JP6810542B2 - 飲食品組成物 - Google Patents
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Description
そして、骨粗鬆症の予防に関する技術として、非特許文献1および2においては、大豆イソフラボンの骨代謝調節作用について検討されている。
前記レジスタントスターチ高含有澱粉が、アミロース含有量が40%以上であるアミロース高含有澱粉の酸処理物であり、
前記酸処理の反応条件が、以下の式(1)および(2)を満たす、Interleukin 7 Receptor(IL−7R)遺伝子発現抑制用飲食品組成物が提供される。
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が65%以上
(b)分子量ピークが8×103以上1.5×104以下
(c)分子量分散度が3.0以上5.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが1J/g以上8J/g以下
(5.54×(4.20) (T-40)/10 ) (-0.879) ≦C<−0.000016×T 3 +0.00068×T 2 −0.028×T+4.3 (1)
(ただし、上記式(1)において、T:反応温度(℃)、C:無機酸水溶液中の無機酸の規定度(N)である。)
13.0×C (-1.14) ×(1/4.2) (T-40)/10 ≦t≦180×C (-1.58) ×(1/4.2) (T-40)/10 (2)
(ただし、上記式(2)において、T:反応温度(℃)、C:無機酸水溶液中の無機酸の規定度(N)、t:反応時間(時間)である。)
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が60%以上
(b)分子量ピークが6×103以上4×104以下
(c)分子量分散度が1.5以上6.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが10J/g以下
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が60%以上
(b)分子量ピークが6×103以上4×104以下
(c)分子量分散度が1.5以上6.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが10J/g以下
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が60%以上
(b)分子量ピークが6×103以上4×104以下
(c)分子量分散度が1.5以上6.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが10J/g以下
たとえば、本発明によれば、前記条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉のIL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物、骨髄の炎症抑制用飲食品組成物、骨密度低下抑制用飲食品組成物、または骨代謝バランス改善用飲食品組成物への使用が提供される。
また、本発明によれば、前記条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を含む、IL−7R遺伝子発現抑制剤が提供される。
本発明によれば、前記条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を含む、骨髄の炎症抑制剤が提供される。
本発明によれば、前記条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を含む、骨密度低下抑制剤が提供される。
本発明によれば、前記条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を含む、骨代謝バランス改善剤が提供される。
また、本発明によれば、前記IL−7R遺伝子発現抑制剤、前記骨髄の炎症抑制剤、前記骨密度低下抑制剤、または前記骨代謝バランス改善剤の飲食品、飼料または医薬品への使用が提供される。
本実施形態において、レジスタントスターチ高含有澱粉は、以下の条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たす。
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が60%以上
(b)分子量ピークが6×103以上4×104以下
