JP6802850B2 - 大環状化合物および該化合物を含む組成物 - Google Patents

Description

本発明は医薬技術分野に関し、特に大環状化合物および該化合物を含む組成物に関する。
本願は、ＰＣＴ／ＣＮ２０１７／０７４５５５ （出願提出日：２０１７年２月２３日）の国際段階の出願であり、中国出願番号２０１６１０１１７８１４．２（出願提出日：２０１６年３月３日）の優先権を主張する。ここで、中国出願番号２０１６１０１１７８１４．２の内容を明細書に取り込む。

過去の３０年間で、肺がんの死亡率は４６５％上昇し、発生率は毎年２６．９％増加し、中国において、既に悪性腫瘍による死亡の第一位の原因となった。その中に、非小細胞肺癌（ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，ＮＳＣＬＣ）は全肺癌の８０％以上を占める。ＮＳＣＬＣ患者の３分の１のみは手術治療を受ける機会があり、患者の約７０％は、診断する時にすでに局所進行または遠隔転移となったので、手術を受ける機会が失われる。この場合、薬物治療は特に重要である。未分化リンパ腫キナーゼ（ａｎａｐｌａｓｔｉｃｌｙｍｐｈｏｍａ ｋｉｎａｓｅ，ＡＬＫ）遺伝子融合は、最近に重要なバイオマーカーとなり、特定のＮＳＣＬＣサブグループの患者をスクリーニングすることと対応の阻害剤で治療することに寄与する。国際肺癌学会（ＩＡＳＬＣ）は、ＡＬＫ融合検査を採用して患者のスクリーニングを指導し、性別、民族、喫煙歴、その他の臨床リスク要因にかかわらず、末期腺癌の患者においてＡＬＫ阻害剤で治療される患者を選抜することを推奨する。二重標識単離プローブを用いた蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）検査は、ＡＬＫ−ＴＫＩ療法が受けられる患者の選抜に使用されました。この診断方法は、米国ＦＤＡによって承認され、クリゾチニブによるＡＬＫ再配列腫瘍の治療の研究に使用されている。クリゾチニブは、ＡＬＫおよびＭＥＴチロシンキナーゼを阻害でき、さらにＲＯＳ１およびＲＯＮキナーゼの活性を阻害できる経口アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）競合阻害剤である。

しかし、クリゾチニブは、視覚障害、胃腸の副作用などの副作用があり、症例の１６％は、グレード３〜４の肝臓トランスアミナーゼのレベル上昇を示した。さらに、ＡＬＫ陽性患者は、初期段階のクリゾチニブ治療の敏感期間を経過した後に、必然的に薬剤耐性を示す。したがって、ＡＬＫキナーゼ阻害活性を有する、および／またはより良好な薬力学／薬物動態特性を有する化合物を開発する必要がある。
上記の技術問題に鑑み、本発明は、より良好なＡＬＫキナーゼ阻害活性を有する、および／またはより良好な薬力学/薬物動態特性を有する大環状化合物及び該化合物を含む組成物を提供する。

これについて、本発明で採用される技術手段は以下の通りである。
本発明の目的は、ＡＬＫキナーゼ阻害活性を有する、および／またはより良好な薬力学／薬物動態特性を有する新規タイプの化合物を提供することにある。
本発明の第１の態様は、式（Ｉ）で表される大環状化合物またはその結晶形、薬学的に許容される塩、プロドラッグ、立体異性体、水和物または溶媒和物を提供する。

式（Ｉ）中、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１５、Ｒ^１６およびＲ^１７は、それぞれ独立して、水素、重水素またはハロゲンであり；
追加の条件は、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１５、Ｒ^１６およびＲ^１７の少なくとも１つが、重水素または重水素に置換されたものである。
本発明のさらなる改良として、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立して、重水素または水素である。
本発明のさらなる改良として、Ｒ^４は重水素または水素である。
本発明のさらなる改良として、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、それぞれ独立して、重水素または水素である。
本発明のさらなる改良として、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１５は、それぞれ独立して、重水素または水素である。
本発明のさらなる改良として、Ｒ^１６およびＲ^１７は、それぞれ独立して、重水素または水素である。
本発明のさらなる改良として、前記した化合物は、以下の化合物またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるが、これらに限定されない。

従来技術と比べて、本発明の有益な効果は、本発明の化合物が、プロテインキナーゼ（例えば、ＡＬＫキナーゼ）に対して優れた阻害性を有することにある。この重水素化の技術により、生体内における化合物の代謝を変え、化合物はより良好な薬物動態パラメータを有することを可能にする。この場合、用量を変更し、長時間作用型製剤として、適用性を改善することができる。重水素による化合物中の水素原子の置換では、重水素の同位体効果によって、動物の体内における化合物の薬物濃度を増加させ、薬物の有効性を向上させることができる。また、重水素による化合物中の水素原子の置換では、特定の代謝生成物が阻害されることにより、化合物の安全性を増加させることができる。

薬物分子において、重水素は、形状および体積が水素とほぼ同じである。薬物分子における水素は、選択的に重水素に置換される場合、重水素で置換された薬物は、一般に、元の生物活性および選択性を保持する。同時に、炭素−重水素結合の結合は、炭素−水素結合の結合よりも安定であり、いくつかの薬物の吸収、分布、代謝および排泄などの特性に直接に影響を与えるため、薬物の有効性、安全性および耐性を改善できることを、本発明者らが実験により確認した。

別の好ましい実施形態では、重水素は、重水素に置換された各位置における重水素同位体の含有量が少なくとも天然重水素同位体の含有量（０．０１５％）より多く、好ましくは３０％超、より好ましくは５０％超、さらにより好ましくは７５％超、さらにより好ましくは９５％超、さらにより好ましくは９９％超である。

具体的には、本発明において、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１５、Ｒ^１６およびＲ^１７の重水素に置換された各位置における重水素同位体の含有量は、少なくとも５％であり、好ましくは１０％超、より好ましくは１５％超、より好ましくは２０％超、より好ましくは２５％超、より好ましくは３０％超、より好ましくは３５％超、より好ましくは４０％超、より好ましくは４５％超、より好ましくは５０％超、より好ましくは５５％超、より好ましくは６０％超、より好ましくは６５％超、より好ましくは７０％超、より好ましくは７５％超、より好ましくは８０％超、より好ましくは８５％超、より好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超、より好ましくは９９％超である。

別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物におけるＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１５、Ｒ^１６およびＲ^１７の中の少なくとも１個のＲが重水素を含み、好ましくは２個のＲ、より好ましくは３個のＲ、より好ましくは４個のＲ、より好ましくは５個のＲ、より好ましくは６個のＲ、より好ましくは７個のＲ、より好ましくは８個のＲ、より好ましくは９個のＲ、より好ましくは１０個のＲ、より好ましくは１１個のＲ、より好ましくは１２個のＲ、より好ましくは１３個のＲ、より好ましくは１４個のＲ、より好ましくは１５個のＲ、より好ましくは１６個のＲ、より好ましくは１７個のＲが重水素を含む。

別の好ましい実施形態では、前記の化合物が重水素化されていない化合物を含まない。

本発明の第２の態様では、薬学的に許容される担体と、本発明の第１の態様に記載した前記の化合物、またはその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物とを混合して、医薬組成物となる工程を含む医薬組成物の調製方法を提供する。

本発明の第３の態様では、薬学的に許容される担体及び本発明の第１の態様に記載した前記の化合物、またはその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を含む医薬組成物を提供する。

別の好ましい実施形態において、前記の医薬組成物は、注射剤、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤または顆粒剤である。

別の好ましい実施形態において、前記の医薬組成物は、癌、心臓血管疾患、炎症、感染、免疫疾患、細胞増殖性疾患、ウイルス性疾患、代謝性疾患または臓器移植のための薬物である他の治療薬をさらに含む。

本発明の第４の態様では、プロテアーゼを阻害する医薬組成物の調製に用いることへの、本発明の第１の態様に記載した前記の化合物、またはその結晶形、薬学的に許容される塩、プロドラッグ、立体異性体、同位体異性体、水和物もしくは溶媒和物の使用を提供する。

