BR112015022747B1

BR112015022747B1 - kit para prevenção de estenose e uso de um peptídeo de automontagem

Info

Publication number: BR112015022747B1
Application number: BR112015022747-3A
Authority: BR
Inventors: Satoru Kobayashi; Toshio Uraoka; Naohisa Yahagi
Original assignee: 3-D Matrix, Ltd
Priority date: 2013-03-14
Filing date: 2014-03-13
Publication date: 2020-10-13
Also published as: CN105339020A; HK1220413A1; KR20160003651A; US9724448B2; AU2014229273B2; JP6478927B2; WO2014141143A1; JP2018115208A; CN105339020B; BR112015022747A2; EP2968693B1; US20160000966A1; CA2905182A1; JP2016515113A; BR112015022747A8; EP2968693A1; AU2014229273A1

Abstract

KIT PARA PREVENÇÃO DE ESTENOSE E USO DE UM PEPTÍDEO DE AUTOMONTAGEM Materiais e métodos para a prevenção da obstrução gastrointestinal são fornecidos. Um peptídeo compreendendo entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos em uma solução pode ser introduzido em um local alvo. O peptídeo pode sofrer auto-organização em condições fisiológicas e/ou na presença de um cátion.

Description

LISTAGEM DE SEQUÊNCIA

[001] O pedido de patente contém uma listagem de sequências, que foi submetida eletronicamente no formato ASCII e é aqui incorporada por referência na sua totalidade. Referida cópia ASCII, criada em 12 de março de 2014, é nomeada T2071-7008WC_SL.txt e é 29161 bytes de tamanho.

CAMPO DA DIVULGAÇÃO

[002] Esta divulgação refere-se, geralmente, aos materiais e aos métodos que podem ser utilizados na medicina, pesquisa e aplicações industriais. Mais particularmente, esta revelação refere-se aos materiais e métodos que podem ser utilizados para a prevenção de obstrução gastrointestinal, incluindo membranas, hidrogéis, composições e soluções, que podem ser utilizados no tratamento de úlceras induzidas por ESD gástrico.

SUMÁRIO

[003] De acordo com um ou mais aspectos, um método para evitar obstrução gastrointestinal em um indivíduo é proporcionado. O método pode compreender a introdução de um cateter no interior de um trato gastrointestinal. O método pode também compreender posicionar uma extremidade do cateter em uma área alvo do trato gastrointestinal em que pelo menos uma prevenção parcial da obstrução gastrointestinal é desejada. O método pode ainda compreender a administração através do cateter de uma solução compreendendo um peptideo de automontagem compreendendo entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz para formar um hidrogel em condições do trato gastrintestinal para proporcionar prevenção de obstrução gastrointestinal. 0 método pode ainda compreender a remoção do cateter a partir do trato gastrointestinal.

[004] De acordo com um ou mais aspectos, um kit para a prevenção de uma obstrução gastrointestinal em um indivíduo é proporcionado. O kit pode compreender uma solução que compreende um peptideo de automontagem compreendendo entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz para formar um hidrogel em condições fisiológicas para permitir a prevenção da obstrução gastrointestinal. O kit também pode fornecer instruções para a administração da solução a uma área alvo do trato gastrointestinal do indivíduo.

[005] De acordo com um ou mais aspectos, um método para facilitar a prevenção de uma obstrução gastrointestinal em um indivíduo pode compreender o fornecimento de uma solução que compreende um peptideo que compreende entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz para formar um hidrogel em condições fisiológicas para permitir a prevenção da obstrução gastrointestinal. O método de facilitar pode também compreender o fornecimento de instruções para a administração da solução para uma área alvo do trato gastrointestinal através da introdução da solução através de um cateter posicionado no trato gastrointestinal.

[006] De acordo com um ou mais aspectos, um suporte macroscópico consistindo essencialmente em uma pluralidade de peptideos de automontagem é fornecido. Cada um dos peptideos de automontagem compreende entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz que seja capaz de ser posicionado no interior de uma área de lesão de um trato gastrointestinal para promover a cura e para evitar uma obstrução gastrointestinal.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[007] Os desenhos anexos não se destinam a ser desenhados em escala. Para fins de clareza, nem todos os componentes podem ser marcados.

[008] Nos desenhos: FIG. IA é uma imagem de uma úlcera antes da dissecção endoscópica da submucosa (ESD), de acordo com algumas modalidades ; FIG. 1B é uma imagem de uma úlcera antes da ESD, de acordo com algumas modalidades; FIG. 1C é uma imagem mostrando uma área logo após ESD, de acordo com algumas modalidades; FIG. 1D é uma imagem mostrando a área de 1 semana após a ESD e aplicação de solução de peptideo, de acordo com algumas modalidades; FIG. 1E é uma imagem mostrando a área de 4 semanas após a ESD e a aplicação de peptideo, de acordo com algumas modalidades; FIG. 1F é uma imagem mostrando a área de 8 semanas após a ESD e aplicação de peptideo, de acordo com algumas modalidades ; FIG. 2A é uma imagem que mostra um câncer de esôfago em estágio inicial, com Ã de dispersão circunferencial, de acordo com algumas modalidades; FIG. 2B é uma imagem mostrando uma úlcera artificial com 4/5 de dispersão circunferencial após a ressecção da lesão usando ESD, de acordo com algumas modalidades; FIG. 2C é uma imagem mostrando um revestimento de uma solução de peptideo, de acordo com algumas modalidades; FIG. 2D é uma imagem mostrando uma área tratada de 4 semanas após a cirurgia, de acordo com algumas modalidades; e FIG. 2E é uma imagem da área tratada de 8 semanas após a cirurgia, de acordo com algumas modalidades.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[009] Materiais e métodos da presente divulgação podem evitar a obstrução gastrointestinal.

[0010] A mucosectomia endoscópica (EMR) e a dissecção endoscópica da submucosa (ESD) são opções cirúrgicas principais para ressecção de locais da lesão, tais como pólipos e tumores cancerígenos em um sistema digestivo ou trato gastrointestinal. EMR e ESD são ambas as cirurgias minimamente invasivas. ESD, geralmente, pode dissecar áreas mais amplas de um local da lesão do que EMR. ESD, portanto, pode causar obstruções devido à contração/encolhimento da cicatriz durante o processo de cicatrização mais frequentemente do que EMR. No entanto, ambos os procedimentos EMR e ESD podem causar lesões que induzem a obstrução gastrointestinal pós-cirúrgica, durante o curso de cicatrização. Uma forma de obstrução gastrointestinal pode ser uma estenose no trato gastrointestinal durante o curso da cura. Por estenose pretende-se significar um estreitamento no órgão tubular ou uma estrutura, tal como o trato gastrointestinal, o que pode conduzir a uma obstrução parcial ou completa no trato gastrointestinal.

[0011] Sucesso de EMD e ESD pode exigir a redução relativamente alta das taxas de sangramento pós- procedimento. Essas taxas podem ser de aproximadamente 1 por cento para o esôfago, aproximadamente de 5 por cento para o estômago, e aproximadamente de 2 por cento para o coloretal. Tratamentos atuais para úlceras gástricas induzidas por ESD podem incluir ser tratadas com um inibidor da bomba de prótons por pelo menos 8 semanas após o procedimento de ESD.

[0012] Os indivíduos podem, normalmente, necessitar serem submetidos aos vários tratamentos de dilatação do balão e injeção de esteróide local, levando a uma queda significativa na qualidade de vida. Atualmente, não há opções para obstruções de prevenção, ou estenose, devido à contração da cicatriz durante seu processo de cura.

[0013] A presente invenção proporciona materiais e métodos para a prevenção ou redução de uma obstrução, como uma estenose, no trato gastrointestinal. O trato gastrointestinal pode incluir qualquer uma ou mais dos seguintes: boca, garganta, esôfago, estômago, intestino delgado, intestino grosso ou cólon, reto, ou coloretal, referida como a porção distal do cólon e do reto.

[0014] A presente invenção também proporciona materiais e métodos para a prevenção ou redução de uma obstrução no trato gastrointestinal. "Prevenir" pode incluir a prevenção completa de um trato gastrointestinal em que uma ferida, lesão, ou área alvo, podem voltar para um estado pré-operatório, ou em que a ferida, lesão, ou a área alvo pode retornar a um estado anterior ao desenvolvimento de um pólipo, tumor ou outro tecido que pode exigir a remoção, o qual pode ser referido como um estado "normal". Prevenir pode incluir pelo menos parcialmente prevenir ou pelo menos parcialmente reduzir, o que pode incluir o retorno a um estado que permite pelo menos algum alivio de uma obstrução do trato gastrointestinal que retorna ferida, lesão, ou a área alvo de um estado menor do que o normal.

[0015] Os materiais e métodos podem compreender prevenir ou reduzir uma obstrução gastrointestinal no trato gastrointestinal em um indivíduo. Tal como aqui utilizado, o termo "indivíduo" destina-se a incluir os animais humanos e não humanos, por exemplo, grandes animais, vertebrados, e primatas. Em certas modalidades, o indivíduo é um indivíduo mamífero, e em modalidades particulares, o indivíduo é um indivíduo humano. Embora aplicações com os seres humanos sejam claramente previstas, aplicações veterinárias, por exemplo, com animais não humanos, são também aqui previstas. O termo "animais não humanos" da presente invenção inclui todos os vertebrados, por exemplo, não mamíferos (tais como aves, por exemplo, frangos; anfíbios; répteis) e mamíferos, tais como primatas não humanos, domesticados e animal agricolamente útil, por exemplo, ovelhas, cães, gato, vaca, porco, rato, entre outros.

[0016] A prevenção ou redução da obstrução pode ser parcial ou completa. Os materiais e métodos podem incluir administração, aplicação, ou injeção de um peptideo de automontagem, ou uma solução compreendendo um peptideo de automontagem, ou uma composição compreendendo um peptideo de automontagem, para uma área predeterminada ou área alvo pretendida.

