JP6571650B2 - アミノ酸誘導体 - Google Patents
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Description
配列番号1:PylRSメタノサルシナ・マゼイ(Methanosarcina mazei)WTヌクレオチド配列
配列番号2:PylRSメタノサルシナ・マゼイ(Methanosarcina mazei)WTアミノ酸配列
配列番号3:PylRSメタノサルシナ・マゼイ(Methanosarcina mazei)、Y384F突然変異体ヌクレオチド配列
配列番号4:PylRSメタノサルシナ・マゼイ(Methanosarcina mazei)、Y384F突然変異体アミノ酸配列
配列番号5:tRNApylメタノサルシナ・マゼイ(Methanosarcina mazei)Go1
配列番号6:U6snRNAプロモータ
配列番号7:U6−tRNApyl構築物
配列番号8:GFPヌクレオチド配列
配列番号9:GFPアミノ酸配列
配列番号10:GFPY40ヌクレオチド配列
配列番号11:GFPY40アミノ酸配列
配列番号12:抗Her2(4D5)γヌクレオチド配列
配列番号13:抗Her2(4D5)γアミノ酸配列
配列番号14:抗Her2(4D5)γ_K274アンバーヌクレオチド配列
配列番号15:抗Her2(4D5)γ_K274アンバーアミノ酸配列
配列番号16:抗Her2(4D5)κヌクレオチド配列
配列番号17:抗Her2(4D5)κアミノ酸配列
用語「アミド」は、−C(=O)−NH−結合を指す。
Z=結合、CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O、S又はCH−NH2であり;
aは、3〜7の整数であり;
bは、0又は1〜7の整数であり;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン)
の構造を有する。
(2S)−2−アミノ−6−{[(2−アジドエトキシ)カルボニル]アミノ}ヘキサン酸
(2S)−2−アミノ−5−{[(2−アジドエトキシ)カルボニル]アミノ}ペンタン酸
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=3又は5〜7の整数;及び
b=1〜4の整数である)
の構造を有する。
Y=CH2、NH、O又はS;
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=1〜7の整数;
ZがNH、O又はSであるとき、bが2〜7の整数である以外は、b=1〜7の整数であり、ただし、a+bは、2〜8の範囲であり;
d=1〜4の整数)
の構造を有する。
(2S)−2−アミノ−3−[(2−{[(2−アジドエトキシ)カルボニル]アミノ}エチル)スルファニル]プロパン酸
Y=CH2、NH、O又はS;
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=1〜7の整数;
ZがNH、O又はSであるとき、bが2〜7の整数である以外は、b=1〜7の整数であり、ただし、a+bは、2〜8の範囲であり、
d=1〜4の整数)
の構造を有する。
(2S)−2−アミノ−3−(2−{[(2−アジドエトキシ)カルボニル]アミノ}エトキシ)プロパン酸
R=20の天然アミノ酸のうちの1つの側鎖;
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=1;及び
b=1〜4の整数)
の構造を有する。
(2S)−2−アミノ−3−(2−{[(2−アジドエトキシ)カルボニル]アミノ}アセトアミド)プロパン酸
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール及びシクロアルキン;
a=4又は5;及び
b=1〜4の整数)
の構造を有する。
(2S)−2−アミノ−7−[(2−アジドエチル)カルバモイル]ヘプタン酸
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
R1=H、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;
R2=アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;
R3=H、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;及び
a=1)
の構造を有する。
(2S)−2−アミノ−3−(4−アジド−2−{[(プロプ−2−エン−1−イルオキシ)カルボニル]アミノ}ブタンアミド)プロパン酸
スキーム4を参照されたい。
本明細書に開示するピロリシン類似体は、組み換えタンパク質に組み込むことができる。特に、組み換えタンパク質への類似体の部位特異的組み込みは、アンバー抑制によって達成することができ、この場合、ナンセンス(アンバー)コドンを、組み換えタンパク質コード化ヌクレオチド配列内のピロリシン類似体を挿入しようとする部位に挿入する。突然変異したヌクレオチド配列を、PylRS及びtRNApylをコード化する1つ又は複数のプラスミドと一緒に、無細胞発現系の細胞に挿入する。
