JP6912140B2 - 分光分析用チップ - Google Patents

Description

本発明は、分光分析用チップに関する。さらに詳しくは、医学や、生化学、薬学、化学、環境などの分野における分析に広く利用される分光分析用チップに関する。

近年、血液や尿などの体液から多数の病気の診断が可能となってきている。しかし、診断に使用可能な体液（以下、試料という）の量には限界がある。このため、少ない試料からできるだけ多くの情報（例えば、病気の進行状況や病気の早期発見等）を得ることが重要となってきている。

特許文献１には、フォトリソグラフィー法を用いて処理した多層構造を有する簡易分析チップが開示されている。このチップの流路の先端部には、各種発色性材料を備えた検出部が設けられており、試料中に分析成分が存在すれば検出部の発色度合いを目視で判断したり、反射光の変化量に基づいて試料中の目的成分の量を把握する旨の記載がある。
特許文献２〜４にも同様の簡易分析チップや試験紙が開示されており、対象成分の存在量に応じた色調変化（比色法）、すなわち基材表面の反射光（散乱光）の変化量を目視や画像処理として数値化する旨が記載されている。

特開２０１２−２３０１２５号公報 特表２０１４−５２９０８３号公報 特開２０１３−５３８６９号公報 特開２００９−１１５８２２号公報 特開２０１３−１４８５９２号公報

しかるに、特許文献１〜５の技術は、あくまでも定性的に試料中の目的成分を測定する技術であって、試料中の目的成分を定量分析する技術ではない。
また、特許文献１〜５の技術では、反射光（散乱光）の変化量に基づいて分析を行った場合には、測定時におけるチップ表面の凹凸（ラフネス）や外部光の影響を受けやすいといった問題や、目視による比色分析を行う場合には、個人差や周囲の明るさ等により客観的な判定が得られにくいなどの問題が生じている。
つまり、従来の簡易分析技術では、試料中の目的成分の定性分析を行うことはできるものの、測定値にバラツキが生じたり十分な感度が得られないなどのことから、定量的な数値を得られないといったことや、高い精度を得ることができない、というのが常識である。

一方、定量性に優れかつ高い精度を有する分析方法としては、石英やガラス、プラスチックなど光を透過する透明材料で形成された検出部（セル）を用いた吸光光度法や蛍光分光分析法などの分光分析法が広汎に利用されている。
これらの分光分析法では、試料をセルに収容し、かかるセルに光を入射して、入射した光が試料中の目的成分と作用した光（例えば、透過光や蛍光など）を測定することで、試料中の目的成分を定量する方法である。
しかしながら、このような分光分析法では、定量性に優れている一方、セルに収容し得るだけの試料量（例えば０．１ｍｌ〜５ｍｌ）が必要となるため、試料量が少量しか得られないような上述した体液などの分析には不向きであるという問題がある。

以上のように、現状では、少ない試料を分光分析法を用いて試料中の目的成分を定量的に分析する技術は存在しないというのが事情である。

本発明は上記事情に鑑み、少ない試料を分光分析法を用いて定量分析ができる分光分析用チップを提供することを目的とする。

本発明の分光分析用チップは、分光分析に用いられる分析用具であって、基材の表裏を貫通した貫通孔を有する検出部を備えており、該検出部は、前記基材内部に、前記貫通孔に連通する、液体が毛細管現象によって通液可能な複数の空隙を有しており、前記貫通孔は、液体を表面張力によって保持し得る大きさに形成されていることを特徴とする。

本発明の分光分析用チップによれば、検出部に液体試料を供給すれば、供給した液体試料によって貫通孔内に液膜を形成させることができる。この検出部に光を照射すれば、液膜を透過した透過光を得ることができる。そして、この透過光を解析すれば、試料中の目的成分を適切に定量することができる。

本実施形態の分光分析用チップ１の概略説明図であり、（Ａ）は概略平面図であり、（Ｂ）は（Ａ）の検出部１０のＢ−Ｂ線概略断面図であり、（Ｃ）は貫通孔１０ｈの概略説明図である。 図１の検出部１０のＩＩＡ−ＩＩＡ線概略断面拡大図をさらに拡大した本実施形態の分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１の概略説明図であり、（Ａ）は、基材１１を透水性材料１２で形成した場合の概略説明図であり、（Ｘ）、（Ｙ）は、基材１１を他の材質で形成した場合の概略説明図であり、（Ｘ）は、基材１１を透水性材料１２と不透水性材料１３で形成した場合の概略説明図であり、（Ｙ）は、基材１１をナノファイバー層１４と不透水性材料１３で形成した場合の概略説明図である。 本実施形態の分光分析用チップ１の概略説明図であり、（Ａ）は概略平面図であり、（Ｂ）は（Ａ）の流路部２０の流路基材２１のＢ−Ｂ線概略断面図であり、流路基材２１を透水性材料１２で形成した場合の概略説明図であり、（Ｘ）、（Ｙ）は、流路基材２１を他の材質で形成した場合の概略説明図であり、（Ｘ）は、流路基材２１を透水性材料２２と不透水性材料２３で形成した場合の概略説明図であり、（Ｙ）は、流路基材２１をナノファイバー層２４と不透水性材料２３で形成した場合の概略説明図である。 本実施形態の分光分析用チップ１に試料Ｌを供給した際の試料の移動状況と貫通孔１０ｈに形成される液膜Ｌｆの概略説明図である。 本実施形態の分光分析用チップ１を用いた分光分析の概略説明図である。 （Ａ）〜（Ｃ）は本実施形態の分光分析用チップ１に試料Ｌを供給した際の貫通孔１０ｈ内に形成される液膜Ｌｆの液面形状の変化の概略説明図であり、（Ｄ）は基材１１が試料Ｌにより膨潤した状態の概略説明図である。 本実施形態の分光分析用チップ１の検出部１０の不透水性領域１１ｃの概略説明図である。 本実施形態の分光分析用チップ１の検出部１０が形状保持層１１ｂとカバー部材３０ａ、３０ｂを有する構造の概略説明図である。 本実施形態の分光分析用チップ１の分光分析に用いる分光計ＳＭの概略説明図である。 実験に使用した本実施形態の分光分析用チップ１の概略説明図であり、（Ｂ）は、貫通孔１０ｈの形状を示した概略説明図である。 実験１の結果（検量線）を示した図である。 実験２の分析１の結果（吸収スペクトル）を示した図である。 実験２の分析１の結果（検量線）を示した図である。 実験２の分析２の結果を示した図であり、（Ａ）はＲＧＢ表色系をＸＹの２軸平面として表現したグラフであり、（Ｂ）は液膜の着色状況を示した図である。 実験２の分析２の結果（Ｒ値と銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液の濃度との関係）を示した図である。 実験４の結果（吸収スペクトル）を示した図である。 実験４の結果（試料の滴下量変化と吸光度の関係）を示した図である。 実験４の結果（貫通孔領域の側面視観察）を示した図である。 実験５の結果（吸収スペクトル）を示した図である。 実験６の結果（吸収スペクトル）を示した図である。 実験７の結果（吸収スペクトル）を示した図である。 実験８の結果（吸収スペクトル）を示した図である。

つぎに、本発明の本実施形態を図面に基づいて説明する。
本実施形態の分光分析用チップは、分光分析法に用いられる分析用具であって、少量の試料であっても簡単な操作で定量分析が行うことができるようにしたことに特徴を有している。

なお、明細書において試料とは、液体の試料のことをいい、試料中に存在する成分等はとくに限定されない。例えば、血液や、河川などの環境水、工場から排出される工場排水などを試料とすることができる。

まず、本実施形態の分光分析用チップの特徴について詳細に説明する前に、分光分析用チップの概略と、本実施形態の分光分析用チップを分析する分光計を説明する。

本明細書中の分光分析法とは、光を試料に照射して得られる光に基づいて試料中の目的成分を分析する手法のことを意味しており、得られた光の解析手段は様々な方法を用いることができる。例えば、解析手段としては、吸光光度法、蛍光分光分析法または色調分析などを用いることができるが、詳細については後述する。

図１に示すように、符号１は、板状の本実施形態の分光分析用チップ（以下、単に分光分析用チップ１という）を示している。図９の符号ＳＭは、分光分析用チップ１を分析するのに用いられる分光計を示している。

＜分光分析用チップ１の検出部１０の概要＞
図１、図２に示すように、分光分析用チップ１は、検出部１０を備えている。そして、この検出部１０は、板状の基材１１を備えている。この基１１は、液体が通液可能な部材であり、表裏を貫通する貫通孔１０ｈを有している。図２に示すように、基材１１内部には、液体が毛細管現象によって通液可能な複数の空隙１１ｈが形成されている。そして、この空隙１１ｈは、貫通孔１０ｈに連通するように形成されている。この貫通孔１０は、液体を表面張力によって保持し得る大きさに形成されている。

図４、図５に示すように、検出部１０は、検出部１０に試料Ｌが供給されれば、試料Ｌを内部に形成された複数の空隙１１ｈ内を移動させて貫通孔１０ｈ内へ試料Ｌを供給させることができる。そして、貫通孔１０ｈ内へ供給された試料Ｌは、表面張力によって貫通孔１０ｈ内に保持される。つまり、貫通孔１０ｈ内に供給された試料Ｌは、貫通孔１０ｈ内において膜（液膜Ｌｆ）を形成するこの液膜Ｌｆが、後述する分光分析に用いられる。

貫通孔１０ｈの数は、１個でもよいが、精度向上の観点から複数個形成するのが望ましい。なお、複数とは、２個以上を意味する。

図４に示すように、検出部１０の基材１１に複数の貫通孔１０ｈが形成されている場合、基材１１内には、毛細管現象によって液体が通液可能な空隙１１ｈが複数形成されている。このため、一の貫通孔１０ｈに試料が供給されると、隣接する他の貫通孔１０ｈにも自動的に試料Ｌを移動（つまり展開）させることができる。貫通孔１０ｈに供給された試料Ｌは、表面張力によって貫通孔１０ｈ内に保持されて液膜Ｌｆを形成する。そして、検出部１０において、この現象が連続的に行われ、複数の貫通孔１０ｈ全体に試料Ｌの液膜Ｌｆを形成させることができる（図４、図５参照）。

図１、図２に示すように、検出部１０の貫通孔１０ｈは、基材１１の面方向に対して略直交するように形成されている。
具体的には、貫通孔１０ｈは、基材１１の表面に形成された貫通孔１０ｈの表面開口１０ｈａの中心と、基材１１の裏面に形成された貫通孔１０ｈの裏面開口１０ｈｂの中心を結ぶ貫通孔１０ｈの中心軸ＣＬが基材１１面（表面１１ｓａおよび／または裏面１１ｓｂ）に対して略直交するように、基材１１の表裏を貫通して形成されている。貫通孔１０ｈの中心軸ＣＬが基材１１面１１ｓａ、１１ｓｂに対して略直交するように形成することにより、詳細は後述するが、試料Ｌを分析する際の精度を向上させることができるようになる。

（分光計ＳＭ）
図９に示すように、分光計ＳＭは、分光分析用チップ１を設置するための測定窓を有するステージと、ステージの測定窓に設置した分光分析用チップ１の検出部１０の複数の貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆに対して照射光Ｌ１を照射する光源手段と、光源手段から照射された光が液膜Ｌｆを透過した透過光Ｌ２を受光する受光手段と、この受光手段で受光した光を解析する解析手段と、を備えている。

なお、分光計ＳＭのステージの測定窓は、分光計ＳＭのステージの表裏を連通して形成されており、分光分析用チップ１を設置し保持するための測定用の連通孔である。
分光計ＳＭに用いられる受光手段および解析手段としては、吸光光度法、蛍光分光分析法または色調分析などを用いることができる。
以下、各分析方法を用いて試料Ｌ中の目的成分を分析する場合を順に説明する。

（吸光光度法または蛍光分光分析法を用いる場合）
まず、吸光光度法または蛍光分光分析法を用いる場合について説明する。
図９に示すように、分光計ＳＭには、ステージの測定窓を挟むようにして、光源手段と受光手段が配置されている。
光源手段は、光源と、光源から放出された光を照射する光照射ファイバとを備えている。光照射ファイバは、基端が光源に接続されており、光源からの光を先端の照射面から照射光Ｌ１として照射できるようになっている。
受光手段は、光照射ファイバと、この光照射ファイバから照射された照射光Ｌ１が測定窓に配置して分光分析用チップ１の検出部１０に形成された液膜Ｌｆを通過（透過）し、この透過した光（透過光Ｌ２）を受光する光受光ファイバと、を備えている。この光受光ファイバは、基端が解析手段に接続されており、先端の受光面で受光した透過光Ｌ２を解析手段へ伝搬できるようになっている。この解析手段は、受光手段の光受光ファイバから伝搬された光をデータ信号に変換して、変換されたデータ信号に基づいて試料Ｌ中の目的成分の濃度を算出する機能を有している。

光照射ファイバと光受光ファイバの設置方法はとくに限定されない。
例えば、図９に示すように、測定窓を介して、光照射ファイバの光軸上に光受光ファイバの受光面が位置するように、光照射ファイバと光受光ファイバを配置することができる。具体的には、測定窓の下方に光照射ファイバが配置される。このとき、光照射ファイバの照射面が、測定窓の開口面に対向するように配置される。つまり、光照射ファイバは、照射面から照射した照射光Ｌ１の光軸が、測定窓の開口面に対して直交するように配置される。そして、光受光ファイバは、光照射ファイバを設置した逆の位置、つまり、測定窓の上方に、光照射ファイバの照射面から照射された照射光Ｌ１が検出部１０の液膜Ｌｆを透過した透過光Ｌ２を受光面で受光できるように配置される。
そして、分光計ＳＭの測定窓に分光分析用チップ１の検出部１０を配置すれば、下方から順に、光照射ファイバの照射面、分光分析用チップ１の検出部１０、光受光ファイバの受光面が位置するように設置することができる。

すると、この分光計ＳＭでは、照射光Ｌ１を照射した際、この照射光Ｌ１の照射領域には、検出部１０の複数の貫通孔１０ｈ（貫通孔１０ｈに形成された液膜Ｌｆ）および光受光ファイバの受光面が位置するようにセットすることができる。そして、光受光ファイバでは、液膜Ｌｆを透過した透過光Ｌ２を受光面で適切に受光できるようにセットすることができる。

なお、吸光光度法に基づき試料Ｌ中の目的成分の濃度を算出する場合には、モノクロメータを設けた構成にするのが望ましい。このモノクロメータは、光源から照射された光のうち特定の波長の光を選択する機能を有するものであり、光源と光照射ファイバの先端の照射面との間に設けられる。例えば、モノクロメータとしては、プリズムや回折格子、光学フィルタなどが利用することができる。プリズムを利用した場合には、広い波長帯の電磁波（光）を選択することができるという利点がある。

また、蛍光分光分析法に基づき試料Ｌ中の目的成分の濃度を算出する場合には、照射光Ｌ１の光軸と受光ファイバの受光面との位置関係を適切に調整するのが望ましい。
具体的には、光照射ファイバからの照射された照射光Ｌ１（蛍光分光分析法では励起光といい、以下、当該分析法では、励起光Ｌ１という）が受光ファイバに直接入射しない構成となるように光学系を配置する。このような配置にすることにより、蛍光分析を適切に行うことができる。より具体的には、光照射ファイバからの照射された励起光Ｌ１により、分光分析用チップ１の検出部１０の貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆ中の目的成分が蛍光を発する。この蛍光は、照射された励起光Ｌ１に対して長波長側にシフトする。そして、この目的成分に基づく蛍光を適切に検出することにより、目的成分の濃度を適切に定量することができる。このためには、以下のような構成を採用する。
例えば、検出部１０に形成された液膜Ｌｆを透過した透過光Ｌ２のうち、低波長側の光成分を排除する光学フィルターを分光分析用チップ１の検出部１０と受光ファイバとの間に配置する構成とする。または、目的成分に基づく蛍光は、ランダムな方向に放射されるので、光照射ファイバからの照射された励起光Ｌ１の光軸を外した方向（例えば、光照射ファイバからの照射された励起光Ｌ１の進行方向に対して垂直方向）に受光ファイバの受光面を配置する構成とする。

（色調分析を用いる場合）
つぎに、色調分析を用いる場合について説明する。
色調分析を用いる場合には、光受光ファイバに替えて、光照射ファイバの反対側に光学顕微鏡を設けた構成とする。
この構成は、光学顕微鏡により分光分析用チップ１の検出部１０の貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆの状態を光学顕微鏡で観察できる構成であれば、とくに限定されない。
例えば、光学顕微鏡は、基端が解析手段に接続されており、観察した検出部１０の貫通孔１０ｈ内の液膜Ｌｆの画像をデータ化して解析手段へ送信できるようになっている。
この解析手段は、光学顕微鏡から送信された画像データに基づいて試料Ｌ中の目的成分の濃度を算出する機能を有している。例えば、この解析手段は、光学顕微鏡から送信された画像データに基づく着色を色空間（ＲＧＢやＬ＊Ａ＊Ｂ＊（エルスター・エースター・ビースター）などの表色系）を用いて解析し、得られた値から試料Ｌ中の目的成分の濃度を算出する機能を有している。