[0017] O termo "peptideo de automontagem" pode referir-se a um peptideo que pode exibir uma estrutura em VW folha beta, em solução aquosa na presença de condições específicas para induzir a estrutura de folha beta. Estas condições específicas podem incluir o aumento do pH de uma solução de peptideo de automontagem. 0 aumento do pH pode ser um aumento do pH para um pH fisiológico. As condições específicas também podem incluir a adição de um cátion, como um cátion monovalente, a uma solução de peptideo de automontagem. As condições específicas podem incluir condições relacionadas com um trato gastrointestinal.

[0018] O peptideo de automontagem pode ser um peptideo de automontagem anfifílico. Por "anfifílico"pretende-se significar que o peptideo compreende porções hidrofóbicas e porções hidrofílicas. Em algumas modalidades, um peptideo anfifílico pode compreender, consistir essencialmente em, ou consistir em aminoácidos hidrofóbicos e aminoácidos hidrofílicos alternando. Ao alternar, se destina incluir uma série de três ou mais aminoácidos que se alternam entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofílico, e ele não precisa incluir todos e cada aminoácido na sequência peptídica alternando entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofílico. O peptideo de automontagem, também aqui referido como "peptideo" pode ser administrado à área alvo predeterminada ou desejada, na forma de uma solução, composição, hidrogel, membrana, suporte de peptideo de automontagem ou qualquer outra forma. O hidrogel pode também ser referido como uma membrana ou um suporte ao longo desta descrição. A área alvo pré-determinada ou desejada pode ser em ou perto do local de uma ESD ou EMR, ou outra ressecção ou remoção cirúrgica do tecido no trato gastrointestinal. A área alvo pré- determinada ou desejada pode ser estabelecida com base no local de um pólipo, tumor, tal como um tumor canceroso, ou outra área que podem ter sofrido um procedimento cirúrgico, ou um trauma acidental ou intencional.

[0019] A solução de peptídeo de automontagem pode ser uma solução aquosa de peptídeo de automontagem. O peptídeo de automontagem pode ser administrado, aplicado, ou injetado em uma solução que é substancialmente isenta de célula, ou livre de células. Em certas modalidades, o peptídeo de automontagem pode ser administrado, aplicado, ou injetado em uma solução que é isenta de célula ou livre de células.

[0020] O peptídeo de automontagem pode também ser administrado, aplicado, ou injetado em uma solução que é substancialmente isenta de fármaco ou livre de fármacos. Em certas modalidades, peptídeo de automontagem pode ser administrado, aplicado, ou injetado em uma solução que é isenta de fármacos ou livre de fármacos. Em certas outras modalidades, o peptídeo de automontagem pode ser administrado, aplicado, ou injetado em uma solução que é substancialmente isenta de célula e substancialmente isenta de fármaco. Em ainda certas outras modalidades, o peptídeo de automontagem pode ser administrado, aplicado, ou injetado em uma solução que é isenta de célula e isenta de fármaco.

[0021] A solução de peptídeo de automontagem pode compreender, consistir em, ou consistir essencialmente no peptídeo de automontagem. O peptídeo de automontagem pode estar numa forma não modificada ou modificada. Por modificado, entende-se que o peptídeo de automontagem pode ter um ou mais domínios que compreendem um ou mais aminoácidos que, quando fornecidos em solução, por si só, não são automontados. Por não modificado, entende-se que o peptideo de automontagem pode não ter quaisquer outros dominios que não aqueles que fornecem para automontagem do peptideo. Isto é, um peptideo não modificado consiste em alternar aminoácidos hidrofóbicos e hidrofilicos que podem automontar em uma folha beta, e uma estrutura macroscópica, tal como um hidrogel.

[0022] A administração de uma solução pode compreender, consistir em, ou consistir essencialmente na administração de uma solução compreendendo, consistindo em, ou consistindo essencialmente em um peptideo de automontagem compreendendo, consistindo em, ou consistindo essencialmente em entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos. Outros peptideos que não compreender, consistem em, ou consistem essencialmente em entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos podem ser contemplados por esta divulgação.

[0023] Ao alternar, se destina incluir uma série de três ou mais aminoácidos que se alternam entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofilico, e ele não precisa incluir todos e cada aminoácido na sequência peptidica alternando entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofilico.

[0024] Os materiais e os métodos podem compreender administrar um peptideo de automontagem para um alvo predeterminado ou desejado. O peptideo pode ser administrado como um hidrogel ou forma um hidrogel após a administração. Um hidrogel é um termo que pode referir-se a um gel coloidal, o qual é disperso em água. O hidrogel pode também ser referido como uma membrana ou um suporte ao longo desta descrição. Os sistemas e os métodos podem também incluir a aplicação de um peptídeo de automontagem para um alvo predeterminado ou desejado como uma solução tal como uma solução aquosa de peptídeo.

[0025] O termo "administração" pretende incluir, mas não está limitado a, aplicar, introduzir ou injetar o peptídeo de automontagem, em uma ou mais das várias formas, incluindo, mas não se limitando a, por si mesmo, por meio de solução, tal como uma solução aquosa, ou por meio de uma composição, hidrogel, ou um suporte, com ou sem componentes adicionais.

[0026] O método pode compreender a introdução de um dispositivo de administração em ou perto de uma área alvo predeterminada ou desejada de um indivíduo. O método pode compreender a introdução de um dispositivo de administração que compreende pelo menos um dos seguintes: seringa, pipeta, tubo, cateter, cateter de seringa, ou outro dispositivo à base de agulha para a área alvo predeterminada ou desejada de um indivíduo. O peptídeo de automontagem pode ser administrado por meio de uma seringa, pipeta, tubo, cateter, cateter de seringa, ou outro dispositivo a base de agulha para a área alvo predeterminada ou desejada de um indivíduo. A medição da agulha da seringa pode ser selecionada para proporcionar um fluxo adequado de uma composição, uma solução, um hidrogel, ou um liquido a partir da seringa para a área alvo. Isto pode ser baseado em algumas modalidades em pelo menos uma quantidade de peptídeo de automontagem em uma composição, solução de peptídeo, ou um hidrogel a ser administrado, a concentração da solução de peptídeo, na composição, ou o hidrogel, e a viscosidade da solução de peptideo, composição, ou hidrogel. 0 dispositivo de administração pode ser um dispositivo convencional ou projetado para realizar pelo menos um dos seguintes: atingir uma área especifica de destino, conseguir um regime especifico de dosagem, administrar um volume alvo especifico, uma quantidade, ou concentração, e fornecer com precisão para uma área alvo.

[0027] O método de prevenção ou redução de uma obstrução gastrointestinal pode compreender a introdução de um cateter no indivíduo e posicionar uma extremidade do cateter em uma área predeterminada ou área alvo, tal como uma porção do trato gastrointestinal. O peptideo de automontagem pode ser administrado por meio de um cateter para a área alvo, em que pelo menos uma prevenção ou redução parcial na obstrução do trato gastrointestinal é desejada. O uso de um cateter pode proporcionar uma administração mais seletiva do peptideo para proporcionar uma distribuição mais precisa para a área alvo. Administração seletiva do peptideo pode permitir a entrega melhorada e mais incisiva da solução de peptideo, composição, ou hidrogel tal que a prevenção ou redução de uma obstrução gastrointestinal ou estenose é bem sucedida e posicionada no local desejado de um modo preciso. A administração seletiva pode proporcionar a distribuição de destino melhorada que aperfeiçoa marcadamente o posicionamento e a eficácia do tratamento ao longo do uso de uma seringa ou outro dispositivo de administração. Dispositivos de administração que podem ser utilizados nos sistemas, métodos e kits da divulgação podem incluir uma seringa, pipeta, tubo, cateter, cateter de seringa, outro dispositivo baseado em agulha, tubo ou cateter.

[0028] A utilização do cateter pode incluir a utilização dos dispositivos anexos, como um fio guia utilizado para guiar o cateter em posição, ou um endoscópio que pode permitir a colocação correta do cateter e a visualização da área alvo, e/ou o caminho para a área alvo. O endoscópio pode ser um tubo, que pode compreender, pelo menos, um de uma luz e de uma câmara ou outro dispositivo de visualização para permitir que as imagens do corpo do indivíduo a ser visualizado. O fio guia ou endoscópio pode ser introduzido no indivíduo por meio do trato gastrointestinal. Por exemplo, por meio da boca, garganta, esôfago, estômago, intestino delgado, intestino grosso ou do cólon, ou do reto. O endoscópio pode ser introduzido no trato gastrointestinal antes da introdução do cateter para o trato.

[0029] A utilização do dispositivo de administração, como uma seringa, pipeta, tubo, cateter, do cateter de seringa, outro dispositivo com base em agulha, cateter ou endoscópio pode necessitar de determinar o diâmetro ou tamanho da abertura ou trato em que existe uma área alvo, tal modo que pelo menos uma porção da seringa, pipeta, tubo, cateter de seringa, outro dispositivo do tipo agulha, cateter ou endoscópio pode entrar na abertura ou no trato para administrar o peptideo, solução de peptideo, composição, ou hidrogel para a área alvo.

[0030] Em certas modalidades, o hidrogel pode ser formado in vitroe administrado ao local desejado in vivo. Em certos exemplos, este local pode ser a área em que se desejam prevenir ou reduzir uma obstrução. Em outros exemplos, este local pode ser a montante, a jusante da área, ou substancialmente perto da área. Pode ser desejado permitir uma migração de hidrogel para a área em que se deseja prevenir ou reduzir uma obstrução ou prevenir ou reduzir a estenose. Alternativamente, outro processo pode posicionar o hidrogel na área em que é desejada. A localização desejada ou área alvo pode ser pelo menos uma porção de uma área em que o tecido foi removido, por exemplo, em ou em torno das áreas em que um tecido canceroso ou pré-canceroso foi removido, em que um ou mais tumores foi removido, ou em que uma biópsia foi feita. A localização desejada ou área alvo pode ser uma úlcera ou lesão induzida por ESD ou ERD.

