JP6790013B2 - 細胞サンプルのサイトメトリー解析方法 - Google Patents
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Description
例えば、蛍光染色された細胞の画像ベース分析用のサイトメトリー解析方法が、サイトメトリーの分野では知られている。古典サイトメトリーでよく知られた画像ベースサイトメトリーのパラメータまたは特徴のほかに、利用できるパラメータまたは特徴の数が増加しているのは、蛍光顕微鏡などによって微視的に記録された細胞サンプルの各画像のオブジェクトサイズ(特に細胞サイズ)および他の形態学的パラメータが、古典サイトメトリーで知られたパラメータ(通常、色(または波長)、強度および散乱光信号)と共に得られるためである。
‐細胞サンプルの移動中に、細胞サンプルのサブ領域の少なくとも1つ以上の画像を、透過モードまたは蛍光モードで記録し、かつ、細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像を、少なくとも1つの顕微鏡カメラを用いて、蛍光モードで、特に落射蛍光モードで、好ましくは少なくとも部分的に記録し、画像を好ましくはデジタル化する工程と、
‐透過モードまたは蛍光モードの細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像と、蛍光モードの細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像とを、好ましくは局所的に互いに関連付ける工程と、
‐a)細胞サンプルの細胞または細胞成分の位置および/または輪郭を透過モードの画像において検出し、その後、蛍光モードで記録された画像の検出強度を細胞サンプルの細胞または細胞成分の検出位置および/または輪郭に応じて分析する、および/またはb)細胞サンプルの細胞または細胞成分の位置および/または輪郭を、蛍光モードの画像において検出し、その後、透過モードで記録された画像の検出強度を細胞サンプルの細胞または細胞成分の検出位置および/または輪郭に応じて分析する、および/またはc)細胞サンプルの細胞または細胞成分の位置および/または輪郭を蛍光モードの画像において検出し、その後、さらなる蛍光モードで記録された画像の検出強度を細胞サンプルの細胞または細胞成分の検出位置および/または輪郭に応じて分析する工程。
透過モードおよび蛍光モードで画像を記録する顕微鏡の好ましくは静止光学系に対する細胞サンプルの連続した、好ましくは均一の移動に応じて、細胞サンプルのサブ領域の画像または写真を連続して記録し、所定の一定の間隔で保存し、その後、それに続く方法工程で分析し、評価する。
さらに、一実施形態の本方法は、細胞サンプルのサブ領域の画像が透過モードおよび蛍光モードで記録された後に、さらなる画像が、細胞サンプルの先行するサブ領域に隣接した、特に直接隣接した細胞サンプルのサブ領域について透過モードおよび/または蛍光モードで記録されるという事実によって区別される。さらなる画像は、特に、細胞サンプルにおける先行するサブ領域、好ましくは1番目のサブ領域としての隣接するサブ領域と同様の方法で記録される。
また、ある構成においては、光学系または撮像システムの色の縦収差の特性を利用することによって焦点がずれた画像を得ることができる。この場合、ある構成においては、サンプルは、その後、波長の異なる光で照らされる。あるいは、RGBカメラによって、または、細胞サンプルと少なくとも1つのカメラとの間の光路内の色フィルタを用いて、画像が記録される。
得られたまたは作成された位相コントラスト画像によって、画像を用いて、個々の細胞サンプル中の細胞または細胞成分の位置および/または輪郭を決定することが可能である。細胞および/または細胞成分に関する位置および/または輪郭情報は、局所的に関連付けられた蛍光画像における強度を測定することを可能にし、これらの測定値は、識別された細胞サンプルの細胞および/または細胞成分と関連付けられる。特に、様々な細胞タイプまたは細胞特性を、強度測定値を用いて適切に分類することができる。
本方法の実行中に、サンプル、または細胞サンプルを、全体領域が顕微鏡のカメラによって連続的に撮像されるように、固定対物レンズの前方のXY平面内で移動する。細胞サンプルは、XY平面内で連続的に、好ましくは直線的に移動する。このようにして得られた細胞サンプルのサブ領域の画像は、必要に応じて、より大きな、シームレス画像に融合され、部分写真または部分画像は、それに応じて融合される。
こうして、本方法の実行のために、少なくとも2つのZ面で、透過モードで、同時にまたは素早く連続的に透過光が検出される。
デジタルカメラ28によって記録された画像は、コンピュータ32に送信され、デジタル化された画像は、コンピュータ32によって保存および処理されることができる。同時に、コンピュータ32は、モータ22の制御装置として構成されており、テーブル18が同期して制御され、所定の速度で移動するように、モータ22と接続する。その結果、サンプルキャリア16の動きは、デジタルカメラ28によって記録された画像と位置的に正確に同期する。
サブ領域の細胞サンプルの画像が透過モードで記録された後に、その後の蛍光モードで細胞サンプルを照らすために、蛍光が生成される光源34が、テーブル18の下に配置される。生成された蛍光によって、また、例えば励起フィルタを通過した後、生成された光は、細胞サンプルに向かって、すなわちテーブル18の方向にビームスプリッタ36によって偏向または反射される。その結果、短波励起光が、サンプルキャリア16の細胞サンプルに当たる。励起光を吸収した直後により長い波の蛍光を発するように、細胞サンプルに蛍光標識等を付与することにより、放射された蛍光がビームスプリッタ36に当たり、ビームスプリッタ36の半透明性のために、より長い波の蛍光が偏向することなくビームスプリッタ36を通過し、場合によってはブロッキングフィルタ(blocking filter)を通過した後、デジタルカメラ28によって記録される。
