JP6894155B2 - 特定の遺伝子マーカーを有する患者に用いるがん治療用の医薬組成物 - Google Patents
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Description
本発明の有効成分であるO−(5−アミノ−2−フェニルベンズオキサゾール−7−イル)メチル−3,5−ジクロロ−L−チロシンは、特許文献1に開示された化合物であり、現在出願人らによる第II相試験が進行中のものである。
本発明の医薬組成物は、有効成分としてJPH203またはその薬理学的に許容される塩を含む。また、必要に応じて医薬品添加物を含んでもよい。本発明の医薬組成物は、錠剤、顆粒剤、細粒剤、粉剤、カプセル剤などの固形製剤または液剤、ゼリー剤、シロップ剤などの形態で、経口投与することができ、あるいは、該医薬組成物薬は、注射剤、経鼻剤、坐剤、吸入剤、経皮剤などの形態で、非経口的に投与してもよい。
本発明の医薬組成物が適用される投薬レジメは、患者のタイプ、人種、年齢、体重、性別および医学的状態;処置すべき状態の重症度;投与経路;ならびに患者の肝および腎機能をはじめとする様々な要因に従って選択される。医師は、その症状の進行を予防、阻止または停止させるために必要な薬物の有効量を容易に決定し、処方することができる。
−医薬組成物が、一定期間連続投与に続く一定期間の休薬を1サイクルとして投与される、
−医薬組成物が、5日間の連続投与に続く9日間の休薬の計14日を1サイクルとして投与される、
−一定量の医薬組成物が、一定時間かけて静脈内持続投与される、
−医薬組成物100mLが、90分かけて静脈内持続投与される、
−患者に対して1〜60mg/m2で投与される、
−患者に対して12.5〜60mg/m2で投与される、
−患者に対して12.5〜25mg/m2で投与される、
−患者に対して25mg/m2で投与される、
等が挙げられ、必要に応じてこれらを組み合わせて適用可能である。
(2) Non−Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有すると同定された当該対象に当該医薬組成物を投与する。
更に、本発明のO−(5−アミノ−2−フェニルベンズオキサゾール−7−イル)メチル−3,5−ジクロロ−L−チロシンまたは薬学的に許容されるその塩は、ホウ素中性子捕捉療法と併用して、がんの治療に用いることができる。
(1) Non−Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有する前記対象を同定して選択し;
(2) 含ホウ素化合物を、当該医薬組成物を投与する前に、Non−Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有すると同定された当該対象に投与し;そして
(3) 当該医薬組成物を、当該対象に投与する。
使用薬剤:JPH203−SBECD(有効成分として50mg)を注射用水9.7mlに溶解させ、50mg/10ml濃度とし、最終的に患者の体表面積に従い、全量100mlとする。
被験者から、血液(全血)及び尿を採取した。濃度測定に用いた全血は、投与開始から0.5、1、1.5、2、3、4.5、6、12、25.5、49.5時間後に採取した。濃度測定に用いた尿は、投与開始から0−3、3−6、6−12、12−25.5時間ごとに蓄尿で採取した。血中・尿中のJHP203濃度およびそのアセチル体であるNac−JPH203濃度を、バリデーションされたLC−MS/MSの測定系を用いて測定した。
NAT2遺伝子多型の測定は、以下のリアルタイムPCR法またはLuminex Systemを用いる方法のいずれかの方法で実施することができる。いずれの方法においても、NAT2に関して下記の7種類のSNPsを解析対象とする。
下記の方法に従いリアルタイムPCR法で測定する。なお、プロトコルの詳細については適宜変更することができる。
(i) NAT2のDNA濃度を測定した後、解析対象SNPs7種を含む領域を増幅できるForward Primer2種およびReverse Primer1種を設計する。
(ii) これらのPCRプライマーを用いてPCR条件を検討し、最終的に使用するPCRプライマーセットおよびPCR条件を決定する。その後、決定した条件により、ゲノムDNAについてサンガーシーケンス法による配列解析を実施する。
(iii) PCR後、PCR産物の精製およびキャピラリーシーケンサーによる測定を行う。シーケンスプライマーにはPCR プライマーを使用し、PCR 産物の両側よりシーケンスを実施する。
