JP6829186B2

JP6829186B2 - 海産物ペプチドおよび魚類ヌクレオチド、その組成物および血糖を低下させるためのその使用

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Publication number: JP6829186B2
Application number: JP2017505501A
Authority: JP
Inventors: ビェルゲオドヴァー; リードエイナー
Original assignee: Firmenich SA
Current assignee: Firmenich SA
Priority date: 2014-07-31
Filing date: 2015-07-30
Publication date: 2021-02-10
Anticipated expiration: 2035-07-30
Also published as: US10213473B2; CN106573034A; WO2016016350A1; EP3174548B1; ES2815351T3; JP2017523203A; CN106573034B; US20170258866A1; MX2017000878A; EP3174548A1; RU2713935C1; BR112017001589A2

Description

分野
本明細書では、魚類産物および魚類副産物ならびに健康、食品、栄養および医学的治療におけるそれらの使用が提供される。

背景
食後血糖（または血糖症）は、関連する高インスリン血症および脂肪血症とともに、例えば肥満症、２型糖尿病および心血管疾患といった慢性代謝性疾患の発症に関与している。食後血糖症または食後の血糖変動が、こうした状態の発現または認知および運動のパフォーマンスの障害と関連していることが証明されている。

食前にタンパク質が摂取され、これが炭水化物と一緒に消費されると食後血糖が低下し、この血糖低下作用が乳タンパク質、例えば乳清タンパク質と特に関連することが、データから明らかになっている。乳清タンパク質と乳清タンパク加水分解物とを比較した最近の研究から、乳清タンパク質を食前に消費することで、摂食行動、食後血糖およびインスリンが減少するとともに、曲線下のインスリン面積（ＡＵＣ）に対する累積血糖の比率が用量依存的に減少することが明らかになった。それとは対照的に、乳清タンパク加水分解物は、インスリン依存性機序によってもインスリン非依存性機序によっても血糖制御に寄与しなかった。

また、例えば慢性的な高血糖および２型糖尿病、体組成の管理に関連する脂肪およびタンパク質の同化および異化といったメタボリックシンドロームならびに加齢による自然な筋消耗（サルコペニア）に関連する近年の健康上の問題のいくつかに対処する機能性食品成分としての可能性を海産物タンパク質が有していることが、科学的データから明らかになっている。

さらに、海産物ペプチドと海産物ヌクレオチドとを組み合わせることで、炎症を低減させうるとともに胃腸機能を高めうることが、研究により明らかになっている。

概要
本明細書では、被験体の血液中の食後のグルコース濃度を低下させる方法であって、前記被験体の血液中のグルコース濃度を低下させるのに十分な海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の有効量を、食前または食中に前記被験体に投与することを含む前記方法が提供される。

さらに、被験体の血液中の食後のグルコース濃度を低下させるための海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の使用であって、前記組み合わせ物の有効量を食前または食中に前記被験体に投与することを含む前記使用が提供される。

本明細書ではまた、単離された海産物ペプチドと単離された魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を前記組み合わせ物の全重量の約１０：１の重量比で含有する組成物が提供される。

さらに、被験体の血液中のグルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）レベルを高める方法であって、そのＧＬＰ−１レベルの低下を必要とする前記被験体に海産物ペプチドの有効量を投与することを含み、ここで、前記海産物ペプチドを、海産物ヌクレオチドの実質的な非存在下に投与する前記方法が提供される。特に、海産物ペプチドは食前または食中に被験体に投与される。

本明細書ではさらに、被験体の血液中の食後のグレリンの濃度レベルを低下させる方法であって、そのグレリンレベルを必要とする前記被験体に海産物ペプチドの有効量を投与することを含み、ここで、前記海産物ペプチドを海産物ヌクレオチドの実質的な非存在下に投与する前記方法が提供される。特に、海産物ペプチドは食前または食中に被験体に投与される。

本明細書ではさらに、被験体に満腹感を与える方法であって、それを必要とする前記被験体に、被験体の体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇ〜約２５ｍｇの海産物ペプチドを投与することを含み、ここで、前記海産物ペプチドを海産物ヌクレオチドの実質的な非存在下に提供する前記方法が提供される。

詳細な説明
本明細書中の記述および添付の特許請求の範囲に関して、文脈上明示がない限り、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」には複数の指示対象が含まれる。したがって、例えば「ａｃｏｍｐｏｕｎｄ」への言及は複数の化合物を指す。さらに、特に明記しない限り、「または」の使用は「および／または」を意味する。同様に、「ｃｏｍｐｒｉｓｅ，」、「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ，」、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」、「ｉｎｃｌｕｄｅ，」、「ｉｎｃｌｕｄｅｓ，」および「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ」は互換的であり、限定を意図するものではない。

本明細書ではさらに、被験体の血液中の食後のグルコース濃度を低下させる方法であって、前記被験体の血液中のグルコース濃度を低下させるのに十分な海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の有効量を前記被験体に投与することを含み、ここで、前記組み合わせ物を食前または食中に前記被験体に投与する前記方法を含む一実施形態が提供される。