さらに、細胞サンプルのサイトメトリー評価のために、サブ領域の時間オフセット画像は、細胞サンプルの変位移動を考慮に入れて、時間オフセットに応じて変更され、この結果、それぞれのサブ領域についての画像周期の4つの画像は、互いに局所的に関連付けられる。このデジタルまたは仮想画像変位を使用して、画像1a、2a、3a、4aは、例えば、図2の下側に示すように、サブ領域aに対して、互いに局所的に関連付けられる。画像1a、2a、3aそれぞれが、サブ領域aを完全に覆わない場合には、問題のサブ領域と重なる隣接するサブ領域からの画像1b、2b、3bが、同様に、サブ領域aに比例的に関連付けられる。その結果、サブ領域aは完全に撮像される。これは、画像1b、2b、3b、4bについても、画像1c、2c、3c、ならびに、サブ領域b、c、およびdの画像周期におけるさらなる画像についても同様に起きる。
この場合、細胞サンプルのサブ領域の画像は、異なるチャネルに記録され、サブ領域は、透過モードおよび蛍光モードで交互に記録される。図3に示す処理では、チャネル1の顕微鏡システムの透過モードで画像が最初に記録され、サンプルキャリアは引き続き移動する。細胞サンプルを有するサンプルキャリアの位置データに基づいて、サンプルキャリア内またはサンプル中の画像位置が決定される。ここでは、細胞サンプルを有するサンプルキャリアの動きを制御部により制御することにより、制御部からの制御データに基づいて画像位置を判定することができる。続いて、明るい透過モードでのサブ領域の撮像のために、コントラスト最適化などのデジタル画像処理が実行される。その後、適切なオブジェクトマスクが、好ましくは自動的に、適切な認識アルゴリズムなどを使用して、画像チャネル1における細胞または細胞内構造の輪郭が検出される。
これらの図は、透過およびセグメンテーションを伴う画像に基づくサイトメトリー解析と、細胞周期のG1期およびG2期の(低信号での)蛍光の分析とを示す。ここに示した例Aの画像および評価は、照明時間100msでの細胞サンプルの増分移動の間に行った。第2の例Bでは、細胞サンプルを増分移動させ、照明時間1msで照らした。例Cでは、細胞サンプルを連続移動させ、照明時間は50μsであった。
Claims (15)
- 顕微鏡下で複数の細胞サンプルを検査するための顕微鏡による複数の細胞サンプルのサイトメトリー解析方法であって、前記顕微鏡は、透過モードおよび蛍光モードで操作可能であり、または操作され、少なくとも1つの細胞サンプルは少なくとも1つの蛍光標識を有し、該方法が、
‐前記細胞サンプルを、少なくとも1つの顕微鏡カメラを備えた前記顕微鏡の光学系に対して、1つの平面内で連続的に移動させる工程と、
‐前記細胞サンプルの移動中に、前記細胞サンプルのサブ領域の少なくとも1つ以上の画像を、前記透過モードで記録し、かつ、前記細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像を、前記少なくとも1つの顕微鏡カメラを用いて、前記蛍光モードで記録する工程と、
‐前記透過モードの前記細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像と、前記蛍光モードの前記細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像とを、互いに関連付ける工程と、
‐前記細胞サンプルの細胞または細胞成分の位置および/または輪郭を、前記透過モードの画像において検出し、その後、前記蛍光モードで記録された画像の検出強度を、前記細胞サンプルの細胞または細胞成分の検出位置および/または輪郭に応じて分析する工程と、を含む方法。 - 顕微鏡下で複数の細胞サンプルを検査するための顕微鏡による複数の細胞サンプルのサイトメトリー解析方法であって、前記顕微鏡は、透過モードおよび蛍光モードで操作可能であり、または操作され、少なくとも1つの細胞サンプルは少なくとも1つの蛍光標識を有し、該方法が、
‐前記細胞サンプルを、少なくとも1つの顕微鏡カメラを備えた前記顕微鏡の光学系に対して、1つの平面内で連続的に移動させる工程と、
‐前記細胞サンプルの移動中に、前記細胞サンプルのサブ領域の少なくとも1つ以上の画像を、前記透過モードで記録し、かつ、前記細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像を、前記少なくとも1つの顕微鏡カメラを用いて、前記蛍光モードで記録する工程と、
‐前記透過モードの前記細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像と、前記蛍光モードの前記細胞サンプルの同じサブ領域の少なくとも1つ以上の画像とを、互いに関連付ける工程と、
前記細胞サンプルの細胞または細胞成分の位置および/または輪郭を、前記蛍光モードの画像において検出し、その後、前記透過モードで記録された画像の検出強度を、前記細胞サンプルの細胞または細胞成分の検出位置および/または輪郭に応じて分析する工程と、を含む方法。 - 前記透過モードの前記細胞サンプルのサブ領域の少なくとも1つの画像が、第1の平面に記録され、前記透過モードの前記細胞サンプルのサブ領域の少なくとも1つの画像が、前記第1の平面とは異なる第2の平面に、記録されることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記細胞サンプルのサブ領域の画像が前記透過モードおよび前記蛍光モードで記録された後に、さらなる画像が、前記細胞サンプルの先行するサブ領域に隣接した前記細胞サンプルのサブ領域について前記透過モードおよび前記蛍光モードで記録される、請求項1〜3のうちのいずれかに記載の方法。
