JP6478927B2 - 消化管閉塞の予防のための材料 - Google Patents

Description

配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出され、参照によりその全体において本明細書に組み込まれる、配列表を含有する。前記ＡＳＣＩＩコピーは、２０１４年３月１２日に作成され、Ｔ２０７１−７００８ＷＯ＿ＳＬ．ｔｘｔと名付けられ、２９，１６１バイトのサイズである。

開示の分野
本開示は一般に、医療適用、研究適用、および産業的適用で使用されうる材料および方法に関する。より具体的に、本開示は、消化管閉塞を予防するために使用されうる材料および方法であって、胃ＥＳＤ誘導性潰瘍を処置するのに使用されうる、膜、ハイドロゲル、組成物、および溶液を含む材料および方法に関する。

要旨
１または複数の態様に従い、被験体における消化管閉塞を予防するための方法が提供される。方法は、カテーテルを消化管へと導入するステップを含みうる。方法はまた、消化管閉塞の少なくとも部分的な予防が所望される消化管の標的エリアに、カテーテルの端部を配置するステップも含みうる。方法は、カテーテルを介して、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、消化管の条件下でハイドロゲルを形成して消化管閉塞の予防をもたらすのに有効な量および有効な濃度で含む自己集合性ペプチドを含む溶液を投与するステップをさらに含みうる。方法は、カテーテルを、消化管から取り出すステップをさらに含みうる。

１または複数の態様に従い、被験体における消化管閉塞を予防するためのキットが提供される。キットは、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、生理学的条件下でハイドロゲルを形成して消化管閉塞の予防を可能とするのに有効な量および有効な濃度で含む自己集合性ペプチドを含む溶液を含みうる。キットはまた、溶液を被験体の消化管の標的エリアへと投与するための指示も提供しうる。

１または複数の態様に従い、被験体における消化管閉塞の予防を容易とする方法は、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、生理学的条件下でハイドロゲルを形成して消化管閉塞の予防を可能とするのに有効な量および有効な濃度で含むペプチドを含む溶液を提供するステップを含みうる。容易とする方法はまた、消化管内に配置されたカテーテルを介して、溶液を導入することにより、溶液を、消化管の標的エリアへと投与する指示を与えるステップも含みうる。

１または複数の態様に従い、複数の自己集合性ペプチドから本質的になる肉眼的足場が提供される。自己集合性ペプチドの各々は、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、消化管の病変エリア内に配置して、治癒を促進し、消化管閉塞を予防することを可能にする有効な量で含む。

付属の図面は、原寸で描くことを意図しない。明確さの目的のために、必ずしもあらゆる構成要素がラベル付けされているわけではない。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
被験体における消化管閉塞を予防する方法であって、
カテーテルを消化管へと導入するステップと、
消化管閉塞の予防が所望される該消化管の標的エリアに、該カテーテルの端部を配置するステップと、
該カテーテルを介して、約７アミノ酸〜３２アミノ酸の間のアミノ酸を、該消化管の条件下でハイドロゲルを形成して消化管閉塞の予防をもたらすのに有効な量および有効な濃度で含む自己集合性ペプチドを含む溶液を投与するステップと、
該カテーテルを、該消化管から取り出すステップと
を含む方法。
（項目２）
前記消化管のうちの少なくとも一部を含む領域を可視化するステップをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記領域を可視化するステップが、
前記消化管の前記標的エリアを同定すること、
前記カテーテルを導入すること、
該カテーテルの前記端部を、該標的エリアに配置すること、
前記溶液を投与すること、
該カテーテルを取り出すこと、および
該カテーテルを取り出した後で、該消化管をモニタリングすること
のうちの少なくとも１つの間に、該領域を可視化することを含む、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記領域を可視化するステップが、前記溶液の、前記消化管への選択的投与をもたらす、項目３に記載の方法。
（項目５）
前記投与後約１週間の期間に、前記領域を可視化するステップをさらに含む、項目３に記載の方法。
（項目６）
前記投与後約４週間の期間に、前記領域を可視化するステップをさらに含む、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記投与後約８週間の期間に、前記領域を可視化するステップをさらに含む、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記有効な量および前記有効な濃度のうちの少なくとも１つが、前記消化管の前記標的エリアの大きさに部分的に基づく、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記有効な量が、標的エリア１ｃｍ ^２ 当たり約１ｍＬである、項目１に記載の方法。
（項目１０）
消化管閉塞の予防を可能とするのに有効な前記濃度が、約０．１重量／体積（ｗ／ｖ）パーセント〜約３ｗ／ｖパーセントの範囲のペプチドの濃度を含む、項目１に記載の方法。
（項目１１）
消化管閉塞の予防を可能とするのに有効な前記量が、約０．１ｍＬ〜約５ｍＬの範囲の体積を含む、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記標的エリアをモニタリングして、前記溶液の前記投与の有効性を決定するステップをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目１３）
外科的手技の後で使用される、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記外科的手技が、内視鏡的粘膜切除術および内視鏡的粘膜下層剥離術のうちの１つである、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記溶液が、細胞を実質的に含まない、項目１に記載の方法。
（項目１６）
前記溶液が、薬物を実質的に含まない、項目１に記載の方法。
（項目１７）
前記溶液が、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる、少なくとも１２アミノ酸を含む両親媒性ペプチドから本質的になる、項目１に記載の方法。
（項目１８）
前記溶液が、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる、少なくとも１２アミノ酸を含む両親媒性ペプチドからなる、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記被験体が、哺乳動物である、項目１に記載の方法。
（項目２０）
前記被験体が、ヒトである、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記溶液を投与するステップが、前記溶液を単一用量で投与することを含む、項目１に記載の方法。
（項目２２）
前記溶液を投与するステップが、該溶液を少なくとも２用量で投与することを含む、項目１に記載の方法。
（項目２３）
前記被験体を評価して、消化管閉塞を予防し、前記溶液を調製する必要を決定するステップをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目２４）
前記カテーテルを導入する前に、内視鏡を前記消化管へと導入するステップをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目２５）
前記溶液が、少なくとも１つの生物学的活性剤をさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目２６）
前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ） _ｐ ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ） _ｐ Ｉ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つを含む、項目１に記載の方法。
（項目２７）
前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ） _ｐ ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ） _ｐ Ｉ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つから本質的になる、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ） _４ （配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ） _３ Ｉ（配列番号１１）のうちの１つを含む、項目１に記載の方法。
（項目２９）
前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ） _４ （配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ） _３ Ｉ（配列番号１１）から本質的になる、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
被験体における消化管閉塞を予防するためのキットであって、
約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、生理学的条件下でハイドロゲルを形成して該消化管閉塞の予防を可能とするのに有効な量および有効な濃度で含む、自己集合性ペプチドを含む溶液と、
該溶液を、該被験体の該消化管の標的エリアへと投与するための指示と
を含むキット。
（項目３１）
前記溶液を、前記被験体の前記消化管へと導入するカテーテルをさらに含む、項目３０に記載のキット。
（項目３２）
スクロース溶液をさらに含む、項目３０に記載のキット。
（項目３３）
前記溶液を希釈して、有効な濃度の前記溶液を、前記被験体の前記消化管へと投与するための指示をさらに含む、項目３０に記載のキット。
（項目３４）
前記被験体における前記消化管への前記溶液の前記有効な濃度を、該消化管の前記標的エリアにおける大きさに基づき決定するための指示をさらに含む、項目３０に記載のキット。
（項目３５）
被験体における消化管閉塞の予防を容易とする方法であって、
約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、生理学的条件下でハイドロゲルを形成して該消化管閉塞の予防を可能とするのに有効な量および有効な濃度で含む、自己集合性ペプチドを含む溶液を提供するステップと、
該消化管に配置されたカテーテルを介して該溶液を導入することにより、該溶液を、該消化管の標的エリアへと投与する指示を与えるステップと
を含む方法。
（項目３６）
前記消化管のうちの少なくとも一部を含む領域を可視化する指示を与えるステップをさらに含む、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
前記消化管のうちの少なくとも一部を含む前記領域を可視化する指示を与えるステップが、
該消化管の前記標的エリアを同定すること、
カテーテルを導入すること、
該カテーテルの端部を、該標的エリアに配置すること、
前記溶液を投与すること、
該カテーテルを、該消化管から取り出すこと、および
該カテーテルを取り出した後で、該消化管をモニタリングすること
のうちの少なくとも１つの間に、該領域を可視化する指示を与えることを含む、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記領域を可視化する指示を与えるステップが、内視鏡を使用してイメージングすることを含む、項目３６に記載の方法。
（項目３９）
前記投与後約１週間の期間に、前記領域を可視化する指示を与えるステップをさらに含む、項目３６に記載の方法。
（項目４０）
前記投与後約４週間の期間に、前記領域を可視化する指示を与えるステップをさらに含む、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
前記投与後約８週間の期間に、前記領域を可視化する指示を与えるステップをさらに含む、項目３８に記載の方法。
（項目４２）
前記消化管の前記標的エリアの大きさに部分的に基づき、前記有効な量および前記有効な濃度のうちの少なくとも１つを調製する指示を与えるステップをさらに含む、項目３５に記載の方法。
（項目４３）
前記有効な量が、標的エリア１ｃｍ ^２ 当たり約１ｍＬである、項目３５に記載の方法。
（項目４４）
前記消化管閉塞の予防を可能とするのに有効な前記濃度が、約０．１重量／体積パーセント〜約３重量／体積パーセントの範囲のペプチドの濃度を含む、項目３５に記載の方法。
（項目４５）
前記消化管閉塞の予防を可能とするのに有効な前記量が、約０．１ｍＬ〜約５ｍＬの範囲の体積を含む、項目３５に記載の方法。
（項目４６）
前記標的エリアの周囲のエリアをモニタリングする指示を与えるステップをさらに含む、項目３５に記載の方法。
（項目４７）
前記溶液および外科的手技の後に使用するための指示を与えるステップをさらに含む、項目３５に記載の方法。
（項目４８）
前記外科的手技が、内視鏡的粘膜切除術および内視鏡的粘膜下層剥離術のうちの１つである、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
前記溶液が、細胞を実質的に含まない、項目３５に記載の方法。
（項目５０）
前記溶液が、薬物を実質的に含まない、項目３５に記載の方法。
（項目５１）
前記溶液が、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドから本質的になる、項目３５に記載の方法。
（項目５２）
前記溶液が、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を含む両親媒性ペプチドからなる、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
前記被験体が、哺乳動物である、項目３５に記載の方法。
（項目５４）
前記被験体が、ヒトである、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記溶液を投与するステップが、該溶液を単一用量で投与することを含む、項目３５に記載の方法。
（項目５６）
前記溶液を投与するステップが、該溶液を少なくとも２用量で投与することを含む、項目３５に記載の方法。
（項目５７）
前記被験体を評価し、消化管（ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｎｔｉｎａｌ）閉塞を予防し、前記溶液を調製する必要を決定するステップをさらに含む、項目３５に記載の方法。
（項目５８）
前記カテーテルを導入する前に、内視鏡を前記消化管へと導入するステップをさらに含む、項目３５に記載の方法。
（項目５９）
前記溶液が、少なくとも１つの生物学的活性剤をさらに含む、項目３５に記載の方法。
（項目６０）
前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ） _ｐ ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ） _ｐ Ｉ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つを含む、項目３５に記載の方法。
（項目６１）
前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ） _ｐ ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ） _ｐ Ｉ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つから本質的になる、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ） _４ （配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ） _３ Ｉ（配列番号１１）のうちの１つを含む、項目３５に記載の方法。
（項目６３）
前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ） _４ （配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ） _３ Ｉ（配列番号１１）から本質的になる、項目６２に記載の方法。
（項目６４）
複数の自己集合性ペプチドから本質的になる肉眼的足場であって、該自己集合性ペプチドの各々が、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、消化管の病変エリア内に配置して治癒を促進することおよび消化管閉塞を予防することが可能な有効な量で含む肉眼的足場。
（項目６５）
前記複数のペプチドの各々が、（ＲＡＤＡ） _ｐ ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）および（ＩＥＩＫ） _ｐ Ｉ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つを含む、項目６４に記載の肉眼的足場。
（項目６６）
前記複数のペプチドの各々が、（ＲＡＤＡ） _ｐ ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ） _ｐ Ｉ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つから本質的になる、項目６５に記載の肉眼的足場。
（項目６７）
前記複数のペプチドの各々が、（ＲＡＤＡ） _４ （配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ） _３ Ｉ（配列番号１１）のうちの１つを含む、項目６４に記載の肉眼的足場。
（項目６８）
前記複数のペプチドの各々が、（ＲＡＤＡ） _４ （配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ） _３ Ｉ（配列番号１１）から本質的になる、項目６７に記載の肉眼的足場。
（項目６９）
約１０ナノメートル〜約２０ナノメートルの直径を有するナノファイバーを含む、項目６５に記載の肉眼的足場。
（項目７０）
約５ナノメートル〜約２００ナノメートルの小孔サイズを有するナノファイバーを含む、項目６５に記載の肉眼的足場。
（項目７１）
前記複数のペプチドの各々が約５ナノメートルの長さを有する、項目６５に記載の肉眼的足場。

