号２２７）に記載されるＶＬ ＦＲ３。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下の（１）〜（４１）のいずれか１つから選択されるＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＦＲ２、ＶＨ ＦＲ３及びＶＨ ＦＲ４の組み合わせを含むＶＨを含む：
Figure 0006949012
Figure 0006949012
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下を含むＶＨを含む：
（ａ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＳＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６１）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ （配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｂ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｃ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ(配列番号９３)に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＲＹＹＣＡＳ（配列番号１６３）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列盤１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｄ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ(配列番号９３)に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＶＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３０）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｅ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＩＧ（配列番号１３９）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１７４）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｆ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号 １２９）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
(ｇ)ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６７）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｈ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＫＲＬＥＷＭＧ（配列番号１３７）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１７１）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ （配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｉ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＥＬＥＷＩＧ（配列番号１３８）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１７３）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｊ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６７）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｋ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＴＳＩＴ（配列番号９５）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｌ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号９６）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｍ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＴ（配列番号９７）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｎ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＴ（配列番号９７）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＱＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３１）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
(ｏ)ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号９８）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｐ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＳ（配列番号９９）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｑ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＧＳＩＴ（配列番号１００）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｒ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０１）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＬＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３２）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＩＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６４）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｓ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＳ（配列番号１０４）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＫＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３３）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＳ（配列番号１６８）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｔ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１７）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＳ（配列番号１７２）に記載のＶＨ ＦＲ３;及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ （配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｕ）ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＴＳＩＴ（配列番号１０６）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６６）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｖ）ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０８）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６６）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｗ）ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＴ（配列番号１０９）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６６）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
(ｘ)ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１０３）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６６）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｙ）ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号１０７）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＰＩＲＱＦＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６６）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ｚ）ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号１１０）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６６）に記載のＶＨ ＦＲ３；及びＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ａａ）ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０５）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＫＧＬＥＷＩＧ（配列番号１３４）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１６９）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１８４）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ａｂ）ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０５）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＫＳＬＥＷＩＧ（配列番号１３６)に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１６９）に記載のＶＨ ＦＲ３;及び、ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１８４）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ａｃ）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１１１）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６５）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ａｄ）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１６）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＶＷＭＧ（配列番号１３５）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＳＩＳＲＤＩＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＦＣＡＳ（配列番号１７０）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＭＬＴＶＳＳ（配列番号１８５）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ａｅ）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１０２）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６５）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ａｆ）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１１２）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６５）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ａｇ）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＴＳＩＴ（配列番号１１３）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６５）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;
（ａｈ）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号１１４）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６５）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４;又は
（ａｉ）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号１１５）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６５）に記載のＶＨ ＦＲ３；及び、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは以下を含む：
（１）ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４、及び、
（１ａ）ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ(配列番号１６２)に記載のＶＨ ＦＲ３、及び、以下からなる群から選択されるＶＨ ＦＲ１：
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号９８）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）；及び
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号９６）；又は
（１ｂ）ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６６）に記載のＶＨ ＦＲ３、及び以下からなる群から選択されるＶＨ ＦＲ１：
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１０３）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＴＳＩＴ（配列番号１０６）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号１０７）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０８）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号１１０）；
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１０３）；及び
ＨＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＡＳＩＴ（配列番号１０９）；又は
（１ｃ）ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６５）に記載のＶＨ ＦＲ３、及び、以下からなる群から選択されるＶＨ ＦＲ１：
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号１１１）；
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号１１５）；及び
ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１０２）；又は
