JP6450007B2 - Ａｄｋタンパク質を有効成分として含む抗菌用の組成物、または敗血症の予防または治療用の組成物 - Google Patents

Description

本発明はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来のＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ、Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質を有効成分として含む抗菌用の組成物および感染性疾患の予防または治療用の組成物に関するものである。また、本発明は上記のＡＤＫタンパク質および抗生剤を有効成分として含む敗血症または敗血症性ショックの予防または治療用の組成物に関するものである。

抗菌材とは通常的に抗微生物剤を総称するもので、特に細菌に対して抗菌作用をする物質、詳細には細菌が細胞壁やタンパク質などを合成するシステムを阻害することによって、優れた抗菌作用をする物質またはこれらの物質から製造されたものを意味する。抗菌材の成分は主にカビから抽出されたものが主になっており、今は細菌感染による疾病などを治療するために多く使われている。

２０世紀、フレミングによるペニシリン抗菌剤の発見をはじめに、細菌感染によって引き起こされる疾病から逃れるために数多くの抗菌剤、抗生剤が開発された。このような抗菌剤は私たちの生活において不可欠な位置を示しており、医薬品として用いられることのみならず、食品および化商品保存剤として用いられるなど、その応用分野が広範囲である。しかし、化学合成物質を用いた抗菌剤の場合、これに対する耐性を有する細菌が徐々に増加されているのが実情であり、その使用が次第に制限されている。

抗菌剤の耐性細菌とは、特定抗菌剤に耐性を示し、薬効が効かない細菌をいう。例えば、上記のペニシリンの薬効が全く効かないペニシリン耐性黄色ブドウ球菌がこれに該当する。これ以外にも、１９６１年最初に学界に報告されて、その後に全世界的に主な病院性感染菌になっているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、ＭＲＳＡ）が報告されたことがあって、１９８８年バンコマイシンに耐性を見せるバンコマイシン耐性腸球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、ＶＲＥ）がヨーロッパで初めて発見されたし、１９９０年後半には日本、アメリカ、フランス、韓国でバンコマイシンに耐性を見せる黄色ブドウ球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｓ．ａｕｒｅｕｓ、ＶＩＳＡ）が発見された。また、人体感染の最も一般的な原因菌である黄色ブドウ球菌の最後の治療剤として知られているバンコマイシンに高度の耐性を見せるブドウ球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、VRSA）が２００２年アメリカの疾病統制局（Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ）で世界最初に報告されることによって、いわゆるスーパーバクテリアの拡散の可能性が非常に高まっている。

一方、敗血症（ｓｅｐｓｉｓ）は病院性グラム陰性細菌が生体に感染される場合、細胞壁の成分であるリポ多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ、ＬＰＳ）が毒素として作用して生体の免疫体系が過渡に活性化されることによって誘発される炎症反応として、全身に感染症を起こしたり症状がひどい場合、ショックを伴うこともある。具体的に敗血症は悪性腫瘍、白血病、悪性リンパ腫、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、膠原病、腎不全、肝疾患、脳血管障害、糖尿病などの基礎疾患を有する患者や高齢者、未熟児のような体液性免疫不全または細胞性免疫不全を有する抵抗力が弱い宿主が副腎ステロイドや抗腫瘍剤の化学療法、コバルト照射などの放射線治療または留置カテーテル、血液透析、臓器移植、心臓手術などの処置、手術を受けった場合に主に発病する。敗血症は病院の集中治療病棟に入院した患者が死亡する主な原因になり、これによる致死率が通常３０％以上である非常に深刻な疾病である。医学技術の発展にもかかわらず、今も全世界的に手術後遺症で感染されて敗血症が発生する場合が多く、新生児や高齢者のように体内の免疫力が弱いヒトが感染された場合、敗血症に進行される場合が多い。代表的に、新生児敗血症は成熟児１，０００名の中で３名程度が発生することと知られており、未熟児は発病率が３ないし４倍増加することと知られている。敗血症にかかった場合、大抵は抗生剤治療を受けることになるが、適切な処置が遅れて菌が多く増殖された場合や抗生剤に耐性が強い菌株により感染された場合には抗生剤のみでは効果的な治療を行うことができず、様々な抗生剤に対して耐性を有する病院菌が徐々に増加しており、新たな敗血症治療剤の開発が急務である。

これで、本発明者は新しい抗菌剤および敗血症治療剤を解決するために努力した結果、ヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来のＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ、Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質がグラム陰性菌に対して選択的に優れた抗菌活性を見せて、バクテリアの増殖抑制だけではなく、死んだバクテリアから分離された内毒素を除去する優れた効果を有していて、抗生剤と併用する場合抗生剤による副作用を最小化することができ、単独投与に比べて顕著に優れた敗血症治療効果を見せることを確認することによって、本発明を完成した。

本発明の目的はＡＤＫタンパク質を有効成分として含むグラム陰性菌に対する抗菌用の組成物を提供するものである。

本発明の他の目的はＡＤＫタンパク質を有効成分として含む感染性疾患の予防または治療用の組成物を提供するものである。

本発明のまたの他の目的はＡＤＫタンパク質および抗生剤を有効成分として含む敗血症または敗血症性ショックの予防または治療用の組成物を提供するものである。

上記の目的を達成するために、本発明はＡＤＫタンパク質を有効成分として含むグラム陰性菌に対する抗菌用の組成物、医薬部外品、食品添加物、または飼料添加物を提供する。

また、本発明はＡＤＫタンパク質を有効成分として含む感染性疾患の予防または治療用の薬学的組成物または、食品組成物を提供する。

また、本発明はＡＤＫタンパク質および抗生剤を有効成分として含む敗血症または敗血症性ショックの予防または治療用の薬学的組成物または食品組成物を提供する。

本発明によるヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来のＡＤＫタンパク質はグラム陰性菌に対する選択的に優秀な抗菌活性を有していて、グラム陰性菌に対する抗菌用の組成物またはグラム陰性菌により誘発される感染性疾患の予防または治療に有用に用いることができる。または、本発明によるＡＤＫタンパク質はバクテリアの増殖抑制だけではなく、死んだバクテリアから分離された内毒素を除去する優秀な効果を有していて抗生剤と併用する場合、抗生剤による副作用を最小化することができ、単独投与に比べて顕著に優れた敗血症の治療効果を有していて、敗血症または敗血症性ショックの予防または治療に有用に用いることができる。

図１は組換えＡＤＫタンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥを通して確認した結果を示す図である。 図２は組換えＡＤＫタンパク質がＥ．ｃｏｌｉの生長に及ぶ影響を示す図である。 図３は組換えＡＤＫタンパク質がＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの生長に及ぶ影響を示す図である。 図４は組換えＡＤＫタンパク質がＳ．ａｕｒｅｕｓの生長に及ぶ影響を示す図である。 図５は組換えＡＤＫタンパク質がＥ．ｃｏｌｉ細胞の形態に及ぶ影響をＳＥＭ解析を通して確認した結果を示す図である。 図６は組換えＡＤＫタンパク質がＥ．ｃｏｌｉ細胞の表面と細胞機関の破壊程度に及ぶ影響をＴＥＭ解析を通して確認した結果を示す図である。 図７は動物モデルでＡＤＫタンパク質がグラム陰性菌側のみに特異的に移動することを確認した結果を示す図である。 図８は動物モデルでＡＤＫタンパク質のＥ．ｃｏｌｉに対する殺菌効果を確認した結果を示す図である。 図９は動物モデルでＡＤＫタンパク質のＳ．ａｕｒｅｕｓに対する殺菌効果を確認した結果を示す図である。 図１０は動物モデルの各組織でＡＤＫタンパク質の殺菌効果を確認した結果を示す図である。 図１１は敗血症の治療効果を検証するための動物実験デザインを示す図である。 図１２は敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質または抗生剤（ゲンタマイシン）の投与の際に、時間による生存率を示す図である。 図１３は敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質または抗生剤（ゲンタマイシン）の投与の際に、血清内の炎症性サイトカイン（ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６）の分泌量を示す図である。 図１４は敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質または抗生剤（ゲンタマイシン）の投与の際に、血清内のＡＳＴ、ＡＬＴおよびＢＵＮ濃度を示す図である。 図１５は敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質または抗生剤（ゲンタマイシン）の投与の際、血清内のエンドトキシンの量を示す図である。 図１６は敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質または抗生剤（ゲンタマイシン）の投与の際、肺組織内の炎症誘発細胞の浸潤の程度を示す図である。 図１７は敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質または抗生剤（ゲンタマイシン）の投与の際、脾臓組織内の細胞死滅の程度を示す図である。 図１８は敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質または抗生剤（ゲンタマイシン）の投与の際、脾臓細胞内のＢ細胞およびＴ細胞の細胞死滅の程度を示す図である。 図１９は敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質または抗生剤（ゲンタマイシン）の投与の際、肝、肺、および腎臓の組織内のバクテリアの除去の程度を示す図である。

発明の実施のための形態

以下、本発明に関してより詳しく説明する。

本発明はＡＤＫタンパク質を有効成分として含むグラム陰性菌に対する抗菌用の組成物を提供する。

本発明において、「抗菌」または「抗菌活性」とは、細菌やカビのような微生物に対して抵抗する性質を意味して、より詳しくは抗生物質などが細菌の成長または増殖を抑制する特性を意味する。

本発明において、「抗菌用の組成物」は細菌やカビのような微生物の生育を阻害する活性を有する組成物として、抗菌効果が要求される様々な分野で用いられるすべての形態が含まれることができ、例えば、医薬品、医薬部外品、食品添加剤または飼料添加剤などの形態であることができる。具体的に、医薬においては抗生剤や汚染防止剤のような目的で、食品においては防腐や抗菌目的で、農業においては抗菌、殺菌、消毒の目的で、化粧品や生活用品においてはフケ抑制用、水虫防止用、わき体臭抑制用、抗ニキビ用など微生物と直接関係のある製品にもちいられたり、掃除用の洗浄剤などに防腐や抗菌または殺菌の目的で用いることができるし、このような目的のみに限定されるものではない。

本発明のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）から由来されたもので、望ましくは配列番号１で表示されるアミノ酸配列からなることができ、配列番号２で表示される塩基配列で暗号化することができるし、上記のタンパク質の機能的同等物を含む。上記の「機能的同等物」とはアミノ酸の付加、置換または欠失の結果、上記の配列番号１で表示されるアミノ酸配列と少なくとも７０％以上、そのましくは８０％以上、さらに望ましくは９０％以上、よりさらに望ましくは９５％以上の配列相同性を有するもので、配列番号１で表示されるアミノ酸配列でなるタンパク質または配列番号２で表示される塩基配列で暗号化されるタンパク質と実質的に同質の生理活性を示すタンパク質を言う。

本発明のＡＤＫタンパク質にはこれの天然型アミノ酸配列を有するタンパク質だけではなく、これのアミノ酸配列変異体がまた本発明の範囲に含まれている。ＡＤＫタンパク質の変異体とは、ＡＤＫ天然アミノ酸配列と一つ以上のアミノ酸残基が欠失、挿入、非保全的または保全的置換またはこれらの組合せにより相違な配列を有するタンパク質を意味する。分子の活性を全体的に変更させないタンパク質およびペプチドでのアミノ酸の交換は当該分野で公知されている。上記のＡＤＫタンパク質またはこれの変異体は天然から抽出したり合成（Ｍｅｒｒｉｆｌｅｌｄ，Ｊ．Ａｍｅｒ．ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．８５：２１４９−２１５６、１９６３）またはＤＮＡ配列を基本にする遺伝子組換え方法により製造されることができる（Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｕｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ＵＳＡ， ２版、１９８９）

本発明のＡＤＫタンパク質は配列番号２の塩基配列で暗号化されることができ、上記のヌクレオチドと機能的に同一な作用をすることができる変異体が本発明の範囲内に含まれる。

本発明による「グラム陰性菌（ｇｒａｍ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ）」はグラム染色法で染色する際に赤色に染色される細菌を意味するもので、一般的に色素抵抗力が強く、界面活性剤の耐性が強い。本発明のグラム陰性菌にはエンドトキシン（ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ）を保有するすべての種類のグラム陰性菌が含まれ、例えば、エシェリキア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）属、 クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属、ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）属、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、 シゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）属、モラクセラ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ）属、ヘリコバクター（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）属、ステノトロホモナス（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ）属、ブデロビブリオ（Ｂｄｅｌｌｏｖｉｂｒｉｏ） 属、レジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）の属の菌株などが含まれ、これに限定されない。詳しくは、グラム陰性菌には大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、 シュードモーナス・エールジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、 シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、 シュードモナス・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）、 シュードモナス・クロロラフィス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ）、 シュードモナス・ペルツシノゲナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｅｒｔｕｃｉｎｏｇｅｎａ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シリンガエ （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ）、アシネトバクター・バウマニ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、アシネトバクター・ルオフィイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｗｏｆｆｉｉ）、アシネトバクター‐カルコアセチカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、 アシネトバクター・ヘモリティカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、サルモネラ・エンテリカ （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ）、サルモネラ・ボンゴール（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｂｏｎｇｏｒｉ）、 サルモネラ・エンテリティディス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ）、サルモネラ・チフィリウム （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、サルモネラ・ガリナルム （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ）、サルモネラ・プローラム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐｕｌｌｏｒｕｍ）、サルモネラ・ムバンダカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｂａｎｄａｋａ）、サルモネラ・コレレスイス （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ）、サルモネラ・トンプソン（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｈｏｍｐｓｏｎ）、サルモネラ・インファンティス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｉｎｆａｎｔｉｓ）、サルモネラ・デルビー（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｄｅｒｂｙ）、 クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、 クレブシエラ・グラニュロマティス（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、クレブシエラ・テリジェナ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ）、ナイセリア・ゴノレエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、ナイセリア・メニンジティディス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、エンテロバクター・アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、エンテロバクター・クロアカエ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ）、シゲラ・ボイディイ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｂｏｙｄｉｉ）、シゲラ・ディセンテリアエ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、シゲラ・フレクスネリ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｎｅｒｉ）、シゲラ・ソンネイ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｓｏｎｎｅｉ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、モラクセラ・ラクナータ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｌａｃｕｎａｔａ）、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｂｏｖｉｓ）、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）、ヘリコバクター・ヘイルマニ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｈｅｉｌｍａｎｎｉｉ）、ヘリコバクター・フェリス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｆｅｌｉｓ）、ヘリコバクター・ムステラエ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｍｕｓｔｅｌａｅ）、ヘリコバクター・フェネリアエ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｆｅｎｅｌｌｉａｅ）、ヘリコバクター ラッピニ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｒａｐｐｉｎｉ）、ヘリコバクター・ヘパティカス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｈｅｐａｔｉｃｕｓ）、ヘリコバクター・ビリス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｂｉｌｉｓ）、ヘリコバクター・プローラム（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｕｌｌｏｒｕｍ）、ステノトロホモナス・マルトフィリア（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）、ステノトロホモナス・ニトリティレデュセンス（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｎｉｔｒｉｔｉｒｅｄｕｃｅｎｓ）、ブデロビブリオ・バクテリオボルス（Ｂｄｅｌｌｏｖｉｂｒｉｏｂａｃｔｅｒｉｏｖｏｒｕｓ）、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、レジオネラ・アニーサ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａａｎｉｓａ）、レジオネラ・バーミンガメンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｂｉｒｍｉｎｇｈａｍｅｎｓｉｓ）、レジュネラ・ボゼマニー（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｂｏｚｅｍａｎｉｉ）、レジオネラ・シンシナティエンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｃｉｎｃｉｎｎａｔｉｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・ダモフィイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｄｕｍｏｆｆｉｉ）、レジオネラ・フィーレイイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｆｅｅｌｅｉｉ）、レジュネラ・ゴルマニー（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｇｏｒｍａｎｉｉ）、レジオネラ・ハッケリアエ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｈａｃｋｅｌｉａｅ）、レジオネラ・イスラエレンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）、レジオネラ‐ジョルダニス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｊｏｒｄａｎｉｓ）、レジオネラ・ランシンゲンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｌａｎｓｉｎｇｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・ロングビーチアエ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｌｏｎｇｂｅａｃｈａｅ）、レジオネラ・マセアケルニイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｍａｃｅａｃｈｅｒｎｉｉ）、レジオネラ・ミクダデイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｍｉｃｄａｄｅｉ）、レジオネラ・オークリジェンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｏａｋｒｉｄｇｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・セントヘレンシ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｓａｉｎｔｈｅｌｅｎｓｉ）、レジオネラ・ツクソネンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｔｕｃｓｏｎｅｎｓｉｓ）およびレジオネラ・ワズワーシイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｗａｄｓｗｏｒｔｈｉｉ）などが含まれて、これに限定されない。

また、他の様態として、本発明はＡＤＫタンパク質を有効成分として含む感染性疾患の予防または治療を必要とする個体に投与するステップを含む、感染性疾患の予防または治療の方法を提供する。

上記の組成物は薬学的組成物または食品組成物を含む。

本発明のＡＤＫタンパク質はグラム陰性菌に対して選択的に優れた抗菌活性を示すので、これを含む組成物はグラム陰性菌により誘発される感染性疾患の予防または治療に有用に用いることができる。

本発明において、「感染性の疾患」はウィルス、細菌、カビ、寄生虫のように疾病を起こす病院体が動物やヒトに伝播、侵入して起こす疾患を意味し、本発明の目的の上、グラム陰性菌によって誘発されるすべての感染性疾患を意味する。例えば、本発明の感染性疾患には、グラム陰性菌によって誘発される呼吸器疾患、消化器疾患、炎症性疾患などが含まれ、具体的には肺炎、腹膜炎、髄膜炎、創傷感染症、骨関節炎、胆嚢炎、尿路感染症、髄膜炎、心内膜炎、心筋炎、心外膜炎、関節炎、咽喉炎、淋病、細菌性赤痢、腸炎、結膜炎、胃炎、中耳炎、膀胱炎、リンパ管炎、敗血症などが含まれるが、これらに限定されない。

本発明において、「予防」は上記の組成物の投与により感染性疾患を抑制したり発病を遅延させるすべての行為を意味し、「治療」は上記の組成物の投与により感染性疾患により症状が好転されたり利するように変更されるすべての行為を意味する。

本発明の薬学的組成物は通常的に用いる適切な担体、賦形剤、または希釈剤をさらに含むことができる。本発明の薬学的組成物に含まれることができる担体、賦形剤または希釈剤としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、澱粉、アカシアゴム、アルギン酸塩、ゼラチン、リン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、オキシ安息香酸メチル、オキシ安息香酸プロピル タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱物油などがあり、これらに限定されない。

本発明の薬学的組成物は通常の方法により経口または非経口の剤形で投与されることができ、製剤化する場合には、通常、使用される充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を用いて調製される。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれており、これらの固形製剤は、上記の組成物に少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、炭酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ ｃａｒｂｏｎａｔｅ）、スクロース、ラクトース、ゼラチンなどを混ぜて調剤される。また、単純な賦形剤以外にステアリン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤も用いられる。経口投与のための液状製剤としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当するが、よく用いられる単純希釈剤である水、リキッドパラフィン以外にさまざまな賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などが含まれることができる。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤が含まれる。上記の非水性溶剤、懸濁剤としては、プロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物油、オレイン酸エチルのような注射可能なエステルなどが用いることができる。坐剤の基剤では、ウィテップゾール（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴール、ツイン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどを用いることが できる。

本発明において、「投与」は、任意の適切な方法で、個体に所定の本発明の薬学的組成物を提供することを意味する。

本発明の薬学的組成物の好ましい投与量は、個体の状態および体重、疾患の程度、薬物の形態、投与の経路及び期間によって異なるが、当業者によって適切に選ぶことができる。望ましい効果のために、本発明の薬学的組成物は、１日０．００１〜１０００ｍｇ/ｋｇで投与することができる。投与は、一日に一度投与することもでき、数回に分けて投与することもできる。上記の投与量は、どのような面であれ、本発明の範囲を限定するものではない。

本発明の薬学的組成物は、個体にさまざまな経路で投与することができる。投与のすべての方式は予想されることができるが、例えば、経口、直腸または静脈、筋肉、皮下、子宮内硬膜または脳血管内の注射によって投与することができる。しかし、経口投与の際に、タンパク質は、消化されるので、経口用の組成物は、活性薬剤をコーティングしたり、胃での分解から保護されるように剤形化することが望ましい。本発明の組成物は、好ましくは、注射剤の形で投与することができる。

本発明による薬学的組成物は、ＡＤＫタンパク質以外に、抗菌活性を有する公知の物質を一つ以上さらに含むことができる。

本発明では、食品組成物は、好ましくは、健康機能食品の形態であることができる。

本発明において、健康機能食品とは、食品の物理的、生化学的、生物工学的な手法などを用いて、当該食品の機能を特定の目的に働きかけ、発現するように付加価値を付与した食品群や食品組成が有する生体防御リズムの調節、病気の防止と回復等に関する体内調節機能を生体に対して十分に発現するように設計して加工した食品を意味する。

上記の健康機能食品には、食品学的に許容可能な食品補助添加剤を含むことができ、健康機能食品の製造で通常に用いられる適切な担体、賦形剤、および希釈剤をさらに含むことができる。

本発明の食品組成物を食品添加物として用いる場合には、上記の組成物をそのまま添加したり他の食品または食品成分と一緒に用いることができ、通常の方法に応じて適切に用いることができる。有効成分の混合量は使用の目的（予防、健康または治療的な処置）により適切に決定することができる。一般的に、食品または飲料の製造の際に、本発明の組成物は、原料に対して１５重量％以下、好ましくは１０重量％以下の量で添加される。しかし、健康及び衛生を目的にしたりまたは健康調節を目的とする長期間の摂取の場合には、上記の範囲以下であることができ、安全性の面で問題がないので、有効成分は、上記の範囲以上の量でも用いることができる。

上記以外に、本発明の食品組成物は、様々な栄養剤、ビタミン、電解質、風味剤、着色剤、エフェクト酸およびその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調整剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に用いられる炭酸化剤などを含むことができる。それ以外に、本発明の食品組成物は、天然フルーツジュース、フルーツジュース飲料、野菜飲料の製造のための果肉を含むことができる。これらの成分は、独立的に、または組み合わせて用いることができる。このような添加剤の割合は、それほど重要ではないが、本発明の組成物１００重量部あたり０．０１〜０．１重量部の範囲で選ばれるのが一般的である。

もう一つの様態として、本発明は、ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ、Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質および抗生剤を有効成分として含む敗血症または敗血症性ショックの予防または治療用の組成物を提供する。他の様相で、本発明は、ＡＤＫタンパク質および抗生剤を敗血症または敗血症性ショックの予防または治療を必要とする個体に投与するステップを含む、敗血症または敗血症性ショックの予防または治療方法を提供する。

上記の組成物は薬学的組成物および食品組成物を含む。

本発明において、「敗血症」とは微生物に感染されて全身に深刻な炎症反応が現れる状態をいう。体温が３８℃以上に上がる発熱症状または３６℃以下に下がる低体温症、呼吸数が１分当たり２４回以上に増加（頻呼吸）、１分当たり９０回以上の心拍数（頻脈）、血液の検査上の白血球数の増加または著しい減少の中で、二以上の症状を示す場合、これを全身性炎症反応症候群（ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｙｎｄｒｏｍｅ；ＳＩＲＳ）と呼ぶ。このような全身性炎症反応症候群が微生物の感染によるものであるとき、敗血症という。身体の感染病巣から病原菌が継続的または断続的に血流に入り、複数の臓器の組織に定着して病巣を作り、激しい全身症状を示すものである。原因菌としてはブドウ球菌、連鎖球菌、大腸菌、緑膿菌、結核菌、肺炎桿菌、真菌、嫌気性菌などがある。

本発明において、「抗生剤（ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）」は、細菌感染症の治療および予防のために用いられる物質であって、微生物の成長や生命を防ぐ物質を意味する。上記の抗生剤には、細菌やカビのような微生物によって生成される化学物質である天然抗生剤、天然の抗生剤の構造的な形態などの変化を介して得られた誘導体である半合成抗生剤、化学的に合成された合成抗生剤（抗菌剤）などが含まれる。

本発明の抗生剤は、アミノグリコシド系（ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ）、ペニシリン系（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）、セファロスポリン系（ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎ）、テトラサイクリン系（ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ）、マクロライド系（ｍａｃｒｏｌｉｄｅｓ）、ストレプトグラミン系（ｓｔｒｅｐｔｏｇｒａｍｉｎｓ）、グリコペプチド系（ｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅ）、ペプチド系（ｐｅｐｔｉｄｅ）、フラボフォスフォリポール系（ｆｌａｖｏｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｌ）、ポリエーテル 系（ｐｏｌｙｅｔｈｅｒ）、フェニコール 系（ｐｈｅｎｉｃｏｌ）、 リンコサミド 系（ｌｉｎｃｏｓａｍｉｄｅ）、リファマイシン 系 （ｒｉｆａｍｙｃｉｎ）、ポリエン系（ｐｏｌｙｅｎｅ）、スルホンアミド 系（ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ）、ベンゾピリミジン系 、キノロン系（ｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）、フルオロキノロン 系（ｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）およびニトロフラン系（ｎｉｔｒｏｆｕｒａｎ）抗生剤などが含まれて、これに限定されない。

上記のアミノグリコシド系抗生剤には、ゲンタマイシン、カナマイシン、リボスタマイシン、トブラマイシン、シソマイシン、アストロマイシン、イセパマイシン、アルベカシン、ジベカシン、スペクチノマイシン、ネチルマイシン、ミクロノマイシン、ストレプトマイシン、ジヒドロストレプトマイシン、アプラマイシン、デストマイシン、ハイグロマイシン、アミカシン、ネオマイシンなどが含まれ、これに限定されない。

上記のペニシリン系抗生剤には、ペニシリン、ベンジルペニシリン、 オキサシリン 、 クロキサシリン 、 ジクロキサシリン 、 フルクロキサシリン 、 ナフシリン 、 アンピシリン 、 アモキシシリン 、 カルベニシリン 、 チカルシリン 、 ピペラシリン などが含まれており、これらに限定されない。

上記のセファロスポリン系（ セフェム ）抗生剤には、 セファロチン 、 セファゾリン 、 セファロリジン 、 セファレキシン 、 セファセトリル 、 セファロニウム 、 セフォキサゾール 、セファピリン、
セファドロキシル 、 セファマンドール 、 セフォキシチン
、 セフロキシム 、 セフォペラゾン ,セフメタゾール, セフォタキシム, セフチオフルなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のテトラサイクリン系抗生剤には、クロルテトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサイクリン、ミノサイクルリン、ドクシサイクルリンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のマクロライド系抗生剤は、エリスロマイシン、 キタサマイシン、 スピラマイシン、オレアンドマイシン、 ジョサマイシン 、セデカマイシン、チロシン、 ロキシスロマイシン などが含まれており、これらに限定されない。

上記のストレプトグラミン系抗生剤には、 バージニアマイシン 、ミカマイシンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のグリコペプチド系抗生剤には、 アボパルシン 、 バンコマイシン などが含まれており、これらに限定されない。

上記のペプチド系抗生剤には、ポリミキシン（例えば、 コリスチン 、ポリミキシンBなど）、サイクリック（例えば、 バシトラシン など）、 環状デプシ （例えば、エンラマイシン 、チオペプチンなど）などが含まれており、これらに限定されない。

上記のフラボフォスフォリポール系抗生剤には、 バンベルマイシン 、 マカルボマイシン 、クエベマイシンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のポリエーテル系抗生剤には、モネンシン、サリノマイシン、 ラサロシド 、 ナラマイシン, マデュラマイシン などが含まれており、これらに限定されない。

上記のフェニコール系抗生剤には、クロラムフェニコール、チアンフェニコール 、フロルフェニコール などが含まれており、これらに限定されない。

上記のリンコサミド系抗生剤には、リンコマイシン、クリンダマイシンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のリファマイシン系抗生剤には、リファンピシンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のポリエン系抗生剤には、ナイスタチン、ピマリシン、ペンタマイシン、アムホテリシンＢ、トリコマイシン、カンジシジンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のスルホンアミド系 系抗生剤には、スルファピリジン、スルファジアジン、スルファジミジン、スルファフラゾール、スルファモノメトキシンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のベンゾピリミジン系抗生剤には、トリメトプリム、オルメトプリム、テトロキソプリム などが含まれており、これらに限定されない。

上記のキノロン系 抗生剤には、ナリジクス酸 、オキソリン酸 、シノキサシン、アクロソサシンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のフルオロキノロン系抗生剤には、フルメキン、シプロキサシン、エンノサシン、フレロキサシン、マルボフロキサシンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記のニトロフラン系抗生剤には、フラゾリドン、フラルタドン、ニトロビン、ニトロフラゾンなどが含まれており、これらに限定されない。

上記の組成物でＡＤＫのタンパク質および抗生剤の混合割合は、制限されず、抗生剤の種類により副作用が現れる濃度と治療効果を示す濃度の範囲内で適切に調節することができる。

本発明によるヒト型結核菌から由来したＡＤＫタンパク質は、バクテリアの増殖抑制だけでではなく、死んだバクテリアから分離された内毒素を除去する優れた効果を有しており、抗生剤と併用する場合、抗生剤による副作用を最小限に抑えることができ、単独投与に比べて著しく優れた敗血症の治療効果を有している。

したがって、本発明のＡＤＫタンパク質および抗生剤は、敗血症または敗血症性ショックの予防または治療のための医薬品および健康機能食品に有用に用いることができる。

上記の敗血症または敗血症性ショックの予防または治療用組成物は、薬学的組成物および食品組成物を含んでいるので、上述した薬学的組成物および食品組成物と重複された内容は、重複された内容の記載による本明細書の過度な複雑性を避けるためにその記載を省略する。

以下、本発明の理解を助けるために好ましい実施例を提示する。しかし、下記の実施例は、本発明をより容易に理解するために提供されるものだけであり、実施例により本発明の内容が限定されるものではない。

（実施例１．組換えＡＤＫのクローニング）
ヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）Ｈ３７ＲｖのゲノムＤＮＡ（ＡＴＣＣ ２７２９４）を鋳型として用いて、ＰＣＲを通してＡＤＫ（Ｒｖ０７３３）部分を増幅させた（プライマー：５‘−ＣＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＴＴＴＧＴＴＧＣＴＧＧＧＡＣＣＧ−３’および５‘−ＡＡＧＣＴＴＣＴＴＴＣＣＣＡＧＡＧＣＣＣＧＣＡＡＣＧＣ−３’）。分離されたＰＣＲ産物をＮｄｅＩおよびＨｉｎｄＩＩＩ制限酵素で切断して、発現ベクターであるｐＥＴ２２ｂベクターに挿入した。ＡＤＫ遺伝子が挿入されたｐＥＴ２２ｂベクターで形質転換させたＥ．ｃｏｌｉ ＢＬ２１をＬＢ培地（１００μｇ／ｍｌ アンピシリンを含む）に移した後、３７℃で１２時間の間培養した。その後、１ｍＭのイソプロピル-D-チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）を添加して、再び６時間の間培養した後、融解緩衝液（ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒ、１Ｍ ＤＴＴ、リゾチーム、ＰＭＳＦを含む。）で細胞を溶かした。組換えタンパク質はニトリロ三酢酸ニッケル(Ｎｉ−ＮＴＡ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ， Ｃａｒｌｓｂａｄ， Ｃａ， ＵＳＡ) アガロースを用いて、製造社の方法に従い精製した。最終的に精製した組換えＡＤＫタンパク質はＳＤＳ−ＰＡＧＥで解析して確認したし、配列解析を通して再確認した後（配列番号１）、Ｂｒａｄｆｏｒｄ Ａｓｓａｙを用いて定量した。組換えタンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥで確認した結果を図１に示した。

（実験例１．ＡＤＫタンパク質の抗菌活性の検証）
上記の実施例１で得た組換えＡＤＫタンパク質の抗菌活性を検証するために、上記のＡＤＫタンパク質がグラム陰性菌である大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、Ｅ．ｃｏｌｉ）およびシュードモーナス・エールジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）とグラム陽性菌である黄色ブドウ球菌(Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ)の生長に及ぶ影響を解析した。

より具体的には、１×１０^５ＣＦＵの菌株を１０ｍｌＬＢ培地に入れて下記のような五つの条件に従って抗生剤（ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ）およびＡＤＫタンパク質をそれぞれ添加した（１群：ＬＢ ｂｒｏｔｈ ｍｅｄｉａ ｗｉｔｈ ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ １００μｇ／ｍｌ、２群：ＬＢ ｂｒｏｔｈ ｍｅｄｉａ ｗｉｔｈ Ａｄｋ ２０μｇ／ｍｌ、３群： ＬＢ ｂｒｏｔｈ ｍｅｄｉａ ｗｉｔｈ Ａｄｋ ５０μｇ／ｍｌ、４群： ＬＢ ｂｒｏｔｈ ｍｅｄｉａ ｗｉｔｈ Ａｄｋ ５０μｇ／ｍｌ、５群：Ｎｏｎ−ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ＬＢ ｂｒｏｔｈ ｍｅｄｉａ）。これを３７℃振盪培養器で培養した後、３時間間隔でそれぞれの群から１００μｌずつを取って滴定倍数でＬＢ培地に希釈の後、ＬＢアガー（Ｂｉｏｂａｓｉｃ、Ａｍｈｅｒｓｔ、ＮＹ）プレートに塗抹した。

これを再び３７℃培養器で一晩培養した後、ＬＢアガープレートの上のコロニー数を計数して、各時間ごとのＣＦＵ値を計算した。その結果を図２〜図４に示した。

図２〜図４に示すように、ＡＤＫタンパク質は、グラム陰性菌である大腸菌およびとシュードモーナス・エールジノーサの成長は阻害したが、グラム陽性菌である黄色ブドウ球菌の成長には、特別な影響を与えないことを確認した。一方、公知された抗生剤であるアンピシリンの場合、グラム陰性菌およびグラム陽性菌の成長の両方を阻害した。これにより、本発明のＡＤＫタンパク質は、グラム陰性菌、特異的に抗菌効果を示すことを確認した。

（実験例２．ＭＩＣおよびＭＢＣ解析）
組換えＡＤＫタンパク質が様々な種類のグラム陰性菌およびグラム陽性菌に成長阻害効果を示す適正濃度を確認するために、最小抑制濃度（ｍｉｎｉｍｕｍ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ、ＭＩＣ）および最小殺菌濃度（ｍｉｎｉｍｕｍ ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ、ＭＢＣ）を測定した。

より具体的に、各菌株（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＤＨ５α, Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｋ１、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ（ＡＴＣＣ １９６０６）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ（ＡＴＣＣ １３０７６）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（ＡＴＣＣ １３８８３）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ＵＳＡ：３００、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のコロニー１個を分離した後、これを１０ｍｌ ＭＨ 培地（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ ｂｒｏｔｈ；ＯＸＯＩＤ、Ｈａｍｐｓｈｉｒｅ、ＵＫ）で６時間培養して、分光光度計（ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）Ｏ．Ｄ ６２５ｎｍでの測定値が０．１（ＭａＦａｒｌａｎｄ０．５）になるように各菌株をＭＨ培地で希釈した。希釈した菌株を食塩水（０．０９％ＮａＣＬ）で１／２０倍で希釈した。１００μｌＭＨ培地を入れた９６ウェル培養プレートに濃度別の抗生剤（ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ、ｇｅｎｔａｍｙｃｉｎ、Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ、Ｉｍｉｐｅｎｅｍ）およびＡＤＫタンパク質をそれぞれ添加して、上記の希釈した菌株９μlを各ウェルに入れた後、一晩培養した。

ＭＩＣはＲＥＭＡ（Ｒｅｓａｚｕｒｉｎ ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ ａｓｓａｙ）を用いて計算したし、上記の９６ウェル培養プレートの各ウェルに３０μｌの０．０１％ｒｅｓａｚｕｒｉｎ（ＡＣＲＯＳ ｏｒｇａｎｉｃｓ、ＮＪ）溶液を入れて、１時間の間３７℃で培養した。各ウェルの培地が藍色である場合は、菌株が育たないことを意味し、ピンク色の場合は、菌株がよく育っていることを意味する。このような色の変化を分光光度計Ｏ．Ｄ５０５ｎｍで測定し、抗生剤およびＡＤＫタンパク質を処理していないウェルでの結果値を１００％として、５０％と８０％の抑制濃度を計算した。

また、ＭＢＣを測定するために、上記の９６ウェル培養プレートの各ウェルに１０μｌずつ取り、ＬＢアガープレートに塗抹した後、３７℃で一晩培養して、コロニーが育たない濃度を計算した。

以上の実験の結果を表１に示した。

上記の表１に示すように、ＡＤＫタンパク質は、実験に用いられたすべての種類のグラム陰性菌の成長を阻害して、これに対する殺菌効果を示したが、グラム陽性菌である黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、枯草菌の成長および生存には特別な影響がなく、グラム陰性菌特異的な抗菌効果を示すことを確認した。

（実験例３．ＳＥＭ解析）
組換えＡＤＫタンパク質が細胞の形態に及ぼす影響を確認するために、大腸菌に時間単位で組換えＡＤＫタンパク質を処理した後、ＳＥＭ（ｓｃａｎｎｉｎｇ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ）解析を行った。

より具体的には、１０ｍｌのＬＢ培地に１００μg/ｍｌアンピシリン（ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ、陽性対照群として利用）または２０μg/ｍｌ ＡＤＫタンパク質を処理した後、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｋ１を一定時間の間、３７℃で 振盪培養した。培養された大腸菌を１Ｘ ＰＢＳで３回洗浄した後、１ｍｌの２．５％グルタルアルデヒド（ｇｌｕｔａｒａｌｄｅｈｙｄｅ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）溶液を用いて固定した。上記の試料をＬＥＯ １４５５ ＶＰ ＳＥＭ（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ、Ｏｂｅｒｋｏｃｈｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて観察した。陰性対照群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）には、何も処理していなかった。その結果を図５に示した。

図５に示すように、陰性対照群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）の大腸菌は、明るく柔らかな細胞表面を有するのに対し、ＡＤＫタンパク質を処理した群の場合、大腸菌の表面が剥がれれ細胞死が表示されることを確認した。

（実験例４．ＴＥＭ解析）
組換えＡＤＫタンパク質が細胞の表面と細胞機関の破壊の程度に及ぼす影響を確認するために、大腸菌の組換えＡＤＫタンパク質を処理し、１２時間後、公知された方法により金ナノ粒子を用いたＴＥＭ（Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）解析を行った。陰性対照群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）には、何も処理していなかった。その結果を図６に示した。

図６に示すように、陰性対照群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）の大腸菌は、細胞の表面に一定に保つながらナノ粒子が細胞内に流入されてどのような破壊現象を見えなかったが、ＡＤＫタンパク質でコーティングされた金ナノ粒子を処理した群の場合、大腸菌の細胞壁が失われると同時に細胞の中に細胞死が起こることを観察した（白く見える）。

（実験例５．動物モデルを用いたＡＤＫタンパク質のグラム陰性菌の選択的な抗菌活性の検証）
動物モデルで組換えＡＤＫタンパク質がグラム陰性菌に対して選択的に結合するかどうかを確認するために、下記のような実験を行った。

まず、グラム陰性菌であるＥ．ｃｏｌｉ Ｋ１またはＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａを１０^７ＣＦＵ／ｍｉｃｅの濃度でＣＡｎＮ．Ｃｇ−Ｆｏｘｎ１ ｎｕ／ＣｒｌｊＯｒｉマウスなどの左側に皮下注射して、グラム陽性菌であるＳ．ａｕｒｅｕｓを同じ濃度でマウスなどの右側に皮下注射した。２００μg/ｍｉｃｅのＩＲＤｙｅ８００−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＡＤＫをマウスの尾に静脈注射した。注入３時間の後ＡＤＫの移動と位置をｎｅａｒ−ｉｎｆｒａｒｅｄ（ＮＩＲ）ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｍａｇｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍを用いて観察した。その結果を図７に示した。

図７に示すように、ＡＤＫタンパク質がグラム陰性菌（Ｅ．ｃｏｌｉ Ｋ１またはＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）側のみに、特異的に移動することを確認した。