一実施形態において、被験体は動物であり、より具体的には哺乳動物である。

一実施形態において、被験体はヒトである。

一実施形態において、被験体は、グルコースの減少を必要とする。

一実施形態において、被験体の血液中のＧＬＰ−１レベルを上昇させ、特に、被験体がそのような増加を必要とする場合に前記被験体の血液中のＧＬＰ−１レベルを上昇させる。

一実施形態において、６以上のＨｂＡ１Ｃ（糖化ヘモグロビン）レベルを有する被験体に、特に前記ＨｂＡ１Ｃレベルが６．５超である場合に、より具体的には前記ＨｂＡ１Ｃレベルが７超である場合に、前記ＨｂＡ１Ｃレベルを低下させるのに十分な期間にわたって、海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の有効量を投与することを含む方法が提供される。

一実施形態において、被験体のインスリン抵抗性を低下させるのに十分な期間にわたって、特に前記被験体がそのような低下を必要とする場合に、前記被験体に海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の有効量を投与することを含む方法が提供される。

一実施形態において、本明細書では、被験体におけるグルコースレベルを管理するための方法が提供される。

一実施形態において、糖尿病前症、糖尿病または肥満症からなる群から選択される状態の治療を、そのような治療を必要とする被験体に対して、行うのに十分な量で海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を含有する医薬調剤が提供される。

一実施形態において、被験体における血糖の健康および／または体重の健康の維持に十分な量で海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を含有する栄養補助食品が提供される。

一実施形態において、被験体における血糖の健康の維持に十分な量で海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を含有する食品が提供され、より具体的には被験体における血糖の健康の維持に十分な量で海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を含有する機能性食品が提供される。

一実施形態において、被験体における血中グルコースレベルの維持に十分な量で海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を含有する食品が提供され、より具体的には被験体における血中グルコースレベルの維持に十分な量で海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を含有する機能性食品が提供される。

一実施形態において、被験体におけるグルコースレベルの管理に有効な量で海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を含有する食品を投与することを含む方法が提供され、より具体的には被験体におけるグルコースレベルの管理に有効な量で海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を含有する機能性食品を投与することを含む方法が提供される。

本明細書ではさらに、被験体の血液中の食後のグレリン濃度レベルを低下させる方法であって、そのグレリンレベルを必要とする前記被験体に海産物ペプチドの有効量を投与することを含み、ここで、前記海産物ペプチドを海産物ヌクレオチドの実質的な非存在下に投与する前記方法が提供される。特に、海産物ペプチドは食前または食中に被験体に投与される。

一実施形態において、本明細書では、被験体の血液中の食後のＧＬＰ−１濃度レベルを高める方法であって、それを必要とする前記被験体に、前記被験体の体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇ〜２５ｍｇを投与することを含む前記方法が提供される。特に、海産物ペプチドは食前または食中に被験体に投与される。

一実施形態において、本明細書では、被験体の血液中の食後のグレリン濃度レベルを低下させる方法であって、そのグレリンレベルの低下を必要とする前記被験体に、前記被験体の体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇ〜約２５ｍｇを投与することを含む前記方法が提供される。特に、海産物ペプチドは食前または食中に被験体に投与される。

一実施形態において、本明細書では、被験体に満腹感を与える方法であって、それを必要とする前記被験体に、前記被験体の体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇ〜約２５ｍｇを投与することを含む前記方法が提供される。特に、被験体に満腹感を与えるのに十分な時間にわたって海産物ペプチドが投与される。さらなる一実施形態において、海産物ヌクレオチドの実質的な非存在下に、具体的には１０％未満の海産物ヌクレオチドの存在下に、より具体的には５％未満の海産物ヌクレオチドの存在下に、より具体的には１％未満の海産物ヌクレオチドの存在下に、より具体的には０．１％未満の海産物ヌクレオチドの存在下に、さらにより具体的には海産物ヌクレオチドの非存在下に、被験体において満腹感を与えるための方法が提供される。

一実施形態において、被験体におけるＧＬＰ−１の健康の維持に十分な量の海産物ペプチドを含有する栄養補助食品であって、前記栄養補助食品が海産物ヌクレオチドの実質的な非存在下に提供される前記栄養補助食品が提供される。一実施形態において、被験体におけるグレリンの健康の維持に十分な量の海産物ペプチドを含有する栄養補助食品であって、前記栄養補助食品が海産物ヌクレオチドの実質的な非存在下に提供される前記栄養補助食品が提供される。

一実施形態において、被験体におけるＧＬＰ−１レベルの維持に十分な量の海産物ペプチドを含有する食品が提供され、より具体的には被験体におけるＧＬＰ−１レベルの維持に十分な量の海産物ペプチドを含有する機能性食品が提供され、その際、前記食品、より具体的には機能性食品は、海産物ヌクレオチドの実質的な非存在下に提供される。一実施形態において、被験体における血中グレリンレベルの維持に十分な量の海産物ペプチドを含有する食品が提供され、より具体的には被験体における血中グレリンレベルの維持に十分な量の海産物ペプチドを含有する機能性食品が提供される。

特定の一実施形態において、ＧＬＰ−１レベルおよびＧＬＰ−１の健康および／またはグレリンレベルまたはグレリンの健康の維持には、被験体における空腹、満腹、体重および／または肥満症の管理が含まれる。特に、ＧＬＰ−１レベルおよび／またはグレリンレベルを管理することで、健康な身体が維持される。