（１ｄ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）に記載のＶＨ ＦＲ１、及びＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＳＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号６１）に記載のＶＨ ＦＲ３;又は
（１ｅ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１、及びＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６７）に記載のＶＨ ＦＲ３;又は
（１ｆ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１７）に記載のＶＨ ＦＲ１に記載のＶＨ ＦＲ１、及びＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＳ（配列番号１７２）に記載のＶＨ ＦＲ３;又は
（２）ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＶＨ ＦＲ４、以下からなる群から選択されるＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＦＲ２及びＶＨ ＦＲ３：
（２ａ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ(配列番号９４)に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＫＲＬＥＷＭＧ（配列番号１３７）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１７１）に記載のＶＨ ＦＲ３;
（２ｂ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＥＬＥＷＩＧ（配列番号１３８）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１７３）に記載のＶＨ ＦＲ３;
（２ｃ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０１）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＬＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３２）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＩＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６４）に記載のＶＨ ＦＲ３;
（２ｄ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＳ（配列番号１０４）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＫＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３３）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＳ（配列番号１６８）に記載のＶＨ ＦＲ３;又は
（３）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１６）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＶＷＭＧ（配列番号１３５）に記載のＶＨ ＦＲ２;ＲＶＳＩＳＲＤＩＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＦＣＡＳ（配列番号１７０）に記載のＶＨ ＦＲ３;及び、ＷＧＱＧＴＭＬＴＶＳＳ（配列番号１８５）に記載のＶＨ ＦＲ４。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントのＶＨは、以下を含む：
（１）ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１２９）に記載のＶＨ ＦＲ２、ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３）に記載のＢＨ ＦＲ４、及び、
（１ａ）ＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１６２）に記載のＶＨ ＦＲ３、及び以下からなる群から選択されるＶＨ ＦＲ１：
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＳＳＩＴ（配列番号９８）；
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号 ９４）；及び
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＮＳＩＳ（配列番号９６）；又は
（１ｂ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）に記載のＶＨ ＦＲ１、及びＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＳＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＹＣＡＳ（配列番号１６１）に記載のＶＨ ＦＲ３;又は
（１ｃ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１、ＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６７）に記載のＶＨ ＦＲ３;又は
（１ｄ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１７）に記載のＶＨ ＦＲ１、及びＲＶＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＳ（配列番号１７２）に記載のＶＨ ＦＲ３;又は
（２）ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１８３)に記載のＶＨ ＦＲ４、及び以下からなる群から選択されるＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＦＲ２及びＶＨ ＦＲ３：
（２ａ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＫＲＬＥＷＭＧ（配列番号１３７）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳ（配列番号１７１）に記載のＶＨ ＦＲ３;
（２ｂ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＴ（配列番号９４）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＥＬＥＷＩＧ（配列番号１３８）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＩＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１７３）に記載のＶＨ ＦＲ３;
（２ｃ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号１０１）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＬＰＧＮＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３２）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＩＴＩＳＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＦＣＡＳ（配列番号１６４）に記載のＶＨ ＦＲ３;
（２ｄ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＰＩＳ（配列番号１０４）に記載されるＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＫＫＬＥＷＩＧ（配列番号１３３）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＫＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＳ（配列番号１６８）に記載のＶＨ ＦＲ３;
（２ｅ）ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＹＳＩＳ（配列番号９３）に記載のＶＨ ＦＲ１；ＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＩＧ（配列番号１３９）に記載のＶＨ ＦＲ２;及びＲＶＴＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＩＬＲＳＶＴＡＥＤＴＡＫＹＹＣＡＳ（配列番号１７４）に記載のＶＨ ＦＲ３;又は
（３）ＤＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＹＰＩＴ（配列番号１１６）に記載のＶＨ ＦＲ１;ＷＩＲＱＦＰＧＮＫＬＶＷＭＧ（配列番号１３５）に記載のＶＨ ＦＲ２；ＲＶＳＩＳＲＤＩＳＫＮＱＦＦＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＦＣＡＳ（配列番号１７０）に記載のＶＨ ＦＲ３;及び、ＷＧＱＧＴＭＬＴＶＳＳ（配列番号１８５）に記載のＶＨ ＦＲ４。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記に定義されるようなＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＦＲ２、ＶＨ ＦＲ３及びＶＨ ＦＲ４を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記で定義されるようなＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＦＲ２、ＶＬ ＦＲ３及びＶＬ ＦＲ４を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、上記に定義されるようなＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＦＲ２、ＶＨ ＦＲ３、ＶＨ ＦＲ４、ＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＦＲ２、ＶＬ ＦＲ３及びＶＬ ＦＲ４を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体の重鎖可変領域フレームワーク領域（ＦＲ１〜４）は、配列番号１１〜９２及び２６３〜２７９のいずれか１つ（例えば配列番号１１）に含まれる重鎖可変領域フレームワーク領域（ＦＲ１〜４）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体の軽鎖可変領域フレームワーク領域（ＦＲ１〜４）は、配列番号１８６〜２１４及び２９８〜３０８のいずれか１つ（例えば配列番号１８６）に含まれる軽鎖可変領域フレームワーク領域（ＦＲ１〜４）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体は、配列番号１１〜９２及び２６３〜２７９のいずれか１つ（例えば配列番号１１）のいずれか１つに含まれる重鎖可変領域フレームワーク領域（ＦＲ１〜４）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変領域フレームワーク領域（ＦＲ１〜４）及び配列番号１８６〜２１４及び２９８〜３０８のいずれか１つ（例えば配列番号１８６）に含まれる軽鎖可変領域フレームワーク領域（ＦＲ１〜４）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変領域フレームワーク領域（ＦＲ１〜４）を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、以下から選択される抗体の重鎖及び軽鎖可変領域由来の８個のＦＲを含む：
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの重鎖可変領域は、上記に定義されるようなＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＦＲ２、ＶＨ ＣＤＲ２、ＶＨ ＦＲ３、ＶＨ ＣＤＲ３及びＶＨ ＦＲ４を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの軽鎖可変領域は、上記に定義されるようなＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＦＲ２、ＶＬ ＣＤＲ２、ＶＬ ＦＲ３、ＶＬ ＣＤＲ３及びＶＬ ＦＲ４を含む。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの重鎖可変領域は、上記に定義されるようなＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＦＲ２、ＶＨ ＣＤＲ２、ＶＨ ＦＲ３、ＶＨ ＣＤＲ３及びＶＨ ＦＲ４を含み；軽鎖可変領域は、上記で定義されるようなＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＦＲ２、ＶＬ ＣＤＲ２、ＶＬ ＦＲ３、ＶＬ ＣＤＲ３及びＶＬ ＦＲ４を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの重鎖可変領域は、以下からなる群から選択される重鎖可変領域と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％のアミノ酸配列同一性を有する：
配列番号１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９, ２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８及び２７９に記載される重鎖可変領域。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの重鎖可変領域は、配列番号１１〜９２及び２６３〜２７９のいずれか１つに記載される重鎖可変領域から選択される。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの軽鎖可変領域は、以下からなる群から選択される軽鎖可変領域と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％のアミノ酸配列同一性を有する：
配列番号１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７及び３０８に記載の軽鎖可変領域。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの軽鎖可変領域は、配列番号１８６〜２１４及び２９８〜３０８のいずれか１つに記載される軽鎖可変領域から選択される。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体に含まれる重鎖可変領域は、配列番号１１と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有する。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体に含まれる軽鎖可変領域は、配列番号１８６と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有する。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域は、配列番号１１と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有し、軽鎖可変領域は、配列番号１８６と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有する。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体は、上記に定義されるような重鎖可変領域及び上記に定義されるような軽鎖可変領域を含む。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体は、以下から選択される抗体に含まれる重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む：
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体は、以下を含む：
（１）配列番号１１に記載のＶＨ及び配列番号１８６に記載のＶＬ；
（２）配列番号１６に記載のＶＨ及び列番号１８７に記載のＶＬ；
（４）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２０１に記載のＶＬ；
（５）配列番号７１に記載のＶＨ及び配列番号１９９に記載のＶＬ；
（６）配列番号１７に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（７）配列番号３１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（８）配列番号６９に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（９）配列番号４４に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１０）配列番号７３に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１１）配列番号３２に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１２）配列番号７７に記載のＶＨ及び配列番号２０６に記載のＶＬ；