図１Ａは、いくつかの実施形態に従う、内視鏡的粘膜下層剥離術（ＥＳＤ：ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｓｕｂｍｕｃｏｓａｌ ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ）の前における潰瘍の画像である。 図１Ｂは、いくつかの実施形態に従う、ＥＳＤの前における潰瘍の画像である。 図１Ｃは、いくつかの実施形態に従う、ＥＳＤの直後におけるエリアを示す画像である。 図１Ｄは、いくつかの実施形態に従う、ＥＳＤおよびペプチド溶液適用の１週間後におけるエリアを示す画像である。 図１Ｅは、いくつかの実施形態に従う、ＥＳＤおよびペプチド適用の４週間後におけるエリアを示す画像である。 図１Ｆは、いくつかの実施形態に従う、ＥＳＤおよびペプチド適用の８週間後におけるエリアを示す画像である。 図２Ａは、いくつかの実施形態に従う、４分の３が周方向に広がる、早期食道がんを示す画像である。 図２Ｂは、いくつかの実施形態に従う、ＥＳＤを使用して病変を切除した後における、５分の４が周方向に広がる、人工潰瘍を示す画像である。 図２Ｃは、いくつかの実施形態に従う、ペプチド溶液によるコーティングを示す画像である。 図２Ｄは、いくつかの実施形態に従う、手術の４週間後における、処置されたエリアを示す画像である。 図２Ｅは、いくつかの実施形態に従う、手術の８週間後における、処置されたエリアの画像である。

詳細な説明
本開示の材料および方法は、消化管閉塞を予防しうる。

内視鏡的粘膜切除術（ＥＭＲ：ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｍｕｃｏｓａｌ ｒｅｓｅｃｔｉｏｎ）および内視鏡的粘膜下層剥離術（ＥＳＤ）は、消化器系または消化管におけるポリープおよびがん性腫瘍などの病変部位を切除するための、第一の手術選択肢である。ＥＭＲおよびＥＳＤはいずれも、侵襲性が最小限の手術である。ＥＳＤは一般に、ＥＭＲより広範なエリアにわたる病変部位を剥離させうる。したがって、ＥＳＤは、ＥＭＲより頻繁に、治癒過程における瘢痕の収縮／縮小に起因する閉塞を引き起こす場合がある。しかし、ＥＭＲ手技およびＥＳＤ手技のいずれも、治癒経過において、術後消化管閉塞を誘導する病変を引き起こす場合がある。消化管閉塞の一形態は、治癒経過における、消化管内の狭窄でありうる。狭窄とは、消化管など、管状の器官または構造の狭隘化であって、部分的または完全な消化管内の閉塞をもたらしうる狭隘化を意味する。

ＥＭＤおよびＥＳＤの成功には、比較的高い術後出血率の低減が必要とされうる。出血率は、食道で約１パーセント、胃で約５パーセント、および結腸直腸で約２パーセントでありうる。胃ＥＳＤ誘導性潰瘍のための現行の処置は、ＥＳＤ術後少なくとも８週間にわたる、プロトンポンプ阻害剤による処置を含みうる。

被験体は典型的に、生活の質の著明な低下をもたらす、バルーン拡張および局所ステロイド注射によるいくつかの処置を受けることを必要とし得る。現在のところ、その治癒過程における瘢痕の収縮に起因する、閉塞または狭窄を予防するための選択肢は存在しない。

本開示は、消化管内の狭窄などの閉塞を予防するまたは減少させる、材料および方法を提示する。消化管は、口腔、咽喉、食道、胃、小腸、大腸、または結腸、直腸、もしくは結腸および直腸の遠位部と称する、結腸直腸のうちの任意の１または複数を含みうる。

本開示はまた、消化管内の閉塞を予防するまたは減少させる、材料および方法も提示する。「予防すること」は、創傷、病変、もしくは標的エリアが術前状態に戻りうるという点で、または、創傷、病変、もしくは標的エリアが、除去を必要としうる、ポリープ、腫瘍、もしくは他の組織が発生する前の状態であって、「正常」状態と称し得る状態に戻りうるという点で、消化管の完全な予防を含み得る。予防することは、少なくとも部分的に予防することまたは少なくとも部分的に減少させることであって、創傷、病変、もしくは標的エリアを正常未満の状態へと戻す消化管閉塞の、少なくとも一部の軽減を可能とする状態へ戻ることを含みうる予防または減少を含みうる。

材料および方法は、被験体における消化管内の消化管閉塞を予防することまたは減少させることを含みうる。本明細書で用いられる「被験体」という用語は、ヒトおよび非ヒト動物、例えば、脊椎動物、大型動物、および霊長動物を含むことを意図する。ある種の実施形態では、被験体は、哺乳動物被験体であり、具体的な実施形態では、被験体は、ヒト被験体である。ヒトを伴う適用が明らかに予想されているが、本明細書ではまた、例えば、非ヒト動物を伴う獣医学的適用も想定されている。本発明の「非ヒト動物」という用語は、全ての脊椎動物、例えば、非哺乳動物（鳥類、例えば、ニワトリ、両生類、爬虫類など）および非ヒト霊長動物、家畜動物、および農作業に有用な動物、とりわけ、例えば、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ラットなどの哺乳動物を含む。

閉塞の予防または減少は、部分的な場合もあり、完全な場合もある。材料および方法は、自己集合性ペプチド、または自己集合性ペプチドを含む溶液、または自己集合性ペプチドを含む組成物の、所定または所望の標的エリアへの投与、適用、または注射を含みうる。

「自己集合性ペプチド」という用語は、ベータシート構造を誘導する特異的な条件の存在下にある水溶液中でベータシート構造を呈示しうるペプチドを指す場合がある。これらの特異的な条件は、自己集合性ペプチド溶液のｐＨの上昇を含みうる。ｐＨの上昇とは、生理学的なｐＨへのｐＨの上昇でありうる。特異的な条件はまた、一価カチオンなどのカチオンを、自己集合性ペプチド溶液に添加することも含みうる。特異的な条件は、消化管と関連する条件を含みうる。

自己集合性ペプチドとは、両親媒性の自己集合性ペプチドでありうる。「両親媒性」とは、ペプチドが、疎水性部分および親水性部分を含むことを意味する。いくつかの実施形態では、両親媒性ペプチドは、交互になる疎水性アミノ酸および親水性アミノ酸を含むか、これらから本質的になるか、またはこれらからなり得る。交互になることとは、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる一連の３つまたはそれ超のアミノ酸を含むことを意味し、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になるペプチド配列内の各アミノ酸およびあらゆるアミノ酸を含む必要はない。本明細書ではまた「ペプチド」とも称する自己集合性ペプチドは、自己集合性ペプチド溶液、組成物、ハイドロゲル、膜、足場、または他の形態の形態で、所定または所望の標的エリアへと投与することができる。ハイドロゲルはまた、本開示を通して、膜または足場とも称しうる。所定または所望の標的エリアは、消化管内の組織の、ＥＳＤもしくはＥＭＲ、または他の切除もしくは手術による除去の位置における標的エリアの場合もあり、これらの位置の近傍における標的エリアの場合もある。所定または所望の標的エリアは、ポリープ、がん性腫瘍などの腫瘍の部位に基づき確立することもでき、外科的手技を受けたかまたは意図されない外傷もしくは意図された外傷を有し得る他のエリアに基づき確立することもできる。

自己集合性ペプチド溶液は、水性の自己集合性ペプチド溶液でありうる。自己集合性ペプチドは、実質的に無細胞であるかまたは細胞を実質的に含まない溶液で投与、適用、または注射することができる。ある種の実施形態では、自己集合性ペプチドは、無細胞であるかまたは細胞を含まない溶液で投与、適用、または注射することができる。

自己集合性ペプチドはまた、実質的にドラッグフリーであるかまたは薬物を実質的に含まない溶液で投与、適用、または注射することもできる。ある種の実施形態では、自己集合性ペプチドは、ドラッグフリーであるかまたは薬物を含まない溶液で投与、適用、または注射することができる。他のある種の実施形態では、自己集合性ペプチドは、実質的に無細胞であり、かつ、実質的にドラッグフリーである溶液で投与、適用、または注射することができる。なおさらに他のある種の実施形態では、自己集合性ペプチドは、無細胞であり、かつ、ドラッグフリーである溶液で投与、適用、または注射することができる。

