JP6476573B2 - 細胞捕捉金属フィルタシート、細胞捕捉金属フィルタ、細胞捕捉デバイス、及び、細胞捕捉金属フィルタシートの製造方法 - Google Patents

Description

本発明は、細胞分散液中に含まれる細胞を捕捉するための細胞捕捉金属フィルタシート、細胞捕捉金属フィルタ、細胞捕捉デバイス、及び、細胞捕捉金属フィルタシートの製造方法に関する。

一般的に、癌の転移再発は、癌細胞が原発巣から血管又はリンパ管を経由して、別臓器組織の血管壁に定着、浸潤して微小転移巣を形成することで起こる。このような血管又はリンパ管を通じての人の体内を循環する癌細胞は、血中循環癌細胞（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ Ｔｕｍｏｒ Ｃｅｌｌ、以下、場合により「ＣＴＣ」という。）と呼ばれている。

血液には赤血球、白血球、血小板等の血球成分が多く含まれ、その個数は血液１ｍＬ中に３．５〜９×１０^９個ともいわれている。これに対してＣＴＣは僅か数個程度しか存在しないため、血球成分の中からＣＴＣを効率的に捕捉及び検出するために血液をろ過するために用いるフィルタ、及びこのフィルタを収容するデバイスについて検討がなされている。例えば、特許文献１では、レジストパターンが形成された銅基板をめっきして、金属めっき層を形成した後に、銅基板を化学的溶解により除去することにより、金属フィルタとなるめっき層を得る方法が記載されている。

国際公開第２０１３／０５４７８６号

しかしながら、細胞を捕捉するための金属フィルタとして、特許文献１記載の金属フィルタを量産しようとした場合、銅基板を金属めっきした後に銅基板を除去する工程を繰り返すため、生産工程が煩雑になることが懸念される。

そこで本発明は、細胞捕捉金属フィルタの量産に適し、且つ細胞捕捉金属フィルタの寸法安定性にも優れた細胞捕捉金属フィルタシートを提供することを目的とする。また、当該細胞捕捉金属フィルタシートから得られる細胞捕捉金属フィルタ、当該細胞捕捉金属フィルタシートを適用した細胞捕捉デバイス、及び、当該細胞捕捉金属フィルタシートの製造方法を提供することを目的とする。

上記目的を達成するため本発明者らは、金属フィルタを切手シートのように敷き詰めたシートを設計し、シート単位で複数の金属フィルタを同時に製造することを考えた。しかしながら、金属フィルタを切手シートのように敷き詰めた場合、隣り合う金属フィルタ同士を切り離した場合に、金属フィルタの外縁部に、切離しによるバリ等が発生するため金属フィルタの外形に寸法誤差が生じやすいと考えられた。そこで鋭意検討した結果、寸法誤差をより生じにくくする細胞捕捉金属フィルタシートの構成を見出した。即ち、本発明者らは、細胞捕捉金属フィルタシートを以下の構成にすることにより、細胞捕捉金属フィルタの量産に適し、且つ細胞捕捉金属フィルタの寸法安定性にも優れた細胞捕捉金属フィルタシートが得られることを見出した。

本発明に係る細胞捕捉金属フィルタシートは、複数の貫通孔が厚さ方向に形成されたフィルタ領域をその内側に有すると共に、外縁部において側面側からフィルタ領域側へ凹んだ凹部を有し、厚さ方向に垂直な面に沿って所定の間隙を介して配列されたシート状の複数の細胞捕捉金属フィルタと、凹部内に進入する進入部を有し、進入部で細胞捕捉金属フィルタと連続することにより複数の細胞捕捉金属フィルタ同士を接続している接続部と、を備え、凹部内における細胞捕捉金属フィルタと進入部との境界には、細胞捕捉金属フィルタと接続部との分離を可能とする切離線が設けられている。

この細胞捕捉金属フィルタシートは、シート状の複数の細胞捕捉金属フィルタが所定の間隙を介して配列されており、当該所定の間隙により、細胞捕捉金属フィルタの外形寸法が規定されている。そして、細胞捕捉金属フィルタは、接続部との分離を可能とする切離線が、細胞捕捉金属フィルタ外縁部における側面側からフィルタ領域側へ凹んだ凹部内において設けられている。このため、細胞捕捉金属フィルタと接続部とを分離した場合には、切離しによるバリ等は当該凹部内に発生するため、細胞捕捉金属フィルタの外形寸法には影響しない。従って、本発明の細胞捕捉金属フィルタシートは、細胞捕捉金属フィルタの量産に適し、且つ細胞捕捉金属フィルタの寸法安定性にも優れている。

ここで、切離線は、所定の間隔を有して配置された複数の小孔から構成されていてもよい。これによれば、細胞捕捉金属フィルタシートを切離線に沿って折り曲げることで細胞捕捉金属フィルタと接続部とを容易に分離することができる。

また、凹部の形状は、一次元方向に延びる切離線と、間隙のうち進入部の側面に沿って延び切離線の端部に連絡する部分とにより決められていてもよい。切離線が一次元方向に延びている場合、二次元方向に延びている場合と比べて、１回の折曲げで細胞捕捉金属フィルタと接続部とを分離することができる。

細胞捕捉金属フィルタは略四角形状であり、外縁部のうち、略四角形を構成する隣接する２辺により挟まれる角部のそれぞれには、角部を挟む２辺からそれぞれ切り込んだ２つの切込辺により形成される切込部が設けられていてもよい。この切込部は、細胞捕捉金属フィルタを後述する細胞捕捉デバイスに適用する場合に、細胞捕捉デバイスの蓋部材と収納部材との嵌合時に細胞捕捉金属フィルタにしわが寄らないための逃げとして機能する。

ここで、複数の切込部のうち少なくとも１つは、２つの切込辺と切込辺の始点となる辺とのなす角が互いに異なっていることが好ましい。これによれば、フィルタ領域に形成された貫通孔を肉眼で見ることができない場合でも、フィルタ領域の特定の方向を識別することができる。

本発明に係る細胞捕捉金属フィルタは、上記細胞捕捉金属フィルタシートを切離線に沿って分離することで得られるものである。また、本発明に係る細胞捕捉金属フィルタは、複数の貫通孔が厚さ方向に形成されたフィルタ領域をその内側に有するシート状の細胞捕捉金属フィルタであって、外縁部において、側面側からフィルタ領域側へ凹んだ凹部を有し、凹部における側面に、凹凸が形成されている。このような細胞捕捉金属フィルタは、外形寸法に誤差を発生させるバリ又は凹凸等が、外縁部において側面側からフィルタ領域側へ凹んだ凹部内に形成されているため、細胞捕捉金属フィルタの外形寸法には影響しない。従って、本発明に係るこれらの細胞捕捉金属フィルタは、寸法安定性に優れている。

本発明に係る細胞捕捉デバイスは、被検液中の細胞を捕捉する細胞捕捉デバイスであって、被検液を内部へ導入するための導入流路を有する蓋部材と、被検液を外部へ排出するための排出流路を有する収納部材と、を有する筐体と、被検液が貫通孔を通過するように導入流路と排出流路との間の筐体の内部の流路上に設けられ、蓋部材及び収納部材との間において蓋部材と収納部材とにより支持される上記細胞捕捉金属フィルタと、を備える。

この細胞捕捉デバイスでは、寸法安定性に優れた上記細胞捕捉金属フィルタを使用するため、捕捉性能の再現性を高めることができる。

この細胞捕捉デバイスにおいて、蓋部材は、組み立てた際にフィルタ領域よりも外側であって細胞捕捉金属フィルタの外縁部より内側となる位置に設けられて、細胞捕捉金属フィルタが取り付けられる側の面において外方に突出する第１の突出部と、第１の突出部よりも外側で離間した位置であって組み立てた際に細胞捕捉金属フィルタの少なくとも一部が重なる位置に設けられて、収納部材と嵌合する第１の嵌合部と、を備え、収納部材は、組み立てた際に第１の突出部と対応する位置に設けられて、第１の突出部と対応する位置に配置して突出する第２の突出部と、組み立てた際に蓋部材と嵌合する第２の嵌合部と、を備え、第１の嵌合部及び第２の嵌合部のうちのいずれか一方は凸形状をなすと共に他方は凹形状をなし、組み立てた際には、第１の突出部及び第２の突出部が細胞捕捉金属フィルタを挟んで対応する位置に配置することで筐体の内部の流路を形成すると共に、第１の嵌合部と第２の嵌合部とがフィルタ領域より外周側で細胞捕捉金属フィルタを嵌合して固定してもよい。

上記態様では、蓋部材の第１の突出部と収納部材の第２の突出部とにより細胞捕捉金属フィルタを固定し、更にその外側の第１の嵌合部と第２の嵌合部とを嵌合させながら細胞捕捉金属フィルタを挟みこむ。これにより、細胞捕捉金属フィルタの中心から外側に向けて引っ張られながら細胞捕捉金属フィルタが蓋部材と収納部材との間に固定されるため、細胞捕捉金属フィルタにしわ等が発生せず、内部のフィルタ領域を通過する被検液に含まれる細胞を好適に捕捉することができる。更に、フィルタ領域の外周側となる位置（外周領域）において細胞捕捉金属フィルタが第１の突出部及び第２の突出部によって両側から挟み込まれるため、細胞捕捉デバイスの内部に液（被検液又は処理液）を導入した場合に、液の流路は外部から遮蔽されると共に細胞捕捉金属フィルタ等を伝ってデバイス内での液の拡散を防ぐことができ、外側への液の滲出を防止することができ、フィルタ領域にて被検液中の細胞を捕捉し、捕捉した細胞をデバイスを解体することなく簡便に且つ精度よく観察することが可能となる。また、第１の突出部及び第２の突出部によって、細胞捕捉金属フィルタが嵌合して固定されるため、細胞捕捉金属フィルタ表面の高さのばらつきを低減した状態で固定することが可能となるので、細胞の顕微鏡観察の際の作業性が向上する。

本発明に係る細胞捕捉金属フィルタシートの製造方法は、金属箔上にフォトレジストをラミネートする工程と、フォトレジストの上に、複数の透光部によってそれぞれ形成された複数の第一透光領域と、複数の第一透光領域をそれぞれ区画するように透光部が形成された複数の第二透光領域と、複数の第二透光領域の間を連絡するように透光部が形成された複数の第三透光領域と、を有するフォトマスクを重ねて露光する工程と、現像してフォトレジストの未硬化部を除去してフォトレジストパターンを形成する工程と、フォトレジストパターン間を金属めっきしてフォトレジストパターンの高さより低い金属めっきパターンを形成する工程と、金属箔を化学的溶解によって除去して、金属めっきパターンとフォトレジストパターンからなる構造物を得る工程と、構造物からフォトレジストパターンを除去して、第一透光領域、第二透光領域、及び第三透光領域に対応する貫通孔を有する金属めっきパターンを得る工程と、を含む。

この製造方法によれば、複数の貫通孔が厚さ方向に形成されたフィルタ領域をその内側に有する細胞捕捉金属フィルタ、接続部、所定の間隙、及び切離線を備え、細胞捕捉金属フィルタと接続部とが切離線を介して一体的に形成された細胞捕捉金属フィルタシートを得ることができる。

本発明によれば、細胞捕捉金属フィルタの量産に適し、且つ細胞捕捉金属フィルタの寸法安定性にも優れた細胞捕捉金属フィルタシートを提供することができる。また、当該細胞捕捉金属フィルタシートから得られる細胞捕捉金属フィルタ、当該細胞捕捉金属フィルタシートを適用した細胞捕捉デバイス、及び、当該細胞捕捉金属フィルタシートの製造方法を提供することができる。