（１３）配列番号４５に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１４）配列番号７４に記載のＶＨ及び配列番号２０９に記載のＶＬ；
（１５）配列番号４７に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１６）配列番号９１に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１７）配列番号７３に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１８）配列番号３６に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１９）配列番号３６に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（２０）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９２に記載のＶＬ；
（２１）配列番号４６に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２２）配列番号７４に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（２３）配列番号９２に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（２４）配列番号７６に記載のＶＨ及び配列番号２０４に記載のＶＬ；
（２５）配列番号４２に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２６）配列番号４８に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２７）配列番号２０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２８）配列番号４９に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（２９）配列番号１８に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３０）配列番号２４に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３１）配列番号１９に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３２）配列番号２５に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３３）配列番号２１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３４）配列番号２７に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３５）配列番号２２に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３６）配列番号２９に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３７）配列番号１２に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３８）配列番号３０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（３９）配列番号３３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４０）配列番号３４に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４１）配列番号３５に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４２）配列番号２３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４３）配列番号７５に記載のＶＨ及び配列番号２０３に記載のＶＬ；
（４４）配列番号４０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４５）配列番号３７に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４６）配列番号１３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４７）配列番号１５に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４８）配列番号３８に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（４９）配列番号４１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５０）配列番号３９に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５１）配列番号４３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５２）配列番号７８に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（５３）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（５４）配列番号２６に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５５）配列番号２８に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（５６）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９４に記載のＶＬ；
（５７）配列番号７０に記載のＶＨ及び配列番号１９８に記載のＶＬ；
（５８）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９５に記載のＶＬ；
（５９）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９７に記載のＶＬ；
（６０）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９６に記載のＶＬ；
（６１）配列番号９０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（６２）配列番号５１に記載のＶＨ及び配列番号１８８に記載のＶＬ；
（６３）配列番号５４に記載のＶＨ及び配列番号１９０に記載のＶＬ；
（６４）配列番号８３に記載のＶＨ及び配列番号２０８に記載のＶＬ；
（６５）配列番号７９に記載のＶＨ及び配列番号１９０に記載のＶＬ；
（６６）配列番号８５に記載のＶＨ及び配列番号１９０に記載のＶＬ；
（６７）配列番号６２に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（６８）配列番号６２に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（６９）配列番号６６に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（７０）配列番号６６に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７１）配列番号６４に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（７２）配列番号６４に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７３）配列番号６７に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（７４）配列番号６７に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７５）配列番号６５に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７６）配列番号６３に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７７）配列番号８２に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（７８）配列番号８２に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（７９）配列番号６０に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８０）配列番号６０に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８１）配列番号５６に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８２）配列番号５６に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８３）配列番号６１に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８４）配列番号６１に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８５）配列番号５７に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８６）配列番号５７に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８７）配列番号５８に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（８８）配列番号５８に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（８９）配列番号５９に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（９０）配列番号５９に記載のＶＨ及び配列番号１９３に記載のＶＬ；
（９１）配列番号６８に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ：
（９２）配列番号５３に記載のＶＨ及び配列番号１９１に記載のＶＬ；
（９３）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号１９９に記載のＶＬ；
（９４）配列番号５５に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（９５）配列番号５３に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（９６）配列番号５２に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（９７）配列番号８４に記載のＶＨ及び配列番号２１０に記載のＶＬ；
（９８）配列番号８４に記載のＶＨ及び配列番号２１２に記載のＶＬ；
（９９）配列番号５０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１００）配列番号８０に記載のＶＨ及び配列番号２０７に記載のＶＬ；
（１０１）配列番号８８に記載のＶＨ及び配列番号２１４に記載のＶＬ；
（１０２）配列番号５２に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
（１０３）配列番号８９に記載のＶＨ及び配列番号２１２に記載のＶＬ；
（１０４）配列番号８１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
（１０５）配列番号８４に記載のＶＨ及び配列番号２１１に記載のＶＬ；
（１０６）配列番号８６に記載のＶＨ及び配列番号１９０に記載のＶＬ；
（１０７）配列番号８７に記載のＶＨ及び配列番号２１３に記載のＶＬ；
（１０８）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１０９）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号３０６に記載のＶＬ；
（１１０）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（１１１）配列番号９１に記載のＶＨ及び配列番号３００に記載のＶＬ；
（１１２）配列番号９１に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（１１３）配列番号２６３に記載のＶＨ及び配列番号１９２に記載のＶＬ；
（１１４）配列番号２６４に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１１５）配列番号２６４に記載のＶＨ及び配列番号１９２に記載のＶＬ；
（１１６）配列番号２６４に記載のＶＨ及び配列番号２０１に記載のＶＬ；
（１１７）配列番号２６４に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１１８）配列番号２６５に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１１９）配列番号２６５に記載のＶＨ及び配列番号２０１に記載のＶＬ；
（１２０）配列番号２６５に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１２１）配列番号２６６に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
（１２２）配列番号２６６に記載のＶＨ及び配列番号１９２に記載のＶＬ；
（１２３）配列番号２６７に記載のＶＨ及び配列番号２９８に記載のＶＬ；
（１２４）配列番号２６８に記載のＶＨ及び配列番号２９９に記載のＶＬ；
（１２５）配列番号２６９に記載のＶＨ及び配列番号３０１に記載のＶＬ；
（１２６）配列番号２７０に記載のＶＨ及び配列番号３０２に記載のＶＬ；
（１２７）配列番号２７１に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１２８）配列番号２７２に記載のＶＨ及び配列番号３０３に記載のＶＬ；
（１２９）配列番号２７３に記載のＶＨ及び配列番号３０４に記載のＶＬ；
（１３０）配列番号２７４に記載のＶＨ及び配列番号３０５に記載のＶＬ；
（１３１）配列番号２７５に記載のＶＨ及び配列番号２００に記載のＶＬ；
（１３２）配列番号２７６に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
（１３３）配列番号２７７に記載のＶＨ及び配列番号３０７に記載のＶＬ；
（１３４）配列番号２７８に記載のＶＨ及び配列番号３０８に記載のＶＬ；又は
（１３５）配列番号２７９に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ。
本発明に係る抗体は、遺伝子操作組換え技術によって得られ得る。例えば、化学合成又はＰＣＲ増幅によって、本発明に係る重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子のＤＮＡ分子を得ることができる。得られたＤＮＡ分子は、発現ベクターに挿入されることができ、次に、宿主細胞（例えば、Ｅ. ｃｏｌｉ（大腸菌）細胞、サル霊長類細胞、ＣＯＳ細胞、又は免疫グロブリンを産生しない他の骨髄腫細胞）に核酸を導入されることができる。次に、核酸を導入された宿主細胞は、本発明に係る抗体を発現する特定の条件下で培養されることができる。
本発明に係る抗体は、ＨＢｓＡｇタンパク質に対して高い特異性及び親和性を有する。例えば、本発明に係る抗体は、１×１０−５Ｍ未満のＫＤ値を有する；好ましくは、１×１０−６Ｍ未満のＫＤ値を有する；より好ましくは、１×１０−７Ｍ未満のＫＤ値を有する；最も好ましくは、１×１０−８Ｍ未満のＫＤ値を有するＨＢｓＡｇに結合する。
本発明に係る抗体は、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含む伝統的なＹ型抗体であることができる。また、本発明に係る抗体は、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、又は伝統的なＹ型抗体の他のフラグメントであることができ、これは、ＨＢｓＡｇタンパク質に対して親和性を保持し、伝統的なＹ型抗体のものよりも高いか、又は低い親和性を有するＨＢｓＡｇタンパク質に結合することができる。
本発明に係る抗原結合フラグメントは、インタクトな抗体分子の加水分解によって得られることができる（Ｍｏｒｉｍｏｔｏら, Ｊ. Ｂｉｏｃｈｅｍ. Ｂｉｏｐｈｙｓ. Ｍｅｔｈｏｄｓ ２４：１０７−１１７ (１９９２) 及びＢｒｅｎｎａｎら., Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：８１ (１９８５年)参照）。また、これらの抗原結合フラグメントはまた、組換え宿主細胞によって直接産生されることができる（Ｈｕｄｓｏｎ, Ｃｕｒｒ. Ｏｐｉｎ. Ｉｍｍｕｎｏｌ. １１： ５４８−５５７ (１９９９年)； Ｌittleら, Ｉｍｍｕｎｏｌ. Ｔｏｄａｙ, ２１： ３６４−３７０(２０００年)に見直される）。例えば、Ｆａｂ’フラグメントは、Ｅ. ｃｏｌｉ（大腸菌）細胞から直接得られることができ；及びＦａｂ’フラグメントは、化学的に結合してＦ（ａｂ）２フラグメントを形成することができる（Ｃａｒｔｅｒら, Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ, １０： １６３−１６７ (１９９２年)）。また、Ｆｖ、Ｆａｂ又はＦ（ａｂ）２フラグメントは、組換え宿主細胞の培養から直接単離されることもできる。当業者は、抗原結合フラグメントを調製する他の技術を十分に知っている。