自己集合性ペプチド溶液は、自己集合性ペプチドを含むか、またはこれからなるか、またはこれから本質的になり得る。自己集合性ペプチドは、改変された形態の場合もあり、改変されていない形態の場合もある。改変されたとは、自己集合性ペプチドが、それ自体溶液で提供された場合に自己集合しない、１または複数のアミノ酸を含む、１または複数のドメインを有しうることを意味する。改変されていないとは、自己集合性ペプチドが、ペプチドの自己集合をもたらすドメイン以外の他のいかなるドメインも有し得ないことを意味する。すなわち、改変されていないペプチドは、ベータシート、およびハイドロゲルなどの肉眼的構造物へと自己集合しうる、交互になる疎水性アミノ酸および親水性アミノ酸からなる。

溶液の投与は、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を含むか、またはこれからなるか、またはこれから本質的になる自己集合性ペプチドを含むか、またはこれからなるか、またはこれから本質的になる溶液の投与を含むか、またはこれからなるか、またはこれから本質的になり得る。本開示では、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を含まないか、またはこれからならないか、またはこれから本質的にならない他のペプチドも、想定されうる。

交互になることとは、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる一連の３つまたはそれ超のアミノ酸を含み、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になるペプチド配列内の各アミノ酸およびあらゆるアミノ酸を含む必要はないことを意味する。

材料および方法は、自己集合性ペプチドを、所定または所望の標的へと投与することを含みうる。ペプチドは、ハイドロゲルとして投与される場合もあり、投与されるとハイドロゲルを形成する場合もある。ハイドロゲルとは、水中で分散させたコロイド状ゲルを指す場合がある用語である。ハイドロゲルはまた、本開示を通して、膜または足場とも称しうる。システムおよび方法はまた、自己集合性ペプチドを、水性のペプチド溶液などの溶液として、所定または所望の標的へと適用することも含みうる。

「〜を投与すること」という用語は、水溶液などの溶液により、またはさらなる成分を伴うかもしくは伴わない、組成物、ハイドロゲル、もしくは足場によりそれ自体含むがこれらに限定されない多様な形態のうちの１または複数で、自己集合性ペプチドを適用するか、導入するか、または注射することを含むがこれらに限定されないことを意図する。

方法は、送達デバイスを、被験体の所定または所望の標的エリアまたはその近傍に導入するステップを含みうる。方法は、シリンジ、ピペット、チューブ、カテーテル、シリンジカテーテル、または他のニードルベースのデバイスのうちの少なくとも１つを含む送達デバイスを、被験体の所定または所望の標的エリアへと導入するステップを含みうる。自己集合性ペプチドは、シリンジ、ピペット、チューブ、カテーテル、シリンジカテーテル、または他のニードルベースのデバイスにより、被験体の所定または所望の標的エリアへと投与することができる。注射針のゲージは、組成物、溶液、ハイドロゲル、または液体の、シリンジから標的エリアへの十分な流動をもたらすように選択することができる。いくつかの実施形態では、これは、投与される組成物中、ペプチド溶液中、またはハイドロゲル中の自己集合性ペプチドの量、組成物中、またはハイドロゲル中のペプチド溶液の濃度、およびペプチド溶液、組成物、またはハイドロゲルの粘度のうちの少なくとも１つに基づきうる。送達デバイスは、従来のデバイスの場合もあり、具体的な標的エリアに到達すること、具体的な投与レジメを達成すること、具体的な標的体積、標的量、または標的濃度を送達すること、および標的エリアへと正確に送達することのうちの少なくとも１つを達成するようにデザインする場合もある。

消化管閉塞を予防するまたは減少させる方法は、カテーテルを被験体へと導入するステップと、カテーテルの端部を、消化管の一部など、所定エリアまたは標的エリアに配置するステップとを含みうる。自己集合性ペプチドは、カテーテルを介して、消化管閉塞の少なくとも部分的な予防または減少が所望される、標的エリアへと投与することができる。カテーテルの使用は、標的エリアへのより正確な送達をもたらすように、ペプチドのより選択的な投与をもたらしうる。ペプチドの選択的投与は、消化管の閉塞または狭窄の予防または減少を成功させ、所望の位置に正確な様式で配置されるように、ペプチド溶液、組成物、またはハイドロゲルの、増強され、よりターゲティングされた送達を可能としうる。選択的投与は処置の配置および有効性を、シリンジまたは他の送達デバイスの使用を上回って顕著に改善する、増強され、ターゲティングされた送達をもたらしうる。本開示のシステム、方法、およびキットにおいて使用されうる送達デバイスは、シリンジ、ピペット、チューブ、カテーテル、シリンジカテーテル、他のニードルベースのデバイス、チューブまたはカテーテルを含みうる。

カテーテルの使用は、カテーテルを位置へと誘導するのに使用されるガイドワイヤー、またはカテーテルの適正な留置ならびに標的エリアおよび／もしくは標的エリアへの経路の可視化を可能としうる内視鏡などの付属デバイスの使用を含みうる。内視鏡は、光およびカメラ、または被験体の体内の画像を得ることを可能とする他の可視化デバイスのうちの少なくとも１つを含みうる、チューブでありうる。ガイドワイヤーまたは内視鏡は、消化管を介して被験体へと導入することができる。例えば、口腔、咽喉、食道、胃、小腸、大腸もしくは結腸、または直腸を介して。カテーテルを消化管へと導入する前に、内視鏡を消化管へと導入することができる。

シリンジ、ピペット、チューブ、カテーテル、シリンジカテーテル、他のニードルベースのデバイス、カテーテル、または内視鏡などの送達デバイスの使用は、シリンジ、ピペット、チューブ、シリンジカテーテル、他のニードル型のデバイス、カテーテル、または内視鏡のうちの少なくとも一部が開口部または管腔に入って、ペプチド、ペプチド溶液、組成物、またはハイドロゲルを、標的エリアへと投与しうるように、標的エリアが存在する開口部または管腔の直径またはサイズの決定を必要としうる。

ある種の実施形態では、ハイドロゲルは、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて形成し、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて所望の位置へと投与することができる。ある種の例では、この位置は、閉塞を予防するまたは減少させることが所望されるエリアでありうる。他の例では、この位置は、エリアの上流、エリアの下流、またはエリアの実質的に近傍でありうる。ハイドロゲルの、閉塞を予防するもしくは減少させることが所望されるエリア、または狭窄を予防するもしくは減少させることが所望されるエリアへの移動を可能とすることが所望されうる。代替的に、別の手技は、ハイドロゲルを、それが所望されるエリア内に配置しうる。所望の位置または標的エリアは、組織が摘出されたエリアのうちの少なくとも一部、例えば、がん性組織もしくは前がん性組織が摘出されたエリア内もしくはエリア近傍、１もしくは複数の腫瘍が摘出されたエリア内もしくはエリア近傍、または生検が採取されたエリア内もしくはエリア近傍でありうる。所望の位置または標的エリアは、ＥＳＤ誘導性潰瘍もしくはＥＳＤ誘導性病変またはＥＲＤ誘導性潰瘍もしくはＥＲＤ誘導性病変でありうる。

本開示のある種の態様では、ハイドロゲルは、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて形成することができる。水溶液など、自己集合性ペプチドを含む溶液は、被験体のｉｎ ｖｉｖｏにおける位置またはエリアへと挿入して、その位置において、閉塞を予防するまたは減少させることもでき、狭窄を予防するまたは減少させることもできる。ある種の例では、ハイドロゲルは、ｉｎ ｖｉｖｏの１つの位置において形成し、閉塞を予防するもしくは減少させることが所望されるエリア、または狭窄を予防するもしくは減少させることが所望されるエリアへと移動させることができる。代替的に、別の手技により、ハイドロゲルを、閉塞を予防するもしくは減少させることが所望されるエリア、または狭窄を予防するもしくは減少させることが所望されるエリア内に配置することもできる。本開示のペプチドは、粉末、溶液、ゲルなどの形態でありうる。自己集合性ペプチドは、溶液のｐＨおよび塩濃度の変化に応答してゲル化するので、適用の間または投与の間において被験体と接触するとゲル化する液体として分布させることができる。

ある種の環境では、ペプチド溶液は、弱いハイドロゲルであり得、結果として、本明細書で記載される送達デバイスにより投与することができる。

１または複数の実施形態に従い、自己集合性ペプチドは、消化管閉塞を予防しうる。少なくともいくつかの実施形態では、自己集合性ペプチドは、粘膜上皮形成を容易にして、術後の瘢痕形成を予防または減少させうる。術後の瘢痕形成の予防または減少は、少なくとも部分的に、消化管の閉塞または狭窄の予防または減少をもたらす。ある種の実施形態では、これは、ハイドロゲルが、配置されると、標的エリアの治癒を促進する細胞の浸潤を可能とする足場をもたらす。

自己集合性ペプチドの、粘膜皮下層への投与は、病変を固有筋層から浮かび上がらせ、次いで、高頻度の使用により、これを引きはがすことができる。また、病変の切除時において、止血効果も得ることができ、手術の難度および危険度の低減が可能となる。

１または複数の実施形態に従い、肉眼的足場が提供される。肉眼的足場は、複数の自己集合性ペプチドであって、それらの各々が、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、消化管の病変エリア内に配置することが可能な有効な量であって、治癒を促進し、消化管閉塞を予防するのに有効な量で含むか、これらから本質的になるか、またはこれらからなる、複数の自己集合性ペプチドを含むか、これらから本質的になるか、またはこれらからなり得る。

いくつかの実施形態に従い、自己集合性ペプチドは、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる両親媒性であることが可能である。１または複数の実施形態に従い、被験体を評価して、消化管閉塞または狭窄を予防することに対する必要を決定することができる。評価が完了したら、被験体へと投与するペプチド溶液を調製することができる。

いくつかの実施形態では、生物学的活性剤を、本開示の材料および方法と共に使用することができる。生物学的活性剤は、被験体または実験室環境における、ある活性、状態の調節、モジュレーション、もしくは調整、または他の活性を付与しうる、ペプチド、ＤＮＡ配列、化合物、または無機化合物もしくは有機化合物を含む化合物を含みうる。生物学的活性剤は、別の成分と相互作用して、このような活性をもたらしうる。本明細書のいくつかの実施形態に従い、生物学的活性剤を、薬物と称することができる。ある種の実施形態では、１または複数の生物学的活性剤は、ペプチド系の外側へと徐々に放出されうる。例えば、１または複数の生物学的活性剤は、ハイドロゲルから徐々に放出されうる。ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏのいずれにおいても、試験により、生物学的活性剤のこの漸進的な放出が裏付けられている。生物学的活性剤は、被験体へと投与する前に、ペプチド溶液へと添加することもでき、溶液とは別個に被験体へと投与こともできる。