一実施形態において、肥満症の治療に十分な量の海産物ペプチドを含有する医薬調剤が提供される。

さらに、本明細書中に記載の海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の使用が提供される。

一実施形態において、海産物ペプチドは、海産物ヌクレオチドと組み合わせて使用される場合に、被験体の体重１ｋｇ当たり約５ｍｇ〜約５０ｍｇの量で提供され、具体的には被験体の体重１ｋｇ当たり約５ｍｇ〜約４０ｍｇの量で提供され、より具体的には被験体の体重１ｋｇ当たり約１０ｍｇ〜約３０ｍｇの量で提供され、さらにより具体的には被験体の体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇの量で提供される。さらなる特定の一実施形態において、海産物ペプチドは、海産物ヌクレオチドと組み合わせて使用される場合に、被験体の体重１ｋｇ当たり約１０ｍｇの量で提供される。さらに他の実施形態において、海産物ペプチドは、海産物ヌクレオチドと組み合わせて提供される場合に、被験体の体重１ｋｇ当たり約２５ｍｇの量で提供される。

一実施形態において、海産物ヌクレオチドは、被験体の体重１ｋｇ当たり約０．８ｍｇ〜約８ｍｇの量で提供され、具体的には被験体の体重１ｋｇ当たり約０．８ｍｇ〜約６ｍｇの量で提供され、より具体的には被験体の体重１ｋｇ当たり約２ｍｇ〜約６ｍｇの量で提供され、さらにより具体的には被験体の体重１ｋｇ当たり約４ｍｇの量で提供される。さらなる特定の一実施形態において、海産物ヌクレオチドは、被験体の体重１ｋｇ当たり約２ｍｇの量で提供される。さらなる一実施形態において、海産物ヌクレオチドは、被験体の体重１ｋｇ当たり約３ｍｇの量で提供される。

一実施形態において、少なくとも、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２００ｍｇ、２２５ｍｇ、２５０ｍｇ、２７５ｍｇ、３００ｍｇ、３２５ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４２５ｍｇ、４５０ｍｇ、４７５ｍｇ、５００ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、２０００ｍｇ、２５００ｍｇおよび３０００ｍｇから選択される量の単位用量で海産物ペプチドを投与することを含む方法が提供される。特定の一実施形態において、単位用量は、海産物ペプチドの重量の約１０％の量の魚類ヌクレオチドを含有し、具体的には海産物ペプチドの重量の約１５％の量の魚類ヌクレオチドを含有し、より具体的には海産物ペプチドの重量の約２０％の量の魚類ヌクレオチドを含有し、さらにより具体的には海産物ペプチドの重量の約２５％の魚類ヌクレオチドを含有する。

一実施形態において、海産物ペプチドは食品の一部であり、より具体的には機能性食品、機能性配合物の一部であり、その際、１食当たりの海産物ペプチドの量は２００ｍｇ〜２５００ｍｇである。

一実施形態において、海産物ペプチドおよび海産物ヌクレオチド、特にＤＮＡナトリウムは、食品１食当たり１：４〜１：１０の比で存在することができ、より具体的には機能性食品１食当たり１：４〜１：１０の比で存在することができる。海産物ヌクレオチドのレベルは、２０ｍｇ〜２５０ｍｇで可変である。一実施形態において、少なくとも、３ｍｇ、５ｍｇ、７．５ｍｇ、１０ｍｇ、１３ｍｇ、１５ｍｇ、１８ｍｇ、２０ｍｇ、２３ｍｇ、２５ｍｇ、２８ｍｇ、３０ｍｇ、３３ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４４ｍｇ、４５ｍｇ、４８ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇおよび３００ｍｇからなる群から選択される量の単位用量で海産物ヌクレオチドを投与することを含む方法が提供される。特定の一実施形態において、単位用量は、海産物ペプチドの重量の約１０％の量の魚類ヌクレオチドを含有し、具体的には海産物ペプチドの重量の約１５％の量の魚類ヌクレオチドを含有し、より具体的には海産物ペプチドの重量の約２０％の量の魚類ヌクレオチドを含有し、さらにより具体的には海産物ペプチドの重量の約２５％の魚類ヌクレオチドを含有する。

さらなる一実施態様において、本明細書では、単離された海産物ペプチドと単離された魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物を、前記組み合わせ物の全重量の約１０：１〜約２：１の重量比（海産物ペプチド：魚類ヌクレオチドの比）で、具体的には約６．４：１〜約４：１の重量比で、より具体的には約４：１の重量比で含有する組成物が提供される。

さらに本明細書では、被験体の血液中の食後のグルコース濃度を低下させるための海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の使用であって、前記被験体の血液中のグルコース濃度を低下させるのに十分な海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の有効量を前記被験体に投与することを含む前記使用が提供される。