別の好ましい実施形態において、前記の医薬組成物は、癌、細胞増殖性疾患、炎症、感染、免疫疾患、臓器移植、ウイルス性疾患、心臓血管疾患または代謝性疾患を治療および予防することに用いる。

別の好ましい実施形態において、前記の癌には、肺癌、頭頸部癌、乳癌、前立腺癌、食道癌、直腸癌、結腸癌、鼻咽頭癌、子宮癌、膵臓癌、リンパ腫、血液癌、骨肉腫、黒色腫、腎臓癌、胃癌、肝臓癌、膀胱癌、甲状腺癌または大腸癌を含むが、これらに限定されない。

別の好ましい実施形態において、前記の癌には、肺癌、頭頸部癌、乳癌、前立腺癌、食道癌、直腸癌、結腸癌、鼻咽頭癌、子宮癌、膵臓癌、リンパ腫、血液癌、骨肉腫、黒色腫、腎臓癌、胃癌、肝臓癌、膀胱癌、甲状腺癌または大腸癌を含むが、これらに限定されない。

別の好ましい実施形態において、前記の免疫疾患または炎症には、関節リウマチ、変形性関節症、リウマチ様脊椎炎、痛風、喘息、気管支炎、鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症を含むが、これらに限定されない。

別の好ましい実施形態において、前記の癌は非小細胞肺癌である。

本発明の第５の態様では、本発明の第１の態様に記載の化合物、またはその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物、或いは本発明の第３の態様に記載した医薬組成物を治療を必要とする対象に投与する工程を含む、プロテインキナーゼ（例えば、ＡＬＫキナーゼ）を阻害する方法または疾患（例えば、癌、細胞増殖性疾患、炎症、感染、免疫疾患、臓器移植、ウイルス性疾患、心血管疾患または代謝性疾患）を治療する方法を提供する。

本発明の範囲おいて、本発明の上記の技術特徴および以下（例えば、実施例）に具体的に記載される技術特徴を互いに組み合わせて新しいまたは好ましい技術案を構成できることを理解すべきである。ここで、その詳細を省略する。

また、本発明は同位体標識化合物を含み、ここで元の化合物を開示することに相当する。本発明の化合物の同位体の例として、^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆおよび^３６Ｃｌなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素および塩素の同位体が挙げられる。本発明の化合物、そのエナンチオマー、ジアステレオマー、異性体、または薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、上記の化合物の同位体や他の同位体原子を含むものは、すべて本発明の範囲内にある。例えば、放射性同位体である^３Ｈおよび^１４Ｃも本発明の特定の同位体標識化合物の中に含み、それは薬物および基質の組織分布実験に有用である。トリチウム（即ち^３Ｈ）と炭素１４（即ち^１４Ｃ）は、調製および検出が比較的に容易であるため、同位体の第１候補である。なお、重水素（即ち^２Ｈ）のようなより重い同位体の置換は、優れた代謝安定性があるため、インビボで半減期を増加するまたは投与量を減少するように、特定の治療法において利点を有するので、場合によっては好ましいことがある。同位体標識化合物は、通常の方法で非同位体試薬の代わりに容易に入手可能な同位体標識試薬を使用することにより、実施例に示すプロトコルに従って調製される。

本発明において、特に説明のない限り、「ハロゲン」とは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを指す。より好ましくは、ハロゲン原子がＦ、ＣｌおよびＢｒから選択される。

本発明において、特に説明のない限り、「Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基」とは、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルまたは類似の基などの炭素数１〜６の直鎖状または分岐状のアルキル基を指す。

本発明において、特に説明のない限り、「重水素化」とは、化合物または基における水素の１個以上が重水素に置換されていることを意味し、重水素化は一置換、二置換、多置換または完全置換であっても良い。「１つ以上の重水素化」および「１回以上の重水素化」という用語は、同じ意味で使用される。

本発明において、特に説明のない限り、「非重水素化された化合物」とは、重水素原子の割合が天然重水素同位体の含有量（０．０１５％）以下の化合物を指す。

本発明において、薬学的に許容される塩としては、無機塩および有機塩がある。一種類の好ましい塩は、本発明の化合物と酸と形成された塩である。塩の形成に適した酸として、塩酸、臭化水素酸、フッ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸；ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、ピクリン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸などの有機酸；及び、プロリン、フェニルアラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸などのアミノ酸が挙げられるが、これらに限定されない。別の一種類の好ましい塩は、例えば、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩或いはカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、マグネシウム塩或いはカルシウム塩）、アンモニウム塩（例えば、メチルアミン塩、エチルアミン塩、プロピルアミン塩、ジメチルアミン塩、トリメチルアミン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ｔｅｒｔ−ブチルアミン、エチレンジアミン塩、ヒドロキシエチルアミン塩、ジヒドロキシエチルアミン塩、トリヒドロキシアミン塩、及びモルホリン、ピペラジン、リジンからそれぞれ形成されたアミン塩などの低級アルカノールアンモニウム塩および他の薬学的に許容されるアミン塩）などの本発明の化合物をアルカリで形成された塩である。

「溶媒和物」という用語とは、本発明の化合物が溶媒分子と配位して特定の割合で形成した錯体を指す。「水和物」とは、本発明の化合物が水と配位して形成した錯体を指す。

以下、本発明の式（Ｉ）で表される構造の化合物の調製方法をさらに具体的に説明するが、これらの具体的な方法は本発明を限定するものではない。また、本発明の化合物は、本明細書に記載された、又は当技術分野で公知された様々な合成方法を組み合わせることによって順調に調製することができ、そのような組み合わせは、当業者にとって明らかである。

調製プロセスにおいて、一般に、各反応は不活性溶媒の中に、室温〜還流温度（例えば、０℃〜１００℃、好ましくは０℃〜８０℃）で行われる。反応時間は、一般に、０．１〜６０時間で、好ましくは０．５〜２４時間である。

以下、実施例により具体的に説明する。

実施例１ 中間体である２−（１−（（２−アミノ−５−ブロモピリジン−３−イル）オキシ）エチル）−４−フルオロ安息香酸メチル（化合物７）の合成

工程１ 化合物２の合成
窒素雰囲気下、化合物１（２．６ｇ、１０ｍｍｏｌ）のメタノール（５０ｍＬ）溶液を氷水浴で冷却し、徐々にＮａＢＨ_４（０．３８ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加え、０℃で５分間反応し続け、反応系に泡がなくなるまで０．５Ｍ ＨＣｌ溶液を徐々に加え、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で反応液をｐＨ＞７に調整し、酢酸エチルで抽出して白色固体生成物２．６ｇを得た。収率は９９％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝２６７（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．７６−７．７１（ｍ，１Ｈ），７．３５−７．３１（ｍ，１Ｈ），６．７８−６．７２（ｍ，１Ｈ），５．０５−４．９９（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程２ 化合物３の合成
化合物２（２．６ｇ、１０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６０ｍＬ）溶液に、Ｅｔ_３Ｎ（１．５２ｇ、１５ｍｍｏｌ）およびＭｓＣｌ（１．５ｇ、１３ｍｍｏｌ）を０℃で順次滴下した後、反応混合物を室温下で１時間撹拌し、水およびジクロロメタンを添加し、有機相を分離して、水、０．５Ｍ ＨＣｌ溶液および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて淡色固体生成物３．１ｇを得て、そのまま次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３４５（Ｍ＋１）^＋。

工程３ 化合物５の合成
化合物３（１．０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５０ｍＬ）溶液に、化合物４（０．４８ｇ、４．３ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．９ｇ、５．８ｍｍｏｌ）を加え、８５℃に加熱して２時間反応した。その後、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、濾過し、濾液を回収し、カラムで精製して淡色固体生成物５００ｍｇを得た。収率は４８％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３５９．１（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）（δ／ｐｐｍ） ７．９０−７．８５（ｍ，１Ｈ），７．４７−７．４５（ｍ，１Ｈ），７．４０−７．３５（ｍ，１Ｈ），７．００−６．９４（ｍ，１Ｈ），６．５７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４０−６．３５（ｍ，１Ｈ），５．９０（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．４０（ｑ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），１．５４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。