本開示は、場合によって、自己集合性オリゴペプチドとも称する自己集合性ペプチドを含む、水溶液、ハイドロゲル、足場、および膜に関する。ペプチドは、約６〜約２００アミノ酸残基を有するペプチドからなりうる。自己集合性ペプチドは、生理学的なｐＨおよび／もしくは一価カチオンなどのカチオン、または消化管へと適用可能な他の条件の存在下にある水溶液中でベータシート構造を呈示しうる。ペプチドは、両親媒性であることが可能であり、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる。ある種の実施形態では、ペプチドは、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる両親媒性であることが可能な、第１の部分と、両親媒性ではない別の部分または領域とを含みうる。

ペプチドは一般に、水溶液中で安定であることが可能であり、生理学的条件、中性のｐＨ、または生理学的レベルの塩へと曝露されると、大型の、肉眼的構造物、足場、またはマトリックスへと自己集合しうる。ハイドロゲルが形成されると、分解されない場合もあり、ある期間の後で分解または生体分解される場合もある。分解速度は、アミノ酸配列およびその周囲の条件のうちの少なくとも１つに少なくとも部分的に基づきうる。

「肉眼的」とは、１０倍またはそれ未満の拡大下で目視可能となるのに十分な程度の大きさを有することを意味する。好ましい実施形態では、肉眼的構造物は、肉眼で目視可能である。肉眼的構造物は、透明な場合もあり、二次元の場合もあり、三次元の場合もある。各大きさは、少なくとも１０μｍのサイズであることが典型的である。ある種の実施形態では、多くの場合、少なくとも２つの大きさは、少なくとも１００μｍまたは少なくとも１０００μｍのサイズである。少なくとも２つの大きさは、少なくとも１〜１０ｍｍのサイズ、１０〜１００ｍｍのサイズ、またはこれを超えるサイズである。

ある種の実施形態では、フィラメントのサイズは、約１０ナノメートル（ｎｍ）〜約２０ｎｍでありうる。フィラメント間距離は、約５０ｎｍ〜約８０ｎｍでありうる。

「生理学的条件」は、天然では、特定の生物、細胞系、または被験体に応じて生じ得、これは、人工の実験室条件とは対照的でありえる。条件は、１もしくは複数の特定の特性または１もしくは複数の範囲の特性など、１または複数の特性を含みうる。例えば、生理学的条件は、温度またはある範囲の温度、ｐＨまたはある範囲のｐＨ、圧力またはある範囲の圧力、および１または複数の濃度の特定の化合物、塩、および他の成分を含みうる。例えば、いくつかの例では、生理学的条件は、摂氏約２０〜約４０度の範囲の温度を含みうる。いくつかの例では、気圧は、約１ａｔｍでありうる。ｐＨは、中性のｐＨの範囲でありうる。例えば、ｐＨは、約６〜約８の範囲でありうる。生理学的条件は、膜またはハイドロゲルの形成を誘導しうる、一価の金属カチオンなどのカチオンを含みうる。これらは、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）を含みうる。生理学的条件はまた、約１ｍＭ〜約２０ｍＭの間の、グルコース濃度、スクロース濃度、または他の糖の濃度も含みうる。生理学的条件は、口腔、咽喉、食道、胃、小腸、大腸、および直腸の局所条件を含みうる。

いくつかの実施形態では、自己集合性ペプチドは、約６アミノ酸〜約２００アミノ酸の間のペプチドでありうる。ある種の実施形態では、自己集合性ペプチドは、少なくとも約７アミノ酸のペプチドでありうる。ある種の実施形態では、自己集合性ペプチドは、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のペプチドでありうる。ある種のさらなる実施形態では、自己集合性ペプチドは、約７アミノ酸〜約１７アミノ酸の間のペプチドでありうる。他のある種の例では、自己集合性ペプチドは、少なくとも８アミノ酸、少なくとも約１２アミノ酸、または少なくとも約１６アミノ酸のペプチドでありうる。

ペプチドはまた、相補性であり、かつ、構造適合性でもありうる。相補性とは、それらの親水性側鎖の間で形成するイオン化対および／または水素結合を介して相互作用するペプチドの能力を指し、構造適合性とは、相補性のペプチドのペプチド骨格の間の一定の距離を維持する、該相補性のペプチドの能力を指す。これらの特性を有するペプチドは、二次構造レベルにおけるベータシートの形成および安定化、ならびに三次構造レベルにおいて絡み合ったフィラメントを結果としてもたらす分子間相互作用に関与する。

上述の特性により特徴づけられる、ペプチドの同種混合物および異種混合物のいずれも、安定的な、肉眼的膜、肉眼的フィラメント、および肉眼的ハイドロゲルを形成しうる。自己相補性であり、かつ、自己適合性のペプチドは、同種混合物中で、膜、フィラメント、およびハイドロゲルを形成しうる。また、同種溶液中で膜、フィラメントおよびハイドロゲルを形成しえないペプチドを含む異種ペプチドであって、互いに対して相補性であり、かつ／または構造適合性である異種ペプチドも、肉眼的膜、肉眼的フィラメントおよび肉眼的ハイドロゲルへと自己集合しうる。

膜、フィラメント、およびハイドロゲルは、非細胞傷害性でありうる。本開示のハイドロゲルは、被験体において消化および代謝されうる。ハイドロゲルは、３０日またはそれ未満内に生体分解されうる。ハイドロゲルは、組成が単純であり、透過性であり、大量に作製するのが容易であり、比較的廉価である。膜およびフィラメント、ハイドロゲルまたは足場はまた、滅菌条件で作製および保管することもできる。膜を形成するのに最適の長さは、アミノ酸組成、溶液条件、および標的部位における条件のうちの少なくとも１つと共に変化しうる。

ある種の実施形態では、被験体における消化管閉塞を予防する方法が提供される。方法は、消化管閉塞の少なくとも部分的な予防が所望される消化管の標的エリアに、カテーテルを導入するステップを含みうる。方法は、カテーテルを介して、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、消化管の条件下でハイドロゲルを形成して消化管閉塞の少なくとも（ａ ｌｅａｓｔ）部分的な予防をもたらすのに有効な量および有効な濃度で含む自己集合性ペプチドを含む溶液を投与するステップをさらに含みうる。方法は、カテーテルを、消化管から取り出すステップをさらに含みうる。

方法は、消化管のうちの少なくとも一部を含む領域または標的エリアを可視化するステップをさらに含みうる。領域または標的エリアを可視化するステップは、消化管の標的エリアを同定すること、カテーテルを導入すること、カテーテルの端部を、標的エリアに配置すること、溶液を投与すること、カテーテルを取り出すこと、およびカテーテルを取り出した後で、消化管をモニタリングすることのうちの少なくとも１つの間に、領域または標的エリアを可視化することを含みうる。領域または標的エリアを可視化するステップは、溶液の、消化管への選択的投与をもたらしうる。可視化するステップは、溶液を投与する前、投与の間、および投与した後の、任意の時点において施すことができる。可視化は、例えば、投与の約１週間後、投与の約４週間後、および投与の約８週間後のうちの少なくとも１つの時点において施すことができる。

投与される溶液は、少なくとも約７アミノ酸を含む自己集合性ペプチドから本質的になりうるか、またはこれからなりうる。投与される溶液は、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドから本質的になりうるか、またはこれからなりうる。ペプチドは、両親媒性であることが可能であり、ペプチドのうちの少なくとも一部は、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間が交互でありえる。

本開示の容易とする方法は、カテーテルを介して、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、消化管の条件下でハイドロゲルを形成して消化管閉塞を少なくとも部分的に予防するまたは減少させるのに有効な量および有効な濃度で含む自己集合性ペプチドを含む溶液を投与するための指示を与えるステップを含みうる。ペプチドは、両親媒性であることが可能であり、ペプチドのうちの少なくとも一部は、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間が交互でありえる。

容易とする方法は、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、生理学的条件下でハイドロゲルを形成して消化管閉塞を少なくとも部分的に予防するまたは減少させるのに有効な量および有効な濃度で含む自己集合性ペプチドを含む溶液を提供するステップを含みうる。ペプチドは、両親媒性であることが可能であり、ペプチドのうちの少なくとも一部は、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間が交互でありえる。

容易とする方法は、消化管のうちの少なくとも一部を含む領域または標的エリアを可視化する指示を与えるステップを含みうる。方法は、消化管の標的エリアを同定すること、カテーテルを導入すること、カテーテルの端部を、標的エリアに配置すること、溶液を投与すること、カテーテルを、消化管から取り出すこと、およびカテーテルを取り出した後で、消化管をモニタリングすることのうちの少なくとも１つの間に、標的エリアまたは領域を可視化する指示を与えるステップを含みうる。容易とする方法は、内視鏡を使用してイメージングすることにより、領域または標的エリアを可視化する指示を与えるステップを含みうる。方法は、投与に続く約１週間、約４週間、または約８週間の期間において、標的エリアを可視化する指示を与えるステップを含みうる。指示は、標的エリアにおけるまたは標的エリアの周囲におけるエリアをモニタリングするように与えることができる。指示は、外科的手技の後で本開示の方法を使用するように与えることができる。

自己集合性ペプチドまたは両親媒性ペプチドのアミノ酸は、ｄ−アミノ酸、ｌ−アミノ酸、またはこれらの組合せから選択することができる。疎水性アミノ酸は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、およびＧｌｙを含みうる。親水性アミノ酸は、塩基性アミノ酸、例えば、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｏｒｎ；酸性アミノ酸、例えば、Ｇｌｕ、Ａｓｐ；または水素結合を形成するアミノ酸、例えば、Ａｓｎ、Ｇｌｎでありうる。酸性アミノ酸および塩基性アミノ酸は、ペプチド上でクラスター化しうる。末端残基のカルボキシル基およびアミノ基は、保護される場合もあり、保護されない場合もある。膜またはハイドロゲルは、自己相補性ペプチドおよび自己適合性ペプチドの同種混合物中で形成することもでき、互いに対して相補性であり、かつ、構造適合性であるペプチドの異種混合物中で形成することもできる。上記の基準に当てはまるペプチドは、本明細書で記載される適切な条件下で、肉眼的膜へと自己集合しうる。

自己集合性ペプチドは、約６〜約２００アミノ酸残基からなりうる。ある種の実施形態では、約７〜約３２残基を、自己集合性ペプチド内で使用しうるのに対し、他の実施形態では、自己集合性ペプチドは、約７〜約１７残基を有しうる。ペプチドの長さは、約５ｎｍでありうる。

本開示のペプチドは、アルギニン、アラニン、アスパラギン酸、およびアラニン（Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ（ＲＡＤＡ）（配列番号１））の反復配列を有するペプチドを含むことが可能であり、このようなペプチド配列は、（ＲＡＤＡ）_ｐ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）により表すことができる。