海産物ペプチドは、以下のものに限定されるわけではないが、例えば魚類、海藻類、甲殻類および貝類から得ることができる。本明細書では、魚類、海藻類、甲殻類および貝類からなる群から選択される海産物ペプチドが提供される。特定の一実施形態において、海産物ペプチドは魚類ペプチドである。本明細書において、単離された、とは、海産物ペプチドに関しては、総じて海産物源から加工された海産物タンパク加水分解物を意味し、より具体的には魚類から加工された海産物タンパク加水分解物を意味する。本明細書において、単離された、とは、魚類ヌクレオチドに関しては、魚類のＤＮＡまたはその断片と、その生理学的に許容される塩、特にナトリウム塩を意味する。特定の一実施形態において、単離された魚類ヌクレオチドは、魚類白子から抽出されたＤＮＡを含有する。例えば、ノルウェー国特許第２００１４６７０号明細書を参照のこと。特定の一実施形態において、魚類ヌクレオチドは実質的に純粋なＤＮＡまたはその断片を含有しており、特に魚類ヌクレオチドは２％未満のタンパク質を含有する。単離された、とは、本明細書中の実施形態の実施の可能性を、医薬製品、栄養補助食品または食品、より具体的には機能性食品の調製における単離された成分と例えば魚類または魚類産物との組み合わせに限定することを意図するものではない。

一実施形態において、本明細書では、以下：
ａ）海産物原材料と水と酵素とを混合して、海産物材料混合物を形成させること；特に、酵素はエンドペプチダーゼから選択される；
ｂ）前記海産物材料混合物を均質化してホモジネートを形成させること；
ｃ）約４５分間までの期間にわたって前記ホモジネートを加熱して、インキュベート物（ｉｎｃｕｂａｔｅ）を形成させること；
ｄ）前記酵素を不活性化させて、不活性化された酵素を有するインキュベート物を形成させること；
ｅ）任意に、前記インキュベート物から骨を分離して、水溶性タンパク質に富む画分を有するインキュベート物を形成させること；
ｆ）前記インキュベート物からペプチドに富む水溶性画分を分離して、ペプチド加水分解物を得ること；
ｇ）任意に、前記加水分解物をろ過または限外ろ過して微小粒子を除去すること；および
ｈ）任意に、前記加水分解物を噴霧乾燥して自由流動性粉末を形成させること；
を含む海産物ペプチドの製造方法が提供される。

一実施形態において、本明細書における単離された海産物ペプチドとは、該ペプチドの少なくとも７０％、具体的には少なくとも７５％、より具体的には少なくとも８５％が、５０００ダルトン（Ｄａ）未満の分子量を有する海産物ペプチドを意味する。他の実施形態において、ペプチドの９０％が、１００００（２）Ｄａ未満の分子量を有する。一実施形態において、海産物ペプチドは、約９５％の水不含タンパク質含分を含む。特定の一実施形態において、海産物ペプチドは、（プロファイルＩ）に記載されたペプチドの分子量プロファイルを有する：
ペプチド（分子量（Ｄａ））量（乾燥重量基準）
＞２０ＫＤａ０〜５％
１５ＫＤａ〜２０ＫＤａ０〜５％
１０ＫＤａ〜１５ＫＤａ０〜５％
８ＫＤａ〜１０ＫＤａ０〜５％
６ＫＤａ〜８ＫＤａ０〜５％
４ＫＤａ〜６ＫＤａ０〜１０％
２ＫＤａ〜４ＫＤａ０〜１５％
１ＫＤａ〜２ＫＤａ０〜５０％
０．５ＫＤａ〜１ＫＤａ０〜５０％
０．２ＫＤａ〜０．５ＫＤａ０〜７５％
＜０．２ＫＤａ０〜７５％。

ペプチドの合計量は、１００％（乾燥重量基準）である。

一実施形態において、ペプチドの分子量範囲（ｋＤａ）は、それぞれ独立して乾燥重量基準で以下の通りである（プロファイル２）：
ペプチド（分子量）量（乾燥重量基準）
＞２０ＫＤａ約＜０．１％
１５ＫＤａ〜２０ＫＤａ約＜０．１
１０ＫＤａ〜１５ＫＤａ約＜０．１
８ＫＤａ〜１０ＫＤａ約０．１
６ＫＤａ〜８ＫＤａ約０．５％
４ＫＤａ〜６ＫＤａ約１．９
２ＫＤａ〜４ＫＤａ約６．３
１ＫＤａ〜２ＫＤａ約１３．０
０．５ＫＤａ〜１ＫＤａ約１８．５
０．２ＫＤａ〜０．５ＫＤａ約２３．８
＜０．２ＫＤａ約２４．０
遊離ＡＡ０〜２０％、特に約３．５
ＥＡＡ／ＮＥＡＡ比率０．４〜０．９、特に約０．７。

一実施形態において、分岐鎖アミノ酸の合計は、全アミノ酸を基準として約１５．３１％以上である。

一実施形態において、不可欠アミノ酸、すなわち必須アミノ酸は、全アミノ酸の約３６．７０％である。

一実施形態において、海産物ペプチドは、ノルウェー国特許第２００４０４５０号明細書に記載されている。

海産物ペプチドの製造方法は、典型的には、新鮮な魚類の筋組織または新鮮なまま凍結された魚類の筋組織から開始され、この筋組織を刻み、インキュベータ（これに限定されるものではないが、例えば１〜２０ｍ^３容インキュベータ）中で、水と１：１の比で混合する。この混合物を好ましくは５０〜８０ｒｐｍで撹拌しながら、温度を５０〜５５℃に上げる。この混合物に、プロテアーゼとペプチダーゼとの混合物からなる酵素カクテルを添加して（例えば、デンマーク国ノボザイムズ社によるプロタメックス（Ｐｒｏｔａｍｅｘ）（登録商標））温度を約５０〜５５℃にし、形成されたホモジネートを、ｐＨ６〜８で、好ましくはｐＨ６〜７で５０〜５５℃で４５分間インキュベートする。次いで、温度を８５〜９０℃に上げ、その温度で約１０〜１５分間保持して酵素を不活性化させる。このインキュベート物をシーブに通して骨およびデブリを除去し、次に遠心分離を用いて可溶性画分と難消化性／不溶性の材料とを分離し、その後、ペプチドに富む可溶性画分を脱水して濃縮物にし、この濃縮物を噴霧乾燥に使用して粉末にする。