工程４ 化合物６の合成
化合物５（０．２５ｇ、０．７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（１０２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ_３Ｎ（１４０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を順次加え、反応系を真空にした後、ＣＯを吹き込み、ＣＯ雰囲気下、７０℃で一晩反応させ、室温に冷却した後、酢酸エチルを加え、ろ過し、ろ液を回収し、カラムで精製して白色生成物１５０ｍｇを得た。収率７３％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝２９１．１（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ８．０５−８．０３（ｍ，１Ｈ），７．６１−７．５８（ｍ，１Ｈ），７．３０−７．２７（ｍ，１Ｈ），７．００−６．９５（ｍ，１Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．４２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．３３−６．３０（ｍ，１Ｈ），４．７５（ｂｒ ｓ，２Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），１．６５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。

工程５ 化合物７の合成
窒素雰囲気下、攪拌付けの一口フラスコに化合物６（４４０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）とアセトニトリル（６ｍＬ）とを順次に加え、反応系を０℃に冷却し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、２６７ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（６ｍＬ）溶液を滴下し、１５分間反応し続けた後、溶媒を回転乾燥し、残渣を酢酸エチルに溶解し、ＮａＯＨ、１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、有機相を回収し、カラムで褐色油状生成物４００ｍｇを得た。収率は７１％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３６９．１（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ８．０７−８．０５（ｍ，１Ｈ），７．６８−７．６５（ｍ，１Ｈ），７．２６−７．２４（ｍ，１Ｈ），７．０４−７．０２（ｍ，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．３３−６．３０（ｍ，１Ｈ），４．７７（ｂｒ ｓ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），１．６５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。

実施例２ 置換された大環状化合物１８の調製

工程１ 化合物９の合成
一口フラスコに化合物８（６．７２ｇ、４０ｍｍｏｌ）、１，２−ジクロロエタン（１００ｍＬ）を添加して清澄な溶液を得た。この攪拌されている溶液にＮＢＳ（１４．９２ｇ、８４ｍｍｏｌ）、過酸化ベンゾイル（ＢＰＯ、１．２４ｇ、５．２ｍｍｏｌ）を添加し、一晩加熱還流した後、室温に冷却し、氷浴で１時間攪拌した。針状固体が現れた後、濾過を行い、濾液を回収し、カラムで精製して白色固体９．１ｇを得た。収率は７０％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３２７（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ４．４８（ｓ，２Ｈ），４．４１（ｑ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），１．４１（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，３Ｈ）。

工程２ 化合物１０の合成
一口フラスコに化合物９（２ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）とエタノール（１５ｍｌ）とを加え、清澄な溶液を得た後、アンモニア水（１５ｍｌ）を加え、室温で２４時間攪拌し、回転乾燥して黄色固体１．５ｇを得て、そのまま次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝２３３（Ｍ＋１）^＋。

工程３ 化合物１１の合成
連続的な撹拌付けの二口丸底フラスコに、化合物１０（１．５ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、４０ｍＬ）及びトリエチルアミン（ＴＥＡ、１．３ｇ、１３ｍｍｏｌ）を順次添加し、ジクロロメタンを加え、換気した後、反応系を窒素雰囲気下にして、氷水浴で（ＢＯＣ）_２Ｏ（２ｇ、９ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で一晩攪拌した後、水とジクロロメタンを加えて反応をクエンチした。ジクロロメタンで抽出し、有機相を分離し、カラムで精製して白色固体生成物６００ｍｇを得た。収率は２９％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３３３（Ｍ＋１）^＋。

工程４ 化合物１２の合成
連続的な撹拌付けの三口丸底フラスコに、化合物１１（１．２ｇ、３．６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（９０ｍＬ）及びＴＥＡ（２．９ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）を順次添加し、−５℃に冷却し、トリフルオロ酢酸無水物（３．８ｍｇ、１８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液を滴下し、０℃で１時間撹拌した後、ジクロロメタンで希釈し、５％のクエン酸、炭酸水素ナトリウム溶液および飽和ブラインで順次洗浄し、有機相を回収し、カラムで精製して黄色固体生成物７９０ｍｇを得た。収率は７０％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３１５．１（Ｍ＋１）^＋。

工程５ 化合物１３の合成
窒素雰囲気下、二口丸底フラスコに化合物１２（４６０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）を注入して清澄な溶液を得た後、−７８℃に冷却し、ヘキサメチルジシラザンリチウム（ＬｉＨＭＤＳ、１．７ｍｌ、１．７ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間撹拌した後、ＣＤ_３Ｉ（２８３ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で３時間撹拌し、水と酢酸エチルを加えて抽出し、有機相を回収し、カラムで精製して黄色油状生成物２３０ｍｇを得た。収率は４８％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３３２．１（Ｍ＋１）^＋。

工程６ 化合物１４の合成
窒素雰囲気下、二口丸底フラスコに化合物７（９０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、化合物１３（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（９０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＣｓＦ（１９０ｍｇ，１．２６ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ（９：１，５ｍＬ）を順次添加し、均一に攪拌した後、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（３ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）のトルエン（０．５ｍＬ）溶液を加え、６０℃に加熱し、一晩還流した。その後、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、濾過し、濾液を水とブラインで順次洗浄した。有機相を回収し、カラムで精製して黄色油状生成物８７ｍｇを得た。収率は６７％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５４２．２（Ｍ＋１）^＋。

工程７ 化合物１５の合成
一口丸底フラスコに、化合物１４（２００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）、ＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（１５１ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）およびＨ_２Ｏ（５ｍＬ）を順次加え、室温で一晩攪拌した後、硫酸ナトリウム十水和物を加え、５分間攪拌し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、有機相をろ過し、回収して褐色油状生成物１８０ｍｇを得た。収率は９５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５２８（Ｍ＋１）^＋。

工程８ 化合物１６の合成
窒素雰囲気下、一口丸底フラスコに化合物１５（１８０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）、ＨＣｌの１，４−ジオキサン（２ｍＬ、３．３２ｍｍｏｌ）溶液を順次加え、４０℃に加熱し、２時間反応させ、溶媒を除去し、カラムで精製して黄色油状生成物８０ｍｇを得た。収率は５３％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４２８．２（Ｍ＋１）^＋。

工程９ 化合物１８の合成
一口丸底フラスコに、２−（７−アゾベンゾトリアゾール）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、９７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）および乾燥したＤＭＦ（２ｍＬ）を順次加え、０℃に冷却した。上記の一口丸底フラスコに、化合物１６（８０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、２３４ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）とＴＨＦ（０．１ｍＬ）の混合溶液を０℃で徐々に添加した。その後、この温度で３０分間攪拌を続け、水と酢酸エチルを加えて反応をクエンチさせた後、有機相を分離し、酢酸エチルで抽出し、有機相を回収し、カラムで精製して２０ｍｇの白色固体化合物１７を得た。ラセミ体である化合物１７（２０ｍｇ）を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）で分離して、目的物Ｒ−１８とＳ−１８をそれぞれ６ｍｇ得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４１０（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．７５（ｓ，１Ｈ），７．２４−７．１１（ｍ，２Ｈ），７．０２−７．０５（ｍ，１Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ），５．６９−５．６２（ｍ，１Ｈ），４．８２（ｓ，２Ｈ），４．３３（ｑ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），４．００（ｓ，３Ｈ），１．７２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，３Ｈ）。

実施例３ 置換された大環状化合物２８の調製

工程１ 化合物１９の合成
窒素ガスの保護下、一口丸底フラスコに、化合物８（３．０８ｇ、２０ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（３０ｍＬ）、炭酸カリウム（５．４８ｇ、４０ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸ｄ３−メチル（５．６７ｇ、３０ｍｍｏｌ）を順次加え、７０℃に加熱し、この温度で１８時間反応させた後、室温に冷却し、水とジクロロメタンで抽出し、有機相を回収し、カラムで精製して無色油状生成物１．６ｇを得た。収率は４７％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝１７２．１（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣＬ_３）（δ／ｐｐｍ）： ６．６２（ｓ，１Ｈ），４．３３（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），４．３３（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）。

工程２ 化合物２０の合成
一口フラスコに、化合物１９（３．４ｇ、２０ｍｍｏｌ）、１，２−ジクロロエタン（１００ｍＬ）を加えて清澄な溶液を得た。この攪拌されている溶液に、更にＮＢＳ（７．５ｇ、４２ｍｍｏｌ）、過酸化ベンゾイル（ＢＰＯ、０．６４ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を添加し、一晩加熱還流し、室温に冷却し、氷浴で１時間撹拌し、針状固体が現れた後、濾過を行い、濾液を回収し、カラムで精製して白色固体４．８ｇを得た。収率は７３％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３３０（Ｍ＋１）^＋。