したがって、いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖフラグメント、ダイアボディ、二重特異性抗体、及び多特特異性抗体からなる群から選択される。特に好ましくは、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ｓｃＦｖ抗体である。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、対象においてＨＢｓＡｇに特異的に結合し、ＨＢＶ病原性を中和し、及び／又はＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させることができる。
いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＩｇＧアイソタイプの抗体又はその抗原結合フラグメントである。例えば、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２の又はＩｇＧ４アイソタイプの抗体又はそれらの抗原結合フラグメントの抗体であり得る。
キメラ抗体
別の側面において、融合抗体又はイムノアドヘシンを調製することができ、例えば、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、別のポリペプチドに連結されることができる。いくつかの好ましい態様において、融合抗体は、本発明に係る抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。いくつかの好ましい態様において、融合抗体は、本発明に係るＶＨドメイン及びＶＬドメインを含み；ここで、ＶＨドメインは、第１のポリペプチドに連結され、ＶＬドメインは、第２のポリペプチドに連結される。
誘導体化抗体
本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、誘導体化され、例えば、別の分子（例えば別のポリペプチド又はタンパク質）に連結されることができる。一般的には、抗体又はその抗原結合フラグメントの誘導体化（例えば、標識）は、ＨＢｓＡｇへのその結合に有害に影響を与えないだろう。したがって、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、誘導体化形態などを含むことも意図される。例えば、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、別の分子（アビジン又はポリヒスチジンタグ）と別の抗体など（例えば二重特異性抗体の形成）、検出剤、医薬剤、及び／又は抗体又はその抗原結合フラグメントの会合体を媒介することができるタンパク質又はポリペプチドなど、１つ以上の他の分子群に（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合又は他の手段によって）機能的に結合されることができる。
１つのタイプの誘導体化抗体（例えば、二重特異性抗体）は、２つ以上の抗体（同じタイプに属するか否か）を架橋することによって産生される。適切な架橋剤は、例えば、適切なスペーサー（例えば、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）；及び、ホモ二官能性架橋剤（ジスクシンイミジルスベレート）によって分離される２つの異なる反応性基を含む、ヘテロ二官能性架橋剤を含む。そのような架橋剤は、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ, Ｒｏｃｋｆｏｒｄ, ＩＩから購入され得る。
別のタイプの誘導体化抗体は、標識された抗体である。例えば、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、有用な検出剤に結合されることができる。そのような検出剤は、例えば、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、塩化ダンシル、フィコエリトリン、ランタニド蛍光体などの蛍光化合物を含む。また、抗体はまた、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ、グルコースオキシダーゼなどのような酵素によって標識されることができる。抗体が酵素によって標識される場合、認識可能なシグナル又は反応生成物を産生するための酵素によって利用されることができる試薬が、標識された抗体を検出するために添加されることができる。例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼを用いて抗体を標識する場合、過酸化水素及びジアミノベンジジンを添加して、検出可能な発色反応生成物を産生して、標識された抗体の存在又は量を検出することができる。まだ、抗体はまた、ビオチンで標識されることができる。この場合、標識された抗体の存在又は量は、アビジンの結合を間接的に決定することによって、決定されることができる。また、抗体はまた、第２のレポーター分子（例えば、ロイシンジッパー対配列、金属結合ドメイン、エピトープタグなど）によって認識されることができる。いくつかの特定の態様において、標識は、潜在的な立体障害を低減するために、異なる長さのスペーサーアームを介して抗体に結合されることができる。
また、本発明に係る抗体は、その抗原結合フラグメントは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、メチル又はエチル、又は糖類などの化学基で誘導体化されることもできる。これらの基は、血清半減期の増加など、抗体の生物学的特性を改善するために使用されることができる。
核酸分子、ベクター及び宿主細胞
別の側面において、本発明は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントをコードするヌクレオチド配列、その重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含む単離された核酸分子を提供する。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る単離された核酸分子は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメント、又はその重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域をコードする。
別の側面において、本発明は、本発明に係る単離された核酸分子を含む、ベクター（例えばクローニングベクター又は発現ベクター）を提供する。いくつかの好ましい態様において、本発明に係るベクターは、例えば、プラスミド、コスミド、ファージ等である。いくつかの好ましい態様において、ベクターは、対象（例えば、ヒトなどの哺乳動物）において本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを発現することができる。
別の側面において、本発明は、本発明に係る単離された核酸分子又は本発明に係るベクターを含む、宿主細胞を提供する。そのような宿主細胞は、Ｅ. ｃｏｌｉ（大腸菌）細胞などの原核細胞、及び酵母細胞、昆虫細胞、植物細胞及び動物細胞（例えばマウス細胞及びヒト細胞などの哺乳動物細胞）などの真核細胞を含むが、これらに限定されない。本発明に係る細胞は、２９３Ｔ細胞などの細胞株であり得る。
別の側面において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを調製するための方法を提供し、本発明の抗体又はその抗原結合フラグメントの発現を可能にする条件下で本発明に係る宿主細胞を培養し、培養された宿主細胞の培養物から抗体又はその抗原結合フラグメントを回収することを含む。
診断方法及びキット
本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＨＢｓＡｇに特異的に結合することができ、したがって、サンプル中のＨＢｓＡｇたんぱく質の存在又はレベルを検出するために使用されることができ、対象がＨＢＶに感染しているかどうかを診断するために使用されることができる。
したがって、別の側面において、本発明は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを含むキットを提供する。好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、検出可能なマーカーをさらに含む。好ましい態様において、キットは、第２の抗体をさらに含み、これは、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを特異的に認識する。好ましくは、第２の抗体は、検出可能なマーカーをさらに含む。
上記の方法に従って、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは又は第２の抗体は、標識されることができる。例えば、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、検出可能なマーカーで標識されることができる。当業者に周知であるそのような検出可能なマーカーは、放射性同位体、蛍光物質、発光物質、発色物質及び酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ）などを含むが、これらに限定されない。また、そのような検出可能なマーカーはさらに、例えば、１２５Ｉなどの放射性同位体；フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアナート、ローダミン、５−ジメチルアミノ−１−ナフタレンスルホニルクロニド、フィコエトリン、及びランタニド蛍光体等の蛍光物質；西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ、及びグルコースオキシダーゼなどの識別可能なシグナル又は反応生成物を産生することができる酵素；ビオチン、アビジン、ロシンジッパー対配列、金属結合ドメイン、及びエピトープタグなどの第２のレポーター分子によって認識されることができるタグをさらに含む。いくつかの特定の態様において、検出剤（例えばタグ）は、潜在的な立体障害を減少させるために、異なる長さのリンカーを介して抗体に連結されることができる。
別の側面において、本発明は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを使用することを含む、サンプル中のＨＢｓＡｇタンパク質の存在又はレベルを検出するための方法を提供する。好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、検出可能なマーカーをさらに含む。別の好ましい態様において、その方法は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを検出するための検出可能なマーカーを担持する第２の抗体を使用することをさらに含む。その方法は、診断目的又は非診断目的（例えば、前記サンプルが、患者のサンプルではなく細胞サンプルである）に使用され得る。
別の側面において、本発明は、対象のサンプル中のＨＢｓＡｇタンパク質の存在を検出するために本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを使用することを含む、対象が、ＨＢＶに感染しているかどうかを診断する方法を提供する。好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、検出可能なマーカーをさらに含む。別の好ましい態様において、その方法は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを検出するために検出可能なマーカーを担持する第２の抗体を使用することをさらに含む。
別の側面において、サンプル中のＨＢｓＡｇの存在又はレベルを検出するための、又は対象がＨＢＶに感染しているかどうかを診断するためのキットの製造における本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの使用を提供する。
治療方法及び医薬組成物
本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防又は治療するために、インビトロ又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ病原性を中和するために、及び対象（例えばヒト）においてＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させるために、使用されることができる。
したがって、別の側面において、本発明は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの、及び薬学的に許容可能な担体及び／又は添加剤を含む、医薬組成物を提供する。好ましい態様において、本発明に係る医薬組成物は、追加の薬学的に活性な薬剤をさらに含み得る。好ましい態様において、さらなる薬学的に活性な薬剤は、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防又は治療するための薬剤、例えば、他の抗ウイルス剤である、例えばインターフェロン又はペグ化インターフェロンなどのインターフェロン型薬剤である。
別の側面において、対象（例えばヒト）においてＨＢＶ感染又はＨＢＶ肝炎に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防又は治療するための、インビトロ又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ病原性を中和するための、及び／又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させるための医薬の製造において本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの使用を提供する。
別の側面において、本発明は、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防又は治療するための、インビトロ又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ病原性を中和するための、及び／又は対象（例えばヒト）においてＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させるための方法を提供し、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメント、又は本発明に係る医薬組成物の有効量をそれを必要とする対象に投与することを含む。
本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、経口、口腔、舌下、眼内、局所、非経口、直腸、膣内、嚢内、鼠径部、膀胱内、局所（例えば、粉末、軟膏又はドロップ）、又は鼻経路を含むが、これらに限定されない従来の経路によって投与され得る。本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、当該技術分野で公知の複数の経路によって投与されることができる。しかしながら、多くの治療用途について、好ましい投与経路／方法は、非経口投与（例えば、静脈内注射、皮下注射、腹腔内注射、及び筋肉内注射）である。当業者は、投与経路／方法が期待される目的に応じて変更されることができることを理解する。好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、静脈内注入又は注射によって投与される。
本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメント又は本発明に係る医薬組成物は、液体、半固体及び固体形態、例えば、溶液（例えば注射）、分散液又は懸濁液、錠剤、粉末、顆粒、エマルション、丸剤、シロップ剤、粉末、リポソーム、カプセル及び坐薬などの、複数の剤形で調製されることができる。好ましい剤形は、期待される投与経路及び治療的使用に依存する。
例えば、１つの好ましい剤形は、注射である。そのような注射は、滅菌注射溶液であり得る。例えば、滅菌注射溶液は、次の方法によって調製されることができる：本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの必要な用量は、適切な溶媒中に組み込まれ、及び任意には、他の期待される成分（ｐＨ調整剤、表面活性剤、アジュバント、イオン強度増強剤、等張剤、防腐剤、希釈剤又はそれらの任意の組み合わせを含むが、これらに限定されない）が、同時に組み込まれ、次にろ過滅菌を行う。また、滅菌注射溶液は、保存及び使用の便宜のために、（例えば、真空乾燥又は冷凍乾燥によって）滅菌粉末に調製されることができる。そのような滅菌粉末は、滅菌発熱物質を含まない水など、使用前に適切な賦形剤中に分散されることができる。
別の好ましい剤形は、分散液である。分散液は、次の方法によって調製されることができる：本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、塩基分散媒及び任意には、他の期待される成分（ｐＨ調整剤、表面活性剤、アジュバント、イオン強度増強剤、等張剤、防腐剤、希釈剤、又はそれらの任意の組合せを含むが、これらに限定されない）を含む滅菌賦形剤に組み込まれる。また、予想される薬物動態特性を得るために、吸収遅延剤は、例えばモノステアレート塩及びゼラチンなどの分散液中に組み込まれることもできる。
