JP6360500B2

JP6360500B2 - 骨関節炎の処置のためのアグリカナーゼ阻害剤としての置換カルボン酸誘導体

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Publication number: JP6360500B2
Application number: JP2015556413A
Authority: JP
Inventors: クレイン，マルクス; リンデマン，スヴェン
Original assignee: Merck Patent GmbH
Current assignee: Merck Patent GmbH
Priority date: 2013-02-06
Filing date: 2014-01-16
Publication date: 2018-07-18
Anticipated expiration: 2034-01-16
Also published as: CA2900116C; EP2953932B1; EP2953932A1; CN104955806A; AU2014214325B2; IL240293A0; IL240293B; ES2627281T3; WO2014121884A1; AU2014214325A1; JP2016513092A; CN104955806B; CA2900116A1; US20150368188A1; AR095154A1; US9656949B2

Description

本発明は、ＡＤＡＭＴＳ５の関与が引き金となる生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防において使用するための、特に骨関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症または痛覚過敏の処置および／または予防において使用するための、式Ｉで表される化合物および特に式Ｉで表される少なくとも１種の化合物を含む医薬に関する。

本発明の背景
骨関節炎（ＯＡ）は、先進国において、身体に最も障害を引き起こす疾患の１つである。ＯＡの有病率は、世界的に見て、６０歳を超える男性１０人中１人および女性５人中１人と推定される。かくして、該疾患は相当な額の医療費の割合を占め、したがって社会経済上の著しい負担となる。現在、疾患修飾性処置は利用可能ではない。したがって、現在の処置は、関節全置換術が必要となり得るときまで、完全に対症療法である。

医療制度においてはこのように著しく重要であるにもかかわらず、ＯＡの原因は現在まで不明のままであり、有効な予防策はさらには遠い目標のままである。関節間隙の減少（関節軟骨の破壊に起因する）は、軟骨下骨および骨棘の形成における変化とともに、該疾患の放射線医学的な特徴である。しかしながら、患者においては、疼痛（荷重依存的かつ夜間の休息痛）とそれに続く機能障害が表面化される。それはまた、対応する二次疾患とともに患者を社会的に孤立させるものでもある。

骨関節炎という用語は、非公式な定義によると、その年齢に関する通常の程度を超えた「関節の摩耗」を示す。その原因は、過大荷重（例えば体重増加など）、例えば関節の位置異常などの先天性もしくは外傷性の原因、もしくは、また例えば骨粗鬆症などの骨疾患による骨変形とされている。骨関節炎は同様に、他の疾患、例えば関節の炎症（関節炎）として生じ得るか（二次骨関節炎）、または過荷重誘発性浸出（二次炎症反応）に随伴し得る（活性化された骨関節炎）。英米の専門家の文献では、関節表面の破壊がおそらくは主に荷重の影響に起因し得る骨関節症（ＯＡ）と、炎症性成分による関節変性が表面化した関節炎（リウマチ性関節炎、ＲＡ）とを区別する。

原則として、骨関節炎はまた、その原因によっても区別される。アルカプトン尿症性関節炎は、既存のアルカプトン尿症の場合における関節におけるホモゲンチジン酸(homogenitic acid)の堆積が増加したことに基づく。血友病性関節炎の場合においては、定期的な関節内出血が血友病により発生する（血友病性関節）。痛風性関節症は、正常な軟骨に対する尿酸結晶（尿酸）の機械的影響に起因する（Pschyrembel W.et al.: Klinisches Woerterbuch, Verlag Walter de Gruyter & Co, 253rd Edition, 1977）。

骨関節炎の古典的な原因は、関節の異形成である。臀部の例を使用すると、生理的臀部体位の場合において、最も大きな機械的応力を有する領域が異形成臀部の場合よりも著しく大きな面積を占めることが明らかとなっている。ただし、関節に作用する力により生じた応力は、関節形状とは実質的に無関係である。それらは本質的に、主要な応力領域（単数または複数）にわたって分配される。それゆえ、相対的に小さな領域の場合において、より大きな領域の場合におけるよりも、より大きな圧力が生じるであろう。それゆえ関節軟骨に対する生体力学的圧力は、異形成臀部の場合において、生理的臀部体位の場合よりも大きい。この法則は、一般に、理想解剖学的形状とは異なる支持関節における関節症変化の発生が増加したことが原因とされている。

損傷の結果が早期の摩耗の原因となる場合、用語外傷後関節症が用いられる。議論されている二次関節症または骨関節炎のさらなる原因は、機械的、炎症性、代謝性、化学的（キノロン）、栄養的、ホルモン性、神経学的および遺伝的な理由であるが、ほとんどの症例において下される診断は、原因疾患が見かけ上存在しないことを医師が意味する、特発性関節症である（H. I. Roach and S. Tilley, Bone and Osteoarthritis F. Bronner and M. C. Farach-Carson (Editors), Verlag Springer, Volume 4, 2007）。

骨関節炎の医薬的な原因は、例えばジャイレース阻害剤型の抗生物質（例えばシプロフロキサシン、レボフロキサシンなどのフルオロキノロン）などであり得る。これらの医薬は、血管化が不十分な組織（硝子関節軟骨、腱組織）においてマグネシウムイオンの錯化をもたらし、それにより不可逆的損傷が結合組織に発生するという結果を招く。この損傷は、一般に、小児および若年の成長期において、より顕著である。腱障害および関節障害は、このクラスの医薬の公知の副作用である。成人において、これらの抗生物質は、独立した薬剤師およびリウマチ専門医からの情報によると、硝子関節軟骨の生理学的劣化の加速をもたらす（Menschik M.et al., Antimicrob. Agents Chemother. 41, pp. 2562-2565, 1997; Egerbacher M. et al., Arch. Toxicol. 73, pp. 557-563, 2000; Chang H. et al., Scand. J. Infect. Dis. 28, pp. 641-643, 1996; Chaslerie A. et al., Therapie 47, p. 80. 1992）。フェンプロクモンによる長期処置はまた、関節内部構造の応力の場合において、骨密度を低減させることによって、関節症にも有利に働き得る。

骨関節症の公知の危険因子は、年齢に加えて、機械的過荷重、（微小）外傷、保持機構の欠如に起因する関節不安定化および遺伝因子である。しかしながら、その発生も可能な介入も完全には説明されていない（H. I. Roach and S. Tilley, Bone and Osteoarthritis F. Bronner and M. C. Farach-Carson (Editors), Verlag Springer, Volume 4, 2007）。

骨関節炎を患った関節において、一酸化窒素の含有量が、ある場合においては、上昇している。軟骨組織の高度な機械的刺激による類似の状況が観察されるが（Das P. et al., Journal of Orthopaedic Research 15, pp. 87-93, 1997; Farrell A. J. et al., Annals of the Rheumatic Diseases 51, pp. 1219-1222, 1992; Fermor B. et al., Journal of Orthopaedic Research 19, pp. 729-737, 2001）、その一方で、中程度の機械的刺激は、正の効果を有する傾向がある。よって、機械的な力の作用は、骨関節炎の進行に因果的に関与する（Liu X. et al., Biorheology 43, pp. 183-190. 2006）。