工程３ 化合物２１の合成
一口フラスコに、化合物２０（２ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）、エタノール（１５ｍｌ）を加え、清澄な溶液を得た後、さらにアンモニア水（１５ｍｌ）を添加し、室温で２４時間攪拌し、回転乾燥して黄色固体１．５ｇを得て、そのまま次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝２３６（Ｍ＋１）^＋。

工程４ 化合物２２の合成
連続的な撹拌付けの二口丸底フラスコに、化合物２１（１．５ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、１５ｍＬ）およびＴＥＡ（１．３ｇ、１３ｍｍｏｌ）を順次添加し、ジクロロメタンを加えて換気した後、反応系を窒素雰囲気下にして、氷水浴で（ＢＯＣ）_２Ｏ（２ｇ、９ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で一晩攪拌した後、水とジクロロメタンで反応をクエンチした。ジクロロメタンで抽出し、有機相を分離し、カラムで精製して白色固体生成物６００ｍｇを得た。収率は２９％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３３６（Ｍ＋１）^＋。

工程５ 化合物２３の合成
連続的な撹拌付けの三口丸底フラスコに、化合物２２（１．２ｇ、３．６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（９０ｍＬ）およびＴＥＡ（２．９ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）を順次加え、−５℃に冷却し、トリフルオロ酢酸無水物（３．８ｍｇ、１８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液を滴下し、０℃で１時間撹拌し、ジクロロメタンで希釈し、５％のクエン酸、炭酸水素ナトリウム溶液および飽和ブラインで順次洗浄し、有機相を回収し、カラムで精製して黄色固体生成物７２０ｍｇを得た。収率は６３％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３１８．１（Ｍ＋１）^＋。

工程６ 化合物２４の合成
窒素雰囲気下、二口丸底フラスコに化合物２３（４６１ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）を注入して清澄な溶液を得た後、−７８℃に冷却し、ヘキサメチルジシラザンリチウム（ＬｉＨＭＤＳ、１．７ｍｌ、１．７ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間撹拌した後、ＣＨ_３Ｉ（４２０ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で３時間撹拌し、水と酢酸エチルを加えて抽出し、有機相を回収し、カラムで精製して黄色油状生成物２２０ｍｇを得た。収率は４５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３３２．１（Ｍ＋１）^＋。

工程７ 化合物２５の合成
窒素雰囲気下、二口丸底フラスコに化合物７（９０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、化合物２４（８０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（９０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＣｓＦ（１９０ｍｇ，１．２６ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ（９：１，５ｍＬ）を順次添加し、均一に攪拌した後、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（５ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（０．５ｍＬ）を添加し、６０℃に加熱し、一晩還流した。その後、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、濾過し、濾液を水とブラインで順次洗浄した。有機相を回収し、カラムで精製して黄色油状生成物８７ｍｇを得た。収率は６７％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５４２．２（Ｍ＋１）^＋。

工程８ 化合物２６の合成
一口丸底フラスコに、化合物２５（２００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）、ＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（１５１ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）およびＨ_２Ｏ（５ｍＬ）を順次加え、室温で一晩攪拌した後、硫酸ナトリウム十水和物を加え、５分間撹拌し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、有機相をろ過し、回収して褐色油状生成物１８０ｍｇを得た。収率は９５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５２８（Ｍ＋１）^＋。

工程９ 化合物２７の合成
窒素雰囲気下、一口丸底フラスコに化合物１５（１８０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）、ＨＣｌの１，４−ジオキサン（２ｍＬ、３．３２ｍｍｏｌ）溶液を順次加え、４０℃に加熱し、２時間反応させ、溶媒を除去し、カラムで精製して黄色油状生成物８０ｍｇを得た。収率は５３％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４２８．２（Ｍ＋１）^＋。

工程１０ 化合物２８の合成
一口丸底フラスコに、２−（７−アゾベンゾトリアゾール）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、９７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）および乾燥したＤＭＦ（２ｍＬ）を順次加え、０℃に冷却した。上記の一口丸底フラスコに、化合物１６（８０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、２３４ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）とＴＨＦ（０．１ｍＬ）の混合溶液を０℃で徐々に添加した。その後、この温度で３０分間攪拌を続け、水と酢酸エチルを加えて反応をクエンチさせた後、有機相を分離し、酢酸エチルで抽出し、有機相を回収し、カラムで精製して２０ｍｇの白色固体化合物２８を得た。ラセミ体である化合物２８（２０ｍｇ）を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）で分離して、目的物Ｒ−２９とＳ−２９をそれぞれ６ｍｇ得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４１０（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．７５（ｓ，１Ｈ），７．２４−７．１１（ｍ，２Ｈ），７．０２−７．０５（ｍ，１Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ），５．６９−５．６２（ｍ，１Ｈ），４．８２（ｓ，２Ｈ），４．３３（ｑ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），１．７２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，３Ｈ）。

実施例４ 置換された大環状化合物４５の調製

工程１ 化合物３１の合成
化合物３０（３．６ｇ、３０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液にＮ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、６．４ｇ、３６ｍｍｏｌ）を加え、９０℃で３時間攪拌した。室温に冷却した後、溶媒を除去し、残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して白色固体生成物として５．５ｇの化合物３１を得た。収率は９１．６％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ３．９９（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ）。

工程２ 化合物３２の合成
窒素雰囲気下、乾燥されたトリフルオロトルエン６０ｍＬに化合物３１（５．５ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）を溶解し、４５℃に加熱した後、ＮＢＳ（６．８５ｇ、３８．５ｍｍｏｌ）とアゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ、２００ｍｇ）を順次添加し、８５℃に加熱し、１時間反応させた後、１５０ｍｇのＡＩＢＮを添加して更に３時間反応させた。室温に冷却して濾過し、有機相を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物３２を５．２ｇ得た。収率は６７．８％であった。

工程３ 化合物３４の合成
窒素雰囲気下、化合物３２（５．２ｇ、１８．６５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのアセトニトリルに溶解した。この溶液を０℃に冷却し、ＭｅＮＨ_２のテトラヒドロフラン溶液（２Ｍ、４０ｍＬ、８０ｍｍｏｌ）に滴下し、室温で１時間反応させ、溶媒を除去し、ジクロロメタン４０ｍＬ、トリエチルアミン（ＴＥＡ、３．７７ｇ、３７．２ｍｍｏｌ）を順次添加し、０℃に冷却した後、Ｂｏｃ_２Ｏ（５．２８ｇ、２４．１８ｍｍｏｌ）を加え、室温で反応を３０分間続けた。水１０ｍＬを加え、ジクロロメタンで抽出し、有機相を分離しカラムで精製して無色油状生成物として５．０ｇの化合物３４を得た。収率は８１．７％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ４．４５（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，２Ｈ），４．０２（ｓ，３Ｈ），２．８３（ｓ，３Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。

工程４ 化合物３６の合成
窒素雰囲気下、エチニルトリメチルシラン（２．５２ｇ、２５．７５ｍｍｏｌ）に、化合物３５（５ｇ、２１．４６ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２（４５２ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）及びＣｕＩ（４１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン（ＴＥＡ）溶液４０ｍＬを滴下し、９０℃に加熱し、２時間反応させた後、室温に冷却し、酢酸エチル５０ｍＬを加え、濾過した後、濾液を回収し、カラムで精製して５．３ｇの目的化合物３６を得た。収率は９７％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．９７−７．９０（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．２５（ｍ，１Ｈ），７．０８−７．０４（ｍ，１Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），０．２８（ｓ，９Ｈ）。

工程５ 化合物３７の合成
窒素雰囲気下、化合物３６（５．３ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＤ／ＣＤＣｌ_３（１／１，２０ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（２．９４ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間撹拌した。ろ過を行い、ろ過ケーキを酢酸エチルで洗浄し、ろ液を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物３７を３．４ｇ得た。収率は８９．６％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ８．０１−７．９８（ｍ，１Ｈ），７．３２（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１４−７．０９（ｍ，１Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ）。