以上のごとき構成の分光計ＳＭに、検出部１０の貫通孔１０ｈ内に試料Ｌの液膜Ｌｆを形成した分光分析用チップ１をセットして、検出部１０に対して照射光Ｌ１を照射する。照射された照射光Ｌ１は、検出部１０の貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆを透過して、透過光Ｌ２を生成させる。そして、この透過光Ｌ２を分光分析法より分析すれば、試料Ｌ中の目的成分の濃度を適切に定量することができる。つまり、分光分析用チップ１の検出部１０が、従来の分光分析で用いられるセルと同様の機能を発揮するのである。具体的には、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１が、従来の分光分析法に用いられるセルに相当するものである。そして、基材１１の各貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆが、従来のセルに収容された試料に相当するものである。
したがって、分光分析用チップ１は、検出部１０の基材１１が石英やガラス、プラスチックなど光を透過する透明素材で形成されていないにも関わらず、従来の分光分析法と同様の原理で試料Ｌ中の目的成分を定量することができるようになっている。

なお、分光分析用チップ１の検出部１０の貫通孔１０ｈ内に形成される液膜Ｌｆの膜厚の長さＲが、分光分析法における光路長に相当する。

しかも、分光分析用チップ１の検出部１０に形成された貫通孔１０ｈは、試料Ｌを供給した際に表面張力によって貫通孔１０ｈ内に試料Ｌを保持させることができる大きさに形成されている。つまり、分光分析用チップ１は、非常に少量（例えば１μＬ〜１５０μＬ程度）の試料Ｌでも試料Ｌ中の目的成分の濃度を適切に定量できる。

また、検出部１０の基材１１内には、複数の空隙１１ｈが形成されている。この空隙１０ｈは、液体を毛細管現象により通液させることができる大きさに形成されている。そして、複数の空隙１１ｈは、基材１１に形成された複数の貫通孔１０ｈに連通するように形成されている。
このため、検出部１０の基材１１の一の箇所に試料Ｌを供給すれば、供給された試料Ｌは、基材１１表面から内部に浸透する。そして基材１１内に浸透した試料Ｌは、空隙１１ｈ内を毛細管現象により自動的に移動しながら複数の貫通孔１０ｈ内にまんべんなく供給される。つまり、複数の貫通孔１０ｈに均一に試料Ｌを供給しなくても、基材１１の一箇所に試料Ｌを供給するだけで、複数の貫通孔１０ｈ内にほぼ均一に展開させて、貫通孔１０ｈ内に均一な液膜Ｌｆを形成させることができる。このため、複数の液膜Ｌｆから均質なデータを得ることができるようになる。つまり、一度の測定で、複数の液膜Ｌｆのデータを解析することができるようになる。
したがって、分光分析用チップ１を用いれば、少ない試料量であっても、試料Ｌ中の目的成分を精度よく定量することができるようになる。

なお、本明細書において、試料Ｌが複数の貫通孔１０ｈ内に略均一に展開されている、とは、各貫通孔１０ｈ内に略同じ量の試料Ｌが供給されて、各貫通孔１０ｈ内において略同じ膜厚の液膜Ｌｆが形成された状態を意味しており、貫通孔１０ｈ内に展開された試料Ｌ量はとくに限定されない。
例えば、図５または図６（Ｂ）、図６（Ｃ）に示すように、各貫通孔１０ｈ内全体が試料Ｌで満たされるように展開された状態や、試料Ｌが各貫通孔１０ｈ内の半分程度に展開された状態（図６（Ａ）参照）や、図示しないが、試料Ｌが各貫通孔１０ｈ内の三分の一程度に添加された状態などを挙げることができる。

また、図６に示すように、各貫通孔１０ｈに展開された試料Ｌの液膜Ｌｆの長さＲ（具体的には、液膜Ｌｆの膜厚の厚さ方向の長さをいい、以下単に液膜長さＲという）は、貫通孔１０ｈの中心軸ＣＬに沿って計測することができる。
例えば、図６（Ｂ）、図６（Ｃ）に示すように、液膜Ｌｆの液膜長さＲは、液膜Ｌｆの上面Ｌｓａと貫通孔１０ｈの中心軸ＣＬが交差する点Ｐと、液膜Ｌｆの底面Ｌｓｂと貫通孔１０ｈの中心軸ＣＬが交差する点Ｑの距離で求めることができる。

例えば、液膜Ｌｆの上面Ｌｓａと基材１１の表面１１ｓａが略面一となり、液膜Ｌｆの底面Ｌｓｂと基材１１の裏面１１ｓｂが略面一となるように貫通孔１０ｈ内全体が試料Ｌで満たされるように展開された場合、液膜Ｌｆの液膜長さＲと、貫通孔１０ｈの軸方向の長さ（貫通孔１０ｈの貫通軸方向の長さ）は略同じになる。言い換えれば、液膜Ｌｆの液膜長さＲは、基材１１の貫通孔領域における厚さ方向の距離と略同じになる。

一方、液膜Ｌｆの形状は、試料Ｌの性状により変化する。
例えば、図６（Ｂ）に示すように、液膜Ｌｆは、試料Ｌの表面張力により上面Ｌｓａや底面Ｌｓｂが凸状のメニスカス形状に形成されることがある。つまり、この試料Ｌを貫通孔１０ｈ内が満たされるように検出部１０に供給すれば、液膜Ｌｆの液膜長さＲは、貫通孔１０ｈの軸方向の長さよりも長くなる。なお、このような凸状のメニスカス形状を形成する試料Ｌとしては、水を溶媒とする水溶液のものを挙げることができる。
また、その逆に、図６（Ｃ）に示すように、液膜Ｌｆは、液膜Ｌｆの上面Ｌｓａや底面Ｌｓｂが凹状のメニスカス形状に形成されることがある。そして、上記と同様にこの試料Ｌを貫通孔１０ｈ内全体に展開すれば、液膜Ｌｆの液膜長さＲは、貫通孔１０ｈの軸方向の長さよりも短くなる。

なお、本明細書では、試料Ｌが貫通孔１０ｈ内に満たされた状態における、貫通孔領域の断面視において、液膜Ｌｆの液面Ｌｓ（上面Ｌｓａ、底面Ｌｓｂ）と基材面１１ｓ（表面１１ｓａ、裏面１１ｓｂ）は、ほぼフラットな状態にあるという。つまり、上述したような液膜Ｌｆの液面Ｌｓと基材面１１ｓが面一な状態はもちろん、液膜Ｌｆの凸状または凹状に形成されているような状態も、本明細書におけるフラットな状態に含まれる。

また、液膜Ｌｆが上面Ｌｓａや底面Ｌｓｂを凸状に形成する試料Ｌを複数の貫通孔１０ｈ内が満たされるように検出部１０に供給した場合、液膜Ｌｆの貫通孔１０ｈの表面開口１０ｈａおよび／または裏面開口１０ｈｂから突出するように形成された凸状部が、隣接する他の凸上部と連結することがある。この現象が、複数の貫通孔１０ｈに形成された液膜Ｌｆ全体で生じれば、基材１１の貫通孔領域の表面および／または裏面に試料Ｌが滞留した層（滞留層）を形成させることができる（実施例 図１８参照）。
滞留層により、分光分析法における光路長を、液膜Ｌｆの上面Ｌｓａが基材１１表面１１ｓａと面一となる場合に比べて長くできる。言い換えれば、供給する試料Ｌ量を多くすることができる。そして、滞留層が形成されることにより複数の貫通孔１０ｈ内に確実に液膜Ｌｆを形成させることができる。このため、分光分析により試料Ｌ中の目的成分を測定した際の感度を向上させることができる。しかも、複数の貫通孔１０ｈ内への液膜Ｌｆ形成がより適切に行われる。このため、試料Ｌ中の目的成分の定量値の精度をより向上させることができる。
したがって、基材１１表面に滞留層を形成させることにより、試料Ｌの目的成分を感度よく測定することがきるので、試料Ｌ中の濃度を精度よく安定して定量することができるようになる。

ここで、従来、分光分析法としては、吸光光度法または蛍光分光法が、定量性の高さや検出システムのシンプルさから広汎に利用されている。これらの分光分析法では、測定試料に光を入射し、試料中の目的成分と作用した光（透過光や蛍光など）を検出光として検出する必要がある。このため、一般的には、試料を収容するための容器は、石英やガラスなどの光を透過する材質で形成された検出部（セル）が用いられることが前提となっている。つまり、従来の分光分析法では、光が透過しない材質で形成されたセルを用いることは全く想定されておらず、そもそも光が透過しない材質のセルを用いた分光分析は行うことができないとされている。
さらに、従来の分光分析法で使用されるセルの材質は、内部に収容した試料が壁面等から外部へ染み出さないものである必要がある。具体的には、上記のようなガラス等の耐水性、耐溶媒性を有する材質のものを用いる必要がある。このため、従来の分光分析法では、ろ紙のような繊維等をセルの形状に成型して利用することは全く想定されていない。

しかしながら、本発明者らは、セルに相当する部材に貫通孔を形成し、この貫通孔に試料を展開させて液膜を形成させることにより、従来の分光分析法を用いて試料中の目的成分の濃度を定量的に測定することができることを初めて見出し、本発明に至った。
具体的には、分光分析用チップ１は、検出部１０の基材１１が、紫外、可視、赤外光などの電磁波を透過しないまたは透過しにくい材質（例えば、繊維、ろ紙、耐水紙など）で形成されていても、この基材１１に貫通孔１０ｈを形成することにより、分光分析法に基づいて試料Ｌ中の目的成分の濃度を定量することができる。つまり、分光分析用チップ１は、検出部１０の貫通孔１０ｈを有する基材１１と、従来技術の分光分析法に用いられているセルでは、分光分析法において、同様の機能を発揮するものの、両者は全く異なる技術的思想に基づいて構成されたものである。

しかも、従来技術の分光分析法では、セルにある程度の量（例えば、数ｍｌ）の試料を供給しなければ適切な定量を行うことができないのに対して、分光分析用チップ１では供する試料量を数μＬ〜数百μＬ程度と従来のセルを用いる場合と比べて１／１０〜１／１００程度の量で適切な定量が行うことができるようになる。
このため、試料量が少なく従来技術の分光分析法では分析に適さない試料であっても、分光分析用チップ１を用いれば、分光分析法により試料Ｌ中の目的成分を適切に定量することができるようになる。
とくに、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１に貫通孔１０ｈが複数形成されていれば、同時に複数の液膜Ｌｆから目的成分の濃度を算出することができるので、より精度の高い定量を行うことができるようになる。

さらに、貫通孔１０ｈ内に形成される液膜Ｌｆは、貫通孔１０ｈ内に保持された状態である。つまり、液膜Ｌｆ自体の材質は、液体そのものである。このため、従来技術のように試料をプラスチックやガラスなどセルで保持した際に生じるセルの材質に起因する照射光の吸収等の影響を抑制できる。例えば、従来のプラスチック製のセルでは、紫外域３００ｎｍ以下で使用することができないし、有機溶媒や強酸を使用することができない。また、従来のガラス製や石英製のセルでは、強アルカリ溶液を使用することができない。
したがって、従来の技術のようにセルの材質の影響に基づく分析方法の選択を行う必要がなくなるので、分析の自由度を向上させることができるという利点も得られる。

なお、検出部１０の基材１１の貫通孔１０ｈ内に試料Ｌ中の目的成分と反応する検出材料を担持させてもよい。
この検出材料としては、試料Ｌ中の目的成分により抗原抗体反応や蛍光反応などを生じる様々な反応試薬を適宜選択し採用することができる。この場合、貫通孔１０ｈ内に液膜Ｌｆが形成すれば、その液膜Ｌｆ中の目的成分と検出材料が反応するようになる。この反応した状態を分光分析に基づいて測定すれば、より選択的に目的成分を定量できるようになる。

＜分光分析用チップ１の構造の詳細＞
つぎに、分光分析用チップ１の構造を詳細に説明する。
図１、図３に示すように、分光分析用チップ１は、板状の基材１１を有する検出部１０を備えている。

（検出部１０の基材１１）
検出部１０の基材１１は、板状の部材であり、内部に毛細管現象によって液体が通液可能な空隙１１ｈが形成されていれば、材質はとくに限定されない。
基材１１は、透水性材料１２だけを備えた構成としてもよいし（図２（Ａ）参照）、透水性材料１２と不透水性材料１３とを備えた構成としてもよいし（図２（Ｘ）参照））、ナノファイバーｎｆからなるナノファイバー層１４と不透水性材料１３とを備えた構成としてもよいし（図２（Ｙ）参照）、透水性材料１２と不透水性材料１３とナノファイバー層１４とを備えた構成としてもよい。なお、各材質についての詳細は後述する。

基材１１の厚みは、貫通孔１０ｈ内に形成される液膜Ｌｆの分析に影響しない程度であれば、とくに限定さない。例えば、基材１１の厚み（図１（Ｂ）では、基材１１の表面１１ｓａと裏面１１ｓｂとの距離）は、０．０１ｍｍ〜１０ｍｍ程度となるように形成される。

（吸光光度法を行う際の基材１１の厚さ）
ここで、吸光光度法では、セルにおける光路長が長ければ通過する光の吸光量が多くなるので感度を高くすることができる。このため、試料中の目的成分の濃度を適切に定量することができる。

分光分析用チップ１においても、同様に、光路長に相当する液膜Ｌｆの液膜長さＲを長くすることにより、試料Ｌ中の目的成分の定量をより適切に行うことができる。
しかしながら、光路長つまり貫通孔１０ｈが形成される基材１１の貫通孔領域における厚さ方向の長さをあまり長くすると、透過光において、貫通孔１０ｈの内面の材質に基づく影響が発生する可能性がある。
具体的には、貫通孔１０ｈ内に展開した液膜Ｌｆに基づく光吸収だけでなく、貫通孔１０ｈの内面の材質に基づく照射光Ｌ１の吸収や散乱等による影響により、液膜Ｌｆ中の目的成分以外の透過光量の減少、すなわち測定への悪影響（感度の低下、測定精度の悪化）が発生する可能性がある。例えば、基材１１の材質にもよるが、検出部１０の基材１１の貫通孔領域における厚みが１０ｍｍよりも厚い場合、測定値において、基材１１の材質に基づく非特異な光の吸収が発生する可能性が生じる。
一方、例えば、基材１１の貫通孔領域における厚みが０．０１ｍｍよりも薄くなりすぎると、液膜Ｌｆの液膜長さＲが短くなる結果、光路長が短くなりすぎてしまい、試料Ｌ中の目的成分の濃度を適切に測定することができなくなる可能性がある。また、検出部１０の基材１１の貫通孔領域における厚みが、上記値よりも薄くなると、貫通孔１０ｈの形状が変化しやすくなる。

したがって、吸光光度法に基づく分析方法の観点では、分光分析用チップ１は、検出部１０の基材１１の貫通孔領域における厚みが、例えば、０．０１ｍｍ以上、１０ｍｍ以下である。なお、厚みの下限値は、好ましくは０．０５ｍｍ以上であり、より好ましくは０．１ｍｍ以上ある。また、厚みの上限値は、好ましくは５ｍｍ以下であり、より好ましくは３ｍｍ以下であり、さらに好ましくは１．５ｍｍ以下である。

（蛍光分光分析法を行う際の基材１１の厚さ）
また、蛍光分光分析法に基づく場合も吸光光度法と同様に、基材１１の貫通孔領域における厚みを厚くすれば、液膜Ｌｆの液膜長さＲを長く（つまり光路長を長く）できる一方、貫通孔１０ｈの内面の材質に基づく影響が発生する可能性がある。
具体的には、液膜Ｌｆの液膜長さＲを長くしすぎると（つまり基材１１の貫通孔領域における厚みを厚くしすぎると）、透過光において、貫通孔１０ｈの内面の材質に基づく影響が発生する可能性がある。より具体的には、貫通孔１０ｈ内に展開した液膜Ｌｆに基づく光吸収だけでなく、上述した吸光光度法の場合と同様の測定への悪影響（感度の低下、測定精度の悪化）が発生する可能性がある。
一方、基材１１の貫通孔領域における厚みを薄くしすぎると、液膜Ｌｆの液膜長さＲが短くなる結果、光路長が短くなり、適切な蛍光強度を得られない。

したがって、蛍光分光分析法に基づく分析方法の観点では、分光分析用チップ１は、検出部１０の基材１１の貫通孔領域における厚みが、吸光光度法に基づく場合と同様の範囲内となるように調製するのが望ましい。

（色調分析を行う際の基材１１の厚さ）
色調分析に基づく場合も上述した吸光光度法や蛍光分光分析法と同様に、基材１１の貫通孔領域における厚みを厚くすれば、液膜Ｌｆの液膜長さＲを長く（つまり光路長を長く）できる。そして、この液膜長さＲが長くなれば、液膜Ｌｆ中の目的成分由来の吸光あるいは蛍光に基づく色調変化量を高くすることができる。
一方、基材１１の貫通孔領域における厚みを厚くしすぎると、透過光において、貫通孔１０ｈの内面の材質に基づく光の影響が発生する可能性がある。具体的には、貫通孔１０ｈ内に展開した液膜Ｌｆに基づく光吸収だけでなく、貫通孔１０ｈの内面の材質に基づく光吸収の影響により、液膜Ｌｆ中の目的成分の濃度に基づかない色調変化や色調が暗くなるなど、色調変化を視認できにくくなる、すなわち測定への悪影響（測定精度の悪化）が発生する可能性がある。