原則として、骨関節炎治療は、２つの目標：第一に、通常の荷重下の疼痛がないこと、第二に、関節における機械的制限または機械的変化を予防すること、を追及する。これらの目標は、純粋な対症療法アプローチとしての長期的な疼痛処置によって達成され得ることはない。なぜなら、これは疾患の進行を止めることができないからである。後者が達成される場合、軟骨破壊を停止させなければならない。成人患者の関節軟骨は再生され得ないため、関節軟骨上の点圧力の増加をもたらす例えば関節の異形成または位置異常などの病原因子の排除は、加えて大いに重要である。

最終的に、医薬を用いて、軟骨組織中の分解過程を予防または停止することが試みられている。

関節軟骨の機能的な状態ひいてはその応力抵抗性のための必須因子は、主にコラーゲン、プロテオグリカンおよび水からなる細胞外マトリックスである。細胞外マトリックスの分解に関与する酵素は、特にメタロプロテアーゼ、アグリカナーゼおよびカテプシン酵素を含む。

アグリカンは軟骨における主要なプロテオグリカンであり、そのコアタンパク質のプロテアーゼによる分解は、リウマチ性関節炎および骨関節炎などの、平面関節の軟骨破壊に関連する関節障害の初期兆候の１つである。軟骨破壊をもたらすこの分解プロセスは、軟骨表面上のアグリカンの消失に始まり、ＩＩ型コラーゲン繊維の分解へ進行する（Sandy J. D. et al., J. Clin. Invest. 89, 1512-1516, 1992; Lohmander L. S. et al., Arthritis Rheum. 36, 1214−1222, 1993）。

Ａｓｎ３４１−Ｐｈｅ３４２を切断するＭＭＰ（マトリックスメタロプロテアーゼ）およびＧｌｕ３７３−Ａｌａ３７４を切断するアグリカナーゼは、このアグリカン分解に関与する酵素として知られ、両者は、触媒活性中心に亜鉛を有するメタルプロテアーゼである。後者は、１９９９年にＡＤＡＭＴＳ（A Disintegrin and Metalloproteinase with Thrombospondin Motifs）であると決定された。ＡＤＡＭＴＳ１〜２０がこれまでに同定されており、ＡＤＡＭＴＳ４および５はそれぞれ、アグリカナーゼ−１およびアグリカナーゼ−２に対応する（Abbaszade I. et al, J. Biol. Chem. 274 (33): 23443-23450, 1999, Hurskainen T.L. et al., J. Biol. Chem. 274 (36): 25555-25563, 1999）。従来、ＭＭＰは主に軟骨破壊を引き起こすと考えられてきたが、多くの報告には、骨関節炎（ＯＡ）患者の関節から見出されたアグリカン断片の大部分が、アグリカナーゼによって切断された断片であると記録されている。よって、アグリカナーゼもまた、これらの病態にとって著しく危険な因子であると考えられる。

アグリカナーゼは、アグリカンの切断、プロコラーゲンプロセシング（Colige A et al., Proc. Natl Acad. Sd. USA, 94, 2374-2379, 1997）、炎症（Kuno K. et al., J. Biol. Chem., 272, 556-562, 1997）、血管新生（Vazquez F. et al., J. Biol. Chem. 1999, 274, 23349-23357）および腫瘍浸潤（Masui T. et al., J. Bio.l Chem., 272, 556-562, 1997）に関与することが示された。

ＡＤＡＭＴＳ５は、ＡＤＡＭＴＳ（トロンボスポンジンモチーフを有するディスインテグリンおよびメタロプロテイナーゼ(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs)）タンパク質ファミリーのメンバーである。該ファミリーのメンバーは、プロペプチド領域、メタロプロテイナーゼドメイン、ディスインテグリン様ドメインおよび１型トロンボスポンジン（ＴＳ）モチーフを含む、特徴のあるいくつかのタンパク質モジュールを共有する。このファミリーの個々のメンバーは、Ｃ末端ＴＳモチーフ数が異なり、いくつかは、特有のＣ末端ドメインを有する。この遺伝子にコードされる酵素は、２つのＣ末端ＴＳモチーフを含有し、軟骨の主要なプロテオグリカンであるアグリカンを切断するアグリカナーゼとして機能する。

ＡＤＡＭＴＳ５の触媒ドメインが欠失した遺伝子組換えマウスは、骨関節炎実験モデルにおける軟骨破壊に対して、耐性を示した（Glasson S.S. et al., Nature 434 (7033): 644-648, 2005）。ＡＤＡＭＴＳ５は、炎症性関節炎のマウスモデルにおけるマウス軟骨において、主要なアグリカナーゼである（Stanton H. et al., Nature 434 (7033): 648-652, 2005）。

加えて、アグリカナーゼ様ＭＭＰは、腫瘍細胞の転移または組織浸潤に関与することが示唆されており、ひいては、アグリカナーゼ阻害剤は、有効な抗腫瘍剤と期待されている。さらに、以下の文献は、アグリカナーゼ阻害剤がまた、骨関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症、痛覚過敏、リウマチ性関節炎、関節損傷、反応性関節炎、硬変症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、胃炎、乾癬、湿疹および皮膚炎としての炎症性疾患、喘息、アレルギー反応、慢性閉塞性肺疾患、肺線維症、急性呼吸窮迫（ＡＲＤＳ）、肺感染症、間質性肺炎、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、加齢性黄斑変性、心筋梗塞、角膜潰瘍、がん、腫瘍転移および浸潤、骨関節炎において見られる細胞外マトリックスの非制御分解、中枢神経系疾患、異常な創傷治癒、多発性硬化症、血管新生および再狭窄からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防においても有効であることを開示する。

US7030242、US6566384およびWO9805635は、骨関節炎の処置のためのアグリカナーゼおよびＭＭＰ−１３の阻害剤としてヒドロキサム酸およびカルボン酸の誘導体を開示する。US20080096918は、リウマチ性関節炎および骨関節炎の処置のためのアグリカナーゼ阻害剤として環状尿素を開示する。

WO2001062750およびWO2000012478は、様々な疾患の処置のためのＭＭＰ阻害剤としてアリールピペラジンを開示する。WO2009109230は、骨関節炎およびがん性疼痛の処置のためのアリール−およびヘテロアリールベンゾピラノンアミジノ誘導体を開示し、WO2008024922は、メタロプロテイナーゼ関連障害の処置のためのヒドロキシキノリン誘導体を開示する。

WO2005058884は、リウマチ性関節炎および骨関節炎、関節損傷、反応性関節炎、骨吸収障害、がん、喘息、アレルギー反応、慢性肺気腫、肺線維症、急性呼吸窮迫（ＡＲＤＳ）、肺感染症および間質性肺炎などの障害の処置のためのアグリカナーゼおよびＭＭＰ−１３の阻害剤として、シクロプロパン化合物を開示する。