工程６ 化合物３８の合成
重水素ガス雰囲気下、化合物３７（３１０ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）の酢酸エチル溶液１０ｍＬに３１ｍｇのＰｄ／Ｃを加え、室温で一晩撹拌し、濾過し、酢酸エチルで濾過ケーキを洗浄し、濾液を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物３８を３００ｍｇ得た。収率は９６．７％であった。

工程７ 化合物３９の合成
窒素雰囲気下、化合物３８（４．８ｇ、２５．６７ｍｍｏｌ）およびＮＢＳ（５．０ｇ、２８．２４ｍｍｏｌ）の溶液にＡＩＢＮ（１２６ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を加え、８０℃に加熱し、４時間反応させた。室温に冷却した後、濾過し、ジクロロメタンで濾過ケーキを洗浄し、濾液を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物３９を６．３ｇ得た。収率は８４．２％であった。

工程８ 化合物４１の合成
窒素雰囲気下、化合物３９（３．５ｇ、１３．２５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４．９４ｇ、１５．１２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液４０ｍＬに、化合物４０（２．３７ｇ、１２．６３ｍｍｏｌ）を加え、５０℃に加熱して２時間反応させた後、室温に冷却し、濾過し、ジクロロメタンおよび酢酸エチルで濾過ケーキを洗浄し、濾液を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物４１を２．９ｇ得た。収率は６１．７％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ８．０８−８．０４（ｍ，１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０６−７．０１（ｍ，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．７８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），３．９６（ｓ，３Ｈ）。

工程９ 化合物４２の合成
窒素雰囲気下、丸底フラスコに、化合物４１（２．３ｇ、６．１ｍｍｏｌ）、化合物３４（２ｇ、６．１ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（２．３２ｇ、９．２ｍｍｏｌ）、ＣｓＦ（４．８７ｇ、３２ｍｍｏｌ）及び６０ｍＬのＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ（９：１）を順次添加し、６０℃で撹拌しながら、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（０．１４ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）およびｃａｔａＣＸｉｕｍ（０．４４ｇ、１．２ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（６ｍＬ）を加え、還流までに加熱した後、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（０．０７ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）およびｃａｔａＣＸｉｕｍ（０．２２ｇ、０．６ｍｍｏｌ）のトルエン（６ｍＬ）をさらに加え、６０℃で一晩撹拌した。室温に冷却した後、酢酸エチル２０ｍＬを加えてろ過し、ろ液を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物４２を２．１ｇ得た。収率は６３．５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５４３．２（Ｍ＋１）^＋。

工程１０ 化合物４３の合成
化合物４２（２．１ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（１．６ｇ、３８ｍｍｏｌ）の水溶液２０ｍＬを添加し、４５℃に加熱し、一晩反応させた。有機相を除去し、固体クエン酸を加えて残渣のｐＨを５に調整し、酢酸エチルで抽出し、有機相を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物４３を１．２ｇ得た。収率は５８．７％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５２９．３（Ｍ＋１）^＋。

工程１１ 化合物４４の合成
窒素雰囲気下、化合物４３（１．２ｇ、２．２７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液２０ｍＬに、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、４ｍＬ）を０℃で滴下し、室温で２時間反応させた。溶媒を除去して乾燥させた後、化合物４４を得て、そのまま次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４２９．２（Ｍ＋１）^＋。

工程１２ 化合物４５の合成
２−（７−オキシベンゾトリアゾール）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、６０１ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を入れた丸底フラスコに、窒素ガスを充填した。１２ｍＬの無水ＤＭＦを滴下し、０℃に冷却し、化合物４４（０．９７ｇ、２．２７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、３．０ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液６ｍＬを加え、この温度で３０分間攪拌した。水２０ｍＬおよび酢酸エチル２０ｍＬを加え、有機相を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物４５を４３０ｍｇ得た。収率は４６．２％であった。ラセミ体である化合物４５（２０ｍｇ）を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）で分離して、目的物Ｒ−４５とＳ−４５をそれぞれ得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４１１．１（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．８４（ｓ，１Ｈ），７．３１−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．０２−６．９８（ｍ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），４．８７（ｂｒ ｓ，２Ｈ），４．４７−４．３４（ｍ，２Ｈ），４．０７（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｓ，３Ｈ）。

実施例５ 置換された大環状化合物５８の調製

工程１ 化合物４７の合成
窒素雰囲気下、１２ｍＬの水、Ｋ_３ＰＯ_４（２０ｇ、９４．５９ｍｍｏｌ）およびエチルボロン酸（７ｇ、９４．５９ｍｍｏｌ）に、化合物４６（１１ｇ、４７．３０ｍｍｏｌ）のトルエン溶液２１０ｍＬを添加した後、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（１４９ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を加え、１００℃に加熱して３時間反応させた後、室温に冷却した。濾過ケーキを酢酸エチルで洗浄し、有機相を回収し、目的生成物である化合物４７を８．３ｇ得た。収率は９６．６％であった。

工程２ 化合物４８の合成
窒素雰囲気下、化合物４７（８．３ｇ、４５．６０ｍｍｏｌ）のＣＣｌ_４溶液４０ｍＬに、ＮＢＳ（８．９３ｇ、５０．１６ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（２２４ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を順次加え、８０℃に加熱し、２時間反応させた。室温に冷却した後、濾過ケーキをジクロロメタンで洗浄し、有機相を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物４８を８．８４ｇ得た。収率は７４．５％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．８９−７．８５（ｍ，１Ｈ），７．４６（ｄｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．００−６．９５（ｍ，１Ｈ），６．３３−６．２７（ｍ，１Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），１．９７（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程３ 化合物４９の合成
窒素雰囲気下、化合物４８（８．８４ｇ、３４ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１２．０９ｇ、３０．９１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液１００ｍＬに、化合物４０（５．８１ｇ、３０．９１ｍｍｏｌ）を加え、５０℃に加熱し、２時間反応させた。濾過して濾過ケーキをジクロロメタンと酢酸エチルで洗浄し、有機相を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物４９を９．３ｇ得た。収率は９８．８％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ８．０８−８．０４（ｍ，１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０６−７．０１（ｍ，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．３７−６．３４（ｍ，１Ｈ），４．７８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），３．９６（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程４ 化合物５１の合成
化合物３０の代わりに化合物５０を用いた以外は、実施例４の工程１と同様にして目的生成物である化合物５１を５．５ｇ得た。収率は９１．６％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ２．２７（ｓ，３Ｈ）。

工程５ 化合物５２の合成
化合物３１の代わりに化合物５１を用いた以外は、実施例４の工程２と同様にして目的生成物である化合物５２を５．２ｇ得た。収率は６７．８％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ４．０５（ｓ，２Ｈ）。

工程６ 化合物５４の合成
化合物３２の代わりに化合物５２を用い、ＭｅＮＨ_２の代わりにｄ３−ＭｅＮＨ_２を用いた以外は、実施例４の工程３と同様にして目的生成物である化合物５４を０．８ｇ得た。収率は６８．７％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ４．４５（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。

工程７ 化合物５５の合成
化合物３４の代わりに化合物５４を用い、化合物４１の代わりに化合物４９を用いた以外は、実施例４の工程９と同様にして目的生成物である化合物５５を２．１ｇ得た。収率は６３．５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５４５．３（Ｍ＋１）^＋。

工程８ 化合物５６の合成
化合物４２の代わりに化合物５５を用いた以外は、実施例４の工程１０と同様にして目的生成物である化合物５６を１．２ｇ得た。収率は５８．７％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５３１．３（Ｍ＋１）^＋。

工程９ 化合物５７の合成
化合物４３の代わりに化合物５６を用いた以外は、実施例４の工程１１と同様にして目的生成物を得て、そのまま次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４３１．２（Ｍ＋１）^＋。

工程１０ 化合物５８の合成
化合物４４の代わりに化合物５７を用いた以外は、実施例４の工程１２と同様にして目的生成物である化合物５８を４５０ｍｇ得た。収率は４８．１％であった。ラセミ体である化合物５８（２０ｍｇ）を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）で分離して、目的物Ｒ−５８とＳ−５８をそれぞれ得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４１１．１（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．８４（ｓ，１Ｈ），７．３１−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．０２−６．９８（ｍ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），５．７４−５．７２（ｍ，１Ｈ），４．８７（ｂｒ ｓ，２Ｈ），４．４７−４．３４（ｍ，２Ｈ），１．７８（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）。

