JP6521461B2 - コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物、当該分解物の製造方法、および、当該分解物の利用 - Google Patents
コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物、当該分解物の製造方法、および、当該分解物の利用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6521461B2 JP6521461B2 JP2016516418A JP2016516418A JP6521461B2 JP 6521461 B2 JP6521461 B2 JP 6521461B2 JP 2016516418 A JP2016516418 A JP 2016516418A JP 2016516418 A JP2016516418 A JP 2016516418A JP 6521461 B2 JP6521461 B2 JP 6521461B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- collagen
- atelocollagen
- degradation product
- chemical bond
- amino acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 title claims description 231
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 title claims description 231
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 title claims description 231
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 title claims description 226
- 108010045569 atelocollagen Proteins 0.000 title claims description 197
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 25
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 135
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 129
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 89
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 63
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 63
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 63
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 52
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 38
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 37
- 102000005927 Cysteine Proteases Human genes 0.000 claims description 30
- 108010005843 Cysteine Proteases Proteins 0.000 claims description 30
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 23
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 claims description 17
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 claims description 17
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 13
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 12
- 239000008380 degradant Substances 0.000 claims description 4
- -1 and X 2 Chemical compound 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 78
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 64
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 64
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 60
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 59
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 58
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 58
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 58
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 48
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 41
- ZHQQRIUYLMXDPP-SSDOTTSWSA-N Actinidine Natural products C1=NC=C(C)C2=C1[C@H](C)CC2 ZHQQRIUYLMXDPP-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 38
- 230000011382 collagen catabolic process Effects 0.000 description 38
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 37
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 37
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 37
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 33
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 30
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 26
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 25
- 108090000350 actinidain Proteins 0.000 description 25
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 23
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 23
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 22
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 21
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 20
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 20
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 15
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 15
- 239000000463 material Substances 0.000 description 15
- 108090000625 Cathepsin K Proteins 0.000 description 14
- 102000004171 Cathepsin K Human genes 0.000 description 14
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 14
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 14
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 13
- ZHQQRIUYLMXDPP-ZETCQYMHSA-N actinidine Chemical compound C1=NC=C(C)C2=C1[C@@H](C)CC2 ZHQQRIUYLMXDPP-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 13
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 13
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 13
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 12