(c)分子量分散度が1.5以上6.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが10J/g以下
レジスタントスターチ含有量をより一層高める観点からは、本実施形態におけるレジスタントスターチ高含有澱粉のAOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量は60%以上であり、好ましくは62%以上、さらに好ましくは65%以上である。なお、本実施形態におけるレジスタントスターチ高含有澱粉のレジスタントスターチ含有量の上限に制限はなく、100%以下であり、たとえば90%以下であってもよい。
ここで、レジスタントスターチ含有量は、試料乾燥重量当たりのレジスタントスターチ重量(w/w)として定義される。
分子量ピークを6×103以上4×104以下とすることにより、レジスタントスターチ含有量が60%を上回る澱粉が安定的に得られる。
より安定的にレジスタントスターチ含有量の高い澱粉を得る観点からは、分子量ピークがたとえば6.5×103以上、好ましくは8×103以上であってもよい。また、さらに確実にレジスタントスターチ含有量の高い澱粉を得る観点からは、分子量ピークがたとえば3.6×104以下、好ましくは2.5×104以下、より好ましくは1.5×104以下であってもよい。
条件(c)における分子量分散度とは、数平均分子量Mnに対する重量平均分子量Mwの比Mw/Mnをいう。上記条件(c)を満たす構成とすることにより、レジスタントスターチ含有量を安定的に高めることができる。また、分子量が低い画分または分子量が高い画分が過剰に多くなることを抑制することができるため、飲食品組成物が粉っぽくなりすぎたり食感が硬くなりすぎることを抑制できる。
分子量分散度の下限は、飲食品組成物を摂取する際の粉っぽさ等の食感の好ましさを向上させる観点からは、1.5以上、好ましくは2.0以上、より好ましくは3.0以上とする。
一方、分子量分散度の上限は、レジスタントスターチ含有量をより一層安定的に高める観点からは、6.0以下、好ましくは5.5以下、さらに好ましくは5.0以下である。
よって、本実施形態における分子量分散度は、レジスタントスターチ含有量と食感とのバランスの観点からは、1.5以上6.0以下、好ましくは2.0以上5.5以下、より好ましくは3.0以上5.0以下である。
なお、澱粉の分子量は、たとえば、ゲル濾過クロマトグラフィー(GPC)(標準物質:プルラン換算)で測定することができる。
本実施形態においては、条件(d)を満たすため、元々のレジスタントスターチ含有量が高いことに加えて、加熱処理をおこなった後もレジスタントスターチを高含有量で含むことができる。
具体的には、200℃、20分間加熱後のレジスタントスターチ含有量を、たとえば55%以上、好ましくは60%以上、より好ましくは63%以上とすることも可能となる。
なお、本明細書においてとくに記述がない場合、各用語の定義は以下の通りである。また、本明細書において、レジスタントスターチをRSと記載する場合もある。
スラリー濃度:澱粉スラリー重量に対する澱粉乾重量の割合(w/w)。
酸規定度:澱粉由来の水分も含めた、反応液中の水に対する酸の規定度。ここで、水分とは、澱粉湿重量に対する水分の割合(w/w)である。
レジスタントスターチ含有量:試料乾重量に対するレジスタントスターチの重量の割合(w/w)。
レジスタントスターチ高含有澱粉:レジスタントスターチ含有量60%以上の澱粉。
アミロース高含有澱粉の酸処理物は、たとえば、アミロース含有量が40%以上であるアミロース高含有澱粉を原料とし、該原料を無機酸水溶液中で酸処理することにより得られる。
(5.54×(4.20)(T-40)/10)(-0.879)≦C<−0.000016×T3+0.00068×T2−0.028×T+4.3 (1)
(ただし、上記式(1)において、T:反応温度(℃)、C:無機酸水溶液中の無機酸の規定度(N)である。)
上記式(1)を満たす条件とすることにより、レジスタントスターチ含有量を効率よく安定的に高めることができる。
13.0×C(-1.14)×(1/4.2)(T-40)/10≦t≦180×C(-1.58)×(1/4.2)(T-40)/10 (2)
(ただし、上記式(2)において、T:反応温度(℃)、C:無機酸水溶液中の無機酸の規定度(N)、t:反応時間(時間)である。)
