JP6574436B2 - アルパインワームウッド抽出物を含む組成物 - Google Patents
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Description
)の一種であるアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用組成物を提供する。
(1)アルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)を、水、有機溶媒、またはこれらの組合せにより抽出するステップを含む製造方法によって製造されてよい。
アルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)の花の部分を収穫した後、熱風乾燥し、これを粉砕して粉末化した。このような粉末を、エタノール/水の溶液で抽出した後、真空蒸留(vacuum distillation)を通じてエタノールを除去した。このような濃縮物に、グリセリンと保存剤を添加し、最終濾過をしてアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物を収得した。下記実験においては、前記のような方法で製造されたアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物(ALPAFLOR(登録商標)ARTEMISIA AO)を、DSM社(DSM Nutritional Products Ltd,4002 Basel,Switzerland)から購入して使用した。
(1)細胞の培養
微生物資源センター(Korean Collection for Type Culture,KCTC)に寄託されているメラニン形成細胞(KaMC)(KCTC12015BP)を、6ウェルプレート(well plate)にヒトメラノサイト増殖サプリメント(Human Melanocyte Growth Supplement,HMGS)(Gibco BRL,NY,USA)を添加したM‐254培地(Gibco BRL,NY,USA)において、2日間隔で培地を交換し、37℃、5%CO2培養器において、密度がプレート面積の95%を占めるまで(95% confluent)細胞を培養した。
前記培養されたメラニン形成細胞が6ウェルプレートにおいて80%程度の密度となった際(約80% confluent)、色素沈着物質(Endothelin 1,EDN1)10nMと、実施例1によるアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物を濃度別(0,0.1,1,2ppm)に5日間培養した。色素沈着物質と実施例1によるアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物を処理しなかったものを対照群とした。
6ウェルプレートで培養されたメラニン形成細胞(KaMC)にアクターゼ溶液(Accutase solution)(Millipore,CA,USA)400μlを入れ、1分間攪拌(agitation)した後、M‐254培地600μlを追加して、合計1mlの細胞含有培地を回収した。その後、12,000rpmで15分間遠心分離した後、上澄み液を捨て、ペレット(pellet)にMCLライシスバッファー(lysis buffer)(Sigma‐Aldrich,St.Louis,USA)20μlを入れ、よく混ぜた後、さらに12,000rpmで15分間遠心分離した後、上澄み液と細胞沈殿物を別途分離した。
実験例1の(3)で分離された細胞沈殿物に1N NaOH(Sigma‐Aldrich,St.Louis,USA)70μlを入れ、55℃で15分間溶解させた後、96ウェルプレートに30μlずつ2つに分注して、475nmにおける吸光度を測定した。測定前に試験管に入れた時の写真と、前記定量したタンパク質量を利用して数学式1に基づいてメラニンの量を算出した結果を、図1に示した。
実験例1の(3)において定量されたタンパク質量を根拠に、細胞上澄み液に含まれているタンパク質量20μgを96ウェルプレートに入れ、PBS(Phosphate Buffered Saline,without CaCl2 & MgCl2,Welgene,Korea)を追加して、最終容量100μlを作った。その後、2mg/mlの濃度でPBSに溶かしたL‐DOPA(L‐3,4‐dihydroxyphenylalanine)(Sigma‐Aldrich,St.Louis,USA)溶液100μlをさらに添加した。L‐DOPAからチロシナーゼの作用により生成されたドーパクロム(dopachrome)の生成量を、吸光度を利用して比較した。L‐DOPAの添加後、37℃でインキュベーションしつつ、10分間隔で475nmにおける吸光度を測定した。前記実験例1の(3)において定量したタンパク質量を利用して、数学式2に基づいてチロシナーゼの量を算出した結果を図2に示した。
実施例1のアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物8mg、ビタミンE9mg、ビタミンC9mg、パーム油2mg、植物性硬化油8mg、黄蝋4mg、およびレシチン9mgを通常の方法に従って混合し、軟質カプセル充填液を製造する。1カプセルあたり400mgずつ充填して、軟質カプセルを製造する。そして、これとは別に、ゼラチン66重量部、グリセリン24重量部、およびソルビトール液10重量部の比率で軟質カプセルシートを製造して、前記充填液を充填させて、本発明の一側面による組成物400mgが含有された軟質カプセルを製造する。
実施例1のアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物8mg、ビタミンE9mg、ビタミンC9mg、ガラクトオリゴ糖200mg、乳糖60mg、および麦芽糖140mgを混合し、流動層乾燥機を利用して顆粒した後、糖エステル(sugar ester)6mgを添加する。これら組成物500mgを通常の方法で打錠して、錠剤を製造する。
実施例1のアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物8mg、ビタミンE9mg、ビタミンC9mg、ブドウ糖10g、クエン酸0.6g、および液状オリゴ糖25gを混合した後、精製水300mlを加えて、各瓶に200mlずつになるように充填する。瓶に充填した後、130℃で4〜5秒間殺菌して、ドリンク剤を製造する。
実施例1のアルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)抽出物8mg、ビタミンE9mg、ビタミンC9mg、無水結晶ブドウ糖250mg、および澱粉550mgを混合し、流動層造粒機を使用して顆粒に成形した後、包に充填して顆粒剤を製造する。
下記表2に記載された組成に従い、通常の方法で注射剤を製造した。
下記表4に記載された組成に従い、通常の方法で健康飲料を製造した。
下記表5に記載された組成に従い、通常の方法で柔軟化粧水を製造した。
Claims (4)
- アルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)の花の抽出物を有効成分として含み、
アルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)の花の抽出物は、水とエタノールの混合物の抽出物であり、組成物の総体積を基準として1ppm以上10ppm以下の濃度である、チロシナーゼ活性抑制による美白用組成物。 - アルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)の花の抽出物を有効成分として含み、
アルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)の花の抽出物は、水とエタノールの混合物の抽出物であり、組成物の総体積を基準として1ppm以上10ppm以下の濃度である、
チロシナーゼ活性抑制によるメラニン生成抑制用、またはメラニン減少用組成物。 - アルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)の花の抽出物を有効成分として含み、
アルパインワームウッド(Artemisia Umbelliformis)の花の抽出物は、水とエタノールの混合物の抽出物であり、組成物の総体積を基準として1ppm以上10ppm以下の濃度である、
チロシナーゼ活性抑制による色素沈着抑制用組成物。 - 組成物は、薬学、食品または化粧料組成物である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の組成物。
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