JP6426273B2

JP6426273B2 - Ｇｐｃｒ１９作用剤を有効成分として含有する、アルツハイマー病または認知症を予防、治療、または遅延させるための薬学的組成物

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Publication number: JP6426273B2
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Inventors: ソン、スンヨン; ゾ、ゾンア; キム、テズ; キム、ヨンヒ
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Description

本発明は、Ｇタンパク質共役型受容体１９（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ−ＣｏｕｐｌｅｄＲｅｃｅｐｔｏｒ１９、ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、アルツハイマー病（ＡｌｚｈｅｉｍｅｒＤｉｓｅａｓｅ、ＡＤ）または認知症を予防、治療、または遅延させるための薬学的組成物およびアルツハイマー病または認知症を予防、改善または遅延させるための食品組成物に関するものである。

アルツハイマー病（ＡＤ）は、漸進的な神経細胞の退化により認知能力の喪失をもたらす、認知症の５０〜７０％を占める慢性神経退行性疾患で、脳組織内のアミロイドプラークおよびアミロイドとして存在する、原線維形態のβ−アミロイドタンパク質（Ａβ）と命名される３９−４３個のアミノ酸ペプチドの蓄積を特徴とする。

アルツハイマー病において、Ａβ沈着は、脳の神経細胞および間質細胞に有害であり、その結果、アルツハイマー病の特徴的な特性である脳の炎症および神経細胞の死滅を起こす。ＡＤの病因について多くの様々な理論が開陳されてきており、よく定立された理論の一つがコリン性経路の関連性を提案しており、これはＡＤの究極的発生過程として、神経伝達物質アセチルコリンの漸進的減少をもたらす。ＡＤはまた、パーオキシナイトライト（ｐｅｒｏｘｙｎｉｔｒｉｔｅ；ＯＮＯＯ−）およびスーパーオキサイドイオン（・Ｏ_２−）への露出のような酸化的ストレス状態と通常関連するＡβおよびタウ−関連神経線維タングル（ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙｔａｎｇｌｅｓ）の沈着を病理的特徴とする。

アルツハイマー病は、遺伝的要因により現れる家族性ＡＤと、正確な原因はわからないが、多くの患者に発症する散発性ＡＤとに分けられる。人間のＡＤ患者は、記憶力減退および増加した不安と過敏反応を含む心身的異常のような心理的な徴候を示すことによって複合的認知力の欠陥を現わす。

ＡＤにより死亡した患者の大脳では、老人性プラーク（ｓｅｎｉｌｅｐｌａｑｕｅ）と神経原線維のタングル（ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙｔａｎｇｌｅｓ）が病理学的特性として現れる。このうち老人性プラークは、細胞の外部にタンパク質と死んだ細胞などが蓄積されて形成されるもので、主構成成分は、アミロイド−ベータ（Ａｍｙｌｏｉｄ−β（Ａβ））と呼ばれるペプチドである。

ＡＤ患者の主な特徴である認知作用の漸進的な喪失は、異常に蓄積されたＡβによって誘発されるものと見られる。Ａβは、アミロイド前駆タンパク質（ａｍｙｌｏｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎ：以下「ＡＰＰ」と称する）からタンパク質分解（ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ）のプロセスを介して生成される。前駆物質であるＡＰＰは、β−セクレターゼ（ＢＳＣＥ）およびγ−セクレターゼによって分解され、Ａβが生成される。

現在、各国で使用されているＡＤ治療剤は、ＡＣｈ分解酵素阻害剤がほとんどであり、タクリン（ｔａｃｒｉｎｅ）、そしてアリセプト（ａｒｉｃｅｐｔ）などがこれに属する。これ以外にもメルク、バイエルなどの製薬会社がこれと類似する薬剤を市場に出している。タクリンの場合、肝毒性の副作用が大きく、治療が中止された場合が多いが、最近開発されたアリセプトは、このような副作用が少ないといわれる。

ＡＣｈの合成を促進させるために、その前駆体であるコリン、レシチンアセチルカルニチンなどを投与する臨床試験が何度も試みられたが、これらの物質がｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎｂａｒｒｉｅｒを通過できず、その効力が短期間であるという欠点のために、現在は注目されていない。

一方、ニコチン受容体阻害剤であるＡＢＴ−４１８、ムスカリン受容体阻害剤であるキサノメリン、アセチルコリン前駆体であるレシチン、アセチル−Ｌ−カルニチン、金属キレートであるデスフェリオキサミン、リオキノール、ベータ−シートブレーカーであるｉＡβ５、ｉＡβ１１、抗酸化剤であるビタミンＥ、イチョウ葉抽出物、メラトニン、イデベノン、ｓＡＰＰ放出剤であるニコチン、アセチルコリン、カルバコール、ベータセクレターゼまたはガンマセクレターゼ阻害剤であるＯＭ９９−１、ＯＭ９９−２、ＯＭ９９−３、Ｚ−ＶＬＬ−ＣＨＯ、抗炎症剤であるＮＳＡＩＤｓ系薬物などが開発されているが、まだ効果が若干の病理的症状を緩和または進行程度を遅らせるくらいの微々たるものであったり、それ自体の毒性のため、実際の適用が困難な物質がほとんどで、安定的で効果的なＡＤ治療薬の開発が急務である。

大韓民国特許 1,452,864 (2014.10.14.)
大韓民国特許 1,494,275 (2015. 2. 11.)
大韓民国公開特許 2015-0029043 (2015. 3. 18.)
大韓民国特許 785,656 (2007. 12. 7.)

Hardy, J. et al, Nat Neurosci. 1:355-358, 1998
Craven, R., Nat Rev. Neurosci. 2: 533, 2001; David, H. S. et al., Nat Rev. Neurosci. 2: 595-598, 2001
Yankner, B. A., Neuron 16: 921-932, 1996; Selkoe, D. J., Nature 399: A23-A31, 1999

本発明の発明者らは、ＧＰＣＲ１９作用剤であるタウロデオキシコール酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）およびその誘導体を含む組成物が、アルツハイマー病または認知症に効果があることを発見し、アルツハイマー病または認知症の予防および治療、改善、遅延用の薬剤成分として提案しようとするものである。現在までタウロデオキシコール酸ナトリウムおよびその誘導体を含む組成物をアルツハイマー病または認知症の改善および治療に試みた例は全く知られておらず、アルツハイマー病または認知症の治療効果について報告されたこともない。

本発明の目的は、有効成分としてＧＰＣＲ１９作用剤を含む、アルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の組成物を提供することであり、より具体的には、ＧＰＣＲ１９作用剤の一つであるタウロデオキシコール酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）およびその誘導体を有効成分として含むアルツハイマー病または認知症の予防、治療または遅延用の組成物を提供することである。より具体的には、タウロデオキシコール酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）およびその誘導体を有効成分として含有する、アルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延剤を提供することである。

前記目的を達成するために、本発明は、ＧＰＣＲ１９作用剤を有効成分として含有する、アルツハイマー病または認知症の予防、治療または遅延用の薬学的組成物を提供し、具体的にはタウロデオキシコール酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）およびその誘導体を有効成分として含むアルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の薬学的組成物が提供され、前記薬学的組成物は、注射剤および経口剤の形態で剤形化することができ、これには薬学的に許容可能な添加剤がさらに含まれうる。

本発明によるＧタンパク質共役型受容体１９（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ−ＣｏｕｐｌｅｄＲｅｃｅｐｔｏｒ１９、ＧＰＣＲ１９）作用剤は、個体に投与時に個体の健康に害を与えず、認知障害および行動障害を改善させる効能を示し、脳組織の細胞死滅を抑制し、免疫力を増強させ、アミロイドβ（Ａβ）プラークの形成を減少させることにより、アルツハイマー病または認知症を予防したり、既に疾患が発生した個体に疾患の進行を遅延させたり、治療する効能を示しうる。

対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、マウスの体重の変化を測定した結果を示したものである。対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、水中迷路実験を行い、空間学習能力を評価した結果を示したものである。対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、プラットフォームを除去した水槽内でのマウスの行動パターンをトレッキングした代表的なイメージを示したものである。対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、プラットフォームを除去した水槽内でのマウスの行動パターンにおいてプラットフォームの位置を行ったり来たり（ｃｒｏｓｓｉｎｇ）した回数およびプラットフォームの位置にとどまった時間を測定した結果を示したものである。対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、マウスの脳内前頭皮質と海馬組織で炎症を起こすアミロイドβ（Ａβ）プラークと、炎症反応を引き起こす細胞群であるミクログリア、アストロサイトを蛍光染色した結果を示したものである。対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、マウスの脳内前頭皮質と海馬組織で炎症を起こすアミロイドβ（Ａβ）プラークと、炎症反応を引き起こす細胞群であるミクログリア、アストロサイトを蛍光染色した結果を示したものである。対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、マウスの脳内前頭皮質領域内の細胞毒性を示すＲＯＳを生産するｉＮＯＳの発現を蛍光染色した結果を示したものである。薬物を投与したアルツハイマー病モデルマウスの脳組織を摘出して、前頭皮質と海馬領域における細胞死滅が発生した領域を蛍光染色した結果を示したものである。対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、マウスの血液を採取して、血液内炎症性物質について分析した結果を示したものである。対照群とアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回ずつ合計２０回注射した後、各実験群別のマウスの血液中代謝物質（グルコース等）の量を比較した結果を示したものである。

本発明は、Ｇタンパク質共役型受容体１９（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ−ＣｏｕｐｌｅｄＲｅｃｅｐｔｏｒ１９、ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、アルツハイマー病（ＡｌｚｈｅｉｍｅｒＤｉｓｅａｓｅ、ＡＤ）または認知症を予防、治療、または遅延用の薬学的組成物に関するものである。

本発明の一形態において、前記Ｇタンパク質共役型受容体１９（ＧＰＣＲ１９）作用剤は、タウロデオキシコール酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）である。

本発明の一形態において、前記薬学的組成物は、経口、直腸、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、脾内および経皮投与用の製剤の形で剤形化することができる。

より具体的には、前記薬学的組成物は、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤、滅菌された水溶液、非水性溶剤、凍結乾燥製剤、坐剤、および注射剤からなる群から選択されるいずれかの剤形を有することができる。

前記組成物の投与経路は、目的組織に到達することができる限り、ある一般的な経路を通じて投与することができる。本発明の組成物は、目的とするところにより、経口、直腸、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、脾内投与することができるが、これに限定されるものではない。また、前記組成物は、活性物質が標的細胞に移動することができる任意の装置によって投与することができる。

本発明の一実施形態において、経口投与のための薬学的製剤は、例えば糖衣錠、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤またはカプセル剤のような投与量単位形態およびアンプルで存在しうる。これらはそれ自体で公知の方法、例えば、通常の混合、粒状化、糖剤調製、溶解または凍結乾燥方法によって製造される。例えば、経口投与のための製薬学的製剤は、活性成分を固体担体と混合して、混合物を粒状化して、必要に応じて適切な添加剤を添加した後、混合物または顆粒を錠剤または糖衣錠の形で剤形化することにより製造することができる。

適切な担体としては、特に充填剤、例を挙げれば糖、例えばラクトース、サッカロース、マンニトールまたはソルビトール、セルロース製剤および／またはリン酸カルシウム、例えばリン酸三カルシウムまたはリン酸水素カルシウム、および結合剤、例えば、トウモロコシ、小麦、米またはジャガイモの澱粉を使用した澱粉ペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドン、および必要に応じて崩壊剤、例えば前記した澱粉、カルボキシメチル澱粉、架橋されたポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸またはその塩、例えばアルギン酸ナトリウムである。

添加剤としては、特に流動−調整剤および潤滑剤、例えばケイ酸、タルク、ステアリン酸またはその塩、例えばステアリン酸マグネシウムまたはカルシウム、および／またはポリエチレングリコールである。胃液に抵抗性でありうる適切なコーティングを糖衣錠コアに提供して、特に適切な有機溶媒または溶媒混合物中に任意にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタンを含有する濃縮された糖溶液、またはラッカー溶液が使用され、または胃液に抵抗性であるコーティングを形成するために、アセチルセルロースフタレートまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートのような適切なセルロース製剤の溶液を使用することができる。

他の経口投与可能な薬学的製剤としては、カプセル剤があり、ゼラチンで作られた乾式−充填カプセル、およびゼラチンおよび可塑剤、例えばグリセロールまたはソルビトールで作られた軟質の密封されたカプセル剤である。乾式−充填カプセルは、粒子の形態、例えば充填剤、例えばラクトース、結合剤、例えば澱粉、および／または滑沢剤、例えばタルクまたはステアリン酸マグネシウム、および適切であれば安定化剤との混合物の形で活性成分を含有することもできる。軟質カプセルで、活性成分を適切な液体、例えば脂肪油、パラフィン油または液体ポリエチレングリコールに溶解または懸濁させて、ここに安定化剤を添加することもできる。

非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤が含まれる。非経口製剤は、様々な方式、例えば静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、脾内、皮内、皮下、好ましくは静脈内方式で効果的な注射液でもよい。このような液体は、好ましくは、活性成分を単独で、または薬学的に許容可能な担体とともに含有する凍結乾燥された製剤から使用前に製造されうる等張性水溶液または懸濁液である。薬学的製剤は、殺菌され得／されていて、保存剤、安定化剤、湿潤剤、および／または乳化剤、溶解剤、浸透圧を調節するための塩および／または緩衝液のような添加剤を含有することができる。

具体的には非水性溶剤、懸濁溶剤としては、プロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物性油、オレイン酸エチルのような注射可能なエステルなどを使用してもよい。坐剤の基剤としては、ウイテプゾール（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴール、ツイン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどを使用してもよい。

本発明の一形態において、Ｇタンパク質共役型受容体１９（ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩は、大脳アミロイド血管症、認知損傷に関連する障害、軽度認知障害、アルツハイマー病に関連する注意力欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経退行、退行性認知症、若年性認知症、老人性認知症、脳血管性認知症、アルコール性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、ピック障害および皮質基底核変性であるアミロイドβ−関連症から構成されたグループから選択される疾患を予防、治療、または遅延させることができる。

本発明の一形態において、Ｇタンパク質共役型受容体１９（ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩は、０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日の量、具体的には１ｍｇ／ｋｇ／日〜５００ｍｇ／ｋｇ／日の量、より具体的には、１０ｍｇ／ｋｇ／日〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の量が７５ｋｇ体重の温血動物に投与されることにより、アルツハイマー病または認知症を予防または治療することができる。

本発明の一形態において、Ｇタンパク質共役型受容体１９（ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩が、１週間に１回〜３回、具体的には、１週間に１回〜２回の投与間隔で投与することができる。

本発明で使用するためのＧタンパク質共役型受容体１９作用剤の投与量および投与間隔は、様々な要因、例えば活性成分の有効性および作用持続時間、投与方式、温血動物の性別、年齢、体重、および他の疾患の重軽度などの個別条件により異なりうる。特定の投与経路および投与量は、投与される個体の特徴、すなわち年齢、体重、疾患の状態、体のコンディションなどの条件により、担当医／獣医によって選択されうる。

本発明はまた、Ｇタンパク質共役型受容体１９（ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩と、認知強化剤、記憶強化剤、およびコリンエステラーゼ阻害剤から構成されたグループから選択される１種以上の薬物が配合された形態の製剤でありうる。

より具体的には、本発明によるＧタンパク質共役型受容体１９作用剤は、アルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延のために他の薬剤と組み合わせ／配合して投与することができる。したがって、本発明は、Ｇタンパク質共役型受容体１９作用剤および、異なるアルツハイマー病または認知症の予防／治療剤との配合治療を含む、アルツハイマー病または認知症患者の治療方法をも含む。

本発明は、Ｇタンパク質共役型受容体１９（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ−ＣｏｕｐｌｅｄＲｅｃｅｐｔｏｒ１９、ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩を含有する、アルツハイマー病（ＡｌｚｈｅｉｍｅｒＤｉｓｅａｓｅ、ＡＤ）または認知症を予防、改善または遅延用の食品組成物に関するものである。

本発明の一形態において、前記Ｇタンパク質共役型受容体１９（ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩は、大脳アミロイド血管症、認知損傷に関連する障害、軽度認知障害、アルツハイマー病に関連する注意力欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経退行、退行性認知症、若年性認知症、老人性認知症、脳血管性認知症、アルコール性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、ピック障害および皮質基底核変性であるアミロイドβ−関連病症から構成されたグループから選択される疾患を予防、改善または遅延させるための目的で使用することができる。

本発明において、「有効成分として含有する」とは、アルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延の効果をもたらす容量範囲として含有することを意味し、重症度および剤形により容量範囲は異なり得、適用回数も適用対象の年齢、体重および体質により異なりうる。

本発明において、「治療」とは、本発明の薬学組成物を、アルツハイマー病または認知症を持つ個体に適用した結果として、アルツハイマー病または認知症の完治はもちろん、アルツハイマー病または認知症の症状の部分的完治、好転および軽減を含む。

本発明において、「予防」とは、本発明の薬学組成物を、アルツハイマー病または認知症を持つ個体に適用して認知障害、行動障害、脳神経破壊などの症状ないし現象を抑制または遮断することにより、アルツハイマー病または認知症の症状が事前に発生しないようにすることを意味する。

また、本発明において、「改善」とは、症状の軽減、予防または治療を含む意味である。

また、本発明において、「有効成分」とは、単独で活性を示し、またはそれ自体は活性がない担体（ｃａｒｒｉｅｒ）とともに活性を示す成分を意味する。

前記本発明の薬学的組成物は、薬学的に有効な量で投与されるが、本発明において、用語「薬学的に有効な量」とは、医学的治療または改善に適用可能な合理的な効果／リスク比で疾患を治療するのに十分な量を意味し、有効容量のレベルは、個体の種類および重症度、年齢、性別、薬物の活性、薬物に対する敏感度、投与時間、投与経路および排出の割合、治療期間、同時に使用される薬物を含む要素およびその他の医学分野でよく知られた要素により決定されうる。

本発明において、用語「個体」とは、アルツハイマー病または認知症が既に発症していたり、発症されうる人間を含むすべての動物を意味し、本発明によるＧＰＣＲ１９作用剤またはタウロデオキシコール酸ナトリウム（Ｓｏｄｉｕｍｔａｕｒｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）またはその誘導体を含む組成物を個体に投与することにより、前記疾患を効果的に予防および改善することができる。

また、本発明は、Ｇタンパク質共役型受容体１９（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ−ＣｏｕｐｌｅｄＲｅｃｅｐｔｏｒ１９、ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩を、アルツハイマー病（ＡｌｚｈｅｉｍｅｒＤｉｓｅａｓｅ、ＡＤ）または認知症にかかった個体に投与する段階を含むアルツハイマー病または認知症の予防、遅延、または治療方法を提供する。

前記個体は、アルツハイマー病または認知症が既に発症していたり、発症されうる人間を含むすべての動物を意味するもので、人間、馬、羊、豚、ヤギ、ラクダ、犬などを含むことが望ましいが、これに限定されるものではない。

前記投与は、適切な方法で人間を含む個体に所定の物質を導入することを意味し、本発明によるＧタンパク質共役型受容体１９作用剤またはその薬学的に許容される塩の投与経路は、目的組織に到達しうる限り、ある一般的な経路を通じて経口投与したり、非経口投与（例えば、静脈内、皮下、腹腔内または局所に適用）することができ、有効成分が標的細胞に移動することができる任意の装置によって投与することもあるが、好ましくは皮下注射の方法で投与することができる。

前記治療は、本発明のＧタンパク質共役型受容体１９作用剤またはその薬学的に許容される塩を、アルツハイマー病または認知症を持つ個体に適用した結果として、アルツハイマー病または認知症の完治はもちろん、アルツハイマー病または認知症の症状の部分的完治、好転および軽減を含む。

前記予防は、本発明のＧタンパク質共役型受容体１９作用剤またはその薬学的に許容される塩を、アルツハイマー病または認知症を有する個体、または健康な個体に適用して認知障害、行動障害、脳神経破壊などの症状ないし現象を抑制または遮断することにより、アルツハイマー病または認知症の症状が事前に発生しないようにすることを意味する。
前記改善は、症状の軽減、予防または治療を含む意味である。

また、本発明は、アルツハイマー病（ＡｌｚｈｅｉｍｅｒＤｉｓｅａｓｅ、ＡＤ）または認知症の予防、治療、または遅延用の薬学的組成物として使用するためのＧタンパク質共役型受容体１９（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ−ＣｏｕｐｌｅｄＲｅｃｅｐｔｏｒ１９、ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩の用途を提供する。

さらに、本発明は、アルツハイマー病または認知症の予防、改善または遅延用の食品組成物として使用するためのＧタンパク質共役型受容体１９（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ−ＣｏｕｐｌｅｄＲｅｃｅｐｔｏｒ１９、ＧＰＣＲ１９）作用剤またはその薬学的に許容される塩の用途を提供する。

本発明によるＧタンパク質共役型受容体１９作用剤またはその薬学的に許容可能な塩は、個体に投与時に個体の健康に害を与えず、認知障害および行動障害を改善させる効果を示し、脳組織の細胞死滅を抑制し、免疫力を増強させ、アミロイドβ（Ａβ）プラークの形成を減少させることにより、アルツハイマー病または認知症を予防したり、既に疾患が発生した個体に疾患の進行を遅延させたり、治療する薬学的組成物または食品組成物の用途として使用することができる。

以下、本発明をより具体的に説明するために実施例などを挙げて説明する。しかし、本発明による実施例は、様々な他の形態に変形することができ、本発明の権利範囲が下記の実施例により限定されることを意味するものではない。

実験例１．アルツハイマー病のマウスモデル（５ｘＦＡＤ）でタウロデオキシコール酸ナトリウムによる体重変化および行動学的差異の分析

［実験方法］対照群のマウス（Ｃｏｎｔｒｏｌｍｏｕｓｅ、アルツハイマー病の遺伝子のない）とアルツハイマー病のマウス（群当たり４匹）にＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回合計２０回注射したマウスの体重変化を測定した。実験結果は、図１に示した。実験の結果、タウロデオキシコール酸ナトリウムの投与群で薬物投与によるマウスの急激な体重の変化が見られなかった。タウロデオキシコール酸ナトリウムの投与が動物の健康に害を与えないことを知ることができる。

［実験方法：ＭｏｒｒｉｓＷａｔｅｒｍａｚｅ］直径×高さ＝１５０ｃｍ×８０ｃｍの大きさの円形水槽に１０ｃｍ径のアクリル製のプラットフォームを設け、水槽が置かれた天井には水槽の中心位置にカメラを設置した。水槽の周りには、横ｃｕｅ、縦格子ｃｕｅ、円形物体ｃｕｅをそれぞれ配置した。実験準備は、水槽に２６℃程度の温度の水をプラットフォーム上に１ｃｍ程度の高さまで満たし、白い水性塗料を放った。

実験初日は、準備した水槽にマウスを水槽の一方の位置で水に入れて３分間泳がせた後、３分経過後には、実験者が手を使ってマウスをプラットフォームの位置に移動するように誘導し、マウスがプラットフォームの上に上がれば１分間放置した。１分経過後には、マウスを持ち上げ、両手で包んだ後、１分間待ってから、ケージに戻した。このプロセスを合計３回繰り返した。実験二日目からは、準備した水槽にマウスを水槽の一方の位置（「１番の位置」）で水に入れてマウスがプラットフォームを探すまでの時間を記録した。９０秒経過時にもプラットフォームが探せなかった場合に、実験者が手でマウスをプラットフォームの位置に移動するように誘導し、マウスがプラットフォームの上に上がると、３０秒間放置した後、マウスを持ち上げて両手で包んだ後、１分間待った。１分経過後には、水槽の他の二つの位置で（「２番の位置」、「３番の位置」）で繰り返して、最後に再び「１番の位置」で繰り返した。このプロセスを、マウスのグループ間の差が縮まるまで毎日繰り返した。実験最終日には、水槽内のプラットフォームを除去した後、マウスを水槽に入れて９０秒間の映像を録画して、分析ソフトウェアを利用して、水槽内のマウスの移動経路とプラットフォーム通過回数、プラットフォームの位置にとどまった時間などを分析した。

対照群のマウスとアルツハイマー病のマウス（群当たり４匹）にＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回合計２０回注射した後、水中迷路（ｗａｔｅｒｍａｚｅ）実験を介して空間学習（ｓｐａｔｉａｌｌｅａｒｎｉｎｇ）能力を評価した結果は、図２に示した。タウロデオキシコール酸ナトリウム薬物投与によってアルツハイマー病のマウスがプラットフォームを探すまでの所要時間が短縮されることを確認した。

対照群のマウスとアルツハイマー病のマウス（群当たり１０匹以上）にＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回合計２０回注射した後、プラットフォーム（ｐｌａｔｆｏｒｍ）を除去した水槽内でのマウスの行動パターンをトラッキング（ｔｒａｃｋｉｎｇ）した。プラットフォームを除去した水槽内でのマウスの移動トラッキング結果の代表的なイメージは、図３に示した。タウロデオキシコール酸ナトリウム投与マウス群でプラットフォームの位置への移動パターンがより活発に観察された。

上の実験では、マウスがプラットフォームの位置を行ったり来たり（ｃｒｏｓｓｉｎｇ）した回数およびプラットフォームの位置にとどまった時間を測定した結果を図４に示し、タウロデオキシコール酸ナトリウム投与マウスでプラットフォームを記憶する程度が高いことを確認した。プローブテスト（ｐｒｏｂｅｔｅｓｔ）で、各実験群別のマウスのプラットフォームの位置を行ったり来たりした回数およびとどまった時間を比較した結果、タウロデオキシコール酸ナトリウム投与時のプラットフォームの位置を探していく回数ととどまった時間が明らかに増加した。

実験例２．アルツハイマー動物モデル（５ｘＦＡＤ）でタウロデオキシコール酸ナトリウムによる脳組織の変化の分析

［実験方法：組織蛍光染色］マウスを麻酔した後、手足を固定させた後ハサミやピンセットなどで心臓が見えるように切開した。右心房の上部をはさみで軽く切って穴をあけ左心室側に針を差し込み、ＰＢＳを注入してパーフュージョン（ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ）させた。血管や臓器の色が白くなれば、４％ＰＦＡ（ｐａｒａｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ）溶液に交換し、筋肉の収縮が起こり、足の裏が硬くなるまで注入した。脳摘出ははさみで首を切った後、頭皮を剥いて、筋肉を切った後、端から鉗子やハサミを用いて皮をむき頭蓋骨の中央部分を長く切った後、両耳側の骨を砕いた。大脳、小脳、延髄まで分離してＰＦＡに漬け、２０時間反応させて３０％スクロースに移し、３日間反応させた。組織は、ＯＣＴ化合物を通じたフローズン（ｆｒｏｚｅｎ）状態でミクロトーム（ｍｉｃｒｏｔｏｍｅ）を用いて、３０μｍの厚さに切った。切った組織断片は、筆を用いてスライドに付け、非特異的抗体結合を防ぐためのブロッキングをした後、見ようとするタンパク質に対して特異的な抗体（蛍光が結合された）と反応させた。染色が完了したスライドは、共焦点顕微鏡を用いて蛍光程度を確認した後、イメージを撮影した。撮影したイメージは、分析用のソフトウェアを利用して、それぞれの蛍光に対して蛍光の強度を測定して数値に換算した。

対照群のマウスとアルツハイマー病のマウス（群当たり３匹）にＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回合計２０回注射した後、マウスの脳内前頭皮質（ｆｒｏｎｔａｌｃｏｒｔｅｘ）と海馬（ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ）組織で炎症を引き起こすアミロイドβプラークと炎症反応を引き起こす細胞群であるミクログリア（ｍｉｃｒｏｇｌｉａ）、アストロサイト（ａｓｔｒｏｃｙｔｅ）を蛍光染色した。その結果は、図５および図６に示した。実験の結果、タウロデオキシコール酸ナトリウム投与により脳前頭皮質領域のアミロイドβプラークの形成およびミクログリアとアストロサイトの細胞分布がともに明らかに減少することが現れ、脳の海馬領域の場合アストロサイトの細胞分布が著しく減少することが現れた。

アルツハイマー病のマウス（群当たり３匹）にＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回合計２０回注射した後、マウスの脳内前頭皮質領域内の細胞毒性を示すＲＯＳを生産するｉＮＯＳの発現を蛍光染色した結果は、図７に示した。タウロデオキシコール酸ナトリウム投与により脳前頭皮質領域のｉＮＯＳ発現が顕著に減少することが現れた。

薬物を投与したアルツハイマー病モデルマウスの脳組織を摘出して、前頭皮質と海馬領域での細胞死滅領域（ａｐｏｐｔｏｔｉｃｌｅｓｉｏｎ）のような病変現象が減少したかどうかを蛍光染色して測定し、その結果は、図８に示すとおりである。アルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウムを投与し、投与マウスの前頭皮質部位で細胞死滅（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）によって損傷した部位をＴＵＮＥＬ染色して分析した。実験の結果、タウロデオキシコール酸ナトリウム投与により、脳組織内の細胞死滅領域（ａｐｏｐｔｏｔｉｃｒｅｇｉｏｎ）が減少した。

実験例３．アルツハイマー病の動物モデルでタウロデオキシコール酸ナトリウムによる血液成分の変化の分析

［実験方法：血液分析］マウスから心臓採血あるいは眼窩採血を介して血液を取得した。炎症性物質の分析のためには、取得した血液を常温で２時間放置した後、遠心分離をして上澄み液を取った後、バイオプレックス（Ｂｉｏｐｌｅｘ）用キットと装置を用いて、それぞれの炎症性物質を定量分析した。生化学および血球細胞分析のためには、取得した血液を、適切なチューブまたは容器に入れて、生化学分析機器そして血球分析機器にそれぞれ適用して、データを取得した。

対照群のマウスとアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回合計２０回注射したマウスの血液を採取した後、血液中の炎症性物質について分析し、その結果は、図９に示す通りである。各実験群別のマウス血液中のサイトカインの量を比較した結果、タウロデオキシコール酸ナトリウム投与マウス群の血液中ＣＣＬ３量が増加したことが現れた。

対照群のマウスとアルツハイマー病のマウスにＰＢＳまたはタウロデオキシコール酸ナトリウム（１ｍｇ／ｋｇ）を週に２回合計２０回注射したマウスの血液を採取した後、血液中の生化学成分について分析した。その結果は、図１０に示した通りである。各実験群別のマウス血液中の代謝物質の量を比較した結果、タウロデオキシコール酸ナトリウム投与マウス群の血液中のグルコースの減少が認められた。

以下、本発明による各製剤の製造例を例示する。下記製造例は、本発明の実施に対する理解を助けるためのものであって、本発明による剤形の製造方法が下記製造例に限定されることを意味しない。

製造例１．散剤の製造
タウロデオキシコール酸ナトリウム１０ｍｇ
スクロース１００ｍｇ
タルク１０ｍｇ
前記の成分を粉末化して混合した後、機密包に充填して散剤を製造する。

製造例２．錠剤の製造
タウロデオキシコール酸ナトリウム１０ｍｇ
澱粉１００ｍｇ
スクロース１００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム２ｍｇ
通常の錠剤の製造方法により前記成分を混合した後、これを打錠して錠剤を製造する。

製造例３．カプセル剤の製造
タウロデオキシコール酸ナトリウム１０ｍｇ
結晶性セルロース３ｍｇ
ラクトース１５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム１ｍｇ
通常のカプセル剤の製造方法により前記成分を混合した後、ゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造する。

製造例４．顆粒剤の製造
タウロデオキシコール酸ナトリウム１０ｍｇ
大豆抽出物５０ｍｇ
ブドウ糖２００ｍｇ
澱粉５００ｍｇ
前記成分を混合した後、３０％エタノール１００ｍＬを添加して、６０℃で乾燥させて顆粒を形成した後、包に充填して顆粒剤を製造する。

製造例５．丸剤の製造
タウロデオキシコール酸ナトリウム１０ｍｇ
乳糖１，５００ｍｇ
グリセリン１，５００ｍｇ
澱粉９８０ｍｇ
前記成分を混合した後、通常の丸剤の製造方法により１丸あたり４ｇになるように製造する。

製造例６．注射剤の製造
タウロデオキシコール酸ナトリウム１０ｍｇ
マンニトール１８０ｍｇ
注射用滅菌蒸留水２，９７０ｍｇ
Ｎａ_２ＨＰＯ_４・１２Ｈ_２Ｏ３０ｍｇ
通常の注射剤の製造方法により１アンプルあたり（２ｍＬ）になるように、前記成分を混合して製造する。

製造例７．液剤の製造
タウロデオキシコール酸ナトリウム１０ｍｇ
異性化糖１０，０００ｍｇ
マンニトール５，０００ｍｇ
精製水適量
通常の液剤の製造方法により精製水に前記成分を溶解させ、適切な香を加えた後、瓶に充填して滅菌させて製造する。

Claims

タウロデオキシコール酸ナトリウムを有効成分として含有する、アルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の薬学的組成物。
前記薬学的組成物は、経口、直腸、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、脾内および経皮投与用製剤の形で製剤化されることを特徴とする、請求項１に記載のアルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の薬学的組成物。
前記タウロデオキシコール酸ナトリウムは、大脳アミロイド血管症、認知損傷に関連する障害、軽度認知障害、アルツハイマー病に関連する注意力欠陥症状、アルツハイマー病と関連する神経退行、退行性認知症、若年性認知症、老人性認知症、脳血管性認知症、アルコール性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、ピック障害および皮質基底核変性であるアミロイドβ−関連症から構成されたグループから選択される疾患を予防、治療または遅延させるためであることを特徴とする、請求項１に記載のアルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の薬学的組成物。
前記タウロデオキシコール酸ナトリウムが０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日の量で投与されるように製剤化された、請求項１に記載のアルツハイマー病または認知症の予防、治療または遅延用の薬学的組成物。
前記タウロデオキシコール酸ナトリウムが１ｍｇ／ｋｇ／日〜５００ｍｇ／ｋｇ／日の量で投与されるように製剤化された、請求項１に記載のアルツハイマー病または認知症の予防、治療または遅延用の薬学的組成物。
前記タウロデオキシコール酸ナトリウムが１ｍｇ／ｋｇ／日〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の量で投与されるように製剤化された、請求項１に記載のアルツハイマー病または認知症の予防、治療または遅延用の薬学的組成物。
前記タウロデオキシコール酸ナトリウムが、１週間に１回〜３回投与されることを特徴とする、請求項１に記載のアルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の薬学的組成物。
前記タウロデオキシコール酸ナトリウムが、認知強化剤、記憶強化剤、およびコリンエステラーゼ阻害剤から構成されたグループから選択される１種以上の薬物が配合されたことを特徴とする、請求項１に記載のアルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の薬学的組成物。
タウロデオキシコール酸ナトリウムを含有する、アルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の食品組成物。
前記タウロデオキシコール酸ナトリウムは、大脳アミロイド血管症、認知損傷に関連する障害、軽度認知障害、アルツハイマー病に関連する注意力欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経退行、退行性認知症、若年性認知症、老人性認知症、脳血管性認知症、アルコール性認知症、パーキンソン病に関連する認知症、ピック障害および皮質基底核変性であるアミロイドβ−関連症から構成されたグループから選択される疾患を予防、治療、または遅延させることを特徴とする、請求項９に記載のアルツハイマー病または認知症の予防、治療、または遅延用の食品組成物。