JP6944606B1 - Manufacturing method of cosmetic composition - Google Patents
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Abstract
【課題】コラーゲンが豊富に含まれたプラセンタエキスを含み、機能性に優れた化粧料組成物及び化粧料組成物の製造方法を提供する。【解決手段】本発明を適用した化粧料組成物の一例である化粧水は、全量基準で重量比率が、精製水：３０〜９５％、コラーゲン含有プラセンタエキス：０．０５〜０．８％（ｖ／ｖ）、多価アルコール：０．１〜５０％、エステル油：適量（０〜５％、無配合の場合もある）、界面活性剤：適量、クエン酸：適量、カルボキシビニルポリマー：適量（下限０．１％）、水酸化ナトリウム：適量、植物エキス：適量（下限０．１％）防腐剤：適量、を含む組成を有している。また、ここで示す化粧水は、全量基準で、０．０００００７５〜０．０００１２％（ｗ／ｖ）の濃度となる上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含んでいる。【選択図】図３PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a cosmetic composition containing a placenta extract rich in collagen and having excellent functionality, and a method for producing the cosmetic composition. SOLUTION: The cosmetic water, which is an example of a cosmetic composition to which the present invention is applied, has a weight ratio of purified water: 30 to 95% and collagen-containing placenta extract: 0.05 to 0.8% (based on the total amount). v / v), polyhydric alcohol: 0.1 to 50%, ester oil: appropriate amount (0 to 5%, may not be blended), surfactant: appropriate amount, citric acid: appropriate amount, carboxyvinyl polymer: appropriate amount It has a composition containing (lower limit 0.1%), sodium hydroxide: appropriate amount, plant extract: appropriate amount (lower limit 0.1%), preservative: appropriate amount. In addition, the lotion shown here contains epidermal growth factor (EGF) having a concentration of 0.0000075-0.00012% (w / v) on a total amount basis. [Selection diagram] Fig. 3
Description
本発明は化粧料組成物の製造方法に関する。詳しくは、コラーゲンが豊富に含まれたプラセンタエキスを含み、機能性に優れた化粧料組成物の製造方法に係るものである。 The present invention relates to a method for producing a cosmetic composition. More specifically, the present invention relates to a method for producing a cosmetic composition containing a placenta extract rich in collagen and having excellent functionality.
従来、化粧水、乳液、ジェル等の化粧料に対して、皮膚の黒化や色素沈着によるしみ、そばかす等を改善するための美白効果、また、しみやたるみの予防のための保湿効果や抗酸化効果を付与させることが行われており、種々の原料が化粧料に配合されている。 Conventionally, for cosmetics such as lotions, milky lotions, and gels, it has a whitening effect to improve darkening of the skin, stains due to pigmentation, freckles, etc., and a moisturizing effect and anti-sag to prevent stains and sagging. It is used to impart an oxidizing effect, and various raw materials are blended in cosmetics.
また、皮膚は、常に外界にさらされており、加齢とともにシワ、タルミ、くすみ、色素沈着などの老化現象が生じる。特に、シワやタルミといった形態変化は、真皮マトリックスの９０％以上を占めるコラーゲンによる影響が大きいと考えられている。 In addition, the skin is constantly exposed to the outside world, and aging phenomena such as wrinkles, tarmi, dullness, and pigmentation occur with aging. In particular, morphological changes such as wrinkles and tarmi are considered to be greatly affected by collagen, which accounts for 90% or more of the dermis matrix.
このコラーゲンの量は、加齢と共に減少し、コラーゲンの減少で真皮構造の形成が不完全になるため、皮膚が衰え、シワ、タルミの大きな要因の一つとなっている。 The amount of this collagen decreases with aging, and the decrease in collagen causes incomplete formation of the dermis structure, resulting in weakening of the skin, which is one of the major causes of wrinkles and tarmi.
また、コラーゲン量の減少の原因としては、真皮の線維芽細胞によるコラーゲンの産生能の低下が挙げられ、その結果、皮膚のシワやタルミが発生する。 In addition, the cause of the decrease in the amount of collagen is a decrease in the ability of collagen production by fibroblasts in the dermis, and as a result, wrinkles and tarmi of the skin occur.
そこで、コラーゲン産生を促進する素材を天然物から探索する試みがなされ、植物の抽出物やその成分の他、種々の物質にコラーゲン産生促進作用があることがこれまでに報告されている。 Therefore, an attempt has been made to search for a material that promotes collagen production from natural products, and it has been reported so far that various substances other than plant extracts and their components have a collagen production promoting effect.
また、コラーゲンそのもの、または、加水分解コラーゲンにも、線維芽細胞増殖効果や、コラーゲン産生作用があることが知られている。 Further, it is known that collagen itself or hydrolyzed collagen also has a fibroblast proliferation effect and a collagen producing effect.
また、コラーゲン産生促進作用を有する原料の他に、化粧料に、美白効果を始め、多くの有用な機能を付与する原料として、プラセンタエキス（胎盤抽出物）が注目されている。 In addition to the raw material having a collagen production promoting action, placenta extract (placenta extract) is attracting attention as a raw material that imparts many useful functions such as a whitening effect to cosmetics.
このプラセンタエキスは、内分泌調整作用、強肝・解毒作用、免疫賦活作用、自律神経作用、血行促進・造血作用の効果を有している。また、美容的な側面として、抗炎症作用による肌荒れ等の改善、抗酸化作用による美白効果、新陳代謝の促進、更に肌の老化を回復させるというように、非常に多くの機能を有している。 This placenta extract has endocrine regulating action, strong liver / detoxification action, immunostimulatory action, autonomic nervous action, and blood circulation promoting / hematopoietic action. In addition, as a cosmetic aspect, it has a great many functions such as improvement of rough skin due to anti-inflammatory action, whitening effect due to antioxidant action, promotion of metabolism, and recovery of skin aging.
また、化粧料において、プラセンタエキスが有する美白効果等を向上させるために、種々の検討がなされており、例えば、特許文献１に記載のプラセンタエキスを含有した化粧料組成物が提案されている。 Further, in cosmetics, various studies have been made in order to improve the whitening effect of the placenta extract, and for example, a cosmetic composition containing the placenta extract described in Patent Document 1 has been proposed.
この特許文献１に記載の化粧料組成物では、プラセンタエキスとハトムギをリポソームに封入した原料が用いられている。 In the cosmetic composition described in Patent Document 1, a raw material in which placenta extract and Coix seeds are encapsulated in liposomes is used.
しかしながら、特許文献１に開示された化粧料組成物をはじめ、従前のプラセンタエキスを原料とする化粧料では、プラセンタエキスそのものに含まれるコラーゲンの含量が少なく、コラーゲンに由来する線維芽細胞増殖効果や、コラーゲン産生作用を向上させる点で、更なる改良が望まれている。 However, conventional cosmetics made from placenta extract, such as the cosmetic composition disclosed in Patent Document 1, have a low collagen content in the placenta extract itself, and have a fibroblast proliferation effect derived from collagen. Further improvement is desired in terms of improving the collagen-producing action.