別の好ましい剤形は、カプセル、錠剤、粉末、顆粒などの経口固体剤形である。そのような固体剤形は、一般的には、次のうちの少なくとも１つを含む：（ａ）クエン酸ナトリウム及びリン酸カルシウムなどの不活性薬物添加剤（又は賦形剤）；（ｂ）デンプン、ラクトース、スクロース、マンノース及びケイ酸などの充填剤；（ｃ）カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース及びアラビアゴムなどの結合剤；（ｄ）グリセロールなどの湿潤剤；（ｅ）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモ又はタピオカデンプンなどの崩壊剤；（ｆ）オレフィンなどの遅延剤；（ｇ）第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；（ｈ）セチルアルコール及びグリセリルモノステアレートなどの湿潤剤；（ｉ）カオリン及びベントナイトなどの吸着剤；（ｊ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ドデシル硫酸ナトリウムなどの潤滑剤、又はそれらの任意の組み合わせ。錠剤ま及びカプセル形態の場合において、緩衝剤を含むこともできる。
また、放出速度改変剤（すなわち、薬物放出速度を変化させることができる薬剤）は、改変放出又はパルス放出剤形を得るために、経口固体剤形に加えられ得る。そのような放出速度改変剤は、カルボキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロース、ポリエチレンオキシド、キサンタンガム、イソアクリルアミノコポリマー、水素化香味油、カルナバワックス、パラフィン、酢酸フタル酸セルロース、カルボキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸コポリマー、又はそれらの任意の組み合わせを含むが、これらに限定されない。改変放出又はパルス放出剤形は、放出速度調整剤の１つ又は群を含み得る。
別の好ましい剤形は、エマルション、溶液、懸濁液、シロップなどを含む経口液体剤形である。有効成分に加えて、そのような経口液体剤形は、当該技術分野で一般的に使用される不活性溶媒、例えば、水又は他の溶媒、例えばエチルアルコール、イソプロパノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（例えば、綿実油、ピーナッツ油、トウモロコシ油、オリーブ油、香味油及びゴマ油）、グリセロール、ポリエチレングリコール及びソルビタン脂肪酸エステル、及びそれらの任意の組み合わせをさらに含む。これらの不活性溶媒に加えて、そのような経口液体剤形は、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、香味剤、香味料などをさらに含み得る。
また、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、投与の便宜のために、医薬組成物中の単位剤形で存在し得る。本発明に係る医薬組成物は、滅菌されていて、製造及び保存条件下で安定であるべきである。
本発明で提供される医薬及び医薬組成物は、単独で又は組み合わせて使用され得るか、又は追加の薬学的に活性な薬剤（例えば、他の抗ウイルス剤、例えば、インターフェロン又はペグ化インターフェロンなどのインターフェロン型薬剤）と組み合わせて使用され得る。いくつかの好ましい態様において、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＨＢＶ感染に関連する疾患を予防及び／又は治療するために、他の抗ウイルス剤（複数可）と組み合わせて使用される。本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、同時に、別々に又は連続して投与されることができる。そのような抗ウイルス剤（複数可）は、インターフェロン型薬剤、リバビリン、アダマンタン、ヒドロキシ尿素、ＩＬ−２、Ｌ−１２及びペンタカルボキシサイトゾル酸などを含むが、これらに限定されない。
本発明に係る医薬組成物は、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの「治療有効量」又は「予防有効量」を含み得る。「予防有効量」は、疾患（ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患など）の発症を予防、抑制又は遅延させるのに十分な量を指す。「治療有効量」は、疾患を有する患者における疾患及びその合併症を治療するか、又は少なくとも部分的に抑制するのに十分な量を指す。本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントは、次の要因に依存して変化し得る：治療される疾患の重篤度、患者における免疫系の一般的状態、年齢、体重及び性別などの患者の一般的状態、薬物の投与様式、同時に使用される追加療法など。
投薬計画は、最適な所望の効果（例えば、治療効果又は予防効果）を提供するように調整されることができる。例えば、単一の用量を投与してもよく、又は複数の用量をある期間内に投与してもよく、又は用量は、治療状況の緊急性によって示されるように比例して減少又は増加されることができる。
本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントについて、治療又は予防有効量の例示的かつ非限定的な範囲は、０．０２５〜５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．１〜５０ｍｇ／ｌｇ、より好ましくは０．１〜２５ｍｇ／ｋｇ、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇである。用量は、治療される疾患の種類及び重篤度に応じて変化することができることに留意すべきである。また、当業者は、任意の特定の患者について、特定の投与計画は、医師の専門的評価に応じて、時間の経過とともに調整されるべきであり；本明細書で提供される用量範囲は、本発明に係る医薬組成物の使用又は範囲を定義するのではなく、例示の目的でのみ提供されることを理解する。
本発明の有益な効果
先行技術と比較して、本発明の技術的解決法は、以下の有益な効果を有する。
（１）本発明に係る抗体は、ＨＢｓＡｇを特異的に認識／結合するだけでなく、ＨＢＶ病原性を中和し、対象のＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させ、インビボでＨＢＶ及びＨＢＶ感染細胞を効果的に除去することができる。したがって、本発明に係る抗体は、ＨＢＶ感染及びＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防及び治療する潜在力を有する。
（２）本発明に係る抗体（特にヒト化抗体）は、親マウス抗体の機能及び特性を保持し、したがって、ＨＢＶ感染及びＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）を予防及び治療する潜在力を有し；さらに、非常に高いヒト化度（９７％までのヒト化度）を有し、したがって、免疫応答を上昇させることなく、安全にヒト対象に投与することができる。本発明に係る抗体（特にヒト化抗体）は、重要な臨床的価値を有する。
本発明を実施するための特定の態様
本発明は、本発明の保護範囲を限定するのではなく、本発明を例示することを意図した以下の例を参照して説明される。
他に示されない限り、本発明で使用される分子生物学的実験方法及び免疫学的アッセイは、Ｓａｍｂｒｏｏｋ Ｊら, Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ (第２版), Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ, １９８９年,及びF. Ｍ. Ａｕｓｕｂｅｌら, Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ,第３版, Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ, Ｉｎｃ., １９９５年に記載されるような方法に従って実質的に実施され；制限酵素は、生成物の製造業者によって推奨される条件下で使用される。当業者は、実施例が、本発明を例示するために使用され、本発明の保護範囲を限定するものではないことを理解する。
例１：ＨＢｓＡｇに特異的に結合するマウスモノクロナール抗体６Ｄ１１及びそのヒト化
１．１：モノクロナール抗体６Ｄ１１の特性
従来の免疫学的方法に従って、ＨＢｓＡｇに特異的に結合するマウスモノクロナール抗体６Ｄ１１（以下、６Ｄ１１−ｍＡｂ又はｍＡｂ）を調製した。マウスモノクロナール抗体６Ｄ１１は、配列番号１に記載される重鎖可変領域のアミノ酸配列、及び配列番号２に記載される軽鎖可変領域のアミノ酸配列を有する。
配列番号１
DVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYPITSGYHWNWIRQFPGNKLVWMGYISYDGSDHYNPSLENRISITRDISKNQFFLILRSVTTEDTGKYFCASGFDHWGQGTTLTVSS
配列番号２
DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHSYGDTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVETEDLGVYFCSQNTHVPYTFGGGTKLEIKR
さらに、Ｋａｂａｔら（Ｋａｂａｔら, Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ,第５版, Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ, Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａlｔｈ, Ｂｅｔｈｅｓｄａ, Ｍａｒｙｌａｎｄ (１９９１年), ６４７−６６９頁）によって記載される方法を使用することによって、マウスモノクロナール抗体６Ｄ１１のＣＤＲ配列を同定した。マウスモノクロナール抗体の重鎖及び軽鎖可変領域のＣＤＲのアミノ酸配列を、表３（配列番号３〜８）に示した。
Figure 0006949012
また、マウスモノクロナール抗体６Ｄ１１の重鎖及び軽鎖可変領域をコードする遺伝子配列は、それぞれ、重鎖及び軽鎖定常領域をコードする遺伝子配列に連結され、組換え発現をＣＨＯ細胞中で行い、キメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂを得た（以下、ｓＡｂと略記する）。
驚くべきことに、マウスモノクロナール抗体６Ｄ１１−ｍＡｂ及びキメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂは、ＨＢｓＡｇを特異的に結合／認識するだけでなく、対象のＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させ、インビボでＨＢＶ及びＨＢＶ感染細胞を効果的に除去することできることがわかった（６Ｄ１１−ｍＡｂ及び６Ｄ１１−ｃＡｂの実験データについては、図７〜９を参照されたい）。したがって、モノクロナール抗体６Ｄ１１−ｍＡｂ及びキメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂの両方は、対象においてＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えばＢ型肝炎）の治療において潜在力を有する。
１．２：抗体６Ｄ１１−ｍＡｂのヒト化のためのヒト抗体鋳型の選択及び最適化
ヒト対象に投与したとき、異種抗体の免疫原性を低下させるために、マウスモノクロナール抗体６Ｄ１１−ｍＡＢは、ＣＤＲ移植によってヒト化されなければならなかった。抗体は、主にＣＤＲを介して抗原に接触して認識し、抗体のＦＲのいくつかの残基はまた、抗原−抗体相互作用に関与し、ＣＤＲの立体配座に影響を及ぼし得る。したがって、マウス抗体のＦＲが、ヒト抗体のＦＲによって置換された後、マウス抗体由来のＣＤＲの立体配座は、一般的には、変化し得、抗原を認識／結合するためのヒト化抗体の親和性の有意な低下、又はヒト化抗体の抗原結合能力の喪失さえもたらす（Ｇｅ Ｙａｎ, Ｓｔｒａｔｅｇｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ [Ｊ]. Ｆｏｒｅｉｇｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ (Ｓｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ), ２００４年, ２７(５)： ２７１）。したがって、マウス抗体のヒト化の間、マウス抗体のＣＤＲと一致することができるヒト抗体鋳型を選択することは非常に重要である。
多くの分析及び実験に基づいて、発明者は、驚くべきことに、ヒト生殖系列遺伝子配列４−２８−０２（配列番号９）及び２Ｄ−２８−０１（配列番号１０）を６Ｄ１１−ｍＡｂのＣＤＲを受け入れるためのヒト抗体鋳型として使用することが特に有利であることを見出した。特に、ヒト生殖系列遺伝子配列４−２８−０２（配列番号９）及び２Ｄ−２８−０１（配列番号１０）は、６Ｄ１１−ｍＡｂの重鎖及び軽鎖ＣＤＲと良好に一致することができ、６Ｄ１１−ｍＡｂの抗原結合親和性を最大限に保持することができる。ヒト生殖系列遺伝子配列４−２８−０２（配列番号９）及び２Ｄ−２８−０１（配列番号１０）の特定の配列はまた、ＮＣＢＩ、Ｋａｂａｔ及びＧｅｎＢａｎｋなどの公開データベースに見出されることができる。
マウスモノクロナール抗体６Ｄ１１−ｍＡｂの重鎖及び軽鎖ＣＤＲを、ヒト化のために鋳型のＦＲに移植した（すなわち、ヒト生殖系列遺伝子配列４−２８−０２（配列番号９）及び２Ｄ−２８−０１（配列番号１０））。さらに、過去のヒト化経験と組み合わせた配列分析に基づいて、ヒト化の鋳型のＦＲのアミノ酸残基に対して一連の逆突然変異を行って、ヒト化抗体が、マウス抗体の抗原結合能力を可能な限り保持することを可能にした。全部で２０個のヒト化抗体を得た。２０のヒト化抗体の名称並びにＶＨ及びＶＬ情報を図１Ａ〜１Ｂに示し、図１Ａは、ヒト化抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列を示し；図１Ｂは、ヒト化抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を示し；「．」は、その位置のアミノ酸残基は、抗体Ｂ−Ｓ３−４５の対応する位置のアミノ酸残基と同一であることを意味する。また、２０のヒト化抗体の重鎖可変領域、軽鎖可変領域のアミノ酸配列番号、並びに重鎖及び軽鎖ＦＲ（ＦＲ１〜ＦＲ４）及びＣＤＲ（ＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）を、表１及び表２にまとめた。
１．３：６Ｄ１１−ｍＡｂ由来のヒト化ｓｃＦｖ抗体の構築
２０のヒト化抗体をコードする遺伝子を鋳型として使用して、スプライシング重複伸長ＰＣＲ（ＳＯＥ−ＰＤＲ）を使用して、６Ｄ１１−ｍＡｂ由来のヒト化ｓｃＦｖ抗体をコードする２０の遺伝子フラグメントを得た。ｓｃＦｖ抗体の構造は、ＮＨ２−ＶＨ−リンカー−ＶＬ−ＣＯＯＨであり、リンカーの配列は、（Ｇ４Ｓ）３であり得る。以下は、ＰＣＲで使用される条件である：９５℃で５分間の前変性；８サイクル（９５℃で３０秒間の変性、５７℃で３０秒間のアニーリング、７２℃で３０秒間の伸長）；及び７２℃で１０分間の反応。増幅産物をアガロース電気泳動で分析し、ＤＮＡ精製キット（ＴｉａｎＧｅｎ、ＤＰ２１４−０３）を使用することによって回収／精製し、６Ｄ１１−ｍＡｂ由来のヒト化ｓｃＦｖ抗体をコードする２０の遺伝子フラグメントＨ−Ｋを得た。遺伝子フラグメントＨ−Ｋのそれぞれを、酵素Ｓｆｉｌで切断し、１０：１（遺伝子フラグメント：ベクター）のモル比でベクターｐＣＧＭＴ（Ｓｃｒｉｐｐｓから、感染性と連結することにより化学反応を選択可能にした）に連結した。２５μＦ、２．５ＫＶ及び２００Ωの条件下でエレクトロポレーションにより、ライゲーション産物をコンピテント大腸菌（Ｅ. ｃｏｌｉ）ＥＲ２７３８に形質転換した。形質転換した大腸菌（Ｅ. ｃｏｌｉ）を、ＳＯＣ培地で４５分間インキュベートし、次に２００μＬの細菌液をＬＢプレート（１００ｇ／Ｌアンピシリン＋テトラサイクリン＋２ｇ／ｍＬグルコースを含む）上に広げて、３７℃で一晩放置した。単一の細菌コロニーをプレートから採取し、配列決定してｓｃＦｖ抗体をコードする組換えベクターの配列が正しいことを確認した。ｓｃＦｖ抗体をコードする組換えベクター（ｐＣＧＭＴ−ｃＦｖ）の地図を図２に示した。
１．４：ヒト化ｓｃＦｖ抗体の検出
先のステップで得られた陽性の単一細菌コロニーを、アンピシリン（１００ｇ／Ｌ）を含む２×ＹＴ培地でＯＤ＝０．６になるまで培養し、続いてＭ１３Ｋ０７で重感染させた。２時間後、１００ｇ／Ｌのカナマイシンを添加し、３７℃で２時間インキュベーションを続けた。次に、培養物を、１０分間４０００ｒｐｍで遠心分離し、上清を捨て、細胞ペレットを回収した。細胞ペレットをアンピシリン及びカナマイシン（１００ｇ／Ｌ）を含む培地に再懸濁し、３０℃で一晩振盪下で培養した。その後、培養物を１２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、細菌及び上清を回収し、アッセイのために４℃で保存した。
ＨＢｓＡｇ（３μｇ／ｍＬ）抗原で被覆したＥＬＩＳＡプレートの各ウェルに、試験すべき上清を添加し、３７℃で１時間インキュベートした。その後、ＥＬＩＳＡ場所をＰＢＳＴで５回洗浄し、次に１：５０００で希釈した１００μＬの抗Ｍ１３−ＨＲＰを添加し、３７℃で３０分間インキュベートした。その後、ＥＬＩＳＡ場所をＰＢＳＴで５回洗浄し、基質ＴＭＢ溶液を添加した。反応の１５分後、Ｈ２ＳＯ４を加えて発色を停止させ、ＯＤ４５０／６２０値を読み取った。Ｍ１３ＫＯ７を陰性対照として使用した。ＥＬＩＳＡ結果を図３に示した。図３の結果は、これらのｓｃＦｖ抗体を提示する全てのファージを、ＥＬＩＳＡによって測定されるような反応性を有したこと；全ての２０の構築されたヒト化ｓｃＦｖ抗体は、抗原ＨＢｓＡｇに結合することができたことを示した。
また、２０のヒト化抗体のヒト化度を、以下の式に従って算出した：
ヒト化度＝（ＦＲ中のアミノ酸番号の数−ＦＲ中に保有されるマウスアミノ酸の数）／ＦＲ中のアミノ酸の数×１００％
その結果は、２０のヒト化抗体は、９１．２％及び８８．１７％の間のヒト化度を有し、ＦＲ中に保有されるマウスアミノ酸の数及びヒト化度を表４に示した。