また、条件(a)〜(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉は、レジスタントスターチ含有量が高く、レジスタントスターチの加熱耐性に優れているとともに、IL−7R遺伝子の発現抑制ができるため、骨髄の炎症、または、骨密度の低下を抑制し、また、骨代謝バランスを改善することができる。これは、IL−7はエストロゲン欠乏による骨量の減少を引き起こす主要な炎症性サイトカインであり、その受容体であるIL−7R遺伝子の発現抑制をすることは、IL−7の作用を弱め、骨髄の炎症、または、骨密度の低下を抑制し、また、骨代謝バランスを改善することができるためである。
また、条件(a)〜(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉は、飲食品組成物中の成分として好ましく用いられる。
以下、飲食品組成物の具体例として、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物、骨髄の炎症抑制用飲食品組成物、骨密度の低下抑制用飲食品組成物、および骨代謝バランス改善用飲食品組成物について説明する。
本実施形態において、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物は、前述した条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含む。このため、本実施形態におけるIL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物は、骨髄の炎症関連遺伝子であるIL−7R遺伝子の発現を抑制することができる。
コーンスターチ、ハイアミロースコーンスターチ、タピオカ澱粉、馬鈴薯澱粉、小麦澱粉、米澱粉等の上記レジスタントスターチ高含有澱粉以外の澱粉、またはこれらにアセチル化、ヒドロキシプロピル化、リン酸架橋等の加工を施した加工澱粉;
小麦粉、大麦粉、大豆粉、米粉等の穀粉;
不溶性食物繊維、水溶性食物繊維、難消化性オリゴ糖等の食物繊維;
ペクチン、グァーガム、セルロース等の上記以外の多糖類;
ブドウ糖、果糖、シュークロース、乳糖、トレハロース等の単糖またはオリゴ糖;
アスパルテーム、アセスルファムカリウム、ステビア等の上記単糖およびオリゴ糖以外の甘味料;
カゼイン、アルブミン、大豆タンパク質等のタンパク質またはペプチド;
コーン油、オリーブ油、ココナッツ油、亜麻仁油、えごま油、ごま油、パーム油等の食用油脂、バター、ショートニング、マーガリン等の加工油脂等の油脂;
ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛等のミネラル;
ビタミンA、ビタミンB群、ビタミンC、ビタミンD群、ビタミンE、ビタミンK群等のビタミン;
シスチン、グルタミン酸またはその塩、グリシン等のアミノ酸;
コリン酒石酸水素塩等のコリン塩;
t−ブチルヒドロキノン、ローズマリー抽出物等の酸化防止剤;
クエン酸、リンゴ酸等の有機酸、無機酸、無機塩等のpH調整剤;
レシチン、グリセリン脂肪酸エステル等の界面活性剤;
ダイゼイン、エクォール等のイソフラボン類;
香料;および
水等が挙げられる。
また、入手の容易さの観点からは、不溶性食物繊維がセルロースおよびその誘導体から選ばれる1種以上または2種であることが好ましく、より好ましくはセルロースである。
IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物中の不溶性食物繊維の含有量は、飲食品組成物の形態に応じて設定してよく、また、IL−7R遺伝子の発現抑制効果が充分に得られる範囲で適宜設定してよいが、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物全体に対してたとえば0.1質量%以上であり、好ましくは1質量%以上、さらに好ましくは3質量%以上であり、また、たとえば30質量%以下、好ましくは20質量%以下である。
また、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物の製造過程において、加熱、乾燥、混合、水や油脂等への分散等の所定の調理工程をおこなうこともできる。
分散液、懸濁液等の液状;
ゼリー状;または
ペースト状等の組成物とすることができる。
IL−7R遺伝子の発現抑制効果を高める観点から、成人については、体重1kgあたり、1日あたりの有効成分として、たとえば50mg以上、好ましくは100mg以上とすることができる。
また、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物の摂取量の上限に制限はないが、成人については、体重1kgあたり、1日あたりの有効成分として、たとえば5g以下とすることができる。
また、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物を摂取する者は、年齢や性別に制限はないが、エストロゲン欠乏による骨粗鬆症を引き起こしやすい者が好ましく、特に閉経後の女性が好ましい。
本実施形態において、骨髄の炎症抑制用飲食品組成物は、前述した条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含む。
得られる骨髄の炎症抑制用飲食品組成物の形態に制限はなく、たとえば、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物の形態として前述した形態とすることができる。
また、骨髄の炎症抑制用飲食品組成物を摂取する者は、年齢や性別に制限はないが、エストロゲン欠乏による骨粗鬆症を引き起こしやすい者が好ましく、特に閉経後の女性が好ましい。
本実施形態において、骨密度の低下抑制用飲食品組成物は、前述した条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含む。また、骨密度の低下抑制用飲食品組成物は、たとえば、大腿骨の骨密度低下抑制用に優れる。
骨密度の低下抑制用飲食品組成物の形態に制限はなく、たとえば、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物の形態として前述した形態とすることができる。
また、骨密度の低下抑制用飲食品組成物を摂取する者は、年齢や性別に制限はないが、エストロゲン欠乏による骨粗鬆症を引き起こしやすい者が好ましく、特に閉経後の女性が好ましい。
本実施形態において、骨代謝バランス改善用飲食品組成物は、前述した条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含む。
骨代謝バランス改善用飲食品組成物の形態に制限はなく、たとえば、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物の形態として前述した形態とすることができる。
また、骨代謝バランス改善用飲食品組成物を摂取する者は、年齢や性別に制限はないが、エストロゲン欠乏による骨粗鬆症を引き起こしやすい者が好ましく、特に閉経後の女性が好ましい。
本実施形態において、IL−7R遺伝子発現を抑制する飲食品組成物、骨髄の炎症を抑制できる飲食品組成物、骨密度の低下を抑制することができる飲食品組成物、または、骨代謝バランスを改善する飲食品組成物における飲食品の具体例として、
ヨーグルト、チーズ、粉ミルク等の乳製品;
粉末スープ、レトルトスープ等のスープ類;
プリン、クッキー、ビスケット、クラッカー、ケーキ、チョコレート、キャンディー、シリアルバー、グラノーラ、コーンパフ等の洋菓子、和菓子等の菓子;
パン、ピザ、麺類;
ベーコン、ハム、ソーセージ、ハンバーグ等の畜肉加工品;
かまぼこ、ちくわ、魚肉ソーセージ等の魚介加工品;
味噌、塩麹等の調味料;
果汁飲料、乳飲料、スポーツ飲料等の清涼飲料、茶、アルコール飲料、スムージー等の飲料;
サプリメント等が挙げられる。
また、本実施形態において、飲食品の摂取者はヒト以外であってもよく、飲食品が飼料であってもよい。
また、本実施形態によれば、たとえば、骨粗鬆症を予防または改善する効果を得ることも可能となる。
以下、参考形態の例を付記する。
1. 以下の条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含む、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物。
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が60%以上
(b)分子量ピークが6×10 3 以上4×10 4 以下
(c)分子量分散度が1.5以上6.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが10J/g以下
2. 前記レジスタントスターチ高含有澱粉が、アミロース含有量が40%以上であるアミロース高含有澱粉の酸処理物である、1.記載のIL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物。
3. 当該IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物中の前記レジスタントスターチ高含有澱粉の含有量が、当該IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物全体に対して0.1質量%以上100質量%未満である、1.または2.に記載のIL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物。
4. 以下の条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含む、骨髄の炎症抑制用飲食品組成物。
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が60%以上
(b)分子量ピークが6×10 3 以上4×10 4 以下
(c)分子量分散度が1.5以上6.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが10J/g以下
5. 前記レジスタントスターチ高含有澱粉が、アミロース含有量が40%以上であるアミロース高含有澱粉の酸処理物である、4.に記載の骨髄の炎症抑制用飲食品組成物。
6. 当該骨髄の炎症抑制用飲食品組成物中の前記レジスタントスターチ高含有澱粉の含有量が、当該骨髄の炎症抑制用飲食品組成物全体に対して0.1質量%以上100質量%未満である、4.または5.に記載の骨髄の炎症抑制用飲食品組成物。
7. 以下の条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含む、骨密度の低下抑制用飲食品組成物。
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が60%以上
(b)分子量ピークが6×10 3 以上4×10 4 以下
(c)分子量分散度が1.5以上6.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが10J/g以下
8. 前記レジスタントスターチ高含有澱粉が、アミロース含有量が40%以上であるアミロース高含有澱粉の酸処理物である、7.に記載の骨密度の低下抑制用飲食品組成物。
9. 当該骨密度の低下抑制用飲食品組成物中の前記レジスタントスターチ高含有澱粉の含有量が、当該骨密度の低下抑制用飲食品組成物全体に対して0.1質量%以上100質量%未満である、7.または8.に記載の骨密度の低下抑制用飲食品組成物。
10. 以下の条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含む、骨代謝バランス改善用飲食品組成物。
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が60%以上
(b)分子量ピークが6×10 3 以上4×10 4 以下
(c)分子量分散度が1.5以上6.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが10J/g以下
11. 前記レジスタントスターチ高含有澱粉が、アミロース含有量が40%以上であるアミロース高含有澱粉の酸処理物である、10.に記載の骨代謝バランス改善用飲食品組成物。
12. 当該骨代謝バランス改善用飲食品組成物中の前記レジスタントスターチ高含有澱粉の含有量が、当該骨代謝バランス改善用飲食品組成物全体に対して0.1質量%以上100質量%未満である、10.または11.に記載の骨代謝バランス改善用飲食品組成物。
また、以下において、特に断りのない場合、「%」とは「質量%」である。
特許文献1に記載の実施例1に準じて、上記条件(a)〜(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を製造した。
具体的には、ハイアミロースコーンスターチHS−7 classVII(J−オイルミルズ社製、水分15.0%、アミロース含有量70%)を用い、スラリー重量に対する澱粉乾重量が40%(dry starch weight/slurry weight)となるよう水を加えたスラリーを320g調製した。そこに、懸濁しながら6.67Nに調製した塩酸水溶液80mLを加え、40℃に調整した。このとき、澱粉水分を含めた反応水当たりの塩酸の規定度は1.96Nとなった。塩酸水溶液を加えたのち、40℃に達した時点を開始時とした。24時間反応後、3%NaOHで中和し、水洗、脱水、乾燥し、レジスタントスターチ高含有澱粉である酸処理ハイアミロースコーンスターチを得た。なお、酸規定度とは最終的な反応液における澱粉水分を含めた反応水当たりの酸規定度を意味する。
レジスタントスターチ含有量:68%(AOAC公定法2002.02による測定法)
分子量ピーク:1.2×104
分子量分散度:4.0
DSCによる糊化エンタルピー:4.9J/g
200℃、20分間加熱後のレジスタントスターチ含有量:67%
ここで、分子量分布、糊化エンタルピー、および、200℃、20分間加熱後のレジスタントスターチ含有量の測定は、それぞれ以下の方法でおこなった。