上記のように作製した海産物ペプチドのアミノ酸プロファイルを、表１に示す。

上記の通りに作製した海産物ペプチドの化学組成を、表２に示す。

ヒ素は有機結合体として存在し、非毒性である。

上記の通りに作製した海産物ペプチドの微生物学的プロファイルを、表３に示す。

上記通りに作製した海産物ペプチドの海産物ペプチド加水分解物の分子量分布を、表４に示す。

記載の結果を得るための算出に、以下のものを用いた：
アミノ酸の平均Ｍ_ｗ＝１３２
ペプチドにおいて存在する場合のアミノ酸の平均Ｍ_ｗ＝１１３．５
存在する最小の可能なジペプチド＝グリシル−グリシン＝Ｍ_ｗ１３２
存在する最大の可能なジペプチド＝トリプチル−トリプトファン＝Ｍ_ｗ３９０。

さらに他の一実施形態において、本明細書では、海産物ペプチドおよび魚類ヌクレオチドの有効量を有する単位用量が提供される。

いくつかの実施形態において、海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドは、単一の剤形、すなわち１つの剤形か、または２つ以上の剤形で投与される。本明細書で使用される場合に、「剤形」とは、投与経路に関する物理的形態を指す。「剤形」という用語は、従来使用されているまたは医学的に許容されるあらゆる投与形態を指すことができ、例えば経口投与形態、静脈内投与形態または腹腔内投与形態を指すことができる。いくつかの実施形態において、海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドは、単回投与で、すなわち１単位用量で投与される。本明細書で使用される場合に、「単位用量」とは、単回投与で被験体に投与される海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドの量を指し、例えば１つのゲルカプセル剤で被験体に投与される海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドの量を指す。「単位用量」という用語はさらに、適切な固形物の単一の単位の単一の剤形、液体の単一の単位の単一の剤形、シロップの単一の単位の単一の剤形、飲料の単一の単位の単一の剤形、または食品、より具体的には機能性食品の単一の単位の単一の剤形、以下のものに限定されるわけではないが例えば医薬品、栄養補助食品および食品、より具体的には機能性食品の送達に用いられる品目の単一の単位の単一の剤形を指すこともでき、その際、海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドの全用量は短い期間内で投与され、例えば、投与の最初の部分から約１分以内、約２分以内、約３分以内、約５以内、約１０分以内、約２０分以内または約３０分以内で投与される。したがって、例えば投与形態が食品、より具体的には機能性食品である場合には、これは、食品１食当たり２００〜２０００ｍｇを含有する、より具体的には機能性食品１食当たり２００〜２０００ｍｇを含有する、いかなる食品製品の一部であってもよく；その際、１食分は、食品の種類に基づいて、より具体的には機能性食品の種類に基づいて、製造業者／調整者によって定められ；例えば、これは食品の上に振りかけられて、１食当たり上記のレベルで食事と共に食されることができる。

一実施形態において、単位用量は、例えば錠剤、カプセル剤、カシェ剤、ペレット剤、丸剤、ゼラチンカプセル剤、散剤および顆粒剤といった単位剤形を介して送達される。特定の一実施形態において、本明細書では、海産物ペプチド約５００ｍｇと海産物ヌクレオチド約５０ｍｇとを含有するカプセル剤およびまたは錠剤が提供される。

一実施形態において、約１５００ｍｇの海産物ペプチド、より具体的には約２０００ｍｇの海産物ペプチドが、飲料の単一の投与量単位で提供される。一実施形態において、約１５０ｍｇの海産物ヌクレオチド、より具体的には約２００ｍｇの海産物ヌクレオチドが、飲料の単一の投与量単位で提供される。

いくつかの実施形態において、治療すべき被験体に、１日当たり少なくとも１単位用量を投与することができる。いくつかの実施形態において、剤形は、１日１回の適用で摂取されてもよいし、１日複数回の適用で摂取されてもよい。例えば、１日に４つのカプセル剤が摂取され、各カプセル剤が海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドを約５００ｍｇ含有する場合には、４つすべてのカプセル剤が１日１回で摂取されることもできるし、２つのカプセル剤が１日２回で摂取されることもでき、また１つのカプセル剤が６時間おきに摂取されることもできる。海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドの様々な量を１単位用量とすることができる。いくつかの実施形態において、単位用量には、約２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２００ｍｇ、２２５ｍｇ、２５０ｍｇ、２７５ｍｇ、３００ｍｇ、３２５ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４２５ｍｇ、４５０ｍｇ、４７５ｍｇ、５００ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、２０００ｍｇ、２５００ｍｇおよび３０００ｍｇが含まれる。