他のペプチド配列は、イソロイシン、グルタミン酸、イソロイシン、およびリシン（Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（ＩＥＩＫ）（配列番号３））の反復配列を有する自己集合性ペプチドにより表すことができ、このようなペプチド配列は、（ＩＥＩＫ）_ｐ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号４）により表される。他のペプチド配列は、イソロイシン、グルタミン酸、イソロイシン、およびリシン（Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（ＩＥＩＫ）（配列番号３））の反復配列を有する自己集合性ペプチドにより表すことができ、このようなペプチド配列は、（ＩＥＩＫ）_ｐＩ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）により表される。

他のペプチド配列は、リシン、ロイシン、アスパラギン酸、およびロイシン（Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ（ＫＬＤＬ）（配列番号６））の反復配列を有する自己集合性ペプチドにより表すことができ、このようなペプチド配列は、（ＫＬＤＬ）_ｐ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号７）により表される。他のペプチド配列は、リシン、ロイシン、およびアスパラギン酸（Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＫＬＤ）（配列番号８））の反復配列を有する自己集合性ペプチドにより表すことができ、このようなペプチド配列は、（ＫＬＤ）_ｐ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号９）により表される。本発明による自己集合性ペプチドの具体例としては、配列Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ（ＲＡＤＡ）_４（配列番号１０）を有する自己集合性ペプチドＲＡＤＡ１６、配列Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ（ＩＥＩＫ）_３Ｉ（配列番号１１）を有する自己集合性ペプチドＩＥＩＫ１３、配列Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ（ＩＥＩＫ）_４Ｉ（配列番号１２）を有する自己集合性ペプチドＩＥＩＫ１７、または配列Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ（ＫＬＤＬ）_３（配列番号１３）を有する自己集合性ペプチドＫＬＤＬ１２を挙げることができる。

本明細書で開示されるペプチド配列の各々は、列挙されたアミノ酸配列を含むペプチド、これらから本質的になるペプチド、およびこれらからなるペプチドをもたらしうる。

本開示は、本明細書で列挙されるペプチドを含むか、これらから本質的になるか、またはこれらからなる溶液、ハイドロゲル、および足場のための材料、方法、およびキットを提示する。

１重量／体積（ｗ／ｖ）パーセントの水性（水）溶液および２．５ｗ／ｖパーセントの（ＲＡＤＡ）_４（配列番号１０）が、３−Ｄ Ｍａｔｒｉｘ Ｃｏ．，Ｌｔｄによる製品であるＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（商標）ペプチドハイドロゲルとして利用可能である。

ある種のペプチドは、細胞接着リガンドＲＧＤ（アルギニン−グリシン−アスパラギン酸）と類似する配列を含有しうる。これらのペプチドの、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける細胞成長を支持する適性は、培養された、様々な初代細胞および形質転換細胞を、Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ（ＡＥＡＥＡＫＡＫＡＥＡＥＡＫＡＫ（ＥＡＫ１６）（配列番号１４）、ＲＡＤ１６（配列番号２６）、ＲＡＤＡ１６（配列番号１０）のホモポリマーシート、ならびにＲＡＤ１６（配列番号２６）とＥＡＫ１６（配列番号１４）とのヘテロポリマーへと導入することにより調べた。ＲＡＤベースのペプチドは、この配列の、ＲＧＤとの類似性のために、具体的な目的のペプチドでありうる。ＲＡＤ配列は、細胞外マトリックスタンパク質であるテネイシン内に存在する高アフィニティーリガンドであり、インテグリン受容体により認識される。ＥＡＫ１６ペプチド（配列番号１４）および本明細書で開示される他のペプチドは、酵母タンパク質であるズオチンの領域に由来した。

ペプチドの自己集合は、ペプチドを構成するアミノ酸による、ペプチド分子の間の水素結合および疎水性結合に帰することができる。

本開示の自己集合性ペプチドは、約１０ｎｍ〜約２０ｎｍの範囲のナノファイバー直径を有しえ、平均小孔サイズは約５ｎｍ〜約２００ｎｍの範囲である。ある種の実施形態では、ナノファイバー直径、小孔サイズ、およびナノファイバー密度を、使用されるペプチド溶液の濃度、およびペプチド溶液の体積など、使用されるペプチド溶液の量のうちの少なくとも１つにより制御することができる。閉鎖に対して十分に施すのに所望されるナノファイバー直径、小孔サイズ、および密度のうちの少なくとも１つをもたらす、溶液中のペプチドの具体的な濃度およびペプチド溶液の具体的な量のうちの少なくとも１つを、それ自体として選択することができる。

本明細書で用いられる場合、消化管閉塞を少なくとも部分的に予防するまたは減少させるのに有効なペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルの量である「有効な量」または「治療有効量」とは、被験体へと単回投与または複数回投与（適用または注射）されると、障害を伴う被験体の、このような処置の非存在下で予測される状態を上回る処置に、または治癒、緩和、軽減、もしくは改善に有効な、ペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルの量を指す。これは、ペプチド溶液中またはハイドロゲル中のペプチドの特定の濃度またはある範囲の濃度を含む場合もあり、加えて、または代替的に、ペプチド溶液またはハイドロゲルの特定の体積またはある範囲の体積を含む場合もある。容易とする方法は、有効な量および有効な濃度のうちの少なくとも１つを調製する指示を与えるステップを含みうる。

投与量、例えば、投与された（例えば、適用されたまたは注射された）体積または濃度は、ペプチドの形態（例えば、ペプチド溶液中、ハイドロゲル中、または凍結乾燥形態中など、乾燥形態中）、および活用される投与経路に応じて変化しうる。正確な処方、投与経路、体積、および濃度は、被験体の状態に照らし、かつ、ペプチド溶液、ハイドロゲル、またはペプチドの他の形態が投与される特定の標的エリアまたは標的位置に照らして選択することができる。本明細書で列挙される用量より少ないかまたは多い用量が、使用または必要とされる場合もある。任意の特定の被験体のための具体的な投与量および処置レジメンは、援用される具体的な１または複数のペプチド、処置されるエリアの大きさ、結果として得られる、所望の標的エリアに配置されうるハイドロゲルの所望の厚さ、および処置時間の長さを含みうる、様々な因子に依存しうる。具体的な投与量および処置レジメンに影響を及ぼしうる他の因子は、年齢、体重、全般的な健康状態、性別、投与回数、分解速度、疾患、状態、または症状の重症度および経過、ならびに主治医の判断を含む。ある種の実施形態では、ペプチド溶液は、単一用量で投与することができる。他の実施形態では、ペプチド溶液は、１超の用量または複数用量で投与することができる。ペプチド溶液は、少なくとも２用量で投与することができる。

ペプチド溶液の有効な量および有効な濃度は、消化管閉塞を少なくとも部分的に予防するまたは減少させるように選択することができる。いくつかの実施形態では、有効な量および有効な濃度のうちの少なくとも１つは、標的エリアの大きさまたは直径に部分的に基づきうる。他の実施形態では、有効な量および有効な濃度のうちの少なくとも１つは、標的エリアまたはその近傍における１または複数の流体の流量に部分的に基づく。さらに他の実施形態では、有効な量および有効な濃度のうちの少なくとも１つは、組織などの消化管から摘出される材料または腫瘍の大きさまたは直径に部分的に基づきうる。

なおも他の実施形態では、有効な量および有効な濃度のうちの少なくとも１つは、標的エリアの大きさまたは直径、標的エリアにおける１もしくは複数の流体の流量または標的エリアの近傍における１もしくは複数の流体の流量、および組織などの消化管から摘出される材料または腫瘍の大きさまたは直径のうちの少なくとも１つに部分的に基づきうる。

有効な量とは、本明細書で記載される通り、消化管閉塞の少なくとも部分的な予防または減少をもたらしうる量でありうる。消化管の多様な特性は、標的エリアの大きさまたは直径、標的エリアまたはその近傍における１または複数の流体の流量、標的エリアまたはその近傍におけるｐＨ、および標的エリアまたはその近傍における多様な塩の濃度のうちの少なくとも１つを含む、有効な量の選択または決定に寄与しうる。有効な量を決定しうるさらなる特性は、ペプチド溶液を送達する経路に沿った多様な位置における、上記で列挙した多様な特性を含む。例えば、標的エリアが胃内に位置する場合、胃の１もしくは複数の特性および／または胃への経路、例えば、食道の１もしくは複数の特性は、有効な量の選択または決定に、少なくとも部分的に影響を及ぼすか、またはそれをもたらしうる。

有効な量は、約０．１ミリリットル（ｍＬ）〜約１００ｍＬの体積のペプチド溶液を含みうる。有効な量は、約０．１ｍＬ〜約１０ｍＬの体積のペプチド溶液を含みうる。ある種の実施形態では、有効な量は、約０．５ｍＬでありうる。他の実施形態では、有効な量は、約１．０ｍＬでありうる。さらに他の実施形態では、有効な量は、約１．５ｍＬでありうる。なおさらに他の実施形態では、有効な量は、約２．０ｍＬでありうる。他のいくつかの実施形態では、有効な量は、約３．０ｍＬでありうる。ある種の実施形態では、有効な量は、標的エリア１ｃｍ^２当たり約０．１ｍＬ〜約５ｍＬでありうる。ある種の実施形態では、有効な量は、標的エリア１ｃｍ^２当たり約１ｍＬでありうる。この有効な量は、２．５重量／体積パーセントの本開示のペプチド溶液など、濃度と関連させて使用することができる。

いくつかの実施形態では、消化管閉塞のより有効な予防または減少は、投与されるペプチド溶液の体積を増加させることにより達成することもでき、投与される溶液中のペプチド濃度を上昇させることにより達成することもできる。これは、標的エリア内により長いかまたはより厚いハイドロゲルを形成すること可能とし、標的エリアにおけるハイドロゲルのより確実な位置を可能としうる。十分な高体積が選択されない場合、ハイドロゲルは、所望の期間にわたり、標的エリアで消化管閉塞を予防するまたは減少させるのに有効でない可能性がある。

本明細書で記載される通り、有効な濃度は、所望される消化管閉塞の予防するまたは減少をもたらしうる量でありうる。標的エリアの大きさまたは直径、標的エリアにおける１もしくは複数の流体の流量または標的エリアの近傍における１もしくは複数の流体の流量、および組織などの消化管から摘出される材料または腫瘍の大きさまたは直径のうちの少なくとも１つを含む、消化管の多様な特性は、有効な濃度の選択または決定に寄与しる。

有効な濃度は、約０．１重量／体積（ｗ／ｖ）パーセント〜約１０ｗ／ｖパーセントの範囲の、溶液中のペプチド濃度を含みうる。有効な濃度は、約０．１ｗ／ｖパーセント〜約３．５ｗ／ｖパーセントの範囲の、溶液中のペプチド濃度を含みうる。ある種の実施形態では、有効な濃度は、約１ｗ／ｖパーセントでありうる。他の実施形態では、有効な濃度は、約２．５ｗ／ｖパーセントでありうる。さらに他の実施形態では、有効な濃度は、約３．０ｗ／ｖパーセントでありうる。