実施例６ 置換された大環状化合物７２の調製

工程１ 化合物６１の合成
窒素雰囲気下、乾燥された丸底フラスコに、４０ｍＬのＥｔＯＤおよびＮａ（２．７６ｇ、１２０ｍｍｏｌ）を０℃で順次添加し、室温で１時間撹拌し、０℃に冷却し、重水素化アセトン（化合物６０、７．７ｇ、１２０ｍｍｏｌ）およびシュウ酸ジエチル（１４．６ｇ、１００ｍｍｏｌ）を滴下し、この反応混合物を室温で一晩撹拌した。３０ｍＬのＤ_２Ｏを加えて反応をクエンチして、酢酸エチルで抽出し、有機相を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物６１を１２ｇ得た。収率は７３．６％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝１６４．１（Ｍ＋１）^＋。

工程２ 化合物６２の合成
窒素雰囲気下、化合物６１（１１ｇ、６７．４ｍｍｏｌ）のＣＨ_３ＣＯＯＤ溶液６０ｍＬを０℃に冷却し、この温度でＮＨ_２ＮＨ_２−Ｈ_２Ｏ（９８％、３．２ｇ、６４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＤ溶液１０ｍＬを滴下し、２０分間撹拌して８５℃に加熱し、２時間反応させた。溶媒を除去し、カラムで精製して目的生成物である化合物６２を１０ｇ得た。収率は９５．１％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．２４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．３９（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），１．３９（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程３ 化合物６３の合成
窒素雰囲気下、化合物６２（１０ｇ、６４．１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液１５０ｍＬに、４−メチルベンゼンスルホン酸（１７．９ｇ、９６．１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１７．７ｇ、１２８．２ｍｍｏｌ）を加え、５０℃に加熱し、一晩反応させた。室温に冷却した後、酢酸エチルを加えてろ過し、ろ液を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物６３を９ｇ得た。収率は８１．５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝１７３．１（Ｍ＋１）^＋。

工程４ 化合物６４の合成
封止された反応管に化合物６３（９ｇ、５２．３ｍｍｏｌ）とアンモニア水１００ｍＬを順次添加し、室温で一晩反応させた。濾過した後、水で洗浄し、ジクロロメタンで濾液を抽出し、濾過ケーキを有機相に溶解した後、回転乾燥して回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物６４を５ｇ得た。収率は６６．８％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝１４４．１（Ｍ＋１）^＋。

工程５ 化合物６５の合成
窒素雰囲気下、丸底フラスコに化合物６４（４．８ｇ、３４．５ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン７８ｍＬおよびＤＩＰＥＡ（２２．８ｍＬ、１３８ｍｍｏｌ）を順次加え、−１０℃に冷却した後、無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡＡ、５．２８ｍＬ、３７．９８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液１２ｍＬを徐々に滴下した。その後、０℃で１時間撹拌し、反応液を室温に戻した後、水５０ｍＬを加えて反応をクエンチさせ、ジクロロメタンで抽出した後、有機相を回収し、カラムで精製して目的生成物である化合物６５を３．６ｇ得た。収率は８７．５％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ３．９８（ｓ，３Ｈ）。

工程６ 化合物６６の合成
化合物３０の代わりに化合物６５を用いた以外は、実施例４の工程１と同様にして目的生成物である化合物６６を５．５ｇ得た。収率は９１．６％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ３．９９（ｓ，３Ｈ）。

工程７ 化合物６７の合成
化合物３１の代わりに化合物６６を用いた以外は、実施例４の工程２と同様にして目的生成物である化合物６７を３．２ｇ得た。収率は４１．５％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ４．０５（ｓ，３Ｈ）。

工程８ 化合物６８の合成
化合物３２の代わりに化合物６７を用いた以外は、実施例４の工程３と同様にして目的生成物である化合物６８を２．６ｇ得た。収率は６８．７％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ４．０２（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，３Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。

工程９ 化合物６９の合成
化合物３４の代わりに化合物６８を用い、化合物４１の代わりに化合物４９を用いた以外は、実施例４の工程９と同様にして目的生成物である化合物６９を２．１ｇ得た。収率は６３．５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５４１．２（Ｍ＋１）^＋。

工程１０ 化合物７０の合成
化合物４２の代わりに化合物６９を用いた以外は、実施例４の工程１０と同様にして目的生成物である化合物７０を１．２ｇ得た。収率は５８．７％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５２７．２（Ｍ＋１）^＋。

工程１１ 化合物７１の合成
化合物４３の代わりに化合物５６を用いた以外は、実施例４の工程１１と同様にして目的生成物を得て、そのまま次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４２７．２（Ｍ＋１）^＋。

工程１２ 化合物７２の合成
化合物４４の代わりに化合物５７を用いた以外は、実施例４の工程１２と同様にして目的生成物である化合物７２を４５０ｍｇ得た。収率は４８．１％であった。ラセミ体である化合物７２（２０ｍｇ）を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）で分離して、目的物Ｒ−７２とＳ−７２をそれぞれ得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４０８．１（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．８４（ｓ，１Ｈ），７．３１−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．０２−６．９８（ｍ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），５．７４−５．７２（ｍ，１Ｈ），４．８７（ｂｒ ｓ，２Ｈ），４．０７（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｓ，３Ｈ），１．７８（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）。

実施例７ 置換された大環状化合物７６の調製

工程１ 化合物７３の合成
化合物３４の代わりに化合物２４を用いた以外は、実施例４の工程９と同様にして目的生成物である化合物７３を２．１ｇ得た。収率は６３．５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５４６．３（Ｍ＋１）^＋。

工程２ 化合物７４の合成
化合物４２の代わりに化合物７３を用いた以外は、実施例４の工程１０と同様にして目的生成物である化合物７４を１．２ｇ得た。収率は５８．７％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５３２．３（Ｍ＋１）^＋。

工程３ 化合物７５の合成
化合物４３の代わりに化合物７４を用いた以外は、実施例４の工程１１と同様にして目的生成物を得て、そのまま次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４３２．２（Ｍ＋１）^＋。

工程４ 化合物７６の合成
化合物４４の代わりに化合物７５を用いた以外は、実施例４の工程１２と同様にして目的生成物である化合物７６を４３０ｍｇ得た。収率は４６．２％であった。ラセミ体である化合物７６（２０ｍｇ）を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）で分離して、目的物Ｒ−７６とＳ−７６をそれぞれ得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４１４．６（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．８４（ｓ，１Ｈ），７．３１−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．０２−６．９８（ｍ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），４．８７（ｂｒ ｓ，２Ｈ），４．４７−４．３４（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｓ，３Ｈ）。

実施例８ 置換された大環状化合物８３の調製

工程１ 化合物７８の合成
化合物７７（２．０ｇ、１０．６４ｍｍｏｌ）の重水（１５ｍＬ）溶液に、２００ｍｇのＰｄ／Ｃを加え、水素で５分間バブリングした後、１８０℃で２時間マイクロ波処理した。室温に冷却した後、メタノール３０ｍＬを加え、ろ液を回収し、回転乾燥して目的生成物である化合物７８を１．８５ｇ得た。収率は９１．５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝１９１．０（Ｍ＋１）^＋。

工程２ 化合物７９の合成
窒素雰囲気下、化合物７８（１．８５ｇ、１０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液３０ｍＬに、炭酸セシウム（４．２２ｇ、１３ｍｍｏｌ）と化合物４８（２．６１ｇ、１０ｍｍｏｌ）を順次加え、５０℃に加熱し、２時間反応させた後、濾過を行い、ジクロロメタンおよび酢酸エチルで濾過ケーキを洗浄し、回収して濾過し、目的生成物である化合物７９を２．１５ｇ得た。収率は６１．３％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３７１．１（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ８．０６（ｄｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，３．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０６−７．０４（ｍ，１Ｈ），６．３６−６．３１（ｍ，１Ｈ），４．７８（ｓ，２Ｈ），３．９６（ｓ，３Ｈ），１．６５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）。