本発明のピロリシン類似体を組み込んだタンパク質を、官能化タンパク質コンジュゲートの調製に用いてもよい。非天然アミノ酸を組み込んだタンパク質と結合することができる分子としては、(i)他のタンパク質、例えば、抗体、特にモノクローナル抗体;(ii)ポリマー、例えば、当該系に半減期延長をもたらし得るPEG基又は他の基;(iv)細胞傷害性薬剤、例えば、オーリスタチン(Auristatin)F;並びに(v)薬物部分、例えば、ドキソルビシン及び放射性同位体含有部分が挙げられる。さらに、これらの修飾タンパク質は、上記の効力のある化合物の標的化送達のために薬物又はヌクレオチドと結合することができる。
標的タンパク質をPEG部分に結合してもよい。PEG部分を抗体薬物コンジュゲートに組み込んでもよい。PEG部分は、典型的に、5kDa〜40kDaの分子量を有し得る。より好ましくは、PEG部分は、約20kDaの分子量を有し得る。PEG部分は直鎖でも、分岐していてもよい。
本発明のピロリシン類似体は、均質性である抗体薬物コンジュゲート(所与の薬物、典型的には、細胞傷害性薬物、あるいは、タンパク質若しくはPEG基に、合成リンカーにより共有結合された組換え抗体)の製造に特に有用であり、抗体当たりの薬物(又は他の結合された分子)の数及び抗体に対するこれら薬物の位置は明確に制御されており、これによって、組み込まれた非天然アミノ酸を含有するモノクローナル抗体が得られ、直交性化学により、薬物部分(又は他の結合された分子)を担持するリンカーに部位特異的に結合される。
1.完全長抗体をコードするDNA配列を担持する1つ又は複数のプラスミドを安定した細胞株に導入することにより、終止コドンを上記配列内の特定の位置に導入するステップ、
2.所望の位置に設定されたピロリシン類似体(nnAA)を含む修飾抗体を精製するステップ、
3.抗体に設定されたnnAAに相補的な官能基を含むように修飾された細胞毒−リンカー誘導体を、直交性化学により、相補的反応基を含有する修飾抗体と反応させるステップ、
4.得られたADCを精製するステップ
を含む。
本明細書に記載するピロリシン類似体は、任意選択で、塩の形態で使用してもよい。こうした塩のいずれも本発明の態様を形成する。カルボン酸の塩は、第1族金属及び第2族金属を用いて形成される塩、特にナトリウム及びカリウム塩などの可溶性塩を含み得る。アミンの塩は、HCl、HBr又は酢酸などの弱酸及び強酸で形成された塩を含み得る。
本発明の実施形態は、以下のように表される:
1.式I:
Z=結合、CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O、S又はCH−NH2;
aは、3〜7の整数であり;
bは、0又は1〜7の整数であり;及び
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン)
のピロリシン類似体。
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=3又は5〜7の整数;及び
b=1〜4の整数)
のピロリシン類似体。
Y=CH2、NH、O又はS;
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=1〜7の整数;
ZがNH、O又はSであるとき、bが2〜7の整数である以外は、b=1〜7の整数であり、ただし、a+bは、2〜8の範囲であり、
及びd=1〜4の整数)
のピロリシン類似体。
Y=CH2、NH、O又はS;
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=1〜7の整数;
ZがNH、O又はSであるとき、bが2〜7の整数である以外は、b=1〜7の整数であり、ただし、a+bは、2〜8の範囲であり、
及び
d=1〜4の整数)
のピロリシン類似体。
R=20の天然アミノ酸のうちの1つの側鎖;
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=1;及び
b=1〜4の整数)
のピロリシン類似体。
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;
a=4又は5;及び
b=1〜4の整数)
のピロリシン類似体。
Z=CH2、CH−NH2、CH−OH、NH、O又はS;
R1=H、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;
R2=アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;
R3=H、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;及び
a=1)
のピロリシン類似体。