ある種の実施形態では、ペプチドの濃度が大きなペプチド溶液は、適当な位置にとどまり、有効な消化管閉塞の予防または減少をもたらす能力を有する、より有効なハイドロゲルをもたらしうる。ペプチド溶液を送達する目的では、高濃度のペプチド溶液の粘性は、溶液の有効で選択的な投与を可能とするにはあまりに高くなりすぎる。十分な高濃度が選択されない場合、ハイドロゲルは、所望の期間にわたり、標的エリアで消化管閉塞の予防または減少を維持するのに有効でない可能性がある。

有効な濃度は、注射、または特定の直径もしくはゲージのカテーテルもしくはニードルを使用する他の手段により投与されうる溶液をもたらすように選択することができる。

本開示の方法は、治療有効量の、本明細書で記載されるペプチド、組成物、ペプチド溶液、膜、フィラメント、およびハイドロゲルの単回投与のほか、複数回投与も想定する。本明細書で記載されるペプチドは、被験体の状態の性質、重症度、および広がりに応じて、規則的な間隔で投与することができる。いくつかの実施形態では、ペプチド、組成物、ペプチド溶液、膜、フィラメント、またはハイドロゲルは、単回投与で投与することができる。いくつかの実施形態では、本明細書で記載されるペプチド、組成物、ペプチド溶液、またはハイドロゲルは、複数回投与で投与される。いくつかの実施形態では、治療有効量のペプチド、組成物、ペプチド溶液、膜、フィラメント、またはハイドロゲルは、規則的な間隔で定期的に投与することができる。選択される規則的な間隔は、投与される溶液の初期ペプチド濃度、投与される量、および形成されたハイドロゲルの分解速度のうちのいずれか１または複数に基づきうる。例えば、初期投与の後、後続の投与は、例えば、１週間後、２週間後、４週間後、６週間後、または８週間後に施しうる。後続の投与は、ペプチドの濃度および体積が初期投与と同じ溶液の投与を含む場合もあり、ペプチドの濃度および体積がより小さいかまたは大きい溶液の投与を含む場合もある。ペプチド溶液の適切な後続の投与の選択は、標的エリアおよび標的エリアの周囲のエリアのイメージングならびに被験体の状態に基づく必要の確認に基づきうる。所定の間隔は、各回の後続の投与について同じ場合もあり、異なる場合もある。いくつかの実施形態では、ペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルは、被験体の生涯にわたり、被験体における、少なくとも部分的な消化管閉塞の予防または減少を維持するように、所定の間隔で長期投与することができる。所定の間隔は、各回の後続の投与について同じ場合もあり、異なる場合もある。これは、先行する投与により形成されたハイドロゲルが、部分的または完全に破壊または分解されているのかどうかに依存しうる。後続の投与は、ペプチドの濃度および体積が初期投与と同じ溶液の投与を含む場合もあり、ペプチドの濃度および体積がより小さいかまたは大きい溶液の投与を含む場合もある。ペプチド溶液の適切な後続の投与の選択は、標的エリアおよび標的エリアの周囲のエリアのイメージングならびに被験体の状態に基づく必要の確認に基づきうる。

ＲＡＤＡ１６（配列番号１０）など、本開示の自己集合性ペプチドは、識別可能な、生理学的または生物学的に活性のモチーフまたは配列を欠くペプチド配列であることが可能であり、したがって、内因性の細胞機能を損なう可能性がない。生理学的に活性のモチーフは、転写など、多数の細胞内現象を制御することが可能であり、生理学的に活性のモチーフの存在は、モチーフを認識する酵素による、細胞質内タンパク質または細胞表面タンパク質のリン酸化をもたらしうる。生理学的に活性のモチーフが、ペプチドによる組織閉鎖剤中に存在する場合、多様な機能を有するタンパク質の転写は、活性化される場合もあり、抑制される場合もある。本開示の自己集合性ペプチドは、このような生理学的に活性のモチーフを欠くことが可能であり、したがって、この危険性を伴わない。

糖を、自己集合性ペプチド溶液へと添加して、組織閉鎖効果を低減せずに、溶液の浸透圧を、低張性から、等張性へと改善し、これにより、生物学的安全性の増大を可能とすることができる。ある種の例では、糖は、スクロースまたはグルコースでありうる。

膜を形成するのに最適の長さは、アミノ酸組成と共に変化しうる。本開示のペプチドにより想定される安定化因子は、相補性のペプチドは、ペプチド骨格の間の一定の距離を維持することである。本明細書では、対合すると一定の距離を維持しうるペプチドを、構造適合性であると称する。ペプチド間距離は、対内の各アミノ酸の側鎖上の非分岐原子の数を合計することにより、各イオン化対または水素結合対について計算することができる。例えば、リシンは、５つの非分岐原子、グルタミン酸は、４つの非分岐原子を、それぞれ、その側鎖上において有する。同種混合物中または異種混合物中で膜、ハイドロゲル、または足場を形成しうるペプチドの他の例を、表１に列挙する。

両親媒性配列、長さ、相補性および構造適合性という基準は、ペプチドの異種混合物にも適用される。例えば、２つの異なるペプチドを使用して、膜を形成することができる：ペプチドＡである、Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｓｐ（ＶＲＶＲＶＤＶＤＶＲＶＲＶＤＶＤ）（配列番号６６）は、ＡｒｇおよびＡｓｐを、親水性残基として有し、ペプチドＢである、Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ（ＡＤＡＤＡＫＡＫＡＤＡＤＡＫＡＫ）（配列番号６７）は、ＬｙｓおよびＡｓｐを有する。ペプチドＡとペプチドＢとは、相補性であり、Ａ上のＡｒｇは、Ｂ上のＡｓｐとイオン化対を形成することが可能であり、Ａ上のＡｓｐは、Ｂ上のＬｙｓとイオン化対を形成しうる。したがって、ペプチドＡおよびＢの異種混合物中では、膜が形成する可能性があるが、膜はペプチドＡまたはＢのいずれかから同種で構成される。

膜およびハイドロゲルはまた、それらが互いに対して相補性であり、かつ、構造適合性であれば、それらの各々が単独では膜を形成しないペプチドの異種混合物からも形成されうる。例えば、（Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｌａ）_４（ＫＡＫＡ）_４（配列番号１５）と、（Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ａｌａ）_４（ＥＡＥＡ）_４（配列番号６８）との混合物、または（Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｌａ）_４（ＫＡＫＡ）_４（配列番号１５）と、（Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｓｐ）_４（ＡＤＡＤ）_４（配列番号６９）との混合物であれば、膜を形成することが予測されるが、これらのペプチド単独のいずれも、相補性の欠如に起因して、膜を形成しないことが予測される。

完全には相補性でないまたは完全には構造適合性でないペプチドは、核酸のハイブリダイゼーションにおける塩基対のミスマッチと類似するミスマッチを含有するペプチドであると考えることができる。ミスマッチした対の破壊力よりも、ペプチド間相互作用の全体的な安定性が優位であれば、ミスマッチを含有するペプチドも、膜を形成しうる。機能的にはまた、このようなペプチドも、相補性であるまたは構造適合性であると考えることができる。例えば、ミスマッチしたアミノ酸対も、各側（ｅａｃｈ ｓｉｄｅ）において、完全にマッチしたいくつかの対により取り囲まれていれば、許容されうる。

ペプチドは、化学合成することもでき、天然供給源および組換え供給源から精製することもできる。化学合成されたペプチドを使用することにより、ペプチド溶液に、別の動物の細胞外マトリックスに由来する未確認の成分など、未確認の成分を欠損させることができる。したがって、この特性により、ウイルス感染の危険性を含む、感染の懸念を、従来の組織に由来する生体材料と比較して消失させることができる。これにより、ウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）などの感染を含む、感染の懸念を消失させ、ペプチドを、医療用の使用のために高度に安全とすることができる。

ペプチドの初期濃度は、形成される膜、ハイドロゲル、または足場のサイズおよび厚さにおける因子でありうる。一般に、ペプチド濃度が高くなるほど、膜またはハイドロゲル形成の程度も大きくなる。初期のペプチド濃度を高くした（約１０ｍｇ／ｍｌ）（約１．０ｗ／ｖパーセント）ときに形成されるハイドロゲルまたは足場は、より厚くなる可能性があり、このため、より強くなる可能性がある。

膜、ハイドロゲル、または足場の形成は、極めて急速であることが可能であり、数分間のオーダーでありうる。膜またはハイドロゲルの形成は、不可逆的でありうる。ある種の実施形態では、形成は、可逆的であることが可能であり、他の実施形態では、形成は、不可逆的でありうる。ハイドロゲルは、標的エリアへと投与されると、瞬時に形成しうる。ハイドロゲルの形成は、投与後約１〜２分間以内に生じうる。他の例では、ハイドロゲルの形成は、投与後約３〜４分間以内に生じうる。ある種の実施形態では、ハイドロゲルを形成するのに要する時間は、少なくとも部分的に、ペプチド溶液の濃度、適用されるペプチド溶液の体積、および適用エリアまたは注射エリアにおける条件（例えば、適用エリアにおける一価の金属カチオンの濃度、エリアのｐＨ、およびエリアまたはその近傍における１または複数の流体の存在）のうちの１または複数に基づきうる。プロセスは、１２未満またはそれに等しいｐＨおよび温度の影響を受け得ない。膜またはハイドロゲルは、摂氏約１〜９９度の範囲の温度で形成しうる。

ハイドロゲルは、本開示の方法およびキットを使用して所望される効果をもたらすのに十分な期間にわたり、標的エリアにおいて、定位にとどまりうる。所望の効果は、消化管閉塞を少なくとも部分的に予防するまたは減少させる効果でありうる。

本開示の方法およびキットを使用して所望される効果は、消化管内の外科的手技が実施されるエリアを処置する効果の場合もあり、これらのエリアの治癒の一助となる効果の場合もある。例えば、本開示の方法およびキットを使用して所望される効果は、エリアを処置する効果の場合もあり、これらのエリアの治癒の一助となる効果の場合もあり、該エリアにおいて、消化管内のポリープおよびがん性腫瘍など、病変部位の切除。外科的手技は、内視鏡的粘膜切除術（ＥＭＲ）または内視鏡的粘膜下層剥離術（ＥＳＤ）を含みうる。