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 12
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 12
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 11
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 10
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 10
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 10
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 10
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 9
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 9
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 9
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 9
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 7
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 7
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000269841 Thunnus albacares Species 0.000 description 7
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 7
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 7
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 7
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 6
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 6
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 5
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 5
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 5
- LCWXJXMHJVIJFK-UHFFFAOYSA-N Hydroxylysine Natural products NCC(O)CC(N)CC(O)=O LCWXJXMHJVIJFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 5
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 5
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 5
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 5
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 5
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 5
- QJHBJHUKURJDLG-UHFFFAOYSA-N hydroxy-L-lysine Natural products NCCCCC(NO)C(O)=O QJHBJHUKURJDLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 5
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 5
- JHPNVNIEXXLNTR-UHFFFAOYSA-N 4-(trimethylammonio)butanoate Chemical compound C[N+](C)(C)CCCC([O-])=O JHPNVNIEXXLNTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 4
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 4
- 201000009051 Embryonal Carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 108090000270 Ficain Proteins 0.000 description 4
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 4
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 4
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 4
- 239000000385 dialysis solution Substances 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 4
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000623 ulna Anatomy 0.000 description 4
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000252233 Cyprinus carpio Species 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 3
- 241000276707 Tilapia Species 0.000 description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 3
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 3
- 238000010504 bond cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 3
- 235000019836 ficin Nutrition 0.000 description 3
- POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N ficin Chemical compound FI=CI=N POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003505 heat denaturation Methods 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 3
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 3
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical class Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 description 2
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 2
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000003195 fascia Anatomy 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101710155556 Calcium-dependent protease Proteins 0.000 description 1
- 108090000619 Cathepsin H Proteins 0.000 description 1
- 102000004175 Cathepsin H Human genes 0.000 description 1
- 108090000624 Cathepsin L Proteins 0.000 description 1
- 102000004172 Cathepsin L Human genes 0.000 description 1
- 108090000613 Cathepsin S Proteins 0.000 description 1
- 102100035654 Cathepsin S Human genes 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000004067 Osteocalcin Human genes 0.000 description 1
- 108090000573 Osteocalcin Proteins 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N cyanuric chloride Chemical compound ClC1=NC(Cl)=NC(Cl)=N1 MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 210000004268 dentin Anatomy 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical compound [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000000955 peptide mass fingerprinting Methods 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- 230000035322 succinylation Effects 0.000 description 1