本発明は、以上の点に鑑みて創案されたものであり、コラーゲンが豊富に含まれたプラ
センタエキスを含み、機能性に優れた化粧料組成物の製造方法を提供することを目的とする。
The present invention has been devised in view of the above points, and an object of the present invention is to provide a method for producing a cosmetic composition containing a placenta extract rich in collagen and having excellent functionality.
上記の目的を達成するために、本発明の化粧料組成物は、プラセンタエキスと、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含有し、前記プラセンタエキスは、同プラセンタエキスの総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上であるように構成されている。 In order to achieve the above object, the cosmetic composition of the present invention contains placenta extract and epidermal growth factor (EGF), and the placenta extract has the total nitrogen concentration (w / v) of the placenta extract. It is configured so that the per-hydroxyproline concentration (w / v) is 0.47 or more.
ここで、プラセンタエキスが、プラセンタエキスの総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上であることによって、原料となるプラセンタエキスに、コラーゲンが多く含まれるものとなる。まず、ヒドロキシプロリンは、コラーゲンの主要な成分であると共に、コラーゲンに特徴的にみられるアミノ酸の一種であり、ヒドロキシプロリン量はコラーゲン含有量の指標とされている。そのため、プラセンタエキスの総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリンの濃度（ｗ／ｖ）が高ければ、プラセンタエキス中のコラーゲンの濃度が高いものと判断することができる。また、プラセンタエキスの総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上とは、従前の市販のプラセンタエキスにおけるヒドロキシプロリンの濃度よりも高く、充分な量のコラーゲンを含んでいる。この結果、プラセンタエキスにおける、コラーゲンに由来する線維芽細胞増殖効果や、コラーゲン産生作用を高めることができる。 Here, the placenta extract contains a large amount of collagen as a raw material because the hydroxyproline concentration (w / v) per total nitrogen concentration (w / v) of the placenta extract is 0.47 or more. It becomes a thing. First, hydroxyproline is a major component of collagen and is one of the amino acids characteristically found in collagen, and the amount of hydroxyproline is used as an index of collagen content. Therefore, if the concentration of hydroxyproline (w / v) per the total nitrogen concentration (w / v) of the placenta extract is high, it can be determined that the concentration of collagen in the placenta extract is high. Further, the hydroxyproline concentration (w / v) per total nitrogen concentration (w / v) of the placenta extract is 0.47 or more, which is higher than the concentration of hydroxyproline in the conventional commercially available placenta extract, which is a sufficient amount. Contains collagen. As a result, the collagen-derived fibroblast proliferation effect and collagen-producing effect of the placenta extract can be enhanced.
また、プラセンタエキスと、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含有することによって、各々の成分を単独で配合する組成と比べて、化粧料組成物における線維芽細胞増殖効果を相乗的に高めることができる。 In addition, by containing the placenta extract and epidermal growth factor (EGF), the fibroblast proliferation effect in the cosmetic composition can be synergistically enhanced as compared with the composition in which each component is blended alone. ..
また、プラセンタエキスの濃度が０．０２５ｖ／ｖ％〜１．０ｖ／ｖ％の範囲内であり、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の濃度が０．０００００３７５ｗ／ｖ％〜０．０００１５ｗ／ｖ％の範囲内である場合には、一層、化粧料組成物における線維芽細胞増殖効果を高めることができる。また、化粧料が呈色することを抑止できる。 Further, the concentration of placenta extract is in the range of 0.025 v / v% to 1.0 v / v%, and the concentration of epidermal growth factor (EGF) is 0.00000375 w / v% to 0.00015 w / v%. When it is within the range, the fibroblast proliferation effect in the cosmetic composition can be further enhanced. In addition, it is possible to prevent the cosmetic from coloring.
また、一方で、プラセンタエキスの濃度が０．０２５ｖ／ｖ％未満の場合には、化粧料組成物における線維芽細胞増殖効果は向上するものの、効果が高められる程度が小さくなる。また、プラセンタエキスの濃度が１．０ｖ／ｖ％を超える場合には、プラセンタエキスに由来する呈色が化粧料に表れやすくなり、化粧料の色として需要がある透明や白色の化粧料への適用を考慮した場合、原料として採用しにくくなってしまう。 On the other hand, when the concentration of the placenta extract is less than 0.025 v / v%, the fibroblast proliferation effect in the cosmetic composition is improved, but the degree of the effect is reduced. In addition, when the concentration of the placenta extract exceeds 1.0 v / v%, the coloration derived from the placenta extract is likely to appear in the cosmetics, and the transparent or white cosmetics that are in demand as the color of the placenta are used. Considering the application, it becomes difficult to use it as a raw material.
また、一方で、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の濃度が０．０００００３７５ｗ／ｖ％未満の場合には、化粧料組成物における線維芽細胞増殖効果は向上するものの、効果が高められる程度が小さくなる。また、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の濃度が０．０００１５ｗ／ｖ％を超える場合には、化粧料組成物における線維芽細胞増殖効果は向上するものの、より低い濃度と比べて、効果が高められる程度が頭打ちとなり、使用する上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）のコストが上昇するため好ましくない。 On the other hand, when the concentration of epidermal growth factor (EGF) is less than 0.00000375 w / v%, the fibroblast proliferation effect in the cosmetic composition is improved, but the degree of the effect is reduced. .. Further, when the concentration of epidermal growth factor (EGF) exceeds 0.00015 w / v%, the fibroblast proliferation effect in the cosmetic composition is improved, but the effect is enhanced as compared with the lower concentration. It is not preferable because the degree reaches a plateau and the cost of epidermal growth factor (EGF) used increases.
また、プラセンタエキスの濃度が０．２ｖ／ｖ％〜０．８ｖ／ｖ％の範囲内である場合には、より一層顕著に、化粧料組成物における線維芽細胞増殖効果を高めることができる。 Further, when the concentration of the placenta extract is in the range of 0.2 v / v% to 0.8 v / v%, the fibroblast proliferation effect in the cosmetic composition can be enhanced even more remarkably.
また、プラセンタエキスはウマ胎盤由来である場合には、化粧料組成物の原料として使用しうるプラセンタエキスとすることができる。 When the placenta extract is derived from horse placenta, it can be a placenta extract that can be used as a raw material for a cosmetic composition.
また、上記の目的を達成するために、本発明の化粧料組成物の製造方法は、解凍したウマ胎盤またはブタ胎盤を、前記解凍の際に出る血液と混合して、熱水で処理する熱水抽出工程と、前記熱水抽出工程を経た抽出処理物を、６０度〜７０度の範囲内の温度で、パパインを用いて酵素消化する消化反応工程とを有する、プラセンタエキス製造工程と、該プラセンタエキス製造工程で得られたプラセンタエキスであり、その総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上であるプラセンタエキスと、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を混合する混合工程とを備える。 Further, in order to achieve the above object, the method for producing a cosmetic composition of the present invention is a method of mixing thawed horse placenta or porcine placenta with blood produced during the thawing and treating with hot water. A placenta extract manufacturing step comprising a water extraction step and a digestion reaction step of enzymatically digesting the extracted product that has undergone the hot water extraction step at a temperature in the range of 60 ° C. to 70 ° C. using papain, and the placenta extract manufacturing step. Placenta extract obtained in the placenta extract manufacturing process, the placenta extract having a hydroxyproline concentration (w / v) of 0.47 or more per total nitrogen concentration (w / v), and epithelial cell growth factor (EGF). It is provided with a mixing step of mixing.