[0031] Em certos aspectos da presente descrição, o hidrogel pode ser formado in vivo. Uma solução compreendendo o peptideo de automontagem, tal como uma solução aquosa, pode ser inserido para um local in vivo ou a área de um indivíduo para prevenir ou reduzir uma obstrução ou prevenir ou reduzir a estenose no local. Em certos exemplos, o hidrogel pode ser formado in vivo em um local, e deixado migrar para a área, em que se deseja prevenir ou reduzir uma obstrução ou prevenir ou reduzir a estenose. Alternativamente, outro processo pode colocar o hidrogel na área, em que é desejável para prevenir ou reduzir uma obstrução ou prevenir ou reduzir a estenose. Os peptideos da presente invenção podem estar na forma de um pó, uma solução, um gel, ou semelhante. Uma vez que os géis de peptideo de automontagem em resposta para alterações no pH da solução e a concentração de sal, ele pode ser distribuído como um liquido que gelifica quando em contato com um objeto durante a aplicação ou administração.

[0032] Em alguns ambientes, a solução de peptide pode ser um hidrogel fraco e, como resultado, pode ser administrada por meio de um dispositivo de distribuição, tal como aqui descrito.

[0033] Em conformidade com uma ou mais modalidades, os peptideos de automontagem podem evitar a obstrução gastrointestinal. Em pelo menos algumas modalidades, os peptideos de automontagem podem facilitar a formação de epitélio da mucosa para prevenir ou reduzir a formação de cicatrizes pós-operatória. A prevenção ou redução na formação de cicatrizes pós-operatórias proporciona, pelo menos em parte, para a prevenção ou redução na obstrução gastrointestinal ou estenose. Em certas modalidades, isto pode ser porque o hidrogel, uma vez no lugar, fornece um suporte para permitir uma infiltração das células que promovem a cicatrização da área alvo.

[0034] A administração dos peptideos de automontagem dentro da camada subcutânea da membrana mucosa pode induzir uma lesão a flutuar até longe da camada muscular fixa e, em seguida, ser separada através da utilização de alta frequência. Um efeito hemostático pode também ser obtido no momento da ressecção da lesão, permitindo a redução do grau de dificuldade cirúrgica e risco.

[0035] Em conformidade com uma ou mais modalidades, um suporte macroscópico é fornecido. O suporte macroscópico pode compreender, consistir essencialmente em, ou consistir em uma pluralidade de peptideos de automontagem, cada um dos quais compreende, consiste essencialmente em, ou consiste em entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz que seja capaz de ser posicionada dentro de uma área da lesão de um trato gastrointestinal para promover a cura e para evitar uma obstrução gastrointestinal.

[0036] De acordo com algumas modalidades, os peptideos de automontagem podem ser anfifilicos, alternando entre os aminoácidos hidrofóbicos e os aminoácidos hidrofilicos. Em conformidade com uma ou mais modalidades, um indivíduo pode ser avaliado para determinar a necessidade de prevenção da obstrução gastrointestinal ou estenose. Uma vez que a avaliação tenha sido concluída, uma solução de peptideo para administrar ao indivíduo pode ser preparada.

[0037] Em algumas modalidades, um agente biologicamente ativo pode ser utilizado com os materiais e os métodos da presente revelação. Um agente biologicamente ativo pode compreender um composto, incluindo um peptideo, sequência de DNA, o composto quimico, ou o composto orgânico ou inorgânico que pode conferir alguma atividade, regulação, modulação ou ajuste de uma condição ou outra atividade em um indivíduo ou em um ambiente de laboratório. O agente biologicamente ativo pode interagir com outro componente para fornecer essa atividade. O agente biologicamente ativo pode ser referido como um medicamento de acordo com algumas modalidades da presente invenção. Em certas modalidades, um ou mais agentes biologicamente ativos podem ser gradualmente liberados para o exterior do sistema de peptideo. Por exemplo, um ou mais agentes biologicamente ativos podem ser gradualmente liberados a partir do hidrogel. Tanto testes in vitroe in vivo tem demonstrado essa liberação gradual de um agente biologicamente ativo. O agente biologicamente ativo pode ser adicionado à solução do peptideo antes da administração a um indivíduo, ou pode ser administrado separadamente a partir da solução ao indivíduo.

[0038] Esta divulgação refere-se a soluções aquosas, hidrogéis, suportes, e membranas, que compreendem peptideos de automontagem, por vezes, referidos como oligopeptídeos de automontagem. Os peptideos podem ser compreendidos por um peptideo tendo cerca de 6 a cerca de 200 resíduos de aminoácidos. Os peptideos de automontagem pode exibir uma estrutura em folha beta, em solução aquosa na presença de um pH fisiológico e/ou um cátion, como um cátion monovalente, ou outras condições aplicáveis para o trato gastrointestinal. Os peptideos podem ser anfifílicos e alternam entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofílico. Em certas modalidades, o peptideo pode compreender uma primeira porção que pode ser anfifílica, alternando entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofílico, e outra porção ou região que não é anfifílica.

[0039] Os peptideos podem ser, geralmente, estáveis em soluções aquosas e automontar em estruturas grandes, macroscópicas, suportes ou matrizes, quando expostos às condições fisiológicas, pH neutro, ou níveis fisiológicos de sal. Uma vez que o hidrogel é formado, pode não decompor, ou pode decompor ou biodegradar após um período de tempo. A taxa de decomposição pode estar baseada pelo menos em parte, em pelo menos uma das condições e a sequência de aminoácidos em seus arredores.

[0040] Por "macroscópico" entende-se como tendo dimensões suficientemente grandes para serem visíveis sob ampliação de 10 vezes ou menos. Em modalidades preferidas, uma estrutura macroscópica é visível a olho nu. Uma estrutura macroscópica pode ser transparente e pode ser bidimensional ou tridimensional. Tipicamente, cada dimensão é pelo menos 10 pm, em tamanho. Em certas modalidades, pelo menos, duas dimensões são pelo menos 100 pm, ou pelo menos 1000 pm em tamanho. Frequentemente, pelo menos duas dimensões são, pelo menos, 1-10 mm de tamanho, 10-100 mm de tamanho, ou mais.

[0041] Em certas modalidades, o tamanho dos filamentos pode ser de cerca de 10 nanometres (nm) a cerca de 20 nm. A distância do interfilamento pode ser de cerca de 50 nm a cerca de 80 nm.

[0042] "Condições fisiológicas" podem ocorrer na natureza por um organismo em particular, sistema de célula, ou indivíduo que pode estar em contraste com as condições artificiais de laboratório. As condições podem compreender uma ou mais propriedades, tais como uma ou mais propriedades particulares ou uma ou mais faixas de propriedades. Por exemplo, as condições fisiológicas podem incluir uma temperatura ou faixa de temperaturas, um pH ou faixa de pH, uma pressão ou faixa de pressões, e uma ou mais das concentrações dos compostos em particular, sais e outros componentes. Por exemplo, em alguns exemplos, as condições fisiológicas podem incluir uma temperatura em uma faixa de cerca de 20 a cerca de 40 graus Celsius. Em alguns exemplos, a pressão atmosférica pode ser de cerca de 1 atm. O pH pode estar na faixa de pH neutro. Por exemplo, o pH pode estar na faixa de cerca de 6 a cerca de 8. As condições fisiológicas podem incluir cátions, tais como cátions de metais monovalentes que podem induzir a formação da membrana ou hidrogel. Estes podem incluir cloreto de sódio (NaCl). As condições fisiológicas também podem incluir uma concentração de glicose, concentração de sacarose, ou outra concentração de açúcar, de entre cerca de 1 e cerca de 20 mM. As condições fisiológicas podem incluir as condições locais da boca, garganta, esôfago, estômago, intestino delgado, intestino grosso, e reto.

[0043] Em algumas modalidades, os peptideos de automontagem podem ser peptideos de entre cerca de 6 aminoácidos e cerca de 200 aminoácidos. Em certas modalidades, os peptideos de automontagem podem ser peptideos de pelo menos cerca de 7 aminoácidos. Em certas modalidades, a automontagem de peptideos podem ser peptideos de entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos. Em certas outras modalidades, os peptideos de automontagem podem ser peptideos de entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 17 aminoácidos. Em certos outros exemplos, a automontagem de peptideos pode ser peptideos de pelo menos 8 aminoácidos, pelo menos cerca de 12 aminoácidos, ou pelo menos cerca de 16 aminoácidos.

[0044] Os peptideos podem também ser complementares e estruturalmente compatíveis. Complementar refere-se à capacidade dos peptideos para interagir através de pares ionizados e/ou as ligações de hidrogênio que se formam entre as suas cadeias laterais hidrofilicas, e estruturalmente compatível se refere à capacidade dos peptideos complementares para manter uma distância constante entre os seus esqueletos peptidicos. Os peptideos tendo estas propriedades participam em interações intermoleculares que resultam na formação e estabilização das folhas beta no nivel da estrutura secundária e filamentos trançados no nivel da estrutura terciária.

[0045] Ambas as misturas homogêneas e heterogêneas de peptideos caracterizadas pelas propriedades acima mencionadas podem formar membranas estáveis macroscópicas, filamentos e hidrogéis. Os peptideos, os quais são autocomplementares e autocompativeis, podem formar membranas, filamentos, e hidrogéis de uma mistura homogênea. Peptideos heterogêneos, incluindo aqueles que não podem formar membranas, filamentos, e hidrogéis em soluções homogêneas, que são complementares e/ou estruturalmente compatíveis uns com os outros podem também automontar em membranas macroscópicas, filamentos e hidrogéis.

[0046] As membranas, os filamentos, e os hidrogéis podem ser não citotóxicos. Os hidrogéis da presente invenção podem ser digeridos e metabolizados em um indivíduo. Os hidrogéis podem ser biodegradados em 30 dias ou menos. Eles têm uma composição simples, são permeáveis, e são fáceis e relativamente baratos de produzir em grandes quantidades. As membranas e os filamentos, os hidrogéis ou os suportes também podem ser produzidos e armazenados em uma condição estéril. Os comprimentos ótimos para a formação da membrana pode variar de acordo com pelo menos um da composição de aminoácidos, condições de solução, e das condições no local de destino.