細胞捕捉金属フィルタシートの平面図である。 図１の部分拡大図である。 細胞捕捉金属フィルタシートの製造方法を説明する図である。 細胞捕捉デバイスの構成を説明する概略斜視図である。 蓋部材についての上方からの概略斜視図である。 蓋部材についての下方からの概略斜視図である。 蓋部材の内部構造を説明する図であり、図５のVII−VII断面の矢視図である。 収納部材についての上方からの概略斜視図である。 収納部材についての下方からの概略斜視図である。 収納部材の内部構造を説明する図であり、図８のX−X断面の矢視図である。 固定部材の斜視図及び平面図である。 細胞捕捉金属フィルタの構造を説明する図である。 細胞捕捉金属フィルタに設けられる貫通孔の形状の他の例を示す図である。 細胞捕捉デバイスの構成を説明する分解斜視図である。 蓋部材、細胞捕捉金属フィルタ、ガスケット及び収納部材を組み立てる前の断面を模式的に示した図であり、図４のXV−XV断面の矢視図の一部に相当する。 図１５のうちの左側部分のみ拡大した図である。 蓋部材、細胞捕捉金属フィルタ、ガスケット及び収納部材を組み立てた後の図であり、図１５に対応する図である。 図１７のうちの左側部分のみ拡大した図であり、図１６に対応する図である。 固定部材の装着方法を示す図である。 細胞捕捉システムの構成を説明するブロック図である。 細胞捕捉金属フィルタシートの変形例の平面図である。 細胞捕捉デバイスの変形例の構成を説明する模式断面図である。 細胞捕捉デバイスの他の変形例の構成を説明する模式断面図である。 細胞捕捉デバイスの他の変形例の構成を説明する模式断面図である。

以下、添付図面を参照して、本発明を実施するための形態を詳細に説明する。なお、図面の説明においては同一要素には同一符号を付し、重複する説明を省略する。

（細胞捕捉金属フィルタシート）
本実施形態に係る細胞捕捉金属フィルタシートについて説明する。図１は、細胞捕捉金属フィルタシートの平面図、図２は、図１の部分拡大図である。細胞捕捉金属フィルタシート３００は、複数の細胞捕捉金属フィルタ３０を効率よく生産するためのシートであって、厚さ方向に垂直な面に沿って所定の間隙Ｓを介して複数の細胞捕捉金属フィルタ３０が配列されたものである。図１に示される細胞捕捉金属フィルタシート３００は、外周枠２の内部に２枚の細胞捕捉金属フィルタ３０が１×２の行列状に敷き詰められて構成されている。

それぞれの細胞捕捉金属フィルタ３０は、略正方形状であり、複数の貫通孔３２が厚さ方向に形成されたフィルタ領域３３をその内側に有している。細胞捕捉金属フィルタ３０の細部の詳細については後述する。

細胞捕捉金属フィルタ３０はそれぞれ、略正方形の各辺の中央部分に、側面Ｔ側からフィルタ領域３３側へ凹んだ凹部Ｄをそれぞれ有しており（図１２も参照）、隣り合う細胞捕捉金属フィルタ３０の凹部Ｄ同士が対向している。一方の細胞捕捉金属フィルタ３０の凹部Ｄにおける外縁部からは、接続部５が連続して設けられており、この接続部５が隣り合う他方の細胞捕捉金属フィルタ３０の凹部Ｄにおける外縁部に連続している。すなわち、接続部５は、相対向する凹部Ｄ内にそれぞれ進入する進入部５Ａを両端に有し、細胞捕捉金属フィルタ３０の凹部Ｄにおけるそれぞれの外縁部と一体的に連続することにより、隣り合う細胞捕捉金属フィルタ３０同士を接続している。ここで「外縁部」とは、細胞捕捉金属フィルタ３０の略正方形をなす各辺、及び、各辺からフィルタ領域３３へ向って広がる各辺近傍の表面を含む領域をいう。細胞捕捉金属フィルタシート３００は、後述する製造方法によって一体成形して得ることができる。

凹部Ｄ内における細胞捕捉金属フィルタ３０と進入部５Ａとの境界には、凹部Ｄの凹み方向と垂直な方向に延びるように、切離線Ｌが設けられている。すなわち切離線Ｌは、細胞捕捉金属フィルタ３０の略正方形をなす辺よりもフィルタ領域３３側に寄った位置に設けられている。切離線Ｌは、それぞれ、所定の間隔を有し、連続して配置された複数の小孔３１０からなる、所謂ミシン目として形成されている。そして、切離線Ｌが所謂ミシン目で形成されていることにより、細胞捕捉金属フィルタ３０と接続部５とを一層容易に分離することができる。

なお、外周枠２と細胞捕捉金属フィルタ３０とは、外周枠２から連続して設けられた接続部５によって互いに接続されている。

小孔３１０は、その直径を例えば０．１ｍｍ〜０．３ｍｍとすることができる。この場合、小孔３１０の間隔は、０．１ｍｍ〜０．７ｍｍであることが好ましい。このような構成にすることで、切離線Ｌを利用した細胞捕捉金属フィルタ３０の分離を容易に行うことができる。すなわち、切離線Ｌに沿って細胞捕捉金属フィルタシート３００を折り曲げることで、切離線Ｌに応力が集中するため細胞捕捉金属フィルタ３０の分離をより簡便に行うことができる。

間隙Ｓは、隣り合う細胞捕捉金属フィルタ３０同士を離間させると共に細胞捕捉金属フィルタ３０の外形を規定するように縦横に線状に延びている。図１では、間隙Ｓは、細胞捕捉金属フィルタ３０の略正方形の隣り合う二辺、又は、隣り合う細胞捕捉金属フィルタ３０の一辺を当該二辺に加えた三辺を規定するように縦横に延びている。１枚の細胞捕捉金属フィルタ３０の略正方形の角部、及び、２枚の細胞捕捉金属フィルタ３０の略正方形の角部が集合している部分は、間隙の面積が拡張して線状ではなく平面視多角形を形成している。そして、この多角形の辺の一部は、細胞捕捉金属フィルタ３０の後述する切込部３５（図１２）を構成している。

一方、間隙Ｓのうち、隣り合う細胞捕捉金属フィルタ３０同士を離間させるように延びた線状部分の先端部分は、接続部５に当たる位置において二股に分岐し、隣り合う細胞捕捉金属フィルタ３０、３０のフィルタ領域３３、３３側に向って直角に折れ、接続部５の進入部５Ａ、５Ａの側面に沿って延びて切離線Ｌ、Ｌの端部において終端している。そして、この接続部５に対しては、隣り合う間隙Ｓの先端部分が接続部５の反対側から同様に延びてきており、切離線Ｌ、Ｌの他方の端部において終端している。すなわち、隣り合う間隙Ｓ、Ｓの先端部分の終端同士は、当該終端同士を結ぶ方向（つまり、凹部Ｄの凹み方向と垂直な方向）に延びる切離線Ｌにより互いに連絡されている。このように、細胞捕捉金属フィルタ３０の凹部Ｄの形状は、一次元方向に延びる切離線Ｌと、間隙Ｓのうち進入部５Ａの側面に沿って延び切離線Ｌの端部に連絡する部分とにより決められている。

また、間隙Ｓのうち、細胞捕捉金属フィルタ３０同士が隣り合っていない部分（細胞捕捉金属フィルタ３０が外周枠２と隣り合っている部分）において細胞捕捉金属フィルタ３０の外形を規定している部分においては、その先端部分は、接続部５に当たる位置において、細胞捕捉金属フィルタ３０のフィルタ領域３３側のみに向って直角に折れている。

（細胞捕捉金属フィルタ及び細胞捕捉金属フィルタシートの製造方法）
次に、細胞捕捉金属フィルタシート３００の製造方法について図３を用いて説明する。本実施形態に係る細胞捕捉金属フィルタシート３００の製造方法は、金属箔上にフォトレジストをラミネートする工程と、フォトレジスト層の上に複数の透光部により形成された透光領域を有するフォトマスクを重ねて露光する工程と、現像してフォトレジスト層の未露光部を除去してフォトレジストパターンを形成する工程と、フォトレジストパターン間を金属めっきしてフォトレジストパターンの高さより低い金属めっきパターンを形成する工程と、金属箔を化学的溶解によって除去して、金属めっきパターンとフォトレジストパターンからなる構造物を得る工程と、構造物からフォトレジストパターンを除去して、金属めっきパターンを得る工程と、を含む。以下、各工程について説明する。

図３（ａ）は、キャリア層５１に対して金属箔５２を積層した状態を示す。図３（ｂ）に示すラミネート工程において、金属箔５２に感光性樹脂組成物からなるフォトレジスト５３を形成する。続いて、図３（ｃ）に示す露光工程において、フォトマスク５４を通してフォトレジスト５３に活性光線（ＵＶ光）を照射し、露光された部分を光硬化させてフォトレジストの硬化物を形成する。続いて、図３（ｄ）に示す現像工程において、硬化物以外のフォトレジスト５３を除去し、フォトレジストパターン５３ａ及びフォトレジストパターン５３ｂを形成する。続いて、図３（ｅ）に示すめっき工程において、硬化物からなるフォトレジストパターン５３ａ、５３ｂが形成された金属箔５２上にめっき層（めっきパターン）５５を形成する。続いて、図３（ｆ）に示すように、金属箔５２とキャリア層５１とを剥離する。続いて、図３（ｇ）に示す溶解工程において、金属箔５２を化学的溶解により除去する。この結果、フォトレジストの硬化物からなるフォトレジストパターン５３ａ、５３ｂ及びめっき層５５が残る。続いて、図３（ｈ）に示す剥離工程において、フォトレジストの硬化物からなるフォトレジストパターン５３ａ、５３ｂを除去し、めっき層５５からなる金属フィルタを回収する。金属フィルタには貫通孔５６ａ、５６ｂが形成されている。これらの貫通孔のうち、フォトレジストパターン５３ａに対応する貫通孔５６ａがフィルタ領域３３の貫通孔３２に相当し、フォトレジストパターン５３ｂに対応する貫通孔５６ｂが切離線Ｌの小孔３１０に相当する。なお、間隙Ｓに相当する貫通孔は、図３には描かれていない。

なお、キャリア層５１に対して金属箔５２を積層した積層体を用いる構成に代えて、金属製の基板を使用してもよい。この場合、図３（ｆ）において示した金属箔５２とキャリア層５１とを剥離する工程が存在しない点以外は図３に示す製造方法と同様の方法により細胞捕捉金属フィルタシート３００を製造することができる。ただし、金属製基板は金属箔よりも厚いため、溶解工程において基板を化学的溶解により除去する工程において用いられる化学的溶解剤と時間が、金属箔を除去する場合と比較して増加する。

以下、各工程についてより詳細に説明する。

（ラミネート工程）
まず、キャリア層５１に対して金属箔５２を積層させた状態を示す。金属箔５２としては、エッチングによって除去可能な金属箔を用いることができ、具体的には銅、ニッケル、ニッケル・クロム合金等の箔が用いられるが、銅箔が好ましい。銅箔はケミカルエッチングで容易に除去可能であり、フォトレジストとの密着力においても他の材料に比べると優れている。銅張り積層板からなるキャリア層５１に対して後の工程で剥離可能な程度に金属箔５２を貼り付けたものを用いると、細胞捕捉金属フィルタシート３００の製造工程途中の作業性及び取り扱い性に優れるので好ましい。上記のような構成として、具体的には、ピーラブル銅箔（日立化成（株）社製）を用いることができる。ピーラブル銅箔とは、極薄銅箔とキャリア層の少なくとも２層からなる銅箔のことである。

図３（ｂ）は金属箔５２の上に感光性樹脂組成物によるフォトレジスト５３を形成した状態を示す図である。フォトレジスト５３としては、ネガ型及びポジ型のいずれも使用可能であるが、ネガ型フォトレジストが好ましい。ネガ型フォトレジストは、少なくとも、バインダー樹脂、不飽和結合を有する光重合性化合物、及び光重合開始剤を含むものであることが好ましい。なお、ポジ型のフォトレジストを使用する場合には、フォトレジスト層のうち、活性光線の照射により露光された部分の現像液に対する溶解性が増大するため、現像工程において、露光された部分が除去されることになる。以下、ネガ型フォトレジストを使用した場合について説明する。

最終的に得られる細胞捕捉金属フィルタシート３００の厚みは、フォトレジストパターンの厚み以下となる。このため、目的とする金属フィルタの厚みに適した膜厚のフォトレジスト層を形成する必要がある。例えば、１５μｍ未満の厚みの金属フィルタを製造する場合には膜厚１５μｍのフォトレジストを使用することが好ましい。また、１５μｍを超え２５μｍ未満の厚みの金属フィルタを製造する場合には膜厚２５μｍのフォトレジストを使用することが好ましい。また、連結貫通孔の孔径が小さくなるほど膜厚の薄いフォトレジストを使用することが好ましい。