- 238000010613 succinylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/04—Animal proteins
- A23J3/06—Gelatine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
- A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
- A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
A)塩濃度が高い条件下では、システインプロテアーゼによって、コラーゲンまたはアテロコラーゲンが従来知られていなかった箇所(具体的には、トリプルヘリカルドメイン内の特定の箇所)にて切断されること;
B)従来知られていなかった箇所にて切断されたコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物は、スフェロイド誘導能を有していること;
C)従来知られていなかった箇所にて切断されたコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物は、従来知られていた箇所にて切断されたコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物と比較して、スフェロイド誘導能が高いこと。
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
本実施の形態のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物は、コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(1)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、GとX3との間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、または、X6とGとの間の化学結合が切断されている、コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物である:
また、本実施の形態のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物は、コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(1)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、GとX3との間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、および、X6とGとの間の化学結合から選択される何れか1つの化学結合が切断されている、コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物であってもよい:
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−(配列番号1):
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X6は、任意のアミノ酸である)。
また、本実施の形態のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物は、コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(2)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、GとX3との間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、X6とGとの間の化学結合、GとX7との間の化学結合、および、X14とGとの間の化学結合から選択される何れか1つの化学結合が切断されている、コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物であってもよい:
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−(配列番号13):
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X6は、任意のアミノ酸である)。
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X6は、任意のアミノ酸である)。
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
本実施の形態のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物の製造方法は、コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(1)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、GとX3との間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、または、X6とGとの間の化学結合を切断する、切断工程を含む製造方法である:
また、本実施の形態のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物の製造方法は、コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(1)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、GとX3との間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、および、X6とGとの間の化学結合から選択される何れか1つの化学結合を切断する、切断工程を含む製造方法であってもよい:
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X6は、任意のアミノ酸である)。
また、本実施の形態のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物の製造方法は、コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(2)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、GとX3との間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、X6とGとの間の化学結合、GとX7との間の化学結合、および、X14とGとの間の化学結合から選択される何れか1つの化学結合を切断する、切断工程を含む製造方法であってもよい:
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
酵素法に基づく切断工程を採用する場合には、例えば、以下のように切断工程を構成することができる。
化学合成法を採用する場合には、例えば、以下のように切断工程を構成することができる。
組み換えタンパク質の発現に基づく切断工程を採用する場合には、例えば、以下のように切断工程を構成することができる。
本発明のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物の用途としては、スフェロイド形成用組成物を挙げることができる。
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
塩化ナトリウムの濃度が0mM、200mM、1000mM、1500mMまたは2000mMである50mM クエン酸緩衝液(pH3.0)を準備した。なお、当該水溶液の溶媒としては、水を用いた。
塩化ナトリウムの濃度が2000mMである50mM クエン酸緩衝液(pH3.0)を準備した。なお、当該水溶液の溶媒としては、水を用いた。
MgCl2の濃度が500mMである水溶液、および、KClの濃度が200mMである水溶液を準備した。なお、当該水溶液の溶媒としては、水を用いた。
本実施例では、システインプロテアーゼの一種であるカテプシンKを用いて、高塩濃度条件下におけるα1鎖の切断箇所を検討した。以下に、試験方法および試験結果を説明する。
透析チューブにアクチニダインを入れ、当該アクチニダインを、塩化ナトリウムの濃度が2000mMである透析外液に対して透析した。その後、透析外液を蒸留水に変えて透析を続けてアクチニダインを得た。なお、アクチニダインとしては、周知の方法にて精製したものを利用した(例えば、非特許文献2参照)。アクチニダインを活性化するため、10mM ジチオスレイトールを含む50mM リン酸緩衝液(pH6.5)に対し、アクチニダインを溶解し、90分間、25℃にて静置した。
透析チューブにアクチニダインを入れ、当該アクチニダインを、塩化ナトリウムの濃度が2000mMである透析外液に対して透析した。その後、透析外液を蒸留水に変えて透析を続けてアクチニダインを得た。なお、アクチニダインとしては、周知の方法にて精製したものを利用した(例えば、非特許文献2参照)。アクチニダインを活性化するため、10mM ジチオスレイトールを含む50mM リン酸緩衝液(pH6.5)に対し、アクチニダインを溶解し、90分間、25℃にて静置した。
上述したコラーゲンの分解物(塩濃度200mMにおける、ブタ由来のα1鎖の分解物)と接触させた、市販の培養用プレートを試験に用いた。
上述したコラーゲンの分解物(塩濃度200mMにおける、ブタ由来のα1鎖の分解物)と接触させた、市販の培養用プレートを試験に用いた。