したがって、色調分析法に基づく分析方法の観点では、分光分析用チップ１は、検出部１０の基材１１の貫通孔領域における厚みが、吸光光度法に基づく場合と同様の範囲内となるように調製するのが望ましい。

なお、上記例は、基材１１の貫通孔領域の厚みが試料Ｌを検出部１０に対して供給した際、基材１１の材質が膨潤等により変動しない場合について説明したものである。つまり、貫通孔１０ｈ内全体を満たすように試料Ｌを検出部１０に対して供給して、基材１１に形成された複数の貫通孔１０ｈ内にほぼ均一な液膜Ｌｆを形成する。このとき、液膜Ｌｆの液膜長さＲは、乾燥状態の貫通孔１０ｈの貫通軸方向の長さ（つまり基材１１の貫通孔領域の厚み方向の距離）とほぼ同じ長さになる。
一方、検出部１０の基材１１の材質が、試料Ｌを吸収して膨潤等する場合には、試料Ｌを上述した場合に供給すれば、基材１１の厚み方向の距離は、乾燥状態よりも長くなる（図６（Ｄ）の参照、矢印方向に膨潤）。このとき、図６（Ｄ）に示すように、基材１１の膨潤に伴い、貫通孔１０ｈの貫通軸方向の長さも長くなる。
このため、液膜Ｌｆの液膜長さＲが長くなるので、光路長も基材１１が乾燥した状態の貫通孔１０ｈの貫通軸方向の長さよりも長くなる。つまり、基材１１の厚みが薄くても、試料Ｌにより膨潤等を生じやすい材質を基材１１の材質として採用すれば、分析に適切な光路長を維持させることができるようになる。よって、基材１１の厚みを薄くしても、基材１１の材質を調整することにより、試料Ｌ中の目的成分の濃度を適切に定量することが可能となる。
なお、試料Ｌの性状により液膜Ｌｆの液膜面Ｌｓが凸状のメニスカス形状になる試料Ｌを供給すれば、液膜長さＲをより長くできるので、光路長もより長くできる。

（基材１１の大きさ、形状）
検出部１０の基材１１の形状や大きさは、分析に影響しない程度の形状や大きさであれば、とくに限定されない。
例えば、基材１１の形状としては、例えば、円形状、矩形状、放射形状、らせん形状など様々な形状を採用することができる。基材１１の大きさとしては、検出部１０を分光計ＳＭにセットできる程度の大きさでればよく、例えば、基材１１の形状を正方形状にした場合には、一辺が０．１ｃｍ〜５ｃｍ程度となるように形成することができる。基材１１の形状を円形状にした場合には、直径が０．１ｃｍ〜５ｃｍ程度となるように形成することができるが、分光計ＳＭのステージの大きさ等に基づいて適宜調整すればよい。

（基材１１中の空隙１１ｈ）
図２に示すように、検出部１０の基材１１は、内部に上述した液体が毛細管現象によって通液可能な複数の空隙１１ｈが形成されている。
この基材１１内部の空隙１１ｈは、液体が毛細管現象によって通液可能となるように形成されていれば、その空隙の幅はとくに限定されない。例えば、空隙１１ｈの幅が０．１μｍ〜２０００μｍ程度となるように形成することができ、より好ましくは０．２μｍ〜１０００μｍ以下である。そして、より好ましくは０．４μｍ〜１０００μｍ以下、さらに好ましくは１μｍ以上１０００μｍ以下、さらにより好ましくは１μｍ以上２００μｍ以下となるように形成する。
そして、基材１１内において、複数の空隙１１ｈが、網目状に形成されている。つまり、基材１１内において、隣接する空隙１１ｈ同士が互いに連通するように複数の空隙１１ｈが網目状に形成されている。言い換えれば、基材１１内には、液体が毛細管現象によって通液可能な微細な空隙ネットワークが形成されているのである。

なお、基材１１中に占める複数の空隙１１ｈの割合は、とくに限定されない。
例えば、基材１１の材質としては、透水性材料１２であるセルロース繊維からなる一般的に市販されている実験用のろ紙や、ろ布（フエルト）、不織布等を採用することができる。このような一般的な材質を用いて基材１１を形成した場合、その空隙率（ろ紙等の一定体積あたりの空隙１１ｈの体積が占める割合）は、５０％〜９５％程度である。
例えば、基材１１としてろ紙を用いた場合、その材質にもよるが、セルロース系であれば６０％〜９５％であり、シリカ系であれば９０％、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）系であれば５０％〜８５％であり、ガラス系であれば８０％〜９０％であり、レーヨン・ポリエステル系不織布であれば８０％〜９０％である。

（貫通孔１０）
図１、図２、図４、図５に示すように、検出部１０の基材１１には、基材１１の表裏を貫通する貫通孔１０ｈが複数形成されている。そして、この貫通孔１０ｈは、上述したように、基材１１に対して略直交するように形成されている。具体的には、貫通孔１０ｈは、中心軸ＣＬが上述したように基材１１の基材面１１ｓに対して略直交するように形成されている。
なお、本明細書では、この略直交するとは、貫通孔１０ｈのアスペクト比（貫通孔１０ｈの開口幅と貫通孔１０ｈの長さの比）の観点から、両者のなす角が９０度±５度を示すことを意味する。言い換えれば、試料Ｌ中の目的成分を適切に定量する上では、貫通孔１０ｈ内に形成される液膜Ｌｆに入射する照射光Ｌ１の入射角と透過光Ｌ２の減衰率に基づいて、アスペクト比が、tan５°（０．０８７）の逆数である１１よりも高くならないように調整される。

分光分析用チップ１を用いた分光分析においては、上述したように、分光計ＳＭにセットした分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１の基材面１１ｓに対して光軸が略直交するように照射光Ｌ１が照射される。この照射された照射光Ｌ１は、検出部１０の貫通孔１０ｈに形成された液膜Ｌｆを透過して透過光Ｌ２が生成される。
このとき貫通孔１０ｈが基材１１の基材面１１ｓに対して略直交するように形成されているので、液膜Ｌｆが、照射光Ｌ１の光軸に対して略平行となるように形成できる。このため、液膜Ｌｆに対して照射された照射光Ｌ１の光軸に対して、略同軸の光軸を有する透過光２を形成できる。このため、液膜Ｌｆ中の目的成分の濃度を透過光２に基づいて適切に定量することができる。
一方、貫通孔１０ｈの中心軸ＣＬと基材１１の基材面１１ｓのなす角が上記範囲を外れれば、適切な透過光Ｌ２が得られなくなる傾向にある。
したがって、分光分析用チップ１を用いて分光分析により試料Ｌ中の目的成分を適切に定量するという観点では、貫通孔１０ｈは、基材１１の基材面１１ｓに対して略直交するように形成されているのが望ましい。

なお、試料Ｌ中の目的成分の定性を行う場合には、上記なす角が９０度±１５度範囲であればよい。言い換えれば、試料Ｌ中の目的成分を定性する上では、貫通孔１０ｈ内に形成される液膜Ｌｆに入射する照射光Ｌ１の入射角と透過光Ｌ２の減衰率に基づいて、アスペクト比が、tan１５°（０．２６８）の逆数である４よりも高くならないように調整するのが好ましい。

（貫通孔１０ｈの形状・大きさ）
この貫通孔１０ｈの大きさや形状は、貫通孔１０ｈ内に試料Ｌを供給した際に表面張力によって液膜Ｌｆが形成された状態を保持し得る機能を有していれば、とくに限定されない。

（貫通孔１０ｈの形状）
貫通孔１０ｈの形状としては、円形や楕円形状のほか、矩形状や三角形状等など様々な形状に形成することができる。
例えば、貫通孔１０ｈの形状として、開口１０ｈａ、１０ｈｂの一部の曲率が他の曲率と比べて大きくなるような三角形状や楕円形状などの非円形状を採用する場合には、基材１１中の空隙１１ｈを移動してきた試料Ｌが貫通孔１０ｈの内壁面に到達した際に曲率の大きい箇所から貫通孔１０ｈ内へ侵入する傾向にある。つまり、非円形状を採用すれば、円形に形成する場合と比べて、試料Ｌを効率よく貫通孔１０ｈ内に展開させやすい傾向にある。

（貫通孔１０ｈの大きさ）
貫通孔１０ｈの大きさは、内部に供給された試料Ｌを表面張力によって液膜Ｌｆの状態を保持できる大きさであれば、とくに限定されない。

例えば、略円形の貫通孔１０ｈでは、開口１０ｈａ、１０ｈｂの大きさが、５０μｍ以上となるように形成するのが好ましい。貫通孔１０ｈの大きさが５０μｍよりも小さいと貫通孔１０の形状を安定させにくい傾向にある。一方、試料Ｌの粘性にもよるが、貫通孔１０ｈの大きさの上限は上記のごとく液膜Ｌｆを形成することができればとくに限定されないが、例えば、１０００μｍよりも小さくなるように形成される。したがって、貫通孔１０ｈの形状が略円形の場合、開口１０ｈａ、１０ｈｂの内径が５０μｍ〜１０００μｍであり、より好ましくは５０μｍ〜６００μｍであり、さらに好ましくは１００μｍ〜６００μｍである。

例えば、楕円形状の貫通孔１０ｈでは、開口１０ｈａ、１０ｈｂの長径（長軸方向の長さ）が５０μｍ〜１０００μｍであり、長径と直交する短径（短軸方向の長さ）が長径よりも短くなるように形成されており、より好ましくは長径が５０μｍ〜５００μｍ、単径がこの長径よりも短くなるように形成される。

また、例えば、材質としてセルロース繊維からなるろ紙を基材１１として採用し、この基材１１に対して楕円形状の貫通孔１０ｈを形成する場合、貫通孔１０ｈは、開口１０ｈａ、１０ｈｂの長径が３００μｍ〜５００μｍ、短径が２５０μｍ〜３００μｍである。
また、例えば、材質としてガラス繊維からなるろ紙を基材１１として採用し、この基材１１に対して楕円形状の貫通孔１０ｈを形成する場合、貫通孔１０ｈは、開口１０ｈａ、１０ｈｂの長径が３５０μｍ〜６００μｍ、短径が３００μｍ〜４００μｍである。
さらに、例えば、材質としてニトロセルロース繊維からなるろ紙を基材１１として採用し、この基材１１に対して楕円形状の貫通孔１０ｈを形成する場合、貫通孔１０ｈは、開口１０ｈａ、１０ｈｂの長径が２５０μｍ〜５００μｍ、短径が２００μｍ〜３００μｍである。

（貫通孔１０ｈの数）
貫通孔１０ｈは、複数を基材１１の貫通孔領域に形成することがき、その数は、とくに限定されない。
例えば、内径が約２５０μｍの略円形の貫通孔１０ｈの場合または長径が約３００μｍ、短径が約２００μｍの楕円形状の貫通孔１０ｈの場合、貫通孔領域において、貫通孔１０ｈは、１００個〜１０００個／ｃｍ^２となるように形成される。
分光分析において、貫通孔１０ｈが複数形成されていれば、液膜Ｌｆの数も複数となることから、得られるデータ数も多くできる。このため、試料Ｌ中の目的成分の定量精度を向上させることができる。また、貫通孔１０ｈを複数形成することにより、分光計ＳＭを用いた測定において、貫通孔１０ｈに形成された液膜Ｌｆの位置合わせが行い易くなる。このため、分析時の操作性を向上させることができるようになる。さらに、貫通孔１０ｈを複数形成することにより、得られる定量値のバラツキを抑制できるので、各貫通孔１０ｈの形状のバラツキをある程度大きくできる。このため、貫通孔１０ｈの加工精度を低くできるので、分光分析用チップの生産性を向上させることができる。
一方、貫通孔１０ｈを単一の孔とする場合には、基材１１のコストを少なくでき、貫通孔１０ｈの加工時間を少なくできるという利点を有する。

貫通孔１０を形成する方法は、上記大きさや形状にできればとくに限定されない。
例えば、貫通孔１０を形成する方法としては、レーザーや機械的パンチング、酸、塩基、有機溶媒等エッチングを用いることができる。とくに、レーザーを用いた形成方法では、基材１１に対して貫通孔１０ｈを略直交するように形成させ易い。

＜分光分析用チップ１を用いた分光分析法＞
つぎに、分光分析用チップ１を用いた分光分析について説明する。

（吸光光度法に基づく試料Ｌ中の目的成分の定量）
以下では、まず、分光分析法のうち吸光光度法に基づいて試料Ｌ中の目的成分を定量する場合を代表として詳細に説明する。

なお、検出部１０の貫通孔１０ｈに供給される試料Ｌ量は、各貫通孔１０ｈ内全体を試料Ｌで満たして、貫通孔１０ｈ内全体に液膜Ｌｆが形成されるように供給する場合を代表として説明する（図５参照）。

また、以下で説明する分光計ＳＭおよび分光分析用チップ１は、代表例として説明するものであり、分光計ＳＭおよび分光分析用チップ１が以下に示す構成に限定されるものではない。
以下の説明で用いられる分光計ＳＭ、分光分析用チップ１の概略を説明する。
分光計ＳＭは、光照射ファイバをステージの下方に位置し、連通孔を挟んだ反対側の上方に光受光ファイバを設けたものを用いる。
分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１は、材質がろ紙（所定の空隙率を有する）であり、その大きさおよび形状としては、一辺が約１０ｍｍの正方形状に形成されている。この基材１１は、各辺の内方に、一辺が約５ｍｍ四方の貫通孔領域を形成する。この貫通孔領域は、中心が基材１１の重心と略一致するように基材１１の略中央部に形成する。そして、この貫通孔領域には、直径１００μｍ〜１０００μｍ程度の円形状の貫通孔１０ｈが２００個〜３００個／ｃｍ^２形成されている。

（試料Ｌの展開）
まず、検出部１０の各貫通孔１０ｈ内へ試料Ｌを展開させる。
図４、図１０に示すように、試料Ｌは、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１における貫通孔領域の一部または貫通孔領域近傍付近に所定量滴下しながら供給される。

図４に示すように、供給された試料Ｌは、滴下した表面付近から基材１１内へ浸透する。基材１１内に表面から内部へ浸透した試料Ｌは、基材１１内に形成された空隙１１ｈを毛細管現象により移動しながら貫通孔１０ｈ内へ向かって移動する。この複数の空隙１１ｈは液体が毛細管現象により通液可能に形成されている。このため、空隙１１ｈ内に侵入した試料Ｌは、自動的に滴下位置から離れるように空隙１１ｈ内を移動する。
そして、基材１１内の複数の空隙１１ｈは、複数の貫通孔１０ｈに連通して形成されている。つまり、貫通孔１０ｈの内壁面には、無数の空隙１１ｈの開口が形成されている。このため、空隙１１ｈ内を移動した試料Ｌが一の貫通孔１０ｈに到達すれば、貫通孔１０ｈの内壁面に形成された空隙１１ｈ開口から貫通孔１０ｈへ侵入する。つまり、一の貫通孔１０ｈ内へ試料Ｌが供給される（図４（Ａ）参照）。
貫通孔１０ｈへ侵入した試料Ｌは、貫通孔１０ｈの表面張力によって貫通孔１０ｈを塞ぐように液膜Ｌｆを形成する（図４（Ｂ）参照）。一方、この貫通孔１０ｈは、複数の空隙１１ｈにより隣接する貫通孔１０ｈと連通されている（図２参照）。このため、一の貫通孔１０ｈ内へ侵入した試料Ｌは、液膜Ｌｆ長さが基材１１の貫通孔領域の厚さ（基材１１の厚さ方向の距離）とほぼ同じ程度の長さに保持された状態を維持しながら、隣接する貫通孔１０ｈへ移動する（図４（Ｂ）から図４（Ｄ）参照）。

このような現象が連続的におこることによって、試料Ｌは、基材１１の貫通孔領域に形成された複数の貫通孔１０ｈへほぼ均一に展開され、各貫通孔１０ｈ内にほぼ均一な液膜Ｌｆが形成される（図５参照）。
しかも、貫通孔１０ｈに形成される液膜Ｌｆは、その表面および裏面が貫通孔領域の表面に対してほぼフラットな状態となるように形成されるので、その液膜Ｌｆ長さを貫通孔１０ｈの貫通軸方向の線の距離（つまり基材１１の貫通領域の厚さ）とほぼ同じ長さにできる。

したがって、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１の貫通孔領域の一部または貫通孔領域近傍付近に試料Ｌを滴下するようにして供給すれば、試料Ｌを、検出部１０の基材１１内部に形成された空隙１１ｈを毛細管現象により自動的に移動させながら複数の貫通孔１０ｈ内に展開して、各貫通孔１０ｈ内に均質な液膜Ｌｆを形成させることができる（図４、図５参照）。つまり、光路長が均一な液膜Ｌｆを検出部１０の基材１１の貫通孔領域に複数形成することができる（図５拡大図参照）。