膜またはハイドロゲルが所望のエリアにとどまりうる期間は、１または複数日間、最大で１または複数週間にわたりうる。他の例では、膜またはハイドロゲルは、所望のエリアに、最大で３０日間またはそれ超にわたりとどまりうる。膜またはハイドロゲルは、所望のエリアに、無期限にとどまりうる。他の例では、膜またはハイドロゲルは、所望のエリアに、それが自然に分解されるか、または意図的に摘出されるまで、長期にわたりとどまりうる。ハイドロゲルが、ある期間にわたり自然に分解される場合、同じ位置または異なる位置へのハイドロゲルのその後の適用または注射を実施することができる。

ある種の実施形態では、自己集合性ペプチドを、自己集合性ペプチドの有効性の増強をもたらす場合もあり、別の作用、処置、治療をもたらす場合もあり、被験体の１または複数の成分と他の形で相互作用する場合もある１または複数の成分と共に調製することができる。例えば、１または複数の生物学的または生理学的に活性のアミノ酸配列またはモチーフを含むさらなるペプチドを、自己集合性ペプチドと共に、成分のうちの１つとして含めることができる。他の成分は、いくらかの利益を被験体へともたらしうる薬物または他の処置剤などの生物学的活性化合物を含みうる。例えば、がん処置薬または抗がん薬を、自己集合性ペプチドと共に投与することもでき、別個に投与することもできる。

ペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルは、被験体を処置するか、または溶血、炎症、および感染を予防するための低分子薬物を含みうる。低分子薬物は、グルコース、サッカロース、精製サッカロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、デキストラン（ｄｅｓｔｒａｎ）、ヨウ素、塩化リゾチーム、ジメチルイソプロピルアズレン（ｄｉｍｅｔｈｙｌｉｓｏｐｒｐｙｌａｚｕｌｅｎｅ）、トレチノイントコフェリル、ポビドンヨウ素、アルプロスタジルアルファデクス、アニスアルコール、サリチル酸イソアミル、α，α−ジメチルフェニルエチルアルコール、バクダノール、ヘリオナール、スルファジアジン銀（ｓｕｌｆａｚｉｎ ｓｉｌｖｅｒ）、ブクラデシンナトリウム、アルプロスタジルアルファデクス、硫酸ゲンタマイシン、テトラサイクリン塩酸塩、フシジン酸ナトリウム、ムピロシンカルシウム水和物、および安息香酸イソアミルからなる群から選択することができる。他の低分子薬物も想定されうる。タンパク質ベースの薬物も、投与される成分として含めることができ、エリスロポエチン、組織型プラスミノーゲン活性化因子、合成ヘモグロビンおよび合成インスリンを含みうる。

ハイドロゲルへの迅速または即時の形成に対してペプチド溶液を保護する成分を、含ませることができる。これは、ペプチド溶液の、標的エリアへの制御時間放出を可能として、所望される所定の期間にわたりハイドロゲルを形成するように、経時的に分解されうる封入送達系を含みうる。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸など、生体分解性の生体適合性ポリマーを使用することができる。

本明細書で記載される成分のうちのいずれかを、ペプチド溶液中に含めることもでき、ペプチド溶液とは別個に投与することもできる。加えて、本明細書で提示される方法および容易とする方法のうちのいずれかは、１または複数の関係者により実施することもできる。

本開示のペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルは、キットにより提供することができる。また、溶液を被験体の消化管の標的エリアへと投与するための指示も、キットにより提供することができる。ペプチド溶液は、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を、ハイドロゲルを形成して消化管閉塞を少なくとも部分的に予防するまたは減少させるのに有効な量および有効な濃度で含む、自己集合性ペプチドを含みうる。溶液を投与するための指示は、本明細書で提供されるペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルを、例えば、本明細書で記載される投与経路によって、ある用量、体積、もしくは濃度、または投与スケジュールで投与するための方法を含みうる。ペプチドは、両親媒性であり得、ペプチドのうちの少なくとも一部は、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間が交互でありえる。

キットはまた、情報材料も含みうる。情報材料は、説明的な場合もあり、指示的な場合もあり、販売促進的な場合もあり、または本明細書で記載される方法に関する、他の材料の場合もある。一実施形態では、情報材料は、本明細書で開示されるペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルの生成、ペプチド、組成物、ペプチド溶液、またはハイドロゲルの物理的特性、濃度、体積、サイズ、大きさ、有効期限、およびバッチまたは製造地についての情報を含みうる。

キットはまた、ペプチドまたはペプチド溶液の、所望されるエリアへの投与を可能とするデバイスまたは材料も必要に応じて含みうる。例えば、シリンジ、ピペット、チューブ、カテーテル、シリンジカテーテル、または他のニードルベースのデバイスを、キットに含めることができる。加えて、または代替的に、キットは、ガイドワイヤー、内視鏡、またはペプチド溶液の、標的エリアへの選択的な投与をもたらす、他の付属の器具も含みうる。

キットは、加えて、または代替的に、ペプチド溶液、ハイドロゲル、または足場を配置する一助となりうる成分など、他の成分（ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）または成分（ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）も含みうる。キットでは、十分な量または十分な体積のペプチド溶液を、キットと共に提供する場合もあり、提供されない場合もある、スクロース溶液と組み合わせるための指示を提供することができる。ペプチド溶液を希釈して、有効な濃度の溶液を、消化管の標的エリアへと投与するための指示を提供することができる。指示は、ペプチド溶液を希釈剤または溶媒で希釈することについて記載しうる。希釈剤（ｄｉｌｕａｎｔ）または溶媒は、水でありうる。標的エリアへの溶液の有効な濃度および溶液の有効な量のうちの少なくとも１つを決定するための指示も、さらに提供されうる。これは、本明細書で論じられる多様なパラメータに基づき得、標的エリアにおける病変または創傷の直径を含みうる。

他の成分（ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）または成分（ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）も、キット内の、ペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルと同じ組成物または容器に含めることもでき、これらと異なる組成物または容器に含めることもできる。１または複数の成分は、自己集合性ペプチドの有効性の増強をもたらす場合もあり、別の作用、処置、治療をもたらす場合もあり、被験体の１または複数の成分と他の形で相互作用する場合もある成分を含みうる。例えば、１または複数の、生物学的または生理学的に活性の配列またはモチーフを含むさらなるペプチドを、自己集合性ペプチドと共に、成分のうちの１つとして含めることができる。他の成分は、いくらかの利益を被験体へともたらしうる薬物または他の処置剤などの生物学的活性化合物を含みうる。例えば、がん処置薬または抗がん薬を、自己集合性ペプチドと共に投与することもでき、別個に投与することもできる。ペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルは、本明細書で開示される通り、被験体を処置するか、または溶血、炎症、および感染を予防するための低分子薬物を含みうる。スクロース溶液などの糖溶液を、キットとともに供給することができる。スクロース溶液は、２０％のスクロース溶液でありうる。

また、本明細書で開示される他の成分も、キットに含めることができる。

いくつかの実施形態では、キットの成分は、例えば、ゴムまたはシリコーンの止栓（例えば、ポリブタジエンまたはポリイソプレンの止栓）を伴う密封バイアル内に保管する。いくつかの実施形態では、キットの成分は、不活性条件下で（例えば、窒素下またはアルゴンなど、別の不活性ガス下で）保管する。いくつかの実施形態では、キットの成分は、無水（例えば、乾燥剤を伴う）条件下で保管する。いくつかの実施形態では、キットの成分は、アンバーバイアルなど、遮光容器内で保管する。

キットの一部として、またはキットとは別個に、シリンジまたはピペットに、本明細書で開示されるペプチド、ペプチド溶液、またはハイドロゲルをあらかじめ充填することができる。自己集合性ペプチド溶液を、他のデバイスの使用を伴うかまたは伴わずに、シリンジまたはピペットへと供給し、それを、他のデバイスの使用を伴うかまたは伴わずに、シリンジまたはピペットを介して、標的エリアへと投与するように使用者に指示する方法が提供される。他のデバイスは、例えば、ガイドワイヤーを伴うかまたは伴わないカテーテルを含みうる。

本開示のいくつかの実施形態では、自己集合性ペプチドを、ステントまたはカテーテルなどのデバイス上または器具上のコーティングとして使用して、体液の漏出を抑制することができる。自己集合性ペプチドはまた、被験体へと治療効果をもたらすこともでき、標的エリア内に適用することもできる、ガーゼもしくは包帯などの支持体または裏当てへと組み込むかまたは固定することもできる。自己集合性ペプチドはまた、使用のためのスポンジへと含浸させることもできる。

膜はまた、細胞単層を培養するのにも有用でありうる。細胞は、不均一な帯電表面への接着を好む。タンパク質性膜の帯電残基および立体構造は、細胞の接着および移動を促進する。線維芽細胞成長因子などの成長因子を、ペプチド膜へと添加することにより、付着、細胞成長、および神経突起の伸長をさらに改善することができる。

本明細書で開示される方法およびキットについての、これらの実施形態および他の実施形態の機能および利点は、下記の実施例からより十分に理解される。以下の実施例は、開示される処置法の利益を例示することを意図するものであり、その全範囲を例示するものではない。

（実施例１）
開示されるペプチドが消化管閉塞を予防する能力を決定するために、ヒト被験体において試験を実施した。９名の内視鏡術専門医による、食道、胃、および結腸直腸の内視鏡的粘膜下層剥離術（ＥＳＤ）を受けた被験体が試験に参加した。抗血栓治療を施された被験体を研究に含んだが、このような薬物治療は、上記手技前にはもはや施行しなかった。ヘパリンブリッジ療法（ＨＢＴ：ｈｅｐａｒｉｎ ｂｒｉｄｇｅ ｔｈｅｒａｐｙ）後における抗凝固管理にも関わらず、穿孔および凝固障害（国際標準比（ＩＮＲ）＞３）を伴う症例は除外した。図１Ａおよび１Ｂは、ＥＳＤ前の潰瘍を示す。

ＥＳＤ手技の後、自己集合性ペプチドを、被験体における標的エリアへと投与した。図１Ｃは、ＥＳＤの直後におけるエリアを示す。上記手技の直後において、カテーテルを使用して、腫瘍１ｃｍ^２ごとに、３−Ｄ Ｍａｔｒｉｘ，ＬＴＤ．によるＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（商標）ペプチドハイドロゲルの形態で自己集合性ペプチドＲＡＤＡ１６ １ｍＬ（２．５ｗ／ｖパーセント）を、ＥＳＤ誘導性潰瘍へと適用した。胃のＥＳＤ症例において、手技当日の午前に始まり、８週間にわたる、プロトンポンプ阻害剤の単回投与を実施した。胃潰瘍の病期は、ＥＳＤおよび自己集合性ペプチド適用の１、４、および８週間後において、内視鏡検査により、活動期、治癒期、または瘢痕期と評価した。主要評価項目は、ＥＳＤ後出血率であった。副次評価項目は、胃ＥＳＤ誘導性潰瘍の治癒期および瘢痕期への移行率を含む。