WO2007008994およびWO2008058278は、関節障害、骨関節炎、がん、リウマチ性関節炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アテローム性動脈硬化症、加齢性黄斑変性、心筋梗塞、角膜潰瘍および他の眼表面疾患、肝炎、大動脈瘤、腱炎、中枢神経系疾患、異常な創傷治癒、血管新生、再狭窄、硬変症、多発性硬化症、糸球体腎炎、移植片対宿主病、糖尿病、炎症性腸疾患、ショック症、椎間板変性症、脳卒中、骨減少症および歯周病の処置のためのアグリカナーゼ阻害剤として、グルタマート誘導体を開示する。

本発明は、有益な特性を有する新規化合物、特に医薬の調製のために使用され得るものを見出すという目的に基づいた。

本発明の目標は、特に、新規活性化合物、特に好ましくは、骨関節炎の予防および処置に採用され得、かつ特にＡＤＡＭＴＳ５に対する選択性が高い新規ＡＤＡＭＴＳ５阻害剤を見出すことであった。加えて、目標は、少なくとも局所投与または関節内投与に際し、十分に安定である新規ＡＤＡＭＴＳ５阻害剤を見出すことであった。

本発明の概要
驚くべきことに、本発明による式Ｉで表される化合物は、骨関節炎の発症に重大な役割を果たすＡＤＡＭＴＳ５またはＡＤＡＭＴＳ４およびＡＤＡＴＭＳ５の両者を極めて効果的に阻害する。さらに、本発明の化合物は、ＭＭＰ１およびＭＭＰ１４などの他のＭＭＰを阻害する（これによって望ましくない副作用がもたらされ得る）ことのない、ＡＤＡＭＴＳ５またはＡＤＡＭＴＳ４およびＡＤＡＴＭＳ５の両者の高度に選択的な阻害剤である。加えて、本発明による化合物は滑液中において適切に良好な安定性を有し、このことは、それらが関節内投与に、ひいては骨関節炎またはリウマチ性関節炎の処置に好適であることを意味する。

驚くべきことに、WO2007008994の類似化合物と比較すると、カルボン酸のアルファ位で置換された本発明の化合物は、ＡＤＡＭＴＳ５またはＡＤＡＭＴＳ４およびＡＤＡＴＭＳ５の両者に対しより高度な選択性を示す一方で、WO2007008994の化合物は、他のＭＭＰ（マトリックスメタロプロテイナーゼ）もまた阻害する（これによって望ましくない副作用がもたらされる）ことが開示されている。加えて、本発明の化合物は、WO2007008994の化合物より強力なＡＤＡＭＴＳ５阻害剤である。さらに、脂肪族カルボン酸は、反応性代謝物（この場合アシルグルクロニド）の形成を受けて代謝的に排除される。例えばWO2007008994の化合物（Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−酪酸について記載された、高投薬量と組み合わされたこの反応性代謝物の形成は、特異体質性毒性のより高いリスクをもたらす（Smith G. F., Designing drugs to avoid toxicity, 2011）。WO2007008994の化合物とは対照的に、カルボン酸のアルファ位の置換により、本発明の化合物は、有意に低下したグルクロン酸化を示し、それによってより低い毒性がもたらされる。最終的に、本発明の化合物は、WO2007008994の化合物と比較して、有意に増大した血漿タンパク質結合（ヒトタンパク質）を示す。

本発明は、式Ｉ
式中、
Ｘは、ＣＨＲ^１またはＣＲ^１Ｒ^２であり、ここで任意にＲ^１およびＲ^２が、それらが結合しているＣ原子とともに、３〜７個のＣ原子を含有するシクロアルキルまたはヘテロシクリルを形成し、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＮＲＳＯ_２Ｒ’−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、ならびに、ここで任意に１〜１１個のＨ原子は、ＦまたはＣｌで置換され、

Ｄは、−Ｅ−Ｇ−Ｋまたは−Ｌであり、
Ｅ、Ｋは、互いに独立して、非置換であるかまたはＲ^１もしくはＲ^２で１〜４回置換された、飽和の、不飽和のまたは芳香族の炭化水素環、あるいは、非置換であるかまたはＲ^１、Ｒ^２、＝Ｓ、＝ＮＲ^１もしくは＝Ｏで一、二または三置換された、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する単環式の飽和の、不飽和のまたは芳香族のヘテロ環であり、
Ｇは、単結合であり、
Ｌは、−Ｅ−Ｇ−Ｋであり、ここでＥおよびＫが、単結合Ｇに加えて、１〜３個のＣ原子を含有する追加のアルキルリンカーを介して連結され、ここで任意に１個のＣＨ_２基は、−ＣＲ^１Ｒ^２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^１−、−ＯＣＯ−、−ＮＲ^１ＣＯＮＲ^２−、−ＮＲ^１ＣＯ−、−ＮＲ^１ＳＯ_２Ｒ^２−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ^１−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、

Ｙは、Ｈ、Ｒ^１、あるいは、非置換であるかまたはＲ^１で１〜４回置換された飽和の、不飽和のまたは芳香族の炭化水素環、あるいは、非置換であるかまたはＲ^１、＝Ｓ、＝ＮＲ^１もしくは＝Ｏで一、二または三置換された、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する単環式の飽和の、不飽和のまたは芳香族のヘテロ環であり、
Ｑは、単結合、あるいは、１〜１０個のＣ原子を含有する直鎖状、分枝状または単環式または二環式のアルキルリンカーであり、ここで任意に１〜５個のＣＨ_２基が、−ＣＲ^３Ｒ^４−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^３−、−ＯＣＯ−、−ＮＲ^３ＣＯＮＲ^４−、−ＮＲ^３ＣＯ−、−ＮＲ^３ＳＯ_２Ｒ^４−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ^３−で置換され、および、ここで任意に１〜２０個のＨ原子が、ＦまたはＣｌで置換され、ここでＲ^３およびＲ^４が、それらが結合する原子とともに、３〜７個のＣ原子を含有するシクロアルキルまたはヘテロシクリルを任意に形成し、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＮＲＳＯ_２Ｒ’−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、任意に１〜１１個のＨ原子が、ＦまたはＣｌで置換され、

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は、互いに独立して、Ｈａｌ、Ｅ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＳＯ_２ＮＲＲ’、ＣＮ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’、ＮＲＳＯ_２Ｒ’、ＮＲＣＯＲ’、非置換であるかまたは＝Ｓ、＝ＮＲ、＝Ｏ、Ｅ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＳＯ_２ＮＲＲ’、ＣＮ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’、ＮＲＳＯ_２Ｒ’もしくはＮＲＣＯＲ’で一、二または三置換された１〜１０個のＣ原子を含有する直鎖状または分枝状のアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＮＲＳＯ_２Ｒ’−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ−、−Ｃ≡Ｃ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、ここで任意に１〜２０個のＨ原子は、ＦまたはＣｌで置換され、ならびに、非置換であるかまたは＝Ｓ、＝ＮＲ、＝Ｏ、Ｅ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＳＯ_２ＮＲＲ’、ＣＮ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’、ＮＲＳＯ_２Ｒ’もしくはＮＲＣＯＲ’で一、二または三置換された３〜７個のＣ原子を含有するシクロアルキルまたはヘテロシクリル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＮＲＳＯ_２Ｒ’−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、ここで任意に１〜１１個のＨ原子は、ＦまたはＣｌで置換される、からなる群から選択され、

Ｒ、Ｒ’は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、Ｅ、Ｒ^５、ＯＲ^５、ＮＲ^５、ＳＯ_２Ｒ^５、ＳＯ_２ＮＲ^５Ｒ^６、ＣＮ、ＣＯＯＲ^５、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６、ＮＲ^５ＣＯＲ^６、非置換であるかまたは＝Ｓ、＝ＮＲ^５、＝Ｏ、Ｈａｌ、Ｅ、Ｒ^５、ＯＲ^５、ＮＲ^５、ＳＯ_２Ｒ^５、ＳＯ_２ＮＲ^５Ｒ^６、ＣＮ、ＣＯＯＲ^５、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６もしくはＮＲ^５ＣＯＲ^６で一、二または三置換された１〜１０個のＣ原子を含有する直鎖状または分枝状のアルキル、ここで、任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^５−、−ＯＣＯ−、−ＮＲ^５ＣＯＮＲ^６−、−ＮＲ^５ＣＯ−、−ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ^５−、−Ｃ≡Ｃ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、ここで任意に１〜２０個のＨ原子は、ＦまたはＣｌで置換され、ならびに、非置換であるかまたは＝Ｓ、＝ＮＲ^５、＝Ｏ、Ｈａｌ、Ｅ、Ｒ^５、ＯＲ^５、ＮＲ^５、ＳＯ_２Ｒ^５、ＳＯ_２ＮＲ^５Ｒ^６、ＣＮ、ＣＯＯＲ^５、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６もしくはＮＲ^５ＣＯＲ^６で一、二または三置換された３〜７個のＣ原子を含有するシクロアルキルまたはヘテロシクリル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^５−、−ＯＣＯ−、−ＮＲ^５ＣＯＮＲ^６−、−ＮＲ^５ＣＯ−、−ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ^５−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、任意に１〜１１個のＨ原子は、ＦまたはＣｌで置換される、からなる群から選択され、

Ｒ^５、Ｒ^６は、互いに独立して、Ｈ、アルキル、あるいは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する単環式または二環式の飽和の、不飽和のまたは芳香族の炭化水素環またはヘテロ環であり、
Ｒ^７は、Ｈ、または、１〜７個のＣ原子を含有するアルキルであり、ならびに、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグまたは立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物に関する。

本発明は、好ましくは、上記式Ｉ、式中Ｅが、
であり、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、上に開示された意味を有する、
で表される全化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物に関する。

本発明の他の好ましい態様は、上記式Ｉ、式中Ｋが、
であり、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｌ、Ｙ、Ｑ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、上に開示された意味を有する、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物である。

本発明の他の好ましい態様は、上記式Ｉ、式中Ｑが、
であり、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｙ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、上に開示された意味を有する、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物である。

本発明の他の好ましい態様は、上記式Ｉ、式中
Ｒ１、Ｒ２が、互いに独立して、非置換であるかまたはＥ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＲ’もしくはＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’で一、二または三置換された１〜５個のＣ原子を含有する直鎖状または分枝状のアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子は、Ｆで置換され、あるいは、非置換であるかまたはＥ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＲ’もしくはＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’で一、二または三置換された３〜６個のＣ原子を含有するシクロアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子は、Ｆで置換される、であり、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｑ、Ｙ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、上に開示された意味を有する、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物である。

本発明の他の好ましい態様は、上記式Ｉ、式中
Ｒ１、Ｒ２が、互いに独立して、非置換であるかまたはＥもしくはＯＲで一、二または三置換された、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、２−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、ＯＨまたはＯＲであり、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−または−ＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子は、Ｆで置換され、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｑ、Ｙ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、上に開示された意味を有する、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物である。

本発明の特に好ましい態様は、式Ｉ、式中
Ｅが、
であり、

Ｋが、
であり、

Ｑが、
であり、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｇ、Ｌ、Ｙ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、上に開示された意味を有する、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物である。

本発明の他の特に好ましい態様は、式Ｉ、式中
Ｅが、
であり、

Ｋが、
であり、

Ｑが、
であり、

Ｒ^１、Ｒ^２が、互いに独立して、非置換であるかまたはＥ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＲ’もしくはＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’で一、二または三置換された１〜５個のＣ原子を含有する直鎖状または分枝状のアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子は、Ｆで置換され、あるいは、非置換であるかまたはＥ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＲ’もしくはＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’で一、二または三置換された３〜６個のＣ原子を含有するシクロアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子は、Ｆで置換される、であり、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｇ、Ｌ、Ｙ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、上に開示された意味を有する、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物である。

Ｋが、
であり、

Ｑが、
であり、

Ｒ^１、Ｒ^２が、互いに独立して、非置換であるかまたはＥもしくはＯＲで一、二または三置換された、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、２−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、ＯＨまたはＯＲであり、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−または−ＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子は、Ｆで置換され、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｇ、Ｌ、Ｙ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、上に開示された意味を有する、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物である。

極めて好ましい態様は、以下：
ａ）４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸
ｂ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［５−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−２−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸
ｃ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［（Ｓ）−２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
ｄ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸
ｅ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸

ｆ）（２Ｓ，４Ｓ）−２−ベンジル−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−酪酸
ｇ）（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−エチル｝−ペンタン酸
ｈ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メトキシメチル−酪酸
ｉ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸
ｊ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−２−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸

ｋ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（３−フルオロ−ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
ｌ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［１−（４−フルオロ−フェニル）−ピペリジン−４−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸
ｍ）４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（５−フェニル−ピリジン−２−カルボニル）−アミノ］−酪酸
ｎ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（６−フェニル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酪酸
ｏ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペラジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸

ｐ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−３−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｑ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸
ｒ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［２−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−５−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸
ｓ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラゾール−１−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｔ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル

ｕ）２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（６−フェニル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
ｖ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−３−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル
ｗ）２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−２−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル
ｘ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（３−フルオロ−ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｙ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸メチルエステル

ｚ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［５−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−２−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ａａ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［２−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−５−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｂｂ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸メチルエステル
ｃｃ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［１−（４−フルオロ−フェニル）−ピペリジン−４−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｄｄ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラゾール−１−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル

ｅｅ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペリジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
ｆｆ）２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペラジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
ｇｇ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸メチルエステル
ｈｈ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｉｉ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸メチルエステル

ｊｊ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラジン−２−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｋｋ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（１，１，３−トリメチル−ブチルカルバモイル）−酪酸
ｌｌ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（５−フェニル−ピラジン−２−カルボニル）−アミノ］−酪酸
ｍｍ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラゾール−１−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｎｎ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［４−（１−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾイルアミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸

ｏｏ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸
ｐｐ）（Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２，２−ジメチル−酪酸
ｑｑ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［３−（４−フルオロ−ベンジル）−オキセタン−３−イルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
ｒｒ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−プロピルカルバモイル）−２−メチル−酪酸
からなる群から選択される式Ｉで表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグまたは立体異性体、または、あらゆる比率でのそれらの混合物である。

前述のアミノ酸が複数の鏡像異性体の形態で存在し得る場合、これら全ての形態およびこれらの混合物（例えばＤＬ体など）もまた、本明細書において含まれる。

さらに、略号は以下の意味を有する：
Ｂｏｃｔｅｒ−ブトキシカルボニル
ＣＢＺベンジルオキシカルボニル
ＤＮＰ２，４−ジニトロフェニル
ＦＭＯＣ９−フルオレニルメトキシカルボニル
ｉｍｉ−ＤＮＰイミダゾール環の１位における２，４−ジニトロフェニル
ＯＭｅメチルエステル
ＰＯＡフェノキシアセチル
ＤＣＣＩジシクロヘキシルカルボジイミド
ＨＯＢｔ１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＣＤＩカルボニルジイミダゾール
ＤＣＭジクロロメタン
ＤＭＡジメチルアセトアミド
ＤＭＦジメチルホルムアミド
ＥＤＣＩ１-エチル-３-（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
ＭＴＢＥメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＰＥ石油エーテル
ＲＴ室温
ＴＦＡトリフルオロ酢酸
ＴＨＦテトラヒドロフラン
ＮＭＯＮ−メチルモルホリン
Ｔ３Ｐ無水プロピルホスホン酸

Ｈａｌは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素、特にフッ素または塩素を示す。

Ａは、非分枝状（直鎖状）、分枝状または環状の炭化水素鎖であり、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個のＣ原子を有する。Ａは、好ましくはメチル、さらにエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルを、またさらにはペンチル、１−、２−もしくは３−メチルブチル、１，１−、１，２−もしくは２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−もしくは４−メチルペンチル、１，１−、１，２−、１，３−、２，２−、２，３−もしくは３，３−ジメチルブチル、１−もしくは２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、１，１，２−もしくは１，２，２−トリメチルプロピル、直鎖状または分枝状のヘプチル、オクチル、ノニルまたはデシルをも示す。

環状アルキルまたはシクロアルキルは、好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチルを示す（Ａが環状である場合に、それがこれらを示す）。
＝Ｏは、カルボニル酸素である。
加えて、Ａはまた、エテニル、プロピレニル、ブテニルなどのアルケニルをも示す。

アルコキシおよびアルカノイルなどの「アルキル」ならびに接頭辞「アルク(alk)」を有する他の基は、別段の定義がなされなければ、直鎖状または分枝状およびそれらの組み合わせであってもよい炭素鎖を意味する。アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−およびｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルなどを含む。特に好ましくは、Ｃ_１〜Ｃ_５アルキルである。Ｃ_１〜Ｃ_５アルキルラジカルは、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルまたはペンチルである。

「アリール」、「Ａｒ」または「芳香族炭化水素残基」は、炭素環原子を含有する単環状または多環状の芳香族環系を意味する。好ましいアリールは、単環または二環式の６〜１０員の芳香族環系である。「アリール」基の例は、これらに限定されないが、フェニル、２−ナフチル、１−ナフチル、ビフェニル、インダニルならびにそれらの置換誘導体を含む。最も好ましいアリールはフェニルである。

「ヘテロ環」および「ヘテロシクリル」は、Ｏ、ＳおよびＮから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含有する飽和のまたは不飽和の非芳香族環または環系を指し、さらに硫黄の酸化型つまりＳＯおよびＳＯ_２を含む。ヘテロ環の例は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジヒドロフラン、１，４−ジオキサン、モルホリン、１，４−ジチアン、ピペラジン、ピペリジン、１，３−ジオキソラン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピロリン、ピロリジン、テトラヒドロピラン、ジヒドロピラン、オキサチオラン、ジチオラン、１，３−ジオキサン、１，３−ジチアン、オキサチアン、チオモルホリンなどを含む。

「ヘテロアリール」は、Ｏ、ＳおよびＮから選択される少なくとも１個の環ヘテロ原子を含有する芳香族または部分的芳香族のヘテロ環を意味する。よって、ヘテロアリールは、アリール、シクロアルキルおよび芳香族ではないヘテロ環などの他の種類の環と縮合したヘテロアリールを含む。ヘテロアリール基の例は、以下：ピロリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピリジル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フラニル、トリアジニル、チエニル、ピリミジル、ベンズイソキサゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、インドリニル、ピリダジニル、インダゾリル、イソキサゾリル、イソインドリル、ジヒドロベンゾチエニル、インドリジニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、カルバゾリル、ベンズジオキシニル、ベンゾジオキソリル、キノキサリニル、プリニル、フラザニル、チオフェニル、イソベンジルフラニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、キノリル、インドリル、イソキノリル、ジベンゾフラニルなどを含む。ヘテロシクリル基およびヘテロアリール基には、３〜１５原子を含有する環および環系が含まれ、１〜３個の環を形成する。

これらの化合物の全ての生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物もまた、本発明に従う。

本発明はまた、これらの化合物の光学活性の形態（立体異性体）、鏡像異性体、ラセミ体、ジアステレオマーならびに水和物および溶媒和物にも関する。

本発明による式Ｉで表される化合物は、これらの分子構造のためにキラルであり得、したがって、さまざまな鏡像異性の形態で存在し得る。したがって、それらは、ラセミ体であっても、光学活性の形態であってもよい。本発明による化合物のラセミ体または立体異性体の薬学的効能が異なり得るため、鏡像異性体の使用が望ましいこともある。これらの場合において、最終産物だけでなく、中間体でさえも、当業者に公知のまたは合成において自体既に用いられている化学的または物理的手段によって、鏡像異性体の化合物へと分離され得る。

特に好ましくは、式Ｉで表される化合物の以下の立体異性体である。

薬学的または生理学的に許容し得る誘導体は、例えば、本発明による化合物の塩、および、いわゆるプロドラッグ化合物などもまた、意味するものと解される。プロドラッグ化合物は、例えばアルキル基もしくはアシル基、糖類またはオリゴペプチドなどで修飾され、生体内で迅速に切断されるか、または遊離されて、本発明による有効な化合物を形成する、式Ｉで表される化合物を意味するものと解される。本発明のプロドラッグ化合物は、例えば表１ａのエステル化合物番号２２〜３７などであり、ここで残基Ｒ^７は、生体内で迅速に切断されるか、または遊離されて、本発明による有効な化合物を形成する。プロドラッグはまた、例えばInt. J. Pharm. 115 (1995), 61-67に記載される、本発明による化合物の生分解性ポリマー誘導体も含む。