(2S)−2−アミノ−6−[(2S)−2−アミノ−4−アジドブタンアミド]ヘキサン酸(式IA.7)の調製。マグネチックスターラを備えた20mLバイアル中に、4mLのDMF中のN−Boc−アジドホモアラニン(200mg、1当量)及びHBTU(311mg、1当量)を導入した。混合物を15分間攪拌してから、DMF(3mL)中の溶液N−Boc−リシン(235mg、1当量)、続いてトリエチルアミン(228uL)を添加した。バイアルにキャップをして、4時間攪拌した。混合物を250mMクエン酸及び酢酸エチルの間で分配した。有機層を保持し、水層を酢酸エチルでさらに2回抽出した。有機層を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。質量分析により、所望の中間物の形成が判明した。シリカゲルクロマトグラフィーによって、さらなる精製を実施した。
(2S)−2−アミノ−3−[(2−{[(2−アジドエトキシ)カルボニル]アミノ}エチル)スルファニル]プロパン酸(式III.1)の調製。マグネチックスターラを備えた4mLバイアル中に、システイン(75mg、1当量)及び炭酸ナトリウムの溶液(2.8M、620uL)を導入した。これに、DMSO(620uL)中の2−クロロエチル−N−(2−ブロモエチル)カルバメート(99mg、1.0当量)を添加した。バイアルにキャップをして、8時間攪拌した。質量分析により、所望のs−アルキル化中間物の形成が判明した。中間物質量の確認後、アジ化ナトリウム(120mg)及びDMSO(1mL)を添加し、バイアルに再度キャップをしてから、混合物を60℃に一晩加熱した。質量分析により、所望の質量の好適な形成が判明した。粗混合物のpHを2に調節してから、凍結乾燥して、ペーストを得た。材料を水に懸濁させ、イオン交換樹脂(Dowex−50)に捕捉させた後、水で洗浄してから、水酸化アンモニウムで溶出した。溶出した画分をプールして、凍結乾燥することにより、所望のアミノ酸を得た。生成物を質量分析により確認した。
(2S)−2−アミノ−3−(2−{[(2−アジドエトキシ)カルボニル]アミノ}アセトアミド)プロパン酸(式V.1)の調製。マグネチックスターラを備えた4mLバイアル中に、1mLのDMF中の2−{[(2−クロロエトキシ)カルボニル]アミノ}酢酸(50mg、1当量)及びHBTU(105mg、1当量)を導入した。混合物を15分間攪拌した後、DMF(1mL)中の(2S)−3−アミノ−2−{[(tert−ブトキシ)カルボニル]アミノ}プロパン酸(66mg、1当量)の溶液、続いてトリエチルアミン(77uL)を添加した。バイアルにキャップをして、4時間攪拌した。混合物を250mMクエン酸及び酢酸エチルに注ぎ込み、振盪させた。層を分離させて、有機層を保持した。水層を酢酸エチルでさらに2回抽出した。有機層を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過及び濃縮した。質量分析により、所望の生成物の形成を確認した。それ以上の精製はせずに、粗生成物を次のステップに供した。
(2S)−2−アミノ−6−(2−アジドペンタンアミド)ヘキサン酸(式VII.1)の調製。マグネチックスターラを備えた20mLバイアル中に、3mLのDMF中の2−アジドペンタン酸(100mg、1当量)及びHBTU(266mg、1当量)を導入した。混合物を15分間攪拌した後、DMF(3mL)中のN−Boc−リシン(200mg、1当量)の溶液、続いてトリエチルアミン(195uL)を添加した。バイアルにキャップをして、8時間攪拌した。混合物を250mMクエン酸及び酢酸エチルの間で分配した。有機層を保持し、水層を酢酸エチルでさらに2回抽出した。有機層を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過及び濃縮した。質量分析により、所望の中間物の形成を確認した。シリカゲルクロマトグラフィーにより、さらなる精製を実施した。
(2S)−2−アミノ−3−(4−アジド−2−{[(プロプ−2−エン−1−イルオキシ)カルボニル]アミノ}ブタンアミド)プロパン酸(式VIII.1)の調製。マグネチックスターラを備えた4mLバイアル中に、1mLのDMF中の(2S)−3−(4−アジド−2−{[(プロプ−2−エン−1−イルオキシ)カルボニル]アミノ}ブタンアミド)−2−{[(tert−ブトキシ)カルボニル]アミノ}プロパン酸(65mg、1当量)及びHBTU(108mg、1当量)を導入した。混合物を15分間攪拌した後、DMF(1mL)中の(2S)−3−アミノ−2−{[(tert−ブトキシ)カルボニル]アミノ}プロパン酸(68mg、1当量)の溶液、続いてトリエチルアミン(79uL)を添加した。バイアルにキャップをして、4時間攪拌した。混合物を250mMクエン酸及び酢酸エチルに注ぎ込み、振盪させて、有機層を保持した。水層を酢酸エチルでさらに2回抽出した。有機層を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過及び濃縮した。質量分析により、所望の生成物の形成を確認した。シリカゲルクロマトグラフィーにより、さらなる精製を達成することができた。