本明細書における組成物の「投与する」または「投与」という用語は、例えば経口的または非経口的に（例えば、経粘膜で、静脈内に、筋肉内に、皮下に、直腸に、膣内にまたは吸入を介して）該組成物を被験体に適用することを指す。投与には、本明細書に記載の組成物を医療専門家によって被験体に処方する行為も含まれるであろう。投与には、組成物のラベリング行為、すなわち、治療のために本明細書で提供される様式で組成物を投与するように被験体に指示することも含まれうる。例えば、投与は、非経口、皮下、静脈内（ボーラスまたは注入）、筋肉内または腹腔内の経路によるものであることができる。これらの投与様式のための剤形としては従来の形態を挙げることができ、液剤としての、または懸濁剤としての、注射前に液体中に溶解もしくは懸濁させるのに適した固体形態としての、または乳剤としての、いずれのものも挙げることができる。

特定の一実施形態において、投与経路は経口投与である。特定の一実施形態において、海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドは、栄養補給剤、食品、医薬製剤または飲料の形態で、特に食品、飲料または栄養補給剤の形態で、より具体的には食品および飲料の形態で、より具体的には食品の形態で、個体に投与される。食品の具体的な種類の一つが、機能性食品または医療食品（例えば、消費されうるかまたは医師の監督下に外部から投与されうる製剤として存在する食品であって、認められた科学的な原理に基づく栄養に関する特有の要求が医学的評価によって確立されている疾患または状態の特定の食事管理に向けたもの）である。

栄養補助食品は栄養補給剤と互換的であり、これには食品調製物が含まれうる。

海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドは、製剤化されて剤形にされることができる。これらの剤形としては、以下のものに限定されるわけではないが、錠剤、カプセル剤、カシェ剤、ペレット剤、丸剤、ゼラチンカプセル剤、散剤および顆粒剤が挙げられうる。非経口の剤形としては、以下のものに限定されるわけではないが、本発明で教示される海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドの有効量を含有する液剤、懸濁剤、乳剤、被覆粒剤および乾燥散剤が挙げられる。いくつかの実施形態において、こうした剤形を、食品物質に加えるかまたは食品物質に混合することができる。被覆粒剤については当技術分野において様々な物質が知られており、例えばセルロース誘導体、例えば微結晶性セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース；ポリアルキレングリコール誘導体、例えばポリエチレングリコール；タルク、デンプン、メタクリレート等が挙げられる。いくつかの実施形態において、剤形はカプセル剤であり、その際、該カプセル剤に、海産物ペプチドおよび／または魚類ヌクレオチドを含有する溶液、懸濁液またはエマルションが充填される。また、活性成分が、製薬学的に許容される添加剤と共にそのような製剤中に含まれうることも当技術分野で知られており、これらの添加剤としては、例えば希釈剤、充填剤、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、界面活性剤、疎水性ビヒクル、水溶性ビヒクル、乳化剤、緩衝剤、湿潤剤、保湿剤、可溶化剤、防腐剤、香味剤、味覚マスキング剤、甘味剤等が挙げられる。適切な添加剤としては、例えば植物油（例えば、トウモロコシ油、大豆油、ベニバナ油、ヒマワリ油またはキャノーラ油）を挙げることができる。いくつかの実施形態において、防腐剤は酸化防止剤であることができ、例えば、亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、メタ重亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、チオ硫酸塩、チオグリセロール、チオソルビトール、塩酸システイン、α−トコフェロールおよびそれらの組み合わせ物であることができる。

以下に示す実施例は非限定な例であって、例示のみを目的とするものである。

実施例
実施例１
下記の４つの異なる食物を用いて、１２名の健康な男性被験者を含めて二重盲検試験を行った。

１．食物Ａ（対照食物）カゼイン（３０％）＋プラス炭水化物（５５％マルトデキストリン）＋脂肪（１１％中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ））；すなわち、食物１００ｇ当たり３０ｇのカゼイン由来タンパク質。

２．食物Ｂ：対照食物において、粗タンパク質（Ｎ×６．２５）に関してカゼインのうち１０％を海産物ペプチド（海産物タンパク加水分解物）に置き換えたもの；すなわち、この食物中のタンパク質分は、海産物ペプチド由来タンパク質３．２％およびカゼイン由来タンパク質２６．７％を構成要素とする。

３．食物Ｃ：対照食物において、粗タンパク質（Ｎ×６．２５）に関してカゼインのうち１０％を乳清ペプチド（乳清ペプチド加水分解物）に置き換えたもの；すなわち、乳清ペプチド由来タンパク質３．２ｇおよびカゼイン由来タンパク質２６．８ｇ。

４．食物Ｄ：対照食物において、粗タンパク質（Ｎ×６．２５）に関してカゼインのうち１０％を海産物ペプチド（海産物タンパク加水分解物）に置き換え（すなわち、この食物中のタンパク質分は、海産物ペプチド由来タンパク質３．２％（食物１００ｇ当たり３．２ｇ）およびカゼイン由来タンパク質２６．７％を構成要素とする）、さらに海産物ＤＮＡ（魚類白子粉末）由来ヌクレオチド０．５％（食物１００ｇ当たり０．５ｇ）を補給したもの。少量のＤＮＡ添加により、食物の窒素の調整を行わなかった。

被験者に、試験食物の摂取後にベッドで休むよう指示し；遅くとも食物摂取の５分前に血液サンプルを採取し、さらに試験食物の摂取後に２０分おきに１２０分間にわたって血液サンプルを採取した。これらの食物は、５分以内に摂取された。