Figure 0006949012
例２：ヒト化抗体Ｂ−Ｓ３−４５のＣＤＲにおけるアミノ酸の単一部位置換
ヒト化抗体Ｂ−Ｓ３−４５の６つのＣＤＲの各部位のアミノ酸を、２０個の天然に存在するアミノ酸でそれぞれ単一部位置換に供した。例１．３及び１．４に記載のクローニング方法を用いて、Ｂ−Ｓ３−４５と比較して、ファージ抗体がＣＤＲに単一部位突然変異を有するファージ抗体を発現する組換えベクター発現ファージ抗体を得た。変性部位にアミノ酸置換を導入するために縮重プライマーを使用した。
重鎖可変領域ＣＤＲ（ＨＣＤＲ３）の最初のアミノ酸の置換を例として、オリゴヌクレオチドプライマーＨ３Ｒ１及びＢ４５−Ｈ３Ｆ（この配列を表５に示した）を設計し、ヒト化抗体Ｂ−Ｓ３−４５をコードする遺伝子中のプライマーのアニーリング位置を図４に示した。ＰＣＲ法は、次の通りであった：Ｂ−Ｓ３−４５コード遺伝子を鋳型として使用し、上流及び下流フラグメントをそれぞれプライマー対Ｂ４５−ＶｈＦ／Ｈ３Ｒ１及びＢ４５−Ｈ３Ｆ／Ｂ４５−ＶｋＲによって増幅し；スプライシング重複伸長−ＰＣＲにより、フラグメントを一緒に連結し、Ｂ４５−ＶｈＦ／Ｂ４５−ＶｋＲを増幅のために上流プライマー及び下流プライマーとしてそれぞれ使用して、ＨＣＤＲ３の最初のアミノ酸位置で起こった単一部位突然変異を有する全体のｓｃＦｖ遺伝子フラグメントを得た。
Figure 0006949012
得られたｓｃＦｖ遺伝子フラグメントＨ−Ｋを酵素Ｓｆｉｌで切断し、次にそれぞれ１０：１（遺伝子フラグメント：ベクター）のモル比でベクターｐＣＧＭＴに連結した。単一部位突然変異を含む組換えベクターをＥＲ２７３８細胞に電気変換した。次に形質転換された大腸菌（Ｅ. ｃｏｌｉ）をＬＢプレート（１００ｇ／Ｌアンピシリン＋テトラサイクリン＋２ｇ／ｍＬグルコースを含む）上に広げ、３７℃で一晩放置した。単一部位の突然変異を含むｓｃＦｖ抗体をコードする組換えベクターが正しいことを確実にするために、単一細菌コロニーをプレートから選択し、配列決定した。次に、例１に記載される方法に従って、抗原ＨＢｓＡｇとの単一部位突然変異を含むｓｃＦｖとの反応性を決定し、ここで抗体Ｂ−Ｓ３−４５を提示するファージを陽性対照として用いた。
ＥＬＩＳＡ結果を図５Ａ〜５Ｉに示し、横軸は、ｓｃＦｖの単一部位突然変異の位置及びタイプ（例えば、「Ｈ３１−Ｒ」は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによる位置Ｈ３１のアミノ酸残基がＲに突然変異されることを意味する）を表し、縦軸は、単一部位突然変異及び抗原ＨＢｓＡｇを含むｓｃＦｖ抗体を提示するファージの間の反応性を示す。図５Ａ〜５Ｉの実験結果は、単一部位突然変異は、抗原ＨＢｓＡｇに対する抗体の結合親和性を妨害することなく、抗体Ｂ−Ｓ３−４５のＣＤＲのアミノ酸残基に対して実施されることができたことを示した。
また、抗体Ｂ−Ｓ３−４５のＣＤＲにおいて突然変異が許容されることができるアミノ酸部位、並びに前期位置に置換されることができるアミノ酸残基のタイプを決定するために、図５Ａ〜５Ｉに含まれる全ての単一部位突然変異を、表６に要約した。
Figure 0006949012
Figure 0006949012
例３：ヒト化抗体Ｂ−Ｓ３−４５の最適化と操作
ヒト化抗体のＦＲは、約１０％のマウスアミノ酸残基をさらに含み（表４参照）、ＣＤＲのアミノ酸残基は、実質的にマウスであったため、ヒト対象に投与した場合、ヒト化抗体は、免疫学的拒絶反応をある程度引き起こすだろう。そのような免疫学的拒絶反応をできるだけ低減し、その親のマウス抗体の機能及び特性（すなわち、抗原結合活性、ウイルス中和活性、及びＨＢＶ ＤＮＡ及びＨＢｓＡｇを除去する能力）を保持するヒト化抗体を作製するために、可能な限り、ヒト化抗体Ｂ−Ｓ３−４５を、さらに最適化し操作した。
要するに、ヒト化抗体Ｂ−Ｓ３−４５のアミノ酸配列、アミノ酸残基がＣＤＲで置換されることができる位置及び例２で同定された置換のアミノ酸残基のタイプ、並びにＮＣＧＩ ＢＬＡＳＴからのアラインメントの結果に基づいて、発明者は、ヒト化抗体Ｂ−Ｓ３−４５のＦＲ及びＣＤＲのアミノ酸突然変異の異なる組み合わせを導入し、１１５の新しいヒト化抗体を設計した。１１５のヒト化抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列を、図６Ａ〜６Ｊに示し、ここで図６Ａ〜６Ｅは、ヒト化抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列を示し；図６Ｆ〜６Ｊは、ヒト化抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を示し；「．」は、Ｂ−Ｓ３−４５の対応する位置のアミノ酸残基と同一であることを意味する。また、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、及び１１５個のヒト化抗体の軽鎖及び重鎖ＦＲ（ＦＲ１〜ＦＲ４）及びＣＤＲ（ＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）のアミノ酸配列番号をまた、表１及び表２に要約した。
１１５のヒト化抗体のうち、抗体１６２Ｂ、Ｂ３−Ｓ４−Ｎ−１３０、Ｂ３−Ｓ４−Ｎ−６５、Ｂ４−Ｔ１３−１１、Ｂ３−Ｓ４−Ｎ−６８、Ｐ−４４、Ｐ−５０、Ｂ３−Ｓ４−Ｎ−５０、１１２、１１０、８４、１１６、１５３、１８７、１２７、６２、２３、１２３、８３、１３８、及び１９２は、９７％のヒト化度を有し、そのＦＲ領域は、４個のマウスアミノ酸残基のみ保持した。
１１５個のヒト化抗体及び例１の２０個のヒト化抗体からランダムに選択される１０個の抗体の真核生物発現及び抗体結合活性を決定した。
３．１：真核生物発現のための組換えベクターの構築
重鎖を発現する組換えベクターの構築：ＥｃｏＲＩ酵素切断部分（ＧＡＡＴＴＣ）及びＨｉｎｄＩＩＩ酵素切断部位（ＡＡＧＣＴＴ）により、重鎖可変領域をコードする遺伝子配列は、すでに構築された重鎖発現ベクターｐＴＴ５−ＣＨ（ヒト抗体の重鎖定常領域をコードする配列を含む）に挿入されている。簡潔にいうと、スプライシング重複伸長−ＰＣＲ（ＳＯＥ−ＰＣＲ）を使用することによって、１２５個のヒト化抗体の重鎖可変領域の遺伝子フラグメントを得た。ＰＣＲ増幅産物を回収し、ゲル電気泳動によって精製した。その後、回収されたＰＣＲ増幅産物（第１ラウンドＰＣＲの生成物）を鋳型として使用し、プライマーＰＴＴ５−ＶＨＦ２／６Ｄ−１１−ＰＴＴ５−ＶＨＲ（その配列を表５に示した）を使用して、第２のラウンドＰＣＲを実施し、第２のＰＣＲ増幅産物を得た（全ＶＨ遺伝子及びシングルペプチドをコードする配列を含む）。第２のＰＣＲ増幅産物を、ＤＮＡ抽出キット（ＴＩＡＮＧＥＮ）によって回収した。次に、第２のＰＣＲ増幅産物及びベクターＰＴＴ５−ＣＨを２つの制限エンドヌクレアーゼＥｃｏＲＩ及びＨｉｎｄＩＩＩによって二重酵素消化に供した。重鎖を発現する組換えベクターＶＨ＋ＣＨ＋ｐＴＴ５を得るために、Ｔ４リガーゼ（ＮＥＢ）を使用して、２つの酵素の切断産物を連結した。連結反応に用いられる条件は、１６℃で４時間の連結である。組換えベクターＶＨ＋ＣＨ＋ｐＴＴ５を大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）株５αに形質転換した。形質転換した大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）を、次にＬＢプレート上に広げ、３７℃で一晩放置した。組換えベクターＶＨ＋ＣＨ＋ｐＴＴ５の配列が正しいことを確実にするために、単一の細菌コロニーをプレートから取り出し、配列決定した。
軽鎖を発現する組換えベクターの構築：ＥｃｏＲＩ酵素切断部位（ＧＡＡＴＴＣ）及びＸｂａｌ酵素切断部位（ＴＣＴｑＡＧＡ）により、軽鎖可変領域及び軽鎖定常領域をコードする遺伝子配列を、軽鎖発現ベクターｐＴＴ５に挿入した。簡潔にいえば、スプライシング重複伸長−ＰＣＲ（ＳＯＥ−ＰＣＲ）法を使用することによって、１２５のヒト化抗体の軽鎖可変領域の遺伝子フラグメントを得た。ＰＣＲ増幅産物を回収し、ゲル電気泳動によって精製した。その後、回収されたＰＣＲ増幅産物（第１ラウンドＰＣＲの生成物）を鋳型として使用し、プライマーＰＴＴ５−ＶＫＦ２／６Ｄ１１−ＰＴＴ５−ＶＫＲ（その配列を表５に示した）を使用して、第２のラウンドＰＣＲを実施し、第２のＰＣＲ増幅産物（全ＶＫ遺伝子及びシングルペプチドをコードする配列を含む）を得た。第２のＰＣＲ増幅産物をＤＮＡ抽出キット（ＴＩＡＮＧＥＮ）によって回収した。軽鎖定常領域遺伝子を含むベクターを鋳型として使用し、プライマーＰＴＴ５−ＣＫ−Ｆ／ＰＴＴ５−ＣＫ−Ｒ（その配列を表５に示した、プライマーＰＴＴ５−ＣＫ−Ｒは、ＸｂａＩ酵素切断部位を含む）を使用して、ＰＣＲ増幅を行い、軽鎖定常領域遺伝子ＣＫを得た。軽鎖定常領域遺伝子ＣＫを回収し、ゲル電気泳動によって精製した。その後、スプライシング重複伸長−ＰＣＲ法を使用することによって、第２のＰＣＲ増幅産物を軽鎖定常領域遺伝子ＣＫに連結し、軽鎖遺伝子全体ＶＫ＋ＣＫを形成した。プライマーＰＴＴ５−ＶＫＦ２及びＰＴＴ５−ＣＫ−Ｒを使用して、遺伝子ＶＫ＋ＣＫを増幅した。遺伝子ＶＫ＋ＣＫ及びベクターｐＴＴ５を２つの制限エンドヌクレアーゼＥｃｏＲＩ及びＸｂａＩによって二重酵素消化に供した。遺伝子ＶＫ＋ＣＫの切断産物をＤＮＡ抽出キット（ＴＩＡＮＧＥＮ）によって回収し、ベクターｐＴＴ５の切断産物をゲル電気泳動によって回収した。Ｔ４リガーゼ（ＮＥＢ）を使用して、遺伝子ＶＫ＋ＣＫの切断産物及びベクターｐＴＴ５を一緒に連結し、それによって、軽鎖を発現する組換えベクターＶＫ＋ＣＫ＋ｐＴＴ５を得た。連結で使用される条件は、１６℃で４時間のライゲーションである。連結反応で使用される条件は、１６℃で４時間のライゲーションである。組換えベクターＶＫ＋ＣＫ＋ｐＴＴ５を大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）株５αに形質転換した。形質転換した大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）を、次にＬＢプレート上に広げ、３７℃で一晩放置した。単一の細菌コロニーをプレートから採取し、組換えベクターＶＫ＋ＣＫ＋ｐＴＴ５の配列が正しいことを確実にするために配列決定した。
３．２：ヒト化抗体の真核生物発現
組換えベクターＶＨ＋ＣＨ＋ｐＴＴ５及びＶＫ＋ＣＫ＋ｐＴＴ５を使用して、（約２×１０６細胞／ｍｌの細胞密度で）ＣＨＯ−Ｓ−懸濁細胞を同時に核酸を導入した。核酸を導入された細胞をＣＯ２インキュベーター中、３２℃で７日間培養し、次に細胞上清を抗体精製のために回収した。製造業者の指示に従って、上清中のＩｇＧ抗体をプロテインＡカラムによって精製した。精製したＩｇＧ抗体をＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分析して、ＩｇＧ抗体の精製を決定した。
３．３：ヒト化抗体の抗原結合活性の決定
ヒト化抗体のＨＢｓＡｇ結合活性を、化学発光法により決定した。簡潔にいえば、ＢＣＡタンパク質定量キットを使用して、精製抗体の濃度を決定し、全ての抗体を２００μｇ／ｍＬの濃度に希釈した。その後、抗体を、２０μｇ／ｍＬから開始して２０％ＮＢＳで３倍に連続希釈し、合計で１２の濃度を得た。次に希釈した抗体を２μｇ／ｍＬのＨＢｓＡｇで被覆された化学発光プレートに添加し、３７℃で１時間インキュベートした。次にＭＡＨ−ＨＲＰ酵素標識二次抗体を添加し、３０分間インキュベートした。インキュベーション後、プレートを洗浄し、発光溶液を加え、光度を決定した。データをＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍによって分析し、その結果を図７Ａ〜７Ｗを示した。図７Ａ〜７Ｗの結果は、全ての試験されたヒト化抗体は、良好な抗原結合活性を有し、抗原ＨＢｓＡｇに対する親和性に関して６Ｄ１１−ｍＡｂ及び６Ｄ１１−ｃＡｂよりも優れているか、６Ｄ１１−Ａｂ及び６Ｄ１１−ｃＡｂに少なくとも匹敵することを示した。これらの結果は、本発明に係るヒト化抗体は、非常に高いヒト化度（９７％まで）を有し、免疫学的拒絶反応の可能性を低減するだけでなく、親マウス抗体の抗原結合活性を実質的に保持するか、又は親マウス抗体よりも高い抗原結合活性さえ示すことを示した。そのような技術的効果は、重要であり、予測できなかった。
良好なＨＢｓＡｇ結合活性を有するヒト化抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ配列を分析した。その分析結果を表７Ａ〜７Ｂに要約した。
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例４：ヒト化抗体の中和活性の決定
マウスモノクロナール抗体６Ｄ１１−ｍＡｂは、ＨＢＶウイルス粒子に特異的に結合し、ＨＢＶの既に分化したＨｅｐａＲＧ細胞への吸着をブロックし、ＨＢＶの細胞への侵入を阻害することができ、これは、ＨＢＶの感染能力の喪失をもたらした。中和抗体が存在しない場合、ＨＢＶは分化したＨｅｐａＲＧ細胞に侵入し、細胞内で複製され、それによって、サンプル中のＨＢＶ抗原（ＨＢｅＡｇ）の高レベルを得た。逆に、中和抗体の存在下では、ＨＢＶの侵入及び複製は、弱毒化又は完全に抑制され、それによってサンプル中のＨＢＶ抗原（ＨＢｅＡｇ）の低いレベルを得た。したがって、ＨＢＶ抗原（ＨＢｅＡｇ）のレベルを決定することによって、異なるヒト化抗体は、ＨＢＶを中和するそれらの能力について決定されることができる。
ＨｅｐａＡＤ３８細胞は、実験室によって調製されたＨＢＶの制御された発現が可能な細胞であった。ＨｅｐａＡＤ３８細胞をＨＢＶを発現させずに増殖させる必要がある場合、ＨＢＶの転写及び複製を阻害するために、テトラサイクリンを、培地に添加することができる。ＨＢＶの発現が必要な場合、ＨＢＶの転写及び複製を開始させるために、テトラサイクリンを含まない培地が使用されることができる。ＨｅｐａＡＤ３８細胞由来の培養上清を分化ＨｅｐａＲＧ細胞と接触させた。その結果は、培養上清はＨＢＶを含み、分化したＨｅｐａＲＧ細胞を効果的に感染することができたことを示した。
ＨｅｐａＲＧ／ＨＢＶ感染モデルを用いて、ヒト化抗体は、１００のＭＯＩでＨＢＶ感染を中和／阻止するそれらの能力を評価した。ヒト化抗体は、１０μｇ／ｍＬから開始して２倍の連続希釈し、合計１０の濃度を得た。細胞を感染させるためのウイルス溶液において、ヒト化抗体の特定の濃度を予め添加しておき、次にウイルス溶液を使用してＨｅｐａＲＧ細胞を感染させた。感染の７日後、細胞培養の上清を採取してそのＨＢｅＡｇレベル（ＨＢＶ感染の成功を示す重要な指標）を決定した。方法は、次の通りであった。
（１）コーティング：抗ＨＢｅＡｇモノクロナール抗体を２０ｍＭ ＰＢ７．４に２μｇ／ｍＬの最終濃度で希釈した。９６ウェルプレートに、希釈した抗ＨＢｅＡｇモノクロナール抗体（１００μｌ／ウェル）を加え、４℃で一晩インキュベートした。使用された材料を、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｗａｎｔａｉ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅ Ｃｏ., ＬＴＤ.から購入した。
（２）洗浄：９６ウェルマイクロプレートをＰＢＳＴで１回洗浄した後、洗浄液を除去した。
（３）ブロッキング：ブロッキング溶液をウェル当たり２００μＬで９６ウェルマイクロプレートに添加した。ブロッキング溶液をＢｅｉｊｉｎｇ Ｗａｎｔａｉ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅ Ｃｏ., ＬＴＤ.から購入した。
（４）インキュベーション：試験サンプルを１００μＬ／ウェルで添加し、３７℃で６０分間インキュベートした。
（５）洗浄：９６ウェルマイクロプレートをＰＢＳＴで５回洗浄した。
（６）インキュベーション：西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗ＨＢｅＡｇ抗体（１００μｌ／ウェル）を添加し、３７℃で３０分間インキュベートした。材料は、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｗａｎｔａｉ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅ Ｃｏ., ＬＴＤ.から購入した。
（７）洗浄：９６ウェルマイクロプレートをＰＢＳＴで５回洗浄した。
（８）発色：化学発光試薬ルミノールを加えた（１００μｌ／ウェル）。
（９）プレート読み取り：化学発光ＥＬＩＳＡ装置を使用することによって、値を読み取った。
例において、以下のヒト化抗体の中和能力を決定した：２４−４０、６−１６、１６２、７−３４−２３９、Ｈ１１／Ｋ１ｖＨ１７／Ｋ１、Ｈ４０／Ｋ１、Ｈ４２／Ｋ１、Ｈ１６２／Ｋ１、Ｄ１１／Ｋ１、Ｄ１６２／Ｋ１、Ｄ２３９／Ｋ１、１１−３、Ｄ１１／４１Ｋ、１６２／４１Ｋ、Ｄ２３９／４１Ｋ、８４、１１０、１１６、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−５６、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１４９、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｐ−６４、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−３２、１６２ｃｃｐ−Ｓ４−Ｎ−８１、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｐ−２７、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｐ−７７、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−４１、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−６９、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−７０、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１０１、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１１１、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１３７、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１４６、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１６０、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−６６及び１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−４５。