[0047] Em certas modalidades, é proporcionado um método de prevenção da obstrução gastrointestinal em um indivíduo. O método pode compreender a introdução de um cateter em uma área alvo do trato gastrointestinal em que pelo menos uma prevenção parcial da obstrução gastrointestinal é desejada. O método pode ainda compreender a administração através do cateter de uma solução compreendendo um peptideo de automontagem compreendendo entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz para formar um hidrogel em condições do trato gastrintestinal para proporcionar pelo menos uma prevenção parcial de obstrução gastrointestinal. O método pode ainda compreender a remoção do cateter a partir do trato gastrointestinal.

[0048] O método pode ainda compreender a visualização de uma área alvo ou região de destino que compreende pelo menos uma porção do trato gastrointestinal. A visualização da área alvo ou região de destino pode compreender visualizar a região de destino ou área alvo durante pelo menos uma identificação da área alvo do trato gastrointestinal, a introdução do cateter, o posicionamento da extremidade do cateter na área alvo, a administração da solução, a remoção do cateter e monitoramento do trato gastrointestinal após a remoção do cateter. A visualização de área alvo ou região de destino pode proporcionar a administração seletiva da solução para o trato gastrointestinal. A visualização pode ocorrer a qualquer momento antes, durante e após a administração da solução. A visualização pode ocorrer, por exemplo, num periodo de tempo de pelo menos uma de cerca de uma semana após a administração, cerca de quatro semanas subsequentes à administração e cerca de oito semanas após a administração.

[0049] A solução a ser administrada pode consistir essencialmente em, ou consistir em, um peptideo de automontagem compreendendo pelo menos cerca de 7 aminoácidos. A solução a ser administrada pode consistir essencialmente em, ou consistir em, um peptideo de automontagem compreendendo entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos. 0 peptideo pode ser anfifilico e pelo menos uma porção do peptideo pode alternar entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofilico.

[0050] Os métodos de facilitar da presente invenção podem compreender o fornecimento de instruções para a administração através de um cateter de uma solução compreendendo um peptideo de automontagem compreendendo entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos de uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz para formar um hidrogel sob condições do trato gastrointestinal para impedir, pelo menos parcialmente, ou reduzir uma obstrução gastrointestinal. O peptideo pode ser anfifilico e pelo menos uma porção do peptideo pode alternar entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofilico.

[0051] Os métodos de facilitar podem compreender o fornecimento da solução compreendendo um peptideo de automontagem que compreende entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz para formar um hidrogel, em condições fisiológicas para pelo menos prevenir parcialmente ou reduzir uma obstrução gastrointestinal. O peptideo pode ser anfifilico e pelo menos uma porção do peptideo pode alternar entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofilico.

[0052] Os métodos de facilitar podem compreender o fornecimento de instruções para visualizar uma área alvo ou região de destino que compreende pelo menos uma porção do trato gastrointestinal. O método pode compreender o fornecimento de instruções para visualizar a área alvo ou região de destino, durante pelo menos uma identificação da área alvo do trato gastrointestinal, a introdução de um cateter, o posicionamento de uma extremidade do cateter na área alvo, a administração da solução, a remoção do cateter a partir do trato gastrointestinal, e monitoramento do trato gastrointestinal após a remoção do cateter. Os métodos de facilitar podem compreender o fornecimento de instruções para visualizar a região de destino ou área alvo por imagem usando um endoscópio. 0 método pode compreender o fornecimento de instruções para visualizar a área alvo em um periodo de tempo de cerca de uma semana, cerca de quatro semanas, ou cerca de oito semanas subsequentes à administração. Podem ser dadas instruções para monitorar a área na área alvo ou em torno da área alvo. Podem ser dadas instruções para utilizar os métodos da presente invenção, após um procedimento cirúrgico.

[0053] Os aminoácidos dos peptideos de automontagem ou anfifilicos podem ser selecionados a partir de d- aminoácidos, 1-aminoácidos, ou combinações dos mesmos. Os aminoácidos hidrofóbicos podem incluir Ala, Vai, lie, Met, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr e Gly. Os aminoácidos hidrofilicos podem ser aminoácidos básicos, por exemplo, Lys, Arg, His, Orn; aminoácidos ácidos, por exemplo, Glu, Asp; ou aminoácidos que formam ligações de hidrogênio, por exemplo, Asn, Gin. Aminoácidos acidicos e básicos podem ser agrupados em um peptideo. Os grupos carboxil e amino dos resíduos terminais podem ser protegidos ou não protegidos. As membranas ou os hidrogéis podem ser formados em uma mistura homogênea de peptideos autocomplementares e autocompativeis ou em uma mistura heterogênea de peptideos que são complementares e estruturalmente compatíveis uns com os outros. Os peptideos em conformidade com os critérios acima podem automontar em membranas macroscópicas sob condições adequadas, aqui descritas.

[0054] Os peptideos de automontagem podem ser compostos por cerca de 6 a cerca de 200 residues de aminoácidos. Em certas modalidades, cerca de 7 a cerca de 32 residues podem ser usados em peptideos de automontagem, enquanto que em outras modalidades peptideos de automontagem podem ter cerca de 7 a cerca de 17 resíduos. Os peptideos podem ter um comprimento de cerca de 5 nm.

[0055] Os peptideos da presente invenção podem incluir peptideos possuindo a sequência de repetição de arginina, alanina, ácido aspártico e alanina (Arg-Ala-Asp- Ala (RADA) (SEQ ID NO: 1)), e essas sequências de peptideos podem ser representadas por (RADA)P, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 2) .

[0056] Outras sequências peptidicas podem ser representadas pelos peptideos de automontagem tanto a sequência de repetição da isoleucina, ácido glutâmico, isoleucina e lisina (Ile-Glu-Ile-Lys (IEIK) (SEQ ID NO: 3)), e tais sequências peptidicas são representadas por (IEIK)P, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 4). Outras sequências peptidicas podem ser representadas pelos peptideos de automontagem tendo a sequência de repetição da isoleucina, ácido glutâmico, isoleucina e lisina (Ile-Glu-Ile-Lys (IEIK) (SEQ ID NO: 3)), e tais sequências peptidicas são representadas por (lEIK)pI, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 5).

[0057] Outras sequências peptidicas podem ser representadas pelos peptideos de automontagem com a sequência de repetição de lisina, leucina, ácido aspártico, e leucina (Lys-Leu-Asp-Leu (KLDL) (SEQ ID NO: 6)), e tais sequências peptidicas são representadas por (KLDL)P, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 7). Outras sequências peptidicas podem ser representadas pelos peptideos de automontagem tendo a sequência de repetição de lisina, leucina e ácido aspártico (Lys-Leu-Asp (KLD) (SEQ ID NO: 8)), e essas sequências de peptideos são representadas por (KLD)P, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 9). Como exemplos específicos de peptideos de automontagem de acordo com a invenção, pode ser um peptideo RADA16 de automontagem possuindo a sequência Arg-Ala-Asp- Ala-Arg-Ala-Asp-Ala-Arg-Ala-Asp-Ala-Arg-Ala-Asp-Ala (RADA)4 (SEQ ID NO: 10), um peptideo de automontagem IEIK13 possuindo a sequência Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile- Lys-Ile (lEIK)al (SEQ ID NO: 11), um peptideo de automontagem IEIK17 tendo a sequência Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile-Lys- Ile-Glu-Ile-Lys-Ile-Glu-Ile-Lys-Ile (IEIK)4I (SEQ ID NO: 12) ou um peptideo de automontagem KLDL12 possuindo a sequência Lys-Leu-Asp-Leu-Lys-Leu-Asp-Leu-Lys-Leu-Asp-Leu (KLDL)3 (SEQ ID NO: 13).

[0058] Cada uma das sequências peptidicas aqui descritas pode proporcionar peptideos compreendendo, consistindo essencialmente em, e consistindo nas sequências de aminoácidos recitadas.

[0059] A presente invenção proporciona materiais, métodos, e kits para soluções, hidrogéis, e suportes compreendendo, consistindo essencialmente em, ou consistindo nos peptideos aqui descritos.

[0060] Uma solução aquosa (água) de 1 por cento em peso por volume (p/v) e 2,5 por cento p/v de (RADA) 4 (SEQ ID NO: 10) está disponível como o hidrogel de peptideo do produto PuraMatrix™ por 3-D matriz de Co., Ltd.

[0061] Determinados peptideos podem conter sequências que são semelhantes à ligante de fixação das células RGD (Arginina-Glicina-àcido Aspártico). A compatibilidade destes peptideos para suportar o crescimento de células in vitrofoi testada através da introdução de uma variedade de células primárias cultivadas e transformadas em folhas de homopolimero de Ala-Glu-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Lys- Ala-Glu-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Lys (AEAEAKAKAEAEAKAK (EAK 16) (SEQ ID NO: 14), RAD 16 (SEQ ID NO: 26), RADA16 (SEQ ID NO: 10), e heteropolimeros de RAD16 (SEQ ID NO: 26) e EAK16 (SEQ ID NO: 14) . Os peptideos à base de RAD podem ser de particular interesse devido à semelhança desta sequência de RGD. A sequência RAD é um ligante de alta afinidade presente na tenascina da proteina da matriz extracelular e é reconhecida por receptores de integrina. O peptideo EAK 16 (SEQ ID NO: 14) e outros peptideos aqui descritos foram derivados a partir de uma região de uma proteina de levedura, zuotina.

[0062] A automontagem dos peptideos pode ser atribuível à ligação de hidrogênio e a ligação hidrofóbica entre as moléculas de peptideos pelos aminoácidos compondo os peptideos.