ここで、熱水抽出工程で、解凍したウマ胎盤またはブタ胎盤を、解凍の際に出る血液と混合して、熱水で処理することによって、ウマ胎盤またはブタ胎盤から、水溶性のコラーゲン成分を効率良く抽出することができる。即ち、後の消化反応工程で生じる、酵素抽出物と残渣との間で、酵素抽出物側に含まれるコラーゲン成分を増やし、消化効率を高めることができる。なお、ここでいう熱水とは、例えば、８０℃程度の高温の水を含むものである。 Here, in the hot water extraction step, the thawed horse placenta or pig placenta is mixed with the blood produced during thawing and treated with hot water to obtain a water-soluble collagen component from the horse placenta or pig placenta. It can be extracted efficiently. That is, the collagen component contained in the enzyme extract side can be increased between the enzyme extract and the residue generated in the subsequent digestion reaction step, and the digestion efficiency can be improved. The hot water referred to here includes, for example, high-temperature water of about 80 ° C.
また、消化反応工程で、熱水抽出工程を経た抽出処理物を、６０度〜７０度の範囲内の温度で、パパインを用いて酵素消化することによって、熱水抽出工程を経た抽出処理物を、酵素反応により溶かし、酵素抽出物と残渣に分けることができる。また、水溶性のコラーゲン成分を含む酵素抽出物を得ることができる。また、パパインは耐熱性のある酵素であることから、前工程の熱水抽出工程において高温で処理された抽出処理物について、温度を高く保ったまま、安定して酵素反応に供することができる。 Further, in the digestion reaction step, the extracted processed product that has undergone the hot water extraction step is enzymatically digested with papain at a temperature in the range of 60 ° C. to 70 ° C. to obtain the extracted processed product that has undergone the hot water extraction step. , It can be dissolved by an enzymatic reaction and separated into an enzyme extract and a residue. In addition, an enzyme extract containing a water-soluble collagen component can be obtained. Further, since papain is a heat-resistant enzyme, the extracted product treated at a high temperature in the hot water extraction step of the previous step can be stably subjected to an enzyme reaction while keeping the temperature high.
また、混合工程で、プラセンタエキス製造工程で得られたプラセンタエキスであり、その総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上であるプラセンタエキスと、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を混合することによって、コラーゲンが多く含まれるプラセンタエキスと、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含有する化粧料組成物を製造することができる。 In addition, the placenta extract obtained in the placenta extract manufacturing process in the mixing step, and the placenta extract having a hydroxyproline concentration (w / v) of 0.47 or more per total nitrogen concentration (w / v) and epidermal growth factor. By mixing the cell growth factor (EGF), a placenta extract containing a large amount of collagen and a cosmetic composition containing the epidermal growth factor (EGF) can be produced.
また、上記の目的を達成するために、本発明の化粧料組成物は、プラセンタエキスを含み、前記プラセンタエキスは、同プラセンタエキスの総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上であり、前記プラセンタエキスの濃度が０．０２５ｖ／ｖ％〜０．８ｖ／ｖ％の範囲内であるように構成されている。 Further, in order to achieve the above object, the cosmetic composition of the present invention contains a placenta extract, and the placenta extract contains a hydroxyproline concentration (w / v) per total nitrogen concentration (w / v) of the placenta extract. v) is 0.47 or more, and the concentration of the placenta extract is configured to be in the range of 0.025 v / v% to 0.8 v / v%.
ここで、プラセンタエキスが、プラセンタエキスの総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上であることによって、原料となるプラセンタエキスに、コラーゲンが多く含まれるものとなる。プラセンタエキスの総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上とは、従前の市販のプラセンタエキスにおけるヒドロキシプロリンの濃度よりも高く、充分な量のコラーゲンを含んでいる。この結果、プラセンタエキスにおける、コラーゲンに由来する線維芽細胞増殖効果や、コラーゲン産生作用を高めることができる。 Here, the placenta extract contains a large amount of collagen as a raw material because the hydroxyproline concentration (w / v) per total nitrogen concentration (w / v) of the placenta extract is 0.47 or more. It becomes a thing. The hydroxyproline concentration (w / v) per total nitrogen concentration (w / v) of the placenta extract is 0.47 or more, which is higher than the concentration of hydroxyproline in the conventional commercially available placenta extract, and a sufficient amount of collagen is obtained. Includes. As a result, the collagen-derived fibroblast proliferation effect and collagen-producing effect of the placenta extract can be enhanced.
また、プラセンタエキスの濃度が０．０２５ｖ／ｖ％〜０．８ｖ／ｖ％の範囲内であることによって、化粧料組成物における線維芽細胞増殖効果を高めることができる。また、化粧料が呈色することを抑止できる。 Further, when the concentration of the placenta extract is in the range of 0.025 v / v% to 0.8 v / v%, the fibroblast proliferation effect in the cosmetic composition can be enhanced. In addition, it is possible to prevent the cosmetic from coloring.
なお、本明細書における「プラセンタエキスの総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたり」とは、プラセンタエキスの総窒素濃度１％（ｗ／ｖ）を基準とした濃度（％（ｗ／ｖ））のことを意味する。 In addition, "per total nitrogen concentration (w / v) of placenta extract" in this specification is the concentration (% (w / v)) based on the total nitrogen concentration 1% (w / v) of placenta extract. Means that.
本発明に係る化粧料組成物の製造方法は、コラーゲンが豊富に含まれたプラセンタエキスを含み、機能性に優れた化粧料組成物を提供できるものとなっている。 The method for producing a cosmetic composition according to the present invention contains a placenta extract rich in collagen and can provide a cosmetic composition having excellent functionality.
以下、本発明を適用した化粧料組成物の一例である化粧水の組成について説明する。 Hereinafter, the composition of the cosmetic water, which is an example of the cosmetic composition to which the present invention is applied, will be described.
ここで示す化粧水は、全量基準で重量比率が、精製水：３０〜９５％、コラーゲン含有プラセンタエキス：０．０５〜０．８％（ｖ／ｖ）、多価アルコール：０．１〜５０％、エステル油：適量（０〜５％、無配合の場合もある）、界面活性剤：適量、クエン酸：適量、カルボキシビニルポリマー：適量（下限０．１％）、水酸化ナトリウム：適量、植物エキス：適量（下限０．１％）防腐剤：適量、を含む組成を有している。また、ここで示す化粧水は、全量基準で、０．０００００７５〜０．０００１２％（ｗ／ｖ）の濃度となる上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含んでいる。 The weight ratio of the lotion shown here is purified water: 30 to 95%, collagen-containing placenta extract: 0.05 to 0.8% (v / v), polyhydric alcohol: 0.1 to 50, based on the total amount. %, Ester oil: Appropriate amount (0 to 5%, may not be blended), Surfactant: Appropriate amount, Citric acid: Appropriate amount, Carboxyvinyl polymer: Appropriate amount (Lower limit 0.1%), Sodium hydroxide: Appropriate amount, It has a composition containing a plant extract: an appropriate amount (lower limit 0.1%) and a preservative: an appropriate amount. In addition, the lotion shown here contains epidermal growth factor (EGF) having a concentration of 0.0000075-0.00012% (w / v) on a total amount basis.