実験結果を図８Ａ〜８Ｇに示した。図８Ａ〜８Ｇの結果は、ヒト化抗体２４−４０、６−１６、１６２、７−３４−２３９、Ｈ１１／Ｋ１、Ｈ１７／Ｋ１、Ｈ４０／Ｋ１、Ｈ４２／Ｋ１、Ｈ１６２／Ｋ１、Ｄ１１／Ｋ１、Ｄ１６２／Ｋ１、Ｄ２３９／Ｋ１、１１−３、Ｄ１１／４１Ｋ、１６２／４１Ｋ、Ｄ２３９／４１Ｋ、８４、１１０、１１６、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−５６、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１４９、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｐ−６４、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−３２、１６２ｃｃｐ−Ｓ４−Ｎ−８１、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｐ−２７、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｐ−７７、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−４１、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−６９、１６２ｃｃｐ−Ｓ５−Ｎ−７０、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１０１、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１１１、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１３７、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１４６、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−１６０、１６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−６６及び６２ｃｃｐ−Ｓ６−Ｎ−４５が良好なウイルス中和活性を有し、ＨＢＶ中和活性の点でキメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂより優れており、中和抗体のいくつかは、中和活性の点で６Ｄ１１−ｍＡｂにさえ匹敵することを示した。これらの結果は、本発明に係るヒト化抗体が、非常に高いヒト化度（９７％まで）を有し、免疫学的拒絶反応の可能性を低下させるだけではなく、キメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂよりも高いウイルス中和活性を示すことを示した。そのような技術的効果は、重要であり、予想外であった。
良好なウイルス中和活性を有するヒト化抗体も、それらの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ配列について分析した。分析結果を表８Ａ〜８Ｂに要約した。
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例５：動物におけるヒト化抗体の治療効果の評価
ＨＢＶトランスジェニックマウスを使用して動物におけるヒト化抗体のウイルス除去能力を評価した。ウイルス除去能力は、薬物としての抗体の潜在力を直接反映した。特定の濃度で精製したヒト化抗体を０．２２μｍフィルターでろ過して、滅菌状態を確保した。ヒト化抗体の１０ｍｇ／ｋｇの単回用量をＨＢＶトランスジェニックマウスに尾静脈注射によって投与した。その後、特定の時間に、眼窩後静脈叢から血液を採取して、マウスの血液サンプルを得た。マウス血清中のＨＢｓＡｇレベルを定量した。
５．１：ＨｂｓＡｇの定量
（１）反応プレートの調製：抗ＨＢｓＡｇマウスモノクロナール抗体ＨＢｓ−４５Ｅ９を１×ＰＢ緩衝液で２μ／ｍＬｎｉ希釈し、次にＥＬＩＳＡプレートに添加した。プレートを２〜８℃で１６〜２４時間コーティングし、次に３７℃で２時間コーティングした。その後プレートをＰＢＳＴで１度洗浄した。洗浄後、各ウェルに、２００μＬのブロッキング溶液を添加し、プレートを３７℃で２時間ブロックした。その後、ブロッキング溶液を捨て、プレートを乾燥させ、真空アルミニウムホイルバッグ中にパッケージングし、２〜８℃で使用のために保存した。
（２）サンプル希釈：採取したマウス血清を、定量のために、２０％新生仔ウシ血清を含むＰＢＳで１：３０及び１：１５０、で希釈しした。
（３）サンプルの変性：１５μＬの希釈血清サンプルを７．５μＬの変性緩衝液（１５％ＳＤＳ、２０ｍＭのＰＢ７．４に溶解）と十分に混合し、３７℃で１時間インキュベートした。その後、９０μＬの中和緩衝液（４％のＣＨＡＰＳ、２０ｍＭのＰＢ７．４に溶解）を加え、十分に混合した。
（４）サンプル反応：１００μＬの変性血清サンプルを反応プレートのウェルに添加し、３７℃で１時間インキュベートした。次にプレートをＰＢＳＴで５回洗浄した。
（５）酵素標識抗体との反応：ＨＢｓ−Ａ６Ａ７−ＨＲＰ反応溶液（１００μＬ／ウェル）を反応プレートのウェルに添加し、次に３７℃で１時間インキュベートした。次にプレートをＰＢＳＴで５回洗浄した。
（６）発光反応及び測定；発光基質溶液（１００μＬ／ウェル）を反応プレートのウェルに添加し、光度を測定した。
（７）試験される血清サンプル中のＨＢｓＡｇ濃度の決定：ＨＢｓＡｇの既知の濃度を有する標準を、並行実験で使用した。標準の決定された結果に基づいて、標準曲線がプロットされた（すなわち、測定された光強度に関する線形回帰分析及び標準のＨＢｓＡｇ濃度が実施された）。次に、試験される血清サンプル中のＨＢｓＡｇ濃度を、標準曲線によって計算することができた。
例において、以下のヒト化抗体を動物におけるウイルス除去能力について試験した：２４−４０、７−３４−２３９、１６２、１１−３、１６２／４１Ｋ、１１６、１１０及び１３８。実験結果を、図９Ａ〜９Ｂに示した。
図９Ａ〜９Ｂは、ヒト化抗体２４−４０、７−３４−２３９、１６２、１１−３、１６２／４１Ｋ、１１６、１１０及び１３８は、良好なウイルス除去能力を有し、動物においてＨＢｓＡｇを除去する能力に関してキメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂより優れていたことを示した。これらの結果は、本発明に係るヒト化抗体は、非常に高いヒト化度（９７％まで）を有し、免疫学的拒絶反応の可能性を減少させることができるだけでなく、キメラ抗体６Ｄ１１−ｃＡｂよりも高いウイルス除去能力を示すことを示した。そのような技術的効果は、重要で予想外であった。
良好なウイルス除去能力を有するヒト化抗体をまた、それらの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ配列について分析した。分析結果を、表９Ａ〜９Ｂに要約する。
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例６：ヒト化抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８のドラッガブルの評価
１．ヒト化抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８の等電点の決定
ヒト化抗体１６２の等電点を、毛細血管等電点電気泳動法（ｃＩＥＦ）によって決定した。実験結果を図１０に示した。その結果は、ヒト化抗体１６２は、７．７８（範囲：７．０３〜７．８７）のｐＩ値、０．９９％の塩基性ピーク、５５．８７％のメインピーク、及び４３．１４％の酸性ピークを有したことを示した。
抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８の等電点を決定し、その結果を図１１に示し、等電点は、７．８３〜８．６の範囲であった。抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８の等電点を表１０に要約した。
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２．ヒト化抗体の安定性試験
Ｔｍ値は、一般的には、抗体分子の安定性を記載するために使用される。Ｔｍ値が高いければ高いほど、抗体分子の熱安定性はより良好である。ヒト化抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８は、１ｍｇ／ｍｌに希釈し、示差走査熱分析（ＤＳＣ）により決定した。走査は、２００℃／時間の走査速度で、１０℃の温度で開始し、１１０℃の温度で終わり、冷却速度は、Ｅｘｐとして設定され、装置は、２５℃の温度で最終的に保持し、データ取得頻度は、１０秒であり、キャピラリー温度は、サンプル充填前に３０℃であった。実験結果を図１２、図１３、表１１、及び表１２に示した。結果は、ヒト化抗体１６２について、Ｔｍ開始は、６１．８１℃であり、Ｔｍ１は、７１．２１℃であり、Ｔｍ２は、８４．４８℃であったことを示した；一方、Ｔｍ値は、抗体１１６、１１０、１５３及び１３８について８０℃より高く、抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８は、良好な熱安定性を有することを示した。
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また、ヒト化抗体１６２を、５％スクロース及び０．０２％ＰＳ８０を含む３つの緩衝液（すなわち、緩衝液１は２５ｍＭクエン酸溶液（ｐＨ５．０）；緩衝液２は、２５ｍＭのヒスチジン溶液（ｐＨ６．０）；緩衝液３は２５ｍＭリン酸塩溶液（ｐＨ７．０））中で６０ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解し、次に５℃、２５℃及び４０℃でそれぞれ保存した。０週目（Ｔ０）、１週目（Ｔ１Ｗ）、２週目（Ｔ２Ｗ）及び４週目（Ｔ４Ｗ）にサンプルは、物理化学的特性（外見、ｐＨ値、タンパク質濃度、粒径など）をモニターされた。
外観モニタリング
サンプルボトルをきれに拭き取り、サンプルの色及び透明度を透明度検出器（黒色背景及び白色背景）によって観察した。結果を表１３に示した。表１３は、異なる保存条件下（異なる緩衝液、異なる温度、及び異なる保存期間）でのヒト化抗体１６２の外観の変化を示した。結果は、緩衝液１に溶解されたヒト化抗体１６２は、４０℃で４週間保存後に、乳白色に変化したが、サンプルは、他の保存条件下で有意な変化を示さなかった。
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ｐＨ値及びタンパク質濃度のモニタリング
サンプルの吸光度をＡ２８０で決定し、サンプルのタンパク質濃度を、Ｂｅｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔの法則に従って計算した。また、サンプルのｐＨ値を、ｐＨメーターで測定し、２回の測定の平均値であった。実験結果を図１４Ａ〜１４Ｆに示した。図１４は、異なる保存条件下でｐＨ値の変化（図１４Ａ〜１４Ｃ）及びヒト化抗体１６２のタンパク質濃度（図１４Ｄ〜１４Ｆ）を示した。結果は、ヒト化抗体１６２は、異なる緩衝液中で異なる温度で４週間の保存後、ｐＨ値（図１４Ａ〜１４Ｃ）及びたんぱく質濃度（図１４Ｄ〜図１４Ｆ）の有意な変化を示さなかったことを示した。
抗体の安定性に関するＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析
異なる時間、３７℃及び４０℃で保存された抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８を非還元及び還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析に供し、非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルにおいて、ポリアクリルアミドの濃度は１０％であり、還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルにおいて、ポリアクリルアミドの濃度は１２％であった。実験結果を図１５に示した。エレクトロフェログラムから見られるように、バンドは、実質的に安定であり、保存後２週間以内に有意な分解及び凝集は起こらなかった。
粒径分析及びＳＥＣ−ＨＰＬＣアッセイ
異なる条件下で保存されたヒト化抗体１６２のサンプルにおいて、分子ポリマーの粒径を、ＤＬＳによって分析した。簡潔には、バイオセーフティキャビネットで、４０μｌのサンプルをマイクロピペットを使用することによってＮａｎｏ ＺＳ粒径分析のサンプル細胞に加え、次にＮａｎｏ ＺＳ粒度分析器で試験した。実験データを分析し、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏソフトウェアによって処理した。実験結果を図１２Ｇ〜１２Ｉに示した。結果は、異なる温度（５℃、２５℃及び４０℃）で保存され、緩衝液２（ｐＨ６．０）に溶解されたヒト化抗体１６２は、最小の流体力学的直径を有し；５℃で、異なる緩衝液中に溶解されたヒト化抗体１６２は、流体力学的直径に有意な変化を示さなかったが、２５℃及び４０℃で、ヒト化抗体１６２は、流体力学的直径が時間と共に増加した。また、４０℃で、緩衝液２（ｐＨ６．０）中に溶解されたヒト化抗体１６２の粒径は、４週目で実質的に飽和し、約１６ｎＭであった。これらの結果は、異なる緩衝液中に溶解されたヒト化抗体１６２が、５℃で安定であったことを示し；緩衝液１及び３と比較して、緩衝液２（ｐＨ６．０）中に溶解したヒト化抗体１６２は、より安定であった。
Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ ｉｎｆｉｎｉｔｙ、ＴＳＫ Ｇ３０００ＳＷＸＬゲルカラム（５μｍ、７．８ｍｍ×３００ｍｍ）を使用するＳＥＣ−ＨＰＬＣによって、異なる条件で保存されたヒト化抗体１６２のサンプルを、分析し、ここで、移動相は、５０ｍＭのＰＢ及び３００ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．０±０．２；流速は、１．０ｍＬ／分であり；検出波長は２８０ｎｍであり；試料濃度は、１０ｍｇ／ｍｌであり、注入量は１０μｌであった。実験結果を図１２Ｊ〜１２Ｌに示した。結果は、異なる保存条件下（異なる緩衝液、異なる温度、及び異なる保存期間）で、ヒト化抗体１６２を含有するサンプルが８５％を超えるメインピークを有した。これは、ヒト化抗体１６２が安定であることを示した。
３．ヒト化抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８の溶解度の分析
ヒト化抗体１６２を、５％スクロース及び０．０２％ＰＳ８０（ｐＨ６．０、緩衝液２）を含む２５ｍＭのヒスチジン溶液に６０ｍ／ｍｌの濃度で溶解し、遠心限外ろ過（５℃の遠心分離温度で、４８５０ｒｐｍの回転速度）によって、遠心分離の時間の増加に伴ってサンプル溶液の液体レベルが、著しく低下しなくなるまで遠心分離した。サンプルをマイクロピペッターで注意深く回収し、サンプルを観察した。結果は、溶液サンプルが黄色であることを示した。
次に、１０００μＬの溶液サンプルを、１．５ｍｌのＥＰチューブに移し、１００００ｒｐｍで２０分間遠心分離した。遠心分離の結果は、サンプルの層化は起こらず、液体は、透明であり、沈殿物は現われなかったことを示した。サンプルの上部及び下部を、マイクロピペッターで注意深く描き、タンパク質濃度をＵＶ２８０で決定した。その結果は、抗体１６２のサンプルの上部溶液は、１７１．８１ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度を有し、下部溶液は、１８８．６１ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度を有したことを示した。上部溶液のタンパク質濃度を、緩衝系におけるヒト化抗体１６２の溶解度として使用した（すなわち、溶解度は、１７１．８１ｍｇ／ｍｌであった）。抗体１１６の溶解度は１８５．９９ｍｇ／ｍｌであり；抗体１１０の溶解度は、１４４．２７ｍｇ／ｍｌであり；抗体１５３の溶解度は、１５９．８７ｍｇ／ｍｌであった。
さらに、５％スクロース及び０．０２％ＰＳ８０を含む２５ｍＭヒスチジン溶液（ｐＨ６．０、緩衝液２）中に溶解したヒト化抗体の粘度を測定した。測定結果を図１６及び図１７に示した。結果は、緩衝系において、ヒト化抗体１６２は、１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で９．６６ｃｐ（１ｃＰ＝１ｍＰａ．ｓ）の粘度を有し、１６０ｍｇ／ｍｌの濃度で１１．７３ｃｐの粘度を有したことを示した。抗体１１６は、その最も高い溶解度で１２．３７ｃｐの粘度を有し；抗体１１０は、その最も高い溶解度で６．６ｃｐの粘度を有し；抗体１５３は、その最も高い溶解度で８．５４ｃｐの粘度を有した。
抗体１１６は、その最も高い溶解度で１２．３７ｃｐの粘度を有し；抗体１１０は、その最も高い溶解度で６．６ｃｐの粘度を有し；抗体１５３は、その最も高い溶解度で８．５４ｃｐの粘度を有した。