募集された１１７例の被験体のうち、１２４カ所の病変（食道：１８カ所；胃：４２カ所；結腸直腸：６４カ所）を有する１１４例の患者を転帰解析に登録し、穿孔のために３例の被験体を除外し、１例は凝固障害を伴った。

１１４例の被験体のうち、ＨＢＴが必要とされる６例（５％）を含む、２２例（１９％）は、以前に抗血栓治療を施されていた。切除された検体の平均サイズは、４０±１６ｍｍ（食道：４１±２０ｍｍ；胃：３６±１２ｍｍ；結腸直腸：４３±１６ｍｍ）であった。ＥＳＤ後出血率は、１．６％（１２４例中２例）（食道：０％；胃：２．４％（４３例中１例、９５％信頼区間、０．０４％〜１２．３％）；結腸直腸：１．６％（６４例中１例、９５％ＣＩ、０．０２％〜１．６％）であった。全てのＥＳＤ後出血は、内視鏡的な管理に成功し、輸血を必要としなかった。１週間での治癒期への移行率は、９８％であった。図１Ｄは、ＥＳＤおよびペプチド適用の１週間後におけるエリアを示す。追跡内視鏡検査により、４および８週間において、瘢痕期がそれぞれ２１％および９７％であることが実証された。図１Ｅは、ＥＳＤおよびペプチド適用の４週間後におけるエリアを示す。図１Ｆは、ＥＳＤおよびペプチド適用の８週間後におけるエリアを示す。

この試験により、自己集合性ペプチドをＥＳＤ後病変の部位へと適用することの有用性および有効性が裏付けられた。自己集合性ペプチドの使用に関連する有害作用はなかった。自己集合性ペプチドは、ＥＳＤ後出血率を低減する一助となった。自己集合性ペプチドはまた、潰瘍の治癒も促進した。本開示の自己集合性ペプチドが、試験した被験体の、処置および回復の増強をもたらしたことから、このペプチドの、ＥＳＤ誘導性潰瘍を処置するための使用の有効性が示される。

（実施例２）
ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（商標）ペプチドハイドロゲルの、ヒトにおける大規模（ｌａｒｇｅ−ｓｃａｌｅ）早期消化器がんおよび前がん性病変のための内視鏡的切除後における狭窄予防剤としての有効性の検証
食道がんの内視鏡的切除後において潰瘍（病変）を有する被験体について、試験を実施した。図２Ａにおいて示される通り、がん部位が、円形エリアのうちの４分の３に及ぶという意味で、４分の３が周方向に広がる早期食道がんが示される。内視鏡的粘膜下層剥離を実施したところ、潰瘍がもたらされた。図２Ｂは、ＥＳＤを使用して病変を切除した後に切除病変が円形エリアのうちの５分の４に及ぶという意味で、５分の４が周方向に広がる人工潰瘍を示す。５分の４に及ぶ周方向の広がりは、ハイドロゲルを形成するペプチド溶液適用の非存在下おいて、狭窄を引き起こしうる。

内視鏡的切除後における人工潰瘍の表面に出血がないことを確認した後で、内視鏡を介してカテーテルを通し、シリンジにより、３−Ｄ Ｍａｔｒｉｘ，ＬＴＤ．によるＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（商標）ペプチドハイドロゲルなどのペプチド溶液（２．５％、適切な用量（１ｃｍ^２当たり１ｍＬ））で、潰瘍の表面を、均等にコーティングした。図２Ｃは、ペプチド溶液によるコーティングを示す。

手術後１週目において、内視鏡を使用して、エリアを再検討する。今回も、第１ラウンドと同様に、ペプチド溶液で、潰瘍の表面を均等にコーティングする。過去の症例については、狭窄を誘導する手術後４および８週目のそれぞれにおいて、内視鏡を使用して、エリアについての３回目および４回目の再検討を実施して、ペプチド溶液によるコーティングの有効性について判定した。図２Ｄは、手術の４週間後における、処置されたエリアを示す。潰瘍は、瘢痕化を示し、狭窄方向における内視鏡の通過も可能である。図２Ｅは、手術の８週間後における、処置されたエリアを示す。狭窄方向における内視鏡の通過が可能である。

狭窄予防剤としてのペプチド溶液の有効性が実証された。加えて、内視鏡的切除の副作用としての遅発性の出血または穿孔も認められなかった。

この実施例は、ペプチド溶液が、潰瘍の表面においてハイドロゲルを形成して、エリアの治癒を促進し、狭窄を減少させる能力を実証する。

Claims (37)

1. 被験体における口腔、咽喉および食道のうちの１つまたは複数における内視鏡的粘膜切除術（ＥＭＲ）または内視鏡的粘膜下層剥離術（ＥＳＤ）の後の狭窄を予防するためのキットであって、
   スクロース、および、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドを、生理学的条件下でハイドロゲルを形成して該狭窄の予防を可能とするのに有効な量および有効な濃度で含む、溶液と、
   該溶液を、該被験体の該口腔、咽喉または食道の標的エリアへと投与するための指示とを含み、ここで、該自己集合性ペプチドが、内因性の細胞機能を与える生理学的または生物学的に活性なモチーフまたは配列を欠く、キット。
2. 前記溶液を、前記被験体の前記口腔、咽喉または食道へと導入するカテーテルをさらに含む、請求項１に記載のキット。
3. 前記溶液を希釈して、有効な濃度の前記溶液を、前記被験体の前記口腔、咽喉または食道へと投与するための指示をさらに含む、請求項１に記載のキット。
4. 前記被験体における前記口腔、咽喉または食道への前記溶液の前記有効な濃度を、該口腔、咽喉または食道の前記標的エリアにおける大きさに基づき決定するための指示をさらに含む、請求項１に記載のキット。
5. 被験体における口腔、咽喉および食道のうちの１つまたは複数における内視鏡的粘膜切除術または内視鏡的粘膜下層剥離術の後の狭窄を予防するための溶液であって、
   該溶液は、約７アミノ酸〜約３２アミノ酸の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドを含み、
   該溶液は、該口腔、咽喉および食道の生理学的条件下でハイドロゲルを形成して該狭窄の予防を可能とするのに有効な量および有効な濃度で投与されることを特徴とし、ここで、該自己集合性ペプチドが、内因性の細胞機能を与える生理学的または生物学的に活性なモチーフを欠く、溶液。
6. 前記有効な量および前記有効な濃度のうちの少なくとも１つが、前記口腔、咽喉または食道における前記内視鏡的粘膜切除術または内視鏡的粘膜下層剥離術の前記標的エリアの大きさに部分的に基づく、請求項５に記載の溶液。
7. 前記有効な量が、標的エリア１ｃｍ^２当たり約１ｍＬである、請求項５に記載の溶液。
8. 前記狭窄の予防を可能とするのに有効な前記濃度が、約０．１重量／体積パーセント〜約３重量／体積パーセントの範囲のペプチドの濃度を含む、請求項５に記載の溶液。
9. 前記狭窄の予防を可能とするのに有効な前記量が、約０．１ｍＬ〜約５ｍＬの範囲の体積を含む、請求項５に記載の溶液。
10. 細胞を実質的に含まない、請求項５に記載の溶液。
11. 薬物を実質的に含まない、請求項５に記載の溶液。
12. 前記自己集合性ペプチドが、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる少なくとも１２アミノ酸を含む両親媒性ペプチドから本質的になる、請求項５に記載の溶液。
13. 前記自己集合性ペプチドが、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる少なくとも１２アミノ酸を含む両親媒性ペプチドを含む、請求項５に記載の溶液。
14. 哺乳動物における狭窄の予防のための、請求項５に記載の溶液。
15. ヒトにおける狭窄の予防のための、請求項１４に記載の溶液。
16. 単一用量で提供される、請求項５に記載の溶液。
17. 少なくとも２用量で提供される、請求項５に記載の溶液。
18. 少なくとも１つの生物学的活性剤をさらに含む、請求項５に記載の溶液。
19. 前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ）_ｐ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ）_ｐＩ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つを含む、請求項５に記載の溶液。
20. 前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ）_ｐ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ）_ｐＩ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つから本質的になる、請求項１９に記載の溶液。
21. 前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ）_４（配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ）_３Ｉ（配列番号１１）のうちの１つを含む、請求項５に記載の溶液。
22. 前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ）_４（配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ）_３Ｉ（配列番号１１）から本質的になる、請求項２１に記載の溶液。
23. 前記自己集合性ペプチドが、生理学的なｐＨおよび／またはカチオンの存在下において水溶液中でベータシート構造を呈示する、請求項５に記載の溶液。
24. 前記カチオンが、一価カチオンである、請求項２３に記載の溶液。
25. 前記自己集合性ペプチドが、生理学的条件下で１０ｎｍ〜２０ｎｍの範囲の直径を有し、平均小孔サイズが５ｎｍ〜２００ｎｍの範囲である構造を形成する、請求項５に記載の溶液。
26. 前記自己集合性ペプチドの長さが、５ｎｍである、請求項５に記載の溶液。
27. 前記自己集合性ペプチドが、生理学的なｐＨおよび／またはカチオンの存在下において水溶液中でベータシート構造を呈示する、請求項１に記載のキット。
28. 前記カチオンが、一価カチオンである、請求項２７に記載のキット。
29. 前記自己集合性ペプチドが、生理学的条件下で１０ｎｍ〜２０ｎｍの範囲の直径を有し、平均小孔サイズが５ｎｍ〜２００ｎｍの範囲である構造を形成する、請求項１に記載のキット。
30. 前記自己集合性ペプチドの長さが、５ｎｍである、請求項１に記載のキット。
31. 前記自己集合性ペプチドが、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる少なくとも１２アミノ酸を含む両親媒性ペプチドから本質的になる、請求項１に記載のキット。
32. 前記自己集合性ペプチドが、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸との間で交互になる少なくとも１２アミノ酸を含む両親媒性ペプチドを含む、請求項１に記載のキット。
33. 前記溶液が、少なくとも１つの生物学的活性剤をさらに含む、請求項１に記載のキット。
34. 前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ）_ｐ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ）_ｐＩ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つを含む、請求項１に記載のキット。
35. 前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ）_ｐ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号２）、および（ＩＥＩＫ）_ｐＩ［配列中、ｐ＝２〜５０である］（配列番号５）のうちの１つから本質的になる、請求項３４に記載のキット。
36. 前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ）_４（配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ）_３Ｉ（配列番号１１）のうちの１つを含む、請求項１に記載のキット。
37. 前記溶液中の前記ペプチドが、（ＲＡＤＡ）_４（配列番号１０）、および（ＩＥＩＫ）_３Ｉ（配列番号１１）から本質的になる、請求項３６に記載のキット。

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