分子量分布(分子量ピークおよび分子量分散度)の測定は、東ソー社製HPLCユニット(ポンプDP−8020、RI検出器RS−8021、脱気装置SD−8022)を使用した。分析条件は、以下の通りである。
カラム:TSKgel α−M(7.8mmφ、30cm)(東ソー社製)2本
流速:0.5ml/min
移動相:5mM NaNO3/ジメチルスルホキシド:水(9:1)
カラム温度:40℃
分析量:0.2mL(試料濃度1.0mg/mL移動相)
DSCの測定には、マックサイエンス社製DSC3100を使用した。試料15mgと蒸留水45μLを70μL容量のアルミセル中に入れ、蓋をして密閉し、室温で3時間以上放置し、吸水させた。リファレンスにはブランクセルを用いた。昇温は、室温から130℃まで10℃/minの速度でおこなった。得られたDSCチャートの吸熱ピークの面積より測定される熱量である糊化エンタルピーを澱粉乾燥重量当たりの糊化熱(J/g)として定義した。
水分が30%となるよう澱粉と水を混ぜ、Wonder Brender(大阪ケミカル社製)で3秒間の混合を2回行った。その後、ゴムベラで側面および底部に付着した澱粉をかき落とし、再度3秒間の混合を1回行った。この調湿した澱粉6gを取り、底面の直径が52mm、開口部の直径が72mm、高さが36mmのステンレス製カップに詰め、同じ大きさのステンレス製カップを上に重ね、10秒間上から押し固めた。重ねたステンレス製カップを外し、試料を200℃の送風定温乾燥機(EYELA WFO−40、東京理化器械社製)に入れ20分間加熱した。加熱後の試料を粉砕し、60メッシュの篩に通し、AOAC公定法2002.02による測定法により、レジスタントスターチ含有量を測定した。
上記製造例1により得られたレジスタントスターチ高含有澱粉および表1に示す成分を用いて飼料1〜3の各飼料を調製した。各飼料について、マウスを用いた2週間試験により、頸骨骨髄中の炎症関連遺伝子発現量の解析をおこなった。
飼料の組成を表1に示す。
*2 ビタミン混合:AIN−93ビタミン混合(オリエンタル酵母工業社製)
*3 ハイアミロースコーンスターチ(HAS):ハイアミロースコーンスターチHS−7 ClassVII(J−オイルミルズ社製)、レジスタントスターチ含有量(AOAC公定法2002.02による測定値)40.5%。飼料を調製する際は、ハイアミロースコーンスターチのRS含有量は34.4%(湿重量換算値)とした。
*4 製造例1で得られたレジスタントスターチ高含有澱粉(HRS):レジスタントスターチ含有量(AOAC公定法2002.02による測定値)68%。飼料を調製する際は、レジスタントスターチ高含有澱粉のRS含有量は60%(湿重量換算値)とした。
試験には7.5週齢のddY雌性マウス(日本エスエルシー社製)を用いた。4日間の予備飼育の後、偽手術(Sham)あるいは卵巣摘出手術(OVX)を施した。偽手術を施したマウスをSham群とした。また、卵巣を摘出したマウスをOVX群、ハイアミロースコーンスターチ(HAS)摂取群(OVX+HAS群)、および、製造例1のレジスタントスターチ高含有澱粉(HRS)摂取群(OVX+HRS群)に分けた。ここで、OVX群は、閉経後骨粗鬆症のモデル群である。
各マウスは個別ケージで飼育し、室温23±1℃、湿度60±5%、明期、暗期ともに12時間のサイクルに調節された部屋で飼育した。飼育期間の飼料摂取量は随時記録し、飲水は自由に摂取させた。
2週間飼育後、ネンブタール麻酔下で脛骨を採取し、分析まで70%エタノールに浸漬し4℃で保存した。
そして、各群のマウスの脛骨骨髄中の炎症関連遺伝子発現量を以下の方法で解析した。
Interleukin (IL) -7-F:TCCTCCACTGATCCTTGTTC(配列番号1)
IL-7-R:CTTCAACTTGCGAGCAGCAC(配列番号2)
Interleuin 7 Receptor (IL-7R) -F:GCGGACGATCACTCCTTCTG(配列番号3)
IL-7R-R:AGCCCCACATATTTGAAATTCCA(配列番号4)
Tumor necrosis factor (TNF)-α -F:ATGAGCACAGAAAGCATGATC(配列番号5)
TNF-α-R:TACAGGCTTGTCACTCGAATT(配列番号6)
IL1β-F:TGCCACCTTTTGACAGTGAT(配列番号7)
IL1β-R:CGAGATTTGAAGCTGGATGC(配列番号8)
解析にはSPSS Statics、Ver 19.0J for Windows(IBM社製)を使用した。結果は平均±標準誤差で示した。すべての値はスミルノフ・グラブス検定で外れ値を除外した後、それぞれの検定を行った。遺伝子発現量のグループ間での有意差検定は一元配置の分散分析(ANOVA)を行った後、Tukeyの多重比較検定を行った。判定基準の確率は全て5%有意水準とした。