上述したコラーゲンの分解物(塩濃度200mMにおける、ブタ由来のコラーゲンの分解物)と接触させた、市販の培養用プレートを試験に用いた。初代ヒト間葉系幹細胞(LONZA社)を当該細胞専用の増殖培地(MSCBM+MSCGM、LONZA社)中に懸濁した後、上述した培養用プレート上に播種し、37℃、5%CO2の条件下で1日培養して、初代ヒト間葉系幹細胞を培養用プレート上に接着させた。その後、周知の方法にしたがって15日間の分化誘導を行い、初代ヒト間葉系幹細胞をヒト軟骨細胞へ分化させた。分化誘導後の軟骨細胞の様子を図9(a)に示す。図9(a)から明らかなように、本実施例のコラーゲンの分解物は、軟骨細胞のスフェロイド形成を著しく促進した。
透析チューブにアクチニダインを入れ、当該アクチニダインを、塩化ナトリウムの濃度が2000mMである透析外液に対して透析した。その後、透析外液を蒸留水に変えて透析を続けてアクチニダインを得た。アクチニダインを活性化するため、10mM ジチオスレイトールを含む50mM リン酸緩衝液(pH6.5)に対し、アクチニダインを溶解し、90分間、25℃にて静置した。
<4>と同様にカテプシンKを活性化するため、10mM ジチオスレイトールを含む50mM リン酸緩衝液(pH6.5)に対し、カテプシンKを溶解し、45分間、25℃にて静置した。
透析チューブにアクチニダインを入れ、当該アクチニダインを、塩化ナトリウムの濃度が2000mMである透析外液に対して透析した。その後、透析外液を蒸留水に変えて透析を続けてアクチニダインを得た。アクチニダインを活性化するため、10mM ジチオスレイトールを含む50mM リン酸緩衝液(pH6.5)に対し、アクチニダインを溶解し、90分間、25℃にて静置した。
透析チューブにアクチニダインを入れ、当該アクチニダインを、塩化ナトリウムの濃度が2000mMの透析外液に対して透析した。その後、透析外液を蒸留水に変えて透析を続けてアクチニダインを得た。なお、アクチニダインとしては、周知の方法にて精製したものを利用した(例えば、非特許文献2参照)。アクチニダインを活性化するため、10mM ジチオスレイトールを含む50mM リン酸緩衝液(pH6.5)に対し、アクチニダインを溶解し、90分間、25℃にて静置した。
Claims (9)
- コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物であって、
上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(1)または(2)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、または、GとX7との間の化学結合が切断されており、
上記(1)または(2)にて示されるアミノ酸配列は、上記トリプルヘリカルドメインのアミノ末端のアミノ酸配列であり、
上記(1)または(2)にて示されるアミノ酸配列のカルボキシル末端側に、100個以上の「Gly−X−Y」(XおよびYは任意のアミノ酸)が連続するアミノ酸配列が存在することを特徴とする、コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物:
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1、X3およびX5は、プロリンまたはヒドロキシプロリンであり、X2、X4およびX6〜X14は、任意のアミノ酸である)。 - 上記切断が、上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンのα1鎖内およびα2鎖内の少なくとも一方で行われていることを特徴とする、請求項1に記載のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物。
- 上記切断が、200mM以上の濃度の塩の存在下にて、上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンと、システインプロテアーゼとを接触させることによって行われていることを特徴とする、請求項1または2に記載のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物。
- 上記切断が、200mM以上の濃度の塩と接触させた後のシステインプロテアーゼと、上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンとを接触させることによって行われていることを特徴とする、請求項1または2に記載のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物。
- 請求項1〜4の何れか1項に記載のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物を含むことを特徴とする、スフェロイド形成用組成物。
- コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(1)または(2)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、または、GとX7との間の化学結合を切断する、切断工程を含み、
上記(1)または(2)にて示されるアミノ酸配列は、上記トリプルヘリカルドメインのアミノ末端のアミノ酸配列であり、
上記切断工程では、(i)200mM以上の濃度の塩の存在下にて、上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンと、システインプロテアーゼとを接触させる、または、(ii)200mM以上の濃度の塩と接触させた後のシステインプロテアーゼと、上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンとを接触させることを特徴とする、コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物の製造方法:
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1、X3およびX5は、プロリンまたはヒドロキシプロリンであり、X2、X4およびX6〜X14は、任意のアミノ酸である)。 - 上記切断が、上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンのα1鎖内およびα2鎖内の少なくとも一方で行われることを特徴とする、請求項6に記載のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物の製造方法。
- 上記切断工程では、上記システインプロテアーゼと骨とを接触させることによって、該骨に含まれるコラーゲンと、上記システインプロテアーゼとを接触させることを特徴とする、請求項6に記載のコラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物の製造方法。
- コラーゲンまたはアテロコラーゲンのトリプルヘリカルドメイン内の下記(1)または(2)にて示されるアミノ酸配列の、X1とX2との間の化学結合、X2とGとの間の化学結合、GとX3との間の化学結合、X4とGとの間の化学結合、X6とGとの間の化学結合、GとX7との間の化学結合、または、X14とGとの間の化学結合を切断する、切断工程を含み、
上記(1)または(2)にて示されるアミノ酸配列は、上記トリプルヘリカルドメインのアミノ末端のアミノ酸配列であり、
上記切断工程では、(i)200mM以上の濃度の塩の存在下にて、上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンと、システインプロテアーゼとを接触させる、または、(ii)200mM以上の濃度の塩と接触させた後のシステインプロテアーゼと、上記コラーゲンまたはアテロコラーゲンとを接触させる、ことを特徴とする、コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物の製造方法:
(1)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−
(2)−G−X1−X2−G−X3−X4−G−X5−X6−G−X7−X8−G−X9−X10−G−X11−X12−G−X13−X14−G−
(但し、Gは、グリシンであり、X1〜X14は、任意のアミノ酸である)。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2014094285 | 2014-04-30 | ||
JP2014094285 | 2014-04-30 | ||
PCT/JP2015/063044 WO2015167003A1 (ja) | 2014-04-30 | 2015-04-30 | コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物、当該分解物の製造方法、および、当該分解物の利用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2015167003A1 JPWO2015167003A1 (ja) | 2017-04-20 |
JP6521461B2 true JP6521461B2 (ja) | 2019-05-29 |
Family
ID=54358724
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016516418A Active JP6521461B2 (ja) | 2014-04-30 | 2015-04-30 | コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物、当該分解物の製造方法、および、当該分解物の利用 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6521461B2 (ja) |