- 前記細胞サンプルの複数のサブ領域についての前記透過モードの細胞サンプルの画像が、すべて、前記透過モードの1つの完全な画像に合成されること、および、前記細胞サンプルの複数のサブ領域についての前記蛍光モードの細胞サンプルの画像が、すべて、前記蛍光モードの1つの完全な画像に合成されることを特徴とする、請求項1から4のいずれかに記載の方法。
- 前記透過モードの画像および前記蛍光モードの画像、または、前記透過モードの前記完全な画像および前記蛍光モードの前記完全な画像を分析することを特徴とする、請求項5に記載の方法。
- 位相コントラスト画像が、前記透過モードの画像または前記透過モードの前記完全な画像から生成されることを特徴とする、請求項6に記載の方法。
- 前記細胞サンプルの複数のサブ領域についての前記蛍光モードの細胞サンプルの画像が、すべて、前記蛍光モードの1つの完全な画像に合成されることを特徴とする、請求項1〜7のいずれかに記載の方法。
- 前記蛍光モードの画像、または、前記蛍光モードの前記完全な画像を分析することを特徴とする、請求項8に記載の方法。
- 時間的にオフセットされた前記透過モードの細胞サンプルのサブ領域の少なくとも1つの画像が、当該時間オフセットに応じて、または、所定の第1画像と時間オフセット画像との間の少なくとも1つの顕微鏡カメラについての前記細胞サンプルの相対的な変位に応じて、前記透過モードの前記細胞サンプルのサブ領域の所定の第1画像について修正される、請求項1〜7のうちのいずれかに記載の方法。
- 時間的にオフセットされた前記蛍光モードの細胞サンプルのサブ領域の少なくとも1つの画像が、当該時間オフセットに応じて、または、所定の第1画像と時間オフセット画像との間の少なくとも1つの顕微鏡カメラについての前記細胞サンプルの相対的な変位に応じて、前記蛍光モードの前記細胞サンプルのサブ領域の所定の第1画像について修正される、請求項1〜10のうちのいずれかに記載の方法。
- 前記所定の第1画像と前記時間オフセット画像とが、前記細胞サンプルの同じサブ領域に関連付けられることを特徴とする、請求項10または11に記載の方法。
- 前記細胞サンプルの動きが、前記細胞サンプルのサブ領域の画像の時系列と同期することを特徴とする、請求項1から12のいずれかに記載の方法。
- 前記細胞サンプルのサブ領域の少なくとも2つの画像が、蛍光モードで記録されることを特徴とする、請求項1から13のいずれかに記載の方法。
- 前記蛍光モードとは、落射蛍光モードである、請求項1から14のいずれかに記載の方法。
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US4661913A (en) * | 1984-09-11 | 1987-04-28 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for the detection and classification of articles using flow cytometry techniques |
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US8885913B2 (en) * | 1999-01-25 | 2014-11-11 | Amnis Corporation | Detection of circulating tumor cells using imaging flow cytometry |
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US7450229B2 (en) * | 1999-01-25 | 2008-11-11 | Amnis Corporation | Methods for analyzing inter-cellular phenomena |
US6249341B1 (en) | 1999-01-25 | 2001-06-19 | Amnis Corporation | Imaging and analyzing parameters of small moving objects such as cells |
US6743576B1 (en) * | 1999-05-14 | 2004-06-01 | Cytokinetics, Inc. | Database system for predictive cellular bioinformatics |
AU2002324422A1 (en) * | 2001-02-21 | 2002-12-23 | Amnis Corporation | Method and apparatus for labeling and analyzing cellular components |
CN2530263Y (zh) | 2002-03-08 | 2003-01-08 | 中国科学院上海光学精密机械研究所 | 检测生物荧光的光纤传感器 |
JP4752208B2 (ja) | 2004-07-23 | 2011-08-17 | 株式会社ニコン | 光学顕微鏡システムおよびこれを用いた試料動画像生成方法 |
CN104849228B (zh) * | 2006-06-29 | 2018-04-13 | 皇家飞利浦电子股份有限公司 | 使用基于uv 光的dna 成像细胞术来检测和/或诊断癌症的体外方法 |