（測定および定量）
上記のごとき複数の貫通孔１０ｈ内に所定の液膜Ｌｆが形成された分光分析用チップ１を、分光計ＳＭのステージにセットする（図９参照）。

このとき、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１に形成された貫通孔領域がステージの連通孔の開口上に位置するように設置する。このとき貫通孔１０ｈが基材１１に対して直交するように形成されているので、液膜Ｌｆを照射光Ｌ１の光軸に対して平行となるように配置することができる。

この状態で、光源を作動させて、光照射ファイバから分光分析用チップ１の検出部１０の貫通孔領域に対して照射光Ｌ１を照射する。
この照射光Ｌ１は、貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆの下面から上面に向かって真っ直ぐに液膜Ｌｆを透過する（図５参照）。このとき、液膜Ｌｆ中に照射光Ｌ１に反応する物質が存在すれば、液膜Ｌｆに入射した照射光Ｌ１と液膜Ｌｆを透過した透過光Ｌ２では、光の成分が異なる状態になる。

この液膜Ｌｆを透過した透過光Ｌ２は、分光計ＳＭのステージ上方に設けられた光受光ファイバの受光面で受光される。この光受光ファイバで受光された透過光Ｌ２は、解析手段へ送信される。
解析手段では、光受光ファイバから送信された透過光Ｌ２をデータ信号に変換する。そして、変換されたデータ信号に基づいて試料Ｌ中の目的成分の濃度が算出（つまり定量）される。

以上のごとく、まず分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１に試料Ｌを供給して検出部１０の各貫通孔１０ｈ内に液膜Ｌｆを形成する。各液膜Ｌｆはほぼ同じ状態で各貫通孔１０ｈ内に保持されている。そして、この検出部１０を分光計ＳＭにセットすれば、液膜Ｌｆから得られる透過光Ｌ２に基づいて試料Ｌ中の目的成分の濃度を定量することができる。つまり、検出部１０において、分光分析に必要な光路長を有する試料を均一な状態で形成することができる。
したがって、分光分析用チップ１の検出部１０は、従来の分光分析法に用いられる石英やガラスなどの透明なセルと同様の機能を発揮させることができる。しかも、試料Ｌを供給する貫通孔１０ｈの大きさが小さい（例えば約５０μｍ）にも関わらず、試料Ｌ中の目的成分を分光分析法に基づいて精度よく定量することができる。

なお、濃度の算出には、一般的な吸光光度法の算出方法に基づいて算出することができる。例えば、試料中の目的成分の濃度は、吸光度と濃度との関係に基づき作成した検量線法や標準添加法を用いて算出してもよいし、試料中に内部標準物質を添加した内部標準法により算出してもよい。
また、試料Ｌの測定においては、同じ分光分析用チップ１を用いたブランク測定をあらかじめ行うのが望ましい。具体的には、目的成分を含有しないブランク試料を調製し、同じ分光分析用チップ１を用いて試料Ｌと同様の分析を行えば、分光分析用チップ１に起因するバックグラウンドの吸光を補正できるなど、データのバラツキ等を抑制することができるので、目的成分の定量分析の精度をより向上させることができるという利点が得られる。

また、試料Ｌを検出部１０の基材１１に設けられた貫通孔領域の一部またはその周辺に供給すれば、自動的に複数の貫通孔１０ｈ内に均一に試料を供給することができる。つまり試料を均一に供給する等の煩雑な操作を行わなくてもよくなるので、分析の操作性を向上させることができる。しかも均一な液膜Ｌｆを形成できるので、各液膜Ｌｆデータの平均化等が行いやすくなるので、分析精度がより向上させることができる。

さらに、供給した試料Ｌは、検出部１０の基材１１内を毛細管現象によって移動し、貫通孔１０ｈ内には表面張力によって保持されるので、分光分析用チップ１を水平に維持しなくても（例えば、検出部１０の基材１１を垂直方向に固定したとしても）、試料を検出部１０の基材１１内に移動させることができる。このため、分光分析用チップ１の配置状態に関わらず、検出部１０の基材１１に形成された複数の貫通孔１０ｈ内に均質な液膜Ｌｆを形成させることができる。

なお、試料Ｌの供給方法は、上述したように貫通孔領域の一部または全部に直接滴下するようにして供給してもよいし、貫通孔領域の近傍付近の非貫通孔領域に供給してもよい。つまり、分光分析用チップ１の検出部１０を上述したような構成にすることによって、試料Ｌの供給位置に関わらず、試料Ｌを適切に複数の貫通孔１０ｈ内へ展開させることができる。

（色調分析に基づく試料Ｌ中の目的成分の定量）
つぎに、分光分析法のうち色調分析を用いて試料Ｌ中の目的成分を定量する場合について、詳細に説明する。

まず、分光分析用チップ１を用いた色調分析の概略を説明する。
上述したように分光計ＳＭのステージに分光分析用チップ１をセットして、光照射ファイバから照射光Ｌ１を検出部１０に対して照射する。すると、複数の貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆは、試料Ｌ中の目的成分の濃度によって色調が変化する。本実施形態の色調分析は、この変化した液膜Ｌｆの色調変化に基づいて試料Ｌ中の目的成分を定量するという技術である。

以下、詳細に説明する。
光学顕微鏡は、基端が解析手段に接続されており、観察した貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆの画像をデータ化して解析手段へ送信できるようになっている。
解析手段では、画像データに基づいて試料中の目的成分の濃度が算出される。具体的には、解析手段は、画像データに基づく着色を色空間（ＲＧＢやＬ^＊Ａ^＊Ｂ^＊（エルスター・エースター・ビースター）などの表色系）を用いることによって、試料中の目的成分の濃度が算出できるようになっている。
つまり、試料中（つまり液膜Ｌｆ中）に存在する目的成分とその濃度には、成分に固有の吸収波長と吸収量が存在するので、光学顕微鏡で観測された画像データに基づく色調から試料中の物質同定と定量を行うことが可能となる（図１４参照）。

光学顕微鏡は、倍率を自在に調整することができるので、検出部１０の基材１１の複数の貫通孔１０ｈのうち一つの貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆの色調の分析が可能となる。この場合、貫通孔１０ｈの径の大きさに関わらず試料中の物質同定と定量を行うことが可能となる。
一方、複数の貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆの色調を合算して平均化してもよい。データを平均化することによって、試料中の目的成分の定量性と再現性を向上させることが可能となる。つまり、分光分析用チップ１を用いれば、少ない試料量であっても、色調分析に基づいて試料中の目的成分の濃度を適切に定量することができる。

なお、光照射ファイバから照射される光は、単一波長でもよいし白色光でもよい。測定対象となる目的成分が限定されている場合、その成分の極大吸収波長付近の単色光（例えば、ＬＥＤ）でよいし、複数の目的成分を同時に測定したり、目的成分の反応を動的に観察するような時間分解測定を行うときには、幅広い波長を持つ白色光としてもよい。

また、試料中の目的成分の濃度算出は、例えば、ＸＹ表色系やＬａｂ表色系として色調を数値化して２軸平面ないし３軸空間に表現し、濃度既知の溶液を測定し、濃度と色調に基づく数値の相関から試料中の目的成分の濃度を算出することができる。

さらに、上述したように分光分析用チップ１の検出部１０が基材１１表面および／または背面に後述するカバー部材３０を設けた状態において、貫通孔１０ｈ内に液膜Ｌｆを形成させた際、試料中の目的成分と反応して呈色等を生じる物質を設けた構成としてもよい。例えば、この後述するカバー部材３０の内方の面（つまり基材１１の表面側または背面側に位置する面）に試料中の目的成分と反応して呈色等を生じる反応試薬を担持等させておけば、試料中の目的成分の濃度等に反応させることができる。
すると、目的成分の濃度が低くても、呈色等の色調変化に基づいて試料中の目的成分を定量することができるようになる。しかも、試料中の目的成分が照射光によって反応しないような場合であっても、反応試薬を設けることによって、目的成分の濃度を算出することが可能となるので、分析の自由度を向上させることが可能となる。

＜基材１１の詳細＞
基材１１は、上述したように、透水性材料１２だけを備えた構成、水性材料１２と不透水性材料１３とを備えた構成、ナノファイバー層１４と不透水性材料１３とを備えた構成、全てを備えた構成など、様々な構成にできる。
以下、検出部１０の基材１１の材質（透水性材料１２、不透水性材料１３、ナノファイバー層１４）をより具体的に説明する。

（透水性材料１２）
図２（Ａ）に示すように、透水性材料１２は、細い繊維ｆが束状になった繊維集合体であり、水などの液体をその内部に浸透させたり、または表面に沿って流したりできる性質を有するものであれば、とくに限定されない。
なお、図２（Ａ）に示すように、基材１１は、透水性材料１２だけを用いてある程度の空隙率を有する構造にしてもよい。このような構造のものとしては、例えば、後述する市販のろ紙を挙げることができる。

透水性材料１２としては以下のような材質のものを採用することができる。
例えば、透水性材料１２を構成する繊維ｆとしては、セルロース繊維、繊維、麻繊維、パルプ繊維等の天然素材のもの（天然繊維）のほか、合成樹脂系材料（例えば、ポリエステルや、ナイロン、レーヨン、アクリル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリビニルアルコール、ニトロセルロース、カーボンなど）を原料とした合成樹脂製の繊維（化学繊維）やスチールウール、銅、銀などを原料とした金属製の繊維（金属繊維）、ケイ素やチタンなど酸化物、マグネシウムなどの水酸化物、カルシウムなどの炭酸塩、バリウムなどの硫酸塩等の無機化合物系材料を原料とした繊維ｆなどを採用することができる。もちろん、上述したように２種以上を適宜混合したものも使用することができる。

図２（Ａ）に示すように、透水性材料１２は、複数の上記繊維ｆが束状になった集合体である。そして、透水性材料１２は、繊維ｆ間に、基材１１の空隙１１ｈより狭い幅を有する微細な隙間１２ｈを有している。この隙間１２ｈは、例えば、数μｍ〜数十μｍ程度の幅を有している。このため、透水性材料１２は、水などの液体が接すれば、液体を繊維ｆ間の微細な隙間１２ｈに浸透させることができる。一旦繊維ｆ間に入り込んだ液体は、この隙間１２ｈを形成する繊維ｆ表面と液体との表面張力等の相互作用によって自動的に隙間１２ｈ内を移動する。つまり、透水性材料１２は、試料が接触すれば内部に浸透させて、毛細管現象により隙間１２ｈを移動させる機能を有している。

基材１１が、上記のごとき透水性材料１２だけを複数用いて所定の空隙率を有する構造とする。この場合、基材１１の網目状の空隙１１ｈは、透水性材料１２間に形成された複数の空隙１１ｈと透水性材料１２内の複数の隙間１２ｈとによって形成される。このような構造を有する基材１１とし使用することができるものとしては、例えば、上述した、市販のろ紙（例えば、後述する実施例に記載のろ紙が挙げられる）や、ろ布（フエルト）、不織布などを挙げることができるが、これらに限定されない。

なお、透水性材料１２には、透水性材料１２自体を製造する際に不純物として混入または意図的に混入させた微細な無機顔料などを含んでいてもよい。なぜなら、このような微細な不純物は試料Ｌが移動する流路の形成に寄与しないからである。

（不透水性材料１３）
不透水性材料１３は、内部に水などの液体が浸透しない性質を有するものである。
図２（Ｘ）に示すように、不透水性材料１３は、基材１１において、複数の透水性材料１２間に配置されるものである。
不透水性材料１３の材質としては、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）のほか、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリプロピレン（ＰＰ）などの合成樹脂製のもののほか、カーボン製、ガラス製、シリカ製、金属製、炭酸カルシウム製、二酸化ケイ素製などを挙げることができる。とくに、試料として血液など動物の体液を用いる場合、これらの液体と反応性の低いＰＥＴ製の不透水性材料１３を使用するのが好ましい。

不透水性材料１３の形状は、とくに限定されず、塊状や球状、短い繊維状等の種々の形状を有する材料を採用することができる。また、この不透水性材料１３は、繊維状のものを複数からまるように形成したものを採用してもよい。
不透水性材料１３の形状として繊維状を採用する場合、その大きさはとくに限定されない。例えば、繊維状の不透水性材料１３は、繊維径が１０μｍ〜５００μｍ程度、繊維長が２０μｍ〜５ｍｍ程度のものや、繊維径が５０μｍ〜１００μｍ程度、繊維長が５０μｍ〜１ｍｍ程度のものを用いることができる。

基材１１が、上記のごとき繊維状の不透水性材料１３と透水性材料１２とを備えた構造とする。この場合、基材１１内に所定の空隙幅を有する空隙１１ｈを形成し易くなる。そして、基材１１の網目状の空隙１１ｈは、透水性材料１２同士間の空隙１１ｈ、透水性材料１２と不透水性材料１３間の空隙１１ｈ、不透水性材料１３同士間の空隙１１ｈ、および透水性材料１２内の隙間１２ｈと、によって形成される。このため、基材１１内により複雑な網目状の空隙１１ｈが形成される。

とくに、基材１１が不透水性材料１３と透水性材料１２を用いた構造とすれば、以下の利点を有する。
まず、基材１１が不透水性材料１３を備えている。この透水性材料１３は、基材１１内において、複数の透水性材料１２間に配置される。しかも、この複数の不透水性材料１３は、基材１１中に不均一（ランダム）に存在する。
このため、基材１１の内部には、複数の網目状の空隙１１ｈが形成される。つまり、基材１１の内部には、網目状の空隙ネットワークが形成される。そして、この網目状の空隙１１ｈは、試料Ｌが流れるための空隙１１ｈの幅（つまり流路幅）が、試料Ｌが流れる方向（流路方向）に向かってより変化する（不均一に変化する）ように形成される。
すると、試料Ｌを基材１１の貫通孔領域の近くに滴下すれば、滴下された試料Ｌは基材１１内部へ浸透して、複数の網目状の空隙１１内を移動しながら貫通孔１０ｈへ向かう。そして、試料Ｌは、この網目状の空隙１１ｈ内を移動している間に、不純物が分離・除去される。つまり、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１は、試料Ｌ中の不純物等を分離・除去するフィルター機能を有しているのである。
ついで、基材１１が透水性材料１２を備えている。この透水性材料１２は、その内部に、試料Ｌが毛細管現象により移動することができる複数の隙間１２ｈを有している。
したがって、基材１１は、不透水性材料１３と、透水性材料１２と、を備えることにより、内部に形成される上記空隙ネットワークをより複雑化させることができる。つまり、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１は、透水性材料１２を備えることにより、より高いフィルター機能を発揮することができるようになる。

以上のごとく、分析用チップ１の基材１１が有するフィルター機能は、透水性材料１２のみで基材１１形成する場合、透水性材料１２と不透水性材料１３を用いて基材１１を形成する場合、後述するナノファイバー層１４と不透水性材料１３を用いて基材１１を形成する場合、の順に高くなる。言い換えれば、基材１１は、内部の空隙１１ｈの不均一さが、フィルター機能の高くなるのと同様の順に高くなる傾向にある。
このため、試料Ｌ中の目的成分を定量する際には、試料Ｌ中の不純物の量に応じて適宜検出部１０の基材１１構造を調整することにより、試料Ｌの目的成分を適切に定量できるようになる。具体的には、不純物を多く含む試料Ｌを分析する場合には、透水性材料１２のみを用いて形成する基材１１よりも、透水性材料１２と不透水性材料１３を用いた基材１１や後述するナノファイバー層１４と不透水性材料１３を用いた基材１１を使用するのが好ましい。

（透水性材料１２と不透水性材料１３の配合割合）
基材１１を構成する透水性材料１２と不透水性材料１３の配合割合は、上記フィルター機能を発揮することができれば、とくに限定されない。
例えば、両者の配合割合（質量割合）としては、例えば、透水性材料１２：不透水性材料１３＝１：９〜９：１となるように配合することができる。

なお、上記例では、不透水性材料１３が透水性材料１２やナノファイバー層１４間に配置される構成の基材１１について説明したが、基材１１を不透水性材料１３のみを用いて形成してもよい。具体的には、複数の繊維状の不透水性材料１３を絡まるようにしてろ紙のような構造の基材１１を形成してもよい。

（ナノファイバー層１４と不透水性材料１３）
つぎに、基材１１が、ナノファイバー層１４と不透水性材料１３とを備える場合を具体的に説明する。
図２（Ｙ）に示すように、基材１１は、複数のナノファイバー層１４と複数の不透水性材料１３とを備えることにより、その内部に、複数のナノファイバー層１４と、この複数のナノファイバー層１４間に配置された複数の不透水性材料１３を有する構造になる。この複数のナノファイバー層１４には、後述するように、不透水性材料１３の影響により、表裏を貫通する孔が複数形成されている。

図２（Ｙ）に示すように、基材１１内には、隣接するナノファイバー層１４間、ナノファイバー層１４と不透水性材料１３間、および隣接する不透水性材料１３間との間に複数の網目状の空隙１１ｈ（網目状の空隙ネットワーク）が形成されている。
この複数の不透水性材料１３は、複数のナノファイバー層１４によって束ねられようにして配置されている。そして、複数の不透水性材料１３を束ねた構造にすることにより、隣接する不透水性材料１３間の距離を短くすることができる。このため、隣接する不透水性材料１３間の空隙１１ｈの幅（流路幅）を小さくすることができる。
したがって、検出部１０の基材１１は、ナノファイバー層１４と不透水性材料１３とを備えることにより、内部に形成される複数の空隙１１ｈの流路幅をより複雑化させることができる。つまり、基材１１内に形成される上記空隙ネットワークをさらに複雑化させることができる。
よって、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１は、ナノファイバー層１４と不透水性材料１３とを備えることにより、より優れたフィルター機能を発揮することができるようになる。