pylRS/tRNAペアと本発明のピロリシン類似体(nnAA)との適合性及び標的タンパク質へのnnAA組み込みの効率を評価するために、in vitro細胞アッセイを開発した。このために、PylRS(配列番号4)を安定に発現するHEK293細胞を、tRNApyl(配列番号7)の発現用のプラスミド及びGFPY40をコードするリポータ構築物(アミノ酸残基番号40(ここで、1は、イニシエータメチオニン)のチロシンの代わりにアンバーコドンを含む)で一時的にトランスフェクトした。トランスフェクトした細胞を2mMのnnAAと一緒に2〜3日の間インキュベートし、顕微鏡での視覚検査により、GFP生成を定量的に分析した。Accuriフローサイトメータを用いたフローサイトメトリーにより、GFP蛍光を定量した後、蛍光細胞の幾何平均を決定した。
2つの非天然アミノ酸(各重鎖に1つ)を含む完全長抗Her2抗体(4D5−2AZ抗体)(配列番号15)を哺乳動物細胞に発現させた。K274位でアンバー部位をコード化するHer2抗体(配列番号14)を安定に発現すると共に、pylRS/tRNAペアを発現するCHO細胞を式III.1及び式1A.1のnnAAに暴露した。アジド部分を含有する式III.1又は式1A.1のnnAAを重鎖位置K274に組み込んだ後、プロテインA樹脂(GE Healthcare)又はIgSelect(GE Healthcare,17096901)のいずれかを用いたアフィニティクロマトグラフィーにより精製した。次に、精製した物質を濃縮し、結合反応に付した。
200uL PCRチューブ中に、4D5−2AzAb−HC274−(2S)−2−アミノ−3−[(2−{[(2−アジドエトキシ)カルボニル]アミノ}エチル)スルファニル]プロパン酸(式III.1)の溶液(100uL、0.05mg/mL)、続いて、20KPEGシクロオクチンの溶液(33.3、60mg/mL)を導入した。溶液をボルテックスミキサーで激しく混合した後、一晩インキュベートした。混合物を200uLまで希釈してから、プロテインA磁気ビーズに適用した。混合物をボルテックスし、回転させることにより、ビーズを90分間混合した。ビーズを固定化し、通過物質を廃棄した。ビーズをPBSで洗浄し(2X)、還元ゲルバッファー中に懸濁させた。ボルテックスしてから、95℃に3分加熱した。懸濁液をSDS−PAGEゲル上に直接ロードした。SDS−PAGEゲルのクーマシー染色は、重鎖の選択的ペグ化を示した(図1、レーン2)。
Fekner,T.,Li,X.,&Chan,M.K.(2010).Pyrrolysine Analogs for Translational Incorporation into Proteins.European Jouranal of Organic Chemistry,4171−4179.
Kavran,J.M.,Gundllapalli,S.,O’Donoghue,P.,Englert,M.,Soll,D.,&Steltz,T.A.(2007).
Structure of pyrrolysyl−tRNA synthetase,an archaeal enzyme for genetic code innovation.Proceedings National Academy of Sciences,104(27),11268−11273.
Kobayashi,T.,Yanagisawa,T.,Sakamoto,K.,&Yokoyama,S.(2009).Recognition of Non−a−amino Substrates by Pyrrolysyl−tRNA Synthetase.J.Mol.Biol.(1352−1360),385.
Liu,Chang C,and Peter G Schultz.“Adding New Chemistries to the Genetic Code.”Annual Review of Biochemistry,2010:413−444.
Chan,Michael K,Tomasz Fekner,Xin Li,Marianne Lee,and Jennifer J Ottesen.International Patent WO2011/044255A1.2011.
Nguyen,D.P.,Lusic,H.,Neumann,H.K.,Deiters,A.,&Chin,J.W.(2009).Genetic Encoding and Labeling of Aliphatic Azides and Alkynes in Recombinant Proteins via a Pyrrolysyl−tRNA
Synthetase/tRNAcua Pair and Click Chemistry.Journal of the American Chemical Society,8720−8721.Yanagisawa,T.,Ishii,R.,Fukunaga,R.,Kobayashi,T.,Sakamoto,K.,&Yokoyama,S.(2008).Crystallographic Studies on Multiple Conformational States of Active−site loops in Pyrrolysyl−tRNA synthetase.J.Mol.Biol.,378,634−652.