下記の方法に従いLuminex System法で測定する。なお、プロトコルの詳細については適宜変更も可能とする。
(i) NAT2の解析対象とする7SNPsに対応するプローブ固相ビーズを作成する。
(ii)ビオチン標識プライマーでNAT2遺伝子を増幅させる。このPCR増幅産物をプローブと結合させ、SA−PEで蛍光標識する。
(iii)Luminex Systemでデータを取得し、解析ソフトウェアでNAT2遺伝子のタイプを表示する。
NAT2遺伝子多型の検査は以下のように実施した。第I相試験時の血液サンプルからDNAを抽出し、NAT2の遺伝子多型に応じて、各SNPの情報からPhenotypeを分類した。方法の概要は以下のとおりである;
DNAの抽出は、全血200μLをAE buffer 100μLに溶出後、QIAamp DNA Blood Mini kit(登録商標)(株式会社キアゲン)を用いて行った。NAT2をコードする部位にあるSNPと関連するアレーおよびハプロタイプの測定には、超微量分光光度計(Nano Drop 2000(登録商標)、サーモフィッシャーサイエンティフィック)を用いた(濃度は5ng/μLに調整)。遺伝子多型解析はTaqMan(登録商標)SNP Genotyping assayを用いた(反応容量5μL)。SNPを検出するために必要なPCRプライマーと蛍光プローブはPrimer Express(商標)(Applied Biosystems,CA,USA)を用いてデザインした。蛍光プローブはリポーター色素(carboxyfluoresceinあるいはVIC(登録商標),Applied Biosystems)によってラベルしておき、7つのNAT2SNP(rs1801279(191G>A),rs1041983(282C>T),rs1801280(341T>C),rs1799929(481C>T),rs1799930(590G>A),rs1208(803A>G)およびrs1799931(857G>A))にある2つの塩基のうちの1つに特異的に反応するようにした。PCRの反応条件は、95℃で10分に続いて、92℃で15秒と60℃で90秒を50サイクル行った。
16例の被験者のNAT2 SNP表現型は、がん種(大腸がん、胆道がん、膵臓がん、食道がんおよび乳がん)にかかわらず、2−SNP、3−SNP、4−SNPのいずれの組み合わせでも一致した結果であった。表3にその結果の詳細を示す。
PD:部分奏効(腫瘍の大きさの和が20%以上増加かつ絶対値でも5mm以上増加した状態、あるいは新病変が出現した状態)
PAAD:膵がん(Pancreas Adenocarcinoma)
CHOL:胆道がん(Cholangiocarcinoma)
COAD:大腸がん(Colon Adenocarcinoma)
BRCA:乳がん(Breast Adenocarcinoma)
ESCA:食道がん(Esophageal Carcinoma)
16例の個体のNac−JPH203/JPH203濃度比のばらつきをNAT2のRapidタイプ、Intermediateタイプ、およびSlowタイプに分類してみると、代謝物Nac−JPH203が多いタイプはNAT2 Rapidタイプであり、逆に代謝物の少ない個体はNAT2 Slowタイプであった。これらNAT2 Rapid群のうちNac−JPH203比率の高い4例で肝機能検査値の上昇が認められ、うち2例はDLT(Dose Limiting Toxicity)と判断された。これらの患者は大腸がん2例、食道がん1例、すい臓がん1例であり、胆道がん患者は含まれなかった。
JPH203とNAT2阻害剤との併用実験
NAT2阻害剤であるアセトアミノフェン(APAP)投与により、血漿中、肝臓中のJPH203濃度が上昇するか、またその代謝物であるNac−JPH203濃度が低下するかを評価する。
代表的ながん細胞として膵がん由来細胞T3M4を用い、該細胞にBPAを添加し、15分後に10μM JPH203を添加し、細胞内に封じ込められたBPA濃度を測定した。結果を図2に示す。JPH203非添加(●)の場合、BPAは時間を追うごとに細胞から排出されるため細胞内濃度が減少する。一方でJPH203添加(■)の場合、JPH203によりBPAの排出が抑制されるため細胞内濃度が保たれ、30分後では両者の細胞内濃度は10倍程度の差がついていることがわかる。
Claims (19)