被験者は、理想的にランダムな順序ですべての食物を摂取した。食物Ｂ、ＣおよびＤを、１用量につき体重１ｋｇ当たり２０ｍｇのペプチドに相当する量で与え、エネルギーおよびタンパク質に関して同等に摂取した対照食物Ａと比較した。

すべての血液サンプルを、血糖およびインスリンに関して分析した。−５分（すなわち０時間）、６０分および１００分に収集したサンプルを、ホルモンＧＬＰ−１およびグレリンに関して分析した。ＧＬＰ−１分析用のサンプルを、安定剤としてのＧＬＰ−１プロテアーゼ阻害剤の入った試験管中に収集した。

これらの食物は、流動性の食事として摂取された。カゼイン、トウモロコシ由来マルトデキストリン（ＤＥ２０〜２１）、植物性脂肪（ＭＣＴ脂肪粉末）を構成要素とする粉末に、
（１）大西洋タラからの魚切り身で作製された魚類タンパク加水分解物、
（２）乳清タンパク加水分解物、または
（３）魚類タンパク加水分解物＋大西洋タラ（ガドゥス・モルア（Ｇａｄｕｓｍｏｒｈｕａ））の白子から抽出されたＤＮＡナトリウムの形態の海産物ヌクレオチド
のいずれかを補給したものを水に溶解させて、摂取前にクリーム状の飲料を形成させた。混合比：粉末１ｇ＋冷水４ｍｌ。

タンパク質、脂肪および炭水化物の食物の分布は、それぞれ３０％、１１％および５５％であり；エネルギー含量は４．４Ｋｃａｌ／ｇ乾物であった。食物間のいかなる味の相違をもなくすため、これらの食物に自然なイチゴの風味を付与した。

すべての食物を、
・体重１ｋｇ当たり２０ｍｇのペプチドに相当する量
で与え、したがって所与の量を被験者の体重に合わせた。

１日目
被験者は絶食し、この来院の前に朝食をとることは許可されず、午前中に来院した。バイタルサインおよび摂取前の血液サンプルを採取した。食物の摂取後に、以下の時点で血液サンプルを採取した：２０分、４０分、６０分、８０分、１００分および１２０分。

３日目
被験者は絶食し、この来院の前に朝食をとらないよう指示されていた。摂取前の血液サンプルを採取した。食物の摂取後に、以下の時点で血液を採取した：２０分、４０分、６０分、８０分、１００分および１２０分。

５日目
被験者は絶食し、この来院の前に朝食をとらないよう指示されていた。摂取前の血液サンプルを採取した。食物の摂取が完了した後に、以下の時点で血液を採取する：２０分、４０分、６０分、８０分、１００分および１２０分。

７日目
被験者は絶食し、この来院の前に朝食をとらないよう指示されていた。摂取前の血液サンプルを採取した。食物の摂取後に、以下の時点で血液を採取した：２０分、４０分、６０分、８０分、１００分および１２０分。

結果
１２名の参加者全員の平均応答を取得し、かつ、ベースライン（図中のｙ軸上の０）を上回る血液１Ｌ当たりのグルコースｍｍｏｌ数に関する陽性応答の和を、負の値（すなわちベースラインを下回る値。これはインスリンのリバウンド効果を表す）を含めずに用いることによって曲線下面積を算出し、以下の結果を得た：
１．対照食物：５．２ｍｍｏｌ／Ｌ
２．乳清ペプチド食物：５．２ｍｍｏｌ／Ｌ
３．海産物ペプチド食物：４．６ｍｍｏｌ／Ｌ
４．海産物ペプチド＋海産物ヌクレオチド食物：４．２ｍｍｏｌ／Ｌ。

食物間の比較：
１．対照食物と乳清ペプチド食物との比較：相違なし
２．対照食物と海産物ペプチド食物との比較：海産物ペプチドにより、食後血糖応答が１３％低下
３．乳清ペプチド食物と海産物ペプチド食物との比較：海産物ペプチドにより、食後血糖応答が１３％低下
４．対照食物と海産物ペプチド＋海産物ヌクレオチド食物との比較：海産物ペプチド＋海産物ヌクレオチドにより、食後血糖応答が１９％低下。

さらに、以下のことが判明した：
海産物ペプチドによって、対照食物および乳清ペプチド食物と比較して、食後血糖ピークがそれぞれ０．７ｍｍｏｌ／Ｌおよび０．８ｍｍｏｌ／Ｌ低下した。これらは、それぞれ３３％および３５％に相当する。

ＧＬＰおよびグレリン
食物の摂取後の４つの異なる時間に、グレリン濃度を測定した。食後６０分でのグレリンの負のピークを仮定して、分析により以下のことが判明した：
１．対照食物：−１４．３ｎｇ／Ｌ
２．乳清ペプチド（ＷＰＨ）食物：−２１．２ｎｇ／Ｌ
３．海産物ペプチド食物：−２６．６ｎｇ／Ｌ
４．海産物ペプチド＋海産物ヌクレオチド食物：−３．５ｎｇ／Ｌ。