図1(A)〜図1(D)より、2週間の各飼料の摂取が骨粗鬆症モデルマウスの骨髄の炎症関連遺伝子の発現におよぼす影響について、以下のことがわかる。
図1(B)より、エストロゲン欠乏のOVX群のIL−7R遺伝子発現量は、Sham群と比し有意に高値を示した。飼料2のOVX+HAS群では、IL−7R遺伝子発現量についてOVX群との有意差は認められなかった。
一方、飼料3のOVX+HRS群ではIL−7R遺伝子発現量について有意に低値を示した。
骨髄のIL−7、TNF−αおよびIL−1β遺伝子発現量に対しては、OVX+HRS群における有意な影響は認められなかった(図1(A)、図1(C)および図1(D))。
試験例1に準じて、上記製造例1により得られたレジスタントスターチ高含有澱粉および表1に示す成分を用いて飼料1〜3を調製した。
各飼料について、マウスを用いた6週間試験により、各飼料が大腿骨密度に与える影響を調べた。
試験方法は以下のとおりである。
各マウスは個別ケージで飼育し、室温23±1℃、湿度60±5%、明期、暗期ともに12時間のサイクルに調節された部屋で飼育した。飼育期間の飼料摂取量は随時記録し、飲水は自由に摂取させた。
6週間飼育後、ネンブタール麻酔下で心臓採血を行い、大腿骨を採取し、分析まで70%エタノールに浸漬し4℃で保存した。
解析にはSPSS Statics、Ver 19.0J for Windows(IBM社製)を使用した。結果は平均±標準誤差で示した。すべての値はスミルノフ・グラブス検定で外れ値を除外した後、それぞれの検定を行った。骨密度についての有意差検定は、体重を共変量とし、共分散分析(ANCOVA)を行った後、Fisherの多重比較検定を行った。
図2(A)〜図2(D)より、6週間の各飼料の摂取が骨粗鬆症モデルマウスの大腿骨骨密度におよぼす影響について、以下のことがわかる。
図2(A)より、エストロゲン欠乏のOVX群の大腿骨全体骨密度は、Sham群のものに比べて有意に低値を示した。飼料2を摂取したOVX+HAS群では、エストロゲン欠乏に起因する骨密度の減少について、有意差は認められなかった。
一方、飼料3を摂取したOVX+HRS群では、エストロゲン欠乏に起因する骨密度の減少が有意に抑制された。
また、図2(B)より、大腿骨遠位部でも同様の傾向が認められた。
図2(C)より、大腿骨骨幹部に対して飼料2および飼料3の摂取による有意な影響は認められなかった。
また、図2(D)より、大腿骨近位部においても、飼料3を摂取したOVX+HRS群において、エストロゲン欠乏に起因する骨密度の低下が有意に抑制された。
Claims (2)
- 以下の条件(a)、(b)、(c)および(d)を満たすレジスタントスターチ高含有澱粉を有効成分として含み、
前記レジスタントスターチ高含有澱粉が、アミロース含有量が40%以上であるアミロース高含有澱粉の酸処理物であり、
前記酸処理の反応条件が、以下の式(1)および(2)を満たす、IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物。
(a)AOAC公定法2002.02のレジスタントスターチ測定法によるレジスタントスターチ含有量が65%以上
(b)分子量ピークが8×103以上1.5×104以下
(c)分子量分散度が3.0以上5.0以下
(d)示差走査熱量測定による50℃〜130℃における糊化エンタルピーが1J/g以上8J/g以下
(5.54×(4.20) (T-40)/10 ) (-0.879) ≦C<−0.000016×T 3 +0.00068×T 2 −0.028×T+4.3 (1)
(ただし、上記式(1)において、T:反応温度(℃)、C:無機酸水溶液中の無機酸の規定度(N)である。)
13.0×C (-1.14) ×(1/4.2) (T-40)/10 ≦t≦180×C (-1.58) ×(1/4.2) (T-40)/10 (2)
(ただし、上記式(2)において、T:反応温度(℃)、C:無機酸水溶液中の無機酸の規定度(N)、t:反応時間(時間)である。) - 当該IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物中の前記レジスタントスターチ高含有澱粉の含有量が、当該IL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物全体に対して0.1質量%以上100質量%未満である、請求項1に記載のIL−7R遺伝子発現抑制用飲食品組成物。
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