工程３ 化合物８０の合成
化合物３４の代わりに化合物２４を用い、化合物４１の代わりに化合物７９を用いた以外は、実施例４の工程９と同様にして目的生成物である化合物７３を２．１ｇ得た。収率は６３．５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５４１．２（Ｍ＋１）^＋。

工程４ 化合物８１の合成
化合物４２の代わりに化合物８０を用いた以外は、実施例４の工程１０と同様にして目的生成物である化合物８１を１．２ｇ得た。収率は５８．７％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５２７．３（Ｍ＋１）^＋。

工程５ 化合物８２の合成
化合物４３の代わりに化合物８１を用いた以外は、実施例４の工程１１と同様にして目的生成物を得て、そのまま次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４２７．２（Ｍ＋１）^＋。

工程６ 化合物８３の合成
化合物４４の代わりに化合物８２を用いた以外は、実施例４の工程１２と同様にして目的生成物である化合物８３を４３０ｍｇ得た。収率は４６．２％であった。ラセミ体である化合物８３（２０ｍｇ）を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）で分離して、目的物Ｒ−８３とＳ−８３をそれぞれ得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４０９．２（Ｍ＋１）^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（δ／ｐｐｍ） ７．３１−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．０２−６．９８（ｍ，１Ｈ），５．７４−５．７２（ｍ，１Ｈ），４．８７（ｂｒ ｓ，２Ｈ），４．４７−４．３４（ｍ，２Ｈ），４．０７（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｓ，３Ｈ），１．７８（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）。

化合物の生物学的評価。
ＡＬＫチロシンキナーゼ活性の阻害実験
ＡＬＫチロシンキナーゼ活性の阻害は、公知の方法を用いて実証することができる。例えば、一方法では、化合物のバキュロウイルス発現ＡＬＫのキナーゼ活性を阻害する能力を試験することができる。この報告により、プロトコルはｔｒｋＡのＥＬＩＳＡプロトコル（Ａｎｇｅｌｅｓ，Ｔ．Ｓ．ら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９６，２３６，４９−５５）に対して適応させて、参照により本明細書に組み込まれる。グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）の融合タンパク質で産生された基質ホスホリパーゼＣ−γ（ＰＬＣ−γ）（例えば、Ｒｏｔｉｎ，Ｄ．ら、ＥＭＢＯ Ｊ．１９９２，１１，５５９−５６７の報告、参照により本明細書に組み込まれる）のリン酸化として、ユーロピウム標識された抗ホスホチロシン抗体を用いて検出することができ、時間分解蛍光（ｔｉｍｅ−ｒｅｓｏｌｖｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ（ＴＲＦ））によって測定することができる。この試験では、９６ウェルプレートを１００μＬ／ウェルの１０μｇ／ｍＬ基質（ホスホリパーゼＣ−γ、トリス緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）中）でコーティングした。次いで、試験混合物（総容量＝１００μＬ／ウェル）（２０ｎＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．２、１μＭＡＴＰ（Ｋｍレベル）、５ｎＭ ＭｎＣｌ_２、０．１％ ＢＳＡ、２．５％ ＤＭＳＯ、および様々な濃度の試験化合物からなる）を試験プレートに添加した。酵素（３０ｎｇ／ｍＬ ＡＬＫ）の添加により反応を開始させ、３７℃で１５分間進行させた。リン酸化された生成物の検出は、１００μＬ／ウェルのＥｕ−Ｎ１標識されたＰＴ６６抗体（Ｐｅｒｋｉｍ Ｅｌｍｅｒ＃ＡＤ００４１）の添加によって行うことができる。その後、３７℃で１時間インキュベートし、１００μＬの増強溶液（例えば、Ｗａｌｌａｃ＃１２４４−１０）を加えた。プレートを穏やかに攪拌し、３０分間後、得られた溶液の蛍光を測定した（例えば、ＥｎＶｉｓｉｏｎ ２１００マルチラベルプレートリーダー、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒから入手）。

次に、データ分析を行った。ＩＣ_５０の値は、化合物濃度に対する阻害百分率のｌｏｇ１０をプロットすることによって計算することができる。実施例におけるキナーゼ阻害作用の結果を表１に示す。ここで、ＡはＩＣ_５０≦１ｎＭを表し、ＢはＩＣ_５０が１〜１０ｎＭを表し、ＣはＩＣ_５０が１０〜１００ｎＭを表し、ＤはＩＣ_５０≧１００ｎＭを表す。

表１に示されるように、既存のＡＬＫ阻害剤であるクリゾチニブ及びＰＦ−０６４６３９２２と比較して、本発明の化合物は、ＡＬＫ Ｌ１１９６Ｍ突然変異体に対して優れた阻害活性（ＩＣ_５０が１０ｎＭ未満）を示し、本発明の化合物は、未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）に対して強い阻害性を有する。

細胞毒性実験
テトラゾリウム塩（ＭＴＳ）法（Ｍｏｓｍａｎ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ．６５：５５−６３，１９８３）を用いて本発明の化合物による腫瘍細胞の阻害作用を測定した。測定において、使用できる細胞株は、ＮＰＭ−ＡＬＫをコードする発現ベクターｐＣｌｎｅｏＴＭ(Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．，Ｍａｄｉｓｏｎ ＷＩ)を用いて安定にトランスフェクトした、ネズミ科のｐｒｏ−Ｂ細胞株であるＢａ／Ｆ３であり、その後、Ｇ４１８耐性細胞を選択した。式Ｉの化合物の阻害活性は、以下のように測定することができる。ＢａＦ３−ＮＰＭ−ＡＬＫ細胞（１５０００／マイクロプレートウェル）を９６ウェルマイクロプレートに移した後、ＤＭＳＯに溶解した試験化合物を、ＤＭＳＯの最終濃度が１％（ｖ／ｖ）を超えないように、一連の濃度（連続希釈液）で添加した。添加後、プレートを２日間インキュベートした。その間、試験化合物を使用しない対照培養物は細胞分裂サイクルを２回行うことができた。ＢａＦ３−ＮＰＭ−ＡＬＫ細胞の増殖は、ＹｏｐｒｏＴＭ染色（Ｔ Ｉｄｚｉｏｒｅｋら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １９９５，１８５，２４９−２５８）を用いて測定された。２５μＬの細胞溶解緩衝液（２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、ｐＨ４．０、２６．８ｎＭの塩化ナトリウム、０．４％のＮＰ４０、２０ｍＭのＥＤＴＡおよび２０ｍＭからなる）を各ウェルに添加した。細胞溶解は室温で６０分間以内に完了した。ＤＮＡに結合したＹｏｐｒｏの量は、例えばＣｙｔｏＦｌｕｏｒ ＩＩ ９６ウェルリーダー（ＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）によって測定した。ＩＣ_５０は、コンピュータ支援システムを利用して以下の式で決定することができる。
ＩＣ_５０＝［（ＡＢＳ試験−ＡＢＳ開始）／（ＡＢＳ対照−ＡＢＳ開始）］×１００
そのうち、ＡＢＳは吸光度である。このような実験で与えられるＩＣ_５０値は、注目した試験化合物の以下の濃度であり、これらの濃度による細胞数が対照（阻害剤を使用しない）で得られた細胞数よりも５０％低い。

実験結果を表２に示し、ＡはＩＣ_５０≦１ｎＭを表し、ＢはＩＣ_５０が１〜１００ｎＭを表し、ＣはＩＣ_５０≧１００ｎＭを表す。

表２に示すように、既存のＡＬＫ阻害剤であるクリゾチニブと比較して、本発明の化合物はすべて、ＡＬＫ突然変異体Ｌ１１９６Ｍを発現する癌細胞の増殖を阻害する優れた抗癌活性を示した。