ナノファイバー層１４は、微細繊維であるナノファイバーｎｆから形成された膜状のものである。具体的には、ナノファイバー層１４は、複数のナノファイバーｎｆが絡み合って集合した集合体である。
ナノファイバー層１４を構成するナノファイバーｎｆとしては、合成樹脂製のものや天然素材のものを使用することができる。

天然素材のものとしては、セルロースナノファイバーｎｆを挙げることができる。このセルロースナノファイバーｎｆは、その表面に多数の水酸基を有するので、一般的な合成樹脂製のナノファイバーｎｆに化学的に親水性の官能基を結合させたものに比べて親水性が高い。つまり、水に濡れやすいという性質を有する。
このため、このセルロースナノファイバーｎｆを用いたナノファイバー層１４（セルロースナノファイバー層１４、単にＣＮＦ層１４ということがある）を用いて基材１１を形成することにより、複数のＣＮＦ層１４間に形成された空隙１１ｈで発生する毛細管作用をより向上させることができる。
したがって、基材１１が、複数のＣＮＦ層１４を備えることにより、基材１１内部における試料Ｌの移動をよりスムースにさせることができるという利点が得られる。言い換えれば、基材１１が、複数のＣＮＦ層１４を備えることにより、優れたフィルター機能を発揮しつつ、高い吸水機能を発揮するようになる。

なお、このようなセルロースナノファイバーｎｆの大きさは、とくに限定されない。
例えば、平均繊維径が１〜１００ｎｍ程度、平均繊維長が１００ｎｍ〜１μｍ程度のものを使用することができる。

基材１１を構成するナノファイバー層１４の原料となるナノファイバーｎｆと不透水性材料１３の配合割合は、とくに限定されない。
例えば、セルロースナノファイバーｎｆと不透水性材料１３を質量割合において、セルロースナノファイバーｎｆ：不透水性材料１３＝１：９〜９：１となるように配合することができる。

なお、ナノファイバーｎｆからなるナノファイバー層は、一般的には、水などの液体を通しにくい性質を有している。そして、このようなナノファイバー層だけで基材を形成すれば、基材表面で液体ははじかれてしまい、基材内部へ浸透させることはできない。
一方、分析用チップ１の検出部１０の基材１１は、ナノファイバー層１４の原料となるナノファイバーｎｆと不透水性材料１３を混合したものを用いて形成される。このため、基材１１内部および基材１１表面に配置されるナノファイバー層１４には、表裏を貫通する微細な孔が複数形成される。
したがって、検出部１０の基材１１がナノファイバー層１４を有する構成であっても、試料Ｌの供給操作において、試料Ｌを基材１１の表面に滴下すれば、最外層（つまり基材１１表面）に位置するナノファイバー層１４にはじかれることなく基材１１内へ滴下した試料Ｌを浸透させることができる。

また、上記例では、検出部１０の基材１１が、透水性材料１２や不透水性材料１３、ナノファイバー層１４を有する構造について説明したが、基材１１の材質がこれらに限定されるものではなく、上述した空隙１１ｈ構造を有していれば、これら以外に様々な添加剤等を含んでもよい。例えば、試料中の不純物を吸着するものや、着脱機能を有する顔料や、基材の濡れ性を制御するものなどを挙げることができるが、これらに限定されない。

＜流路部２０＞
図１、図３に示すように、分光分析用チップ１は、検出部１０の基材１１に連結した流路部２０を備えていてもよい。

この流路部２０は、液体を通す流路基材２１を備えている。具体的には、流路基材２１の先端部を基材１１に連結させた状態において、流路基材２１の基端側の箇所（つまり基材１１との連結部から離れた箇所、図４参照）に試料Ｌを供給した場合、流路部２０は、試料Ｌ供給箇所から基材１１まで流路基材２１内を通して供給した試料Ｌを移動させることができるように形成されている。そして、この流路部２０の流路基材２１は、検出部１０の基材１１と同様のフィルター機能を有している。

このため、分光分析用チップ１が流路部２０を備えることにより、流路部２０の流路基材２１のフィルター機能によって試料Ｌに含まれる不純物（夾雑成分）を除去することができる。つまり、流路基材２１のフィルター効果によって、試料Ｌ中に存在する複数の成分は、その大きさによって適切に篩分けされる。具体的には、供給された試料Ｌを、試料Ｌ中の成分が目的成分と目的成分以外の成分（目的外成分）に分離除去しながら、検出部１０の基材１１まで移動させることができる。そして、夾雑成分が低減させた状態の試料Ｌ（精製した状態の試料Ｌ）を検出部１０の複数の貫通孔１０ｈ内に展開させることができる。
したがって、分光分析用チップ１が流路部２０を備えることにより、液膜Ｌｆ中に存在する不純物の量を低くできるので、試料Ｌ中の目的成分をより精度よく定量することができるようになる。言い換えれば、試料Ｌ中に含まれる不純物の状況に応じて、流路部２０を備えた分光分析用チップ１と検出部１０のみの分光分析用チップ１を適宜使いわけてもよい。

なお、流路部２０を備えた構造であっても、試料Ｌの滴下箇所を調整することにより、試料Ｌ中の不純物の量に対応させてもよい。例えば、試料Ｌ中の不純物が少ない場合には、検出部１０において、貫通孔領域付近に試料Ｌを供給する。試料Ｌ中の不純物が中間程度であれば、検出部１０において貫通孔領域からはされた箇所に供給する、もしくは流路部２０の検出部１０の貫通孔領域に近い箇所に滴下する。試料Ｌ中の不純物が多い場合には、流路部２０において、検出部１０の貫通孔領域から離れた箇所に滴下する。

さらに、流路部２０の試料Ｌが通液する箇所に上述した検出材料を担持または保持させてもよい。具体的には、流路部２０において、流路部２０の試料Ｌ滴下箇所と検出部１０の貫通孔領域との間に反応場を設けておく。この反応場では、試料Ｌ中の目的成分と結合する反応試薬などの検出材料を流路基材２１を構成する材質（例えば、透水性材料２２）に担持させたり、材質間に保持させておく。検出材料を担持させたり、保持させるたりする方法は、とくに限定されない。例えば、検出材料を反応場に塗布等して乾燥すれば、反応場に検出材料を保持させることができる。

（流路基材２１の構造）
以下、流路部２０の構造を具体的に説明する。
分光分析用チップ１の流路部２０の流路基材２１は、上述した検出部１０の基材１１と同様の構造に形成することができる。つまり、流路部２０の流路基材２１は、内部に毛細管現象によって液体が通液可能な空隙２１ｈが複数形成された構造であればよい。

流路基材２１の材質は、上記構造となるものであるのであればとくに限定されない。
例えば、流路部２０が連結した検出部１０の基材１１と同様の材質を用いてもよいし、異なる材質を用いてもよい。同様の材質を用いれば、流路部２０の流路基材２１に供給した試料の移動状況をある程度予測することが可能となる。
例えば、図３に示すように、流路部２０の流路基材２１の材質としては、基材１１の透水性材料１２と同様の透水性材料２２や、基材１１の不透水性材料１３と同様の不透水性材料２３、基材１１のナノファイバー層１４と同様のナノファイバーｎｆからなるナノファイバー層２４などを挙げことができる。

例えば、図３（Ｂ）に示すように、流路部２０の流路基材２１は、検出部１０の基材１１と同様の材質を用いて同様の構造とする。つまり、流路部２０の流路基材２１と検出部１０の基材１１構造が連続するように形成する。言い換えれば、検出部１０の基材１１と流路部２０流路基材２１を一体形成する。この場合、両者の連結部における構造上に差異を小さくできるので、試料Ｌを流路部２０から検出部１０へよりスムースに移動させることができる。また、検出部１０と同じ材質で一体形成すれば生産性が向上する。

また、例えば、図３（Ｘ）に示すように、流路部２０の流路基材２１が、複数の透水性材料２２と複数の不透水性材料２３とを備え、この複数の透水性材料２２間に複数の不透水性材料２３が配置された構造にする。この場合、上述した検出部１０の基材１１と同様に透水性材料２２だけで構成する場合と比べて形成する網目状の空隙２１ｈをより複雑化させることができる。つまり、流路部２０の流路基材２１内に検出部１０の基材１１と同様により複雑な空隙ネットワークを形成することができる。

とくに、図３（Ｘ）に示すように、流路基材２１の不透水性材料２３を、繊維状とすれば、複数の不透水性材料２３を同一方向に配向させることができる。つまり、この流路基材２１は、複数の繊維状の不透水性材料２３が同じ方向に沿って配列された構造にできる。例えば、流路基材２１を短冊状に形成する。そして、この流路基材２１の長手方向の先端を検出部１０の基材１１に連結する。この場合、この分光分析用チップ１は、流路部２０の流路基材２１の基端から先端（流路基材２１と基材１１の連結部）に向かって複数の繊維状の不透水性材料２３が配列された構造にできる。つまり、複数の繊維状の不透水性材料２３が検出部１０に向かう方向に沿って配列された構造となる。このため、この分光分析用チップ１の流路部２０の流路基材２１に試料Ｌを供給すれば、複数の不透水性材料２３に沿って試料Ｌを検出部２０へよりスムースに移動させることができる。
しかも、流路基材２１内には、上述したような複数の微細な空隙ネットワークが形成されている。このため、この分光分析用チップ１の流路部２０の流路基材２１に試料Ｌを供給すれば、繊維状の不透水性材料２３に沿って、流路基材２１の基端から先端方向（流路部２０と検出部１０の連結部の方向）に向かって試料Ｌを自動的かつよりスムースに移動させることができる。

上記例では、流路基材２１において、繊維状の不透水性材料２３が流路基材２１の長手方向に沿って配列された構造の場合について説明したが、かかる構造に限定されない。
例えば、繊維状の不透水性材料２３が流路基材２１の長手方向に対して交差するような構造としてもよい。つまり、複数の不透水性材料２３が検出部１０に向かう方向に対して交差するように配列されている。言い換えれば、複数の不透水性材料２３は、軸方向が検出部１０に対して斜めになるように配列された構造としてもよい。かかる構造とすることにより、試料Ｌの送液が不透水性材料２３を流路基材２１の長手方向に沿って配列した場合よりも遅くすることができる。この場合、試料Ｌが上述した反応場に滞留する時間を長くできるので、検出材料と試料Ｌとの結合時間を適切に確保できるから、試料Ｌ中の目的成分の感度をより向上させることができるという利点が得られる。

上述したように、流路基材２１において、試料Ｌの送液速度を遅くなるように繊維状の不透水性材料２３が流路基材２１の長手方向に対して交差するように配列されていればよい。例えば、繊維状の不透水性材料２３が流路基材２１の長手方向に対して１０度以上となるように交差して配列することができ、より好ましくは７０度以上であり、さらに好ましくは略直交するように配列する。

また、図３（Ｙ）に示すように、流路基材２１が、複数のナノファイバー層２４と、この複数のナノファイバー層２４間に複数の繊維状の不透水性材料２３を配置した構造とすることができる。この場合、この流路基材２１は、複数の繊維状の不透水性材料２３が、流路部２０と検出部１０の連結部に向かって配向（配列）された状態となる。そして、この同一方向に配列された複数の繊維状の不透水性材料２３は、複数同士がナノファイバー層２４によって束ねられた状態となっている（図３（Ｙ）参照）。このため、この分光分析用チップ１の流路部２０の流路基材２１に試料Ｌを供給すれば、この束ねられた複数の繊維状の不透水性材料２３とナノファイバー層２４に沿って試料Ｌをよりスムースに検出部１０へ向かって移動させることができる。
そして、複数の繊維状の不透水性材料２３がナノファイバー層２４により束ねられることで、流路部２０の流路基材２１の機械的強度を向上させることができるので、使用上の自由度を向上させることができるという利点が得られる。

（流路基材２１の大きさ・形状）
なお、流路部２０の流路基材２１の大きさや形状等は、とくに限定されない。
例えば、流路部２０の流路基材２１は、平面視長方形の板状に形成することができ、この短辺の端縁を検出部１０の基材１１に連結させることができる。この場合、流路基材２１の短辺の幅を連結する基材１１の端縁幅と同等かやや狭くすれば、効率よく試料を検出部１０へ移動させることが可能となる。
また、流路部２０は、Ｉ字状やＹ字状、十字状、放射状などの様々な形状に形成することができる。例えば、Ｙ字状の２つの分岐した流路の先端や十字状の各先端に検出部１０がそれぞれ連結した構造とすれば、試料Ｌ中の存在する複数の目的成分を同時に測定できる。
また、例えば、Ｙ字状に形成した流路部２０の基端に検出部１０を連結させた構造とする。そして、各分岐した２つの流路の先端部に異なる性状を有する試料Ｌを添加する。すると、分岐点で異なる性状の試料Ｌを混合させながら検出部１０へ移送させることができる。
流路部２０の流路基材２１の長さは、とくに限定されず、試料Ｌ量や分光計ＳＭのステージの大きさ等に応じて適宜調整すればよい。例えば、流路基材２１を平面視長方形の板状に形成しその短辺を基材１１に連結する場合、長辺の長さが１０ｍｍ〜５０ｍｍ程度となるように形成することができる。

＜不透水性領域１１ｃ＞
図７に示すように、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１は、複数の貫通孔１０ｈが形成された設けられた貫通孔領域の周縁部を囲むように液体を通さない不透水性領域１１Ｃを設けてもよい。
具体的には、貫通孔領域の周縁部の外端面に形成される空隙１１ｈや透水性材料１２の隙間１２ｈが外部に露出しないようにその周囲を覆うような不透水性領域１１ｃが貫通孔領域の周縁部に沿って設けられている。つまり、この不透水性領域１１ｃによって、貫通孔領域の周縁部が外部から遮断されたような状態となっている。

分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１が、上記のごとき構成の不透水性領域１１ｃを有していれば、複数の貫通孔１０ｈ内に試料が展開された状態において、周縁部の内方近傍に位置する貫通孔１０ｈ内から周縁部方向へ移動する試料を不透水性領域１１ｃによって制限することができる。この場合、試料を検出部１０の複数の貫通孔１０ｈ内に展開した状態を適切に維持することができるので、分析の操作性をより向上させることができる。

また、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１の不透水性領域１１ｃは、一部に液体を通す透水性領域１１ｄを有する構造としてもよい。
つまり、この検出部１０の基材１１の不透水性領域１１ｃは、貫通孔領域の周縁部方向に向かって延びている複数の空隙１１ｈや透水性材料１２中の隙間１２ｈが透水性領域１１ｄを設けることによって完全には遮断されない状態にする。例えば、図７に示すように、この不透水性領域１１ｃは、基材１１の貫通孔領域の周縁部を囲むように平面視Ｃ字状に形成することができ、このＣ字状の端縁間に透水性領域１１ｄを有する構造とすることができる。

検出部１０の基材１１が、不透水性領域１１ｃの一部に上記のごとき透水性領域１１ｄを有する構造とする。この場合、この透水性領域１１ｄの近傍に試料を供給することによって、自動的に不透水性領域１１ｃで囲まれた領域（つまり複数の貫通孔１０ｈが設けられた貫通孔領域）内へ試料を適切に移動させることができる。
すると、少量の試料であってもより適切に複数の貫通孔１０ｈ内へ展開させることができるという利点が得られる。

なお、検出部１０の基材１１の一部、つまり基材１１の透水性領域１１ｄを外方に向かって延設した構造としてもよい。この場合、この延設した延設部が上述した流路部１５に相当する。

また、基材１１の不透水性領域１１ｃは、透水性領域ＰＳ以外の部分が溝状になるように形成してもよい。
具体的には、検出部１０の基材１１において、貫通孔領域の周縁部を囲むように基材１１の表裏を貫通した溝１１ｃgが形成されており、この溝の両端縁間に設けられた透水性領域１１ｄが基材１１の周縁部から突出するように形成される。
例えば、検出部１０の基材１１は、基材１１の貫通孔領域の周縁部を囲むように形成された平面視Ｃ字状の溝と、このＣ字状の端縁間が基材１１の貫通孔領域の周縁部に連結した透水性領域１１ｄを有する構造にすることができる。

検出部１０における貫通孔領域の周囲を上記のごとき構造とすれば、溝状の部分（つまり透水性領域１１ｄ以外の不透水性領域１１ｃ部分）に沿って切断することができる。
この場合、検出部１０において、複数の貫通孔１０ｈが形成された貫通孔領域だけの基材１１を分離することができるようになる。すると、測定を行う際に、検出部１０の貫通孔領域が形成された基材１１だけを扱えばよいので、測定時における操作性の自由度をより向上させることができる。