[0063] Os peptideos de automontagem da presente invenção podem ter um diâmetro de nanofibras em uma faixa de cerca de 10 nm a cerca de 20 nm e um tamanho médio de poro está na faixa de cerca de 5 nm a cerca de 200 nm. Em certas modalidades, o diâmetro de nanofibras, o tamanho dos poros, e a densidade de nanofibras podem ser controlados por pelo menos uma da concentração da solução de peptideo utilizada e a quantidade de solução de peptideo usada, tal como o volume da solução de peptideo. Como tal, pelo menos uma da concentração especifica do peptideo em solução e uma quantidade especifica da solução de peptideo para fornecer pelo menos um dos seguintes: diâmetro desejado de nanofibras, tamanho do poro, e densidade para fornecer adequadamente para uma oclusão pode ser selecionado.

[0064] Tal como aqui utilizado, uma quantidade de um peptideo, solução de peptideo ou hidrogel eficaz para pelo menos parcialmente prevenir ou reduzir uma obstrução gastrointestinal, uma "quantidade eficaz" ou uma "quantidade terapeuticamente eficaz"refere-se a uma quantidade do peptideo, solução de peptideo ou hidrogel, que é eficaz na administração simples ou múltipla (injeção ou aplicação) a um indivíduo, no tratamento, ou na cura, atenuar, aliviar ou melhorar um indivíduo com um distúrbio além do esperado na ausência de tal tratamento. Isto pode incluir uma concentração particular ou faixa de concentrações de peptideo na solução de peptideo ou de hidrogel e, adicionalmente, ou em alternativa, um determinado volume ou faixa de volumes da solução de peptideo ou de hidrogel. O método de facilitar pode compreender o fornecimento de instruções para preparar pelo menos uma quantidade eficaz e a concentração eficaz.

[0065] A dosagem, por exemplo, volume ou concentração, administrado (por exemplo, aplicado ou injetado) pode variar dependendo da forma do peptideo (por exemplo, em uma solução de peptideo, hidrogel, ou numa forma seca, tal como uma forma liofilizada) e a rota de administração utilizada. A formulação exata, a rota de administração, o volume, e a concentração pode ser escolhida tendo em vista as condições do indivíduo e tendo em vista a área alvo particular ou local que a solução do peptídeo, hidrogel, ou outra forma de peptídeo será administrada. As doses mais baixas ou mais elevadas do que aquelas aqui recitadas podem ser usadas ou requeridas. Dosagem e regimes de tratamento específicos para qualquer indivíduo particular pode depender de uma variedade de fatores, que podem incluir o peptídeo específico ou peptideos empregados, a dimensão da área que está sendo tratada, a espessura desejada do hidrogel resultante que pode ser posicionado na área alvo desejado, e a duração do tempo de tratamento. Outros fatores que podem afetar os regimes de dosagem e tratamento específicos incluem a idade, peso corporal, estado geral de saúde, sexo, tempo de administração, taxa de degradação, gravidade e curso da doença, condição ou sintoma, e o julgamento do médico assistente. Em certas modalidades, a solução de peptídeo pode ser administrada em uma única dose. Em outras modalidades, a solução de peptídeo pode ser administrada em mais do que uma dose, ou doses múltiplas. A solução de peptídeo pode ser administrada em pelo menos duas doses.

[0066] Uma quantidade eficaz e uma concentração eficaz da solução de peptídeo podem ser selecionadas para pelo menos evitar parcialmente ou reduzir uma obstrução gastrointestinal. Em algumas modalidades, pelo menos uma quantidade eficaz e uma concentração eficaz podem ser baseadas, em parte, em uma dimensão ou diâmetro da área alvo. Em outras modalidades, pelo menos uma quantidade eficaz e uma concentração eficaz são baseadas em parte na taxa de fluxo de um ou mais fluidos em ou perto da área alvo. Em ainda outras modalidades, pelo menos uma quantidade eficaz e uma concentração eficaz podem ser baseadas em parte em uma dimensão ou diâmetro de um material sendo removido a partir do trato gastrointestinal, tal como o tecido, ou um tumor.

[0067] Em ainda outras modalidades, pelo menos uma quantidade eficaz e a concentração eficaz podem ser baseadas em parte em pelo menos um dos seguintes: dimensão ou diâmetro da área alvo, a taxa de fluxo de um ou mais fluidos em ou perto da área alvo, e uma dimensão ou diâmetro de um material sendo removido a partir do trato gastrointestinal, tal como o tecido, ou um tumor.

[0068] A quantidade eficaz pode ser, como aqui descrita, uma quantidade que pode fornecer para uma prevenção ou redução pelo menos parcial em uma obstrução gastrointestinal. Várias propriedades do trato gastrointestinal podem contribuir para a seleção ou a determinação da quantidade eficaz, incluindo, pelo menos, um dos seguintes: dimensão ou diâmetro da área alvo, a taxa de fluxo de um ou mais fluidos em ou perto da área alvo, o pH em ou perto da área alvo, e a concentração de vários sais em ou perto da área alvo. As propriedades adicionais que podem determinar a quantidade eficaz incluem várias propriedades listadas acima, em vários locais ao longo de um caminho em que a solução de peptideo é entregue. Por exemplo, se a área alvo está localizada no estômago, uma ou mais propriedades do estômago e/ou uma ou mais propriedades do caminho para o estômago, por exemplo, o esôfago pode, pelo menos, parcialmente influenciar ou efetuar a seleção ou determinação da quantidade eficaz.

[0069] A quantidade eficaz pode incluir volumes de cerca de 0,1 mililitros (mL) a cerca de 100 mL de uma solução de peptideo. A quantidade eficaz pode incluir volumes de cerca de 0,1 mL a cerca de 10 mL de uma solução de peptideo. Em certas modalidades, a quantidade eficaz pode ser de cerca de 0,5 mL. Em outras modalidades, a quantidade eficaz pode ser cerca de 1,0 mL. Em ainda outras modalidades, a quantidade eficaz pode ser de cerca de 1,5 mL. Em ainda outras modalidades, a quantidade eficaz pode ser de cerca de 2,0 mL. Em alqumas outras modalidades, a quantidade eficaz pode ser de cerca de 3,0 mL. Em certas modalidades, a quantidade eficaz pode ser cerca de 0,1 mL a cerca de 5 mL por 1 cm2 da área alvo. Em certas modalidades, a quantidade eficaz pode ser de cerca de 1 mL por 1 cm2 de área alvo. Esta quantidade eficaz pode ser utilizada relacionada a uma concentração, tais como 2,5 por cento em peso por volume de uma solução de peptideo da presente divulqação.

[0070] Em algumas modalidades, uma prevenção ou uma redução mais eficaz da obstrução gastrointestinal pode ser alcançada com um maior volume de solução de peptideo administrado ou uma maior concentração de peptideo em solução a ser administrada. Isto pode permitir um hidrogel mais longo ou mais espesso se formar na zona do alvo, permitindo uma posição mais segura do hidrogel na área alvo. É possivel que, se um volume suficientemente elevado não for selecionado, o hidrogel pode não ser eficaz na prevenção ou redução de uma obstrução gastrointestinal na área alvo para o periodo de tempo desejado.

[0071] A concentração pode ser eficaz, tal como aqui descrita, em uma quantidade que pode proporcionar uma prevenção ou redução desejada na obstrução gastrointestinal. Várias propriedades do trato gastrointestinal podem contribuir para a seleção ou a determinação da concentração eficaz, incluindo pelo menos uma de uma dimensão ou diâmetro da área alvo, a taxa de fluxo de um ou mais fluidos em ou perto da área alvo, e em uma dimensão ou diâmetro de um material sendo removido a partir do trato gastrointestinal, tal como o tecido, ou um tumor.

[0072] A concentração eficaz pode incluir a concentrações de peptideo na solução em uma faixa de cerca de 0,1 por cento em peso por volume (p/v) até cerca de 10 por cento p/v. A concentração eficaz pode incluir as concentrações de peptideo na solução em uma faixa de cerca de 0,1 por cento p/v a cerca de 3,5 por cento p/v. Em certas modalidades, a concentração eficaz pode ser de cerca de 1 por cento p/v. Em outras modalidades, a concentração eficaz pode ser de cerca de 2,5 por cento p/v. Em ainda outras modalidades, a concentração eficaz pode ser cerca de 3,0 por cento p/v.

[0073] Em certas modalidades, uma solução de peptideo tendo uma concentração mais elevada de peptideo pode proporcionar um hidrogel mais eficaz que tem a capacidade de permanecer no lugar e proporcionar uma prevenção eficaz ou redução da obstrução gastrointestinal. Para fins de distribuição da solução de peptideo, concentrações mais elevadas de soluções de peptideos podem tornar-se demasiadamente viscosas para permitir a administração eficaz e seletiva da solução. É possível que, se uma concentração suficientemente alta não for selecionada, o hidrogel pode não ser eficaz na manutenção de uma prevenção ou redução da obstrução gastrointestinal na área alvo para o periodo de tempo desejado.

[0074] A concentração eficaz pode ser selecionada para proporcionar uma solução que pode ser administrada por injeção ou por outros meios usando um diâmetro particular ou cateter de medição ou agulha.