- 対象のがん疾患の治療に使用するための、O−(5−アミノ−2−フェニルベンズオキサゾール−7−イル)メチル−3,5−ジクロロ−L−チロシン、または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物であって、Non−Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有する前記対象に投与される医薬組成物。
- がん疾患が、胆道がん、大腸がん、膵臓がん、食道がん、乳がん、肺がん、前立腺がん、膀胱がん、脳腫瘍、胃がん、肝臓がん、皮膚がん、絨毛がん、腎がん、頭頚部がん、舌がん、転移性がん及び浸潤がんからなる群から選択される、請求項1に記載の医薬組成物。
- がん疾患が、胆道がん、大腸がん、膵臓がん、食道がん及び乳がんからなる群から選択される、請求項2に記載の医薬組成物。
- 医薬組成物が、一定期間連続投与に続く一定期間の休薬を1サイクルとして投与される、請求項1〜3のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 医薬組成物が、5日間の連続投与に続く9日間の計14日の休薬を1サイクルとして投与される、請求項4に記載の医薬組成物。
- 医薬組成物が、1〜60mg/m2で対象に投与される、請求項1〜5のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 医薬組成物が、12.5〜60mg/m2で対象に投与される、請求項6に記載の医薬組成物。
- 医薬組成物が、12.5〜25mg/m2で対象に投与される、請求項7に記載の医薬組成物。
- 一定量の医薬組成物が、一定時間かけて静脈内持続投与される、請求項1〜8のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 100mLの医薬組成物が、90分かけて静脈内持続投与される、請求項9に記載の医薬組成物。
- 肝機能障害の発生を低下させる、請求項1〜10のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- O−(5−アミノ−2−フェニルベンズオキサゾール−7−イル)メチル−3,5−ジクロロ−L−チロシンが特定のがん疾患に効果を奏するかどうかを診断するために、対象のNAT2遺伝子において、Non−Rapid型のNAT2遺伝子を有するかどうかを判定するための、検体採取器具、及び試薬を含む遺伝子診断キットであって、
前記試薬は、NAT2SNP(rs1801279(191G>A)、rs1041983(282C>T)、rs1801280(341T>C)、rs1799929(481C>T)、rs1799930(590G>A)、rs1208(803A>G)、およびrs1799931(857G>A)からなる群から選択される少なくとも1以上を検出するプライマーを含む、キット。 - 請求項12に記載の遺伝子診断キットと組み合わせて用いる、請求項1に記載の医薬組成物。
- NAT2遺伝子診断と組み合わせて用いる、請求項1に記載の医薬組成物。
- NAT2阻害剤であるアセトアミノフェンと組み合わせて用いる、請求項1に記載の医薬組成物。
- 対象におけるがんの治療に使用するための、O−(5−アミノ−2−フェニルベンズオキサゾール−7−イル)メチル−3,5−ジクロロ−L−チロシン、または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物であって、下記レジメで投与されることを特徴とする、医薬組成物:
(1) Non−Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有する前記対象を同定して選択し;
(2) 含ホウ素化合物を、当該医薬組成物を投与する前に、Non−Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有すると同定された当該対象に投与し;そして
(3) 当該医薬組成物を、当該対象に投与する。 - 当該医薬組成物を投与後に、更に中性子捕捉療法(BNCT)によりがんを死滅させる、請求項1〜11及び13〜15のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 肝機能障害の発生を低下させる、請求項13〜15のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 対象がヒトである、請求項1〜11及び請求項13〜18のいずれか一項に記載の医薬組成物、または請求項12に記載のキット。
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