なお、コラーゲン含有プラセンタエキスとは、本願請求項における「プラセンタエキス」を意味する。なお、以下では、「コラーゲン含有プラセンタエキス」の用語を用いる。 The collagen-containing placenta extract means the "placenta extract" in the claims of the present application. In the following, the term "collagen-containing placenta extract" will be used.
また、ここで示す化粧水の組成は、化粧料組成物の一例に過ぎず、その他の成分や異なる配合量を適宜設定することが可能である。例えば、上記以外に、製剤の種類、用途に合わせて、キレート剤（金属イオン封鎖剤）、収れん剤、殺菌剤、皮膚賦活剤（ビタミン類、アミノ酸及びアミノ酸誘導体）、消炎剤、美白剤（アルブチン、トラネキサム酸、ビタミンＣ誘導体等）を含むことが可能である。また、必要に応じて香料や着色料も配合することも可能である。 Further, the composition of the cosmetic water shown here is only an example of the cosmetic composition, and other components and different blending amounts can be appropriately set. For example, in addition to the above, chelating agents (sequestrants), astringents, bactericides, skin activators (vitamins, amino acids and amino acid derivatives), anti-inflammatory agents, whitening agents (arbutin), depending on the type and application of the preparation. , Tranexamic acid, vitamin C derivatives, etc.). It is also possible to add fragrances and colorings as needed.
精製水は、化粧水の基剤であり、上述した各種成分を含めて、化粧水の全量を１００％
に調整する。
Purified water is the base of the lotion, and the total amount of the lotion including the above-mentioned various components is 100%.
Adjust to.
コラーゲン含有プラセンタエキスは、特徴成分であり、化粧水に対して、線維芽細胞増殖効果、コラーゲン産生作用、コラゲナーゼ活性抑制作用、抗酸化作用、抗炎症作用、新陳代謝の促進、及び、肌の老化を回復させる機能を付与する、または、これらの好ましい作用を向上させる成分である。また、ウマ胎盤を後述する製造方法で処理して得られた生成物である。 Collagen-containing placenta extract is a characteristic ingredient, and has a fibroblast proliferation effect, collagen production effect, collagenase activity inhibitory effect, antioxidant effect, anti-inflammatory effect, promotion of metabolism, and skin aging. It is a component that imparts a recovering function or enhances these favorable effects. It is also a product obtained by treating horse placenta by a production method described later.
また、コラーゲン含有プラセンタエキスは、プラセンタエキスの総窒素濃度１％（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度が０．４７％（ｗ／ｖ）であるヒドロキシプロリンを含んでいる。ヒドロキシプロリンは、プラセンタエキス中のコラーゲンの濃度の指標であり、本組成におけるコラーゲン含有プラセンタエキスのヒドロキシプロリンの濃度は、従前の市販のプラセンタエキスにおけるヒドロキシプロリンの濃度よりも高く、充分な量のコラーゲンを含んでいる。 In addition, the collagen-containing placenta extract contains hydroxyproline having a hydroxyproline concentration of 0.47% (w / v) per 1% (w / v) of the total nitrogen concentration of the placenta extract. Hydroxyproline is an index of the concentration of collagen in the placenta extract, and the concentration of hydroxyproline in the collagen-containing placenta extract in this composition is higher than the concentration of hydroxyproline in the conventional commercially available placenta extract, and a sufficient amount of collagen is used. Includes.
上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）は、特徴成分であり、化粧水に対して、線維芽細胞増殖効果を向上させる成分である。上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）は、コラーゲン含有プラセンタエキスと組み合わせることで、線維芽細胞増殖効果を相乗的に高めることができる。 Epidermal growth factor (EGF) is a characteristic component and is a component that improves the fibroblast proliferation effect on lotion. Epidermal growth factor (EGF) can synergistically enhance the fibroblast proliferation effect when combined with collagen-containing placenta extract.
多価アルコールは保湿剤である。多価アルコールとしては、例えば、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、１，２−ペンタンジオール等を用いることができる。 Multivalent alcohol is a moisturizer. As the polyhydric alcohol, for example, glycerin, 1,3-butylene glycol, 1,2-pentanediol and the like can be used.
エステル油は柔軟剤（エモリエント剤）である。上記組成では、エステル油を用いたが、これ以外にも例えば、植物油等を用いることができる。 Ester oil is a softener (emollient). In the above composition, ester oil is used, but other than this, for example, vegetable oil or the like can be used.
界面活性剤は、油性成分の乳化剤または可溶化剤である。界面活性剤としては、例えば、レシチンおよびレシチン誘導体、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等を用いることができる。なお、本発明では、油性成分の乳化剤または可溶化剤の種類はこれらに限定されるものではなく、その他の界面活性剤を用いることもできる。 Surfactants are emulsifiers or solubilizers for oily components. As the surfactant, for example, lecithin and lecithin derivatives, glycerin fatty acid ester, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene hydrogenated castor oil and the like can be used. In the present invention, the types of emulsifiers or solubilizers for oily components are not limited to these, and other surfactants can also be used.
クエン酸は、緩衝剤（ｐＨ調整剤）である。上記組成では、クエン酸を用いたが、これ以外にも例えば、クエン酸ナトリウム等を用いることができる。 Citric acid is a buffer (pH regulator). In the above composition, citric acid is used, but other than this, for example, sodium citrate and the like can be used.
カルボキシビニルポリマーは増粘剤であり、化粧水に適度な粘性を付与するものとなる。上記組成では、カルボキシビニルポリマーを用いたが、これ以外にも例えば、アクリル系増粘剤、ポリビニルアルコール、キサンタンガム、カラギーナン、寒天、ゼラチン等を用いることができる。 The carboxyvinyl polymer is a thickener and imparts appropriate viscosity to the lotion. In the above composition, a carboxyvinyl polymer is used, but other than this, for example, an acrylic thickener, polyvinyl alcohol, xanthan gum, carrageenan, agar, gelatin and the like can be used.
水酸化ナトリウムは中和剤である。上記組成では、水酸化ナトリウムを用いたが、これ以外にも例えば、水酸化カリウム等を用いることができる。 Sodium hydroxide is a neutralizing agent. In the above composition, sodium hydroxide is used, but in addition to this, for example, potassium hydroxide and the like can be used.
植物エキスは、化粧水に対して、皮膚に効果のある所望の機能性を付与する成分である。また、防腐剤は化粧水に防腐力を持たせる成分である。 The plant extract is a component that imparts desired functionality that is effective on the skin to the lotion. In addition, preservatives are components that give the lotion antiseptic power.