好適な酸付加塩は全ての生理学的もしくは薬理学的に許容し得る酸の無機塩または有機塩、例えばハロゲン化物、特に塩酸塩もしくは臭化水素酸塩、乳酸塩、硫酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、リン酸塩、メチルスルホン酸塩またはｐ−トルエンスルホン酸塩などである。

式Ｉで表される化合物の溶媒和物は、それらの互いの引力により形成する、式Ｉで表される化合物上への不活性溶媒分子の付加(adduction)を意味するものと解される。溶媒和物は、例えば、一水和物もしくは二水和物などの水和物、または、アルコラート、すなわち例えばメタノールもしくはエタノールなどのアルコールが付加された化合物、などである。

本発明はまた、例えば１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００または１：１０００などの比率における例えば２種のジアステレオマーの混合物など、本発明による式Ｉで表される化合物の混合物にも関する。これらは、２種の立体異性体の化合物の混合物が特に好ましい。

本発明の他の態様は、式Ｉで表される化合物の調製のための方法であって、化合物を構成単位(building block)の段階的反応によって調製することを特徴とする（例２を参照）。

それぞれの場合における反応を段階的に行うこと、および、保護基概念を適応させて構成単位の連結反応の順序を変更することもまた、可能である。

出発材料または出発化合物は一般に知られている。それらが新規である場合、それらは、それ自体知られている方法で製造することができる。

所望の場合、出発材料はまた、反応混合物からそれらを単離せずに、代わりにそれらをさらに式Ｉで表される化合物へ即座に変換することによって、in situでも形成され得る。

式Ｉで表される化合物は、好ましくは、加溶媒分解によって、特に加水分解によって、または水素化分解によって、それらを、それらの官能性誘導体から遊離することによって得られる。加溶媒分解または水素化分解のための好ましい出発材料は、１個もしくは２個以上の遊離アミノ基、カルボキシル基および／またはヒドロキシル基の代わりに、対応の保護アミノ基、カルボキシル基および／またはヒドロキシル基を含有するもの、好ましくはＮ原子に接続されたＨ原子の代わりにアミノ保護基を持つもの、である。さらに好ましいのは、ヒドロキシル基のＨ原子の代わりにヒドロキシル保護基を担持する出発材料である。好ましいのはまた、遊離カルボキシル基の代わりに保護カルボキシル基を担持する出発材料である。同一の、もしくは異なる複数の保護されるアミノ基、カルボキシル基および／またはヒドロキシル基が、出発材料の分子中に存在することもまた可能である。存在する保護基が互いに異なる場合、それらは、多くの場合において、選択的に切断除去することができる。

出発材料として使用される式Ｉで表される化合物の官能性誘導体は、例えば当該標準的な著作物および特許出願などに記載のように、アミノ酸およびペプチド合成の公知方法により製造することができる。

式Ｉで表される化合物は、例えば強酸などの助けを借りて、有利にはトリフルオロ酢酸または過塩素酸を使用して、ならびに塩酸もしくは硫酸などの他の強無機酸、ｐ−トリクロロ酢酸などの強有機酸、または、ベンゾイル−もしくはｐ−トルエンスルホン酸などのスルホン酸を使用して、使用される保護基に応じ、それらの官能性誘導体から遊離される。追加の不活性溶媒および／または触媒を存在存在させることは可能であるが、常に必要とするものではない。

それぞれの合成経路に応じて、出発材料は、不活性溶媒の存在下で任意に反応させることができる。

好適な不活性溶媒は、例えば、へプタン、ヘキサン、石油エーテル、ＤＭＳＯ、ベンゼン、トルエン、キシレン、トリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムもしくはジクロロメタン；メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールもしくはｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル（好ましくはインドール窒素上での置換のための）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）もしくはジオキサンなどのエーテル；エチレングリコールモノメチルもしくはモノエチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル（ジグリム）などのグリコールエーテル；アセトンもしくはブタノンなどのケトン；アセトアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）もしくはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などのアミド；アセトニトリルなどのニトリル；酢酸エチルなどのエステル、例えば酢酸もしくは無水酢酸などのカルボン酸もしくは酸無水物、ニトロメタンもしくはニトロベンゼンなどのニトロ化合物、また任意に当該溶媒の相互の混合物または水との混合物もである。

溶媒の量は重大ではない；１０ｇ〜５００ｇの溶媒が、好ましくは、反応される式Ｉで表される化合物のｇあたりに加えられ得る。

酸結合剤、例えばアルカリもしくはアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩もしくは他の弱酸のアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩など、好ましくはカリウム塩、ナトリウム塩またはカルシウム塩を加えるか、もしくは、例えばトリエチルアミン、ジエチルアミン、ピリミジンもしくはキノリンなどの上の有機塩基、または、過剰のアミン成分を加えることが有利であり得る。

本発明により得られた化合物は、それらが製造された対応する溶液から分離することができ（例えば遠心分離および洗浄などによって）、および分離後に他の組成物中に保管することができるか、または、それらは製造溶液中に直接的に残存させることができる。本発明により得られた化合物はまた、特定の使用のために、所望の溶媒中に吸収されることもできる。

好適な反応温度は、０〜４０℃の、好ましくは５〜２５℃の温度である。

反応時間は、選択された反応条件に依存する。一般に、反応時間は０．５時間〜１０日間、好ましくは１〜２４時間である。マイクロ波の使用の際、反応時間は、１〜６０分間の数値まで低減され得る。

式Ｉで表される化合物、およびそれらの製造のための出発材料もまた、加えて、例えば前記反応に好適であって知られている反応条件下で、（例えばHouben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgartなどの標準的な著作物における）文献に記載のように、公知方法によって製造される。ここではより詳細に記載されていないが、それ自体知られている変形の使用もまた、ここでなされ得る。

従来の仕上げ(work-up)のステップ、例えば反応混合物および抽出物への水の添加などは、溶媒の除去後に化合物を得ることを可能とする。生成物のさらなる精製のため、蒸留もしくは結晶化がこれに続くか、またはクロマトグラフィ精製を行うことは有利であり得る。

本発明の他の態様は、式Ｉで表される化合物の調製方法であって、
ａ）式Ｉで表される化合物の塩基を、酸との処置によって、その塩の１つへ変換すること、または、
ｂ）式Ｉで表される化合物の酸を、塩基との処置によって、その塩の１つへ変換すること
を特徴とする。

式Ｉで表される酸は、例えばエタノールなどの不活性溶媒中での等量の該酸および塩基の反応などにより、塩基および続く蒸発を使用して、関連する付加塩へ変換され得る。この反応に好適な塩基は、特に生理学的に許容し得る塩を与えるものである。よって、式Ｉで表される酸は、塩基（例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウムなど）を使用して、対応する金属塩、特にアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩へ、または対応するアンモニウム塩へ、変換され得る。例えばエタノールアミンなどの生理学的に許容し得る塩を与える有機塩基もまた、この反応に好適である。