また、検出部１０を上記構造とした場合、基材１１における貫通孔領域の周縁部の端面が溝（不透水性領域１１ｃ部分）に露出した状態になる。つまり、かかる端面に複数の空隙１１ｈの開口や複数の隙間１２ｈの開口が形成された状態となる。すると、検出部１０に試料Ｌを供給すれば、基材１１内を移動した試料Ｌがこれらの開口まで到達することがある。しかし、端面に到達した試料Ｌは、かかる端面が有する表面張力によって、端面に形成された複数の空隙１１ｈの開口や複数の隙間１２ｈの開口付近に保持された状態となる。つまり、検出部１０を上記構造とした場合であっても、端面に到達した試料Ｌは端面でその移動が停止される。そして、試料Ｌが溝内へ流出するのが防止される。

＜形状保持層１１ｂ＞
図８に示すように、分光分析用チップ１の検出部１０は、検出部１０の基材１１形状を保持するための形状保持層１１ｂを有するようにしてもよい。

具体的には、検出部１０の基材１１は、表面側の空隙層１１ａと、この空隙層１１ａの下方に位置する空隙層１１ａよりも膨潤しにくい材質で形成された形状保持層１１ｂを有する構造としてもよい。より具体的には、この基材１１の空隙層１１ａは、上述した複数の空隙１１ｈ構造を有する層である。基材１１の形状保持層１１ｂは、表面が上層の空隙層１１ａの裏面と接するように積層されかつ背面が基材１１の裏面として機能するように形成された層である。
図８（Ｂ）に示すように、複数の貫通孔１０ｈは、基材１１の空隙層１１ａと形状保持層１１ｂを貫通するように形成されている。つまり、貫通孔１０ｈの基材１１の背面側に位置する開口は、基材１１の形状保持層１１ｂの裏面に形成されているのである。

例えば、基材１１の空隙層１１ａが試料Ｌ中の溶媒等によって膨潤し易い添加剤等（例えば、アクリル酸ポリマーゲルなど）を含む場合、試料Ｌを基材１１に供給すると、上記添加剤等によって基材１１の空隙層１１ａが膨潤する可能性がある。基材１１の空隙層１１ａが膨潤すれば、その応力が貫通孔１０ｈに集中しやすくなる。
ここで、基材１１の空隙層１１ａの膨潤に伴い、貫通孔１０ｈの大きさ（例えば、貫通孔１０ｈの開口が変化したり、貫通孔１０ｈの長さ（貫通孔１０ｈの表面開口面と裏面開口面との距離）が変化する可能性がある。かかる現象が生じれば、試料Ｌを複数の貫通孔１０ｈ内に供給して貫通孔１０ｈ内に液膜Ｌｆを形成した際、液膜Ｌｆの厚みにばらつきが生じる可能性がある。言い換えれば、各貫通孔１０ｈに形成された液膜Ｌｆに基づく光路長がばらつく可能性がある。この状態で分光計ＳＭに分光分析用チップ１をセットして分析すれば、試料中の目的成分の定量値にばらつきが生じる可能性がある。
しかしながら、上記のごとく分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１が形状保持層１１ｂを有する構造とすれば、試料Ｌ供給に基づく空隙層１１ａの膨潤を形状保持層１１ｂで抑制することができるようになる。
このため、検出部１０の基材１１が試料Ｌによって膨潤し易い添加剤等を含有する場合であっても、基材１１を上記構造となるように形成すれば、試料中の目的成分を適切に定量することができる。

この基材１１の形状保持層１１ｂは、上述したように基材１１の空隙層１１ａよりも膨潤しにくい材質で形成されていれば、とくに限定されない。
例えば、形状保持層１１ｂは、膨潤しにくい紙製（例えば、耐水性を有する紙製）、プラスチックなどの樹脂製、木製、金属製、ガラスなどの板状の部材を空隙層１１ａに積層するように貼り合わせて形成してもよい。また、基材１１の裏面側から接着剤やプラスチックなどの樹脂やナノファイバー分散液などを含浸させて基材１１の裏面側に形状保持層１１ｂを形成してもよい。

基材１１の形状保持層１１ｂを上述した板状の部材を基材１１の空隙層１１ａに積層するように貼り合わせて形成した構成とする場合、この板状の部材の外縁が基材１１の空隙層１１ａの外縁よりも外方に向かって張り出した外縁部（図８（Ａ）のカバー部材３０ａよりも外方に位置する空隙層１１ａの張り出した部分）を有するように形成することができる。
この場合、取り扱う際に、かかる外縁部を把持する部分として利用することができるので、コンタミネーションを防止つつ取り扱い性を向上させることができる。

なお、上記例では、基材１１が形状保持層１１ｂを有する場合について説明したが、流路部２０の流路基材２１が基材１１の形状保持層１１ｂと同様の形状保持層を有する構造としてもよい。例えば、図８（Ｂ）に示すように、流路基材２１が、空隙層２１ａに積層した形状保持層２１ｂを備えており、この形状保持層２１ｂが基材１１の形状保持層１１ｂに連結した構造にすることができる。

＜カバー部材３０＞
また、図８に示すように、分光分析用チップ１の検出部１０は、基材１１の表面または／および背面に光透過性を有する部材で形成されたフィルム状のカバー部材３０（表面カバー部材３０ａ、裏面カバー部材３０ｂ）を設けた構成としてもよい。具体的には、カバー部材３０は、基材１１の複数の貫通孔１０ｈを有する貫通孔領域に設けられている。例えば、カバー部材３０が、基材１１の貫通孔領域に形成された複数の貫通孔１０ｈの表面または／および背面に形成された開口１０ｈａ、１０ｈｂを覆うように基材１１の表面または／および背面に連結するように設けることができる。

検出部１０の基材１１表面および／または背面にカバー部材３０を設ければ、貫通孔１０ｈの立体的形状をより安定化させることができる。このため、試料を基材１１に供給した際に貫通孔１０ｈ内に形成される液膜Ｌｆの厚みの揺らぎを防止することができるので、試料中の目的成分の定量性をより向上させることが可能となる。

しかも、カバー部材３０により、貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆの揮発を防止できる。つまり、液膜Ｌｆの揮発による試料Ｌ中の目的成分の濃度変化を防止できるようになる。例えば、試料Ｌを反応場で反応させる際に分光分析用チップ１を加温する場合、貫通孔１０ｈ内に形成された液膜Ｌｆが揮発し易くなるが、カバー部材を設けることによりかかる揮発を防止することができるようになる。このため、液膜Ｌｆを形成した後、測定までの時間を要するような場合には、カバー部材を設けた構造とすることにより、試料Ｌ中の目的成分をより適切に定量することができるようになる。

さらに、上述したようにカバー部材３０を検出に有利な試薬を担持する反応場として用いることもできる。具体的には、この反応場では、試料Ｌ中の目的成分と結合する反応試薬などの検出材料をカバー部材３０（表面カバー部材３０ａ、背面カバー部材３０ｂ）の内方の面（貫通孔領域に対向する面）に設けておく。
この検出材料をカバー部材３０に設ける方法は、とくに限定されず、例えば、検出材料を担持させたり、保持させたりして設けることができる。検出材料をカバー部材３０に保持または担持させる方法としては、検出材料をカバー部材の上記内方の面に塗布等して乾燥させる方法を採用することができる。

例えば、カバー部材３０に保持させた面に液体が接触すれば、塗布した検出材料が溶出するようにする。すると、分光分析用チップ１に供給された試料Ｌが貫通孔１０ｈ内まで到達し液膜Ｌｆを形成する。そして、この液膜Ｌｆの液面がカバー部材３０の内面に接触すれば、カバー部材３０から検出に有利な検出材料を液膜Ｌｆに溶出させることができる。液膜Ｌｆ中に目的成分が存在すれば、目的成分と検出材料を結合させることができる。この検出材料が照射光Ｌ１中の特定の波長を吸収するものであれば、分光分析において、液膜Ｌｆ中の目的成分に基づく光吸収が生じるので、試料Ｌ中の目的成分をより適切に定量することができるようになる。

また、例えば、カバー部材３０の内面に検出材料を担持させた場合には、カバー部材３０の内面に担持させた検出材料に目的成分を吸着または結合させることができる。つまりカバー部材３０の内面に直接、目的成分を保持させることができるので、かかる状態の液膜Ｌｆに照射光Ｌ１を照射すれば、上述した場合と同様に目的成分を適切に定量できる。

さらに、検出材料をカバー部材３０に設ける方法として、カバー部材３０の表面および内部に検出材料が存在するようにしてもよい。例えば、カバー部材３０を形成する材質（例えば、プラスチックやナノファイバーｎｆなど）に検出材料を混合したカバー部材３０を形成する。このカバー部材３０を用いれば、カバー部材３０の内面およびカバー部材３０の内面からやや内部に位置する検出材料に目的成分を吸着または結合させることができる。この場合、カバー部材３０の内面および内部において、光吸収などを生じさせることができる。この場合、より安定して試料Ｌ中の目的成分を適切に定量することができるようになる。

なお、カバー部材３０が光を透過する性質を有するので、カバー部材３０による分析への影響を低減することができる。

このカバー部材３０は、光透過性を有するものであれば、その素材はとくに限定されない。例えば、カバー部材の素材として、プラスチックやガラス、ナノファイバーなどを採用することができる。

なお、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１表面側に設けられたカバー部材３０ａが、特許請求の範囲にいう「表面カバー部材」に相当し、分光分析用チップ１の検出部１０の基材１１の背面側に設けられたカバー部材３０ｂが、特許請求の範囲にいう「背面カバー部材」に相当する。

以下、本発明を実施例に基づいて説明するが、本発明はこれらの実施例等によりなんら限定されるものではない。

[実験１]
楕円形の貫通孔を有する分光分析用チップを用いた鉄（ＩＩ）１、１０−フェナントロリンの定量

＜分光分析用チップの調製＞
ろ紙には、セルロース定性ろ紙（株式会社アドバンテック社製、型番；Ｎｏ．２、質量；１２５ｇ／ｍ^２、厚さ；０．２６ｍｍ、バインダー使用無し、空隙率；約６８％)を用いた。このろ紙から短辺（紙面上下方向の長さ）が約６ｍｍ、長辺（紙面左右方向の長さ）が約１２ｍｍの長方形を切り取った。この切取片の一の短辺側近傍に複数の貫通孔が５ｍｍ四方の貫通孔領域を形成した（図１０（Ａ）参照）。

（貫通孔の調製）
貫通孔は、レーザー加工機（ユニバーサルシステムズ社製、型番；ＩＬＳ９．７５、レーザー出力；４０Ｗ）を用いてろ紙に表裏を貫通する微細な穿孔（貫通孔）を形成した。
照射条件は、レーザーパワー１０％、速度５、４０パルス/インチとした。
貫通孔は、図１０（Ｂ）に示すように、楕円形であり、長径ＷＬが約６００、短径ＤＬが約３００μｍとなるように形成した。
貫通孔の形状観察および貫通孔に形成された液膜の観察は、光学顕微鏡（キーエンスＶＨ−Ｚ１００Ｒ）を用いた透過光モードで行った。

＜試料の調製＞
鉄（ＩＩ）１、１０−フェナントロリン錯体の各溶液を調製した。
各溶液は、鉄の濃度が、ゼロ（ブランク）、０．４０ｍｍｏｌｋｇ^−１、０．７９ｍｍｏｌｋｇ^−１、１．１７ｍｍｏｌｋｇ^−１、１．５５ｍｍｏｌｋｇ^−１となるように調製した。
なお、鉄（ＩＩ）１、１０−フェナントロリン錯体溶液の調製は、硫酸アンモニウム鉄（II）六水和物を所定濃度に調整するとともに、酸化防止剤（鉄（ＩＩ）への還元剤）として０．５％ｗ／ｗの塩化ヒドロキシルアンモニウム、錯体形成剤として１、１０−フェナントロリン０．１ｇｋｇ^−１、ｐＨ緩衝剤として酢酸−酢酸ナトリウム０．０２ｍｏｌｋｇ^−１を含むように調製した。

＜分析＞
吸光光度法に基づく分析
分光計は、ステージと、ステージの測定窓（直径約１０ｍｍ）の下方に光を照射するための光照射ファイバと、測定窓の上方に透過光を受光するための受光ファイバを備えたものを使用した（図９参照）。
光照射ファイバの光源には、重水素-ハロゲン光源（オーシャンオプティクス社製、ＤＨ−２０００Ｌ）を使用した。
受光ファイバでは、基端に分光測定器（紫外−可視−赤外分光器；オーシャンオプティクス社製、ＵＳＢ２０００）を接続して、２５０ｎｍ〜８６０ｎｍ（いわゆる紫外−可視−赤外域）の吸光度を測定した。
検量線は、濃度に対して５１０ｎｍの吸光度から５６０ｎｍの吸光度を差し引いたものをプロットして作成した。

実験操作は以下のとおりとした。
１）分光計のステージの測定窓に分光分析用チップの貫通孔領域が位置するようにセットする。
２）光照射ファイバの光源（バランス重水素ハロゲン光源）から紫外可視光を照射する。
３）シャッターで光を遮断し測定（ゼロ点調整）する。
４）シャッターを開けて紫外可視赤外光を照射する。
５）ブランクとして超純水を一定量滴下し、一定時間経過後、透過光を測定（Ｉ_０）する。
６）ブランクを吸水紙で吸引する。
７）試料を一定量滴下し、一定時間経過後、透過光を測定（Ｉ）する。
８）ランベルト−ベール式に基づき吸光スペクトルを作成する。

（試料の添加）
分光計のステージの測定窓に分光分析用チップの貫通孔領域が位置するようにセットして、この貫通孔領域近くの貫通孔が形成されていないスペースに調製した各濃度の鉄１、１０−フェナントロリン錯体溶液５０μＬを添加した（図１０（Ａ）参照）。具体的には、添加した試料の輪郭の左側端縁が、分光分析用チップの左側の端縁から３〜５ｍｍ程度内方（つまり右側端縁側）に位置するように添加した。

＜結果＞
分光分析用チップは、水平な状態に設置して貫通孔領域から離れた箇所に試料を添加しても貫通孔に液膜を形成させることができることが確認できた。そして、貫通孔の観察結果から、各貫通孔に鉄（ＩＩ）１、１０−フェナントロリン溶液の液膜が形成されていることが確認できた。
図１１には、鉄（ＩＩ）１、１０−フェナントロリンの紫外可視吸収スペクトルの検量線を示す。相関係数Ｒ^２が０．９９０の検量線を作成できることが確認できた。

[実験２]
楕円形の貫通孔を有する分光分析用チップを用いた銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの定量

＜分光分析用チップの調製＞
実験１と同様のろ紙から短辺が約６ｍｍ、長辺が約１２ｍｍの長方形を切り取った。この切取片の一の短辺側近傍に複数の貫通孔が５ｍｍ四方の貫通孔領域を形成した（図１０（Ａ）参照）。

（貫通孔の調製）
貫通孔は、実験１と同様のレーザー加工機を用いてろ紙に表裏を貫通する微細な穿孔（貫通孔）を形成した。
照射条件は、レーザーパワー１０％、速度５、４０パルス/インチとした。
貫通孔は、楕円形であり、長径が約６００、短径が約３００μｍとなるように形成した（図１０（Ｂ）参照）。
貫通孔の形状観察および貫通孔に形成された液膜の観察は、実験１と同様の光学顕微鏡を用いた透過光モードで行った。

＜試料の調製＞
銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム（富士フイルム和光純薬工業製、特級）を０．０９８ｇ(１．０×１０^−４ｍｏｌ）を純水１０ｍｌに溶解して１０ｍｍｏｌｋｇ^-1の溶液を調製した。この溶液をさらに希釈して、各溶液の銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの濃度が、０．１ｍｍｏｌｋｇ^-1、０．２２ｍｍｏｌｋｇ^-1、０．４７ｍｍｏｌｋｇ^-1、０．７６ｍｍｏｌｋｇ^-1となるように調製した。ブランクには純水を用いた。

＜分析１＞
吸光光度法に基づく分析
分光計は、実験１と同様のものを使用した。
光照射ファイバの光源は、実験１と同様のものを使用した。
受光ファイバでは、基端に分光測定器（紫外−可視−赤外分光器；オーシャンオプティクス社製、ＵＳＢ２０００）を接続して、２５０ｎｍ〜８６０ｎｍの吸光度を測定した。
検量線は、濃度に対して６２０ｎｍの吸光度から７６０ｎｍの吸光度を差し引いたものをプロットして作成した。

（試料の添加）
実験１と同様に調製した各濃度の銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液２０μＬを添加した（図１０（Ａ）参照）。

（分析１の結果）
貫通孔の観察結果から、各貫通孔に銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液の液膜が形成されることが確認できた。
液膜が形成される際の観察では、供給した銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液は、楕円形に形成された貫通孔の曲率が小さい箇所（長径の測定に使用する２点付近、図１０（Ｂ）では貫通孔の左右の箇所）から内部へ進展することが確認できた。

図１２には、吸光スペクトルを示す。
図１２に示すように、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの存在に伴う紫外−可視−赤外部の波長域での明瞭な吸光スペクトルが確認された。一方、ブランクとして添加した純水では、当該波長域で顕著なバックグラウンド吸光スペクトルは確認されなかった。このことは、貫通孔を有する分光分析用チップが吸光セルとして、紫外−可視−赤外部の波長域で広汎にスペクトルを測定できているということが確認できた。
図１３には、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの紫外可視吸収スペクトルの検量線を示す。相関係数Ｒ^２が０．９９２の検量線を作成できることが確認できた。