ここで、植物エキスとしては、例えば、以下のようなものが挙げられる。ハトムギ種子エキス、ローヤルゼリーエキス、ツボクサ葉エキス、ベルゲニアリグラタ根エキス、プラセンタエキス、メアカキンバイカルスエキス、ヒメフウロエキス、ダイズ胎座エキス、ハイブリッドローズ花エキス、ゲットウ葉エキス、ヨーロッパアキノキリンソウエキス、サッカロミセス溶解質エキス、クレアチントウビシ果皮エキス、オタネニンジン根エキス、シャクヤク根エキス、ブドウつるエキス。 Here, examples of the plant extract include the following. Hatomugi seed extract, royal jelly extract, tsuboxa leaf extract, bergenia ligratha root extract, placenta extract, meakakin baicalus extract, himefuuro extract, soybean fetal extract, hybrid rose flower extract, ghetto leaf extract, European akinokirinsou extract, saccharomyces lysate Extract, Creatin Tobishi peel extract, Otaneninjin root extract, Shakuyaku root extract, Grape vine extract.
ここで、コラーゲン含有プラセンタエキスの配合量は、化粧水の全量基準で０．０５〜０．８％となっている。ここで必ずしも、コラーゲン含有プラセンタエキスの配合量が、化粧水の全量基準で０．０５〜０．８％に設定される必要はない。但し、化粧水における線維芽細胞増殖効果をより一層向上させる点から、コラーゲン含有プラセンタエキスの配合量が、化粧水の全量基準で０．０２５〜１．０％に設定されることが好ましい。また、化粧水における線維芽細胞増殖効果をより一層向上させると共に、コラーゲン含有プラセンタエキスに由来する色が化粧水に表れることを抑止できる点から、コラーゲン含有プラセンタエキスの配合量が、化粧水の全量基準で０．２〜０．８％に設定されることがさらに好ましい。 Here, the blending amount of the collagen-containing placenta extract is 0.05 to 0.8% based on the total amount of the lotion. Here, the blending amount of the collagen-containing placenta extract does not necessarily have to be set to 0.05 to 0.8% based on the total amount of the lotion. However, from the viewpoint of further improving the fibroblast proliferation effect in the lotion, the amount of the collagen-containing placenta extract is preferably set to 0.025 to 1.0% based on the total amount of the lotion. In addition, the total amount of collagen-containing placenta extract is the total amount of the collagen-containing placenta extract because the fibroblast proliferation effect in the lotion can be further improved and the color derived from the collagen-containing placenta extract can be suppressed from appearing in the lotion. It is more preferable to set it to 0.2 to 0.8% as a reference.
また、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の配合量は、化粧水の全量基準で０．０００００７５〜０．０００１２％（ｗ／ｖ）の濃度となっている。ここで必ずしも、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の配合量が、化粧水の全量基準で０．０００００７５〜０．０００１２％（ｗ／ｖ）の濃度になるように設定される必要はない。但し、化粧水における線維芽細胞増殖効果をより一層向上させると共に、効果が高められる程度が頭打ちとならないようにする点から、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の配合量が、化粧水の全量基準で０．０００００３７５〜０．０００１５％（ｗ／ｖ）の濃度範囲に設定されることが好ましい。 The amount of epidermal growth factor (EGF) blended is 0.0000075-0.00012% (w / v) based on the total amount of cosmetic water. Here, the blending amount of epidermal growth factor (EGF) does not necessarily have to be set to a concentration of 0.0000075-0.00012% (w / v) based on the total amount of the lotion. However, the amount of epidermal growth factor (EGF) blended is based on the total amount of the lotion, from the viewpoint of further improving the fibroblast proliferation effect in the lotion and preventing the effect from reaching a plateau. It is preferably set in the concentration range of 0.00000375 to 0.00015% (w / v).
続いて、本発明を適用した化粧料組成物の製造方法の一例を説明する。ここでは上述した化粧水を例に説明を行う。 Subsequently, an example of a method for producing a cosmetic composition to which the present invention is applied will be described. Here, the above-mentioned lotion will be described as an example.
まず、ウマ胎盤からコラーゲン含有プラセンタエキスを製造する内容について説明する。
凍結保存していたウマ胎盤を解凍する（解凍）。解凍したウマ胎盤の肉質部と同量のドロップ液（解凍の際に生じる血液）を計量し、肉質部を細挫する（細挫・仕込）。
First, the content of producing collagen-containing placenta extract from horse placenta will be described.
Thaw the frozen horse placenta (thaw). Weigh the same amount of drop liquid (blood generated during thawing) as the flesh part of the thawed horse placenta, and crush the flesh part (fine crush / preparation).
また、ウマ胎盤の細挫品と、ドロップ液を混合して、８０℃で約２２時間、熱水抽出する（熱水抽出）。これにより、ウマ胎盤から、水溶性のコラーゲン成分を効率良く抽出することができる。即ち、次の消化反応工程で生じる、酵素抽出物と残渣との間で、酵素抽出物側に含まれるコラーゲン成分を増やし、消化効率を高めることができる。なお、本工程が、本願請求項における熱水抽出工程に該当する。 In addition, the finely crushed horse placenta and the drop solution are mixed and hot water is extracted at 80 ° C. for about 22 hours (hot water extraction). As a result, the water-soluble collagen component can be efficiently extracted from the horse placenta. That is, the collagen component contained in the enzyme extract side can be increased between the enzyme extract and the residue generated in the next digestion reaction step, and the digestion efficiency can be improved. This step corresponds to the hot water extraction step according to the claims of the present application.
続いて、熱水抽出処理物を、０．２％パパインを用いて、６０〜７０℃で３時間、消化反応する（消化反応）。これにより、抽出処理物を、酵素反応により溶かし、酵素抽出物と残渣に分けることができる。また、水溶性のコラーゲン成分を含む酵素抽出物を得ることができる。なお、本工程が、本願請求項における消化反応工程に該当する。 Subsequently, the hot water extract treated product is digested with 0.2% papain at 60 to 70 ° C. for 3 hours (digestion reaction). As a result, the extracted product can be dissolved by an enzymatic reaction and separated into an enzymatic extract and a residue. In addition, an enzyme extract containing a water-soluble collagen component can be obtained. This step corresponds to the digestion reaction step in the claims of the present application.
次に、酵素抽出物を、０．８％の活性炭を用いて、１０分間の活性炭処理を行う。また、この後、９０℃で３０分間、加熱処理をする。さらに、必要に応じて８０００ｒｐｍで５分間、遠心分離して、上澄みと沈殿物に分離する。 Next, the enzyme extract is treated with activated carbon for 10 minutes using 0.8% activated carbon. After that, heat treatment is performed at 90 ° C. for 30 minutes. Further, if necessary, centrifuge at 8000 rpm for 5 minutes to separate into a supernatant and a precipitate.
また、遠心分離した上澄み液を、ろ過助剤も用いて、真空ろ過（Ｎｏ．２ろ紙）する。さらに、真空ろ過後の上澄み液を清澄ろ過する。 In addition, the supernatant liquid that has been centrifuged is vacuum filtered (No. 2 filter paper) using a filtration aid. Further, the supernatant liquid after vacuum filtration is clarified and filtered.