他方、式Ｉで表される塩基は、例えば、エタノールなどの不活性溶媒中、等量の塩基および酸の反応、続く蒸発により、酸を使用して、関連する酸付加塩へ変換され得る。この反応に好適な酸は、特に生理学的に許容し得る塩を与えるものである。よって、無機酸、例えば、硫酸、硝酸、ハロゲン化水素酸、例えば塩酸もしくは臭化水素酸、リン酸、例えばオルトリン酸、スルファミン酸、さらに有機酸、特に、脂肪酸、脂環式の酸、芳香脂肪族の酸、芳香族酸もしくは複素環酸、一塩基もしくは多塩基カルボン酸、スルホン酸もしくは硫酸、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、ピバル酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、メタンスルホン酸もしくはエタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンモノ−および−ジスルホン酸またはラウリル硫酸を使用することが可能である。例えばピクリン酸塩などの生理学的に許容し得ない酸を有する塩は、式Ｉで表される化合物の単離および／または精製のために使用され得る。

式Ｉで表される化合物が良好な耐容性を示し、価値ある薬理学的特性を有することが見出された。なぜなら、それらはアスパラチルプロテアーゼ、特にＡＤＡＭＴＳ５を選択的に阻害するからである。

したがって、本発明はさらに、ＡＤＡＭＴＳ５によって、および／またはＡＤＡＭＴＳ５により促進されるシグナル伝達によって、引き起こされ、促進され、および／または、伝播される疾患の処置および／または予防のための医薬の調製のための、本発明による化合物の使用に関する。

よって、本発明はまた、特に、生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、本発明による少なくとも１種の化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩、誘導体、プロドラッグ、溶媒和物および立体異性体の１種もしくはあらゆる比率でのそれらの混合物を含む医薬にも関する。

特に好ましいのは、ＡＤＡＭＴＳ５に関係する生理学的および／または病態生理学的な状態である。

生理学的および／または病態生理学的な状態は、例えば疾患もしくは病気および医学的障害、愁訴、症状または合併症などの医学関連の生理学的および／または病態生理学的な状態、特に疾患を意味するものと解される。

本発明はさらに、骨関節炎、リウマチ性関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症，および痛覚過敏からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、本発明による少なくとも１種の化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体の１種またはあらゆる比率でのそれらの混合物を含む医薬に関する。

本発明の特に好ましい態様は、骨関節炎および疼痛からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、本発明による少なくとも１種の化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体の１種またはあらゆる比率でのそれらの混合物を含む医薬である。

本発明は、さらに、骨関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症、痛覚過敏、リウマチ性関節炎、関節損傷、反応性関節炎、硬変症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、胃炎、乾癬、湿疹および皮膚炎としての炎症性疾患、喘息、アレルギー反応、慢性閉塞性肺疾患、肺線維症、急性呼吸窮迫（ＡＲＤＳ）、肺感染症、間質性肺炎、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、加齢性黄斑変性、心筋梗塞、角膜潰瘍、がん、腫瘍転移および浸潤、骨関節炎において見られる細胞外マトリックスの非制御分解、中枢神経系疾患、異常な創傷治癒、多発性硬化症、血管新生および再狭窄からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、本発明による少なくとも１種の化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体の１種またはあらゆる比率でのそれらの混合物を含む医薬に関する。

本発明は、さらに好ましくは、骨関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症、痛覚過敏、リウマチ性関節炎、関節損傷、反応性関節炎、中枢神経系疾患、多発性硬化症、血管新生、がん、腫瘍転移および浸潤からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、本発明による少なくとも１種の化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体の１種またはあらゆる比率でのそれらの混合物を含む医薬に関する。

特に好ましくは、本発明は、骨関節炎、リウマチ性関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症および痛覚過敏からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、本発明による少なくとも１種の化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体の１種またはあらゆる比率でのそれらの混合物を含む医薬に関する。

疼痛は複雑な知覚であり、急性事象としては警告および制御シグナルの性質を有するが、慢性疼痛としてはこれを失っており、この場合において（慢性疼痛症候群として）、今日、独立した症候群として考えられ、処置されるべきである。痛覚過敏は、疼痛に対する過剰な感受性および通常は痛みを伴う刺激に対する反応に対して、医学において使用される用語である。疼痛を誘発し得る刺激は、例えば、圧力、熱、冷たさ、または炎症などである。痛覚過敏は、知覚過敏の形態であり、刺激に対する過剰な感受性の総称である。異痛症は、医学において、通常は疼痛を引き起こさない刺激によってもたらされる疼痛の知覚のために使用される用語である。

上に開示された医薬が、生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防のための医薬の調製のための、本発明による化合物の対応する使用を含むことが意図される。

加えて、上に開示された医薬が、本発明による少なくとも１種の化合物がかかる処置を必要とする患者に投与される、上の生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防のための対応する方法を含むことが意図される。

本発明による化合物は、好ましくは、実施例に記載のとおり、酵素アッセイおよび動物実験において容易に実証され得る、有利な生物学的活性を呈する。かかる酵素をベースとしたアッセイにおいて、本発明による化合物は、好ましくは、好適な範囲で、好ましくはマイクロモラー範囲で、より好ましくはナノモラー範囲でＩＣ_５０値により通常記録される阻害効果を呈し、かつ引き起こす。

本発明による化合物は、ヒトまたは動物、特に哺乳動物、例えばサル、イヌ、ネコ、ラットもしくはマウスなどに投与され得、ヒトまたは動物の体の治療的処置において、および、前述の疾患と対抗するにおいて、使用され得る。それらはさらに、診断薬として、または試薬として使用され得る。

さらに、本発明による化合物は、ＡＤＡＭＴＳ５の隔離および活性または発現の調査のために使用され得る。加えて、それらは、妨げられたＡＤＡＭＴＳ５活性に関係する疾患のための診断方法における使用に特に好適である。したがって、本発明はさらに、ＡＤＡＭＴＳ５の隔離ならびに活性もしくは発現の調査のための、またはＡＤＡＭＴＳ５結合剤および阻害剤としての、本発明による化合物の使用に関する。

診断目的において、本発明による化合物は、例えば、放射活性的に標識され得る。放射活性標識の例は、^３Ｈ、^１４Ｃ、^２３１Ｉおよび^１２５Ｉである。好ましい標識方法は、ヨードゲン(iodogen)方法である（Fraker et al., 1978）。加えて、本発明による化合物は、酵素、フルオロフォアおよびケモフォアによって標識され得る。酵素の例はアルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼおよびグルコースオキシダーゼであり、フルオロフォアの例はフルオレセインであり、ケモフォアの例はルミノールであり、例えば蛍光呈色などのための自動検出システムは、例えばUS 4,125,828およびUS 4,207,554などに記載されている。

式Ｉで表される化合物は、特に非化学方法による、医薬調製物の調製のために使用され得る。この場合において、それらは、少なくとも１種の固体、液体(liquid)もしくは半流動体(semi-liquid)の賦形剤またはアジュバントとともに、任意に１種もしくは２種以上のさらなる活性成分（単数または複数）と組み合わせて、好適な投薬形態とする。

したがって、本発明はさらに、式Ｉで表される少なくとも１種の化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物を含む、医薬組成物に関する。特に、本発明はまた、さらなる賦形剤および／またはアジュバントを含む医薬組成物にも、少なくとも１種のさらなる医薬活性成分を含む医薬組成物にも、関する。