フォトレジスト５３の金属箔５２上への積層は、例えば、支持フィルム、フォトレジスト及び保護フィルムからなるシート状の感光性エレメントの保護フィルムを除去した後、フォトレジスト５３を加熱しながら金属箔５２に圧着することにより行われる。これにより、金属箔５２とフォトレジスト５３と支持フィルムとからなり、これらが順に積層された積層体が得られる。

この積層作業は、密着性及び追従性の見地から、減圧の雰囲気下で行うことが好ましい。一方、圧着の際のフォトレジスト５３及び／又は金属箔５２に対する加熱温度、圧力等の条件に特に制限はないが、７０℃〜１３０℃の温度で行うことが好ましく、１００ｋＰａ〜１０００ｋＰａ程度の圧力で圧着することが好ましい。なお、フォトレジストの圧着において、積層性を向上させるために、金属箔を予熱処理してもよい。なお、支持フィルムにフォトマスクの機能を持たせてもよく、その場合には、そのまま次の工程に移ってフォトマスクとして用いてよいが、そうでない場合には、次の工程においてフォトマスクを重ねる前に支持フィルムを剥離する。

（露光工程）
続いて、露光工程について説明する。金属箔５２上のフォトレジスト５３の上に複数の透光部を含む透光領域を有するフォトマスク５４を重ねた後、活性光線を照射し、露光された部分を光硬化させてフォトレジストの硬化物を形成する。これによりフォトレジストパターン５３ａ、５３ｂが得られる。

フォトマスクは、細胞捕捉金属フィルタ３０のフィルタ領域３３に含まれる複数の貫通孔３２に対応する複数の透光部からなる第一の透光領域と、間隙に対応する複数の透光部からなる第二の透光領域と、切離線Ｌの小孔３１０に対応する第三の透光領域と、を有する。なお、第二の透光領域は、図３には描かれていない。

露光方法としては、アートワークと呼ばれるネガ又はポジマスクパターンを通して活性光線を画像上に照射する方法（マスク露光法）が挙げられる。また、ＬＤＩ（Ｌａｓｅｒ Ｄｉｒｅｃｔ Ｉｍａｇｉｎｇ）露光法やＤＬＰ（Ｄｉｇｉｔａｌ Ｌｉｇｈｔ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）露光法等の直接描画露光法により活性光線を画像状に照射する方法を採用してもよい。

活性光線の光源としては、公知の光源を用いることができ、例えば、カーボンアーク灯、水銀蒸気アーク灯、高圧水銀灯、キセノンランプ、アルゴンレーザ等のガスレーザ、ＹＡＧレーザ等の固体レーザ、半導体レーザ等の紫外線、可視光等を有効に放射するものが用いられる。

活性光線の波長（露光波長）としては、３５０ｎｍ〜４１０ｎｍの範囲内とすることが好ましく、３９０ｎｍ〜４１０ｎｍの範囲内とすることがより好ましい。露光は６００ｍｍＨｇ以下の真空下で行うのが好ましい。露光量は０．０１Ｊ／ｃｍ^２〜１０Ｊ／ｃｍ^２の範囲内で行うのが好ましく、０．０１Ｊ／ｃｍ^２〜５Ｊ／ｃｍ^２の範囲内で行うのがより好ましい。

（フォトレジストパターン形成工程）
フォトレジスト５３のうち、フォトレジストの硬化物以外の部分（未硬化部）を金属箔５２上から除去することにより、金属箔５２上に、フォトレジストの硬化物からなるフォトレジストパターン５３ａ、５３ｂを形成する。フォトレジスト上に支持フィルム又はフォトマスクが存在している場合には、支持フィルム又はフォトマスクを除去してから、上記フォトレジストの硬化物以外の部分の除去（現像）を行う。現像方法には、ウェット現像とドライ現像とがあるが、ウェット現像が広く用いられている。

ウェット現像による場合、フォトレジストに対応する現像液を用いて、公知の現像方法により現像する。現像方法としては、ディップ方式、パドル方式、スプレー方式、ブラッシング、スラッピング、スクラッピング、揺動浸漬等を用いた方法が挙げられ、解像性向上の観点からは、高圧スプレー方式が最も適している。これらの現像方法のうち２種以上の方法を組み合わせて現像を行ってもよい。

現像液としては、アルカリ性水溶液、水系現像液、有機溶剤系現像液等が挙げられる。アルカリ性水溶液は、現像液として用いられる場合、安全且つ安定であり、操作性が良好である。アルカリ性水溶液の塩基としては、リチウム、ナトリウム又はカリウムの水酸化物等のアルカリ金属水酸化物；リチウム、ナトリウム、カリウム若しくはアンモニウムの炭酸塩又は重炭酸塩；リン酸カリウム、リン酸ナトリウム等のアルカリ金属リン酸塩；ピロリン酸ナトリウム、ピロリン酸カリウム等のアルカリ金属ピロリン酸塩などが用いられる。

アルカリ性水溶液としては、０．１質量％〜５質量％炭酸ナトリウムの希薄溶液、０．１質量％〜５質量％炭酸カリウムの希薄溶液、０．１質量％〜５質量％水酸化ナトリウムの希薄溶液、０．１質量％〜５質量％四ホウ酸ナトリウムの希薄溶液等が好ましい。アルカリ性水溶液のｐＨは９〜１１の範囲とすることが好ましく、その温度は、フォトレジストのアルカリ現像性に合わせて調節される。アルカリ性水溶液中には、表面活性剤、消泡剤、現像を促進させるための少量の有機溶剤等を混入させてもよい。

なお、フォトレジスト５３の硬化物以外の部分を現像により除去し、金属箔５２上にフォトレジストの硬化物からなるフォトレジストパターン５３ａ、５３ｂを形成した後、必要に応じて６０℃〜２５０℃程度の加熱又は０．２Ｊ／ｃｍ^２〜１０Ｊ／ｃｍ^２程度の露光を行うことにより、フォトレジストパターンを更に硬化してもよい。

フォトレジストパターンは、フォトレジストパターンの高さとその短辺の長さのアスペクト比（高さ／短辺の長さ）が、１以上１０以下であることが好ましく、２以上７以下であることがさらに好ましく、３以上５以下であることが特に好ましい。アスペクト比が１０以下であると、形状が安定し、フォトレジストパターンが倒れる可能性が低下するため、細胞捕捉金属フィルタとしての歩留まりが向上する。一方、アスペクト比が１以上であると、細胞捕捉金属フィルタ３０としての細胞の捕捉効率が向上し、細胞捕捉金属フィルタとしての取扱い性も向上する。

（金属めっきパターン形成工程）
現像工程の後、金属箔５２上に金属めっきを行い、金属めっきパターン５５を形成する。めっきの方法としては、例えば、はんだめっき、ニッケルめっき、及び金めっきが挙げられる。このめっき層が最終的に金属シートとなり、後の工程でフォトレジストパターンが除去されて細胞捕捉金属フィルタシートの貫通孔になるので、フォトレジストパターンを塞いでしまわないようフォトレジストパターンの高さより低くめっきすることが重要である。

金属めっきの金属種としては金、銀等の貴金属、アルミニウム、タングステン、ニッケル、クロム等の卑金属、及びこれらの金属の合金が例示できるがこれらに限定するものではない。金属は単体で用いてもよく、機能性を付与するために他の金属との合金又は金属の酸化物として用いてもよい。これらの中でも、腐食等の発生を防止し、加工性、コスト面にも優れることから、ニッケル及びニッケルを主成分とする金属を用いることが好ましい。ここで主成分とは、材料のうち最も多くの割合を占める成分をいう。

（金属めっきパターンとフォトレジストパターンからなる構造物を得る工程）
金属めっきパターン５５を形成した後、金属箔５２を化学的に溶解して除去する。これにより、人手作業（手剥がし）によらずに金属フィルタとなる金属めっきパターン４０５とフォトレジストパターン５３ａ、５３ｂとからなる構造物を回収することができる。このため、シワ、折れ、キズ、カール等のダメージや、微細な連結貫通孔の変形を生じることなく、金属フィルタを製造することができる。金属箔を溶解する化学的溶解剤としては、メックブライトＳＦ−５４２０Ｂ（商品名、メック株式会社製）、銅選択エッチング液−ＣＳＳ（日本化学産業株式会社）等を使用することができる。

（フォトレジストパターンを除去する工程）
続いて、フォトレジストパターン５３ａ、５３ｂを、例えば現像に用いたアルカリ性水溶液より更に強アルカリ性の水溶液により除去する。この強アルカリ性の水溶液としては、例えば、１質量％〜１０質量％水酸化ナトリウム水溶液又は水酸化カリウム水溶液を用いることが好ましく、１質量％〜５質量％水酸化ナトリウム水溶液又は水酸化カリウム水溶液を用いることがより好ましい。レジストパターン（フォトレジストの硬化物）を除去することにより、金属めっきパターン５５のみを回収することができる。この金属めっきパターン５５が金属フィルタとなる。レジストパターンの除去方式としては、浸漬方式、スプレー方式、超音波を用いる方式等が挙げられ、これらは単独で用いても併用してもよい。

以上の工程を経ることにより、一体成形された細胞捕捉金属フィルタシート３００が得られる。

上記の製造方法で得られた細胞捕捉金属フィルタシート３００の一部を細胞捕捉金属フィルタ３０として使用する場合には、細胞捕捉金属フィルタシート３００を切離線Ｌに沿って切り離し、細胞捕捉金属フィルタ３０の個片とすることで使用する。この場合、切離線Ｌが、小孔が連続して設けられた所謂ミシン目線により構成されている場合には、細胞捕捉金属フィルタシート３００を折り曲げることで細胞捕捉金属フィルタ３０を容易に分離することができる。特に、所謂ミシン目が一次元方向に延びたものである場合は、一方向へ折り曲げるのみで細胞捕捉金属フィルタ３０を容易に分離することができる。

（細胞捕捉デバイス）
図４は、本発明の実施形態に係る細胞捕捉デバイスの構成を説明する概略斜視図である。図１に示す細胞捕捉デバイス１は、内部に設けられたフィルタにより、体液中の特定の細胞を捕捉する機能を有する。特に好適な例として、ＣＴＣと呼ばれる循環癌細胞を含む血液中から、血液中に含まれる赤血球、血小板及び白血球（以下、これらを総称して「血球成分」とする）を通過させる一方で、ＣＴＣを捕捉する機能を有する。フィルタにより捕捉された細胞は、内部に洗浄液、染色液等を導入することにより染色処理が施された後、顕微鏡等による観察が行われる。

図４に示す細胞捕捉デバイス１は、筐体１０と、筐体１０の内部に設けられて被検液を通過させるフィルタとを備える。ここで、被検液とは、細胞が分散した液である。また、筐体１０は、蓋部材１００と収納部材２００とを含んで構成され、後述する蓋部材側ガイド部又は収納部材側ガイド部によって囲まれる部分の寸法及び形状としては、作業性及び観察性の観点から、平面視における一辺の長さが１０ｍｍ〜１００ｍｍの略正方形であることが好ましい。また、その一辺の長さは、１５ｍｍ〜７０ｍｍであることがより好ましく、２０ｍｍ〜３０ｍｍであることが更に好ましい。また、筐体１０の厚さは、観察機器の高さ方向の可動範囲の観点から、２ｍｍ〜２０ｍｍであることが好ましく、３ｍｍ〜１５ｍｍであることがより好ましく、５ｍｍ〜１０ｍｍであることが更に好ましい。

蓋部材１００と収納部材２００は、これらが重ね合わされた方向（フィルタと交差する方向）の両側から四つの固定部材６０（６０Ａ〜６０Ｄ）により挟まれて、互いに固定されている。四つの固定部材６０は、細胞捕捉金属フィルタ３０を囲うように、筐体１０の周縁部に配置されている。

蓋部材１００及び収納部材２００の材料としては、剛性の比較的高いものを選定することが好ましい。これにより、細胞捕捉デバイス１を組み立てて固定する際の加圧による変形を抑制することができる。ただし、剛性が高すぎると嵌合部に応力がかかったときに細胞捕捉金属フィルタ３０を傷付けることになる。ここで、材料の剛性は、例えばヤング率で表すことができる。したがって蓋部材１００及び収納部材２００の材料としては、室温におけるヤング率で０．１ＧＰａ〜１００ＧＰａのものが好ましく、１ＧＰａ〜１０ＧＰａのものがより好ましい。ヤング率は、一般的に知られるユーイング法によって測定できる。