また、清澄ろ過のろ液に、２−フェノキシエタノール１．６％を添加し、撹拌する。さらに、０．２２μｍフィルターを用いて、除菌ろ過する。ここまでの工程で、ウマ胎盤からコラーゲン含有プラセンタエキスを製造することができる。 Further, 1.6% of 2-phenoxyethanol is added to the filtrate for clear filtration, and the mixture is stirred. Further, sterilization filtration is performed using a 0.22 μm filter. By the steps up to this point, collagen-containing placenta extract can be produced from horse placenta.
なお、上述した方法は、あくまで一例であり、各種条件や方法は、適宜変更することができる。 The above method is merely an example, and various conditions and methods can be changed as appropriate.
また、必ずしも、熱水抽出する工程において、８０℃で約２２時間、熱水抽出する必要はなく、水の温度や時間は適宜変更することができる。但し、ウマ胎盤から、水溶性のコラーゲン成分を充分に効率良く抽出する点から、８０℃で約２２時間、熱水抽出することが好ましい。 Further, in the step of extracting hot water, it is not always necessary to extract hot water at 80 ° C. for about 22 hours, and the temperature and time of water can be appropriately changed. However, from the viewpoint of sufficiently and efficiently extracting the water-soluble collagen component from the horse placenta, it is preferable to extract with hot water at 80 ° C. for about 22 hours.
また、必ずしも、消化反応する工程において、０．２％パパインを用いて、６０〜７０℃で３時間、消化反応する必要はなく、パパイン以外の耐熱性の消化酵素を採用することも可能である。また、消化反応の温度及び時間も適宜変更することができる。但し、熱水抽出した処理物から、水溶性のコラーゲン成分を多く含む酵素抽出物を得る点から、０．２％パパインを用いて、６０〜７０℃で３時間、消化反応することが好ましい。 Further, in the step of digestive reaction, it is not always necessary to use 0.2% papain for a digestive reaction at 60 to 70 ° C. for 3 hours, and it is also possible to use a heat-resistant digestive enzyme other than papain. .. In addition, the temperature and time of the digestion reaction can be changed as appropriate. However, from the viewpoint of obtaining an enzyme extract containing a large amount of water-soluble collagen component from the treated product extracted with hot water, it is preferable to perform a digestive reaction at 60 to 70 ° C. for 3 hours using 0.2% papain.
また、本発明の化粧料組成物の製造方法の一例では、上記で得られたコラーゲン含有プラセンタエキスを、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含む各種成分と混合して、化粧水を製造する。 Further, in an example of the method for producing a cosmetic composition of the present invention, the collagen-containing placenta extract obtained above is mixed with various components including epidermal growth factor (EGF) to produce a cosmetic water.
ここで、コラーゲン含有プラセンタエキスと、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含む各種成分との混合の方法は、既知の化粧料の製造方法を用いることができる。 Here, as a method of mixing the collagen-containing placenta extract and various components including epidermal growth factor (EGF), a known method for producing cosmetics can be used.
以上のように、本発明を適用した化粧料組成物は、上述した方法によりコラーゲン含有プラセンタエキスを生成し、このコラーゲン含有プラセンタエキスを、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含む各種原料と混合することで製造することができる。なお、ここで示した製造方法や条件はあくまで一例であり、原料成分や添加物の種類等に応じて適宜、設定変更可能なものであることはいうまでもない。 As described above, the cosmetic composition to which the present invention is applied produces collagen-containing placenta extract by the above-mentioned method, and the collagen-containing placenta extract is mixed with various raw materials containing epidermal growth factor (EGF). Can be manufactured in. It goes without saying that the manufacturing methods and conditions shown here are merely examples, and the settings can be appropriately changed according to the types of raw material components and additives.
また、本発明を適用した化粧料組成物の種類は、上述した化粧水に限定されず、例えば、乳液・クリーム系の化粧料、ジェル、洗浄料（シャンプー）、洗浄料（洗顔）等に適用しうる。また、その製造方法は、生成したコラーゲン含有プラセンタエキスを、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を含む各種の化粧料の原料と、化粧料の種類に応じた既知の方法で混合する方法が採用しうる。 The type of cosmetic composition to which the present invention is applied is not limited to the above-mentioned lotion, and is applied to, for example, emulsion / cream cosmetics, gels, cleansers (shampoos), cleansers (face wash), and the like. Can be done. Further, as the production method, a method of mixing the produced collagen-containing placenta extract with various cosmetic raw materials containing epidermal growth factor (EGF) by a known method according to the type of cosmetic can be adopted. ..
以上のとおり、本発明を適用した化粧料組成物は、コラーゲンが豊富に含まれたプラセンタエキスを含み、機能性に優れた化粧料組成物を提供できるものとなっている。
また、本発明を適用した化粧料組成物の製造方法は、コラーゲンが豊富に含まれたプラセンタエキスを含み、機能性に優れた化粧料組成物を提供できる方法となっている。
As described above, the cosmetic composition to which the present invention is applied contains a placenta extract rich in collagen and can provide a cosmetic composition having excellent functionality.
Further, the method for producing a cosmetic composition to which the present invention is applied is a method capable of providing a cosmetic composition having excellent functionality and containing a placenta extract rich in collagen.
以下、本発明の実施例を説明する。 Hereinafter, examples of the present invention will be described.
まず、本発明の化粧料組成物に含まれるコラーゲン含有プラセンタエキスに関して、以下の評価を行った。 First, the collagen-containing placenta extract contained in the cosmetic composition of the present invention was evaluated as follows.
上述したコラーゲン含有プラセンタエキスの製造方法で製造したコラーゲン含有プラセンタエキスと、２種類の市販のプラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢ（いずれもウマ胎盤由来）について、ヒドロキシプロリン含量の測定を行った。 The hydroxyproline content of the collagen-containing placenta extract produced by the above-mentioned method for producing collagen-containing placenta extract and two types of commercially available placenta extract A and placenta extract B (both derived from horse placenta) were measured.
なお、プラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢは、原料となるウマ胎盤を低温下で凍結、浸漬をくり返して、細胞組織を破砕し、そのプロトプラズマを抽出し、除タン白、限外漏過して、調製したものである。なお、プラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢの調製方法は、既知の方法を採用することができる。例えば、凍結融解に加えて、酵素抽出の工程を組み合わせることもできる。 In addition, placenta extract A and placenta extract B freeze and soak the horse placenta, which is a raw material, at a low temperature repeatedly to crush the cell tissue, extract the protoplasma, remove the protein, and cause extraneous leakage. , Prepared. As the method for preparing the placenta extract A and the placenta extract B, a known method can be adopted. For example, in addition to freeze-thaw, enzyme extraction steps can be combined.