[0075] Os métodos da divulgação contemplam única administração, bem como múltiplas administrações de uma quantidade terapeuticamente eficaz dos peptideos, composições, soluções peptidicas, membranas, filamentos, e hidrogéis como aqui descritos. Os peptideos, como aqui descritos, podem ser administrados em intervalos regulares, dependendo da natureza, gravidade e da extensão da condição do indivíduo. Em algumas modalidades, um peptideo, uma composição, uma solução de peptideo, uma membrana, um filamento, ou um hidrogel pode ser administrado em uma única administração. Em algumas modalidades, um peptideo, uma composição, uma solução de peptideo, ou um hidrogel aqui descrito é administrado em várias administrações. Em algumas modalidades, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um peptideo, uma composição, uma solução de peptideo, uma membrana, um filamento, ou um hidrogel pode ser administrado periodicamente em intervalos regulares. Os intervalos regulares selecionados podem ser baseados em qualquer uma ou mais da concentração de peptideo inicial da solução administrada, a quantidade administrada, e a taxa de degradação do hidrogel formado. Por exemplo, após uma administração inicial, pode ocorrer uma continuação após administração, por exemplo, uma semana, duas semanas, quatro semanas, seis semanas, ou oito semanas. A administração de continuação pode compreender a administração de uma solução tendo a mesma concentração de peptideo e o volume como a administração inicial, ou pode compreender a administração de uma solução de menor ou maior concentração de peptideo e de volume. A seleção da administração de continuação adequada da solução de peptideo pode ser baseada em imagens da área alvo e a área circundante da área alvo e determinação das necessidades com base na condição do indivíduo. Os intervalos predeterminados podem ser os mesmos para cada administração de continuação, ou podem ser diferentes. Em algumas modalidades, um peptideo, uma solução de peptideo, ou um hidrogel pode ser administrado cronicamente em intervalos predeterminados para manter, pelo menos, uma redução parcial ou prevenção parcial na obstrução gastrointestinal em um indivíduo durante a vida do indivíduo. Os intervalos predeterminados podem ser os mesmos para cada administração de continuação, ou eles podem ser diferentes. Isto pode ser dependente do fato do hidrogel formado a partir da anterior administração ser parcialmente ou totalmente interrompida ou reduzida. A administração de continuação pode compreender a administração de uma solução tendo a mesma concentração de peptideo e volume à medida que a administração inicial, ou pode compreender a administração de uma solução de menor ou maior concentração de peptideo e de volume. A seleção da administração de continuação adequada de solução de peptideo pode ser baseada em imagens da área alvo e a área circundante da área alvo e determinação das necessidades com base na condição do indivíduo.

[0076] Os peptideos de automontagem da presente invenção, tais como RADA16 (SEQ ID NO: 10), podem ser sequências peptidicas que não possuem um motivo ou sequência fisiologicamente ou biologicamente ativa distinta e, por conseguinte, pode não prejudicar a função cellular intrínseca. Os motivos ativos fisiologicamente podem controlar numerosos fenômenos intracelulares, tais como a transcrição, e a presença de motivos fisiologicamente ativos podem conduzir à fosforilação de proteínas da superfície das células intracitoplasmáticas ou por enzimas que reconhecem os motivos. Quando um motivo fisiologicamente ativo está presente em um agente oclusivo do tecido de peptideo, a transcrição das proteínas com diversas funções pode ser ativada ou suprimida. Os peptideos de automontagem, da presente invenção, podem não ter tais motivos fisiologicamente ativos e, portanto, não carregam este risco.

[0077] Um açúcar pode ser adicionado à solução de peptideo de automontagem para melhorar a pressão osmótica da solução a partir de hipotonicidade a isotonicidade, sem reduzir o efeito de oclusão do tecido, desse modo, permitindo a segurança biológica ser aumentada. Em certos exemplos, o açúcar pode ser sacarose ou glicose.

[0078] Os comprimentos ótimos para a formação da membrana pode variar com a composição de aminoácidos. Um fator de estabilização contemplado pelos peptideos da presente invenção é que os peptideos complementares mantêm uma distância constante entre os esqueletos peptídicos. Os peptideos que podem manter uma distância constante mediante emparelhamento são aqui referidos como estruturalmente compatível. A distância interpeptídeo pode ser calculada para cada par de ligação ionizada ou de hidrogênio, tendo a soma do número de átomos não ramificados nas cadeias laterais de cada aminoácido no par. Por exemplo, lisina tem 5 e ácido glutâmico tem 4 átomos não ramificados nas suas cadeias laterais, respectivamente. Outros exemplos de peptideos que podem formar membranas, hidrogéis ou suportes em misturas heterogêneas ou homogêneas são listados na Tabela 1.

[0079] Os critérios de sequência anfifilica, o comprimento, a complementaridade e a compatibilidade estrutural aplicável às misturas heterogêneas de peptideos. Por exemplo, dois peptideos diferentes podem ser utilizados para formar as membranas: peptideo A, Val-Arg-Val-Arg-Val- Asp-Val-Asp-Val-Arg-Val-Arg-Val-Asp-Val-Asp (VRVRVDVDVRVRVDVD) (SEQ ID NO: 66), tem Arg e Asp como os resíduos hidrofilicos e peptideo B, Ala-Asp-Ala-Asp-Ala-Lys- Ala-Lys-Ala-Asp-Ala-Asp-Ala-Lys-Ala-Lys (ADADAKAKADADAKAK) (SEQ ID NO: 67), tem Lys e Asp. Os peptideos A e B são complementares; Arg em A pode formar um par ionizado com o Asp em B e o Asp em A pode formar um par ionizado com o Lys em B. Assim, em uma mistura heterogênea de peptideos A e B, membranas provavelmente formam, mas seria homogeneamente composta de qualquer um dos peptideos A ou B.

[0080] As membranas e os hidrogéis podem também ser formados das misturas heterogêneas de peptideos, cada um dos quais sozinho não forma membranas, se eles são complementares e estruturalmente compatíveis uns com os outros. Por exemplo, misturas de (Lys-Ala-Lys-Ala)4 (KAKA)4 (SEQ ID NO: 15) e (Glu-Ala-Glu-Ala) 4 (EAEA) 4 (SEQ ID NO: 68) ou de (Lys-Ala- Lys-Ala) 4 (KAKA) 4 (SEQ ID NO: 15) e (Ala-Asp-Ala-Asp) 4 (ADAD) 4 (SEQ ID NO: 69) seria esperado para formar membranas, mas não qualquer destes peptideos por si só, devido à falta de complementaridade.

[0081] Os peptideos, que não são perfeitamente complementares ou estruturalmente compatíveis, podem ser pensados como contendo análogos incompatíveis aos pares de bases incompatíveis na hibridação de ácidos nucleicos. Os peptideos contendo incompatibilidade podem formar membranas, se a força de ruptura do par incompatível é dominada pela estabilidade global da interação interpeptideo. Funcionalmente, estes peptideos também podem ser considerados como complementares ou estruturalmente compatíveis. Por exemplo, um par de aminoácidos incompatível pode ser tolerado se estiver rodeado por vários pares perfeitamente compatíveis em cada lado.

[0082] Os peptideos podem ser sintetizados quimicamente ou podem ser purificados a partir de fontes naturais e recombinantes. Usando peptideos sintetizados quimicamente podem permitir que as soluções de peptideos a ser deficientes em componentes não identificados, tais como componentes não identificados derivados a partir da matriz extracelular de outro animal. Esta propriedade, portanto, pode eliminar as preocupações de infecção, incluindo o risco de infecção viral em comparação com os tecidos de origem derivados de biomateriais convencionais. Isto pode eliminar os problemas de infecções, incluindo infecções, tais como a encefalopatia espongiforme bovina (EEB), tornando o peptídeo altamente seguro para uso médico.

[0083] A concentração inicial do peptídeo pode ser um fator no tamanho e espessura da membrana, hidrogel, ou suporte formado. Em geral, quanto maior a concentração de peptídeo, maior a extensão da membrana ou formação de hidrogel. Os hidrogéis, ou suportes formados em maiores concentrações de peptídeo inicial (cerca de 10 mg/mL) (cerca de 1,0 por cento p/v) podem ser mais espessos e, portanto, susceptíveis de ser mais forte.

[0084] Formação das membranas, hidrogéis, ou suportes podem ser muito rápidos, na ordem de alguns minutos. A formação das membranas ou hidrogéis podem ser irreversíveis. Em certas modalidades, a formação pode ser reversível, e em outras modalidades, a formação pode ser irreversível. 0 hidrogel pode formar instantaneamente ao ser administrado em uma área alvo. A formação do hidrogel pode ocorrer dentro de cerca de um a dois minutos da administração. Em outros exemplos, a formação do hidrogel pode ocorrer dentro de cerca de três a quatro minutos da administração. Em certas modalidades, o tempo que leva para formar o hidrogel pode ser baseado, pelo menos em parte, em um ou mais da concentração da solução do peptideo, do volume de solução de peptideo aplicado, e das condições na área de aplicação ou injeção (por exemplo, a concentração de cátions metálicos monovalentes na área de aplicação, o pH da área, e a presença de um ou mais fluidos na ou perto da área). 0 processo pode ser não influenciado pelo pH de menos do que ou igual a 12, e pela temperatura. As membranas ou hidrogéis podem formar em temperaturas na faixa de cerca de 1 a 99 graus Celsius.

[0085] Os hidrogéis podem permanecer em posição na área alvo durante um periodo de tempo suficiente para proporcionar um efeito desejado, utilizando os métodos e os kits da presente divulgação. O efeito desejado pode ser pelo menos parcialmente prevenir ou reduzir uma obstrução gastrointestinal.

[0086] O efeito desejado, utilizando os métodos e os kits da presente invenção, pode ser para o tratamento de áreas ou para auxiliar na cicatrização das áreas, em que foi realizado um procedimento cirúrgico no trato gastrointestinal. Por exemplo, o efeito desejado, utilizando os métodos e os kits da presente invenção, pode ser para o tratamento de áreas ou para auxiliar na cicatrização de áreas, em que a ressecção dos locais da lesão, tais como pólipos e tumores cancerosos no trato gastrointestinal. Os procedimentos cirúrgicos podem incluir mucosectomia endoscópica (EMR) ou dissecção endoscópica da submucosa (ESD) .

[0087] O periodo de tempo, em que as membranas ou hidrogéis podem permanecer na área desejada pode ser de um ou mais dias, até uma ou mais semanas. Em outros exemplos, pode permanecer na área desejada durante até 30 dias, ou mais. Pode permanecer na área desejada indefinidamente. Em outros exemplos, pode permanecer na área desejada por um longo periodo de tempo, até que é naturalmente degradada ou intencionalmente removida. Se o hidrogel se degrada naturalmente ao longo de um periodo de tempo, a aplicação subsequente ou injeção subsequente do hidrogel para a mesma ou diferente localização pode ser realizada.