更に、蓋部材１００は、観察対象の細胞を検出する時に使用する波長の光、特に可視光領域の光に対して透光性を有する材料からなることが好ましい。蓋部材１００の材料としては、ガラス、石英ガラス、プラスチック（特にアクリル樹脂）、ポリジメチルシロキサン等の高分子が挙げられるがこれらに限定されない。蓋部材１００と収納部材２００とは必ずしも同一材料である必要はないが、組み立て時に嵌合部にかかる応力が蓋部材側と収納部材側に均等にかかる観点から同一材料であることが好ましい。蓋部材１００及び収納部材２００の材料としては、デバイスの量産が可能であることから、低自家蛍光性のアクリル樹脂が好ましく、ポリメチルメタクリレートが特に好ましい。一般的に、癌細胞等を観察する場合には、対象となる細胞に蛍光試薬による染色処理を行った後、波長が３００ｎｍ〜８００ｎｍの紫外光又は可視光領域の光を照射して、蛍光観察を行う。そのため、蓋部材１００としては、前記波長域の光の照射時に材料自体が発しないように、自家蛍光が低い材料を選定することが好ましい（これを「低自家蛍光性」と呼ぶ。）。一般的に、芳香環を有する有機高分子、例えばポリスチレン、ポリカーボネート等の樹脂は、自家蛍光性が強く、上記の目的に適さない場合が多い。

蓋部材１００は、観察対象の細胞が含まれる被検液及びフィルタ上に捕捉された細胞の染色処理等を行うための処理液を内部に導入するための導入流路１０１、１０２を有する（図５も参照）。また、収納部材２００は、被検液を内部から外部へ排出するための排出流路２０１を有する。なお、以下の説明においては導入流路１０１、１０２が取り付けられる方向をＸ軸方向とし、Ｘ軸に対して直交する水平方向をＹ軸方向とし、Ｘ軸及びＹ軸に直交する垂直方向をＺ軸方向とする。

次に、細胞捕捉デバイス１の構成について詳細に説明する。まず蓋部材１００、収納部材２００、固定部材６０及びフィルタの構成についてそれぞれ説明した後に、これらを組み立てた細胞捕捉デバイスについて説明する。

（蓋部材）
まず蓋部材１００について説明する。図５〜７は、蓋部材１００の構成を説明する図であり、図５は、蓋部材１００についての上方からの概略斜視図であり、図６は、蓋部材１００についての下方からの概略斜視図であり、図７は、図５のVII−VII断面の矢視図である。

図５〜７に示すように、蓋部材１００は、略正方形状の板部材からなる本体部１１０に対して、本体部１１０の側縁からＸ軸方向に沿って外部に突出するように２つの流路部１０５、１０６が取り付けられる。流路部１０５、１０６は、Ｘ軸方向から蓋部材１００を見たときに互いに異なる位置となるように、Ｙ軸方向に沿って中心からずれた位置に取り付けられている。ここでは、図７に示す流路部１０６について説明するが、流路部１０５においても同様の構成とされている。

蓋部材１００には、細胞捕捉金属フィルタ３０を被検液が通過するための凹型の空隙からなる導入領域１２０が設けられる。導入領域１２０は、細胞捕捉デバイス１を上方から見たときに、蓋部材１００と収納部材２００の間に取り付けられた細胞捕捉金属フィルタ３０のうち貫通孔３２が設けられる領域（フィルタ領域３３）を含むように、フィルタ領域３３の上方に設けられる。導入領域１２０の角部には、接続用の穿孔１０９、１１３を介して導入流路１０１、１０２が接続される。導入領域１２０は、導入流路１０１、１０２から導入された被検液又は処理液を細胞捕捉金属フィルタ３０の貫通孔３２に対して誘導するための空間となる。

ここで、図７を用いて、導入流路１０２について更に説明する。流路部１０６には、その内部において、Ｘ軸に沿って延びる導入流路１０２が設けられる。導入流路１０２は、導入口１０２Ａと、導入口１０２Ａから内部に伸びる流路１０２Ｂと、流路１０２Ｂに接続して流路１０２Ｂよりも口径が小さい流路１０２Ｃとを含んで構成される。更に、流路１０２Ｂと流路１０２Ｃとの間には、流路部１０６を垂直方向（Ｚ軸方向）に貫通する穿孔１１１が設けられる（他方、流路部１０５については穿孔１０７が設けられる）。この穿孔１１１には、流路開閉弁（流路開閉機構）として機能する穿孔が設けられたバルブが挿通される。これにより、流路１０２Ｂの開閉がこのバルブにより行われる。更に、導入領域１２０と導入流路１０２とを接続する穿孔１１３が導入流路１０２の本体部１１０側の端部に導入流路１０２と連通するように設けられる。これにより、導入口１０２Ａから導入される液（被検液又は処理液）は、流路１０２Ｂ、流路１０２Ｃ及び穿孔１１３を経て、導入領域１２０へ送られる。

導入領域１２０の周縁には、導入領域１２０に導入された液が外側に漏出することを防ぐための第１の突出部１２５が本体部１１０から下方に伸びるように設けられる。第１の突出部１２５は、蓋部材１００を下方から見たときに、図６に示すように、ＸＹ平面において、略四角形形状をなすと共に２枚羽の風車のように導入流路１０１、１０２に通じる穿孔１０９、１１３に接続する領域だけ四角形形状の外周から突出した形状をなしている。ここで、第１の突出部１２５と、後述する細胞捕捉金属フィルタ３０との接触面の幅は、狭すぎると十分な平面が得られず、一方、幅が広すぎると面圧が低くなりすぎて液封止の効果が得られない。したがって、第１の突出部１２５の幅は０．１ｍｍ〜２ｍｍが好ましく、０．５ｍｍ〜１ｍｍがより好ましい。また、第１の突出部１２５の高さは、高いと細胞捕捉金属フィルタ３０を挟み込む時の圧力を高くすることができ、液の滲出防止効果がより高くなる。ただし、この壁が高過ぎると、細胞捕捉デバイス１の全体の厚さが増し、細胞捕捉デバイスの観察操作に支障を生じる恐れがあるため、０．０５ｍｍ〜１ｍｍが好ましく、０．１ｍｍ〜０．８ｍｍがより好ましい。

また、第１の突出部１２５と離間して設けられ第１の突出部１２５の周縁を囲むように四角形形状の凸部からなる第１の嵌合部１３０が形成されている。第１の嵌合部１３０のＸ軸方向又はＹ軸方向の一辺の長さとしては、蓋部材１００の強度及び細胞捕捉金属フィルタ３０の嵌合性の観点から、８ｍｍ〜３０ｍｍが好ましく、１０ｍｍ〜２５ｍｍがより好ましく、１５ｍｍ〜２０ｍｍが更に好ましい。また、第１の嵌合部１３０の各辺を構成する凸部の幅は、１ｍｍ〜５ｍｍが好ましく、１ｍｍ〜３ｍｍがより好ましく、１．５ｍｍ〜２ｍｍが更に好ましい。なお、図７に示すように第１の嵌合部１３０の高さは第１の突出部１２５よりも高い。更に、本体部１１０の外縁のうちＹ軸方向に沿って延びる側に対してのみ、下方（図６において上方）に突出する位置合わせ壁１３５が流路部１０５、１０６と接続するように設けられている。これは、細胞捕捉デバイス１を組み立てる際に蓋部材１００と収納部材２００との位置合わせ及び方向合わせを行うために用いられる。

図５に示すように、略正方形状をなす本体部１１０において、組み立てた際に上面となる面の四辺の周縁部には、それぞれ端部（角部）付近を始点としそれぞれの周縁部に沿って、平面視反時計回りとなる向きに延びる蓋部材側ガイド部１５１（１５１Ａ〜１５１Ｄ）が設けられている。蓋部材側ガイド部１５１は、蓋部材１００の上方に向って突出する突起であり、これに後述する固定部材６０の爪が係合することにより固定部材６０がスライドする方向を規定するものである。四つの周縁部のうち、側縁に流路部１０５、１０６が取り付けられている周縁部においては、流路部１０５、１０６により分断されている周縁部のうち、距離が長い側に蓋部材側ガイド部１５１Ａ、１５１Ｂがそれぞれ設けられている。すなわち、蓋部材側ガイド部１５１Ａ及び蓋部材側ガイド部１５１Ｂは、平面視において本体部１１０の中心に関して対角となる位置に設けられている。一方、流路部１０５、１０６が取り付けられていない残りの周縁部においては、本体部１１０をＹ軸方向から見たときに、流路部１０５、１０６のうち手前側に位置する流路部が取り付けられている側に蓋部材側ガイド部１５１Ｃ、１５１Ｄがそれぞれ設けられている。すなわち、蓋部材側ガイド部１５１Ｃ及び蓋部材側ガイド部１５１Ｄは、平面視において本体部１１０の中心に関して対角となる位置に設けられている。なお、図５に示すように、蓋部材側ガイド部１５１Ａ〜１５１Ｄの始点と本体部１１０の上面との段差部分は、斜めに面取りされている。

蓋部材側ガイド部１５１（１５１Ａ〜１５１Ｄ）は、本体部１１０の各周縁部において本体部１１０の端部付近を始点として略中央部まで延びており、略中央部からは、蓋部材側ストッパ１５２（１５２Ａ〜１５２Ｄ）が連設され、引き続き周縁部に沿って延びている。蓋部材側ストッパ１５２Ａ〜１５２Ｄは、蓋部材側ガイド部１５１Ａ〜１５１Ｄよりも高い高さを有する突起であり、後述する固定部材６０が蓋部材側ガイド部１５１Ａ〜１５１Ｄに沿ってスライドする限界位置を規定するものである。蓋部材側ストッパ１５２Ａ〜１５２Ｄは、各周縁部における蓋部材側ガイド部１５１Ａ〜１５１Ｄの始点とは反対側の端部付近にまで延びている。流路部１０５、１０６が取り付けられている周縁部における蓋部材側ストッパ１５２Ａ、１５２Ｂは、一部が流路部１０５、１０６の付け根部分と一体化している。

なお、蓋部材側ガイド部１５１Ａ、１５１Ｂ及び蓋部材側ストッパ１５２Ａ、１５２ＢのＸ軸方向の幅は、蓋部材側ガイド部１５１Ｃ、１５１Ｄ及び蓋部材側ストッパ１５２Ｃ、１５２ＤのＹ軸方向の幅よりも大きくされている。この理由については後述する。

（収納部材）
次に、収納部材２００について説明する。図８〜１０は、収納部材２００の構成を説明する図であり、図８は、収納部材２００についての上方からの概略斜視図であり、図９は、収納部材２００についての下方からの概略斜視図であり、図１０は、図８のX−X断面の矢視図である。

図８〜１０に示すように、収納部材２００は、略正方形状の板部材からなる本体部２１０に対して、本体部２１０の側縁からＹ軸方向に沿って外部に突出する流路部２０５が取り付けられる。流路部２０５は、本体部２１０の側縁の中央に取り付けられる。

収納部材２００には、細胞捕捉金属フィルタ３０を通過した被検液が通過する凹型の空隙からなる排出領域２２０が設けられる。排出領域２２０は、細胞捕捉デバイス１を上方から見たときに、収納部材２００に取り付けられた細胞捕捉金属フィルタ３０のうち貫通孔が設けられる領域を含むように、細胞捕捉金属フィルタ３０が取り付けられる領域の下方に設けられる。排出領域２２０は、接続用の穿孔２０９を介して排出流路２０１に接続され、排出流路２０１を経て被検液を外部に排出する空間となる。

ここで、図１０を用いて、排出流路２０１について更に説明する。流路部２０５には、その内部において、Ｙ軸に沿って延びる排出流路２０１が設けられる。排出流路２０１には、排出口２０１Ａと、排出口２０１Ａから内部に伸びる流路２０１Ｂと、流路２０１Ｂに接続して流路２０１Ｂよりも口径が小さい流路２０１Ｃとを含んで構成される。更に、流路２０１Ｃ上には、流路部２０１を垂直方向（Ｚ軸方向）に貫通する穿孔２０７が設けられる。この穿孔２０７には、流路開閉弁として機能する穿孔が設けられたバルブが挿通される。これにより、流路２０１Ｃの開閉がこのバルブにより行われる。更に、排出領域２２０と排出流路２０１とを接続する穿孔２０９が排出流路２０１の本体部２１０側の端部に排出流路２０１と連通するように設けられる。これにより、細胞捕捉金属フィルタ３０を経て排出領域２２０に到達した液（被検液又は処理液）は、穿孔２０９、流路２０１Ｃ及び流路２０１Ｂを経て、排出口２０１Ａへ送られる。

排出領域２２０の周縁には、細胞捕捉金属フィルタ３０のＸＹ平面における高さばらつきを抑制し、平坦化するための第２の突出部２２５が本体部２１０から上方に伸びるように設けられる。第２の突出部２２５は、収納部材２００を上方から見たときに、図８に示すように、ＸＹ平面において、略四角形形状をなすと共に２枚羽の風車のような形状をなしていて、これは、蓋部材１００の第１の突出部１２５と対応する形状とされている。ここで、第２の突出部２２５と、後述する細胞捕捉金属フィルタ３０との接触面の幅は、狭すぎると十分な平面が得られず、一方、幅が広すぎると面圧が低くなりすぎて液封止の効果が得られない。したがって、第２の突出部２２５の幅は０．１ｍｍ〜３ｍｍが好ましく、０．５ｍｍ〜２ｍｍがより好ましい。また、第２の突出部２２５の高さは、高いと細胞捕捉金属フィルタ３０を挟み込む時の圧力を高くすることができ、液の滲出防止効果がより高くなる。ただし、この壁が高過ぎると、細胞捕捉デバイス１の全体の厚さが増し、細胞捕捉デバイスの観察操作に支障を生じる恐れがあるため、０．０５ｍｍ〜１ｍｍが好ましく、０．１ｍｍ〜０．８ｍｍがより好ましい。

また、第２の突出部２２５と離間して設けられ第２の突出部２２５の周縁を囲むように四角形形状の凹部からなる第２の嵌合部２３０が形成されている。この第２の嵌合部２３０は、蓋部材１００の第１の嵌合部１３０と対応するように設けられている。第２の嵌合部２３０のＸ軸方向又はＹ軸方向の一辺の長さとしては、第１の嵌合部１３０の収容性の観点から、第１の嵌合部１３０よりも広めであることが求められ、９ｍｍ〜３１ｍｍが好ましく、１６ｍｍ〜２６ｍｍがより好ましく、１６ｍｍ〜２１ｍｍが更に好ましい。また、第２の嵌合部２３０の各辺を構成する凹部の幅は、１．１ｍｍ〜６ｍｍが好ましく、１．１ｍｍ〜４ｍｍがより好ましく、１．６ｍｍ〜３ｍｍが更に好ましい。なお、本実施形態では、第１の嵌合部１３０が凸部で第２の嵌合部２３０が凹部である例を説明しているが、これらが逆の構成であってもよい。

収納部材２００の第２の嵌合部２３０及び蓋部材１００の第１の嵌合部１３０との寸法の差は、細胞捕捉金属フィルタ３０の厚さを考慮して定めることが好ましい。第２の嵌合部２３０の内側と第１の嵌合部１３０の内側との差（部材中心からみて嵌合部の内側の差）は０．００５ｍｍ〜０．３ｍｍが好ましく、０．００５ｍｍ〜０．２ｍｍがより好ましく、０．００５ｍｍ〜０．１ｍｍが更に好ましい。第２の嵌合部２３０の内側と第１の嵌合部１３０の内側との差が細胞捕捉金属フィルタ３０の厚さよりも小さい場合は、細胞捕捉金属フィルタ３０の厚さよりも隙間がなくなるが、蓋部材と収納部材がプラスチック製であると、比較的弾性があり、細胞捕捉金属フィルタ３０を嵌合したときの固定力が増すので好ましい。

また、収納部材２００には、第２の嵌合部２３０とは別に本体部２１０の外縁のうち排出流路２０１が設けられる外縁の延びる方向（Ｘ軸方向）と直交する方向、すなわち、Ｙ軸方向に沿って延びる側に対してのみ、位置合わせ溝２３５が設けられている。これは、細胞捕捉デバイス１を組み立てる際に蓋部材１００と収納部材２００との位置合わせ及び方向合わせを行うために用いられる。また、本体部２１０の外縁のうち排出流路２０１が設けられる外縁が延びる方向と同じ方向（Ｘ軸方向）には、上方に向けて延びて蓋部材１００の側部を覆う覆い部２５０が設けられている。

図９に示すように、略正方形状をなす本体部２１０において、組み立てた際に下面（表に露出する面）となる面の四辺の周縁部には、それぞれ端部（角部）付近を始点としそれぞれの周縁部に沿って延びる収納部材側ガイド部２５１（２５１Ａ〜２５１Ｄ）が設けられている。収納部材側ガイド部２５１Ａ〜２５１Ｄは、収納部材２００の下方（図９において上方）に向って突出する突起であり、これに後述する固定部材６０の爪が係合することにより固定部材６０がスライドする方向を規定するものである。各収納部材側ガイド部２５１Ａ〜２５１Ｄは、収納部材２００と蓋部材１００とを組み立てた際に蓋部材側ガイド部１５１Ａ〜１５１Ｄのそれぞれと筐体１０の厚さ方向において対応する位置に設けられている。例えば、流路部２０５が取り付けられている周縁部においては、図９における本体部２１０を流路部２０５を手前としてＹ軸方向から見たときに、図示右側となる側に収納部材側ガイド部２５１Ｃが設けられている。なお、図９に示すように、収納部材側ガイド部２５１Ａ〜２５１Ｄの始点と本体部２１０の上面との段差部分は、斜めに面取りされている。

収納部材側ガイド部２５１（２５１Ａ〜２５１Ｄ）は、本体部２１０の各周縁部において本体部２１０の端部付近を始点として略中央部まで延びており、略中央部からは、収納部材側ストッパ２５２（２５２Ａ〜２５２Ｄ）が連設され、引き続き周縁部に沿って延びている。収納部材側ストッパ２５２Ａ〜２５２Ｄは、収納部材側ガイド部２５１Ａ〜２５１Ｄよりも高い高さを有する突起であり、後述する固定部材６０が収納部材側ガイド部２５１Ａ〜２５１Ｄに沿ってスライドする限界位置を規定すると共に、細胞捕捉デバイス１の使用時及び観察時には細胞捕捉デバイス１の脚として機能するものである（図１０参照）。収納部材側ストッパ２５２Ａ〜２５２Ｄは、各周縁部における収納部材側ストッパ２５２Ａ〜２５２Ｄの始点とは反対側の端部付近にまで延びている。流路部２０５が取り付けられている周縁部における収納部材側ストッパ２５２Ｃは、一部が流路部２０５の付け根部分と一体化している。

なお、上記の蓋部材１００及び収納部材２００がアクリル樹脂等のプラスチック製である場合には射出成形によって製造することができる。ただし、蓋部材１００及び収納部材２００の製造方法は上記に限定されない。

（固定部材）
次に、固定部材６０について説明する。図１１（Ａ）は固定部材６０の斜視図であり、図１１（Ｂ）は固定部材６０の正面図である。固定部材６０は、横断面が略四角形の筒状体の側部の一面が開放された形状（すなわち、横断面Ｕ字形）をなす一体成形された部材であり、蓋部材１００及び収納部材２００を、これらが重ね合わされた方向（細胞捕捉金属フィルタ３０と交差する方向）の両側から押圧するように挟んで固定するものである。

固定部材６０は、Ｕ字形の内面部分且つＵ字形の先端部分において、蓋部材１００及び収納部材２００を挟むべき方向に互いに対向して突出する爪６１、６１を有しており、この爪６１、６１は、上記「略四角形の筒状体」の高さに相当する方向に延びている。すなわち、爪６１、６１は、固定部材６０が筐体１０の周縁部に配置されるにあたって蓋部材１００及び収納部材２００の周縁部に沿う方向に延びており、蓋部材側ガイド部１５１及び収納部材側ガイド部２５１に係合することにより蓋部材側ガイド部１５１及び収納部材側ガイド部２５１に沿ってスライド可能となる。ここで、固定部材６０のスライド方向の長さは、より均一に押圧させる観点から、３ｍｍ〜２０ｍｍが好ましく、４ｍｍ〜１５ｍｍがより好ましく、５ｍｍ〜１０ｍｍが更に好ましい。当該長さは、当該固定部材６０を装着する筐体１０の周縁部の一辺の長さに対する割合としては、０．２〜０．４が好ましい。

筐体１０の周縁部を均一な荷重で押圧して固定する観点からは、用いる複数の固定部材６０としては同質のものを用いることが好ましい。例えば、同形状且つ同サイズのもの、又は押圧力のばらつきの小さいものを用いることが好ましい。

固定部材６０の材料としては、適度な弾性（ヤング率として２ＧＰａ〜５ＧＰａ）を有し、引張り強度にも優れ（５００ｋｇ／ｃｍ^２以上）、且つ伸び率が１０％〜１００％の範囲の材質が好ましく、ポリカーボネートまたはポリアセタール樹脂が好ましい。

（細胞捕捉金属フィルタ）
次に蓋部材１００と収納部材２００との間に設けられる細胞捕捉金属フィルタ３０について図１２を用いて説明する。

細胞捕捉金属フィルタ３０は、細胞捕捉金属フィルタシート３００を切離線Ｌに沿って折り曲げることで細胞捕捉金属フィルタシート３００から分離させて得られる。図１２に示すように、細胞捕捉金属フィルタ３０は、略正方形状の金属シート３１の中央付近に、厚さ方向に複数の貫通孔３２が形成されているフィルタ領域３３が形成されたものである。貫通孔３２の形状は、長方形の角が面取りされた所謂角丸長方形である。図１２では、説明のために、細胞捕捉金属フィルタ３０の主面に沿ったＸＹ座標軸を記載している。細胞捕捉金属フィルタ３０では、複数の貫通孔３２の長辺がそれぞれＸ軸方向に沿って形成されている。

細胞捕捉金属フィルタ３０ではフィルタ領域３３の外側においてフィルタ領域３３を囲うように、細胞捕捉のための貫通孔３２が形成されていない外周領域３４が形成されている。

細胞捕捉金属フィルタ３０を形成する金属シート３１の材質は、金属が主成分である。ここで、主成分とは金属シート３１を形成する材料のうち最も割合の多い成分をいう。細胞捕捉金属フィルタ３０のシートの材質の主成分として金属を用いることによって、貫通孔３２のサイズのばらつきが少なく高い分離精度で細胞を分離、濃縮できる。また、金属はプラスチック等の他の材料と比べて剛直であるため、外部から力が加わってもそのサイズ又は形状が維持されやすい。このため、貫通孔３２の孔径よりも若干大きな血液成分（特に白血球）を変形させて通過させ、高精度の分離、濃縮が可能になると考えられる。白血球の中には分離、濃縮の対象となる細胞と同じ程度のサイズを有するものが存在し、サイズの違いだけでは対象の細胞のみを高濃度で区別できない場合がある。しかしながら、白血球は上記細胞よりも変形能が大きいため、吸引又は加圧等による外部の力により、白血球自身より小さな孔を通過することができ、上記細胞と白血球を分離、又は、上記細胞を濃縮することが可能になると考えられる。ここで、「濃縮」とは、被検液を細胞捕捉デバイスに通液する前後において、白血球の数に対する分離、濃縮の対象となる細胞の数の存在割合が高まることを意味する。

金属シート３１に用いられる金属の材質は、金、銀、銅、アルミニウム、タングステン、ニッケル、クロム及びこれらの金属の合金が例示できるが、これらに限定するものではない。また、金属は単体で用いてもよく、機能性を付与するために他の金属との合金又は金属の酸化物として用いてもよい。価格又は入手の容易さの観点から、ニッケル、銅、金及びこれらを主成分とする金属を用いることが好ましく、特にニッケルを主成分とする金属が用いられることが好ましい。また、金属シート３１がニッケルを主成分とする材料から形成される場合、ニッケルの表面に金めっきがされていることが好ましい。金めっきによって、細胞捕捉金属フィルタ３０の表面の酸化を防止できるため、細胞及び血球成分の細胞捕捉金属フィルタ３０に対する付着性が一様となり、データの再現性を高めることができる。

細胞捕捉金属フィルタ３０の厚さは、３μｍ〜１００μｍであることが好ましく、より好ましくは１０μｍ〜３０μｍである。膜厚を上記の範囲とした場合、細胞捕捉金属フィルタ３０の取り扱いが容易であり、精密加工にも適している。また、細胞捕捉金属フィルタ３０のフィルタ領域３３の平面の高低差は顕微鏡でフィルタ表面の端部と中央部の合計５箇所を観察したときの焦点距離の最大と最小の差にして１６μｍ以下であることが好ましい。

また細胞捕捉金属フィルタ３０のサイズの大きさは、細胞捕捉デバイス１の大きさに依存するが、細胞捕捉金属フィルタ３０のうち貫通孔３２が設けられて、被検液を通過させるフィルタ領域３３の大きさは、２５ｍｍ^２〜１０００ｍｍ^２が好ましい。また、フィルタ領域３３の大きさは、２５ｍｍ^２〜２２５ｍｍ^２がより好ましく、２５ｍｍ^２〜１００ｍｍ^２が更に好ましい。フィルタ領域３３のサイズが１０００ｍｍ^２以下である場合には、デッドスペースを減らすことができる。また、２５ｍｍ^２以上とすることで、処理時間を短縮することができる。

また、細胞捕捉金属フィルタ３０では、外周領域３４の外側の外縁部の四隅（各角）に、それぞれ切込部３５が形成されている。切込部３５は、略正方形状をなす細胞捕捉金属フィルタ３０の隣接する２辺によって挟まれる角部に設けられ、当該角部を挟む２辺からそれぞれ切り込んだ２つの切込辺３５Ａ、３５Ｂにより形成される。

四隅の切込部３５の大きさ及び形状は共通とされ、切込辺３５ＡはＹ軸に平行であり、切込辺３５Ａと交差する切込辺３５Ｂは、Ｘ軸に対して傾斜している。このため、切込辺３５Ａと切込辺３５Ｂとのなす角は直角ではない。そして切込部３５が設けられることで、切込部３５が形成されている領域から外側に、Ｘ軸に沿って延びる折り曲げ領域３７Ａと、Ｙ軸に沿って延びる折り曲げ領域３７Ｂとが形成される。折り曲げ領域３７Ａ、３７Ｂは、それぞれ、切込部３５が設けられたことで形成された折り曲げ線３８と、折り曲げ線３８と平行な金属シートの外縁部３９と、切込部３５の切込辺３５Ａ又は切込辺３５Ｂと、によって形成される。

ここで、折り曲げ領域３７にはそれぞれ、細胞捕捉金属フィルタ３０の略正方形の各辺の中央部分に、側面Ｔ側からフィルタ領域３３側へ凹んだ凹部Ｄを有している。そして、凹部Ｄにおける側面であって、接続部５が連続していた部分には、細胞捕捉金属フィルタ３０と接続部５とを分離した際に生じた凹凸Ｂが形成されている。

切込辺３５ＡはＹ軸に沿って延びていることから、切込辺３５Ａを含んで構成される折り曲げ領域３７Ａは、凹部Ｄの部分を無視した場合に略長方形状となる。一方、切込辺３５ＢはＸ軸に対して交差する方向に延びている。このため、Ｙ軸に沿って延びる外縁部３９及び折り曲げ線３８と、２つの切込辺３５Ｂと、を含んで構成される折り曲げ領域３７Ｂは、凹部Ｄの部分を無視した場合に略長方形状にならず、略台形状となる。この結果、細胞捕捉金属フィルタ３０の使用者は、折り曲げ領域３７の形状に基づいて、細胞捕捉金属フィルタ３０の特定の方向を認識することができる。すなわち、この切込辺３５Ａと、切込辺３５Ａの始点となる辺とのなす角、及び、切込辺３５Ｂと、切込辺３５Ｂの始点となる辺とのなす角、が互いに異なっている。この切込部３５が、細胞捕捉金属フィルタ３０におけるフィルタ領域３３の方向を識別するための識別部として機能する。

本実施形態に係る細胞捕捉金属フィルタ３０の場合、フィルタ領域３３における貫通孔３２の形状がＸ軸方向とＹ軸方向とで異なり、具体的には、貫通孔３２の長辺がＸ軸に沿って延びている。そこで、貫通孔３２の延在方向の端部に相当する折り曲げ領域３７Ｂが略台形状となるように切込部３５が加工されている。これにより、フィルタ領域３３の特定の方向（例えば、貫通孔３２の延在方向）を識別することができる。

細胞捕捉金属フィルタ３０に設けられる貫通孔３２の形状については、図１２に示すように、角丸長方形状（端部の角が丸められている長方形）とすることができる。この、角丸長方形状（以下、これと長方形状を総称して「略長方形状」とする）をなす貫通孔の場合、略長方形状の単孔の短辺側の長さの範囲はおおよそ５．０〜１５．０μｍとすることができる。一方、長辺側の長さは、細胞捕捉金属フィルタ３０の大きさに応じて適宜変更することができ、その範囲はおおよそ１０μｍ〜５ｍｍである。なお、細胞捕捉金属フィルタ３０に設けられる貫通孔３２の孔径は、捕獲対象とする細胞のサイズに応じて変更される。ここで、貫通孔の孔径は、それぞれの貫通孔３２を通過できる最も大きい球の直径をいう。例えば、図１２における貫通孔３２の孔径は、単孔の短辺の長さとすることができる。

なお、貫通孔３２の形状については、他の形状に変更することができる。貫通孔の形状についての変形例として代表的なものは、図１３で示すように、（Ａ）長方形、（Ｂ）角丸長方形（図１２のものとは角部の曲率が異なるもの）、（Ｃ）角丸長方形（長方形の短辺が円弧状となっている）等が挙げられる。なお、貫通孔の形状は図１３で示す例に限定されず、例えば、円形でもよいし、角丸長方形の単孔が連結した波形状としてもよいし、角丸長方形ではなく角が丸められていない長方形の単孔を複数個連結した形状の連結貫通孔としてもよい。

また、細胞捕捉金属フィルタ３０における貫通孔の開口率は５％〜５０％であることが好ましく、５％〜４０％がより好ましく、５％〜３０％がさらに好ましい。開口率とは細胞捕捉金属フィルタ３０においてフィルタとして機能する領域の面積に対する貫通孔が占める面積の割合であり、分光光度計等を用いて計測して算出することができる。ここで、フィルタとして機能する領域の面積は、複数の貫通孔３２と当接すると共に貫通孔を全て含むように形成された矩形のうち最も小さい領域を指す。開口率は、目詰まり防止の観点から大きいほど好ましいが、５０％を超えるとフィルタ領域３３の強度が低下する可能性がある。また、５％よりも小さいと目詰まりが発生しやすくなり、フィルタ領域３３としての性能が低下する場合がある。

（細胞捕捉デバイスの組み立て方法）
次に、図１４〜図１９を用いて、細胞捕捉デバイス１の組み立て方法について説明する。図１４は細胞捕捉デバイス１の構成を説明する分解斜視図であり、図１５は蓋部材１００、細胞捕捉金属フィルタ３０、シール部材（ガスケット）４０及び収納部材２００を組み立てる前の断面を模式的に示し、図４のXV−XV断面の矢視図の一部に相当する図であり、図１６は図１５のうちの左側部分のみ拡大した図であり、図１７は蓋部材１００、細胞捕捉金属フィルタ３０、シール部材４０及び収納部材２００を組み立てた後の図であって図１５に対応する図であり、図１８は図１７のうちの左側部分のみ拡大した図であって図１６に対応する図であり、図１９は固定部材の装着方法を示す図である。

細胞捕捉デバイス１の組み立て方法の概略としては、図１４〜図１６に示すように、収納部材２００、シール部材４０Ｂ、細胞捕捉金属フィルタ３０、シール部材４０Ａ及び蓋部材１００をこの順に重ね合わせた後、図１７及び図１８に示すように、収納部材２００と蓋部材１００とを嵌合させる。そして、蓋部材１００と収納部材２００とが嵌合してなる筐体１０に固定部材６０を装着することにより、蓋部材１００と収納部材２００とが互いに固定されると共に、細胞捕捉デバイス１の組み立てが完了する。

まず、図１４に示すように、Ｚ軸に沿って上方から下方に向かって蓋部材１００、蓋部材側シール部材４０Ａ、細胞捕捉金属フィルタ３０、収納部材側シール部材４０Ｂ、収納部材２００の順に重ねることで、細胞捕捉デバイス１が組み立てられる。このとき、蓋部材１００と収納部材２００とが一対の位置合わせ壁１３５と位置合わせ溝２３５とが対向するような向きとすることで、蓋部材１００の流路部１０５、１０６はＸ軸方向に延びる向きとされ、収納部材２００の流路部２０５はＹ軸方向に延びる向きとされる。これにより、流路部１０５、１０６、２０５が互いに異なる方向に突出する構成となる。

なお、シール部材４０（４０Ａ、４０Ｂ）は、蓋部材１００の第１の突出部１２５と細胞捕捉金属フィルタ３０との間、及び、収納部材２００の第２の突出部２２５と細胞捕捉金属フィルタ３０との間に挟まれる部材である。シール部材４０は、第１の突出部１２５及び第２の突出部２２５が存在する全ての領域に配置され、且つ、フィルタ領域３３を覆わないように、中央がフィルタ領域３３の形状に打ち抜かれた環形状とされている。シール部材４０の材質としては、弾性を有し筐体１０の液密性を保つことができるものであれば特に制限されず、例えばシリコーンゴムが用いられる。また、シール部材４０の厚さは０．０５μｍ〜０．３μｍが好ましい。

そして、これらを組み立てた後に流路開閉弁として機能するバルブ４０１、４０２、４０３がそれぞれ穿孔１０７、１１１、２０７へ挿入される。これらのバルブ４０１、４０２、４０３には、それぞれ水平方向に伸びる穿孔である流路孔４０１Ａ、４０２Ａ、４０３Ａが設けられ、穿孔１０７、１１１、２０７にバルブを挿入した際に、バルブの流路孔がそれぞれ導入流路１０１、１０２及び排出流路２０１に対応する。そして、バルブを回転させることで流路孔と導入流路（又は排出流路）の開閉を切り替えることができる。また、使用時には、ストッパ４１１、４１２、４１３がそれぞれ穿孔１０９、１１３、２０９へ挿入されることで、液の漏出を防ぎ、液の導入及び排出を適切な方向に導く。

ここで、図１５〜図１８を用いて、細胞捕捉デバイス１を組み立てる際の内部の構成について説明する。

まず、図１５及び図１６に示すように、収納部材側シール部材４０Ｂを、収納部材２００の第２の突出部２２５の上方となる位置に配置する。

次に、細胞捕捉金属フィルタ３０を収納部材２００の排出領域２２０、第２の突出部２２５、及び第２の嵌合部２３０の上方となる位置に配置する。

また、このとき、細胞捕捉金属フィルタ３０については、切込部３５の形状に基づいて、フィルタ領域３３の貫通孔３２の長手方向がＸ軸に沿って延びるように配置される。このように、フィルタ領域３３の貫通孔３２が非常に小さく肉眼では貫通孔３２の延在方向が確認できなくても、識別部たる切込部３５の形状に基づいて、細胞捕捉金属フィルタ３０の載置方向を決定することで、載置方向の再現性を高めることができる。

このように位置合わせを行うことによって、細胞捕捉金属フィルタ３０を精度よく配置するだけでなく、細胞捕捉デバイス１を組み立てる際に、細胞捕捉金属フィルタ３０の貫通孔の向きを所定の向きに常に同じ向きに配置することを容易に行うことができ、細胞捕捉の再現性をより向上させることができる。

次に、蓋部材側シール部材４０Ａを細胞捕捉金属フィルタ３０の上方となる位置に配置する。そして、蓋部材１００を、第１の突出部１２５と第２の突出部２２５とが対応する位置に配置し、第１の嵌合部１３０と第２の嵌合部２３０とが対応する位置に配置し、これを上下方向に近接させる。

すると、図１７及び図１８に示すように、第１の突出部１２５と第２の突出部２２５がそれぞれ蓋部材側シール部材４０Ａ及び収納部材側シール部材４０Ｂを介して細胞捕捉金属フィルタ３０を挟む位置まで蓋部材１００と収納部材２００とを近接させることができる。この時点で、第１の嵌合部１３０と第２の嵌合部２３０とはその一部が嵌合した状態で止まる。このとき、細胞捕捉金属フィルタ３０は、第１の突出部１２５と第２の突出部２２５とによって挟み込まれることにより、支持されると共に、更に外側では第１の嵌合部１３０と第２の嵌合部２３０とに挟まれる。この結果、主に蓋部材１００の押し下げにより細胞捕捉金属フィルタ３０の折り曲げ領域３７が下方に折り曲げられる。そして、細胞捕捉金属フィルタ３０の内側の中心部から外側に向かって周囲から押し付けられるように挟み込まれることで、中央から周囲に向かって引っ張られる力がかかり、張力をかけた状態で細胞捕捉金属フィルタ３０が蓋部材１００と収納部材２００との間に嵌合される。これによって、フィルタ表面の高さばらつきが抑制され、細胞捕捉金属フィルタ３０の平坦性が優れるものとなる。

なお、細胞捕捉金属フィルタ３０を蓋部材１００及び収納部材２００により挟み込む際の力が不均一になると、歪みが生じて細胞捕捉金属フィルタ３０にしわが入る又はたるみが生じる恐れがある。したがって収納部材２００の第２の嵌合部２３０及び蓋部材１００の第１の嵌合部１３０は細胞捕捉金属フィルタ３０の外縁側全周に設け、細胞捕捉金属フィルタ３０を均一に挟み込むように嵌合することが好ましい。ただし、このとき第１の突出部１２５と第２の突出部２２５とで細胞捕捉金属フィルタ３０を挟むことによって、周方向にも若干の張力が作用してしわになることがある。これに対して、細胞捕捉金属フィルタ３０の四隅に設けられた切込部３５が、しわの逃げ部として機能する。

また、治具を用いて収納部材２００と細胞捕捉金属フィルタ３０との位置合わせをした後においては、蓋部材１００と収納部材２００を重ね合わせる前に治具は取り除いておく。即ち、細胞捕捉金属フィルタ３０は、収納部材２００に対して位置合わせはされたが、位置は固定されていない状態にある。このため、細胞捕捉金属フィルタ３０は筐体１０内部に最終的に固定されるまでは引っ張り力等に対して物理的な障害がなく位置変化に対応できるため、細胞捕捉金属フィルタ３０が蓋部材１００と収納部材２００との間に固定される際に、しわ等が一層発生しにくい。

次に、固定部材６０の装着方法について説明する。図１９に示すように、蓋部材側ガイド部１５１Ｃ及びこれに対応する収納部材側ガイド部２５１Ｃの始点に対して、固定部材６０Ｃを、Ｕ字形の開放部を筐体１０側に向けた状態でＸ軸方向から接近させて、爪６１、６１を蓋部材側ガイド部１５１Ｃ及び収納部材側ガイド部２５１Ｃにそれぞれ係合させる。そして、Ｘ軸方向に固定部材６０Ｃをスライドさせることで、固定部材６０Ｃの装着が完了する。このとき、固定部材６０Ｃの側部が蓋部材側ストッパ１５２Ｃの側部及び収納部材側ストッパ２５２Ｃの側部に当たるまで固定部材６０Ｃをスライドさせてもよいし、当てさせないで途中でスライドを止めてもよい。

同様に、固定部材６０Ｂを筐体１０に装着するには、蓋部材側ガイド部１５１Ｂ及びこれに対応する収納部材側ガイド部２５１Ｂの始点である端部に対して、固定部材６０Ｂを、Ｕ字形の開放部を筐体１０側に向けた状態でＹ軸方向から接近させて、爪６１、６１を蓋部材側ガイド部１５１Ｂ及び収納部材側ガイド部２５１Ｂに係合させる。そして、Ｙ軸方向に固定部材６０Ｂをスライドさせることで、固定部材６０Ｂの装着が完了する。なお、固定部材６０のＵ字形の内面間の距離に対して、固定部材６０が挟む部分の筐体１０の厚さ即ち蓋部材側ガイド部１５１及び収納部材側ガイド部２５１の外表面間の距離のほうが大きい。筐体１０のうち、固定部材６０のＵ字形の内面間の距離よりも厚い部分を挟み込むことによって、細胞捕捉金属フィルタ３０を平坦に張った状態で固定することができる。シール部材を挿入する場合には、蓋部材側ガイド部１５１及び収納部材側ガイド部２５１の外表面間の距離は、収納部材２００、シール部材４０Ｂ、細胞捕捉金属フィルタ３０、シール部材４０Ａ及び蓋部材１００をこの順に重ね合わせたときの距離となる。固定部材６０のＵ字形の内面間の距離と蓋部材側ガイド部１５１及び収納部材側ガイド部２５１の外表面間の距離の差は、０ｍｍ〜０．３ｍｍが好ましく、０ｍｍ〜０．２５ｍｍがより好ましく、０．００５ｍｍ〜０．２ｍｍが更に好ましい。

蓋部材側ガイド部１５１Ｂ及び１５１Ｃの幅に着目すると、収納部材２００の覆い部２５０の厚さの分だけ、蓋部材側ガイド部１５１ＢのＸ軸方向の幅が、蓋部材側ガイド部１５１ＣのＹ軸方向の幅よりも大きくなっている。上述のように蓋部材側ガイド部１５１Ｂ及び蓋部材側ストッパ１５２ＢのＸ軸方向の幅が、蓋部材側ガイド部１５１Ｃ及び蓋部材側ストッパ１５２ＣのＹ軸方向の幅よりも大きくされていることで、筐体１０の外縁と蓋部材側ガイド部１５１Ｂ、１５１Ｃの固定部材６０の爪６１が係合する部分との距離が等しくなっている。すなわち、同形状及び同サイズの固定部材６０を筐体１０の各周縁部に装着することが可能となっている。このように同形状及び同サイズの固定部材６０を用いることができることは、押圧力の揃った同質の固定部材６０を用いることができることを意味し、筐体１０の周縁部を均一な荷重で押圧して固定する観点から好ましい。

図１９では図示を省略しているが、固定部材６０Ａ、６０Ｄについても上記と同様にして筐体１０に装着することができる。このようにして四つの固定部材６０Ａ〜６０Ｄを装着することにより、細胞捕捉金属フィルタ３０を囲うように筐体１０の周縁部に固定部材６０を配置することができる。

（細胞捕捉システム）
次に、上記の細胞捕捉デバイス１を用いた細胞捕捉システムについて説明をする。図２０は細胞捕捉システムの構成を説明するブロック図である。図２０に示すように、細胞捕捉システム７００は、細胞捕捉デバイス１と、細胞捕捉デバイス１に含まれる２つの導入流路をそれぞれ介して供給される被検液と処理液とを貯留する被検液供給容器７１（被検液供給手段）及び処理液供給容器７２（処理液供給手段）と、被検液供給容器７１と細胞捕捉デバイス１とを接続する被検液供給流路７３（被検液供給手段）と、処理液供給容器７２と細胞捕捉デバイス１とを接続する処理液供給流路７４（処理液供給手段）と、細胞捕捉デバイス１に含まれる排出流路に接続されて排出流路から外部に排出された排液を流すための排液流路７５と排液流路７５に接続されて排液を回収する排液回収容器７６と、細胞捕捉デバイス１に対して供給する液を被検液及び処理液から選択し、流路切り替え等の制御を行う制御部７７（選択手段）と、を含んで構成される。

なお流路の切り替え等の制御は制御部７７により行われるが、流路の切り替えの具体的な方法としては、例えば、細胞捕捉デバイス１の流路開閉弁の開閉を行う等の方法がある。また、細胞捕捉システム７００における送液としては、例えば蠕動ポンプ等を流路に取り付けて行うことが好ましい。また処理液が１種類である例を示したが、複数の処理液供給容器７２を設けて、どの処理液を細胞捕捉デバイス１に対して供給するかについても制御部７７により制御する構成とすることもできる。

このように、細胞捕捉システム７００では、制御部７７により、細胞捕捉デバイス１に対して供給する液を選択し、その結果に基づいて、被検液又は処理液を細胞捕捉デバイス１に供給する構成を有することで、従来と比較して被検液中の細胞の捕捉作業を効率よく進めることが可能となる。また、上記細胞捕捉デバイスを用いた細胞捕捉システム７００では、細胞の捕捉作業後、細胞捕捉デバイスを分解することなくそのまま顕微鏡の観察台に載せて細胞の有無を作業性よく観察することが可能となる。

（作用及び効果）
本実施形態の細胞捕捉金属フィルタシート３００では、シート状の複数の細胞捕捉金属フィルタ３０が所定の間隙Ｓを介して配列されており、当該所定の間隙Ｓにより、細胞捕捉金属フィルタ３０の外形寸法が規定されている。そして、細胞捕捉金属フィルタ３０は、接続部との分離を可能とする切離線Ｌが、細胞捕捉金属フィルタ外縁部における側面Ｔ側からフィルタ領域側へ凹んだ凹部Ｄ内において設けられている。このため、細胞捕捉金属フィルタ３０と接続部５とを分離した場合には、切離しによるバリ等は当該凹部Ｄ内に発生するため、細胞捕捉金属フィルタ３０の外形寸法には影響しない。従って、細胞捕捉金属フィルタシート３００は、細胞捕捉金属フィルタ３０の量産に適し、且つ細胞捕捉金属フィルタ３０の寸法安定性にも優れている。

また、切離線Ｌが、所定の間隔を有して配置された複数の小孔３１０から構成されているため、細胞捕捉金属フィルタシート３００を切離線Ｌに沿って折り曲げることで細胞捕捉金属フィルタ３０と接続部５とを容易に分離することができる。

また、凹部Ｄの形状は、一次元方向に延びる切離線Ｌと、間隙Ｓのうち進入部５Ａの側面に沿って延び切離線Ｌの端部に連絡する部分とにより決められている。このように切離線Ｌが一次元方向に延びている場合、二次元方向に延びている場合と比べて、１回の折曲げで細胞捕捉金属フィルタ３０と接続部５とを分離することができる。

また、細胞捕捉金属フィルタ３０は略正方形状であり、外縁部３９のうち、略正方形を構成する隣接する２辺により挟まれる角部のそれぞれには、角部を挟む２辺からそれぞれ切り込んだ２つの切込辺により形成される切込部３５が設けられている。この切込部３５は、細胞捕捉金属フィルタ３０を細胞捕捉デバイス１に適用する場合に、細胞捕捉デバイス１の蓋部材１００と収納部材２００との嵌合時に細胞捕捉金属フィルタ３０にしわが寄らないための逃げとして機能する。

そして、切込部３５は、２つの切込辺と切込辺の始点となる辺とのなす角が互いに異なっているため、フィルタ領域３３に形成された貫通孔３２を肉眼で見ることができない場合でも、フィルタ領域３３の特定の方向を識別することができる。

本実施形態の細胞捕捉デバイス１では、寸法安定性に優れた細胞捕捉金属フィルタ３０を使用するため、捕捉性能の再現性が高い。

また、細胞捕捉デバイス１では、蓋部材１００の第１の突出部１２５と収納部材２００の第２の突出部２２５とにより細胞捕捉金属フィルタ３０を固定し、更にその外側の第１の嵌合部１３０と第２の嵌合部２３０とを嵌合させながら細胞捕捉金属フィルタ３０の外周領域３４を挟みこむ。これにより、細胞捕捉金属フィルタ３０の中心から外側に向けて引っ張られながら細胞捕捉金属フィルタ３０が蓋部材１００と収納部材２００との間に固定されるため、細胞捕捉金属フィルタ３０にしわ等が発生せず、内部のフィルタ領域３３を通過する被検液に含まれる細胞を好適に捕捉することができる。更に、外周領域３４において細胞捕捉金属フィルタ３０が第１の突出部１２５及び第２の突出部２２５によって両側から挟み込まれるため、細胞捕捉デバイス１の内部に液（被検液又は処理液）を導入した場合に、液の流路は外部から遮蔽されると共に細胞捕捉金属フィルタ３０等を伝ってデバイス内での液の拡散を防ぐことができ、外側への液の滲出を防止することができ、フィルタ領域３３にて被検液中の細胞を捕捉し、捕捉した細胞をデバイスを解体することなく簡便に且つ精度よく観察することが可能となる。また、第１の突出部１２５及び第２の突出部２２５によって、細胞捕捉金属フィルタ３０が嵌合して固定されるため、細胞捕捉金属フィルタ３０表面の高さのばらつきを低減した状態で固定することが可能となるので、細胞の顕微鏡観察の際の作業性が向上する。

以上、本発明の実施形態について説明したが、本発明は上記実施形態に限定されず、種々の変更を行うことができる。以下では上記実施形態の変形例について説明する。

（細胞捕捉金属フィルタシートの変形例）
図２１は、細胞捕捉金属フィルタシートの変形例の平面図である。細胞捕捉金属フィルタシート３００Ｂは、細胞捕捉金属フィルタシート３００とは異なり、凹部Ｄが略正方形状の細胞捕捉金属フィルタ３０Ｂの各辺の中央付近に設けられているのではなく、細胞捕捉金属フィルタ３０Ｂの４つの角部に設けられている。そして、細胞捕捉金属フィルタ３０Ｂの角部が集合している部分に接続部５Ｂを有し、接続部５Ｂが、細胞捕捉金属フィルタ３０の凹部Ｄに進入する進入部を有して複数の細胞捕捉金属フィルタ３０Ｂを互いに接続している。

細胞捕捉金属フィルタシート３００Ｂを切離線Ｌに沿って折り曲げ、細胞捕捉金属フィルタ３０Ｂと接続部５Ｂとを切り離した場合、切離しによるバリ等は当該凹部内に発生するため、細胞捕捉金属フィルタ３０Ｂの外形寸法には影響しない。従って、細胞捕捉金属フィルタシート３００Ｂは、細胞捕捉金属フィルタ３０Ｂの量産に適し、且つ細胞捕捉金属フィルタ３０Ｂの寸法安定性にも優れている。

（細胞捕捉デバイスの変形例）
次に、細胞捕捉デバイス１の変形例について説明する。例えば、上記実施形態では、細胞捕捉デバイスとして、固定部材６０により支持する構成について説明したが、これに限定されず、例えば、蓋部材１００と収納部材２００とを溶着により固定する構成とすることもできる。

また、蓋部材１００と収納部材２００とが重なり合う部分についても変更することができる。例えば、図１６、図１８等に示されているような第１の突出部１２５、第２の突出部２２５、第１の嵌合部１３０及び第２の嵌合部２３０を設けなくてもよい。この場合、これらに代えて、図２２に示すように、蓋部材１００及び収納部材２００のいずれも、重なり合う部分を平坦な形状として、細胞捕捉金属フィルタ３０を支持する態様としてもよい。なお、図２２に示した態様ではガスケットを用いていないが、ガスケットを用いた態様とすると、液密性が優れるのでより好ましい。その際には、蓋部材１００及び収納部材２００にそれぞれ図１５に示すような第１の突出部及び第２の突出部を設けると、液密性がより優れるので更に好ましい。

また、図２３に示すように、細胞捕捉デバイス１において第２の嵌合部２３０が形成されている部分を、細胞捕捉金属フィルタ３０との交差方向に深さをもつ溝部２３０Ａとして、これに収容可能な形状である環状の支持部材７０を収容した態様としてもよい。ここでは、図１８に示す細胞捕捉デバイス１と比べて、第１の嵌合部１３０の長さは、支持部材７０の高さが占める分だけ短くされている。そして、収納部材２００に収容された支持部材７０が、フィルタ領域３３より外周側となる位置（外周領域３４）で細胞捕捉金属フィルタ３０を収納部材２００の溝部２３０Ａ側に押圧することで、細胞捕捉金属フィルタ３０が支持される。

この場合、溝部２３０ＡのＸ軸方向又はＹ軸方向の寸法（溝の幅）としては、第１の嵌合部１３０及び支持部材７０が収容される収容性の観点から、１．１ｍｍ〜６ｍｍが好ましく、１．１ｍｍ〜４ｍｍがより好ましく、１．６ｍｍ〜３ｍｍが更に好ましい。また、支持部材７０のＸ軸方向又はＹ軸方向の寸法（一辺を構成する部分の幅）としては、溝部２３０Ａに収容可能な寸法であればよいが、支持部材７０と第１の嵌合部１３０との弾性を利用した反発力によって固定する観点から、支持部材７０と溝部２３０Ａとが同寸、又は、支持部材７０の方が僅かに溝部２３０Ａよりも大きいことが好ましい。具体的には、支持部材７０と溝部２３０Ａとの寸法差が０ｍｍ〜０．２０ｍｍであることが好ましく、０ｍｍ〜０．１５ｍｍであることがより好ましく、０ｍｍ〜０．１０ｍｍであることが更に好ましい。また、支持部材７０の厚さ（溝部２３０Ａの深さ方向の長さ）は、０．５ｍｍ〜２．０ｍｍであることが好ましく、１．０ｍｍ〜１．５ｍｍであることがより好ましい。

上記の態様では、細胞捕捉金属フィルタ３０の支持が蓋部材１００と収納部材２００との嵌合によらず、蓋部材１００が開放されても細胞捕捉金属フィルタ３０は依然として支持部材７０と溝部２３０Ａとの間に挟まれた状態を維持するので、筐体１０の解体時に細胞捕捉金属フィルタ３０が動くことが一層抑制され、細胞捕捉金属フィルタ３０に捕捉された細胞が飛び散るおそれが一層小さい。なお、細胞捕捉デバイス１の第２の嵌合部２３０は、第２の突出部２２５の周縁を囲むように四角形形状（すなわち環状）とされているが、図２３に示す変形例の溝部２３０Ａは、必ずしも連続した環状に形成されている必要はなく、細胞捕捉金属フィルタ３０の折り曲げ領域３７の形状に応じて、例えば環の途中が分断された形状に形成されていてもよい。また、支持部材７０は、弾性を有する部材からなることが好ましい。具体的には、支持部材７０は、ヤング率が０．２ＧＰａ〜２ＧＰａの弾性を有し、且つ伸び率が５０％〜１００％である材料を用いることが好ましく、そのような材料としては、ポリエチレン又はポリプロピレンが好ましい。

また、支持部材７０を用いる上記態様では、第１の嵌合部１３０を完全になくした態様としてもよく、更に、図２４に示すように第１の突出部１２５及び第２の突出部２２５もなくした態様とすることもできる。なお、図２４に示した態様ではガスケットを用いていないが、ガスケットを用いた態様としてもよい。ガスケットを用いた態様とすると、液密性が優れるのでより好ましい。その際には、蓋部材１００及び収納部材２００にそれぞれ図１５に示すような第１の突出部及び第２の突出部を設けると、液密性がより優れるので更に好ましい。また、上記態様では溝部２３０Ａが収納部材２００に設けられている例を用いて説明したが、溝部２３０Ａは蓋部材１００に設けられていてもよい。

１…細胞捕捉デバイス、５…接続部、５Ａ…進入部、１０…筐体、３０…細胞捕捉金属フィルタ、３３…フィルタ領域、３５…切込部、３９…外縁部、４０…シール部材（ガスケット）、６０…固定部材、７０…支持部材、１００…蓋部材、１０１、１０２…導入流路、１２０…導入領域、１２５…第１の突出部、１３０…第１の嵌合部、１５１…蓋部材側ガイド部、２００…収納部材、２０１…排出流路、２２０…排出領域、２２５…第２の突出部、２３０…第２の嵌合部、２３０Ａ…溝部、２５１…収納部材側ガイド部、３００…細胞捕捉金属フィルタシート、７００…細胞捕捉システム、Ｂ…凹凸、Ｄ…凹部、Ｌ…切離線、Ｓ…間隙、Ｔ…側面。

Claims (9)

1. 複数の貫通孔が厚さ方向に形成されたフィルタ領域をその内側に有すると共に、外縁部において側面側から前記フィルタ領域側へ凹んだ凹部を有し、前記厚さ方向に垂直な面に沿って所定の間隙を介して配列されたシート状の複数の細胞捕捉金属フィルタと、
   前記凹部内に進入する進入部を有し、前記進入部で前記細胞捕捉金属フィルタと連続することにより複数の前記細胞捕捉金属フィルタ同士を接続している接続部と、を備え、
   前記凹部内における前記細胞捕捉金属フィルタと前記進入部との境界には、前記細胞捕捉金属フィルタと前記接続部との分離を可能とする切離線が設けられている、細胞捕捉金属フィルタシート。
2. 前記切離線は、所定の間隔を有して配置された複数の小孔から構成されている、請求項１記載の細胞捕捉金属フィルタシート。
3. 前記凹部の形状は、一次元方向に延びる前記切離線と、前記間隙のうち前記進入部の側面に沿って延び前記切離線の端部に連絡する部分とにより決められている、請求項１又は２記載の細胞捕捉金属フィルタシート。
4. 前記細胞捕捉金属フィルタは略四角形状であり、
   前記外縁部のうち、前記略四角形を構成する隣接する２辺により挟まれる角部のそれぞれには、前記角部を挟む２辺からそれぞれ切り込んだ２つの切込辺により形成される切込部が設けられている、請求項１〜３のいずれか一項記載の細胞捕捉金属フィルタシート。
5. 複数の前記切込部のうち少なくとも１つは、２つの前記切込辺と前記切込辺の始点となる辺とのなす角が互いに異なる、請求項４記載の細胞捕捉金属フィルタシート。
6. 請求項１〜５のいずれか一項記載の細胞捕捉金属フィルタシートから、前記切離線に沿って分離することで得られ、
   前記凹部内における側面に、前記切離線の構造に由来し所定の間隔を有して配置された凹凸を有する細胞捕捉金属フィルタ。
7. 被検液中の細胞を捕捉する細胞捕捉デバイスであって、
   前記被検液を内部へ導入するための導入流路を有する蓋部材と、前記被検液を外部へ排出するための排出流路を有する収納部材と、を有する筐体と、
   前記被検液が前記貫通孔を通過するように前記導入流路と前記排出流路との間の前記筐体の内部の流路上に設けられ、前記蓋部材及び前記収納部材との間において前記蓋部材と前記収納部材とにより支持される請求項６記載の細胞捕捉金属フィルタと、を備える、細胞捕捉デバイス。
8. 前記蓋部材は、
   組み立てた際に前記フィルタ領域よりも外側であって前記細胞捕捉金属フィルタの前記外縁部より内側となる位置に設けられて、前記フィルタが取り付けられる側の面において外方に突出する第１の突出部と、
   前記第１の突出部よりも外側で離間した位置であって組み立てた際に前記細胞捕捉金属フィルタの少なくとも一部が重なる位置に設けられて、前記収納部材と嵌合する第１の嵌合部と、
   を備え、
   前記収納部材は、
   組み立てた際に前記第１の突出部と対応する位置に設けられて、前記第１の突出部と対応する位置に配置して突出する第２の突出部と、
   組み立てた際に前記蓋部材と嵌合する第２の嵌合部と、
   を備え、
   前記第１の嵌合部及び前記第２の嵌合部のうちのいずれか一方は凸形状をなすと共に他方は凹形状をなし、
   組み立てた際には、前記第１の突出部及び前記第２の突出部が前記細胞捕捉金属フィルタを挟んで対応する位置に配置することで前記筐体の内部の前記流路を形成すると共に、前記第１の嵌合部と前記第２の嵌合部とが前記フィルタ領域より外周側で前記細胞捕捉金属フィルタを嵌合して固定する、請求項７記載の細胞捕捉デバイス。
9. 請求項１〜５のいずれか一項記載の細胞捕捉金属フィルタシートを製造するための製造方法であって、
   金属箔上にフォトレジストをラミネートする工程と、
   前記フォトレジストの上に、複数の透光部によってそれぞれ形成された複数の第一透光領域と、前記複数の第一透光領域をそれぞれ区画するように透光部が形成された複数の第二透光領域と、前記複数の第二透光領域の間を連絡するように透光部が形成された複数の第三透光領域と、を有するフォトマスクを重ねて露光する工程と、
   現像して前記フォトレジストの未硬化部を除去してフォトレジストパターンを形成する工程と、
   前記フォトレジストパターン間を金属めっきして前記フォトレジストパターンの高さより低い金属めっきパターンを形成する工程と、
   前記金属箔を化学的溶解によって除去して、前記金属めっきパターンと前記フォトレジストパターンからなる構造物を得る工程と、
   前記構造物から前記フォトレジストパターンを除去して、前記第一透光領域、前記第二透光領域、及び前記第三透光領域に対応する貫通孔を有する前記金属めっきパターンを得る工程と、
   を含み、
   前記第一透光領域は、前記フィルタ領域に含まれる複数の貫通孔に対応する領域であり、
   前記第二透光領域は、前記間隙に対応する領域であり、
   前記第三透光領域は、前記切離線に対応する領域である、細胞捕捉金属フィルタシートの製造方法。

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