（貫通孔に形成された液膜の厚み）
液膜の観察において、貫通孔に形成された液膜の厚みが、分光分析用チップの貫通孔領域の厚みとほぼ同じ厚さになっていることが確認できた。

一般的な紫外可視吸光光度計と１ｃｍの光路長を持つプラスチック製のセルを利用した際の銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム水溶液の吸光度測定結果を基に、ランベルト−ベール式から分光分析用チップの貫通孔内に形成された液膜の厚みを換算した。
その結果、９．２２×１０^−３ｍｍｏｌｋｇ^−１の銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム水溶液を１ｃｍの光路長を持つプラスチック製のセルを用いて測定した吸光度は０．４８１であった。
濃度を同一とした場合の吸光度の比を求めると貫通孔：１ｃｍ＝１：２３．４となった。このことから、貫通孔に形成された液膜の厚みは、０．４２７ｍｍと算出することができた。
実験で使用したろ紙の厚みが乾燥時０．２６ｍｍであることから、貫通孔に形成された液膜の厚み（液膜長さ）は、ろ紙の乾燥厚みに対してやや厚め（約１．６倍）になることが確認できた。
これは、ろ紙が膨潤しており、液膜の表面および裏面形状が凸状のメニスカス形状になっていることに起因するものと推察される。

＜分析２＞
色調法に基づく分析
貫通孔に形成された液膜の観察は、光学顕微鏡（キーエンスＶＨ−Ｚ１００Ｒ）を用いた透過光モードで行い、各銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液を添加した後の貫通孔に形成された液膜の色調を観察した。なお、観察は、分光分析用チップの貫通孔領域の背面から白色光を照射し、透過した透過光を透過光モードで受光するとともに、受光像をカメラで撮影した。
色調は、光学顕微鏡に内蔵のデジタルカメラで撮影された像を基に、マイクロソフト社製ソフトウェア（ペイント、バージョン６．１）を用いてＲＧＢ表色系として評価した。

（試料の添加）
実験１と同様に調製した各濃度の銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液２０μＬを添加した（図１０（Ａ）参照）。

（色調評価）
各貫通孔に形成された液膜を光学顕微鏡を用いて観察し、観察画像に基づいてＲＧＢ表色系を評価した。
色調評価は、まず、貫通孔領域の３か所（試料供給側、中央部、試料送液端側をそれぞれ３等分）に位置する貫通孔内に形成された液膜を観察し、３箇所の液膜のＲＧＢをＲＧＢ表色系から求める。ついで、得られた３箇所のＲＧＢの平均値（平均ＲＧＢ）を求める。同様の操作を各濃度毎に行い、各濃度毎の平均ＲＧＢを算出する。

（分析２の結果）
図１４（Ａ）は、ＲＧＢ表色系をＸＹの２軸平面として表現したグラフである。Ｘ軸の値は、Ｘ値＝（Ｒ値／Ｒ値＋Ｇ値＋Ｂ値）であり、Ｙ軸の値は、Ｙ値＝（Ｇ値／Ｒ値＋Ｇ値＋Ｂ値）で示した。グラフ中の黒丸が、各濃度毎の平均ＲＧＢである。
図１４（Ｂ）には、液膜の着色状況を示した。
図１４（Ｂ）に示すように、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液の濃度に応じて液膜の着色状況が変化することが観察された。このことは、濃度に応じて吸光が変化していることを示している。
図１５には、Ｒ値と銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液の濃度との関係を示した。
図１５に示すように、得られた画像から貫通孔内に形成された液膜の色調をＲＧＢ表色系として数値化した場合、Ｒ値が濃度との相関関係を有することが確認できた。

[実験３]
嵩高のガラス繊維ろ紙の分光分析用チップを用いた銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの定量

＜分光分析用チップの調製＞
ろ紙には、ガラス繊維ろ紙（株式会社アドバンテック社製、型番；ＧＡ−１００、質量；１１０ｇ／ｍ^２、厚さ；０．４４ｍｍ、バインダー使用無し、空隙率；約８９％)を用いた。このろ紙から実験１と同様に短辺が約６ｍｍ、長辺が約１２ｍｍの長方形を切り取った。この切取片の一の短辺側近傍に複数の貫通孔が５ｍｍ四方の貫通孔領域を形成した（図１０（Ａ）参照）。

（貫通孔の調製）
貫通孔は、実験１と同様のレーザー加工機を用いてろ紙に表裏を貫通する微細な穿孔（貫通孔）を形成した。
照射条件は、レーザーパワー５％、速度５、４０パルス/インチとした。
貫通孔は、楕円形であり、長径が約５１０、短径が約３８０μｍとなるように形成した（図１０（Ｂ）参照）。
貫通孔の形状観察および貫通孔に形成された液膜の観察は、光学顕微鏡（キーエンスＶＨ−Ｚ１００Ｒ）を用いた透過光モードで行った。

＜試料の調製＞
銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム（富士フイルム和光純薬工業製、特級）を０．０９８ｇ(１．０×１０^−４ｍｏｌ）を純水１０ｍｌに溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。この溶液をさらに希釈して、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム０．４７ｍＭの溶液を調製した。

＜分析＞
吸光光度法に基づく分析
分光計は、実験１と同様のものを使用した。
光照射ファイバの光源には、実験１と同様のものを使用した。
受光ファイバでは、基端に分光測定器（紫外−可視−赤外分光器；オーシャンオプティクス社製、ＵＳＢ２０００）を接続して、６２０ｎｍ〜７６０ｎｍの吸光度を測定した。

（試料の添加）
実験１と同様に調製した銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液４０μＬを添加した（図１０（Ａ）参照）。

＜結果＞
貫通孔の観察結果から、各貫通孔に銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液の液膜が形成されることが確認できた。
銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム０．４７ｍＭの吸光度は、１．６６±０．２６（測定回数３回の平均±標準偏差）であった。
実験３では、実験２における同一濃度での吸光度に比較して、やや高い吸光度が得られた。同じ濃度で吸光度が大きいということで、貫通孔に形成された液膜の厚みがやや厚くなることが確認できた。

（貫通孔に形成された液膜の厚み）
実験２と同様に貫通孔に形成された液膜の厚みを計算したところ、液膜の厚みは、０．６９ｍｍであった。
実験で使用したろ紙（ガラス繊維ろ紙）の厚みが乾燥時０．４４ｍｍであることから、貫通孔に形成された液膜の厚みは、実験２と同様にガラス繊維の乾燥厚みに対してやや厚め（１．５倍程度）になることが確認できた。
これは、ろ紙（ガラス繊維ろ紙）の膨潤と液膜の表面および裏面形状（凸状のメニスカス形状）に起因するものと推察される。
また、ろ紙（ガラス繊維ろ紙）の乾燥厚みに対する液膜の厚みの増加倍率が、実験２に用いたろ紙（セルロース繊維ろ紙）と比べて小さいという理由は、ガラス繊維ろ紙が膨潤し難い性質を有していることと関連するものと推察される。つまり、ガラス繊維ろ紙は、繊維間に水素結合があまり発生しないので、乾燥時はふんわりした粗の状態になっている。一方、実験２に用いたセルロース繊維ろ紙は、乾燥時は繊維間に水素結合が発生して、かっちりと密な状態となっている。そして、両者に水を供給した場合、セルロース繊維ろ紙は、吸水に伴い繊維間の水素結合が乾燥時に比べて相対的に弱くなり膨潤し易くなる一方、ガラス繊維ろ紙はもともと繊維同士が密に結合していないので、セルロース繊維ろ紙と比べて膨潤率が抑制されたものと推察される。

[実験４]
形状保持層を有する分光分析用チップを用いた銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの定量

＜分光分析用チップの調製＞
ろ紙と耐水紙を重ねた耐水紙貼合ろ紙を作成し、この耐水紙貼合ろ紙から短辺が約６ｍｍ、長辺が約１３ｍｍの長方形を切り取った。この切取片の一の短辺側近傍に複数の貫通孔が５ｍｍ四方の貫通孔領域を形成した（図１０（Ａ）参照）。
この耐水紙貼合ろ紙における耐水紙の部分が、この分光分析用チップの形状保持層に相当する。

耐水紙貼合ろ紙の具体的な製法は、以下のとおりとした。
耐水紙（カラーレーザー用耐水紙、特厚、製品品番；ＬＢＰ−ＷＰＦ２２ＭＤＰ、サンワサプライ株式会社製）を垂直に固定する。この耐水紙全体にスプレーのり（コクヨ製、品番；５１０７１４４８）を１０秒間噴霧する。噴霧後、直ちに噴霧面にろ紙をのせ、両者を卓上プレス（１０ＭＰａ、１分間）で加圧して貼り合わせて、耐水紙貼合ろ紙を作成した。作成した耐水紙貼合ろ紙は、貫通孔を形成するまで密閉し保存した。

ろ紙には、クロマトグラフィー用ろ紙（株式会社アドバンテック社製、型番；Ｎｏ．５９０、Ｎｏ．５２６、Ｎｏ．５１４）の３種類を用いた。
ろ紙の厚みは、Ｎｏ．５１４、Ｎｏ．５２６、Ｎｏ．５９０、の順に厚くなる。ろ紙の単位面積当たり坪量は、Ｎｏ．５２６、Ｎｏ．５９０、Ｎｏ．５１４の順に小さくなっていた。

（貫通孔の調製）
貫通孔は、実験１と同様のレーザー加工機を用いてろ紙に表裏を貫通する微細な穿孔（貫通孔）を形成して、耐水紙貼合ろ紙の分光分析用チップを作成した。
照射条件：ろ紙Ｎｏ．５９０については、下記表１のとおりとした。ろ紙Ｎｏ．５２６については、レーザーパワー１０％、速度５、４０パルス/インチとした。ろ紙Ｎｏ．５１４については、レーザーパワー８％、速度５、４０パルス/インチとした。

貫通孔は、楕円形であり、長径が３００〜７００μｍ、短径が２００〜４００μｍとなるように形成した（図１０（Ｂ）参照）。
この分光分析用チップにおける貫通孔の形状観察および貫通孔に形成された液膜の観察は、実験１と同様の光学顕微鏡を用いた透過光モードで行った。
この分光分析用チップ（ろ紙；Ｎｏ．５９０、紙厚；０．９５４ｍｍ）の貫通孔の観察結果を代表として下記表２に示す。
なお、貫通孔の形状は、この分光分析用チップの表側（ろ紙側）の開口を計測した。貫通孔の形状は、やや楕円形状であった。表中の孔径は、楕円形状の長径の計測値を示している。

＜試料の調製＞
銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム（富士フイルム和光純薬工業製、特級）を０．０９８ｇ(１．０×１０^−４ｍｏｌ）を純水１０ｍｌに溶解して１０ｍｍｏｌｋｇ^-1の溶液を調製した。この溶液をさらに希釈して、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの濃度が０．２ｍｍｏｌｋｇ^-1の試料を調製した。

＜分析＞
吸光光度法に基づく分析
光照射ファイバの光源は、バランス重水素ハロゲン光源（オーシャンオプティクス社製、ＤＨ−２０００ ＢＡＬ）を使用した。
受光ファイバでは、基端に分光測定器（紫外−可視−赤外分光器；オーシャンオプティクス社製、ＦＬＡＭＥ−Ｓ）を接続して、２５０ｎｍ〜８６０ｎｍの吸光度を測定した。
なお、測定結果は、分光測定用ソフトウェア（オーシャンオプティクス社製、ＯＣＥＡＮＶＩＥＷ）にて解析した。

実験操作は以下のとおりとした。
操作１）〜５）は実験１と同様に行い、操作５）以降は以下のように行った。
６）分光分析用チップを交換した後、試料を一定量滴下する。一定時間経過後、透過光を測定（Ｉ）する。
７）ランベルト−ベール式に基づき吸光スペクトルを作成する。

（試料の添加）
実験１と同様に、調製した銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液を添加した。試料の添加量は、分光分析用チップに使用したろ紙に厚みに応じて調製した。
図１７に、各分光分析用チップ（ろ紙Ｎｏ．５９０を用いたもの、ろ紙Ｎｏ．５２６を用いたもの、ろ紙Ｎｏ．５１４を用いたもの）に添加した試料添加量を示す。

＜結果＞
貫通孔の観察結果から、試料６０μＬで各貫通孔の開口と液膜の上面がほぼ一致するように銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム溶液の液膜が形成されることが確認できた。
図１６に試料１００μＬ添加した際の吸収スペクトルを示す。図１６に示すように、形状保持層（耐水紙）を有する分光分析用チップは、分光分析の吸光光度法において、適切に使用できることが確認できた。

図１７に、試料の滴下量変化と吸光度の関係を示す。この結果は、各分光分析用チップのサンプルＡの試料滴下量と吸光度差（吸光度６３１ｎｍ‐吸光度８００ｎｍ）の関係を示したものである。なお、サンプルＢ〜Ｄも同様の結果となった。
図１７に示すように、各分光分析用チップ（ろ紙Ｎｏ．５９０を用いたもの、ろ紙Ｎｏ．５２６を用いたもの、ろ紙Ｎｏ．５１４を用いたもの）は、試料の滴下量の増加に伴い、吸光度が上昇する結果となった。そして、試料滴下量が増加すると、吸光度の測定精度が安定することが確認できた。

図１８に、分光分析用チップ（サンプルＡ、ろ紙Ｎｏ．５９０を用いたもの）の貫通孔領域の側面視観察を示す。
図１８（Ａ）は試料６０μＬを滴下し展開させた状態の観察結果であり、図１８（Ｂ）は試料１００μＬを滴下し展開させた状態の観察結果である。
いずれも試料添加後３０秒後のものである。添加量１００μＬの場合、試料が貫通孔領域の表面上に滞留させた状態にできる（試料の滞留層を形成できる）ことが確認できた。この滞留層は、試料の添加量が７０μＬ以上で確認できた。この滞留層は、分光分析用チップの表面（ろ紙の表面）と試料との表面張力によって形成されたものと推察される。

実験結果から、試料の増加に伴い液膜が厚くなり、所定の量を超えると貫通孔領域の表面上に滞留層を形成させることができることが確認できた。そして、滞留層の厚みの増加に伴い吸光度が上昇していることから、吸光光度法において、この滞留層の長さ分だけ光路長を増加させることができることが確認できた。
また、測定精度の点においては、試料の滴下量の多い条件下で測定精度を向上させることができることが確認できた。これは、試料量の増加に伴い、分光分析用チップの貫通孔領域全体に試料が満遍なく展開され、ろ紙の膨潤度と試料の滞留層の厚みが安定することにより、光路長のばらつきが小さくなったことが要因として考えられる。

[実験５]
不純物を含有する試料に対する適性試験

＜分光分析用チップの調製＞
実験４と同様の耐水紙貼合ろ紙を作成した。
ろ紙は、クロマトグラフィー用ろ紙（Ｎｏ．５９０）を用いた。

（貫通孔の調製）
貫通孔は、実験４の同様のレーザー加工機を用い、サンプルＡの条件と同様の条件で耐水紙貼合ろ紙に表裏を貫通する微細な穿孔（貫通孔）を形成して、耐水紙貼合ろ紙の分光分析用チップを作成した。
この分光分析用チップにおける貫通孔の形状観察および貫通孔に形成された液膜の観察は、実験４と同様に行った。

＜試料の調製＞
銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム（富士フイルム和光純薬工業製、特級）を０．０９８ｇ(１．０×１０^−４ｍｏｌ）を純水１０ｍｌに溶解して、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウム１０ｍｍｏｌｋｇ^-1の溶液を調製した。活性炭（ナカライテスク社製、活性炭素(粉末)、３５０メッシュ）０．５ｇを純水１０ｍｌに溶解して５％活性炭分散液を調製した。これらの溶液を混合・希釈して、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの濃度が、０．１ｍｍｏｌｋｇ^-1、活性炭濃度が０．５％となるように混合試料を調製した。
また、活性炭を含有しない活性炭非含有試料（銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの濃度０．１ｍｍｏｌｋｇ^-1）を調製した。

＜分析＞
吸光光度法に基づく分析
分光計は、実験４と同様のものを使用した。
光照射ファイバの光源および受光ファイバは、実験４と同様のものを使用した。
測定吸光度は、２５０ｎｍ〜８６０ｎｍを測定した。