WO2008005426A2 (en) * | 2006-06-30 | 2008-01-10 | University Of South Florida | Computer-aided pathological diagnosis system |
JP4937850B2 (ja) * | 2007-07-03 | 2012-05-23 | オリンパス株式会社 | 顕微鏡システム、そのvs画像生成方法、プログラム |
JP5407015B2 (ja) * | 2008-07-10 | 2014-02-05 | 国立大学法人徳島大学 | 画像処理装置、画像処理方法、コンピュータ実行可能な画像処理プログラム、及び顕微鏡システム |
DE102008059788B4 (de) | 2008-12-01 | 2018-03-08 | Olympus Soft Imaging Solutions Gmbh | Analyse und Klassifizierung insbesondere biologischer oder biochemischer Objekte auf Basis von Zeitreihen-Bildern, anwendbar bei der zytometrischen Time-Lapse-Zellanalyse in der bildbasierten Zytometrie |
US8849006B2 (en) | 2009-03-25 | 2014-09-30 | Quorum Technologies Inc. | Darkfield imaging system and methods for automated screening of cells |
JP5663089B2 (ja) * | 2010-08-05 | 2015-02-04 | アボット ポイント オブ ケア インコーポレイテッド | 顕微鏡画像からの自動全血試料分析のための方法および装置 |
US8941062B2 (en) * | 2010-11-16 | 2015-01-27 | 1087 Systems, Inc. | System for identifying and sorting living cells |
DE102011075369B4 (de) | 2011-05-05 | 2022-02-17 | Carl Zeiss Microscopy Gmbh | Verfahren und Vorrichtung zur Objektabbildung |
JP5734758B2 (ja) * | 2011-06-16 | 2015-06-17 | オリンパス株式会社 | レーザー顕微鏡 |
WO2013040686A1 (en) | 2011-09-21 | 2013-03-28 | Huron Technologies International Inc. | Slide scanner with a tilted image plane |
US9335247B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-05-10 | Cytonome/St, Llc | Assemblies and methods for reducing optical crosstalk in particle processing systems |
US20140334696A1 (en) * | 2013-05-13 | 2014-11-13 | Optra Systems Inc. | Cloud-based method and system for digital pathology |
US9779500B2 (en) * | 2013-07-03 | 2017-10-03 | Konica Minolta, Inc. | Image processing device, pathological diagnosis support system, image processing program, and pathological diagnosis support method |
JP6454478B2 (ja) * | 2013-09-12 | 2019-01-16 | オリンパス株式会社 | 心筋細胞への分化をモニタリングする方法 |
US10041949B2 (en) * | 2013-09-13 | 2018-08-07 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Multiplexed imaging of tissues using mass tags and secondary ion mass spectrometry |
KR20160083884A (ko) * | 2013-11-01 | 2016-07-12 | 스페리움 바이오메드 에스.엘. | 치료제 및 미용제의 경피 전달을 위한 봉입체 |
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WO2016153819A1 (en) * | 2015-03-25 | 2016-09-29 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Single cell analysis using secondary ion mass spectrometry |
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JPWO2017169083A1 (ja) * | 2016-03-31 | 2019-02-07 | 富士フイルム株式会社 | 画像撮像装置及び画像撮像方法 |
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