WO (1) | WO2015167003A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20220023499A1 (en) * | 2018-12-12 | 2022-01-27 | Kinki University | Collagen solid, method for producing collagen solid, biomaterial, and ex vivo material |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2017073785A1 (ja) * | 2015-10-30 | 2017-05-04 | 学校法人近畿大学 | 分化誘導剤、分化誘導方法、および、これらに用いられる骨組織分解物の製造方法 |
JP6995112B2 (ja) | 2017-04-06 | 2022-02-04 | 日機装株式会社 | 細胞の培養方法及び細胞支持複合体の製造方法 |
US11951231B2 (en) | 2018-01-31 | 2024-04-09 | Kinki University | Therapeutic agent for intervertebral disc degeneration and material for culturing inter vertebral disc cells |
JP7012970B2 (ja) * | 2018-01-31 | 2022-01-31 | 学校法人近畿大学 | 神経損傷治療剤 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4023648B2 (ja) * | 1999-01-13 | 2007-12-19 | 日本ハム株式会社 | 皮膚代謝促進物及び機能性食品 |
JP2001103992A (ja) * | 1999-10-05 | 2001-04-17 | Nippi:Kk | パパイン処理コラーゲン改質物 |
JP2003219865A (ja) * | 2002-01-29 | 2003-08-05 | Japan Tissue Engineering:Kk | スフェロイドの作製方法、スフェロイド及びスフェロイド含有組成物 |
JP2004244369A (ja) * | 2003-02-13 | 2004-09-02 | Jellice Co Ltd | ペプチド組成物、その製造方法およびペプチド添加物質 |
JP4439221B2 (ja) * | 2003-08-14 | 2010-03-24 | メビオール株式会社 | 熱可逆ハイドロゲル形成性組成物 |
JP2006151847A (ja) * | 2004-11-26 | 2006-06-15 | Nitta Gelatin Inc | コラーゲンペプチド組成物とその製造方法、化粧料組成物 |
US7485323B2 (en) * | 2005-05-31 | 2009-02-03 | Gelita Ag | Process for making a low molecular weight gelatine hydrolysate and gelatine hydrolysate compositions |
WO2007108554A1 (ja) * | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Nippon Meat Packers, Inc. | 血圧上昇抑制作用を有するペプチド |
-
2015
- 2015-04-30 WO PCT/JP2015/063044 patent/WO2015167003A1/ja active Application Filing
- 2015-04-30 JP JP2016516418A patent/JP6521461B2/ja active Active
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20220023499A1 (en) * | 2018-12-12 | 2022-01-27 | Kinki University | Collagen solid, method for producing collagen solid, biomaterial, and ex vivo material |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPWO2015167003A1 (ja) | 2017-04-20 |
WO2015167003A1 (ja) | 2015-11-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6521461B2 (ja) | コラーゲンまたはアテロコラーゲンの分解物、当該分解物の製造方法、および、当該分解物の利用 | |
Zhang et al. | Biochemical characterisation and assessment of fibril-forming ability of collagens extracted from Bester sturgeon Huso huso× Acipenser ruthenus | |
KR100977744B1 (ko) | 콜라겐과 그 생산방법 | |
Miller et al. | [1] Collagen: An overview | |
CN107188948B (zh) | 用于诱导组织再生的肽及其应用 | |
JP6120428B2 (ja) | 分化誘導用組成物 | |
JP6699821B2 (ja) | 神経再生用移植材料、神経再生用移植材料の製造方法、及び神経再生用移植材料製造用キット | |
JP2006257013A (ja) | 魚鱗由来コラーゲンゲルとその作成方法 | |
Yang et al. | Mechanically durable and biologically favorable protein hydrogel based on elastic silklike protein derived from sea anemone | |
JP5888670B2 (ja) | 骨芽細胞分化誘導用培養基材、骨芽細胞分化誘導方法、及び骨芽細胞製造方法 | |
Kulkarni et al. | Utilization of fish collagen in pharmaceutical and biomedical industries: waste to wealth creation | |
JP5847418B2 (ja) | 細胞接着性タンパク質 | |
JP6822668B2 (ja) | 多能性幹細胞の胚様体形成方法および多能性幹細胞の胚様体形成用組成物 | |
WO2017073785A1 (ja) | 分化誘導剤、分化誘導方法、および、これらに用いられる骨組織分解物の製造方法 | |
WO2015199041A1 (ja) | 新規合成ペプチドおよびその利用 | |
KR101085940B1 (ko) | 콜라겐 파티클을 함유한 콜라겐 현탁액 제조방법 | |
JPWO2019239751A1 (ja) | 細胞移植用組成物及び細胞移植方法 | |
CN112789063B (zh) | 半月板再生用材料 | |
JP7414284B2 (ja) | コラーゲン固形物、コラーゲン固形物の製造方法、生体材料、および、生体外材料 | |
Cipriani | Engineering responsive and biomimetic material based on elastin-like recombinamers for biomedical application | |
Kim et al. | Extraction and Characterization of Human Adipose Tissue-Derived Collagen: Toward Xeno-Free Tissue Engineering | |
Naderi Gharahgheshlagh et al. | Biochemical and Biological Characterization of Type-I Collagen from Scomberomorus commerson Skin as a Biomaterial for Medical Applications | |
EP2554658A1 (en) | Method for culturing cells in system containing laminin-5 | |
AU2005201970B2 (en) | Collagen and method for producing same | |
JP2020188833A (ja) | 関節疾患治療用の医薬組成物及びその製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A529 | Written submission of copy of amendment under article 34 pct |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A5211 Effective date: 20161028 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161219 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170907 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180918 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181119 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190409 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190419 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6521461 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |