JP6461398B2 - プレニル化ヒドロキシスチルベン - Google Patents

Description

関連出願の相互参照
本出願は、ＡＵ２０１１９０１６６３からの優先権を主張し、この内容を参照により本明細書に組み込む。

この発明は、新規なプレニル化スチルベン化合物、ならびに疾患および医学的障害、例えば癌および皮膚老化の処置におけるこうした化合物の使用に関する。

プロポリス、またはいわゆる蜂ろうは、ある特定の樹木および低木からの若い苗条および芽の浸出物および分泌物から働きミツバチ（ミツバチ（Ａｐｉｓ ｍｅｌｌｉｆｅｒａ））によって回収される複合樹脂性物質である。それは、ハチによって、それらの巣箱の割れ目および穴を封じ、微生物感染に対して保護するために使用される。

プロポリスは生理活性物質の豊富な供給源であり、プロポリスの医学的使用は古代文明に遡る。現在では、プロポリスは天然健康製品として広範に利用可能であり、化粧品中に広く使用されている。しかしながら、医学におけるその現代の使用は、主として異なる植物供給源または植物供給源の混合物から回収するミツバチから生じる化学組成物における広い変動により、制限されている。プロポリスの組成物は、ハチがアクセスする周囲の植物相に依存性であり、こうして、植物相における差異はプロポリス組成物における差異をもたらし得る。例えば、フラボノイドはヨーロッパのプロポリスにおける主要な薬理活性化合物であり、ポリプレニル化ベンゾフェノンはキューバおよびベネズエラのプロポリスにおける主な物質であり、プレニル化ケイ皮酸誘導体はブラジルのプロポリスにおいて優占的であることが知られている。

ミツバチによって産生されるプロポリスの植物学的起源を認識することで、高い品質および効力の医薬の製造を可能にするため単一の植物学的供給源からのプロポリスが産生され得るように、養蜂箱が有利な場所に設置されるのが可能になる。

プロポリスの医学的特有性は、ミツバチの選択的回収能力によって決定され、というのは、それらが比較的非極性であるとともに抗生特性を有する天然材料を認識することができるからである。報告されている通り、プロポリスの通常の供給源は、植物組織の繊細な成長を微生物による攻撃から保護するために高い抗生特徴の葉および花芽の浸出物である。ミツバチは創傷または罹患の植物組織から浸出物を回収することも報告された。こうした供給源は、昆虫、微生物およびウイルスからの創傷または攻撃に応答して、植物によって産生される抗生物質が潜在的に豊富である。

ハチが、プロポリスとして知られている植物材料を単に回収するだけかどうか、またはハチから代謝性の修飾または付加があるかは、前の研究からは明らかでない。しかしながら、ミツバチから付加される材料の有意な量の証拠、または代謝性形質転換の強い証拠があるように思われない。

したがって、その恩恵を完全に活用することができる特定の地理的場所におけるプロポリスの組成物に関して、より良い理解が必要とされる。

本発明につながる研究において、本発明者らは、カンガルー島（南オーストラリア）から単離されたプロポリス試料の検査を行ったところ、驚くべきことに、活性構成要素としてフラボノイドを通常に含有する他のプロポリスとは異なり、カンガルー島プロポリスは、スチルベン、さらに特にそれらのコア構造においてレスベラトロール（下記に画像あり）と同様である新規なプレニル化ポリヒドロキシスチルベン（ｐＰＨＯＳ）を含有していることを見いだした。

レスベラトロール

レスベラトロールは、非常にこってりした食品の高い摂取量にもかかわらずフランス人の中で心臓発作の低発生率に貢献していると考えられている赤ワイン中の構成要素である。事実、レスベラトロールは、アテローム性動脈硬化および冠動脈性心疾患につながるＬＤＬ酸化を阻害することが示された。レスベラトロールは、予防的な抗老化医学におけるリード化合物でもあり、抗癌活性および抗酸化活性を持つことも見いだされた。

しかしながら、その治療的特性にもかかわらず、レスベラトロールは非常に乏しい経口生物学的利用能を呈し、腸および肝臓においてグルクロネートおよびスルホネートのコンジュゲート中に迅速に代謝される。レスベラトロールのｉｎ ｖｉｖｏ有効性は、高い濃度で（最大５ｇまで）または静脈内もしくは局所の適用などの直接投与の場合においてのみ観察される。

近年、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ（ＧＳＫ）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌは、レスベラトロール（３〜５ｇ）のその専売製剤ＳＲＴ５０１の第ＩＩａ相臨床試験を、多発性骨髄腫の処置において行ったが、しかしながら、該試験は、該製剤が極小効力しか提供しないとして休止されており、該試験における数人の患者が腎不全を発症した。

プレニル化ヒドロキシスチルベンは、主にクワ科（Ｍｏｒａｃｅａｅ）（マグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）（桑の実）を含めてクワファミリー、および様々なパンノキ種）、およびマメ科（ラッカセイ（Ａｒａｃｈｉｓ ｈｙｐｏｇａｅａ）（ピーナッツ）を含めてマメ科植物ファミリー）のファミリー由来の植物中で報告された。単離された化合物は、報告によると、消炎、抗微生物および抗酸化の活性を呈し、したがって、プレニル基がヒドロキシスチルベンの生物学的活性に悪い影響を及ぼさないことを示唆した。

事実、プレニル化ヒドロキシスチルベンは、その親油性の性質によるレスベラトロールなどのヒドロキシスチルベンの低い生物学的利用能の問題を避けることができる。１個または複数のプレニル基の存在により、該化合物は、より容易に細胞膜を通過できることが可能であり、グルクロネートおよびスルホネートのコンジュゲートの形成を回避することが可能であり、したがって、該化合物の生物学的利用能を改善し、より一般的に、新たな治療剤の開発のための優れた薬物候補を提供する。以前に、レスベラトロールのテトラメトキシ誘導体は、レスベラトロールより簡便にラット中の血液脳障壁を通過することができることが実証された。

したがって、カンガルー島のプロポリス試料から単離される新規なｐＰＨＯＳ誘導体は、癌などの疾患の処置における新たな治療剤の開発のための強い候補である。

本明細書に挙げられている、文書、動作、材料、装置または物品などのいかなる論述も、任意または全てのこれらの事柄が従来技術の基礎の一部を形成するか、またはこの出願の各請求項の優先日前に存在していたとして本発明に関連の分野における通常の一般知識であったという承認としてとらえるべきではない。

本発明につながる研究において、本発明者らは、多くの新規なプレニル化ポリヒドロキシスチルベン（ｐＰＨＯＳ）誘導体を単離および合成し、これらの新規な化合物が癌細胞株のパネルにおいて、特に白血病およびメラノーマの細胞株において高い効力および選択性を呈したｉｎ ｖｉｔｒｏ実験を実施した。他の予備実験において、多くの新規なｐＰＨＯＳ誘導体はＳＩＲＴ１酵素の活性をモジュレートすることが見いだされたが、このことは、本発明の新規なｐＰＨＯＳ化合物が、ある範囲の疾患の処置のためのリード治療剤であり得ることを示す。

したがって、本発明の第１の態様において、式（Ｉ）

［式中、
Ｒ^１は、独立して、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２であり、ここで、Ｒ^１の少なくとも１つは、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２から選択され、
Ｒ^３は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２から選択され、
Ｒ^４は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルまたはベンジルから選択され、
ｎは、１、２、３または４からなる群から選択される整数であり、
A----Bは、ＣＨ＝ＣＨ、ＣＨ_２−ＣＨ_２、ＣＨ＝ＣＨＸ、またはＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘから選択され、ここで、Ｘ＝（ＣＨ_２）ｐＣＨ_２であり、ｐは、０、１、２または３からなる群から選択される整数であり、ただし、Ｒ^２がＯＨであり、Ｒ^３がＨまたはＯＨであり、A----BがＣＨ＝ＣＨであり、ｎが３であり、Ｒ^１基の２つがＯＨである場合、第３のＲ^１基はｔＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２ではない］
の化合物、または薬学的に許容される塩、溶媒和物、または前記化合物を含めた医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている患者に投与することを含む、癌を処置するための方法が提供される。

本発明の第２の態様において、式（Ｉ）

［式中、
Ｒ^１は、独立してＨ、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２であり、ここで、Ｒ^１の少なくとも１つは、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２から選択され、
Ｒ^３は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２から選択され、
Ｒ^４は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルまたはベンジルから選択され、
ｎは、１、２、３または４からなる群から選択される整数であり、
A----Bは、ＣＨ＝ＣＨ、ＣＨ_２−ＣＨ_２、ＣＨ＝ＣＨＸ、またはＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘから選択され、ここで、Ｘ＝（ＣＨ_２）ｐＣＨ_２であり、ｐは、０、１、２または３からなる群から選択される整数である］
の化合物、または薬学的に許容される塩、溶媒和物、または前記化合物を含めた医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている患者に投与することを含む、癌を処置するための方法が提供される。

第３の態様において、医薬品としての使用のための、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、またはその医薬組成物が提供される。

第４の態様において、治療における使用のための、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、またはその医薬組成物が提供される。

本発明の第５の態様において、癌の処置における使用のための、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、またはその医薬組成物が提供される。

本発明の第６の態様において、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、または前記化合物を含めた医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている患者に投与することを含む、免疫抑制を処置するための方法が提供される。

本発明の第７の態様において、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、または前記化合物を含めた医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている患者に投与することを含む、炎症を処置するための方法が提供される。

本発明の第８の態様において、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、または前記化合物を含めた医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている患者に投与することを含む、細菌または真菌感染症を処置するための方法が提供される。

本発明の第９の態様において、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、または前記化合物を含めた医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている患者に投与することを含む、皮膚老化を処置するための方法が提供される。

本発明の第１０の態様において、癌の処置のための医薬品の調製における、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、またはその医薬組成物の使用が提供される。

本発明の第１１の態様において、免疫抑制の処置のための医薬品の調製における、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、またはその医薬組成物の使用が提供される。

本発明の第１２の態様において、炎症の処置のための医薬品の調製における、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、またはその医薬組成物の使用が提供される。

本発明の第１３の態様において、細菌または真菌感染症の処置のための医薬品の調製における、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、またはその医薬組成物の使用が提供される。

本発明の第１４の態様において、皮膚老化の処置のための医薬品の調製における、第１もしくは第２の態様による式（Ｉ）の化合物、またはその医薬組成物の使用が提供される。

本発明のさらなる態様において、本明細書に記載されている通りの方法および使用のための、上記で定義されている通りの化合物または医薬組成物、および少なくとも１種のさらなる治療剤を含む組合せが提供される。

本発明の第１５の態様によると、式（Ｉａ）

の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が提供され、式中、
Ｒ^１ａ _、Ｒ^１ｂ、Ｒ^１ｃおよびＲ^１ｄは、各々独立して、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２であり、ここで、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも１つは、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２であり、
Ｒ^２は、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２から選択され、
Ｒ^３は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２から選択され、
Ｒ^４は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルまたはベンジルから選択され、
A----Bは、ＣＨ＝ＣＨ、ＣＨ_２−ＣＨ_２、ＣＨ＝ＣＨＸ、またはＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘから選択され、ここで、Ｘ＝（ＣＨ_２）ｐＣＨ_２であり、ｐは、０、１、２または３からなる群から選択される整数であり、ただし、
（ｉ）Ｒ^３がＨであり、Ｒ^２がＯＨまたはＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２である場合、Ｒ^１ｂおよびＲ^１ｄは、独立して、ＯＨまたはＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２ではなく、
（ｉｉ）Ｒ^３がＨであり、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の１つがＨであり、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも１つがＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２である場合、A---Bは、ＣＨ＝ＣＨではない。

本発明の第１６の態様において、式（Ｉａ）

の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が提供され、式中、
Ｒ^１ａ _、Ｒ^１ｂ、Ｒ^１ｃおよびＲ^１ｄは、各々独立して、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２であり、ここで、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも１つは、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２であり、
Ｒ^２およびＲ^３は、各々独立して、ＯＨ、ＯＲ^４、ＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、ＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、ＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３）_２、またはＯＣＨ＝ＣＨＣ（ＣＨ_３）＝ＣＨ_２から選択され、
Ｒ^４は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルまたはベンジルから選択され、
A----Bは、ＣＨ＝ＣＨ、ＣＨ_２−ＣＨ_２、ＣＨ＝ＣＨＸ、または−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘから選択され、ここで、Ｘ＝（ＣＨ_２）ｐＣＨ_２であり、ｐは、０、１、２または３からなる群から選択される整数である。

本発明の第１７の態様において、第１５もしくは第１６の態様による式（Ｉａ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。

第１８の態様によると、第１５もしくは第１６の態様による式（Ｉａ）の化合物、または前記化合物を含めた医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている患者に投与することを含む、癌、免疫抑制、炎症、細菌感染症、真菌感染症または皮膚老化を処置するための方法が提供される。

本発明の第１９の態様において、癌、免疫抑制、炎症、細菌感染症、真菌感染症または皮膚老化の処置のための医薬品の調製における、第１５もしくは第１６の態様による式（Ｉａ）の化合物、またはその医薬組成物の使用が提供される。

本発明の第２０の態様によると、以下のステップ：
（ｉ）以下の通りに、カルボン酸を適当な作用物質で処理することで酸塩化物を提供すること、

（ｉｉ）以下の通りに、対応する酸塩化物とアリールアルケンとを縮合すること、

（ｉｉｉ）以下の通りに、アセテート基を脱保護およびアルキル化すること

［式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、各々独立して、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒ、Ｏ^ｉＰｒ、ＯＢｕ、Ｏ^ｉＢｕ、Ｏ^ｔＢｕ、ＯＢｎの群から選択される］
を含む、式（Ｉｂ）の化合物を調製する方法が提供される。

一実施形態において、該方法は、以下の通りの追加ステップ：
（ｉｖ）以下の通りの水素化反応：

［式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、すでに定義されている通りであり、ただし、Ｒ^４、Ｒ^５またはＲ^６の少なくとも１つがＯＢｎであり、
Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、各々独立して、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒ、Ｏ^ｉＰｒ、ＯＢｕ、Ｏ^ｉＢｕ、Ｏ^ｔＢｕの群から選択される］
を含む。

別の実施形態において、該方法は、以下の通りの２つの追加ステップ：
（ｖ）以下の通りのプレニル基の転位：

（ｖｉ）および以下の通りの水素化反応：

［式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、すでに定義されている通りであり、ただし、Ｒ^４、Ｒ^５またはＲ^６の少なくとも１つがＯＢｎであり、
Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、各々独立して、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒ、Ｏ^ｉＰｒ、ＯＢｕ、Ｏ^ｉＢｕ、Ｏ^ｔＢｕの群から選択される］
を含む。

本発明の第２１の態様において、下記に同定される通りのＵＳＹＳＤＳ１５による化合物が提供される。

第２１の態様により、化合物ＵＳＹＳＤＳ１５またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物も提供される。

本発明の第２３の態様において、癌、免疫抑制、炎症、真菌または細菌感染症の処置のための医薬品の調製における、または皮膚老化の処置における、第２１の態様による化合物または第２２の態様の組成物の使用が提供される。

本発明の好ましい実施形態の記載
この明細書の全体にわたって、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という語、または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変化形は、明記されている元素、整数もしくはステップ、または元素、整数もしくはステップの群の包含を示唆するが、いずれの他の元素、整数もしくはステップ、または元素、整数もしくはステップの群の排除も示唆するものではないことが理解されるであろう。

治療における使用のため、本明細書において定義されている通りの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の治療有効量は、未加工の化学物質として投与することができることが可能である一方で、本発明の一態様において、該活性成分は、医薬組成物として存在する。したがって、さらなる実施形態において、本発明は、１種または複数の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と添加混合して、第１、第２、第１５および第１６の態様による式（Ｉ）もしくは（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含む医薬組成物を提供する。担体（単数または複数）、希釈剤（単数または複数）または賦形剤（単数または複数）は、製剤の他の成分と適合性であるという意味において許容されなければならず、そのレシピエントに有害であってはならない。

適用可能である場合、式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物を含めて本発明の化合物は、薬学的に許容される塩の形態であってよく、および／または薬学的に許容される塩として投与することができる。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、全身投与のために毒物学的に安全である塩を指す。薬学的に許容される塩は、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、およびマグネシウムなどを含めて、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、ならびにこれらに限定されないがアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン、およびトリエタノールアミンなどを含めて、非毒性のアンモニウム、第４級アンモニウム、およびアミンカチオンから選択することができる。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、全身投与において安全に使用することができる固体または液体の充填剤、希釈剤または被包物質を指す。投与の特定の経路に依存して、当技術分野においてよく知られている様々な担体が使用され得る。これらの担体または賦形剤は、糖類、デンプン、セルロースおよびその誘導体、麦芽、ゼラチン、タルク、硫酸カルシウム、植物油、合成油、ポリオール、アルギン酸、リン酸緩衝溶液、乳化剤、等張生理食塩水、およびピロゲンフリー水を含める群から選択することができる。

本明細書で使用される場合、「溶媒和物」という用語は、溶質（この発明において、式（Ｉ）もしくは（Ｉａ）の化合物またはその塩もしくは生理的官能性誘導体）および溶媒によって形成される可変化学量論の複合体を指す。本発明の目的のためのこうした溶媒は、溶質の生物学的活性に干渉してはならない。適当な溶媒の例として、これらに限定されないが、水、メタノール、エタノールおよび酢酸が挙げられる。特に、使用される溶媒は、薬学的に許容される溶媒である。適当な薬学的に許容される溶媒の例として、限定せずに、水、エタノール、酢酸、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物が挙げられる。特定の溶媒は水である。

式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物の投与は、「プロドラッグ」の形態であってよい。プロドラッグは、ｉｎ ｖｉｖｏで活性形態に形質転換される化合物の不活性形態である。適当なプロドラッグとして、化合物の活性形態のエステル、ホスホン酸エステルなどが挙げられる。

上で特に記述されている成分に加えて、該製剤が、当該の製剤の型を考慮して、当技術分野において従来的な他の作用物質を含み得ることが理解されるべきである。

本発明の化合物は、ヒトまたは動物の患者における疾患の処置に適当であり得る。一実施形態において、患者は、ヒト、ウマ、イヌ、ネコ、ヒツジ、雌ウシ、または霊長類を含めて哺乳動物である。一実施形態において、患者はヒトである。さらなる実施形態において、患者はヒトではない。

本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、例えば研究者または臨床医によって求められている、組織、系、動物もしくはヒトの生物学的または医学的な応答を誘発する薬物または薬剤の量を意味する。さらに、「治療有効量」という用語は、こうした量を受けていない対応する対象と比較した場合に、処置、治癒、予防の改善、または疾患、障害、もしくは副作用の寛解、または疾患もしくは障害の前進速度の減少をもたらす任意の量を意味する。該用語には、正常な生理機能を増強するのに有効な量も、その範囲以内に含まれる。

本明細書で使用される場合、「処置」という用語は、本発明の化合物を含む医薬組成物を投与しないのと比較した場合に、症状に対して防御または阻害すること、症状を処置すること、症状の外観を遅延させること、症状の発達の重症度を低減すること、および／または個体が被る症状の数または型を低減することを指す。処置という用語は、対症療法的な設定における使用を包含する。

当業者は、本発明の化合物の調製において、望ましくない副反応を予防するために分子中の１個または複数の感応基を保護することが必要および／または望ましいことがあることを認めるであろう。本発明による使用のための適当な保護基は当業者によく知られており、従来の方式で使用することができる。例えば、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓによる「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆ｓｏｎｓ １９９１）またはＰＪ．Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉによる「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ」（Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ １９９４）を参照されたい。適当なアミノ保護基の例として、アシル型保護基（例えば、ホルミル、トリフルオロアセチル、アセチル）、芳香族ウレタン型保護基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）および置換Ｃｂｚ）、脂肪族ウレタン保護基（例えば、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、イソプロピルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル）およびアルキル型保護基（例えば、ベンジル、トリチル、クロロトリチル）が挙げられる。

本発明の第１、第２または第１８の態様によると、処置されるべき癌は、白血病、非小細胞肺癌、大腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎癌、前立腺癌または乳癌である。最も好ましくは、処置されるべき癌は、白血病またはメラノーマである。

第１から第９の態様の好ましい実施形態において、式（Ｉ）による化合物は、式（Ｉａ）を有する。

本発明の第１０または第１９の態様によると、好ましくは、該医薬品は、以下の癌を処置するために使用される。白血病、非小細胞肺癌、大腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎癌、前立腺癌または乳癌。最も好ましくは、該医薬品は、白血病またはメラノーマを処置するために使用される。

第１０から第１４の態様の好ましい実施形態において、式（Ｉ）による化合物は、式（Ｉａ）を有する。

本発明の化合物の抗腫瘍効果は、単独治療として適用することができるか、または加えて、１種または複数の他の物質および／または処置を伴うことができる。こうした共同処置は、処置の個々の構成成分の同時、逐次または別々の投与を経て達成することができる。医療腫瘍学の分野において、外科手術、放射線治療および／または化学治療の組合せなど、癌を有する各患者を処置するために処置の異なる形態の組合せを使用することは常道である。特に、照射、または抗血管新生剤および／もしくは血管透過性低減剤での処置は、腫瘍内の低酸素組織の量を増強することができることが知られている。そのため、本発明の化合物の有効性は、放射線治療および／または抗血管新生剤との共同処置によって改善することができる。

こうした組合せの個々の構成成分は、治療のクール中の異なる時間で別々に、または分割もしくは単一の組合せ形態において同時に投与することができる。本発明は、そのため、同時または交互の処置の全てのこうした体制を包含すると理解されるべきであり、「投与」という用語は適宜に解釈されるべきである。他の抗悪性腫瘍薬を用いるこの発明の化合物の組合せの範囲には、原則として、癌を処置するのに有用な任意の医薬組成物との任意の組合せが含まれるが理解されるであろう。

同じ製剤中で組み合わせる場合、２種の化合物は安定であり、互いにおよび製剤の他の構成成分と適合性でなければならず、投与用に製剤化することができることが認められるであろう。別々に製剤化する場合、それらは、任意の好都合な製剤中に、好都合には、当技術分野においてこうした化合物用に知られているような方式で提供することができる。

本発明の医薬組成物は、任意の適切な経路による、例えば経口（バッカルまたは舌下を含める）、直腸、経鼻、局所的（バッカル、舌下または経皮を含める）、腟内または腸管外（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含める）経路による投与用に製剤化することができる。そのため、本発明の医薬組成物は、例えば、タブレット、カプセル、粉末、顆粒、ドロップ剤、クリーム、または経口もしくは無菌非経口の溶液もしくは懸濁液などの液体調製物として製剤化することができる。こうした医薬製剤は、製薬の当技術分野において知られている任意の方法によって、例えば活性成分を担体（単数または複数）または賦形剤（単数または複数）と会合させることによって調製することができる。こうした医薬製剤は、経口投与および遅延放出の製剤に適当な、腸溶コーティングされた顆粒、タブレットまたはカプセルとして調製することができる。

同じ疾患に対して活性の第２の治療剤との組合せで化合物が使用される場合、各化合物の用量は、化合物が単独で使用される場合のものと異なってよい。適切な用量は、当業者によって容易に認められるであろう。

本発明の一実施形態において、第１５の態様によると、式（Ｉａ）の化合物が提供され、ここで、Ｒ^１ａ〜Ｒ^１ｄ、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびA----Bは、上文に定義されている通りであり、ただし
（ｉ）Ｒ^３がＨである場合、Ｒ^１ｂおよびＲ^１ｄは、独立して、ＯＨまたはＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２ではなく、
（ｉｉ）Ｒ^３がＨであり、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の１つがＨであり、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも１つがＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２である場合、A---BはＣＨ＝ＣＨではない。

第１５または第１６の態様によると、本発明の好ましい実施形態において、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の２つはＨである。他の好ましい実施形態において、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の１つはＨであり、他の実施形態において、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}のいずれもがＨではない。

好ましい実施形態において、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも１つはＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２であり、別の好ましい実施形態において、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも１つはＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２である。

ある特定の実施形態において、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも１つはヒドロキシルであり、ある特定の他の実施形態において、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも２つはヒドロキシルである。別の実施形態において、Ｒ^{１ａ〜１ｄ}の少なくとも１つはＯＲ^４であり、Ｒ^４はメチルであり、なお別の実施形態において、Ｒ^４はベンジルである。

第１５または第１６の態様による本発明の好ましい実施形態において、Ｒ^２またはＲ^３の少なくとも１つはヒドロキシルである。別の好ましい実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３の両方ともがヒドロキシルである。

別の実施形態において、Ｒ^２またはＲ^３の少なくとも１つはＯＲ^４であり、Ｒ^４はメチルであり、なお別の実施形態において、Ｒ^４はベンジルである。

本発明の好ましい実施形態において、式（Ｉａ）におけるA----B基は、ＣＨ＝ＣＨまたはＣＨ＝ＣＨＸ−であり、ここで、Ｘ＝（ＣＨ_２）ｐＣＨ_２であり、ｐは、０、１、２または３からなる群から選択される整数である。

本発明の他の実施形態において、式（Ｉａ）におけるA----B基は、ＣＨ_２−ＣＨ_２、またはＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘであり、ここで、Ｘ＝（ＣＨ_２）ｐＣＨ_２であり、ｐは、独立して、０、１、２または３からなる群から選択される整数である。

好ましい実施形態において、第１５または第１６の態様による式（Ｉａ）の化合物は、式（Ｉｂ）

［式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、各々独立して、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒ、Ｏ^ｉＰｒ、ＯＢｕ、Ｏ^ｉＢｕ、Ｏ^ｔＢｕ、ＯＢｎの群から選択される］を有する。

別の好ましい実施形態において、第１５または第１６の態様による式（Ｉａ）の化合物は、式（Ｉｃ）または（Ｉｄ）

［式中、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、各々独立して、ＯＨ、ＯＭｅ、−ＯＥｔ、ＯＰｒ、Ｏ^ｉＰｒ、ＯＢｕ、Ｏ^ｉＢｕ、Ｏ^ｔＢｕの群から選択される］を有する。

なお別の好ましい実施形態において、第１５または第１６の態様による式（Ｉａ）の化合物は、式（Ｉｅ）または（Ｉｆ）


［式中、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、各々独立して、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒ、Ｏ^ｉＰｒ、ＯＢｕ、Ｏ^ｉＢｕ、Ｏ^ｔＢｕの群から選択される］を有する。

好ましくは、第１５もしくは第１６の態様による化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物は、




からなる群から選択される。

別の好ましい実施形態において、第１５の態様による化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物は、

からなる群から選択される。

プレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体の抗癌活性を決定するための予備ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにおいて、本発明者らは、全ての誘導体ＵＳＹＤＳ１からＵＳＹＤＳ７の癌細胞成長の構造依存性阻害を観察した。これらの化合物の大部分は、ほとんど全ての白血病細胞株（ＣＣＲＦ−ＣＥＭ、ＨＬ−６０（ＴＢ）、Ｋ−５６２、ＭＯＬＴ−４、ＲＰＭＩ−８２２６、ＳＲ）の強力な阻害を呈した。一部の細胞株において、成長はナノモル濃度で阻害された。癌細胞成長の阻害において、ＵＳＹＤＳ１は最も強力な活性を表し、続いてＵＳＹＤＳ１０、ＵＳＹＤＳ９、ＵＳＹＤ２次いでＵＳＹＤＳ１４であった。誘導体ＵＳＹＤＳ１０および１４に関する癌細胞成長の構造依存性阻害も観察された。構造活性の研究は、２位におけるＣ−プレニル化が、３位におけるメトキシ基とともに癌細胞の阻害に対して最も高い効力を呈することを示す。

この研究におけるｐＴＨＯＳの大部分は、生物学的活性の広いスペクトルを表す公知の天然発生化合物のピセタノール構造上に築かれた構造を有する。それは現在、白血病、リンパ腫；乳房、前立腺、大腸およびメラノーマの癌を含めて多種多様な腫瘍細胞の増殖を阻害するその能力により、その抗癌特性に対して多くの注意を惹きつけている。その抗癌効果は、細胞周期停止；Ｂｉｄ、Ｂａｘ、Ｂｉｋ、Ｂｏｋ、Ｆａｓの上方調節；Ｂｃｌ−ｘＬのＰ２１ＷＡＦ１下方調節；ＢＣＬ−２、ｃＩＡＰ、カスパーゼの活性化、ミトコンドリア電位の損失、およびシトクロムｃの放出を介して媒介すると示唆されている。ピセタノールも、フリーラジカル、紫外線照射、サイトカイン、または微生物抗原、ＪＡＫ−１、細胞外サイトカインに応答して細胞性活性を制御するＳＴＡＴ経路における重要な転写によって引き起こされる細胞ストレスに応答して、中心的役割を果たす、ＮＦ−ｋＢを含めて一部の転写因子の活性化を阻害することが示された。

この研究において記載されているｐＴＨＯＳは、ピセタノールが呈するものと同様の生物学的活性スペクトルを表すことが観察された。さらに、ｐＴＨＯＳ（すなわち、ＵＳＹＤＳ１、ＧＩ_５０値：０．０２μＭ〜５μＭ）は、腫瘍細胞のほとんど全ての型の増殖の阻害において、ピセタノール（ＩＣ_５０値：５μＭ〜１００μＭ）よりおよそ２５０倍の強力を示した。そのため、この出願に存在するｐＴＨＯＳは、医薬研究および開発のため、ならびに癌の病態生理学をさらに理解するための生物学的な道具として、魅惑的な主役である。

化合物ＵＳＹＤＳ１および化合物ＵＳＹＤＳ２の強力な細胞毒性は、それらの算出されたＬｏｇ分配係数（ＬｏｇＰ）値によって実証された通り、それらの増加された疎水性の点から説明することができる。ＵＳＹＤＳ１およびＵＳＹＤＳ２は、ヒドロキシスチルベンレスベラトロールのそれのほとんど２倍のＬｏｇＰ値を有する。治療的化合物に対するＬｏｇＰの効果は、主に組織の透過および分布に関連する。より高いＬｏｇＰ値は、化合物がより簡便に細胞膜を通過し、細胞に入ることを可能にする。

他の予備実験において、Ｏ−およびＣ−プレニル化ヒドロキシスチルベン誘導体の特定の例が、タンパク質（サイレント情報調節因子２タンパク質、Ｓｉｒ２）のサーチュインファミリーのメンバーＳＩＲＴ１酵素の濃度依存性阻害を呈することが見いだされた。

サーチュインは、モデル生物における老化および長寿に関する重要な調節因子として出現した。サーチュインの遺伝学および生理学への研究は、この酵素ファミリーが、遺伝子サイレンシング、細胞死、脂肪酸代謝、ニューロン保護および寿命延長を含めて、様々な細胞プロセスにおいて役割を果たすことを示した。

いかなる特定の理論に結び付けられることなく、ＳＩＲＴ１活性のモジュレーションは、癌、メタボリック症候群、肥満症、神経変性疾患および老化関連疾患を含めて、疾患の処置のための治療剤の開発につながり得ることが提唱される。

第１５または第１６の態様による好ましい実施形態において、式（Ｉａ）の化合物は化学的に合成される。別の好ましい実施形態において、式（Ｉａ）の化合物はプロポリスから単離され、ここで、該プロポリスはレピドスペルマ（Ｌｅｐｉｄｏｓｐｅｒｍａ）属の植物に由来する。なお別の好ましい実施形態において、式（Ｉａ）の化合物は、レピドスペルマ属の樹脂、ガムまたは浸出物から単離される。

本発明の第２０の態様によると、式（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）または（Ｉｆ）の化合物の調製において、好ましくは、ステップ（ｉｉ）における縮合反応は、パラジウム触媒の存在下で実施される。好ましくは、パラジウム触媒は酢酸パラジウム（ＩＩ）である。

好ましくは、ステップ（ｉｉｉ）におけるアルキル化反応は、金属水素化物およびハロゲン化プレニル試薬の存在下で実施される。好ましくは、金属水素化物は水素化ナトリウムであるが、しかしながら、他の公知金属水素化物が使用され得ることが、当業者によって認められるであろう。最も好ましくは、ハロゲン化プレニル試薬はＢｒＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２である。

好ましい実施形態において、ステップ（ｉｖ）または（ｖｉ）における水素化反応は、パラジウム触媒の存在下にて溶媒の混合物中で実施される。最も好ましくは、パラジウム触媒は炭素担持パラジウムであり、溶媒の混合物は１，４−シクロヘキサジエンおよびエタノールを含む。しかしながら、任意の他の適当な試薬および溶媒が使用され得ることが、当業者によって認められるであろう。

好ましい実施形態において、ステップ（ｖ）における転位反応は、ケイ酸マグネシウム粒子（Ｆｌｏｒｉｓｉｌ（登録商標））、シリカまたはアルミナ粒子の存在下で実施される。別の好ましい実施形態において、該転位反応は、マイクロ波放射または光の存在下で実施することができる。なお別の好ましい実施形態において、ステップ（ｖ）における転位反応は、ケイ酸マグネシウム粒子（Ｆｌｏｒｉｓｉｌ（登録商標））、シリカまたはアルミナ粒子の存在下、およびマイクロ波放射または光の存在下で実施される。

単離および合成されたプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体の一部を編集したものである。 新規なＯ−およびＣ−プレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体の合成を要約するスキームである。 化合物ＵＳＹＤＳ１による、様々な細胞株に関するヒト癌細胞成長の阻害のための用量応答曲線である。 化合物ＵＳＹＤＳ２による、様々な細胞株に関するヒト癌細胞成長の阻害のための用量応答曲線である。 化合物ＵＳＹＤＳ３による、様々な細胞株に関するヒト癌細胞成長の阻害のための用量応答曲線である。 化合物ＵＳＹＤＳ４による、様々な細胞株に関するヒト癌細胞成長の阻害のための用量応答曲線である。 化合物ＵＳＹＤＳ９による、様々な細胞株に関するヒト癌細胞成長の阻害のための用量応答曲線である。 化合物ＵＳＹＤＳ６による、様々な細胞株に関するヒト癌細胞成長の阻害のための用量応答曲線である。 化合物ＵＳＹＤＳ７による、様々な細胞株に関するヒト癌細胞成長の阻害のための用量応答曲線である。 フリーラジカルスカベンジングに対するスチルベン化合物の効果を表すグラフである。 スチルベン化合物による、ＮＡＤ−依存性デアセチラーゼサーチュイン−２（ＳＩＲＴ１）酵素の濃度依存性阻害を表すグラフである。

本発明の性質をより良く理解するために、多くの例をここで以下の通りに記載する。

材料
カヤツリグサ科草本（レピドスペルマ・ビスシヅム（Ｌｅｐｉｄｏｓｐｅｒｍａ ｖｉｓｃｉｄｕｍ））から回収するのを観察されたミツバチを、プラスチックチューブ中に捕獲し、蓋をし、凍結した。プロポリスを持つハチ後脚の区分を切断し、保存した。植物からの樹脂を回収し、分析まで−２０℃で貯蔵した。植物試料が得られ、植物学者、Ａ／Ｐｒｏｆ Ｍｕｒｒａｙ Ｈｅｎｗｏｏｄ、Ｊｏｈｎ Ｒａｙ Ｍｕｓｅｕｍ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｙｄｎｅｙ、Ｓｙｄｎｅｙ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ、による同定のための証拠標本を提供するために４０℃にて換気炉（Ｔｈｅｒｍｏｌｉｎｅ、ＮＳＷ Ａｕｓｔｒａｌｉａ）内で終夜乾燥させ、レピドスペルマ・ビスシヅム化学型１ａ、証拠番号Ｄｕｋｅ１００２２２−４２およびレピドスペルマ・ビスシヅム化学型２ａ、証拠番号Ｄｕｋｅ１００２２１−２１として登録した。

各々が巣箱カバー蓋下にプロポリスマットを取り付けられている３個の１０枠組箱で構成された７６個の養蜂箱を使用してプロポリス試料を回収した。個々に番号が付けられている巣箱を、カンガルー島の中央南地域に位置する養蜂場内の場所で使用した。

順相の短カラムクロマトグラフィー（ＮＰＳＣＣ）用にシリカゲル６０Ｆ_２５４およびシリカゲル６０Ｈで予備コーティングされた薄層クロマトグラフィーシートを、Ｍｅｒｃｋから購入した。ＴＬＣプレートをＵＶＧＬ−５８鉱物光ランプ、Ｍｕｌｔｉｂａｎｄ ＵＶ−２５４４／３６６で視覚化した。

クロロホルム−ｄおよびメタノール−ｄ_４などの重水素化ＮＭＲ溶媒、重水素化ジメチルスルホキシド（ｄ_６−ジメチルスルホキシド）を含めて、単離および合成において使用された全ての化学薬品は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｐｔｙ Ｌｔｄ（Ｃａｓｔｌｅ Ｈｉｌｌ、ＮＳＷ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）から購入した。ヘキサン、ジクロロメタン、酢酸エチル、イソプロパノール、エタノール、メタノール、および酢酸を含めて、溶媒は分析用グレードであり、Ａｊａｘ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍ、Ｔａｒｅｎ Ｐｏｉｎｔ、ＮＳＷ、ＡｕｓｔｒａｌｉａまたはＡｓｉａ Ｐａｃｉｆｉｃ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｔｄ（ＡＰＳ）から購入した。

４０〜６０℃の間を範囲とする水浴温度を用いるＲｏｔａｖａｐｏｒ Ｒ−１１４型ロータリーエバポレーターを使用して溶媒画分を蒸発させた。真空制御器Ｖ−８００またはＶ−８５０付きの真空ポンプＶ−７００またはＶａｃｕｕｂｒａｎｄ ＭＤ ４Ｃ ＮＴ隔膜ポンプ（Ｖａｃｕｕｂｒａｎｄ ＧＭＢＨ、Ｗｅｒｔｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用する。最終乾燥を、ＤｉｒｅｃｔＴｏｒｒ真空ポンプ（Ｓａｒｇｅｎｔ−Ｗｅｌｃｈ、Ｂｕｆｆａｌｏ、ＵＳＡ）を使用するＮａｐｃｏ５８３１真空オーブン（ＮＡＰＣＯ、Ｓａｌｔ Ｌａｋｅ Ｃｉｔｙ、ＵＳＡ）によって実施する。

分取ＨＰＬＣは、Ｓｈｉｍａｄｚｕ分取勾配ＬＣ−８Ａ系上にて、逆相カラム（Ｇｒａｃｅ、Ａｌｌｔｉｍａ Ｃ１８ ５μＭ ２２ｍｍ ＩＤ×２５０ｍｍ）、注入体積５００μＬ上で実行し、メタノール（７５％）および水を用いて１０ｍＬ／ｍｉｎで溶出し、２８０ｎｍにおいてＵＶ−Ｖｉｓ検出器（Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＳＰＤ−２０Ａ）で検出した。分析ＨＰＬＣは、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＵＦＬＣ、ＬＣ−２０ＡＤポンプ、ＳＩＬ−２０Ａ ＨＴオートサンプラー上で、Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ Ｃｏｌｕｍｎ、ＮＵＣＬＥＯＳＩＬ １００Ｃ１８、５μｍ、４ｍｍ×１２５ｍｍ、注入体積２０μＬを用いて実行し、メタノール−水−酢酸（７０：２９．８：０．２）を用いて１ｍＬ／ｍｉｎで溶出し、２３０ｎｍにおいてＵＶ−Ｖｉｓ検出器（Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＳＰＤ−２０Ａ）で検出した。

^１Ｈおよび^１３Ｃの核磁気共鳴（ＮＭＲ）分析を、Ｖａｒｉａｎ ４００ＭＨｚシステム上で、ＳＭＳオートサンプラー（Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）を用いて実施した。ＮＭＲスペクトルは、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を基準とした。質量スペクトルを、ＴｈｅｒｍｏＦｉｎｎｉｇａｎ ＴＳＱ７０００（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステム）およびＦｉｎｎｉｇａｎ Ｐｏｌａｒｉｓ Ｉｏｎ Ｔｒａｐ ＭＳ／ＭＳシステム（Ｆｉｎｎｉｇａｎ、Ｓａｎ Ｊｏｓｅ、ＵＳＡ）から、Ｘｃａｌｉｂｕｒ１．２データシステムを使用して得た。

植物およびプロポリス標本の^１Ｈ−ＮＭＲ化学物質プロファイルの決定
茎の底部（０．１ｇ）、ハチ後脚（０．０１ｇ）および養蜂箱のプロポリス（１．０ｇ）からの樹脂試料を、酢酸エチルを用いて室温で１５分間抽出した。抽出物を濾過し、減圧下で乾燥させ、^１Ｈ−ＮＭＲおよびＨＰＬＣによって分析した。カヤツリグサ科草本１型からの試料は、主要な構成要素としてプレニル化ヒドロキシスチルベンおよびシナメートを含有することが見いだされたが、一方カヤツリグサ科草本２型からのものは、上記で論じられている通り、主要な構成要素としてプレニル化スチルベンだけを示した。プロポリス試料を引き続いて構成成分の単離のために選択した。

カンガルー島のプロポリスからのプレニル化ポリヒドロキシスチルベンの単離および同定。
一般的方法
プロポリス（１０ｇ）を、ジクロロメタンを用いて室温で撹拌しながら１時間抽出した。抽出物を、順相の短カラムクロマトグラフィー（ＮＰＳＣＣ）を使用する精製にかけた。０％、１％、２％、４％、８％、１０％、１５％、２０％、５０％および１００％でジクロロメタン（ＤＣＭ）および酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）からなる移動相（２×１００ｍＬ）の段階的勾配を用いることで構成成分を溶出し、これらをＴＬＣおよびＮＭＲによって分析した。化合物のさらなる精製を、必要に応じて、同じＮＰＳＣＣ上にてヘキサンおよびＥｔＯＡｃまたはヘキサンおよびイソプロパノールのいずれかからなる異なる移動相で引き続いて実施した。化合物をさらに精製する必要がある場合には、順相の分取用ＨＰＬＣも用いた（Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣ−８Ａ）。シリカカラム（Ａｌｔｉｍａ（登録商標）シリカ１０μｍ、１０ｃｍ×２５０ｃｍ）を介して１０ｍＬ／ｍｉｎの流量でヘキサン中２％イソプロパノールの移動相を用いて外界温度で化合物を溶出した。化合物の溶出を、ＵＶ検出器（ＵＶ／Ｖｉｓ ＳＰＤ−２０Ａ）を用いて２８０ｎｍでモニタリングした。これらの精製化合物の構造および同一性を、高分解能の質量分析を含めて、^１Ｈ−および^１３Ｃ−ＮＭＲならびに質量分析によって特徴づけた。単離化合物の詳細な構造分析も、必要な場合、Ｇｒａｄｉｅｎｔ Ｈｅｔｅｒｏｎｕｃｌｅａｒ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｂｏｎｄ Ｃｏｈｅｒｅｎｃｅ（ＧＨＭＢＣ）を使用する２Ｄ−ＮＭＲによって実施した。

単離したプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体
（Ｅ）−２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−４’，５−ジヒドロキシ−３，３’−ジメトキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ１）。

薄黄色の液体。C₂₁H₂₄O₄ ¹H NMR(メタノール-d₄) 400MHz): R_t14.64分. δ 7.16(d, J=16Hz, H), 7.07(d, J=4Hz, H), 6.94(dd, J=8, 4Hz, H), 6.86(d, J=19Hz, H), 6.78(d, J=8Hz, H), 6.63(d, J=4Hz, H), 6.34(d, J=4Hz, H), 5.06(m, H), 3.89(s, 3H), 3.77(s, 3H), 3.39(m, 2H), 1.80(bs, 3H), 1.66(bs, 3H). ¹³C-NMR(CDCl₃, 100MHz) δ 158.5, 154.4, 146.7, 145.6, 138.1, 130.6, 130.4, 130.3, 124.3, 123.7, 120.7, 120.6, 114.5, 108.2, 103.9, 98.2, 55.9, 55.7, 25.8, 24.5, 18.0; CI-MS: m/z 339(M-1)^-, HRESIMS: m/z 341.1749(M+H)⁺, C₂₁H₂₅O₄の計算値341.1747.
（Ｅ）−３−（３−メチル−２−ブテニルオキシ）−４’，５−ジヒドロキシ−３’−メトキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ２）。

薄黄色の液体。C₂₀H₂₂O₄ ¹H NMR(メタノール-d₄, 400MHz): R_t15.46分. δ 7.12(d, J=4Hz, 1H), 7.01(d, J=16Hz, 1H), 6.97(dd, J=8, 4Hz, 1H), 6.88(d, J=16Hz, 1H), 6.78(d, J=8Hz, 2H, 6.56(m, 1H), 6.24(m, 1H), 5.46(m, 1H), 4.52(d, J=4Hz, 2H), 3.90(s, 3H), 1.79(bs, 3H), 1.76(bs, 3H). ¹³C-NMR(CDCl₃, 100MHz) δ 160.2, 156.9, 146.7, 145.5, 139.9, 138.6, 129.9, 129.2, 126.2, 120.6, 119.4, 114.7, 108.4, 105.9, 105.4, 101.5, 65.0, 55.9, 25.8, 18.2; CI-MS m/z 325(M-1)^-, HRESIMS m/z 327.15938(M+H)⁺, C₂₀H₂₃O₄の計算値327.1591.
（Ｅ）−４−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，３’，５−トリヒドロキシ−４’−メトキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ３）。

薄黄色の液体。C₂₀H₂₂O₄ ¹H NMR(メタノール-d₄, 400MHz): R_t11.46分. δ 7.08(d, J=4Hz, 1H), 6.93(dd, J=8, 4Hz, 1H), 6.91(d, J=16Hz, 1H), 6.78(d, J=16Hz, 1H), 6.77(d, J=8Hz, 1H), 6.46(s, 2H), 5.23(m, 1H), 3.89(s, 3H), 3.28(m, 2H), 1.76(bs, 3H), 1.65(bs, 3H); CI-MS: m/z 325(M-1)^-; HRMS: 325.14453 [M-1]^-,(C₂₀H₂₁O₄の計算値325.14398).
（Ｅ）−３−（３−メチル−２−ブテニルオキシ）−３’，４’，５−トリヒドロキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ４）。

薄黄色の液体。C₁₉H₂₀O₄ ¹H NMR(メタノール-d₄, 400MHz): R_t18.62分. δ 6.98(d, J=4Hz, 1H), 6.94(d, J=16Hz, 1H), 6.85(dd, J=8, 4Hz, 1H), 6.80(d, J=16Hz, 1H), 6.74(d, J=8Hz, 1H), 6.53(m, 2H), 6.23(m, 1H), 5.46(m, 1H), 4.51(d, J=4Hz, 2H), 1.79(bs, 3H), 1.76(bs, 3H); ¹³C NMR(メタノール- d₄, 100MHz): δ 160.2, 158.2, 145.2, 145.1, 139.8, 136.9, 129.5, 128.5, 125.5, 119.9, 118.8, 114.9, 112.4, 105.2, 103.8, 100.7, 64.4, 24.4, 16.8; CI-MS: m/z 311(M-1)^-; HREIMS: m/z 335.1252(M+Na)⁺, C₁₉H₂₀O₄Naの計算値335.1259.
（Ｅ）−２，４−ジ（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，４’，５−トリヒドロキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ６）。

オフホワイトの固体。C₂₄H₂₈O₃ ¹H NMR(メタノール-d₄, 400MHz): R_t9.35分. δ 7.30(d, J=8Hz, 2H), 7.11(d, J=16Hz, 1H), 6.80(d, J=16Hz, 1H), 6.76(d, J=8Hz, 2H), 6.63(s, 1H), 5.21(m, 1H), 5.10(m, 1H), 3.41(m, 2H), 3.35(m, 2H), 1.81(bs, 3H), 1.78(bs, 3H), 1.68(bs, 6H); CI-MS: m/z 363(M-1)^-.
（Ｅ）−２，４−ジ（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，３’，４’，５−テトラヒドロキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ７）。

オフホワイトの固体。C₂₄H₂₈O₄ ¹H NMR(メタノール-d₄, 400MHz): R_t10.46分. δ 7.07(d, J=16Hz, 1H), 6.94(d, J=4Hz, 1H), 6.79(dd, J=8,4Hz, 1H), 6.73(d, J=16Hz, 1H), 6.71(d, J=8Hz, 1H), 6.62(s, 1H), 5.21(m, 1H), 5.10(m, 1H), 3.41(m, 2H), 3.35(m, 2H), 1.81(bs, 3H), 1.78(bs, 3H), 1.68(bs, 6H); CI-MS: m/z 379(M-1)^-; HRMS: 379.19148 [M-1]^-,(C₂₄H₂₇O₄の計算値379.19092).
（Ｅ）−２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，３’，４’，５−テトラヒドロキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ８）。

C₁₉H₂₀O₄ ¹H NMR(アセトン-d₆, 400MHz): δ 7.07(d, J=2Hz, 1H), 7.15(d, J=16Hz, 1H), 6.89(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.81(d, J=8Hz, 1H), 6.80(d, J=16Hz, 1H), 6.35(d, J=2Hz, 1H), 6.63(d, J=2Hz, 1H), 5.15(t, J=7Hz, 1H), 3.42(d, J=7Hz, 2H), 1.81(s, 3H), 1.65(s, 3H). ¹³C NMR(アセトン-d₆, 100MHz): δ 155.9, 155.8, 145.4, 145.3, 138.4, 130.1, 129.7, 129.4, 124.5, 123.9, 117.4, 119.0, 115.4, 112.9, 103.4, 101.6, 24.0, 25.0, 17.2. HRESIMS:(m/z) 313.1434(M+H)⁺, C₁₉H₂₁O₄の計算値313.1440.
（Ｅ）−２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３’，４’，５−トリヒドロキシ−３−メトキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ９）。

C₂₀H₂₂O₄ ¹H NMR(アセトン-d₆, 400MHz): δ 7.16(d, J=16Hz, 1H), 7.07(d, J=2Hz, 1H), 6.90(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.85(d, J=16Hz, 1H), 6.82(d, J=8Hz, 1H), 6.71(d, J=2Hz, 1H), 6.39(d, J=2.3Hz, 1H), 5.09(1H, t, J=7Hz, 1H), 3.78(s, 3H), 3.40(d, J=7Hz, 2H), 1.80(s, 3H), 1.64(s, 3H). ¹³C NMR(アセトン-d₆, 100MHz): δ 158.5, 156.3, 145.3(2C), 138.0, 130.1, 130.0, 129.6, 123.7, 124.2, 119.1, 118.9, 115.3, 112.9, 103.7, 98.1, 55.0, 25.0, 23.9, 17.2. HRESIMS: m/z 327.1592(M+H)⁺, C₂₀H₂₃O₄の計算値327.1596.
（Ｅ）−２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，４’，５−トリヒドロキシ−３’−メトキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ１０）。

C₂₀H₂₂O₄ ¹H NMR:(アセトン-d₆, 400MHz) δ 7.13( d, J=16Hz, 1H) 7.02(dd, J=8, 2Hz, 1H), 7.00(s, 1H), 6.92(d, J=8Hz, 1H), 6.85(d, J=16Hz, 1H), 6.66(d, J=2Hz, 1H), 6.30(d, J=2Hz, 1H), 5.20(t, J=7Hz, 1H), 3.95(s, 3H), 3.43(d, J=7Hz, 2H), 1.84(s, 3H), 1.75(s, 3H). ¹³C NMR(アセトン-d₆, 100MHz): δ 155.4, 154.4, 146.7, 145.7, 138.8, 133.6, 131.2, 130.1, 124.2, 122.5, 120.5, 117.7, 114.6, 108.4, 105.3, 102.5, 55.9, 25.8, 25.1, 18.0. HRESIMS: m/z 349.1411(M+Na)⁺, C₂₀H₂₂O₄Naの計算値349.1416.
（Ｅ）−３−（３−メチル−２−ブテニルオキシ）−４’，５−ジヒドロキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ１１）。

C₁₉H₂₂O₃ ¹H NMR(CDCl₃, 400MHz): δ 7.38(dd, J=7, 2Hz, 2H), 7.00(d, J=16Hz, 1H), 6.84(d, J=16Hz, 1H), 6.82(dd, J=7, 2Hz, 2H), 6.64(t, J=2Hz, 1H), 6.56(t, J=2Hz, 1H), 6.33(t, J=2Hz, 1H), 5.50(t, J=7Hz, 1H), 4.51(d, J=7Hz, 2H), 1.81(s, 3H), 1.76(s, 3H). ¹³C NMR(CDCl₃, 100MHz): δ 160.4, 156.7, 155.4, 139.9, 138.4, 130.1, 128.8, 128.0(2C), 126.3, 119.5, 115.6(2C), 105.6, 105.5, 101.3, 64.9, 25.8, 18.2.
４−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，４’，５−トリヒドロキシジヒドロスチルベン（ＵＳＹＤＳ１２）。

C₁₉H₂₂O₄ ¹H NMR:(CD₃OD, 400MHz) δ 6.97(d, J=8Hz, 2H), 6.66(d, J=8Hz, 2H), 6.13(s, 2H), 5.22(t, J=7Hz, 1H), 3.24(d, J=7Hz, 2H), 2.72(m, 2H), 2.64(m, 2H), 1.74(s, 3H), 1.64(s, 3H). ¹³C NMR(CD₃OD, 100MHz): δ 155.5(2C), 154.9, 140.3, 132.9, 129.4, 128.9(2C), 123.6, 114.6(2C), 112.3, 106.5(2C), 38.0, 36.8, 24.5, 21.7, 16.5.
（Ｅ）−２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３−（３−メチル−２−ブテニルオキシ）−３’，４’，５−トリヒドロキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ１４）。

無色の固体、収量１２ｍｇ。ESI-MS: m/z 379 [M-1]^-, ¹H-NMR(400MHz, CD₃OD): δ 7.07(d, J=16Hz, 1H), 6.96(d, J=4Hz, 1H), 6.80(dd, J=8, 4Hz, 1H), 6.79(d, J=16Hz, 1H), 6.74(d, J=8Hz, 1 H), 6.61(d, J=4Hz, 1H), 6.32(d, J=4Hz, 1H), 5.47(m, 1H), 5.06(m, 1H), 4.48(m, 2H), 3.37(m, 2H), 1.78(m, 6H), 1.75(m, 3H), 1.66(m, 3H). ¹³C-NMR(100MHz, CD₃OD): δ 16.75, 16.80, 23.84, 24.45, 24.54, 64.86, 99.04, 103.41, 112.39, 114.96, 118.71, 119.14, 120.14, 123.54, 123.97, 129.51, 129.70, 130.01, 136.78, 137.95, 145.08, 145.09, 155.59, 157.47. HRMS: 379.19148 [M-1]^-,(C₂₄H₂₇O₄の計算値379.19092).
（Ｅ）−２，６−ジ（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，３’，５，５’−テトラヒドロキシスチルベン ＵＳＹＤＳ１５

無色の固体、収量９ｍｇ。ESI-MS: m/z 379 [M-1]^-, ¹H NMR(400MHz, CD₃OD): δ 6.91(s, 1H), 6.82(d, J=16Hz, 1H), 6.73(s, 1H), 6.72(s, 1H), 6.28(s, 1H), 6.27(d, J=16Hz, 1H), 5.12(m, 1H), 3.26(m, 2H), 1.65(m, 6H), 1.59(m, 6H). ¹³C-NMR(100MHz, CD₃OD): δ 16.75(2C), 24.53(2C), 25.60(2C), 100.93, 112.27, 114.86, 117.66(2C), 118.24, 124.06, 124.63(2C), 128.93(2C), 130.20, 133.33, 139.41, 144.73, 144.97, 153.04(2C). HRMS: 379.19149 [M-1]^-,(C₂₄H₂₇O₄の計算値379.19092).
（Ｅ）−２，６−ジ（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，４’，５−トリヒドロキシ−３’−メトキシスチルベン ＵＳＹＤＳ１８

収量５ｍｇ。ESI-MS: m/z 393 [M-1]^-. ¹H NMR:(CD₃OD, 400MHz) δ 7.03(d, J=2Hz, 1H), 6.87(d, J=17Hz, 1H), 6.85(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.77(d, J=8Hz, 1H), 6.33(d, J=17Hz, 1H), 6.30(s, 1H), 5.14(br t, J=6Hz, 2H), 3.88(s, 3H), 3.26(br d, J=6Hz, 4H), 1.66(br s, 6H), 1.60(br s, 6H). ¹³C NMR(CD₃OD, 100MHz): δ 18.37(2C), 26.12(2C), 27.20(2C), 56.53, 102.58, 110.27, 116.42, 119.23(2C), 121.03, 126.02(2C), 126.31, 130.41(2C), 131.7, 134.87, 140.95, 147.51, 149.26, 154.65(2C). HRMS: 417.20363 [M+23]⁺,(C₂₅H₃₀O₄Naの計算値417.20418).

プレニル化ポリヒドロキシスチルベンの化学的修飾および合成
Ａ．Ｏ−プレニルからＣ−プレニルポリヒドロキシスチルベンへの転位
キシレン（２ｍｌ）中のＵＳＹＤＳ２（５ｍｇ）およびフロリジル（５ｍｇ）の混合物を、１２０℃で３０分間マイクロ波反応器（ＣＥＭ Ｄｉｓｃｏｖｅｒ Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ）内で加熱した。生成物を減圧下で乾燥させ、ＮＰＳＣＣを使用して精製した。およそ３０％の合わせた収率における２種の転位生成物が観察された。

観察された主要生成物は、（Ｅ）−４−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，４’，５−トリヒドロキシ−３’−メトキシスチルベン（ＵＳＤＹＳ１３）

であった。

観察された副次的生成物は、（Ｅ）−２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，４’，５−トリヒドロキシ−３’−メトキシスチルベン（ＵＳＹＤＳ１０）であった。

Ｂ．プレニル化ポリヒドロキシスチルベンの合成
１．３，５−ジヒドロキシ安息香酸メチルエステル（１）の調製
無水メタノール（１５０ｍＬ）中の３，５−ジヒドロキシ安息香酸（１０ｇ、６４．９ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化アセチル（２ｍＬ、２８．１ｍｍｏｌ）を滴下により添加した。混合物を還流にてＮ_２下で１７時間加熱した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）中に溶解させ、次いで、飽和炭酸水素ナトリウム（３×１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮することで、２が無色の固体（９．８０ｇ、９０％）：ｍｐ １６７〜１６８℃（ｌｉｔ．^１ ｍｐ １６８〜１６９℃）として得られた。¹H NMR(400MHz, アセトン-d₆) δ 8.66(s, 2H), 7.00(d, J=2.4Hz, 2H), 6.59(t, J=2.4Hz, 2H), 3.83(s, 3H).

２．３−ヒドロキシ−５−ベンジルオキシ安息香酸メチルエステル（２）の調製
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１００ｍＬ）中のＮａＨ（鉱物油中６０％の分散液、３．３ｇ、１３７．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、無水ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の２（１０ｇ、５９．５ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃にてＮ_２下で添加し、続いて、臭化ベンジル（６．４ｍＬ、５３．８ｍｍｏｌ）を滴下により添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、冷水（５０ｍＬ）でクエンチし、冷たい１ＭのＨＣｌ（２０ｍＬ）で酸性化し、ジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２×５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。クロロホルム／エタノールからなる段階的勾配を使用するＮＰＳＣＣを使用して生成物を精製することで、２がオフホワイトの固体（４．５ｇ、６０％）^２：ｍｐ ９７〜９８℃（ｌｉｔ．^３ ｍｐ ９８℃）として得られた。C₁₅H₁₄O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 8.01(s, 1H), 7.43-7.33(m, 5H), 7.24(dd, J=2.0, 1.2Hz, 1H), 7.20(dd, J=2.0, 1.2Hz, 1H), 6.70(t, J=2.0Hz, 1H), 5.07(s, 2H), 3.90(s, 3H).

３．３−ヒドロキシ−５−ベンジルオキシ安息香酸（３）の調製
メタノール（３０ｍＬ）中の２（４．５ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）の溶液に、１ＭのＮａＯＨ（６０ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を添加した。生じた反応混合物を４５℃で４時間Ｎ_２下で撹拌し、続いて、１ＭのＨＣｌ（５０ｍＬ）を添加することで溶液を酸性化した後に、酢酸エチル（３×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２×３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を真空中で蒸発させることで、３がオフホワイトの固体（４．０２ｇ、９４％）：ｍｐ １９６〜１９８℃として得られた。C₁₄H₁₂O₄ ¹H NMR(400MHz, アセトン-d₆) δ 7.42-7.33(m, 5H), 7.21(dd, J=2.4, 1.2Hz, 1H), 7.11(dd, J=2.4, 1.2Hz, 1H), 6.68(t, J=2.4Hz, 1H), 5.07(s, 2H).

４．３−ヒドロキシ−５−メトキシ安息香酸（４）の調製。
臭化ベンジルの代わりにヨウ化メチルを使用することによって、上記されている通りに標題化合物を調製することで、４がオフホワイトの固体、ｍｐ １９９〜２００℃（ｌｉｔ．^４ ｍｐ １９９〜２００℃）として得られた。C₈H₈O₄ ¹H NMR(400MHz, アセトン-d₆) δ 8.01(s, 2H), 7.16(t, J=1.2Hz, 1H), 7.13(t, J=1.2Hz, 1H), 6.15(t, J=2.4Hz, 1H), 3.82(s, 3H).

５．３−アセトキシ−５−ベンジルオキシ安息香酸（５）の調製
無水酢酸（２０ｍＬ、２１．６ｍｍｏｌ）中の３（４．０２ｇ、１７．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン（１０％、０．１５ｍＬ、１．７６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で４時間撹拌し、水（３０ｍＬ）でクエンチし、０．１ＭのＨＣｌ（１０ｍＬ）によって酸性化し、酢酸エチル（３×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２×３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。溶媒を真空中で蒸発させ、ヘキサン／酢酸エチルの混合物（１：１）から再結晶化させることで、５が、桃色がかった結晶（３．８６ｇ、９６％）^５：ｍｐ １３３〜１３４℃として得られた。C₁₆H₁₄O₅ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.59(dd, J=2.4, 1.2Hz, 1H), 7.45(dd, J=2.4, 1.2Hz, 1H), 7.43-7.34(m, 5H), 6.99(t, J=2.4Hz, 1H), 5.1(s, 2H), 2.32(s, 3H).

６．３−アセトキシ−５−メトキシ安息香酸（６）の調製
５に記載されている通りに標題化合物を調製することで、６がオフホワイト固体：ｍｐ １５１〜１５３℃として与えられた。C₁₀H₁₀O₅ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.50(dd, J=2.0, 1.4Hz, 1H), 7.43(dd, J=2.0, 1.4Hz, 1H), 6.90(t, J=2.0Hz, 1H), 3.86(s, 3H), 2.32(s, 3H).

７．３−メトキシ−４−ベンジルオキシベンズアルデヒド（７）の調製
無水ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のＮａＨ（鉱物油中６０％の分散液、１．６ｇ、６６．６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、０℃にてＮ_２下で、無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のバニリン（４−ヒドロキシ−３−メトキシベンズアルデヒド、４ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）を、シリンジを介してゆっくり添加し、続いて、臭化ベンジル（３ｍＬ、２５．２ｍｍｏｌ）を滴下により添加した。混合物を室温で４時間撹拌し、冷水（３０ｍＬ）でクエンチし、冷たい１ＭのＨＣｌ（１５ｍＬ）で酸性化し、ジエチル−エーテル（３×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２×３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で乾燥させることで、７が無色の固体（６ｇ、９２％）：ｍｐ ６０〜６２℃（ｌｉｔ．^６ ｍｐ ６１〜６２℃）として得られた。C₁₅H₁₄O₃ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 9.84(s, 1H)), 7.43-7.31(m, 7H)), 7.00(d, J=8.4Hz, 1H)), 5.25(s, 2H)), 3.95(s, 3H)).

８．４−メトキシ−３−ベンジルオキシベンズアルデヒド（８）の調製
７に記載されている通りに標題化合物を調製することで、８が無色の固体：ｍｐ ６１〜６３℃（ｌｉｔ．^７ ｍｐ ６１〜６３℃）として与えられた。C₁₅H₁₄O₃ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 9.80(s, 1H)), 7.49-7.31(m, 7H)), 7.00(d, J=8.1Hz, 1H)), 5.20(s, 2H)), 3.97(s, 3H)).

９．４−エテニル−２−メトキシ−１−ベンジルオキシベンゼン（９）の調製。
無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（１５ｍＬ）中のメチルトリフェニルホスホニウムブロミド（６．５ｇ、１８．２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎ_２下にて０℃で、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２．３ｇ、２０．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温に温めた。無水ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のベンジルバニリン（７）（４ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により添加し、２時間撹拌し、次いで、冷水（２０ｍＬ）でクエンチし、０．１ＭのＨＣｌ（２０ｍＬ）で酸性化し、酢酸エチル（３×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を２０％塩化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、次いで、減圧下で乾燥させた。ヘキサン／酢酸エチルからなる段階的移動相を使用するＮＰＳＣＣを使用して生成物を精製することで、９が無色の固体（３．３７ｇ、８５％）；ｍｐ ５３〜５４℃（ｌｉｔ．^８ ｍｐ ５０〜５１℃）として得られた。C₁₆H₁₆O₂ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.45-7.28(m, 5H), 6.99(d, J=2Hz, 1H), 6.90(dd, J=4, 1Hz, 1H), 6.83(d, J=4Hz, 1H), 6.68(dd, J=17, 1Hz, 1H), 5.64(dd, J=17, 1Hz, 1H), 5.17(s, 2H), 5.14(d, J=1Hz, 1H), 3.92(s, 3H).

１０．５−エテニル−２−メトキシ−１−ベンジルオキシベンゼン（１０）の調製。
９に記載されている通りに標題化合物を調製することで、１０がオフホワイトの固体；ｍｐ ６８〜６９℃（ｌｉｔ．^９ ｍｐ６８〜６９℃）として与えられた。C₁₆H₁₆O₂ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃): δ 7.48-7.31(m, 5H), 7.01(d, J=2Hz, 1H), 6.97(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.85(d, J=8Hz, 1H), 6.64(dd, J=17, 1Hz, 1H), 5.56(dd, J=17, 1Hz, 1H), 5.17(s, 2H), 5.12(d, J=1Hz, 1H), 3.92(s, 3H).

１１．Ｅ−１−［３−アセトキシ−５−ベンジルオキシフェニル］−２−［３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル］エテン（１１）の調製
キシレン（３ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ビス（２，６−ジイソプロピル）ジヒドロイミダゾリウムクロリド（０．０９３ｇ、１０％、０．２１７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）_２（０．０４８ｇ、１０％、０．２１７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ_２下にて室温で、キシレン２ｍＬ中の５（０．７ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）の酸塩化物を添加し、続いて、４−エチルモルホリン（０．０４ｍＬ、０．３１６ｍｍｏｌ）およびキシレン（３ｍＬ）中の試薬９（０．６２７ｇ、２．６１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１３０℃で１８〜２２時間加熱した。溶媒を真空中で蒸発させ、ＮＰＳＣＣ（移動相としてヘキサン／酢酸エチルが３：１）を使用して生成物を精製することで、１１が黄色の油（０．３３ｇ、３１．６％）として与えられた。C₃₁H₂₈O₅ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.45-7.28(m, 13H), 7.06(d, J=2.0Hz, 1H), 7.02(d, J=17Hz, 1H), 6.97(dd, J=6, 2Hz, 1H), 6.89(m, 1H), 6.62(t, J=2Hz, 1H), 5.18(s, 2H), 5.07(s, 2H), 3.94(s, 3H), 2.30(s, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 169.39, 159.78, 151.81, 149.79, 148.32, 139.82, 137.00, 136.57, 130.48, 129.78, 128.63(2C), 128.58(2C), 128.10, 127.88, 127.55(2C), 127.24(2C), 126.02, 119.98, 113.95, 112.02, 110.50, 109.48, 107.28, 71.0, 70.27, 56.02, 21.19; CI-MS m/z(%): 481(M+1)⁺, 503(M+Na)⁺; HRMS: m/z 503.1828(M+Na⁺), C₃₁H₂₈O₅Naの計算値503.1834.

１２．Ｅ−１−［３−アセトキシ−５−ベンジルオキシフェニル］−２−［３−ベンジルオキシ−４−メトキシフェニル］エテン（１２）の調製。
１１に記載されている通りに標題化合物を調製することで、５の酸塩化物と試薬１０とを縮合した。生成物をヘキサン／トルエンの混合物（２：１）から再結晶化させることで、黄色がかった針状結晶が得られた。C₃₁H₂₈O₅ mp 133-134℃; ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.49-7.29(m, 10H), 7.07(d, J=2Hz, 1H), 7.05(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.97(d, J=16Hz, 1H), 6.95(t, J=2Hz, 1H), 6.89(d, J=8Hz, 1H), 6.84(t, J=2Hz, 1H), 6.82(d, J=16Hz, 1H), 6.62(t, J=2Hz, 1H), 5.18(s, 2H), 5.07(s, 2H), 3.94(s, 3H), 2.30(s, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 169.39, 159.76, 151.80, 149.90, 148.34, 139.83, 137.05, 136.58, 129.94, 129.78, 128.64(2C), 128.60(2C), 128.11, 127.94, 127.58(2C), 127.38(2C), 125.88, 120.59, 112.00, 111.91, 111.81, 110.52, 107.22, 71.16, 70.27, 56.06, 21.18(CH₃CO); CI-MS m/z 481(M+1)⁺, 503(M+Na)⁺; HRMS m/z 503.1832(M+Na)⁺, C₃₁H₂₈O₅Naの計算値503.1834.

１３．Ｅ−１−［３−アセトキシ−５−メトキシフェニル］−２−［３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル］エテン（１３）の調製。
１１に記載されている通りに標題化合物を調製して、６の酸塩化物と試薬９とを縮合することで、標題化合物がオフホワイトの固体；ｍｐ１０４〜１０６℃として与えられた。C₂₅H₂₄O₅ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.45-7.30(m, 8H), 7.07(d, J=2Hz, 1H), 7.03(d, J=16Hz, 1H), 6.98(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.90(d, J=16Hz, 1H), 6.88(m, 1H), 5.18(s, 2H), 3.95(s, 3H), 3.83(s, 3H), 2.31(s, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 169.41, 160.58, 151.83, 149.78, 148.31, 139.76, 137.00, 130.49, 129.72, 128.58(2C), 127.88, 127.24(2C), 126.07, 119.97, 113.94, 111.73, 109.67, 109.46, 106.54, 71.01, 56.02, 55.50, 21.18; CI-MS m/z 405 [M+1]⁺; HRMS m/z 405.1695(M+H)⁺, C₂₅H₂₅O₅の計算値405.1702.

１４．Ｅ−１−［３−ヒドロキシ−５−ベンジルオキシフェニル］−２−［３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル］エテン（１４）の調製
混合溶媒（ＭｅＯＨ／ＴＨＦ／Ｈ_２Ｏ、３／３／３ｍＬ）中のスチルベン１１（０．０４ｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＯＨ（０．０２ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を、０℃にてＮ_２下で添加した。反応混合物を最大で室温まで温め、３時間撹拌した。溶液を０．１ＭのＨＣｌ（５ｍＬ）で酸性化し、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を２０％塩化ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で蒸発させた。ＮＰＳＣＣ（ヘキサン／酢酸エチルの移動相）を使用し、続いて再結晶して生成物を精製することで、１４が無色の固体（０．０１６ｇ、４４．５％）；ｍｐ １１４〜１１５℃として得られた。C₂₉H₂₆O₄ ¹H NMR(400MHz, メタノール-d₄) δ 7.45-7.28(m, 10H), 7.06(d, J=2Hz, 1H), 7.00(d, J=16Hz, 1H), 6.98(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.87(d, J=8Hz, 1H), 6.86(d, J=16Hz, 1H), 6.71(t, J=2.0Hz, 1H), 6.59(t, J=2Hz, 1H), 6.38(t, J=2Hz, 1H), 5.18(s, 2H), 5.07(s, 2H), 3.95(s, 3H); ¹³C NMR(100MHz, メタノール-d₄) δ 160.29, 156.78, 149.76, 148.19, 139.92, 136.98, 136.84, 130.65, 129.20, 128.61(2C), 128.57(2C), 128.02, 127.88, 127.49(2C), 127.26(2C), 126.54, 119.94, 113.96, 109.45, 105.97, 105.69, 101.54, 71.02, 70.01, 56.03; CI-MS: 461(M+Na)⁺, 439(M+1)⁺; HRMS m/z 439.1908(M+H)⁺, C₂₉H₂₇O₄の計算値439.1909.

１５．Ｅ−１−［３−ヒドロキシ−５−ベンジルオキシフェニル］−２−［３−ベンジルオキシ−４−メトキシフェニル］エテン（１５）の調製。
化合物１４に関して記載されている通りに１２の塩基性加水分解を実施することで、標題化合物が無色の固体；ｍｐ １１７〜１１９℃として与えられた。C₂₉H₂₆O₄ ¹H NMR(400MHz, メタノール-d₄) δ 7.49-7.30(m, 10H), 7.07(d, J=2.0Hz, 1H), 7.06(dd, J=8.4, 2.0Hz, 1H), 6.96(d, J=16.0Hz, 1H), 6.87(d, J=8.0Hz, 1H), 6.79(d, J=16.4Hz, 1H), 6.99(t, J=1.6Hz, 1H), 6.57(t, J=2.0Hz, 1H), 6.38(t, J=2.4Hz, 1H), 5.19(s, 2H), 5.07(s, 2H), 3.90(s, 3H). ¹³C NMR(100MHz, メタノール-d₄) δ 160.20, 158.30, 149.68, 148.25, 139.70, 137.41, 137.31, 130.62, 128.16, 128.07(2C), 128.05(2C), 127.52, 127.41(3C), 127.15(2C), 126.62, 120.35, 111.95(2C), 105.67, 104.09, 101.11, 70.88, 69.56, 55.10; CI-MS: m/z 461(M+Na)⁺, 439(M+1)⁺; HRMS m/z 439.1907(M+H)⁺, C₂₉H₂₇O₄の計算値439.1909.

１６．Ｅ−１−［３−ヒドロキシ−５−メトキシフェニル］−２−［３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル］エテン（１６）の調製。
化合物１４に関して記載されている通りに１３の塩基性加水分解を実施することで、標題化合物が、黄色がかった固体；ｍｐ １１０〜１１２℃として与えられた。C₂₃H₂₂O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.45-7.28(m, 5H), 7.07(d, J=2Hz, 1H), 7.00(d, J=16Hz, 1H), 6.98(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.87(d, J=17Hz, 1H), 6.85(d, J=8Hz, 1H), 6.62(t, J=2Hz, 1H), 6.57(t, J=2Hz, 1H), 6.31(t, J=2Hz, 1H), 5.17(s, 2H), 3.94(s, 3H), 3.81(s, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 161.08, 156.86, 149.73, 148.16, 139.85, 136.96, 130.69, 129.11, 128.57(2C), 127.90, 127.29(2C), 126.61, 119.95, 113.97, 109.47, 105.72, 104.73, 100.72, 71.03, 56.03, 55.36; CI-MS, m/z 384(M+Na)⁺, 363(M+1)⁺; HRMS m/z 363.1592(M+H)⁺, C₂₃H₂₃O₄の計算値363.1596.

１７．Ｅ−１−［３−（３−メチルブテニル−２−エニルオキシ）−５−ベンジルオキシフェニル］−２−［３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル］エテン（１７）の調製

無水ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＮａＨ（鉱物油中６０％の分散液、０．００５１ｇ、０．２１３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎ_２下にて０℃で、スチルベン１４（０．０４ｇ、０．０９１ｍｍｏｌ）を滴下によりＤＭＦ（３ｍＬ）中で添加し、続いて、３，３−ジメチルアリルブロミド（０．０１１ｍＬ、０．０９１ｍｍｏｌ）を滴下により添加した。混合物を室温で２〜３時間撹拌し、次いで、冷水（５ｍＬ）でクエンチし、冷却した０．１ＭのＨＣｌ（５ｍＬ）で酸性化し、ジエチルエーテル（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、減圧下で乾燥させた。ＮＰＳＣＣ（移動相としてヘキサン／酢酸エチル）を使用して生成物を精製することで、１７が、黄色がかった油（０．０２ｇ、４３．３％）として与えられた。C₃₄H₃₄O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.46-7.28(m, 10H), 7.07(d, J=2Hz, 1H), 7.01(d, J=16Hz, 1H), 6.96(d, J=2Hz, 1H), 6.90(d, J=16Hz, 1H), 6.87(d, J=8Hz, 1H), 6.73(t, J=2Hz, 1H), 6.68(t, J=2Hz, 1H), 6.48(t, J=2Hz, 1H), 5.52(m, 1H), 5.17(s, 2H), 5.07(s, 2H), 4.52(d, J=7Hz, 2H), 3.95(s, 3H), 1.80(d, J=1Hz, 3H), 1.76(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 160.21, 160.12, 149.78, 148.14, 139.49, 138.35, 137.03, 136.94, 130.76, 128.94, 128.59(2C), 128.56(2C), 127.94, 127.86, 127.54(2C), 127.24(2C), 126.97, 119.87, 119.53, 113.98, 109.43, 105.38, 105.32, 101.14, 71.01, 70.09, 64.84, 56.03, 25.85, 18.22; CI-MS: m/z 529(M+Na)⁺, 507(M+1)⁺; HRMS m/z 507.2528(M+H)⁺, C₃₄H₃₅O₄の計算値507.2535.

１８．Ｅ−１−［３−（３−メチルブテニル−２−エニルオキシ）−５−ベンジルオキシフェニル］−２−［３−ベンジルオキシ−４−メトキシフェニル］エテン（１８）の調製。

化合物１７に関して記載されている通りに１５のプレニル化を実施することで、標題化合物がオフホワイトの固体；ｍｐ ８８〜９０℃として与えられた。C₃₄H₃₄O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.49-7.32(m, 10H), 7.08(d, J=2Hz, 1H), 7.06(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.97(d, J=16Hz, 1H), 6.89(d, J=8Hz, 1H), 6.82(d, J=16Hz, 1H), 6.71(t, J=2Hz, 1H), 6.66(t, J=2Hz, 1H), 6.47(t, J=2Hz, 1H), 5.53(m, 1H), 5.20(s, 2H), 5.07(s, 2H), 4.52(d, J=6Hz, 2H), 3.91(s, 3H), 1.80(d, J=1Hz, 3H), 1.75(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 161.04, 160.95, 150.51, 149.11, 140.24, 139.03, 137.81, 137.67, 130.91, 129.57, 129.27(4C), 128.66, 128.58, 128.22(2C), 128.05(2C), 127.50, 121.10, 120.20, 112.48, 112.40, 105.95, 105.86, 101.60, 71.55, 70.47, 65.18, 56.36, 26.00, 18.33; CI-MS: m/z 529(M+Na)⁺, 507(M+1)⁺; HRMS m/z 507.2530(M+H)⁺, C₃₄H₃₅O₄の計算値507.2535.

１９．Ｅ−１−［３−（３−メチルブテニル−２−エニルオキシ）−５−メトキシフェニル］−２−［３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル］エテン（１９）の調製。

化合物１７に関して記載されている通りに１６のプレニル化を実施することで、標題化合物がオフホワイトの結晶；ｍｐ ６６〜６９℃として与えられた。C₂₈H₃₀O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.45-7.28(m, 5H), 7.08(d, J=2Hz, 1H), 7.02(d, J=16Hz, 1H), 6.98(d, J=2Hz, 1H), 6.90(d, J=16Hz, 1H), 6.87(d, J=8Hz, 1H), 6.67(t, J=2Hz, 1H), 6.64(t, J=2Hz, 1H), 6.40(t, J=2Hz, 1H), 5.53(m, 1H), 5.17(s, 2H), 4.53(d, J=7Hz, 2H), 3.96(s, 3H), 3.81(s, 3H), 1.81(d, J=1Hz, 3H), 1.76(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 160.91, 160.23, 149.76, 148.14, 139.46, 138.35, 137.04, 130.78, 128.90, 128.56(2C), 127.87, 127.25(2C), 127.02, 119.86, 119.56, 113.98, 109.44, 104.96, 104.49, 100.37, 71.02, 64.82, 56.04, 55.36, 25.86, 18.22; CI-MS: m/z 453(M+Na)⁺; HRMS m/z 453.2036(M+Na)⁺, C₂₈H₃₀O₄Naの計算値453.2042.

２０．（Ｅ）−３−（３−メチル−２−ブテニルオキシ）−４’，５−ジヒドロキシ−３’−メトキシスチルベン（２０、ＵＳＹＤＳ２と同等）の調製
無水エタノール（８ｍＬ）中の１７（０．０２ｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４−シクロヘキサジエン（３ｍＬ、０．０３０ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％、０．００２ｇ）を添加した。混合物をＮ_２下で撹拌し、８０℃で４時間還流した。溶液を濾過し、減圧下で乾燥させることで油残渣が与えられ、これを、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって精製することで、２０が、黄色がかった油として得られた。C₂₀H₂₂O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.02(d, J=2Hz, 1H), 7.00(d, J=16Hz, 1H), 6.99(d, J=2Hz, 1H), 6.91(dd, J=8, 1Hz, 1H), 6.85(d, J=16Hz, 1H), 6.64(t, J=2Hz, 1H), 6.56(t, J=2Hz, 1H), 6.33(t, J=2Hz, 1H), 5.53(m, 1H), 4.52(d, J=7Hz, 2H), 3.95(s, 3H), 1.82(d, J=1Hz, 3H), 1.76(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 160.38, 156.70, 146.67, 145.69, 139.87, 138.37, 129.73, 129.29, 126.15, 120.63, 119.49, 114.54, 108.24, 105.58, 105.38, 101.29, 64.85, 55.92, 25.85, 18.22; CI-MS: m/z 325(M-1)^-; HRMS m/z 327.1588(M+H)⁺, C₂₀H₂₃O₄の計算値327.1596.

２１．３−（３−メチル−２−ブテニルオキシ）−４’，５−ジヒドロキシ−３’−メトキシジヒドロ−スチルベン（２１）の調製。

化合物２０のベンジル基を除去中に、側鎖上の二重結合の水素化によって標題化合物を得た。標題化合物は薄黄色の油として得た。C₂₀H₂₄O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 6.84(d, J=8Hz, 1H), 6.69(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.62(d, J=2Hz, 1H), 6.34(t, J=2Hz, 1H), 6.26(t, J=2.0Hz, 1H), 6.24(t, J=2Hz, 1H), ), 5.46(m, 1H), 5.46(s, 1H), 4.68(s, 1H), 4.53(d, J=7Hz, 2H), 3.84(s, 3H), 2.85(m, 4H), 1.80(d, J=0.4Hz, 3H), 1.73(d, J=0.5Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 160.11, 156.44, 146.22, 144.46, 143.73, 138.23, 133.61, 120.95, 119.55, 114.15, 111.10, 107.89, 107.58, 99.62, 64.72, 55.84, 38.29, 37.23, 25.84, 18.18; CI-MS: m/z 351(M+Na)⁺; HRMS m/z 351.1566(M+Na)⁺, C₂₀H₂₄O₄Naの計算値351.1572.

２２．（Ｅ）−３−（３−メチル−２−ブテニルオキシ）−３’，５−ジヒドロキシ−４’−メトキシスチルベン（２２）の調製。

化合物２０に関して記載されている通りに１８のベンジル基の除去を実施することで、標題化合物が薄黄色の油として与えられた。C₂₀H₂₂O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.13(d, J=2Hz, 1H), 6.98(d, J=16Hz, 1H), 6.97(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.86(d, J=8Hz, 1H), 6.86(d, J=16Hz, 1H), 6.64(t, J=2Hz, 1H), 6.57(t, J=2Hz, 1H), 6.33(t, J=2Hz, 1H), 5.60(s, 1H), 5.52(m, 1H), 4.77(s, 1H), 4.52(d, J=9Hz, 2H), 3.91(s, 3H), 1.82(d, J=1Hz, 3H), 1.76(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 160.37, 156.69, 146.51, 145.75, 139.83, 138.36, 130.87, 128.92, 126.78, 119.51, 119.40, 111.84, 110.62, 105.66, 105.48, 101.33, 65.18, 56.36, 26.00, 18.33; CI-MS: m/z 349.1408(M+Na)⁺, C₂₀H₂₂O₄Naの計算値349.1416.

２３．３−（３−メチル−２−ブテニルオキシ）−３’，５−ジヒドロキシ−４’−メトキシジヒドロ−スチルベン（２３）の調製。

化合物１８のベンジル基の除去中、側鎖上の二重結合の水素化によって標題化合物を得た。標題化合物は薄黄色の油として得た。C₂₀H₂₄O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 6.79(d, J=2Hz, 1H), 6.77(d, J=4Hz, 1H), 6.66(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.35(t, J=2Hz, 1H), 6.27(m, 1H), 5.56(s, 1H), 5.50(m, 1H), 4.74(s, 1H), 4.46(d, J=7Hz, 2H), 3.88(s, 3H), 2.80(m, 4H), 1.80(d, J=1Hz, 3H), 1.74(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 160.11, 156.42, 145.41, 144.80, 144.51, 138.18, 135.07, 119.73, 119.59, 114.59, 110.55, 107.81, 107.49, 99.64, 64.73, 55.00, 38.05, 36.89, 25.83, 18.18; CI-MS: m/z 351(M+Na)⁺; HRMS m/z 351.1566(M+Na)⁺, C₂₀H₂₄O₄Naの計算値351.1572.

２４．Ｅ−１−［２−（３−メチル−２−ブテニル）−５−ヒドロキシ−３−ベンジルオキシフェニル］−２−［３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル］エテン（２４）の調製

トルエン（３０ｍＬ）中の１７（０．０２４ｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）の溶液に、１００〜２００メッシュのフロリジル（０．２４ｇ、１０×）を添加し、１１０℃にてＮ_２下で４時間加熱した。反応混合物を濾過し、真空中で蒸発させ、ＮＰＳＣＣ（移動相としてヘキサン／酢酸エチル）を使用して赤茶色残渣を精製することで、茶色がかった固体（０．０１４ｇ、５８．３％）が得られた。生成物をヘキサン／酢酸エチル（３：１）混合物から再結晶化させることで、２４がオフホワイトの固体；ｍｐ１４５〜１５０℃として与えられた。C₃₄H₃₄O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.46-7.28(m, 10H), 7.20(d, J=16Hz, 1H), 7.06(d, J=2Hz, 1H), 6.97(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.88(d, J=16Hz, 1H), 6.87(d, J=8Hz, 1H), 6.68(d, J=2Hz, 1H), 6.40(d, J=2Hz, 1H), 5.18(s, 2H), 5.17(m, 1H), 5.05(s, 2H), 4.69(s, 1H), 3.94(s, 3H), 3.48(d, J=7Hz, 2H), 1.73(d, J=1Hz, 3H), 1.67(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 157.60, 154.27, 149.76, 148.08, 138.31, 137.14, 137.04, 131.18, 130.59, 130.35, 128.56(2C), 128.49(2C), 127.86, 127.78, 127.23(2C), 127.21(2C), 124.74, 123.63, 121.13, 119.85,113.99, 109.47, 104.31, 99.53, 71.03, 70.29, 55.98, 25.77, 24.69, 18.01.

２５．Ｅ−１−［２−（３−メチル−２−ブテニル）−５−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル］−２−［３−メトキシ−４−ベンジルオキシフェニル］エテン（２５）の調製。

化合物２４に関して記載されている通りに１９の転位を実施することで、桃色がかった固体：ｍｐ １６１〜１６２℃が与えられた。C₂₈H₃₀O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.46-7.28(m, 5H), 7.19(d, J=16Hz, 1H), 7.06(d, J=2Hz, 1H), 6.97(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.88(d, J=16Hz, 1H), 6.87(d, J=8Hz, 1H), 6.66(t, J=2Hz, 1H), 6.40(t, J=2Hz, 1H), 5.18(s, 2H), 5.13(m, 1H), 4.64(s, 1H), 3.94(s, 3H), 3.80(s, 3H), 3.42(d, J=6Hz, 2H), 1.80(d, J=1Hz, 3H), 1.68(d, J=1Hz, 3H);¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 158.56, 154.35, 149.76, 148.07, 138.11, 137.04, 131.21, 130.63, 130.24, 128.56(2C), 127.86, 127.22(2C), 124.73, 123.61, 120.78, 119.84, 113.99, 109.42, 103.88, 98.21, 71.03, 55.97, 55.68, 25.77, 24.46, 17.98; CI-MS: m/z 453(M+Na)⁺, 431(M+1)⁺; HRMS m/z 431.2217(M+1)⁺,C₂₈H₃₁O₄の計算値431.2222.

２６．（Ｅ）−２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−３，４’，５−トリヒドロキシ−３’−メトキシ−スチルベン（２６、ＵＳＹＤＳ１０と同等）の調製。
無水エタノール（６ｍＬ）中の２４（０．０２ｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４−シクロヘキサジエン（３ｍＬ）およびＰｄ−Ｃ（１０％、０．００３５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をＮ_２下で撹拌し、８０℃で４時間加熱した。溶液を濾過し、真空中で蒸発させることで油残渣が与えられ、これを、ＮＰＳＣＣ（移動相としてヘキサン／酢酸エチル）、続いて順相ＨＰＬＣ（移動相として２：１のヘキサン／イソプロパノール）を使用して精製することで、標題化合物が薄黄色の油として得られた。ＵＳＹＤＳ１０のものに類似したデータ。

２７．（Ｅ）−２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−５，４’−ジヒドロキシ−３’，３−ジメトキシ−スチルベン（２７、ＵＳＹＤＳ１と同等）の調製。
化合物２５に関して記載されている通りの手順を使用して標題化合物を調製することで、２７が薄黄色の油として与えられた。C₂₁H₂₄O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 7.17(d, J=16Hz, 1H), 7.01(dd, J=12, 2Hz, 1H), 7.0(d, J=2Hz, 1H), 6.91(d, J=8Hz, 1H), 6.87(d, J=16Hz, 1H), 6.66(t, J=2Hz, 1H), 6.36(t, J=2Hz, 1H), 5.15(m, 1H), 4.64(s, 1H), 3.94(s, 3H), 3.80(s, 3H), 3.42(d, J=7Hz, 2H), 1.81(d, J=1Hz, 3H), 1.68(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 158.57, 154.37, 146.68, 145.60, 138.18, 130.61, 130.44, 130.27, 124.28, 123.67, 120.73, 120.58, 114.55, 108.26, 103.88, 98.18, 55.88, 55.71, 25.79, 24.48, 17.98; CI-MS: m/z 339(M-1)^-; HRMS m/z 363.1566(M+Na)⁺, C₂₁H₂₄O₄Naの計算値363.1572.

２８．２−（３−メチル−２−ブテン−１−イル）−５，４−ジヒドロキシ−３’，３−ジメトキシジヒドロ−スチルベン（２８）の調製。

化合物２７のベンジル基の除去中に、側鎖上の二重結合の水素化によって標題化合物を得た。標題化合物は薄黄色の油として得た。C₂₁H₂₆O₄ ¹H NMR(400MHz, CDCl₃) δ 6.86(d, J=8Hz, 1H), 6.70(dd, J=8, 2Hz, 1H), 6.64(d, J=2Hz, 1H), 6.30(d, J=2Hz, 1H), 6.24(d, J=2Hz, 1H), 5.48(s, 1H), 5.07(m, 1H), 4.67(s, 1H), 3.85(s, 3H), 3.78(s, 3H), 3.28(d, J=6Hz, 2H), 2.82(m, 4H), 1.74(d, J=1Hz, 3H), 1.66(d, J=1Hz, 3H); ¹³C NMR(100MHz, CDCl₃) δ 158.63, 154.23, 146.23, 143.73, 142.01, 133.93, 130.59, 123.87, 120.92, 120.67, 114.21, 111.02, 107.96, 96.90, 55.84, 55.60, 37.19, 35.49, 25.76, 24.38, 17.95; CI-MS: m/z 365(M+Na)⁺; HRMS m/z 365.1723(M+Na)⁺, C₂₁H₂₆O₄Naの計算値365.1729.

プレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体の生物学的評価
１．プレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体の抗癌活性。
Ａ）７種のプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体、すなわちＵＳＹＤＳ１からＵＳＹＤＳ７を、細胞成長の阻害について、下記の表１に示されている通り、６０個の細胞株に対してある範囲の濃度（１×１０^−８〜１×１０^−４Ｍ）で、国立癌研究所（ＮＣＩ）、ＵＳＡで評価した。

ｉｎ ｖｉｔｒｏ癌スクリーンの方法論：ＮＣＩから採用した一般的方法
ヒト腫瘍細胞株を、５％のウシ胎児血清および２ｍＭのＬ−グルタミンを含有するＲＰＭＩ１６４０培地中で成長させた。典型的実験用に、細胞を１００μＬ中の９６ウェルマイクロタイタープレートに５，０００から４０，０００個細胞／ウェルを範囲とするプレーティング密度で、個々の細胞株の倍加時間に依存して播腫した。細胞接種後、マイクロタイタープレートを、３７℃、５％のＣＯ_２、９５％の空気および１００％の相対湿度で２４時間、薬物の添加より前にインキュベートした。

２４時間後、薬物添加時の各細胞株に関する細胞集団の測定を表すために、各細胞株の２つのプレートをｉｎ ｓｉｔｕで、トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）で固定した。実験薬物を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で所望の最終的な最大試験濃度の４００倍で可溶化し、使用より前に冷凍保存した。薬物添加時に、凍結濃縮物のアリコットを解凍し、所望の最終的な最大試験濃度の２倍に、５０μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含有する完全培地で希釈した。該薬物１００μＬのアリコットを、培地１００μＬをすでに含有する適切なマイクロタイターウェルに添加して、必要とする最終的な薬物濃度をもたらした。

薬物添加に続いて、プレートを追加の４８時間、３７℃、５％のＣＯ_２、９５％の空気、および１００％の相対湿度でインキュベートした。付着細胞では、該アッセイを冷たいＴＣＡの添加によって終結させた。細胞をｉｎ ｓｉｔｕで、冷たい５０％（ｗ／ｖ）のＴＣＡ（最終濃度、１０％のＴＣＡ）５０μＬの穏やかな添加によって固定し、６０分間４℃でインキュベートした。上清を捨て、プレートを水道水で５回洗浄し、風乾した。１％の酢酸中０．４％（ｗ／ｖ）のスルホローダミンＢ（ＳＲＢ）溶液（１００μＬ）を、各ウェルに添加し、プレートを１０分間室温でインキュベートした。染色後、結合しなかった色素を、１％の酢酸で５回洗浄することによって除去し、プレートを風乾した。結合染色剤を引き続いて１０ｍＭのトリス塩基で可溶化し、吸光度を自動プレートリーダー上にて５１５ｎｍの波長で読み取った。浮遊細胞では、該方法論は、８０％のＴＣＡ（最終濃度、１６％ＴＣＡ）５０μＬを穏やかに添加することにより定着細胞をウェルの底に固定することによってアッセイを終結させることを除いて同じであり、吸光度を自動化プレートリーダー上にて５１５ｎｍの波長で読み取った。ＧＩ_５０値（細胞成長の５０％阻害に必要とされる濃度）、ＴＧＩ値（細胞成長の全阻害に必要とされる濃度）およびＬＣ_５０値（５０％の細胞致死率または死亡に必要とされる濃度）を、ＵＳＹＤＳ１からＵＳＹＤＳ７の各々について算出し、結果を下記の表１から３に示す。

つまり、全てのプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体ＵＳＹＤＳ１からＵＳＹＤＳ７は、癌細胞成長の構造依存性阻害を呈した。一部の細胞株において、成長はナノモル濃度で阻害された。癌細胞成長の阻害において、ＵＳＹＤＳ１が最も強力な活性を表し、続いて、ＵＳＹＤＳ５次いでＵＳＹＤＳ２であった。試験した他のｐＰＨＯＳ化合物は、中程度の阻害剤であることが示された。図３から９は、化合物ＵＳＹＤＳ１からＵＳＹＤＳ７による、上記の表に呈示されている様々な細胞株に関するヒト癌細胞成長の阻害のための用量応答曲線を示す。

注目に値するのは、これらのｐＰＨＯＳが、細胞死を引き起こす（ＬＣ_５０値）または壊死を引き起こす濃度において、細胞成長を阻害する（ＧＩ_５０値）ために必要とされるものより、少なくとも１０倍の超過を必要としたことである。これは、ｐＰＨＯＳは、プログラム細胞死（アポトーシス）または細胞周期停止を癌細胞に起こすことが可能であることを示す。

Ｂ）２つのプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体、すなわちＵＳＹＤＳ１０およびＵＳＹＤＳ１４を、細胞成長の阻害に関して、下記の表４Ａおよび４Ｂに示されている通り、示されている細胞株に対して、ある範囲の濃度（１×１０^−８〜１×１０^−４Ｍ）にて、国立癌研究所（ＮＣＩ）、ＵＳＡで評価した。

つまり、全てのプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体ＵＳＹＤＳ１０およびＵＳＹＤＳ１４は、癌細胞成長の構造依存性阻害を呈した。

２．様々なヒドロキシスチルベンの算出Ｌｏｇ分配係数（ＬｏｇＰ）値。
ＵＳＹＤＳ１およびＵＳＹＤＳ２ならびに公知ヒドロキシスチルベンのための算出ＬｏｇＰ値を下記の表５に示す。

ｐＰＨＯＳ化合物、例えばＵＳＹＤＳ１およびＵＳＹＤＳ２の強力な阻害は、それらの算出Ｌｏｇ分配係数（ＬｏｇＰ）値によって実証されている通り、それらの増加された疎水性の点から説明することができる。ＵＳＹＤＳ１およびＵＳＹＤＳ２は、ヒドロキシスチルベンレスベラトロールの値のほとんど２倍のＬｏｇＰ値を有する。治療的化合物に対するＬｏｇＰの効果は、主に、組織の透過および分布に関連する。より高いＬｏｇＰ値は、化合物がより簡便に細胞膜を通過し、細胞に入ることを可能にする。

３．ＵＶ照射ヒト皮膚細胞に対するプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体の効果。
正常な成人ヒトケラチノサイト（ＮＨＫ）細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｖｉｃ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を、１２ウェル培養プレート中の、カルシウムおよびヒトケラチノサイト成長サプリメント（ＨＫＧＳ、１ｍＬ当たり０．２ｎｇのＥＧＦ、１ｍＬ当たり５ｍｇのインスリン、１ｍＬ当たり５ｍｇのトランスフェリン、１ｍＬ当たり０．１８ｍｇのヒドロコルチゾン、および０．２％のウシ下垂体抽出物を含有）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｖｉｃ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を補充したケラチノサイト成長培地Ｅｐｉｌｉｆｅ中で、サブコンフルエント状態に達するまで培養した。細胞を、２４ウェルプレート中１ｍＬ／ウェル当たり５×１０^３細胞の密度まで、２４時間３７℃にて加湿インキュベーター内で５％二酸化炭素を用いて培養し、下に記載されているプロトコールに従って試験した。

ＵＶ照射の最適用量の決定。
上記されている通りの密度で播種した細胞を、ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）で２回洗浄し、次いで、ＭＥＤ（極小紅斑量、１ＭＥＤ＝２５．４３／光強度）として知られているＵＶＡおよびＵＶＢの用量範囲内で照射した。細胞を成長培地に置き換え、約２４時間３７℃にて加湿インキュベーター内で５％二酸化炭素を用いてインキュベートした。ＭＴＳアッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱ_{ｕｅｏｕｓ} Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ）（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｖｉｃ Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を使用して、細胞生存能を測定した。

レスキューアッセイ。
細胞をＰＢＳで２回洗浄し、ＰＢＳの薄層に置き換え、次いで、上記で決定された通りのＵＶＡおよびＵＶＢの最適用量で照射した。照射後直ちに細胞を、ある範囲の濃度で試験試料を含有する新鮮な培養培地に置き換え、加湿ＣＯ_２インキュベーター内にて３７℃で２４時間さらにインキュベートした。上清を回収し、ＥＬＩＳＡキットを使用するＰＧＥ２およびサイトカイン（ＩＬ１、６、８、１０＆１２）濃度の決定まで−８０℃で保持した。

保護アッセイ。
細胞をＰＢＳで２回洗浄し、試験化合物の異なる濃度を含有するＰＢＳの薄層に置き換え、次いで、上記で決定された通りのＵＶＡおよびＵＶＢの最適用量で照射した。照射後直ちに細胞を、新鮮な培養培地に置き換え、加湿ＣＯ_２インキュベーター内にて３７℃で２４時間さらにインキュベートした。上清を回収し、ＥＬＩＳＡキットを使用するＰＧＥ２およびサイトカイン（ＩＬ１、６、８、１０＆１２）濃度の決定まで−８０℃で保持した。

偽処置した対照培養物を同一に取り扱ったが、ＵＶ照射に曝露しなかった。ＵＳＹＤＳ１、２、３、５、および７を含めたスチルベン化合物ならびにプロポリス抽出物を、０．１、１および１０μＭまたはμｇ／ｍＬで試験した。

ＵＶ照射の最適用量の決定に関する結果により、ＵＶＡおよびＵＶＢ照射の１ＭＥＤで、細胞生存能に対する有意な効果はないことが明らかになった。したがって、この条件を、レスキューアッセイにおけるサイトカインのレベルに対するスチルベンおよびプロポリス抽出物の効果の調査のために選択した。

ＵＶ照射ヒト表皮ケラチノサイト（ＨＥＫ）中におけるサイトカイン産生のモジュレーションに対する予備調査において、ＵＳＹＤＳ１およびＵＳＹＤＳ２の混合物は、ＩＬ−６、ＴＧＦａ、Ｇ−ＣＳＦおよびＧＭ−ＣＳＦの産生を中程度（２〜３倍）に阻害することが観察された。しかしながら、プレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体は、ＵＶ照射細胞からのＩＬ−８およびＩＬ−１ｒα産生を有意に（４〜５倍）増加させることが見いだされた。ＩＬ−８は、免疫応答の開始に役割を果たすことが知られている。ＩＬ−１ｒα（自然発生のサイトカイン受容体アンタゴニスト）は、他方で、炎症プロセス中のＩＬ−１の有害作用の阻害に重要な役割を果たす。そのため、これらの予備結果は、本発明のプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体が免疫抑制および炎症を伴う状態の処置のための良い候補であり得ることを実証している。

４．スチルベンおよびプロポリス抽出物の抗酸化活性
１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ^□）スカベンジング活性アッセイ
（１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）ＤＰＰＨアッセイは、通常、天然生成物の化合物または抽出物のフリーラジカルスカベンジング能力を、５１７ｎｍにおけるＤＰＰＨ^●ラジカル低減の測定によって試験するために使用される。そのラジカル形態において、ＤＰＰＨ^●は、その奇電子により５１７ｎｍにおける強い吸収を示す。抗酸化剤またはラジカルスカベンジャーによる低減で、吸収が消失し、ラジカルのスカベンジングによって生じる脱色化は、取られた電子の数に関して化学量論的である（ＤＰＰＨ^●＋ＡＨ→ＤＰＰＨ：Ｈ＋Ａ^●）。ＤＰＰＨアッセイは、下に記載されている通りの段階的手順において実施した。

ＤＰＰＨ（０．１ｍＭ）のメタノール溶液を暗い容器内にて室温で２０分間撹拌した。溶液を４００〜７５０ｎｍの間で走査することで、最大波長（λｍａｘ、約５１０ｎｍ）を得た。ＤＰＰＨ溶液の濃度をメタノールで調整することで、およそ１．０の最大吸光度がもたらされた。異なる濃度の試験試料および標準的な抗酸化剤溶液（０．０５ｍＬ）を、キュベット中のメタノールＤＰＰＨ溶液０．９５ｍＬに添加した。試験試料の最終濃度は、０．１μＭ、１μＭ、１０μＭ、５０μＭ、１００μＭおよび２００μＭであった。混合物を激しく振盪し、暗所において３０分間室温で静置した。生じた溶液の吸光度を最大波長（約５１０ｎｍ）で測定した。吸光度の減少で、試験試料のフリーラジカルスカベンジング効果が示された。試験試料の用量応答曲線を確立して、それらのＩＣ_５０値（ＵＶ吸光度の５０％低減を示す濃度）を決定した。

結果
この研究におけるｐＰＨＯＳ化合物は、強い効果を呈したＵＳＹＤＳ７を除いて、フリーラジカルスカベンジングに対して中程度から弱い効果を呈した。これらの結果を図１０に表す。

５．ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）依存性デアセチラーゼサーチュイン−２（ＳＩＲＴ１）に対するスチルベン誘導体の効果。
ＳＩＲＴ１は、ＮＡＤ依存性ヒストンデアセチラーゼであるＳｉｒ２ファミリー（クラスΙΙΙ）のメンバーである。ＳＩＲＴ１酵素による脱アセチル化は、ヒストン、腫瘍サプレッサーｐ５３、フォークヘッド転写因子（ＦＯＸＯ）、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体−γ（ＰＰＡＲγ）および共活性化剤−１α（ＰＧＣ−１α）を含めて、多くの基質を標的にすることができる。ＳＩＲＴ１は、炎症、細胞の老化、アポトーシス／増殖、代謝および細胞周期調節のような多くの生理病理学的プロセスの調節に関与していることを示した（Ｃｈｕｎｇ、Ｙａｏら、２０１０）。したがって、ＳＩＲＴ１活性をモジュレートすることは、癌、メタボリック症候群、肥満症、神経変性疾患、骨格筋機能不全および老化関連疾患などの多くの疾患を制御するための潜在的治療標的であり得る。

ＳＩＲＴ１アッセイキット（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ、Ｍｉｃｈｉｇａｎ、ＵＳＡ）は、ＳＩＲＴ１阻害剤または活性化剤のスクリーニングのための蛍光系の方法を提供している。製造者からの指示に従ってアッセイを実施した。簡潔には、アッセイは２つのステップからなり、両方とも同じプレートで実行される。第１のステップにおいて、ｐ５３配列Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ（ε−アセチル）−ＡＭＣ（７−アミノ−４−メチルクマリン）を含む基質を、ヒト組換えＳＩＲＴ１とともにその補助基質ＮＡＤ^＋と一緒にインキュベートする。脱アセチル化により基質を感作することで、第２のステップにおける発色剤での処理により蛍光生成物を放出するが、これを、蛍光定量プレートリーダーを使用して３５０〜３６０ｎｍの励起波長および４５０〜４６５ｎｍの発光波長で分析した。スチルベンを３つの濃度（１μＭ、１０μＭおよび１００μＭ）でアッセイした。データは２つの独立した実験を表し、各々を３連で実行した。

結果
レスベラトロールを除く全てのスチルベンが、図１１ＡおよびＢに示されている通り、ＳＩＲＴ１の濃度依存性阻害を呈した。ＳＩＲＴ１活性のモジュレーションは、癌、メタボリック症候群、肥満症、神経変性疾患、および老化関連疾患を含めて、疾患の処置のための治療剤の開発につながり得る。

６．ＵＳＹＤＳ１、ＵＳＹＤＳ２、およびカヤツリグサ科草本１型プロポリスのエタノール抽出物の抗細菌活性
要約。
最小阻害濃度（ＭＩＣ）スクリーニングを、１４種の細菌株および４種の化合物で実行した。臨床検査標準協会（ＣＬＳＩ）ガイドラインに従ってブロス微量希釈法によりＭＩＣを決定した。ＭＩＣスクリーニングを、６４μｇ／ｍｌから０．０６μｇ／ｍｌの系列２倍希釈で化合物を含有する９６ウェルプレート上で実行した。細菌接種物を、カチオン調整Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ培地ブロス中にて、毎週新鮮に調製される適切な寒天プレート上で成長した培養物から調製した。成長対照および無菌対照を各アッセイプレートに含めた。アッセイプレートを周囲空気インキュベーター内にて３５±２℃で１６〜２０時間（ＭＲＳＡは２４時間）インキュベートし、細菌の成長を観察および記録した。ＭＩＣスクリーニングにおける参照化合物レボフロキサシンの全てのＭＩＣは、ＣＬＳＩ Ｓ１００−Ａ２０に記載されている標準範囲内である。３種の試験試料の効力は、ＵＳＹＤＳ１＞ＵＳＹＤＳ２＞エタノールのプロポリス抽出物の順である。

１．材料
１．１．菌株
ＭＩＣスクリーニングのための細菌パネル

略語：ＴＳＡ、トリプチケースソイ寒天；ＣＡＭＨＢ、カチオン調整Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎブロス；ＨＴＭ、ヘモフィルス試験培地；ＡＭＰ、アンピシリン；ＡＺＴ、アズトレオナム；ＣＦＸ、セフォキシチン；ＣＰＤ、セフポドキシム；ＣＡＺ、セフタジジム；ＣＨＬ、クロラムフェニコール；ＰＩＰ、ピペラシリン；ＴＥＴ、テトラサイクリン；ＩＭＩ、イミペネム；ＶＡＮ、バンコマイシン；ＰＥＮ、ペニシリン；ＥＲＹ、エリスロマイシン；ＭＥＴ、メチシリン；ＯＸＡ、オキサシリン；ＬＥＶ、レボフロキサシン；ＣＬＩ、クリンダマイシン。

１．２．培地および試薬
トリプチケースソイ寒天（ＢＤ２１１０４３）、カチオン調整Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎブロス（ＢＤ２１２３２２）、ヘモフィルス試験培地ベース（Ｆｌｕｋａ５１２９５）、ヘミン（Ｆｌｕｋａ５１２８０）、β−ＮＡＤ（Ｆｌｕｋａ４３４１０）、レボフロキサシン（Ｓｉｇｍａ２８２６６）、ヒツジ血液（Ｑｕａｄ Ｆｉｖｅ６３０−５００）、Ｌｙｓｅｄウマ血液（Ｑｕａｄ Ｆｉｖｅ２０５−５００）、０．５ ＭｃＦａｒｌａｎｄ硫酸バリウム標準物質、無菌０．８５％ＮａＣｌ（ｗ／ｖ）。

２．方法
２．１．細菌株調製
Ａ．ＭＩＣスクリーニングの２日前に、貯蔵凍結（−８０℃）から細菌株を回復する。適切な寒天プレートの表面上に画線し、プレートを２０〜２４時間３５±２℃にて適切な雰囲気中でインキュベートする。
連鎖球菌：ＴＳＡ ＩＩ、５％ＣＯ_２
腸球菌：ＴＳＡ ＩＩ、周囲空気
インフルエンザ菌：チョコレート寒天、５％ＣＯ_２
パネル中の他の菌株：ＴＳＡ、周囲空気
Ｂ．同様の形態の５〜１０ウェルの単離コロニーを選択し、新鮮な寒天プレート上に無菌ループを使用して再び画線する。プレートを２０〜２４時間３５±２℃にて適切な雰囲気中で、上記の通りインキュベートする。

２．２．化合物プレートを調製
化合物原液を１００％ＤＭＳＯ中で、ＭＩＣスクリーニングの当日に調製し、直ちに使用した。化合物ストック濃度＝［（最も高い試験濃度）×１０３μｌ／３μｌ］（例えば、必要とされる最も高い試験濃度がアッセイプレート中６４μｇ／ｍｌであるならば、ストック濃度＝６４×１０３／３＝２．２ｍｇ／ｍｌである）。試験化合物の効力は、別段に明記されていない限り１００％と推定し、一方参照化合物の効力を、製造者の分析データに従って算出する。
１化合物当たり１１の２倍希釈を作製し、次いで、３μｌを試験プレートの各ウェルに移す。ＭＩＣスクリーニングにおけるＤＭＳＯの最終濃度は約３％である。

２．３．細菌接種物を調製
Ａ．４℃の冷蔵庫から培地ブロスを取り出し、それを室温まで温めておく。
Ｂ．コロニーを新鮮な培養プレートから生理食塩水５ｍｌ中に無菌ループで移し、よく混合する。濁度計を使用して、０．５ ＭｃＦａｒｌａｎｄ硫酸バリウム標準物質に対して濁度を測定し調整する。別法として、１〜２個のコロニーを生理食塩水５００μｌ中に移し、プレートリーダーを使用してＯＤ６２５を約０．１に調整する。
Ｃ．細菌接種材料を、グラム陽性および偏好性の菌株は１：２８０に、およびグラム陰性菌株は１：４００に、対応する培地ブロス中で希釈する（ＣＡＭＨＢ、ＣＡＭＨＢ＋３％の溶解ウマ血液、ＨＴＭ）（例えば、接種材料３５．６μｌをＣＡＭＨＢ１０ｍｌ中に、または接種材料２５μｌをＣＡＭＨＢ１０ｍｌ中に）。
Ｈ．インフルエンザ：ＨＴＭ
腸球菌：ＣＡＭＨＢ＋３％の溶解ウマ血液
パネル中の他の菌株：ＣＡＭＨＢ

２．４．アッセイプレートを調製
Ａ．細菌接種材料１００μｌを、ウェルＢ１２、Ｄ１２、Ｆ１２およびＨ１２を除いて、化合物プレートの各ウェルに添加する。
Ｂ．培地ブロス１００μｌを、化合物プレートのウェルＢ１２、Ｄ１２、Ｆ１２およびＨ１２に添加する。
Ｃ．４つのプレートを一緒に積み重ね、無菌プレート蓋で覆う。周囲空気インキュベーター内にて３５±２℃で１６〜２０時間（ＭＲＳＡは２４時間）インキュベートする。

２．５．コロニーカウントを実行
Ａ．細菌接種材料（０．５ ＭｃＦａｒｌａｎｄ）を、１０−１から１０−７の系列に、生理食塩水溶液（例えば、１００μｌの細菌接種材料＋生理食塩水９００μｌ）中で希釈する。
Ｂ．各希釈（１０−４、１０−５、１０−６、および１０−７）の１００μｌを３連でＣＡＭＨＡプレート上に広げ、液体を寒天中に１０分間浸漬させ、寒天プレートを反転し、２４時間３５±２℃でインキュベートする。

２．６．ＭＩＣを記録およびＣＦＵを算出
Ａ．化合物管理システム内の化合物プレートレイアウトを開き、アッセイプレートバーコードをチェックする。
Ｂ．アッセイプレートをＭＩＣリーダーの上部に設置し、拡大鏡を調整して各ウェルを読み取り、成長状態を生データとして記録する。各アッセイプレートの写真画像を、高速高分解能スキャナーを使用して記録する（任意選択）。
Ｃ．ＣＬＳＩガイドラインに従ってＭＩＣブレイクポイントを決定する。
Ｄ．コロニーをカウントし、細菌接種材料のＣＦＵを算出する。

３．結果
３．１．ＭＩＣ要約表
ＭＩＣスクリーニングを、１４細菌株（１１種のＡＴＣＣ菌株および３種の臨床分離株）および４種の化合物（ＵＳＹＤＳ１、ＵＳＹＤＳ２、およびプロポリスのエタノール抽出物、ならびに参照化合物レボフロキサシン）で実行した。ＭＩＣを下記表６に要約する。この研究で得たレボフロキサシンの参照化合物のＭＩＣ値は、Ｓ１００−Ａ２０［２］に記載されている通りの標準範囲内である。ＭＩＣスクリーニングにおけるＤＭＳＯの最終濃度は約３％であり、大部分の微生物の成長を阻害しなかった。

４．考察
プレニル化テトラヒドロキシスチルベンＵＳＹＤＳ１およびＵＳＹＤＳ２は、中程度の抗菌活性を、ＵＳＹＤＳ１＞ＵＳＹＤＳ２＞プロポリスのエタノール抽出物の効力順位で示した。

７．キナーゼ活性に対するＵＳＹＤＳ１、ＵＳＹＤＳ２およびＵＳＹＤＳ１０の化合物の効果
以下は、検討されたキナーゼの一覧である。

実験
材料
・Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ（Ｐｌｕｓ）／ＡＤＰ−Ｇｌｏａｓｓａｙ緩衝液
２５ｍＭＨＥＰＥＳ、１０ｍＭＭｇＣｌ２、０．０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、１００μｇ／ｍＬＢＳＡ、２．５ｍＭＤＴＴ、ｐＨ７．４。
・Ｃａｌｉｐｅｒアッセイ緩衝液
１００ｍＭＨＥＰＥＳ、１０ｍＭＭｇＣｌ２、１００μｌ／ＬＢｒｉｊ３５（３０％）、１ｍＭＤＴＴ、ｐＨ７．４。

アッセイ基質
・ＭＢＰタンパク質、ＵｎａｃｔｉｖｅＭＥＫ１、ＲｂｐｒｏｔｅｉｎをＳｉｇｎａｌＣｈｅｍから購入した。ポリ（ｇｌｕ：ｔｙｒ）（４：１）をＳｉｇｍａから購入した。ＰＩＰ２をＣａｙｍａｎから購入した。ペプチド基質をＨＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｃｈｉｎａ中で合成した。
ＡＴＰをＳｉｇｍａから購入した。ＫｉｎａｓｅＧｌｏＰｌｕｓ試薬、ＫｉｎａｓｅＧｌｏ試薬およびＡＤＰ Ｇｌｏ試薬をＰｒｏｍｅｇａから購入した。

アッセイ手順−Ｃａｌｉｐｅｒフォーマット
Ｋｉｎａｓｅ、基質、ＡＴＰおよび化合物を、９６ウェルアッセイプレート中で混合し、総体積は５０μＬである。アッセイプレートを３０℃で１時間インキュベートする。３５ｍＭのＥＤＴＡ ２０μＬを添加することによって反応を中止し、２６μＬの中止反応物を３８４ウェルアッセイプレートに移す。アッセイプレートをプレートリーダー上で読み取る。

アッセイ手順−ＡＤＰ−Ｇｌｏフォーマット
Ｋｉｎａｓｅ、基質、ＡＴＰおよび化合物を、３８４ウェルアッセイプレート中で混合し、総体積は１０μｌである。アッセイプレートを３０℃で１時間インキュベートする。ＡＤＰ Ｇｌｏ試薬１０μｌ／ウェルをアッセイプレートに添加し、２７℃で４０分間インキュベートする。
２０μｌ／ウェルの検出試薬をアッセイプレートに添加し、２７℃で３０分間インキュベートする。アッセイプレートをプレートリーダー上で読み取る。

アッセイ手順−Ｋｉｎａｓｅ−Ｇｌｏ（Ｐｌｕｓ）フォーマット
Ｋｉｎａｓｅ、基質、ＡＴＰおよび化合物を、３８４ウェルアッセイプレート中で混合し、総体積は１０μｌである。アッセイプレートを３０℃で１時間インキュベートする。１０μｌ／ウェルのＫｉｎａｓｅＧｌｏ（Ｐｌｕｓ）試薬を反応混合物に添加し、次いで、２７℃で２０分間インキュベートする。アッセイプレートをプレートリーダー上で読み取る。
・百パーセント効果を、化合物および酵素を用いないがＡＴＰおよび基質を含有した状態で実行した。
・ゼロパーセント効果を、化合物を用いないがＡＴＰ、基質および酵素を含有した状態で実施した。
・ＳＢ２０２１９０はキナーゼｐ３８βのための参照化合物であり、スタウロスポリン（ＳＴＳＰ）は残りのキナーゼのための参照化合物である。

結果
６０％より多く阻害したＫｉｎａｓｅを下記の表に要約する。全ての３種の化合物が、キナーゼＴｒＫＡならびにＰＩ３ＫδおよびＰＩ３Ｋγを阻害したことに注目するのは興味深い。ＵＳＹＤＳ１およびＵＳＹＤＳ１０の両方とも、キナーゼに対して同様の阻害活性を表すように思われる。

８．ＵＳＹＤＳ１の急性毒性研究
方法
１匹のマウスには４００ｍｇ／ｋｇの単回ＩＰ注入を与え、第２のマウスは２００ｍｇ／ｋｇのＩＰの用量を受け、第３のマウスは１００ｍｇ／ｋｇのＩＰの単回用量を受ける。マウスを２週の期間観察する。それらがそれらの体重の２０％より多くを損失する場合、または有意な毒性の他の徴候がある場合は、それらを屠殺する。全ての３匹のマウスを屠殺しなければならない場合、次の３つの用量レベル（５０、２５、１２．５ｍｇ／ｋｇ）を同様の方法で試験する。耐量がわかるまでこのプロセスを反復する。この用量を次いで最大耐量（ＭＴＤ）に指定し、抗腫瘍試験中に実験マウスに与えられる材料の量を算出するのに使用する。マウスは無制限に食料および水を許可される。薬物を１００％のＤＭＳＯ中に２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。

ＵＳＹＤＳ１のＭＴＤを１００ｍｇ／ｋｇとして決定した。この濃度は低い哺乳動物毒性を示し、さらなる抗腫瘍試験のために使用されている。ＵＳＹＤＳ１に関する中空繊維アッセイ（ＢＥＣ／Ｃ）は進行中である。中空繊維アッセイは、ある範囲の癌細胞株に対する新規な想定の化学治療化合物を、マウス異種移植モデルにおけるそれらの評価より前に査定するための予備の迅速なスクリーンである。中空繊維モデルは、伝統的な異種移植モデルと比較して、評価時間がより短く、化合物要件が低減される。該モデルは、異種移植における癌細胞型の有効な選択を可能にする。

樹脂をプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体の供給源として生成する植物の化学型
異なる場所からのレピドスペルマ属の植物から得られた樹脂、ガムまたは浸出物を、Ｃ−およびＯ−プレニル化、Ｏ−メチル化および非Ｏ−メチル化誘導体が含まれるプレニル化ポリヒドロキシスチルベン含有量に関する定量的^１Ｈ−ＮＭＲ（ｑ−ＮＭＲ）によって分析した。樹脂からのこれらのプレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体の異なる割合は、植物を適宜分類するための基礎を形成する。

これまでに同定されているレピドスペルマ植物の少なくとも３種の異なる化学型があり、これらの植物の各々は、いくつかのサブ化学型を表す。１型は、Ｃ−およびＯ−プレニル化誘導体の両方のおよそ等しい割合を含有する最も一般的な植物である。２型植物は、Ｃ−プレニル化誘導体のみを含有する。一方で、３型植物は、Ｏ−メチル化プレニル化ポリヒドロキシスチルベン誘導体を含有しない。

広く記載されている本発明の範囲から逸脱することなく具体的な実施形態に示されている通りに、多数の変形および／または改変が本発明に行われ得ることが、当業者によって認められるであろう。本実施形態は、そのため、あらゆる点で、例示的であり拘束的でないと考えられるべきである。

文献
（１）Ｄｅｎｍａｒｋ、Ｅ．；Ｒｅｇｅｎｓ、Ｃ．Ｓ．；Ｔｅｔｓｕｙａ、Ｋ．Ｊ．ｏｆ Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００７、１２９、２７７４〜２２７６。
（２）Ａｌｉ、Ｉ．Ａ．Ｉ．；Ｆａｔｈａｌｌａ、Ｗ．Ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２００６、１７、２８０〜２８８。
（３）Ｋｒｏｈｎ、Ｋ．；Ｔｈｉｅｍ、Ｊ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ．１ １９７７、１１８６〜１１９０。
（４）Ｓｏｅｒｍｅ、Ｐ．；Ａｒｎｏｕｘ、Ｐ．；Ｋａｈｌ−Ｋｎｕｔｓｓｏｎ、Ｂ．；Ｌｅｆｆｌｅｒ、Ｈ．；Ｒｉｎｉ、Ｊ．Ｍ．；Ｎｉｌｓｓｏｎ、Ｕ．Ｊ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００５、１２７、１７３７〜１７４３。
（５）Ａｎｄｒｕｓ、Ｍ．Ｂ．；Ｌｉｕ、Ｊ．；Ｍｅｒｅｄｉｔｈ、Ｅ．Ｌ．；Ｎａｒｔｅｙ、Ｅ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．２００３、４４、４８１９〜４８２２。
（６）Ｒａｏ、Ｍ．Ｌ．Ｎ．；Ａｗａｓｔｈｉ、Ｄ．Ｋ．；Ｂａｎｅｒｊｅｅ、Ｄ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．２０１０、５１、１９７９〜１９８１。
（７）Ｙａｎｇ、Ｐ．−Ｙ．；Ｚｈｏｕ、Ｙ．−Ｇ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ ２００４、１５、１１４５〜１１４９。
（８）Ｒｏｏｎｅｙ、Ｊ．Ｍ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｐａｒｔ Ａ １９８６、２３、８２３〜８２９。
（９）Ｂａｔｓｏｍｂｏｏｎ、Ｐ．；Ｐｈａｋｈｏｄｅｅ、Ｗ．；Ｒｕｃｈｉｒａｗａｔ、Ｓ．；Ｐｌｏｙｐｒａｄｉｔｈ、Ｐ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００９、７４、４００９〜４０１２。
（１０）Ｍｉｃｈａｎ、Ｓ．；Ｓｉｎｃｌａｉｒ Ｄ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２００７、４０４、１〜１３。
（１１）Ｙａｍａｍｏｔｏ Ｈ．；Ｓｃｈｏｏｎｊａｎｓ Ｋ．；Ａｕｗｅｒｘ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．２００７、２１、１７４５〜１７５５。

Claims (13)

1. 式（Ｉａ）
   
   の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物［式中、
   Ｒ^１ａは、Ｈであり、Ｒ^１ｂは、ＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２ 及びＯＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ_３ ） _２ から選択され、Ｒ^１ｃは、Ｈであり、Ｒ^１ｄは、ＯＨであり、
   Ｒ ^２は、ＯＨ及びＯＲ ^４ から選択され、
   Ｒ ^３は、ＯＨ及びＯＲ ^４ から選択され、
   Ｒ^４は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルまたはベンジルから選択され、
   A----Bは、ＣＨ＝ＣＨである］。
2. Ｒ^１ｂ がＯＣＨ_２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２である、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ ^２ がＯＨである、請求項１または２に記載の化合物。
4. Ｒ ^２ がＯＲ^４であり、Ｒ^４がメチルである、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
5. Ｒ ^３ がＯＨである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
6. Ｒ ^３ がＯＲ ^４ であり、Ｒ ^４ がメチルである、請求項１または２に記載の化合物。
7. 及び
   
   からなる群から選択される請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
8. 構造：
   
   である、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物。
9. 構造：
   
   である、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物。
10. レピドスペルマ属の植物に由来するプロポリスから単離される、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物の製造方法。
11. レピドスペルマ属の樹脂、ガムまたは浸出物から単離される、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物の製造方法。
12. 請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
13. 癌、免疫抑制、炎症、細菌感染症、真菌感染症、または皮膚老化の処置のための請求項１２に記載の医薬組成物。