（１）ヒドロキシプロリン含量の測定
コラーゲン含有プラセンタエキスと、プラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢの各試料溶液に終濃度６Ｍとなるよう塩酸を添加し、１１０℃で２４時間加水分解を行った。加水分解後の各試料に対し、オルトフタルアルデヒド標識によるポストカラム法にてアミノ酸分析を行った。また、試料中の総窒素濃度を別途測定しておき、試料の総窒素濃度１％（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリンの濃度（％（ｗ／ｖ））を比較した。
各試料におけるヒドロキシプロリン含量を表１に示す。
(1) Measurement of Hydroxyproline Content Hydrochloric acid was added to each sample solution of collagen-containing placenta extract, placenta extract A and placenta extract B so as to have a final concentration of 6 M, and hydrolysis was carried out at 110 ° C. for 24 hours. Amino acid analysis was performed on each sample after hydrolysis by the post-column method labeled with orthophthalaldehyde. In addition, the total nitrogen concentration in the sample was separately measured, and the concentration of hydroxyproline (% (w / v)) per 1% (w / v) of the total nitrogen concentration of the sample was compared.
The hydroxyproline content in each sample is shown in Table 1.
表１に示すように、本発明の化粧料組成物に含まれるコラーゲン含有プラセンタエキスには、市販のプラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢよりも多くのヒドロキシプロリンが含有されていることが明らかとなった。即ち、コラーゲン含有プラセンタエキスには、プラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢよりも多くのコラーゲンが含まれることが明らかとなった。なお、原料の由来が異なるウマ胎盤に基づき、同様に、コラーゲン含有プラセンタエキスの製造方法によりコラーゲン含有プラセンタエキスを調製して、試料の総窒素濃度１％（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリンの濃度を測定したところ、０．５９（％（ｗ／ｖ））の結果を示すこともあった。 As shown in Table 1, it was revealed that the collagen-containing placenta extract contained in the cosmetic composition of the present invention contains more hydroxyproline than the commercially available placenta extract A and placenta extract B. .. That is, it was revealed that the collagen-containing placenta extract contains more collagen than the placenta extract A and the placenta extract B. In addition, based on the horse placenta from which the raw materials are derived from different sources, the collagen-containing placenta extract is similarly prepared by the method for producing the collagen-containing placenta extract, and the concentration of hydroxyproline per 1% (w / v) of the total nitrogen concentration of the sample. As a result of measuring, the result of 0.59 (% (w / v)) was sometimes shown.
（２）線維芽細胞増殖活性試験
次に、コラーゲン含有プラセンタエキスと、プラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢの各試料について、線維芽細胞増殖活性試験を行った。
ここで、線維芽細胞とは、皮膚の真皮にありコラーゲンを産生する細胞である。この線維芽細胞の増殖を促進する作用（増殖活性）が高いものを、コラーゲン産生促進作用に優れる試料として評価した。
(2) Fibroblast proliferation activity test Next, a fibroblast proliferation activity test was conducted on each sample of collagen-containing placenta extract, placenta extract A and placenta extract B.
Here, the fibroblast is a cell in the dermis of the skin that produces collagen. Those having a high action of promoting the proliferation of fibroblasts (proliferative activity) were evaluated as samples having an excellent action of promoting collagen production.
（試験方法）
ヒト新生児由来皮膚線維芽細胞を２×１０４個／ウェルとなるように９６ウェルプレートに播種し、０．５％のウシ胎児血清（Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ，略称ＦＢＳ）を含有するＤＭＥＭ培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ）にて一晩培養した。コラーゲン含有プラセンタエキス、プラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢについて、それぞれ総窒素量を合わせた濃度を添加した培地に交換し、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で２４時間培養した。リン酸緩衝生理食塩水（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ，略称ＰＢＳ）で細胞を洗浄し、市販の細胞増殖アッセイキット（株式会社同人化学研究所社製：Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ−８）を１０％含有するＤＭＥＭを添加し、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で４時間培養した。培養後、４５０ｎｍの吸光度を測定した。
なお、測定結果は、コラーゲン含有プラセンタエキス、プラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢを添加しなかった場合の増殖活性を１００％とした場合の相対値で示した。また、細胞増殖活性は、下記の式１に示す計算式で算出した。
（式１）
細胞増殖活性（％）＝｛（試料添加群の４５０ｎｍの吸光度）／（試料無添加群の４５０ｎｍの吸光度）｝×１００
線維芽細胞増殖活性試験の結果を表２に示す。
(Test method)
Human neonatal skin fibroblasts are seeded in 96-well plates at 2 × 10 4 cells / well, and DMEM medium (Dulvecco') containing 0.5% fetal bovine serum (FBS). It was cultured overnight in s Modified Eagle's Medium). The collagen-containing placenta extract, placenta extract A, and placenta extract B were replaced with a medium to which the total nitrogen content was added, and cultured at 37 ° C. in a 5% CO 2 incubator for 24 hours. Cells are washed with Phosphate-buffered saline (PBS), and a DMEM containing 10% of a commercially available cell proliferation assay kit (Made by Dojindo Kagaku Kenkyusho Co., Ltd .: Cell Counting Kit-8) is used. It was added and cultured in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C. for 4 hours. After culturing, the absorbance at 450 nm was measured.
The measurement results are shown as relative values when the growth activity when the collagen-containing placenta extract, placenta extract A and placenta extract B are not added is 100%. The cell proliferation activity was calculated by the formula shown in Equation 1 below.
(Equation 1)
Cell proliferation activity (%) = {(absorbance at 450 nm in the sample-added group) / (absorbance at 450 nm in the sample-free group)} × 100
The results of the fibroblast growth activity test are shown in Table 2.
表２に示すように、本発明の化粧料組成物に含まれるコラーゲン含有プラセンタエキスには、市販のプラセンタエキスＡ及びプラセンタエキスＢに比べて、線維芽細胞増殖活性が著しく向上している結果を示した。 As shown in Table 2, the collagen-containing placenta extract contained in the cosmetic composition of the present invention has significantly improved fibroblast proliferation activity as compared with the commercially available placenta extract A and placenta extract B. Indicated.
続いて、本発明を適用した化粧料組成物の製造方法で製造した化粧料組成物の実施例及び比較例を作製し、線維芽細胞増殖活性試験の評価を行った。
（３）試料の原料成分
まず、表３〜表６に示す組成となるように原料成分を添加して、実施例１〜１５及び比較例１〜９の各試料を作製した。なお、以下表３〜６に示す各成分の数値は、コラーゲン含有プラセンタエキスは、全量を基準にした体積比率（％（ｖ／ｖ））を示したものであり、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）は重量体積比率（％（ｗ／ｖ））を示したものである。
Subsequently, examples and comparative examples of the cosmetic composition produced by the method for producing the cosmetic composition to which the present invention was applied were prepared, and the fibroblast proliferation activity test was evaluated.
(3) Raw Material Components of Samples First, raw material components were added so as to have the compositions shown in Tables 3 to 6, and the samples of Examples 1 to 15 and Comparative Examples 1 to 9 were prepared. The numerical values of each component shown in Tables 3 to 6 below indicate the volume ratio (% (v / v)) of the collagen-containing placenta extract based on the total amount, and are epidermal growth factor (EGF). Indicates the weight-volume ratio (% (w / v)).