巨大分子（＞２０００ダルトン）の投与を含むいずれの実験を経験しなかった９匹のオスのカニクイザルを３グループ、３匹のサル／グループに分けた。ＣＨＯ細胞（ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ）によって発現されるＨＢｓＡｇの溶液は、静脈内注射によって、３ｍｇ／ｋｇの用量でグループ１のカニクイザルに投与した。ヒト化抗体１６２の溶液を、静脈内注射によって２０ｍｇ／ｋｇの用量でグループ２のカニクイザルに投与した。静脈内注射により、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの溶液を、グループ３のカニクイザルに３ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、１０分後に、ヒト化抗体１６２の溶液を２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及びヒト化抗体１６２をカニクイザルに単回静脈内注射した後、薬物動態学的特性の評価及び毒性に関する予備試験を行った。特定の実験デザインは、以下の通りであった（表１４）：
Figure 0006949012
巨大分子（＞２０００ダルトン）の投与を含む、いずれの実験を経験しなかった２７匹のオスのカニクイザルを、９グループ、３匹のサル／グループに分けた。ＣＨＯ細胞（ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ）によって発現されたＨＢｓＡｇの溶液を、グループ９のカニクイザルに静脈内注射によって３ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。ヒト化抗体１１６、１１０、１５３及び１３８の溶液を、静脈内注射によって２０ｍｇ／ｋｇの用量でグループ１、３、５及び７のカニクイザルにそれぞれ投与した。静脈内注射で、グループ２、３、６及び８のカニクイザルに、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの溶液を３ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、１０分後、ヒト化抗体１１６、１１０及び１５３の溶液を、それぞれ２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。カニクイザルへのＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及びヒト化抗体の単回静脈内注射の後に、薬物動態学的特性の評価及び毒性に関する予備研究を行った。特定の実験デザインは、以下の通りである（表１５）：
Figure 0006949012
投与前（０時間）、実験動物の健康状態及び外観状態を２回観察した（午前９時３０分と午後４時）。実験前に、実験動物を動物の健康状態を確認するために身体検査に供した。投与の日には、一般的な状態、行動、活動量、排泄、呼吸及び他の異常症状を含む、各採血点の前後で実験動物の状態を観察した。結果は、投与中及び投与後に何らかの異常な反応を示した動物はいなかった（注：投与速度が比較的速い（注入時間は約１分であった）ため、薬物溶液は、比較的低温（３７℃まで加熱しないため）、グループ１の実験動物Ｐ１００１は、投与後短時間不快感を示し；一方、約３分間（注射前に３７℃に加熱した）薬物溶液の注射を受けた他の実験動物は、逆説的な反応は見られなかった）。
また、投与後、実験動物の体重及び体温をモニターした。結果を表１６〜１８に示した。
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
実験結果は、実験動物にヒト化抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８を投与後、実験動物に有害な副作用が生じず、これにより、ヒト化抗体１６２、１１６、１１０、１５３及び１３８の良好な安全性が実証されたことを示す。
また、投与前（０時間）、及び投与後０．２５時間（１５分）、０．５時間（３０分）、１時間、２時間、４時間、１０時間、２４時間（１日目）、４８時間（２日目）、７２時間（３日目）、９６時間（４日目）、１４４時間（６日目）、１９２時間（８日目）、２４０時間（１０日目）、３３６時間（１４日目、Ｐ００１以外の実験動物について、３６０時間（１５日目、実験動物Ｐ１００１について）、４０８時間（１７日目）、５０４時間（２１日目）及び６７２時間（２８日目）の実験動物の頭部静脈から約１．０ｍＬの全血を採取した。採取した血清及び全血を以下のアッセイに供した。
化学発光イムノアッセイ（ＣＬＩＡ）を用いて、カニクイザルの血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及びヒト化抗体１６２の濃度を決定した。血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの定量のより低い限界（ＬＬＯＱ）は、０．０３７ｎｇ／ｍＬであり、定量のより上の限界（ＵＬＯＱ）は、２０ｎｇ／ｍＬであった。血清中のヒト化抗体１６２の定量のより低い限界（ＬＬＯＱ）は、０.０６３ｎｇ／ｍＬであり、定量のより上の限界（ＵＬＯＱ）は、４．０ｎｇ／ｍＬであった。その検出結果を図１８〜２２に示した。
図１８は、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び／又はヒト化抗体１６２の単回静脈注射後、異なるグループからオスのカニクイザルの血清におけるＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及びヒト化抗体１６２の平均血中濃度対時間の曲線を示した。
図１９は、３ｍｇ／ｋｇの用量で、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの単回静脈投与後の各カニクイザル（グループ１）対時間の血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの血中濃度の曲線を示した。
図２０は、２０ｍｇ／ｋｇの用量でヒト化抗体の単回静脈注射後、各カニクイザル（グループ２）対時間の血清中のヒト化抗体１６２の血中濃度の曲線を示した。
図２１は、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１６２の投与後の各カニクイザル（グループ３）の血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの血中濃度対時間の曲線を示した。
図２２は、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１６２の投与後の各カニクイザル（グループ３）の血清中のヒト化抗体１６２の血中濃度対時間の曲線を示した。
薬物動態ソフトウェアＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（商標）バージョン６．２．１（Pｈａｒｓｉｇｈｔ, Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ, ＣＡ）を使用することによって、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及びヒト化抗体１６２の実験データを、静脈内注射の非コンパートメントモデル（ＩＶボーラス入力）で処理した。
図２３は、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１１６、１１０又は１５３の投与後の各カニクイザル（グループ３）対時間の血清中のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの平均血中濃度の曲線を示した。
図２４は、２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１１６、１１０又は１５３の投与後の各グループのカニクイザルの血清中のヒト化抗体１１６、１１０及び１５３の血中濃度対時間の曲線を示した。
図２５は、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１１６、１１０又は１５３の投与後、各グループのカニクイザルの血清中のヒト化抗体の血中濃度対時間の曲線を示した。
以下のパラメーターは、対数線形台形法を用いて計算した：濃度（Ｃ０）中最初の血清、最後の検出可能時点（Ｔｌａｓｔ）、排出半減期（Ｔ１／２）、見かけの分布用量（Ｖｄｓｓ）、総クリアランス（ＣＬ）、時点０から最終時点までの平均滞留時間（ＭＲＴ０−ｌａｓｔ）、時点０から無限大までの平均滞留時間（ＭＲＴ０−ｉｎｆ）、時間点０から濃度が検出可能な最終時点までの平均滞留時間（ＭＲＴ０−ｌａｓｔ）、時点０から濃度が検出可能である最終時点からの血清濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ０−ｌａｓｔ）、及び時点０から無限大までの血清濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ０−ｉｎｆ）。
結果は、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの単回静脈注射後、オスのカニクイザル（グループ１）は、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの０．５３５±０．０１８８ｍＬ／分／ｋｇのＣＬを有した（これは、肝血流量の約１．２３％を占めた）。カニクイザルは、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの２１．６±０．７２３時間の平均消失半減期（ｔ１／２）を有した。カニクイザルの血清において、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇのＶｄｓｓ及びＡＵＣ０−ｉｎｆは、それぞれ、０．４３０±０．０３４４Ｌ／ｋｇ及び９３２３ｎｇ．ｈ／ｍＬであった。
比較すると、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１６２を組み合わせて投与後、オスのカニクイザル（グループ３）は、それぞれ２．０９±０．６０３ｍＬ／分／ｋｇに増加したＣＨＯ−ＨＢｓＡｇの総クリアランス（ＣＬ）（これは、肝臓血流の約４．７９％を占める）、２４．７±１．０４時間の平均排出半減期（ｔ１／２）、０．３５７±０．０７７８Ｌ／ｋｇの見かけ上の分布容積及び２５５６７±８７４１ｎｇ．ｈ／ｍＬのＡＵＣ０−ｉｎｆを有した。
結果はまた、２０ｍｇ／ｋｇの用量でヒト化抗体１６２の単回静脈投与後、オスのカニクイザルは、ヒト化抗体１６２について６．３０±１．５０ｍＬ／分／ｋｇのＣＬを有した（これは、肝臓血流の約１４．４％を占めた）。ヒト化抗体１６２は、１５８±５２．７時間の平均排出半減期（ｔ１／２）を有した。カニクイザルの血清において、ヒト化抗体１６２は、それぞれ８０．４±１２．６Ｌ／ｋｇ及び５４９６７±１３０７７μｇ．ｈ／ｍＬのＶｄｓｓ及びＡＵＣ０−ｉｎｆ値を有した。
比較として、３ｍｇ／ｋｇの用量のＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量のヒト化抗体１６２を組み合わせて投与後、オスのカニクイザル（グループ３）は、ヒト化抗体１６２について１１．１±１．０９ｍＬ／分／ｋｇに増加した総クリアランス（ＣＬ）、８７．６±１０２時間の平均除去半減期（ｔ１／２）、１０９±６０．４Ｌ／ｋｇの見かけ上の分布容積、３０２００±３１００μｇ．ｈ／ｍＬのＡＵＣ０− ｉｎｆを有した。したがって、グループ３のオスのカニクイザルにおいて、ヒト化抗体１６２のＣ０、ＡＵＣ０− ｉｎｆ及びＣＬ値は、それぞれグループ２のものの０．８６７、０．５４９及び１．７６倍であった。
上記の実験結果も表１９、表２０及び表２１にまとめた。
Figure 0006949012
Figure 0006949012
Figure 0006949012
また、カニクイザルの血清を定期的血液検査及び化学分析に供した。カニクイザルの血清中の指標（ビリルビン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、総タンパク質、アルブミン、アルカリホスファターゼ、γ−グルタルタミルトランスフェラーゼ、グルコース、尿酸、クレアチニン、カルシウムイオン、リン、総コレステロール、トリグリセリン、ナトリウムイオン、塩化物イオン、グロブリンなど）のレベルを含む）において、明らかな異常は、観察されなかった。これらの実験結果は、ＣＨＯ−ＨＢｓＡｇ及びヒト化抗体１６２、１１６、１１０及び１５３の単回静脈内注射が特定の用量で安全であったことを示した。したがって、本発明に係るヒト化抗体１６２、１１６、１１０及び１５３は、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患（例えば、Ｂ型肝炎）を予防及び／治療するために、対象（例えば、ヒト）に投与されることができる。
本発明の態様は、詳細に説明してきたが、当業者は、開示された全ての教示によれば、詳細を補正し、修正することができ、これらの変更は全て、本発明の保護範囲に入ることを理解するであろう。本発明の全範囲は、添付の特許請求の範囲及びそのご任意の等価物によって定義される。
Figure 0006949012
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Figure 0006949012

Claims (11)

  1. 以下を含むＨＢｓＡｇに特異的に結合することができる、抗体又はその抗原結合フラグメント：
    （ａ）以下からなる群から選択される重鎖可変領域（ＶＨ）の３個の相補性決定領域（ＣＤＲ）：
    （ｉ）以下の配列：配列番号３、又は１もしくは２個の下記群から選択される置換によって配列番号３と異なる配列からなるＶＨ ＣＤＲ１；
    （０１）Ｈ３１のＲ又はＹ；及び
    （０２）Ｈ３２のＷ；
    （ｉｉ）以下の配列：配列番号４、又は１、２、３もしくは４個の下記群から選択される置換によって配列番号４と異なる配列からなるＶＨ ＣＤＲ２、
    （１２）Ｈ５６のＴ；
    （１３）Ｈ５７のＶ又はＮ；
    （１４）Ｈ５８のＬ；
    （１８）Ｈ６４のＫ；及び
    （１９）Ｈ６５のＳ
    及び
    （ｉｉｉ）以下の配列：配列番号５；ならびに
    （ｂ）以下からなる群から選択される軽鎖可変領域（ＶＬ）の３個のＣＤＲ：
    （ｉｖ）以下の配列：配列番号６、又は１もしくは２個の下記群から選択される置換によって配列番号６と異なる配列からなるＶＬ ７ ＣＤＲ１、
    （２９）Ｌ２７のＰ又はＴ；
    （３２）Ｌ３０のＳ又はＮ；
    （ｖ）以下の配列：配列番号７からなるＶＬ ＣＤＲ２、及び
    （ｖｉ）以下の配列：配列番号８からなるＶＬ ＣＤＲ３；
    上記アミノ酸の位置はＫａｂａｔの付番方法に従うものであり、
    該抗体は以下を含む：
    （４）配列番号７２に記載のＶＨ及び配列番号２０１に記載のＶＬ；
    （８）配列番号６９に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
    （１０）配列番号７３に記載のＶＨ及び配列番号２０２に記載のＶＬ；
    （１６）配列番号９１に記載のＶＨ及び配列番号２０５に記載のＶＬ；
    （１８）配列番号３６に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；
    （１９）配列番号３６に記載のＶＨ及び配列番号１８９に記載のＶＬ；
    （２７）配列番号２０に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ；又は
    （４９）配列番号４１に記載のＶＨ及び配列番号１８７に記載のＶＬ。
  2. 抗体又はその抗原結合フラグメントが、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖフラグメント、ダイアボディ、二重特異性抗体、及び多特異性抗体からなる群から選択される、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
  3. 抗体又はその抗原結合フラグメントが、ＩｇＧアイソタイプの抗体であるか又はその抗原結合フラグメントである、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
  4. 抗体又はその抗原結合フラグメントが、標識されている、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
  5. 請求項１〜４のいずれかに記載の抗体、又はその重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域、又はそれらの抗原結合フラグメントをコードする、単離された核酸分子。
  6. 請求項５に記載の核酸分子を含むベクター。
  7. 請求項５に記載の核酸分子又は請求項６に記載のベクターを含む宿主細胞。
  8. 請求項７に記載の宿主細胞を抗体又はその抗原結合フラグメントの発現を可能にする条件下で培養し、培養宿主細胞の培養から抗体又はその抗原結合フラグメントを回収することを含む、請求項１〜４のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメントを調製する方法。
  9. 請求項１〜４のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、及び薬学的に許容可能な担体及び／又は添加剤を含む、医薬組成物。
  10. 対象におけるＨＢＶ感染又はＨＢＶ感染に関連する疾患の予防又は治療における使用のための、インビトロ又は対象におけるＨＢＶ病原性の中和での使用のための、及び／又は対象におけるＨＢＶ ＤＮＡ及び／又はＨＢｓＡｇの血清レベルを低下させる使用のための、請求項１〜４のいずれかに記載の抗体若しくはその抗原結合フラグメント又は請求項９に記載の医薬組成物。
  11. 以下を満たす請求項１０に記載の抗体若しくはその抗原結合フラグメント:
    （ｉ）ＨＢＶ感染に関連する疾患がＢ型肝炎である；及び／又は
    （ｉｉ）対象がヒトである。
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