また、動物モデルでグラム陰性菌に選択的に結合した遺伝子組換えＡＤＫタンパク質がグラム陰性菌に対する殺菌効果を有していることを確認するために、ＩＲＤｙｅ８００で染色したグラム陰性菌であるＥ．ｃｏｌｉ Ｋ１またはグラム陽性菌であるＳ．ａｕｒｅｕｓ（１０^７ＣＦＵ／ｍｉｃｅ）とＦＩＴＣ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＡＤＫ（２００μg/ｍｉｃｅ）をＣＡｎＮ．Ｃｇ−Ｆｏｘｎ１ ｎｕ／ＣｒｌｊＯｒｉマウスに腹腔注射した後、ｎｅａｒ−ｉｎｆｒａｒｅｄ（ＮＩＲ）ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｍａｇｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍを用いて、時間帯ごとに殺菌の可否を観察した。また、注射の２４時間後、各臓器を削除して、該当の菌株の存在を確認した。その結果を図８〜図１０に示した。

図８に示すように、ＩＲｄｙｅ８００−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ Ｅ．ｃｏｌｉだけ注入した群は、注入２４時間後までに、マウスの腹腔内に一定量のＥ．ｃｏｌｉが生存していたが、ＦＩＴＣ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＡＤＫを同様に処理した群では、マウスの腹腔内でＥ．ｃｏｌｉの生存率が大幅に減少し、注入２４時間後には完全に除去することを確認した。また、ＡＤＫタンパク質も２４時間後には、外部に排出された。

一方、図９に示すように、ＩＲｄｙｅ８００−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ Ｓ．ａｕｒｅｕｓを注入した群では、ＦＩＴＣ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＡＤＫを同様に処理しても、マウスの腹腔内に存在するＳ．ａｕｒｅｕｓの生存率には影響がないことを確認した。

また、図１０に示すように、マウスの肺、脾臓、肝臓、腎臓の組織の両方でＡＤＫタンパク質によってグラム陰性菌であるＥ．ｃｏｌｉが完全に除去されていることを確認した。

以上の実験結果を通して、ヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来のＡＤＫタンパク質は、グラム陰性菌に対して選択的に優れた抗菌活性を有していることを確認した。

（実験例６．敗血症動物モデルでＡＤＫタンパク質および抗生剤併用投与による治療効果の解析）
敗血症の動物モデルでＡＤＫタンパク質および抗生剤の併用投与による治療効果を分析するために、下記のような実験を行った。
（６−１．実験デザインおよび生存率の解析）
実験動物では、６週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃマウスを用いた。マウスの腹腔に１０^７ ＣＦＵ／ｍｉｃｅのＥ．ｃｏｌｉ Ｋ１（ｉｎ ＬＢ ｂｒｏｔｈ）を注射して敗血症を誘導した。Ｅ．ｃｏｌｉ Ｋ１の注射の後、アミノグリコシド系抗生剤の一種であるゲンタマイシン（ＧＥＮ、１００μg/ｋｇ）またはＡｄｋ（１００μg/ｍｉｃｅ）を腹腔注射した。陰性対照群（ＣＯＮ、Ｃｏｎｔｒｏｌ）の場合は、何にも投与しなかった。以上の実験デザインおよび実験群を図１１に示したし、各マウスの時間による生存率を図１２に示した。

図１２に示すように、何も投与していない陰性対照群は、敗血症の誘導の１８時間の後にすべて死亡しており、ゲンタマイシンのみを投与した群も、敗血症の誘導の３０時間後には、すべて死亡した。一方、ＡＤＫタンパク質とゲンタマイシンを一緒に投与した群は、敗血症の誘導の４８時間後の生存率が８０％と示し、陰性対照群に比べて著しく増加することを確認した（青い線）。

（６−２．血清の解析）
敗血症の誘導の１２時間後、各マウスから血清を分離して血清中の炎症性サイトカイン（ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、およびＩＬ−１β）、ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＢＵＮ、およびエンドトキシン（ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ）数値を解析した。この際に、サイトカインの濃度は、ＥＬＩＳＡキット（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を用いて測定し、エンドトキシンはエンドトキシン検出キット（ＬＡＬ ａｓｓａｙ ｋｉｔ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｂｒｅｍｅｎ、Ｇｅｒｍany）を用いて解析した。その結果を図１３〜図１５に示した。

図１３に示すように、陰性対照群（ＣＯＮ）で敗血症によって増加されたマウスの血清中の炎症性サイトカインであるＴＮＦ−α、ＩＬ−６、およびＩＬ−１βの量がＡＤＫタンパク質とゲンタマイシンを併用投与した場合、著しく減少して、単独投与群とも有意な差が出ることをことを確認した。

また、図１４に示すように、陰性対照群（ＣＯＮ）で肝臓と腎臓の毒性と関連されると知られている血清中のＡＳＴ、ＡＬＴおよびＢＵＮ濃度が敗血症によって増加し、マウスＡＤＫタンパク質とゲンタマイシンを併用投与した場合、上記のマーカーが著しく減少して、単独投与群とも有意な差が出ることをことを確認した。

また、図１５に示すように、敗血症によって増加されたマウスの血清中のエンドトキシンの量がＡＤＫタンパク質とゲンタマイシンを併用投与した場合、著しく減少することを確認した。一方、ゲンタマイシン、単独投与群は陰性対照群（ＣＯＮ）と有意な差が観察されなかったし、これにより、抗生剤であるゲンタマイシンは死んだバクテリアから分離された内毒素を除去することができない２次的な感染に対応をしていない副作用を有しており、ＡＤＫタンパク質を併用投与した場合、抗生物質による副作用を最小化することができるメリットがあることを確認した。

（６−３．組織の解析）
敗血症の誘導の１２時間の後、各マウスからの肺と脾臓の組織を摘出し、従来に公知された方法に従いパラフィン切片の後、Ｈ＆Ｅ染色を行い、顕微鏡を通して観察した。その結果を図１６および図１７に示した。

図１６に示すように、ＡＤＫタンパク質とゲンタマイシンを併用投与する場合には、陰性対照群（ＣＯＮ）と単独投与群に比べて肺組織での炎症誘発細胞の浸潤が著しく減少されることを確認した。

また、図１７に示すように、ＡＤＫタンパク質とゲンタマイシンを併用投与する場合には、陰性対照群（ＣＯＮ）と単独投与群に比べて脾臓の組織からの細胞死が顕著に減少されることを確認した。

（６−４．脾臓細胞でＢ細胞およびＴ細胞の細胞死滅程度の解析）
敗血症の誘導の１２時間の後、各マウスから脾臓の細胞を分離した後、従来に公知された方法に基づいてフローサイトメトリー（ＦＡＣＳ ａｎａｌｙｓｉｓ）を用いて、Ｂ細胞とＴ細胞の死滅程度を分析した（ＦＩＴＣ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ ｓｔａｉｎｉｎｇの利用）。その結果を図１８に示した。

図１８に示すように、陰性対照群（ＣＯＮ）で敗血症によって増加されたＢ細胞とＴ細胞の死滅がＡＤＫタンパク質とゲンタマイシンを併用投与した場合、著しく減少し、単独投与群とも有意な差が出ることを確認した。

（６−５．各組織内のバクテリアの数の解析）
敗血症の誘導の１２時間の後、各マウスから肝臓、肺、腎臓を摘出し、ＰＢＳ溶液の下でホモジナイザー（Ｂｕｌｌｅｔ Ｂｌｅｎｄｅｒ ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ、Ｎｅｘｔ Ａｄｖａｎｃｅ、ＮＹ、ＵＳＡ）を用いて、各組織を粉砕した。その後、上澄み液をＬＢアガープレートに塗抹して３７℃で培養し、各組織内のバクテリア の除去の可否を解析した。その結果を図１９に示した。

図１９に示すように、ＡＤＫタンパク質とゲンタマイシンを併用投与する場合には、陰性対照群（ＣＯＮ）と単独投与群に比べて、肝臓、肺、腎臓の組織でのバクテリアの除去の程度が著しく増加することを確認した。

以上の実験結果を通して、ＡＤＫタンパク質は、これまで公知された抗生剤とは異なり、バクテリアの増殖抑制だけではなく、死んだバクテリアから分離された内毒素を除去するのに優れた効果を有しており、抗生剤と併用する場合、抗生剤による副作用を最小限にすることができ、単独投与に比べて著しく優れた敗血症の治療効果を示すことを確認した。