（試料の添加）
実験４と同様に、調製した混合試料溶液６０μＬを分光分析用チップに添加した。同様に、分光分析用チップに活性炭非含有試料６０μＬを添加した。

（結果）
混合試料溶液を添加した分光分析用チップの表面観察から、活性炭の存在を示す黒色の粒子が貫通孔領域以外の箇所で保持されていることが確認できた。また、本実験では、試料量を調整することにより、図１８（Ａ）に示すような滞留層が発生していないことが確認できた。
図１９には、混合試料溶液（Ａ）と活性炭非含有試料（Ｂ）の吸収スペクトルを示す。混合試料溶液と活性炭非含有試料の吸光度（測定波長６３１ｎｍと８００ｎｍの吸光度差）の測定においては、それぞれ０．３５５と０．３４１であり、ほぼ同様の吸光度を得られた。また、ほぼ同一形状の吸光スペクトルが観察できた。
実験結果から、分光分析用チップは、分光測定を妨害する試料中の粗大な粒子を除去しつつ、試料中の目的成分を適切に測定し、定量できることが確認できた。また、試料中に不純物（夾雑物）を含む場合には、滞留層を形成しないように添加量を調整することで、目的成分を適切に定量できることが確認できた。つまり、滞留層が形成されることによる‘試料の濡れ広がり’を防止することにより、添加した試料が分光分析用チップのろ紙内に浸透する前に滞留層を通じて、ろ過前の不純物（夾雑物）が検出部に展開することを防止できることが確認できた。

[実験６]
不純物を含有する試料に対する適性試験

＜分光分析用チップの調製＞
実験４と同様の耐水紙貼合ろ紙を作成し、この耐水紙貼合ろ紙の表面に、セルロースナノファイバー（ＣＮＦ）水溶液を塗工して膜厚数十μｍのＣＮＦ層を形成してＣＮＦ耐水紙貼合ろ紙を作成した。このＣＮＦ耐水紙貼合ろ紙から短辺が約６ｍｍ、長辺が約１３ｍｍの長方形を切り取った。この切取片の一の短辺側近傍に複数の貫通孔が５ｍｍ四方の貫通孔領域を形成した（図１０（Ａ）参照）。そして、この貫通孔領域とは反対側の試料を添加する領域のＣＮＦ層を、添加した試料がろ紙に浸透し易いように除去した。
ＣＮＦは、パルプを解繊処理することによって製造された製品（ＣＮＦ固形分１０％品、スギノマシン社製、型番；Ｂｉｎｆｉｓ ＡＭａ１００１０）を５％に純水で希釈して使用した。ＣＮＦ溶液には、耐水性を付与するためにポリアミドポリアミンエピクロルヒドリンがＣＮＦの濃度比として０．５％添加されたものを使用した。
ろ紙には、クロマトグラフィー用ろ紙（Ｎｏ．５２６）を用いた。
ＣＮＦ溶液の塗工には、塗工用アプリケーター（テスター産業社製、型番ＰＩ−１２１０）を使用した。
なお、このＣＮＦ塗工膜が、本実施形態における「カバー部材」に相当する。

（貫通孔の調製）
貫通孔は、実験４と同様のレーザー加工機を用い、サンプルＡの条件と同様の条件でＣＮＦ耐水紙貼合ろ紙に表裏を貫通する微細な穿孔（貫通孔）を形成して、ＣＮＦ耐水紙貼合ろ紙の分光分析用チップを作成した。照射条件は、実験４のサンプルＢと同様にレーザーパワー２０％、速度５、４０パルス/インチとした。
この分光分析用チップにおける貫通孔の形状観察および貫通孔に形成された液膜の観察は、実験４と同様に行った。

＜試料の調製＞
実験４と同様に混合試料（活性炭濃度が０．５％、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの濃度０．１ｍｍｏｌｋｇ^-1）と活性炭非含有試料（銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの濃度０．１ｍｍｏｌｋｇ^-1）を調製した。

＜分析＞
吸光光度法に基づく分析
分光計は、実験４と同様のものを使用した。
光照射ファイバの光源および受光ファイバは、実験４と同様のものを使用した。
測定吸光度は、実験４と同様に行った。

（試料の添加）
試料は、分光分析用チップのＣＮＦ層を除去した領域に混合試料溶液６０μＬを添加した。同様に、分光分析用チップのＣＮＦ層を除去した領域に活性炭非含有試料６０μＬを添加した。

（結果）

混合試料溶液を添加した分光分析用チップの表面観察から、添加領域以外への活性炭の存在を示す黒色の粒子の存在をほぼ確認できなかった。また、図１８（Ａ）に示すような滞留層が発生していないことが確認できた。
図２０に混合試料溶液（Ａ）と活性炭非含有試料（Ｂ）の吸収スペクトルを示す。混合試料溶液と活性炭非含有試料の吸光度（測定波長６３１ｎｍと８００ｎｍの吸光度差）の測定においては、それぞれ０．２４９と０．２６６であり、ほぼ同様の吸光度を得られた。また、ほぼ同一形状の吸光スペクトルが観察できた。
実験結果から、ほぼ同一形状の吸光スペクトルが得られたことから、耐水紙貼合ろ紙の表面上にＣＮＦ層を備えた分光分析用チップは、分光測定を妨害する試料中の粗大な粒子も適切に除去できていることが確認できた。そして、分光分析用チップがＣＮＦ塗工膜を備えることにより、添加した試料が添加領域（ＣＮＦ塗工膜を除去した領域）以外に広がるのを抑止できることが確認できた。つまり、添加した試料をＣＮＦ塗工膜の下に潜り込ませるようにして分光分析用チップのろ紙内へ浸透させることができることが確認できた。しかも、添加した試料が添加領域以外に広がるのを抑制できることから、試料が分光分析用チップのろ紙内に浸透する前にろ紙表面上で広がって‘試料の濡れ広がり’が形成されることも適切に防止できることが確認できた。
また、分光分析用チップに上記添加領域を設けることで、試料をよりスムースに分光分析用チップのろ紙内へ浸透させることができることが確認できた。

[実験７]
表面カバー部材を有する分光分析用チップを用いた銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの定量

＜分光分析用チップの調製＞
実験４と同様の耐水紙貼合ろ紙を作成した。
ろ紙は、クロマトグラフィー用ろ紙（Ｎｏ．５９０）を用いた。

（貫通孔の調製）
貫通孔は、実験４の同様のレーザー加工機を用い、サンプルＡの条件と同様の条件で耐水紙貼合ろ紙に表裏を貫通する微細な穿孔（貫通孔）を形成した。

（表面カバー部材）
ついで、この耐水紙貼合ろ紙において、試料を添加する領域以外のろ紙表面上に表面カバー部材を貼り合わせてカバー付き耐水紙貼合ろ紙の分光分析用チップを作成した。
この表面カバー部材には、樹脂製のフィルム基材の一の面に接着剤層を設けた部材（セロハンテープ：ニチバン社製、型番；ＣＴ−１２Ｓ）を用いた。
この分光分析用チップにおける貫通孔の形状観察および貫通孔に形成された液膜の観察は、実験４と同様に行った。

＜試料の調製＞
実験４と同様に銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの濃度０．１ｍｍｏｌｋｇ^-1の試料を調製した。

＜分析＞
吸光光度法に基づく分析
分光計は、実験４と同様のものを使用した。
光照射ファイバの光源および受光ファイバは、実験４と同様のものを使用した。
測定吸光度は、２５０ｎｍ〜８６０ｎｍを測定した。

（試料の添加）
実験４と同様に、調製した試料溶液６０μＬを分光分析用チップに添加した。

（結果）
分光分析用チップの表面観察から、各貫通孔内に液膜が適切に形成されていることが確認できた。
図２１に吸収スペクトルを示す。試料の吸光度（測定波長６３１ｎｍと８００ｎｍの吸光度差）の測定においては、０．３４３であった。
実験結果から、分光分析用チップが貫通孔領域に光透過性を有する表面カバー部材を備えた場合であっても、実験６と同様に適切に分光測定が行えることが確認できた。しかも、分光分析用チップに表面カバー部材を設けることにより、添加した試料が分光分析用チップのろ紙内に浸透する前にろ紙表面上で広がって‘試料の濡れ広がり’が形成されることも防止できることが確認できた。

[実験８]
ＣＮＦ層と透水性材料からなる分光分析用チップを用いた銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの定量

＜分光分析用チップの調製＞
不透水性材料は、繊維径１２．５μｍ、繊維長０．２ｍｍのポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）繊維を用いた。セルロースナノファイバー（ＣＮＦ）は、広葉樹漂白クラフトパルプ（ＬＢＫＰ）を機械処理（高速グラインダー：スーパーマスコロイダー ＭＡＣＡ６-２、増幸産業製）して得た。
ついで、ＣＮＦとＰＥＴ繊維の分散液を調製した。この分散液は、ＰＥＴ繊維が１５．３質量部、ＣＮＦ分散液が４５．３質量部、０．５％ポリオキシエチレン水溶液が３９．４質量部の合計１００質量部となるように調製した。
この分散液を、塗工機（ＰＩ−１２１０、テスター産業製）を用いて、市販の耐水紙（カラーレーザー用耐水紙、特厚、製品品番；ＬＢＰ−ＷＰＦ２２ＭＤＰ、サンワサプライ株式会社製）の表面上に塗布して、乾燥機で乾燥して、ＣＮＦ層と不透水性材料からなるシート部材（シート厚；約２００μｍ）を作成した。
このシート部材から図４と同様に短辺が約６ｍｍ、長辺が約１３ｍｍの長方形を切り取った。この切取片の一の短辺側近傍に複数の貫通孔が５ｍｍ四方の貫通孔領域を形成した（図１０（Ａ）参照）。

なお、シート部材を切り取る際に、長方形状の長手方向に対して不透水性材料（ＰＥＴ繊維）が略直交するように切り取った。つまり、ＰＥＴ繊維の配向が、図１０（Ａ）の矢印で示す進液方向に対して略直交するようになるよう調製した。

（貫通孔の調製）
貫通孔は、実験４の同様のレーザー加工機を用い、ＣＮＦ−ＰＥＴ耐水紙に表裏を貫通する微細な穿孔（貫通孔）を形成して、ＣＮＦ−ＰＥＴ耐水紙の分光分析用チップを作成した。
照射条件は、レーザーパワー３％、速度５、４０パルス/インチとした。
この分光分析用チップにおける貫通孔の形状観察および貫通孔に形成された液膜の観察は、実験４と同様に行った。

＜試料の調製＞
実験４と同様に、銅フタロシアニンテトラスルホン酸ナトリウムの濃度が、０．１ｍｍｏｌｋｇ^-1の試料を調製した。

＜分析＞
吸光光度法に基づく分析
分光計は、実験４と同様のものを使用した。
光照射ファイバの光源および受光ファイバは、実験４と同様のものを使用した。
測定吸光度は、２５０ｎｍ〜８６０ｎｍを測定した。

（試料の添加）
実験４と同様に、調製した試料溶液４０μＬを分光分析用チップに添加した。

（結果）
分光分析用チップの表面観察から、表面には小さな穴が多数存在していることが確認できた。そして、試料を添加すれば、試料は表面ではじかれずに内部に浸透したことが確認できた。さらに、各貫通孔内には、液膜が適切に形成されていることが確認できた。
また、不透水性材料であるＰＥＴ繊維の約７０％が、試料供給部からの進行方向（図１０Ａ（Ａ）では矢印の方向）に対して略直交する方向に配向していることが確認できた。
図２２に吸収スペクトルを示す。試料の吸光度（測定波長６３１ｎｍと８００ｎｍの吸光度差）の測定においては、０．３４６であった。
ＣＮＦ層と透水性材料からなる分光分析用チップを用いた場合でも試料中の目的成分を適切に測定し、定量できることが確認できた。

本発明の分光分析用チップは、医学や、生化学、薬学、化学、環境などの分野における分光分析法に用いられる分析用具として適している。

１ 分光分析用チップ
１０ 検出部
１０ｈ 貫通孔
１１ 検出部の基材
１１ｈ 基材中の空隙
１２ 透水性材料
１３ 不透水性材料
１４ ナノファイバー層
２０ 流路部
２１ 流路基材
Ｌｆ 貫通孔内に形成される液膜
ＳＭ 分光計

Claims (24)

1. 分光分析に用いられる分析用具であって、
   基材と、該基材の表裏を貫通した貫通孔を有する検出部を備えており、
   該検出部は、
   前記基材内に、前記貫通孔に連通する、液体が毛細管現象によって通液可能な網目状の空隙を有しており、
   前記貫通孔は、
   液体を表面張力によって保持し得る大きさに形成されており、
   該貫通孔の内壁面には、
   前記空隙の開口が複数形成されている
   ことを特徴とする分光分析用チップ。
2. 前記検出部は、
   前記基材が、
   毛細管現象によって内部を通液可能な複数の透水性材料を備えている
   ことを特徴とする請求項１記載の分光分析用チップ。
3. 前記検出部は、
   前記基材が、
   毛細管現象によって内部を通液可能な複数の透水性材料と、該透水性材料間に配置された複数の不透水性材料と、を備えており、
   前記空隙が、
   前記透水性材料と前記不透水性材料によって形成されている
   ことを特徴とする請求項１記載の分光分析用チップ。
4. 前記検出部は、
   前記基材が、
   ナノファイバーからなる複数のナノファイバー層と、該複数のナノファイバー層間に配置された不透水性材料と、を備えており、
   前記空隙が、
   前記ナノファイバー層と前記不透水性材料によって形成されている
   ことを特徴とする請求項１記載の分光分析用チップ。
5. 前記検出部の基材は、
   前記基材の表面に位置するナノファイバー層が、該ナノファイバー層を貫通する孔を有している
   ことを特徴とする請求項４記載の分光分析用チップ。
6. 前記検出部に連結した液体を通す流路部を備えており、
   該前記流路部は、
   液体が毛細管現象によって通液可能な複数の空隙を有する流路基材を備えている
   ことを特徴とする請求項１乃至５のいずれかに記載の分光分析用チップ。
7. 前記流路部は、
   前記流路基材が、
   毛細管現象によって内部を通液可能な複数の透水性材料を備えている
   ことを特徴とする請求項６記載の分光分析用チップ。
8. 前記流路部は、
   前記流路基材が、
   毛細管現象によって内部を通液可能な複数の透水性材料と、該透水性材料間に配置された複数の不透水性材料と、を備えており、
   前記空隙が、
   前記透水性材料と前記不透水性材料によって形成されている
   ことを特徴とする請求項６記載の分光分析用チップ。
9. 前記流路部は、
   前記流路基材が、
   ナノファイバーからなる複数のナノファイバー層と、該複数のナノファイバー層間に配置された不透水性材料と、を備えており、
   前記空隙が、
   前記ナノファイバー層と前記不透水性材料によって形成されている
   ことを特徴とする請求項６記載の分光分析用チップ。
10. 前記流路部は、
    前記流路基材の表面に位置するナノファイバー層が、該ナノファイバー層を貫通する孔を有している
    ことを特徴とする請求項９記載の分光分析用チップ。
11. 前記流路部は、
    前記不透水性材料が、
    繊維状の部材であり、前記検出部に向かう方向に沿って配列されている
    ことを特徴とする請求項８、９または１０記載の分光分析用チップ。
12. 前記流路部は、
    前記不透水性材料が、
    繊維状の部材であり、前記検出部に向かう方向に対して交差するように配列されている
    ことを特徴とする請求項８、９または１０記載の分光分析用チップ。
13. 前記流路部の流路基材が、前記検出部の基材と一体形成されている
    ことを特徴とする請求項６乃至１２のいずれかに記載の分光分析用チップ。
14. 前記検出部は、
    前記基材が、
    裏面側に形状を保持するための形状保持層を有している
    ことを特徴とする請求項１乃至１３のいずれかに記載の分光分析用チップ。
15. 前記形状保持層が、
    不透水性のベース部材で形成されており、
    該ベース部材は、
    該ベース部材よりも前記基材の表面側に位置する層の外縁よりも外方に張り出した外縁部を備えている
    ことを特徴とする請求項１４記載の分光分析用チップ。
16. 前記検出部には、
    前記基材の前記貫通孔を有する領域に光透過性を有するカバー部材が設けられている
    ことを特徴とする請求項１乃至１５のいずれかに記載の分光分析用チップ。
17. 前記カバー部材が、
    前記基材の表面に設けられた表面カバー部材を備えている
    ことを特徴とする請求項１６記載の分光分析用チップ。
18. 前記カバー部材が、
    前記基材の裏面に設けられた背面カバー部材を備えている
    ことを特徴とする請求項１６または１７記載の分光分析用チップ。
19. 前記カバー部材は、
    前記基材に対向する面に検出材料が設けられている
    ことを特徴とする請求項１６、１７または１８記載の分光分析用チップ。
20. 前記検出部は、
    前記基材が、
    前記貫通孔が設けられた領域の周縁部を囲むように液体を通さない不透水性領域を有しており、
    該不透水性領域が、一部に液体を通す透水性領域を有している
    ことを特徴とする請求項１乃至１９のいずれかに記載の分光分析用チップ。
21. 前記不透水性領域には、
    前記透水性領域を維持した状態で前記周縁部を囲むように溝が形成されており、
    該溝は、
    前記検出部の基材の表裏を貫通するように形成されている
    ことを特徴とする請求項２０記載の分光分析用チップ。
22. 前記検出部は、
    前記貫通孔の開口径が、５０μｍ〜１０００μｍである
    ことを特徴とする請求項１乃至２１のいずれかに記載の分光分析用チップ。
23. 前記検出部は、
    前記基材が、ろ紙である
    ことを特徴とする請求項２記載の分光分析用チップ。
24. 前記流路部は、
    前記流路基材が、ろ紙である
    ことを特徴とする請求項７記載の分光分析用チップ。
    

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