[0088] Em certas modalidades, o peptideo de automontagem pode ser preparado com um ou mais componentes que podem permitir uma maior eficácia do peptideo automontagem ou pode fornecer uma outra ação, tratamento, terapia, ou de outra forma interagir com um ou mais componentes do indivíduo. Por exemplo, os peptideos adicionais compreendendo uma ou mais sequências de aminoácidos biologicamente ativas ou fisiologicamente ativas ou motivos podem ser incluídos como um dos componentes, juntamente com o peptideo de automontagem. Outros componentes podem incluir compostos biologicamente ativos, tais como um fármaco ou outro tratamento que pode proporcionar algum beneficio ao individuo. Por exemplo, um fármaco para tratamento de câncer ou fármaco anticancerigeno pode ser administrado com o peptideo de automontagem, ou pode ser administrado separadamente.

[0089] O peptideo, solução de peptideo, ou hidrogel pode compreender pequenos fármacos moleculares para tratar o individuo ou para evitar hemólise, inflamação e infecção. Os fármacos de pequenas moleculares podem ser selecionados a partir do grupo que consiste em glicose, sacarose, sacarose purificada, lactose, maltose, trealose, dextrano, iodo, cloreto de lisozima, dimetilisopropilazuleno, tretinoina tocoferil, povidona-iodo, alprostadil alfadex, álcool anis, salicilato de isoamila, álcool a,a-dimetilfeniletilico, bacdanol, helional, sulfadiazina de prata, bucladesina de sódio, alprostadil alfadex, sulfato de gentamicina, cloridrato de tetraciclina, fusidato de sódio, hidrato de mupirocina de cálcio e benzoato de isoamila. Outros fármacos moleculares pequenos podem ser contemplados. Os fármacos baseados em proteínas podem ser incluídos como um componente a ser administrado, e pode incluir a eritropoietina, ativador do plasminogênio tipo tecido, hemoglobina sintética e insulina.

[0090] Um componente pode ser incluído para proteger a solução de peptideo contra a formação rápida ou imediata num hidrogel. Isto pode incluir um sistema de liberação encapsulado que pode degradar ao longo do tempo para permitir uma liberação controlada no tempo da solução de peptideo para a área alvo para formar o hidrogel durante um periodo de tempo predeterminado e desejado. Polímeros biodegradáveis, biocompativeis, podem ser utilizados, tais como etileno-acetato de vinila, polianidridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres e ácido polilático.

[0091] Qualquer um dos componentes aqui descritos pode ser incluído na solução de peptideo ou pode ser administrado em separado a partir da solução de peptideo. Além disso, qualquer um dos métodos e métodos de facilitar aqui fornecidos pode ser realizado por uma ou mais partes.

[0092] Um peptideo, solução de peptideo, ou hidrogel da divulgação podem ser proporcionados num kit. Instruções para a administração da solução a uma área alvo do trato gastrointestinal de um indivíduo podem também ser fornecidas no kit. A solução de peptideo pode compreender um peptideo de automontagem compreendendo entre cerca de 7 aminoácidos e cerca de 32, em uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz para formar um hidrogel para pelo menos parcialmente prevenir ou reduzir uma obstrução gastrointestinal. As instruções para a administração da solução pode compreender métodos para administrar o peptideo, solução de peptideo, ou hidrogel aqui proporcionados, por exemplo, por uma via de administração aqui descrita, em uma dose, o volume ou a concentração, ou o planejamento de administração. O peptideo pode ser anfifílico e pelo menos uma porção do peptideo pode alternar entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofílico.

[0093] O kit pode também compreender materiais informativos. O material de informação pode ser descritivo, instrucional, ou marketing de outro material que se relaciona com os métodos aqui descritos. Em uma modalidade, o material de informação pode incluir informação sobre a produção do peptideo, solução de peptídeo, ou hidrogel aqui descrito, as propriedades físicas do peptídeo, composição, solução de peptídeo ou hidrogel, concentração, volume, tamanho, dimensões, data de expiração, e lote ou local de produção.

[0094] O kit pode também incluir, opcionalmente, um dispositivo ou materiais para permitir a administração da solução de peptídeo ou peptídeo para a área desejada. Por exemplo, uma seringa, pipeta, tubo, cateter, cateter de seringa, ou outro dispositivo com base em agulha pode ser incluído no kit. Além disso, ou em alternativa, o kit pode incluir um fio guia, endoscópio, ou outro equipamento de acompanhamento para proporcionar administração seletiva da solução de peptídeo à área alvo.

[0095] O kit pode compreender, em adição a ou em alternativa, outros componentes ou ingredientes, tais como componentes que podem ajudar no posicionamento da solução de peptídeo, hidrogel ou suporte. As instruções podem ser fornecidas no kit para combinar uma quantidade suficiente ou um volume suficiente da solução de peptídeo com uma solução de sacarose, que pode ou não ser fornecida com o kit. Instruções podem ser fornecidas para diluição da solução de peptídeo para administrar uma concentração eficaz da solução para a área alvo do trato gastrointestinal. A instrução pode descrever diluição da solução de peptídeo com um diluente ou solvente. O diluente ou solvente pode ser a água. Instruções podem ainda ser fornecidas para a determinação de pelo menos uma concentração eficaz de solução e uma quantidade eficaz da solução para a área alvo. Isto pode ser baseado em vários parâmetros aqui discutido, e pode incluir o diâmetro da lesão ou ferida na área alvo.

[0096] Outros componentes ou ingredientes podem ser incluidos no kit, na mesma ou em diferentes composições ou recipientes do que o peptideo, soluções de peptideos, ou hidrogel. O um ou mais componentes que podem incluir componentes que podem permitir uma maior eficácia do peptideo de automontagem ou podem fornecer uma outra ação, tratamento, terapia, ou de outra forma interagir com um ou mais componentes do individuo. Por exemplo, os peptideos adicionais compreendendo uma ou mais sequências ou motivos biologicamente ativos ou fisiologicamente ativos podem ser incluidos como um dos componentes, juntamente com o peptideo de automontagem. Outros componentes podem incluir compostos biologicamente ativos, tais como um fármaco ou outro tratamento que pode proporcionar algum beneficio ao individuo. Por exemplo, um fármaco de tratamento de câncer ou fármaco anticancerigeno pode ser administrado com o peptideo de automontagem, ou pode ser administrado separadamente. O peptideo, solução de peptideo, ou hidrogel pode compreender pequenos fármacos moleculares para tratar o individuo ou para evitar hemólise, inflamação, e infecção, como aqui revelados. Uma solução de açúcar, como uma solução de sacarose pode ser fornecida com o kit. A solução de sacarose pode ser uma solução de sacarose a 20%.

[0097] Outros componentes que são aqui descritos também podem ser incluidos no kit.

[0098] Em algumas modalidades, um componente do kit é armazenado em um frasco selado, por exemplo, com um fechamento de borracha ou de silicone (por exemplo, fechamento de polibutadieno ou poliisopreno). Em algumas modalidades, um componente do kit é armazenado sob condições inertes (por exemplo, sob nitrogênio ou outro gás inerte tal como o argônio). Em algumas modalidades, um componente do kit é armazenado sob condições anidras (por exemplo, com um dessecante). Em algumas modalidades, um componente do kit é armazenado em um recipiente de bloqueio de luz, tal como um frasco âmbar.

[0099] Como parte do kit ou separado a partir do kit, seringas ou pipetas podem ser pré-carregadas com um peptideo, solução de peptideo, ou hidrogel, como aqui divulgado. Métodos para instruir um usuário para fornecer uma solução de peptideo de automontagem para uma seringa ou pipeta, com ou sem a utilização de outros dispositivos, e administrar esta para a área alvo através da seringa ou pipeta, com ou sem a utilização de outros dispositivos, é fornecido. Outros dispositivos podem incluir, por exemplo, um cateter com ou sem um fio guia.

[00100] Em algumas modalidades da presente descrição, os peptideos de automontagem podem ser usados como um revestimento sobre um dispositivo ou um instrumento tal como um stent ou cateter, para suprimir a fuga de fluido do corpo. Os peptideos de automontagem também podem ser incorporados ou fixados a um suporte, tal como uma gaze ou atadura, ou um revestimento, que pode proporcionar um efeito terapêutico a um indivíduo, ou que pode ser aplicado dentro de uma área alvo. Os peptideos de automontagem também podem ser embebidos em uma esponja para uso.

[00101] As membranas podem também ser úteis para a cultura de monocamadas de células. Células preferem aderir às superficies carregadas não uniformes. Os residuos carregados e conformação das membranas protéicas promovem a adesão e migração celular. A adição de fatores de crescimento, tais como fator de crescimento de fibroblastos, a membrana do peptideo pode melhorar ainda mais a fixação, o crescimento celular e o crescimento de neurites.

[00102] A função e a vantagem destas e outras modalidades dos métodos e kits aqui descritos serão mais completamente compreendidas a partir do exemplo abaixo. O exemplo que se segue destina-se ilustrar os benefícios da abordagem do tratamento descrito, mas não exemplificam o âmbito completo do mesmo.

EXEMPLOS Exemplo 1

[00103] O teste foi realizado em seres humanos, a fim de determinar a capacidade dos peptideos descritos para evitar a obstrução gastrointestinal. Os indivíduos submetidos à dissecção endoscópica da submucosa (ESD) coloretal, esôfago e gástrico por nove endoscopistas participaram do teste. Os indivíduos que receberam terapia antitrombótica foram incluídos no estudo, mas tais medicações já não foram administradas antes dos procedimentos. Casos com perfuração e coagulopatia (Razão Padronizada Internacional (INR)> 3), apesar da gestão de anticoaculação após a terapia de ponte de heparina (HBT) foram excluídas. Figuras 1A e 1B mostram uma úlcera antes da ESD.