以下、本発明の薬学的組成物および食品組成物の製剤の例を説明するが、これは本発明を限定しようとすることではなく、単に具体的に説明しようとするのである。

（製剤の例１．薬学的な組成物の製造）
（１−１．散剤の製造）
ＡＤＫタンパク質２ｇ
乳糖１ｇ
上記の成分を混合して氣密布に充填して散剤を製造した。

（１−２．錠剤の製造）
ＡＤＫタンパク質１００ｍｇ
コーンスターチ（トウモロコシ澱粉）１００ｍｇ
乳糖１００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム２ｍｇ
上記の成分を混合した後、通常の錠剤の製造方法に従い打錠して錠剤を製造した。

（１−３．カプセル剤の製造）
ＡＤＫタンパク質１００ｍｇ
コーンスターチ（トウモロコシ澱粉）１００ｍｇ
乳糖１００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム２ｍｇ
上記の成分を混合した後、通常のカプセル剤の製造方法に従いゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造した。

（製剤の例２．食品組成物の製造）
（２−１．健康食品の製造）
ＡＤＫタンパク質１００ｍｇ
ビタミン混合物適量
ビタミンＡアセテート７０ｇ
ビタミンＥ １．０ｍｇ
ビタミンＢ１ ０．１３ｍｇ
ビタミンＢ２ ０．１５ｍｇ
ビタミンＢ６ ０．５ｍｇ
ビタミンＢ１２ ０．２ｇ
ビタミンＣ １０ｍｇ
ビオチン １０ｇ
ニコチンさんアミド １．７ｍｇ
葉酸 ５０ｇ
パントテン酸カルシウム ０．５ｍｇ
無機質混合物適量
硫酸第一鉄 １．７５ｍｇ
酸化亜鉛 ０．８２ｍｇ
炭酸マグネシウム ２５．３ｍｇ
第１リン酸カリウム １５ｍｇ
第２リン酸カルシウム ５５ｍｇ
クエン酸カリウム ９０ｍｇ
炭酸カルシウム １００ｍｇ
塩化マグネシウム ２４．８ｍｇ
上記のビタミンおよびミネラル混合物の組成比は比較的健康食品に適合な成分を望ましい実施例で混合組成したが、その配合比を任意に変形実施しても差し支えなく、通常の健康食品の製造方法に従い上記の成分を混合した後、顆粒を製造して、通常の方法に従い健康食品組成物の製造に用いることができる。

Claims (15)

1. ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質を有効成分として含むグラム陰性菌に対する抗菌用の組成物であって、
   上記のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来である、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号１で表示される、または、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号２で表示される核酸配列でエンコーディングされる、抗菌用の組成物。
2. 上記のグラム陰性菌はエシェリキア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）属、 クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属、ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）属、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、 シゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）属、モラクセラ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ）属、ヘリコバクター（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）属、ステノトロホモナス（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ）属、ブデロビブリオ（Ｂｄｅｌｌｏｖｉｂｒｉｏ） 属、 レジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）の属からなる群より選ばれる１種以上であることを特徴とする、請求項１に記載のグラム陰性菌に対する抗菌用の組成物。
3. 上記のグラム陰性菌は、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、 シュードモーナス・エールジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、 シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、 シュードモナス・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）、 シュードモナス・クロロラフィス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ）、 シュードモナス・ペルツシノゲナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｅｒｔｕｃｉｎｏｇｅｎａ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シリンガエ （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ）、アシネトバクター・バウマニ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、アシネトバクター・ルオフィイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｗｏｆｆｉｉ）、アシネトバクター‐カルコアセチカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、アシネトバクター・ヘモリティカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、サルモネラ・エンテリカ （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ）、サルモネラ・ボンゴール（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｂｏｎｇｏｒｉ）、 サルモネラ・エンテリティディス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ）、サルモネラ・チフィリウム （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、サルモネラ・ガリナルム （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ）、サルモネラ・プローラム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐｕｌｌｏｒｕｍ）、サルモネラ・ムバンダカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｂａｎｄａｋａ）、サルモネラ・コレレスイス （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ）、サルモネラ・トンプソン（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｈｏｍｐｓｏｎ）、サルモネラ・インファンティス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｉｎｆａｎｔｉｓ）、サルモネラ・デルビー（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｄｅｒｂｙ）、 クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、 クレブシエラ・グラニュロマティス（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、クレブシエラ・テリジェナ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ）、ナイセリア・ゴノレエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、ナイセリア・メニンジティディス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、エンテロバクター・アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、エンテロバクター・クロアカエ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ）、シゲラ・ボイディイ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｂｏｙｄｉｉ）、シゲラ・ディセンテリアエ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、シゲラ・フレクスネリ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｎｅｒｉ）、シゲラ・ソンネイ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｓｏｎｎｅｉ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、モラクセラ・ラクナータ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｌａｃｕｎａｔａ）、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｂｏｖｉｓ）、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）、ヘリコバクター・ヘイルマニ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｈｅｉｌｍａｎｎｉｉ）、ヘリコバクター・フェリス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｆｅｌｉｓ）、ヘリコバクター・ムステラエ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｍｕｓｔｅｌａｅ）、ヘリコバクター・フェネリアエ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｆｅｎｅｌｌｉａｅ）、ヘリコバクター ラッピニ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｒａｐｐｉｎｉ）、ヘリコバクター・ヘパティカス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｈｅｐａｔｉｃｕｓ）、ヘリコバクター・ビリス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｂｉｌｉｓ）、ヘリコバクター・プローラム（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｕｌｌｏｒｕｍ）、ステノトロホモナス・マルトフィリア（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）、ステノトロホモナス・ニトリティレデュセンス（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｎｉｔｒｉｔｉｒｅｄｕｃｅｎｓ）、ブデロビブリオ・バクテリオボルス（Ｂｄｅｌｌｏｖｉｂｒｉｏｂａｃｔｅｒｉｏｖｏｒｕｓ）、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、レジオネラ・アニーサ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａａｎｉｓａ）、レジオネラ・バーミンガメンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｂｉｒｍｉｎｇｈａｍｅｎｓｉｓ）、レジュネラ・ボゼマニー（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｂｏｚｅｍａｎｉｉ）、レジオネラ・シンシナティエンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｃｉｎｃｉｎｎａｔｉｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・ダモフィイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｄｕｍｏｆｆｉｉ）、レジオネラ・フィーレイイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｆｅｅｌｅｉｉ）、レジュネラ・ゴルマニー（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｇｏｒｍａｎｉｉ）、レジオネラ・ハッケリアエ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｈａｃｋｅｌｉａｅ）、レジオネラ・イスラエレンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）、レジオネラ‐ジョルダニス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｊｏｒｄａｎｉｓ）、レジオネラ・ランシンゲンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｌａｎｓｉｎｇｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・ロングビーチアエ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｌｏｎｇｂｅａｃｈａｅ）、レジオネラ・マセアケルニイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｍａｃｅａｃｈｅｒｎｉｉ）、レジオネラ・ミクダデイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｍｉｃｄａｄｅｉ）、レジオネラ・オークリジェンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｏａｋｒｉｄｇｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・セントヘレンシ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｓａｉｎｔｈｅｌｅｎｓｉ）、レジオネラ・ツクソネンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｔｕｃｓｏｎｅｎｓｉｓ）およびレジオネラ・ワズワーシイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｗａｄｓｗｏｒｔｈｉｉ）からなる群より選ばれる１種以上であることを特徴とする、請求項２に記載のグラム陰性菌に対する抗菌用の組成物。
4. ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質を有効成分として含む、グラム陰性菌に対する抗菌用の医薬部外品であって、
   上記のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来である、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号１で表示される、または、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号２で表示される核酸配列でエンコーディングされる、医薬部外品。
5. ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質を有効成分として含む感染性疾患の予防または治療用の薬学的組成物であって、
   上記のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来である、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号１で表示される、または、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号２で表示される核酸配列でエンコーディングされる、薬学的組成物。
6. 上記の感染性疾患はグラム陰性菌により誘発されることを特徴とする、請求項５に記載の感染性疾患の予防または治療用の薬学的組成物。
7. 上記のグラム陰性菌はエシェリキア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）属、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属、ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）属、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、シゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）属、モラクセラ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ）属、ヘリコバクター（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）属、ステノトロホモナス（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ）属、ブデロビブリオ（Ｂｄｅｌｌｏｖｉｂｒｉｏ）属、レジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）の属からなる群より選ばれる１種以上であることを特徴とする、請求項６に記載の感染性疾患の予防または治療用の薬学的組成物。
8. 上記のグラム陰性菌は、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、 シュードモーナス・エールジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、 シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、 シュードモナス・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）、 シュードモナス・クロロラフィス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ）、 シュードモナス・ペルツシノゲナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｅｒｔｕｃｉｎｏｇｅｎａ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シリンガエ （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ）、アシネトバクター・バウマニ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、アシネトバクター・ルオフィイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｗｏｆｆｉｉ）、アシネトバクター‐カルコアセチカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、アシネトバクター・ヘモリティカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、サルモネラ・エンテリカ （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ）、サルモネラ・ボンゴール（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｂｏｎｇｏｒｉ）、サルモネラ・エンテリティディス （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ）、サルモネラ・チフィリウム （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、サルモネラ・ガリナルム （Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ）、サルモネラ・プローラム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｐｕｌｌｏｒｕｍ）、サルモネラ・ムバンダカ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｂａｎｄａｋａ）、サルモネラ・コレレスイス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ）、サルモネラ・トンプソン（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｈｏｍｐｓｏｎ）、サルモネラ・インファンティス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｉｎｆａｎｔｉｓ）、サルモネラ・デルビー（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｄｅｒｂｙ）、 クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、 クレブシエラ・グラニュロマティス（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、 クレブシエラ・テリジェナ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ）、ナイセリア・ゴノレエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、ナイセリア・メニンジティディス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、エンテロバクター・アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、エンテロバクター・クロアカエ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ）、シゲラ・ボイディイ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｂｏｙｄｉｉ）、シゲラ・ディセンテリアエ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、シゲラ・フレクスネリ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｎｅｒｉ）、シゲラ・ソンネイ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｓｏｎｎｅｉ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、モラクセラ・ラクナータ（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｌａｃｕｎａｔａ）、モラクセラ・ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａｂｏｖｉｓ）、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）、ヘリコバクター・ヘイルマニ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｈｅｉｌｍａｎｎｉｉ）、ヘリコバクター・フェリス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｆｅｌｉｓ）、ヘリコバクター・ムステラエ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｍｕｓｔｅｌａｅ）、ヘリコバクター・フェネリアエ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｆｅｎｅｌｌｉａｅ）、ヘリコバクター ラッピニ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｒａｐｐｉｎｉ）、ヘリコバクター・ヘパティカス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｈｅｐａｔｉｃｕｓ）、ヘリコバクター・ビリス（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｂｉｌｉｓ）、ヘリコバクター・プローラム（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｕｌｌｏｒｕｍ）、ステノトロホモナス・マルトフィリア（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）、ステノトロホモナス・ニトリティレデュセンス（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｎｉｔｒｉｔｉｒｅｄｕｃｅｎｓ）、ブデロビブリオ・バクテリオボルス（Ｂｄｅｌｌｏｖｉｂｒｉｏｂａｃｔｅｒｉｏｖｏｒｕｓ）、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、レジオネラ・アニーサ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａａｎｉｓａ）、レジオネラ・バーミンガメンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｂｉｒｍｉｎｇｈａｍｅｎｓｉｓ）、レジュネラ・ボゼマニー（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｂｏｚｅｍａｎｉｉ）、レジオネラ・シンシナティエンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｃｉｎｃｉｎｎａｔｉｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・ダモフィイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｄｕｍｏｆｆｉｉ）、レジオネラ・フィーレイイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｆｅｅｌｅｉｉ）、レジュネラ・ゴルマニー（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｇｏｒｍａｎｉｉ）、レジオネラ・ハッケリアエ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｈａｃｋｅｌｉａｅ）、レジオネラ・イスラエレンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）、レジオネラ‐ジョルダニス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｊｏｒｄａｎｉｓ）、レジオネラ・ランシンゲンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｌａｎｓｉｎｇｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・ロングビーチアエ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｌｏｎｇｂｅａｃｈａｅ）、レジオネラ・マセアケルニイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｍａｃｅａｃｈｅｒｎｉｉ）、レジオネラ・ミクダデイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｍｉｃｄａｄｅｉ）、レジオネラ・オークリジェンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｏａｋｒｉｄｇｅｎｓｉｓ）、レジオネラ・セントヘレンシ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｓａｉｎｔｈｅｌｅｎｓｉ）、レジオネラ・ツクソネンシス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｔｕｃｓｏｎｅｎｓｉｓ）およびレジオネラ・ワズワーシイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｗａｄｓｗｏｒｔｈｉｉ）からなる群より選ばれる１種以上であることを特徴とする、請求項７に記載の感染性疾患の予防または治療用の薬学的組成物。
9. ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質を有効成分として含む感染性疾患の予防または改善用の食品組成物であって、
   上記のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来である、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号１で表示される、または、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号２で表示される核酸配列でエンコーディングされる、食品組成物。
10. ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質および抗生剤を有効成分として含む敗血症または敗血症性ショックの予防または治療用の薬学的組成物であって、
    上記のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来である、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号１で表示される、または、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号２で表示される核酸配列でエンコーディングされる、薬学的組成物。
11. 上記の抗生剤は、アミノグリコシド系（ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ）、ペニシリン系（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）、セファロスポリン系（ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎ）、テトラサイクリン系（ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ）、マクロライド系（ｍａｃｒｏｌｉｄｅｓ）、ストレプトグラミン系（ｓｔｒｅｐｔｏｇｒａｍｉｎｓ）、グリコペプチド系（ｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅ）、ペプチド系（ｐｅｐｔｉｄｅ）、フラボフォスフォリポール系（ｆｌａｖｏｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｌ）、ポリエーテル系（ｐｏｌｙｅｔｈｅｒ）、フェニコール系（ｐｈｅｎｉｃｏｌ）、 リンコサミド系（ｌｉｎｃｏｓａｍｉｄｅ）、リファマイシン系 （ｒｉｆａｍｙｃｉｎ）、ポリエン系（ｐｏｌｙｅｎｅ）、スルホンアミド系（ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ）、ベンゾピリミジン系 、キノロン系（ｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）、フルオロキノロン 系（ｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）およびニトロフラン系（ｎｉｔｒｏｆｕｒａｎ）からなる群より選ばれる１種以上の抗生剤であることを特徴とする、請求項１０に記載の薬学的組成物。
12. 上記のアミノグリコシド系抗生剤は、ゲンタマイシン、カナマイシン、リボスタマイシン、トブラマイシン、シソマイシン、アストロマイシン、イセパマイシン、アルベカシン、ジベカシン、スペクチノマイシン、ネチルマイシン、ミクロノマイシン、ストレプトマイシン、ジヒドロストレプトマイシン、アプラマイシン 、デストマイシン、ハイグロマイシン 、アミカシンおよびネオマイシンからなる群より選ばれる１種以上であることを特徴とする、請求項１１に記載の薬学的組成物。
13. ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質および抗生剤を有効成分として含む敗血症または敗血症性ショックの予防または改善用の食品組成物であって、
    上記のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来である、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号１で表示される、または、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号２で表示される核酸配列でエンコーディングされる、食品組成物。
14. ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質および抗生剤を有効成分として含むグラム陰性菌に対する抗菌用の食品添加物であって、
    上記のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来である、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号１で表示される、または、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号２で表示される核酸配列でエンコーディングされる、食品添加物。
15. ＡＤＫ（Ａｄｅｎｙｌａｔｅ Ｋｉｎａｓｅ）タンパク質および抗生剤を有効成分として含むグラム陰性菌に対する抗菌用の飼料添加物であって
    上記のＡＤＫタンパク質はヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）由来である、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号１で表示される、または、上記のＡＤＫタンパク質は配列番号２で表示される核酸配列でエンコーディングされる、飼料添加物。