肝臓ミクロソーム代謝実験
ミクロソーム実験：ヒト肝臓ミクロソーム：０．５ｍｇ／ｍＬ，Ｘｅｎｏｔｅｃｈ；ラット肝臓ミクロソーム：０．５ｍｇ／ｍＬ，Ｘｅｎｏｔｅｃｈ；補酵素（ＮＡＤＰＨ／ＮＡＤＨ）：１ｍＭ，Ｓｉｇｍａ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ；塩化マグネシウム：５ｍＭ、１００ｍＭのリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）。
ストック溶液の調製：一定量の実施例化合物２〜８の粉末を正確に秤量し、それぞれＤＭＳＯで５ｍＭに溶解した。
リン酸塩緩衝液（１００ｍＭ，ｐＨ７．４）の調製：予め用意した０．５Ｍのリン酸二水素カリウム１５０ｍＬと０．５Ｍのリン酸水素二カリウム溶液７００ｍＬとを混合し、更に０．５Ｍのリン酸水素二カリウム溶液で混合液のｐＨ値を７．４に調整し、使用前に超純水で５倍に希釈し、塩化マグネシウムを加えて、リン酸カリウム１００ｍＭ、塩化マグネシウム３．３ｍＭを含む、ｐＨが７．４であるリン酸塩緩衝液（１００ｍＭ）を得た。
ＮＡＤＰＨ再生系溶液（６．５ｍＭのＮＡＤＰ、１６．５ｍＭのＧ−６−Ｐ、３Ｕ／ｍＬのＧ−６−ＰＤ、３．３ｍＭの塩化マグネシウムを含む）を調製し、使用前に湿った氷上に置いた。
停止液の調製：５０ｎｇ／ｍＬの塩酸プロプラノロールと２００ｎｇ／ｍＬのトルブタミド（内部標準）を含むアセトニトリル溶液。２５０５７．５μＬのリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を５０ｍＬ遠心管に入れ、ヒト肝臓ミクロソーム８１２．５μＬをそれぞれ添加し、均一に混合して、タンパク質濃度が０．６２５ｍｇ／ｍＬである肝臓ミクロソーム希釈液を得た。２５０５７．５μＬのリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を５０ｍＬ遠心管に入れ、ＳＤラット肝臓ミクロソーム８１２．５μＬをそれぞれ添加し、均一に混合して、タンパク質濃度が０．６２５ｍｇ／ｍＬの肝臓ミクロソーム希釈液を得た。

サンプルのインキュベーション：対応する化合物のストック溶液を、７０％アセトニトリルを含む水溶液でそれぞれ０．２５ｍＭに希釈し、作業溶液として使用した。３９８μＬのヒト肝臓ミクロソーム或いはラット肝臓ミクロソームの希釈液を９６ウェルインキュベーションプレート（Ｎ＝２）にそれぞれ加え、０．２５ｍＭの作業溶液２μＬにそれぞれ添加して均一に混合した。
代謝安定性アッセイ：予め冷却した停止液３００μＬを９６ウェルディープウェルプレートの各ウェルに添加し、氷上に置いて停止プレートとした。９６ウェルインキュベーションプレートおよびＮＡＤＰＨ再生系を３７℃の水浴に置いて、１００ｒｐｍで振とうし、５分間プレインキュベートした。インキュベーションプレートの各ウェルから８０μＬのインキュベーション溶液を取出し、停止プレートに加え、均一に混合し、ＮＡＤＰＨ再生系溶液２０μＬを補充して０分間サンプルとした。インキュベーションプレートの各ウェルに８０μＬのＮＡＤＰＨ再生系溶液を更に添加し、反応を開始し、時間を計り始めた。対応する化合物の反応濃度は１μＭで、タンパク濃度は０．５ｍｇ／ｍＬである。反応の１０分間、３０分間、９０分間に、それぞれ１００μＬの反応液を採取し、停止プレートに加え、３分間ボルテックス操作を行い、反応を停止させた。５０００×ｇ、４℃の条件下で停止プレートを１０分間遠心分離した。予め１００μＬの蒸留水を入れた９６ウェルプレートに、１００μＬの上清を加え、均一に混合し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いてサンプルを分析した。
データ分析：ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムによって対応する化合物および内部標準のピーク面積を検出し、化合物と内部標準のピーク面積の比を計算した。時間に対する化合物残存量の百分率の自然対数をプロットすることによって、傾きを測定して、以下の式に従ってｔ_１／２及びＣＬ_ｉｎｔを計算した。ここで、Ｖ／Ｍは１／タンパク濃度に等しい。

本発明の化合物を上記の手順に従って分析し、その結果を表３に示す。

実験結果から、既存のＰＦ−０６４６３９２２と比較して、本発明の化合物がヒト肝ミクロソーム実験およびラット肝ミクロソーム実験の両方において優れた代謝安定性を示すことが分かる。

ラットの薬物動態実験
実験目的：ラットにＰＦ−０６４６３９２２、実施例の化合物を投与した後、本発明の化合物の薬物動態学的挙動を研究する。
実験動物：
種および系統：ＳＤ ラットの等級：ＳＰＦ級
性別および数量：男性、６匹
重量範囲：１８０〜２２０ｇ（実際の重量範囲は１８７〜１９７ｇ）
供給：Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｓｉｐｐｒ−ＢＫ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ

実験プロセス：
血液サンプルを採取した前に、２Ｍのフッ化ナトリウム溶液（エステラーゼ阻害剤）２０μＬをＥＤＴＡ−Ｋ２抗凝固剤チューブに予め添加し、８０℃のオーブンで乾燥させた後、４度の冷蔵庫に置いた。
ラット（オス、体重１８７〜１９７ｇ）をランダムに２グループに分け、実験の１日前の午後から一晩絶食させたが、水を自由に飲ませ、投与後の４時間に食物を与えた。ＡグループにはＰＦ−０６４６３９２２ ３ｍｇ／ｋｇ、Ｂグループには実施例化合物３ｍｇ／ｋｇを投与した後、１５分間、３０分間、１時間、２時間、３時間、５時間、８時間および１０時間後にそれぞれラット眼窩静脈から１００〜２００μＬ程度採血し、ＥＤＴＡ−Ｋ２抗凝固剤を含む０．５ｍＬのエッペンドルフチューブ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ Ｔｕｂｅ）に入れ、直ちに均一に混合し、抗凝固した後、できるだけ早くチューブを逆さまにして５〜６回混和した。その後、採血した後、アイスボックスに置き、血液サンプルを３０分間内に４０００ｒｐｍ、１０分間、４℃の条件で遠心分離し、すべての血漿を回収して直ちに−２０℃で保存した。全ての時点のサンプルを採取した後に、各時点で薬物の血中濃度を測定した。

上記により得られた投与後の平均血中濃度−時間データに基づいて、Ｗｉｎｎｏｎｉｎソフトウェアを使用して、非コンパートメント統計モーメント理論に従って、雄性のＳＤラットに胃内投与でＰＦ−０６４６３９２２（３ｍｇ／ｋｇ）および実施例化合物（３ｍｇ／ｋｇ）をそれぞれ投与した後の薬物動態関連パラメータを算出した。
実験結果から、ＰＦ−０６４６３９２２と比較して、本発明の化合物は優れた活性を有し、且つ優れた薬物動態学的性質を有することから、未分化リンパ腫キナーゼを阻害する化合物としてより好適であり、さらに癌治療薬の調製に適していることが示された。

これらの実施例は本発明を説明するためのものに過ぎず、本発明の範囲を限定するものではないことを理解すべきである。以下の実施例における具体的な条件を記載しない実験方法は、通常、慣用の条件または製造業者の推奨条件に従う。特に説明のない限り、部および百分率は重量部および重量百分率である。

上記の内容は、特定の好ましい実施形態を参照して本発明に対するさらなる詳細な説明であるが、本発明の実施形態がこれらの記載に限定されない。当業者にとって明らかであるように、本発明の精神から逸脱することなく様々な変更や修正を加えることができることは、すべてが本発明の保護範囲内にあるとみなされるべきである。

Claims (7)

1. 下記化合物群から選択された化合物またはその薬学的に許容される塩。
   
2. 前記の化合物は、以下の化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の化合物。
   
3. 前記の化合物は、以下の化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の化合物。
   
4. 薬学的に許容される担体と、
   請求項１〜３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩とを含む、医薬組成物。
5. 癌、心臓血管疾患、炎症、感染、免疫疾患、細胞増殖性疾患、ウイルス性疾患、代謝性疾患または臓器移植のための薬剤である他の治療薬をさらに含む、請求項４に記載の医薬組成物。
6. 請求項１〜３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、未分化リンパ腫キナーゼ阻害のための医薬組成物。
7. 請求項１〜３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、ＡＬＫ変異関連疾患の治療および／または予防のための医薬組成物。