グレリン濃度は空腹感と逆相関の関係にあり、したがって血中グレリン濃度が低いほど満腹感が強くなる。データは、海産物ペプチドがグレリンの分泌に強い影響を与えるとともに、満腹感にも影響を与えるものと考えられることを示している。海産物ペプチド単独についての結果は、乳清ペプチドよりも高いことが示された。海産物ペプチドと海産物ヌクレオチドとの組み合わせ物は、応答を示さなかった。

試験食物の摂取後の４つの異なる時間に、ＧＬＰ−１濃度を測定した。食後６０分でのＧＬＰ−１のピークを仮定して、分析により以下のことが判明した：
１．対照食物：０．７６ｎｇ／ｉ
２．乳清ペプチド（ＷＰＨ）食物：０．２８ｎｇ／Ｌ
３．海産物ペプチド食物：０．９９ｎｇ／Ｌ
４．海産物ペプチド＋海産物ヌクレオチド食物：０．６１ｎｇ／Ｌ。

ＧＬＰ−１は体内で様々な機能を有しており、とりわけ空腹および満腹の管理に関与している。血液のＧＬＰ−１濃度が増加すると、空腹感が低減しかつ満腹感が持続する。

データから、海産物ペプチドの補給がＧＬＰ−１の分泌に影響を与えるとともに、海産物ペプチドの補給がＷＰＨの補給よりも優れていることが判明した。ＧＬＰ分泌に対する海産物ペプチドの比較的強い応答が満腹感に影響を及ぼすものと考えられる。海産物ペプチドと海産物ヌクレオチドとの組み合わせ物の補給は、ＧＬＰ−１分泌に影響を及ぼさなかった。

Claims

被験体の血液中の食後のグルコース濃度を低下させるための、海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物であって、
前記海産物ペプチドと前記魚類ヌクレオチドを前記組み合わせ物の全重量の２：１〜１０：１の重量比で含有し、
前記海産物ペプチドがタラから加工された魚類タンパク加水分解物であり、前記魚類ヌクレオチドがタラ白子から抽出されたＤＮＡナトリウム形態であり、かつ、
前記組み合わせ物を、食前または食中に前記被験体に投与する、
前記組み合わせ物。
前記被験体がヒトである、請求項１に記載の組み合わせ物。
前記被験体がそのような低下を必要としている、請求項１または２に記載の組み合わせ物。
前記海産物ペプチドを、前記被験体の体重１ｋｇ当たり５ｍｇ〜５０ｍｇの量で提供する、請求項１から３までのいずれか１項に記載の組み合わせ物。
前記海産物ペプチドを、前記被験体の体重１ｋｇ当たり２０ｍｇの量で提供する、請求項４に記載の組み合わせ物。
前記被験体のインスリン抵抗性を低下させるのに十分な期間にわたって、前記被験体に投与する、請求項１から５までのいずれか１項に記載の組み合わせ物。
６以上のＨｂＡ１Ｃレベルを有する被験体に、前記ＨｂＡ１Ｃレベルを低下させるための期間にわたって投与する、請求項１から５までのいずれか１項に記載の組み合わせ物。
前記ＨｂＡ１Ｃレベルが６．５超である、請求項７に記載の組み合わせ物。
前記ＨｂＡ１Ｃレベルが７超である、請求項８に記載の組み合わせ物。
前記被験体におけるグルコースレベルを管理するための食品として提供される、請求項１から９までのいずれか１項に記載の組み合わせ物。
糖尿病前症または糖尿病からなる群から選択される状態を治療するための医薬調剤として提供される、請求項１から９までのいずれか１項に記載の組み合わせ物。
血糖の健康を維持するための栄養補助食品において提供する、請求項１から９までのいずれか１項に記載の組み合わせ物。
前記魚類ヌクレオチドを、前記海産物ペプチドの重量の２５％の量で提供する、請求項１から１２までのいずれか１項に記載の組み合わせ物。
請求項１から９までのいずれか１項に記載の組み合わせ物を含む、被験体の血液中の食後のグルコース濃度を低下させるための組成物。
請求項１から９までのいずれか１項に記載の組み合わせ物を含む、被験体におけるグルコースレベルを管理するための食品。
請求項１から９までのいずれか１項に記載の組み合わせ物を含む、糖尿病前症または糖尿病からなる群から選択される状態を治療するための医薬調剤。
請求項１から９までのいずれか１項に記載の組み合わせ物を含む、血糖の健康を維持するための栄養補助食品。
被験体の血液中の食後のグルコース濃度を低下させるための、海産物ペプチドと魚類ヌクレオチドとの組み合わせ物の製造方法であって、
前記海産物ペプチドと前記魚類ヌクレオチドを、前記組み合わせ物の全重量の２：１〜１０：１の重量比で混合するステップを含み、
前記海産物ペプチドがタラから加工された魚類タンパク加水分解物であり、
前記魚類ヌクレオチドがタラ白子から抽出されたＤＮＡナトリウム形態であり、かつ
前記組み合わせ物が、食前または食中に前記被験体に投与されるものである、
前記組み合わせ物の製造方法。
前記海産物ペプチドを、前記被験体の体重１ｋｇ当たり５ｍｇ〜５０ｍｇの量で提供する、請求項１８に記載の組み合わせ物の製造方法。
前記魚類ヌクレオチドを、前記海産物ペプチドの重量の２５％の量で提供する、請求項１８または１９に記載の組み合わせ物の製造方法。