Yanagisawa,T.,Ishii,R.,Fukunaga,R.,Kobayashi,T.,Sakamoto,K.,&Yokoyama,S.(2008).Multistep Engineering of Pyrrolysyl−tRNA Synthetase to Genetically Encode Ne−(o−Azidobenzyloxycarbonyl)lysine for Site Specific Protein Modification.Chemistry and Biology,15,1187−1197.
Yanagisawa,T.,Sumida,T.,Ishii,R.,&Yokoyama,S.(2013).A novel crystal fom of pyrrolysyl−tRNA synthetase reveals the pre− and post−aminoacyl−tRNA synthesis conformational states of the adenylate and aminoacyl moieties and an asparagine residue in the catalytic site.Acta Crystallographica Section D,D69,5−15.
本明細書で言及する全ての特許及び特許出願は、その全体を参照により本明細書に組み込むものとする。
本発明は、以下の実施形態を包含する。
(実施形態1)
式X:
X=O又はS;
Y=CH 2 、NH、O又はS;
Z=CH 2 、CH−NH 2 、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;a=1〜7の整数;
ZがNH、O又はSであるとき、bが2〜7の整数である以外は、b=1〜7の整数であり、ただし、a+bは、2〜8の範囲であり;
d=1〜4の整数)
のピロリシン類似体。
(実施形態2)
式III:
a、b、Y、Z、d及びFGは、請求項1に定義した通りである)
のピロリシン類似体である、実施形態1に記載のピロリシン類似体。
(実施形態3)
以下:
(実施形態4)
式IV:
a、b、Y、Z、d及びFGは、実施形態1に定義した通りである)
のピロリシン類似体である、実施形態1に記載のピロリシン類似体。
(実施形態5)
以下:
(実施形態6)
式I:
Z=結合、CH 2 、CH−NH 2 、CH−OH、NH、O、S又はCH−NH 2 であり;
aは、3〜7の整数であり;
bは、0又は1〜7の整数であり;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキンであるが;
以下:
aが4、ZがOを表すとき、−(CH 2 ) b −FGは、−CH 2 −C≡CH、−CH 2 CH 2 −N 3 、−CH 2 −CH=CH 2 又は−CH 2 −Phではなく;
aが4、ZがOを表すとき、−(CH 2 ) b −FGは、−CH 2 CH 2 CH 2 −C(=O)CH 3 又は−CH 2 CH 2 CH 2 −CH=CH 2 ではなく;
aが4、Zが結合、bが0を表すとき、−(CH 2 ) b −FGは、−C(=O)Bn又は−C(=O)Meではなく;かつ
aが4、Zが結合を表すとき、−(CH 2 ) b −FGは、−CH 2 CH 2 −C≡CHではないことを条件とする)
のピロリシン類似体。
(実施形態7)
aが3である、実施形態6に記載のピロリシン類似体。
(実施形態8)
aが4である、実施形態6に記載のピロリシン類似体。
(実施形態9)
ZがOである、実施形態6〜8のいずれか一項に記載のピロリシン類似体。
(実施形態10)
ZがNである、実施形態6〜8のいずれか一項に記載のピロリシン類似体。
(実施形態11)
Zが結合である、実施形態6〜8のいずれか一項に記載のピロリシン類似体。
(実施形態12)
以下:
(実施形態13)
以下:
(実施形態14)
式II:
Z=CH 2 、CH−NH 2 、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;a=3又は5〜7の整数;及び
b=1〜4の整数である)
のピロリシン類似体。
(実施形態15)
式V:
R=20の天然アミノ酸のうちの1つの側鎖;
Z=CH 2 、CH−NH 2 、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;a=1;及び
b=1〜4の整数)
のピロリシン類似体。
(実施形態16)
以下:
(実施形態17)
式VI:
Z=CH 2 、CH−NH 2 、CH−OH、NH、O又はS;
FG=アジド、アルケン、アルキン、ケトン、エステル、アリール又はシクロアルキン;a=4又は5;及び
b=1〜4の整数)
のピロリシン類似体。
(実施形態18)
以下:
(実施形態19)
式VII:
R=アルキル、アルケニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;
a=1〜7の整数;及び
b=1〜3の整数)
のピロリシン類似体。
(実施形態20)
以下:
(実施形態21)
式VIII:
Z=CH 2 、CH−NH 2 、CH−OH、NH、O又はS;
R 1 =H、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;
R 2 =アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;