[00104] Após o procedimento de ESD, um peptideo de automontagem foi administrado a uma área alvo no indivíduo. Figura 1C mostra uma área logo após ESD. Por cada 1 cm2 de tumor, 1 mL de automontagem de peptideo RADA16, na forma de hidrogel peptideo PuraMatrix™ por 3-D Matriz, LTD. (2,5 por cento p/v) foi aplicada na úlcera induzida pela ESD usando um cateter imediatamente após o procedimento. Um inibidor da bomba de prótons de dose única foi administrado nos casos de ESD gástrico durante 8 semanas começando na manhã do procedimento. Estágios de úlcera gástrica foram avaliados por endoscopia como ativo, cura ou cicatrização em 1, 4, e 8 semanas depois de ESDs, e a aplicação do peptideo de automontagem. A meta primária foi a taxa de hemorragia pós- ESD. As metas secundárias incluem a taxa de transição para os estágios de cura e cicatrização de úlceras induzidas por ESD gástricas.

[00105] Dos 117 indivíduos recrutados, 114 pacientes com 124 lesões (esôfago 18; estômago 42; coloretal 64) foram inscritos para análise de resultados e 3 indivíduos foram excluídos devido às perfurações e 1 com coagulopatia.

[00106] Dos 114 pacientes, 22 (19%) foram anteriormente na terapia antitrombótica incluindo 6 (5%) exigindo HBTs. O tamanho médio do espécime da ressecção foi de 40 ± 16 mm (esôfago 41 ± 20 mm; estômago 36 ± 12 mm; coloretal 43 ± 16 mm). A taxa de sangramento pós-ESD foi de 1,6% (2/124) (esôfago 0%; estômago 2,4% (1/43' intervalo de confiança de 95%, 0,04% a 12,3%); coloretal 1,6% (1/64' 95% Cl, 0,02% para 1,6%). Todos os sangramentos pós-ESD foram controlados com sucesso por via endoscópica sem necessidade de transfusão de sangue. A taxa de Transição para o estágio de cura em 1 semana foi de 98%. Figura 1D mostra a área de 1 semana após a aplicação ESD e peptideo. A endoscopia de continuação demonstrou estágio de cicatrizes em 21% e 97% em 4 e 8 semanas, respectivamente. Figura 1E mostra a área de 4 semanas após a aplicação de ESD e de peptideos. Figura 1F mostra a área de 8 semanas após a aplicação de ESD e peptideo.

[00107] Este teste demonstrou a utilidade e a eficácia da aplicação de um peptideo de automontagem para o local da lesão pós-ESD. Não houve efeitos adversos relacionados com a utilização do peptideo de automontagem. O peptideo de automontagem ajudou a reduzir a taxa de sangramento pós-ESD. O peptideo de automontagem também promoveu a cicatrização da úlcera. Os peptideos de automontagem da presente descrição fornecida aumentou tratamento e recuperação dos indivíduos testados, indicando a eficácia da utilização deste peptideo para o tratamento de úlceras induzidas por ESD. Exemplo 2: Verificação da eficácia do hidrogel de peptideo PuraMatrix™ como uma estenose preventiva após uma ressecção endoscópica para o câncer gastrointestinal em estágio inicial em grande escala e lesões pré-cancerosas em humanos.

[00108] Os testes foram realizados em um indivíduo tendo uma úlcera (lesão) após uma ressecção endoscópica do câncer do esôfago. Como mostrado na Figura 2A, um câncer do esôfago de fase inicial com de dispersão circunferencial é mostrado, em que o local do câncer abrange de uma zona circular. Dissecção endoscópica da submucosa foi realizada, o que criou uma úlcera. A Figura 2B mostra uma úlcera artificial com 4/5 da dispersão circunferencial, em que a lesão da ressecção cobre 4/5 de uma área circular, após a lesão sofrer ressecção usando ESD. 4/5 da dispersão circunferencial pode causar estenose na ausência de aplicação de uma solução de peptideo de modo a formar um hidrogel.

[00109] Depois de confirmar que não havia hemorragia na superfície da úlcera artificial após uma ressecção endoscópica, um cateter foi passado através de um endoscópio, e uma solução de peptideo, como hidrogel de peptideo PuraMatrix™ por 3-D Matriz, LTD. (2,5%, dose adequada (1 mL por 1 cm2) ) em uma seringa foi revestida uniformemente sobre a superfície da úlcera. A Figura 2C mostra um revestimento da solução de peptideo.

[00110] Na primeira semana após a cirurgia, um endoscópio é utilizado para avaliar a área. Neste momento, como com a ronda inicial, a solução de peptideo é revestida de forma uniforme sobre a superfície da úlcera. Para os casos anteriores, um endoscópio foi usado para realizar uma terceira e quarta avaliação da área, nas quarta e oitava semanas, respectivamente, após a cirurgia que induziu estenose, para avaliar a eficácia do revestimento de solução de peptideo. A Figura 2D mostra a área tratada 4 semanas após a cirurgia. A úlcera mostra cicatrizes, e a passagem do endoscópio é possível na direção da estenose. A Figura 2E mostra a área tratada 8 semanas após a cirurgia. A passagem do endoscópio é possível na direção da estenose.

[00111] Foi demonstrada a eficácia da solução de peptideo, tal como uma estenose preventiva. Além disso, nenhuma hemorragia retardada ou perfurações foram vistas como efeitos colaterais da ressecção endoscópica.

[00112] Este exemplo demonstra a capacidade da solução de peptideo para formar um hidrogel sobre uma superfície da úlcera para promover a cura da área e reduzir a estenose.

Claims

1. Kit para a prevenção de estenose subsequente à mucosectomia endoscópica (EMR) ou dissecção endoscópica da submucosa (ESD) em um ou mais da boca, garganta e esôfago em um individuo, CARAC TE RIZADOpelo fato de que compreende: uma solução compreendendo sacarose e um peptideo de automontagem compreendendo entre 7 aminoácidos e 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz para formar um hidrogel sob condições fisiológicas para permitir a prevenção da estenose; e instruções para a administração da solução a uma área alvo da boca, garganta ou esôfago do individuo, em que o peptideo de automontagem é ausente de motivo ou sequência fisiologicamente ou biologicamente ativo que prejudica a função intrínseca da célula, em que o peptideo na solução compreende um de (RADA)P, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 2), (IEIK)pI, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 5), (RADA) 4 (SEQ ID NO: 10) e (IEIK)3I(SEQ ID NO: 11).

2. Kit, de acordo com a reivindicação 1, CARAC TE RI ZADO pelo fato de que adicionalmente compreende um cateter para introduzir a solução na boca, garganta ou esôfago do individuo.

3. Kit, de acordo com a reivindicação 1, CARAC TE RIZADO pelo fato de adicionalmente compreender instruções para diluição da solução para administrar uma concentração eficaz da solução para a boca, garganta ou esôfago do individuo.

4. Kit, de acordo com a reivindicação 1, CARAC TE RIZADO pelo fato de que adicionalmente compreende instruções para determinar a concentração eficaz de solução para a boca, garganta e esôfago no individuo com base em uma dimensão da boca, garganta e esôfago na área alvo.

5. Kit, de acordo com a reivindicação 1, CARAC TE RIZADO pelo fato de que o peptideo de automontagem exibe uma estrutura em folha beta em solução aquosa na presenta de pH fisiológico e/ou um cátion.

6. Kit, de acordo com a reivindicação 1, CARAC TE RIZADO pelo fato de que o peptideo de automontagem tem um diâmetro de nanofibras em uma faixa de 10 nm a 20 nm, um tamanho médio de poro está em uma faixa de 5 nm a 200 nm, ou um comprimento de 5 nm.

7. Kit, de acordo com a reivindicação 1, CARAC TE RIZADO pelo fato de que a solução consiste essencialmente de um peptideo anfifilico compreendendo pelo menos 12 aminoácidos que alternam entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofilico.

8. Kit, de acordo com a reivindicação 1, CARAC TE RIZADO pelo fato de que a solução adicionalmente compreende pelo menos um agente biologicamente ativo.

9. Uso de um pepideo de automontagem CARAC TE RI ZADO pelo fato de ser na preparação de um medicamento para prevenção de estenose subsequente à mucosectomia endoscópica ou dissecção endoscópica da submucosa em um ou mais da boca, garganta e esôfago em um indivíduo, em que o peptideo de automontagem é fornecido em uma solução que compreende um peptideo de automontagem compreendendo entre 7 aminoácidos a 32 aminoácidos em uma quantidade eficaz e em uma concentração eficaz de modo a formar um hidrogel em condições fisiológicas da boca, garganta ou esôfago para permitir a prevenção da estenose, em que o peptideo de automontagem é ausente de motivo ou sequência fisiologicamente ou biologicamente ativo que prejudica a função intrínseca da célula, em que o peptideo na solução compreende um de (RADA)p, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 2) e (IEIK)PI, em que p = 2-50 (SEQ ID NO: 5), RADA)4 (SEQ ID NO: 10) e (IEIK)3I(SEQ ID NO: 11).

10. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARAC TE RI ZADO pelo fato de que pelo menos uma quantidade eficaz e uma concentração eficaz é baseada em parte em uma dimensão da área alvo da mucosectomia endoscópica ou dissecção endoscópica da submucosa na boca, garganta ou esôfago.

11. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARAC TE RI ZADO pelo fato de que a quantidade eficaz é de 1 mL por 1 cm2 de área alvo.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARAC TE RI ZADO pelo fato de que a concentração eficaz para permitir a prevenção da estenose compreende uma concentração em uma faixa de 0,1 por cento em peso por volume a 3 por cento em peso por volume de peptideo ou a quantidade eficaz para permitir a prevenção da estenose compreende um volume em uma faixa de 0,1 mL a 5 mL.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARAC TE RI ZADO pelo fato de que a solução é isento de células e/ou fármacos.

14. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARAC TE RI ZADO pelo fato de que a solução consiste essencialmente em um peptideo anfifílico compreendendo pelo menos 12 aminoácidos que alternam entre um aminoácido hidrofóbico e um aminoácido hidrofílico.

15. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARAC TE RI ZADO pelo fato de que o indivíduo é um mamífero.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARAC TE RI ZADO pelo fato de que a solução é fornecida em uma dose única.

17. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADO pelo fato de que a solução é fornecida em pelo menos duas doses.

18. Uso, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADO pelo fato de que a solução adicionalmente compreende pelo menos um agente biologicamente ativo.