また、線維芽細胞増殖活性試験については、以下の内容で行った。
（試験方法）
ヒト新生児由来皮膚線維芽細胞を２×１０４個／ウェルとなるように９６ウェルプレートに播種し、０．５％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含有するＤＭＥＭ培地にて一晩培養した。コラーゲン含有プラセンタエキス、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）、及び、コラーゲン含有プラセンタエキスと上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の混合物をそれぞれ、表３〜５に示す量を添加した培地に交換し、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で２４時間培養した。リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で細胞を洗浄し、市販の細胞増殖アッセイキット（株式会社同人化学研究所社製：Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ−８）を１０％含有するＤＭＥＭを添加し、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で４時間培養した。培養後、４５０ｎｍの吸光度を測定した。
なお、測定結果は、コラーゲン含有プラセンタエキス、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）、及び、コラーゲン含有プラセンタエキスと上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の混合物を添加しなかった場合の増殖活性を１００％とした場合の相対値で示した。また、細胞増殖活性は、下記の式１に示す計算式で算出した。
（式１）
細胞増殖活性（％）＝｛（試料添加群の４５０ｎｍの吸光度）／（試料無添加群の４５０ｎｍの吸光度）｝×１００
なお、比較例１、８及び９は、コラーゲン含有プラセンタエキス、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）、及び、コラーゲン含有プラセンタエキスと上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の混合物を添加しなかった場合の増殖活性を示している。
The fibroblast proliferation activity test was conducted with the following contents.
(Test method)
Human neonatal skin fibroblasts were seeded in 96-well plates to 2 × 10 4 cells / well and cultured overnight in DMEM medium containing 0.5% fetal bovine serum (FBS). The collagen-containing placenta extract, epidermal growth factor (EGF), and the mixture of collagen-containing placenta extract and epidermal growth factor (EGF) were replaced with the medium to which the amounts shown in Tables 3 to 5 were added, respectively, at 37 ° C. The cells were cultured in a 5% CO 2 incubator for 24 hours. The cells were washed with phosphate buffered saline (PBS), and DMEM containing 10% of a commercially available cell proliferation assay kit (Made by Dojindo Kagaku Kenkyusho Co., Ltd .: Cell Counting Kit-8) was added at 37 ° C. Cultured in a 5% CO 2 incubator for 4 hours. After culturing, the absorbance at 450 nm was measured.
The measurement result is based on the case where the growth activity when the collagen-containing placenta extract, epidermal growth factor (EGF), and the mixture of collagen-containing placenta extract and epidermal growth factor (EGF) are not added is 100%. It is shown as a relative value of. The cell proliferation activity was calculated by the formula shown in Equation 1 below.
(Equation 1)
Cell proliferation activity (%) = {(absorbance at 450 nm in the sample-added group) / (absorbance at 450 nm in the sample-free group)} × 100
In addition, Comparative Examples 1, 8 and 9 show the proliferative activity when the collagen-containing placenta extract, epidermal growth factor (EGF), and the mixture of collagen-containing placenta extract and epidermal growth factor (EGF) are not added. Shown.
線維芽細胞増殖活性試験の結果を図１〜図３及び表３〜表６に示す。なお、図１は表３に示す数値をグラフ化し、図２は表４に示す数値をグラフ化し、図３は表５及び表６に示す数値をグラフ化している。 The results of the fibroblast growth activity test are shown in FIGS. 1 to 3 and Tables 3 to 6. Note that FIG. 1 is a graph of the numerical values shown in Table 3, FIG. 2 is a graph of the numerical values shown in Table 4, and FIG. 3 is a graph of the numerical values shown in Tables 5 and 6.
実施例１〜実施例６、及び、実施例７〜１５では、線維芽細胞増殖活性が向上している結果を示した。特に、実施例７〜実施例１４では、比較例２〜４、６、７と比べても、線維芽細胞増殖活性が著しく向上している結果を示した。 In Examples 1 to 6 and 7 to 15, the results showed that the fibroblast proliferation activity was improved. In particular, in Examples 7 to 14, the results showed that the fibroblast proliferation activity was remarkably improved as compared with Comparative Examples 2 to 4, 6 and 7.
また、以下では、本発明を適用した化粧料組成物の製造方法で製造した各種化粧料の一例を示す。 In addition, the following shows an example of various cosmetics produced by the method for producing a cosmetic composition to which the present invention is applied.
（乳液・クリーム）
（ジェル）
（洗浄料（シャンプー））
（洗浄料（洗顔））
また、上述した各種の化粧料では、その他の成分や異なる配合量を適宜設定することが可能である。例えば、上記以外に、製剤の種類、用途に合わせて、キレート剤（金属イオン封鎖剤）、収れん剤、殺菌剤、皮膚賦活剤（ビタミン類、アミノ酸及びアミノ酸誘導体）、消炎剤、美白剤（アルブチン、トラネキサム酸、ビタミンＣ誘導体等）を含むことが可能である。また、必要に応じて香料や着色料も配合することも可能である。 Further, in the various cosmetics described above, other ingredients and different blending amounts can be appropriately set. For example, in addition to the above, chelating agents (sequestrants), astringents, bactericides, skin activators (vitamins, amino acids and amino acid derivatives), anti-inflammatory agents, whitening agents (arbutin), depending on the type and application of the preparation. , Tranexamic acid, vitamin C derivatives, etc.). It is also possible to add fragrances and colorings as needed.
Claims (4)
前記熱水抽出工程を経た抽出処理物を、６０度〜７０度の範囲内の温度で、パパインを用いて酵素消化する消化反応工程とを有する、プラセンタエキス製造工程と、
該プラセンタエキス製造工程で得られたプラセンタエキスであり、その総窒素濃度（ｗ／ｖ）あたりのヒドロキシプロリン濃度（ｗ／ｖ）が０．４７以上であるプラセンタエキスと、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）を混合する混合工程とを備える
化粧料組成物の製造方法。 A hot water extraction step in which the thawed horse placenta or pig placenta is mixed with tissue fluid such as blood produced during the thawing, and the mixture is heated to perform hot water extraction treatment.
A placenta extract manufacturing step, which comprises a digestion reaction step of enzymatically digesting the extracted product that has undergone the hot water extraction step with papain at a temperature in the range of 60 ° C. to 70 ° C.
The placenta extract obtained in the placenta extract manufacturing process, the placenta extract having a hydroxyproline concentration (w / v) of 0.47 or more per total nitrogen concentration (w / v), and epidermal growth factor (EGF). ) Is provided with a mixing step of mixing.
A method for producing a cosmetic composition .
前記上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）の濃度が０．０００００３７５ｗ／ｖ％〜０．０００１５ｗ／ｖ％の範囲内である
請求項１に記載の化粧料組成物の製造方法。 The concentration of the placenta extract is in the range of 0.025 v / v% to 1.0 v / v%.
The concentration of the epidermal growth factor (EGF) is in the range of 0.00000375 w / v% to 0.00015 w / v%.
The method for producing a cosmetic composition according to claim 1 .
請求項２に記載の化粧料組成物の製造方法。 The concentration of the placenta extract is in the range of 0.05 v / v% to 0.8 v / v%.
The method for producing a cosmetic composition according to claim 2 .
請求項１、請求項２または請求項３に記載の化粧料組成物の製造方法。 The placenta extract is derived from horse placenta
The method for producing a cosmetic composition according to claim 1, claim 2 or claim 3 .
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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