R 3 =H、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクリル;及び
a=1)
のピロリシン類似体。
(実施形態22)
以下:
(実施形態23)
非天然アミノ酸として、実施形態1〜22のいずれか一項に記載の1つ又は複数のピロリシン類似体を含む突然変異体タンパク質。
(実施形態24)
非天然アミノ酸として、実施形態1〜22のいずれか一項に記載の1つのピロリシン類似体を含む、実施形態23に記載の突然変異体タンパク質。
(実施形態25)
1つ又は複数の非天然アミノ酸を介して、タンパク質、細胞傷害性薬剤、薬物及びポリマーから選択される1つ又は複数の部分に結合される、実施形態23又は24に記載の突然変異体タンパク質。
(実施形態26)
PEG部分に結合される、実施形態25に記載の突然変異体タンパク質。
(実施形態27)
抗体部分に結合される、実施形態25に記載の突然変異体タンパク質。
(実施形態28)
細胞傷害性薬剤に結合される、実施形態25に記載の突然変異体タンパク質。
(実施形態29)
薬物部分に結合される、実施形態25に記載の突然変異体タンパク質。
(実施形態30)
1つ又は複数の非天然アミノ酸を含む突然変異体タンパク質の製造における、実施形態1〜22のいずれか一項に記載のピロリシン類似体の使用。
Claims (9)
- 非天然アミノ酸として、請求項1に記載の1つ又は複数のピロリシン類似体を含む突然変異体タンパク質。
- 非天然アミノ酸として、請求項1に記載の1つのピロリシン類似体を含む、請求項2に記載の突然変異体タンパク質。
- 1つ又は複数の非天然アミノ酸を介して、タンパク質、細胞傷害性薬剤、薬物及びポリマーから選択される1つ又は複数の部分に結合される、請求項2又は3に記載の突然変異体タンパク質。
- PEG部分に結合される、請求項4に記載の突然変異体タンパク質。
- 抗体部分に結合される、請求項4に記載の突然変異体タンパク質。
- 細胞傷害性薬剤部分に結合される、請求項4に記載の突然変異体タンパク質。
- 薬物部分に結合される、請求項4に記載の突然変異体タンパク質。
- 1つ又は複数の非天然アミノ酸を含む突然変異体タンパク質の製造における、請求項1に記載のピロリシン類似体の使用。
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EP3424941A4 (en) * | 2016-03-03 | 2019-10-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | METHOD OF PRODUCTION OF NON-CYCLIC PEPTIDE NUCLEIC ACID COMPLEX WITH AMINO ACID WITH THIOL GROUP, IN ADDITION TO THE AMINO GROUP ON N-TERMINUS, LIBRARY THEREOF, AND CYCLIC PEPTIDE NUCLEIC ACID COMPLEX LIBRARY THEREOF |
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CN113582881B (zh) * | 2021-07-29 | 2022-10-11 | 浙江新码生物医药有限公司 | 一种非天然氨基酸及其应用、包含其的重组蛋白以及重组蛋白偶联物 |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3711458A (en) | 1969-08-21 | 1973-01-16 | Research Corp | Substituted and unsubstituted vinyloxycarbonyl groups as amino protecting groups in the syntheses of peptides |
US4512979A (en) | 1981-03-23 | 1985-04-23 | Merck & Co., Inc. | Dipeptides containing thialysine and related amino acids as antihypertensives |
HU207287B (en) | 1989-01-17 | 1993-03-29 | Biosignal Kutato Fejlesztoe Kf | Polyene fatty acid derivatives of tyrozine-quinaze inhibiting activity and pharmaceutical composition containing them as active component |
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UY35421A (es) * | 2013-03-15 | 2014-10-31 | Nihon Nohyaku Co Ltd | Compuesto heterocíclico condensado o su sal, insecticida agrícola u hortícola que comprende el comp uesto y método de uso del insecticida |
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Cited By (1)
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