特に、本発明はまた、式Ｉで表される化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体の１種、もしくは、あらゆる比率でのそれらの混合物が、固体、液体もしくは半流動体の賦形剤またはアジュバントとともに、任意に１種もしくは２種以上のさらなる活性化合物（単数または複数）と組み合わせて、好適な投薬形態とすることを特徴とする、医薬組成物の調製方法にも関する。

本発明による医薬組成物は、ヒトの医薬または獣医薬として使用され得る。患者または宿主は、いずれの哺乳動物種、例えば霊長類種、特にヒト；マウス、ラットおよびハムスターを含む齧歯動物；ウサギ；ウマ、ウシ、イヌ、ネコなどに属し得る。動物モデルは実験調査を目的とするものであり、それらは、ヒト疾患の処置のためのモデルを提供する。

好適な担体物質は、経腸（例えば経口など）、非経口または局所の投与に好適であって、新規化合物とは反応しない有機物質または無機物質であり、例えば水、植物油（ひまわり油またはタラ肝油など）、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトースもしくはデンプンなどの炭水化物、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ラノリンまたはワセリンなどである。当業者は、その専門知識のおかげで、どのアジュバントが所望の医薬製剤に好適であるか精通している。溶媒、例えば水、生理食塩溶液またはアルコール、例えばエタノール、プロパノールもしくはグリセロール、糖溶液、例えばグルコース溶液もしくはマンニトール溶液、もしくは該溶媒の混合物、ゲル形成剤、錠剤補助剤および他の活性成分担体に加えて、例えば、潤滑剤、安定化剤および／または湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与えるための塩、抗酸化剤、分散剤、消泡剤、緩衝物質、フレーバーおよび／またはアロマもしくはフレーバー収集剤、防腐剤、可溶化剤もしくは染料などを使用することも可能である。所望の場合、本発明による組成物または医薬は、１種または２種以上のさらなる活性成分、例えば１種または２種以上のビタミンを含んでもよい。

用語「医薬製剤」および「医薬調製物」は、本発明の目的において同義語として使用される。

ここで使用される「薬学的耐容性」は、所望されない生理学的な副作用、例えば吐き気、めまい、消化の問題なしに、それらから得られた医薬組成物の哺乳動物への投与を容易にする、医薬、沈殿試薬、賦形剤、アジュバント、安定化剤、溶媒および、他の剤に関する。

非経口投与のための医薬組成物において、製剤の（低毒性）、採用されるアジュバントのおよびプライマリーパッケージングの、等張性、体水分正常および耐容性の要求が存在する。驚くべきことに、本発明による化合物は、好ましくは、直接使用が可能であること、よって、例えば高濃度の有機溶媒などの毒物学的に許容し得ない剤または他の毒物学的に許容し得ないアジュバントの除去のためのさらなる精製ステップが、本発明による化合物の医薬製剤における使用前に不要であること、という利点を有する。

本発明はまた、特に好ましくは、沈殿した非結晶の形態、沈殿した結晶の形態または可溶化形態もしくは懸濁形態での本発明による少なくとも１種の化合物と、任意に賦形剤および／またはアジュバントおよび／またはさらなる医薬活性成分とを含む医薬組成物にも関する。

本発明による固体化合物は、好ましくは、本発明による化合物の好ましくなく、望ましくない凝集が発生せずに、高度に濃縮された製剤の調製を可能にする。よって、活性成分を高含有量で有する使用準備済み(ready-to-use)の溶液は、水性溶媒とともに、または水性媒体中で、本発明による化合物を用いて調製され得る。

化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物はまた、凍結乾燥もされ得、得られた凍結乾燥体は、例えば注射調製物の調製などのために使用され得る。

水性組成物は、本発明による化合物を水性溶液中に溶解または懸濁させることと、任意にアジュバントを加えることとによって調製され得る。この目的のために、当該さらなるアジュバントを規定濃度で含む規定容量のストック溶液は、規定濃度の本発明による化合物を有する溶液または懸濁液へ有利に加えられ、混合物は任意に、予め計算した濃度まで水で希釈される。代わりに、アジュバントは、固体の形態で加えられ得る。それぞれの場合において必要とされる量のストック溶液および／または水が、続いて、得られた水性溶液または懸濁液へ加えらえ得る。本発明による化合物はまた、有利には、全てのさらなるアジュバントを含む溶液中に直接溶解または懸濁させることもできる。

本発明による化合物を含み、４〜１０のｐＨを、好ましくは５〜９のｐＨを有し、２５０〜３５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する溶液または懸濁液が、有利に調製され得る。よって、医薬組成物は、静脈内、動脈内、関節内、皮下または経皮で、実質的に疼痛がなく、直接投与され得る。加えて、調製物はまた、例えばグルコース溶液、等張食塩溶液またはリンガー溶液などの輸液に加えてもよく、該液はまた、さらなる活性成分をも含有してよく、よって比較的多量の活性成分が投与されることも可能にする。

本発明による医薬組成物はまた、本発明による複数の化合物の混合物をも含んでよい。

本発明による組成物は、生理学的に良好に耐容性を示し、調製が容易であり、正確に分配され得、好ましくは保管および輸送の間中ならびに複数回の凍結および解凍の過程の間の、アッセイ、分解産物および凝集体に関して安定である。それらは、好ましくは、冷蔵庫内温度（２〜８℃）で、ならびに、室温（２３〜２７℃）および６０％の相対大気湿度（Ｒ．Ｈ．）で、少なくとも３ヶ月〜２年間の期間にわたって安定したやり方で保存され得る。

例えば、本発明による化合物は、乾燥による安定的なやり方で保存され得、必要なときに、溶解または懸濁によって使用準備済みの医薬組成物へ変換され得る。可能な乾燥方法は、例えば、これらの例に制限されずに、窒素ガス乾燥、真空オーブン乾燥、凍結乾燥、有機溶媒による洗浄と続く空気乾燥、液体層(liquid-bed)乾燥、流動層(fluidised-bed)乾燥、噴霧乾燥、ローラー乾燥、層乾燥(layer drying)、室温での空気乾燥およびさらなる方法である。

用語「有効量」は、組織、系、動物もしくはヒトにおいて、例えば研究者または医師に求められるか、または所望される生物学的もしくは医学的な応答をもたらす、医薬または医薬活性成分の量を示す。

加えて、用語「治療的有効量」は、この量を施与されていない対応する対象と比較して、以下の結果：疾患、症候群、病状、愁訴、障害の改善された処置、治癒、予防もしくは排除、または副作用の予防、または同様に疾患、愁訴もしくは障害の進行の緩和、を与える量を示す。用語「治療的有効量」はまた、正常な生理学的機能を高めるのに有効な量をも包含する。

本発明による組成物または医薬の使用の際、本発明による化合物および／またはその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物は、一般に、使用ユニットあたり好ましくは０．１〜５００ｍｇ、特には５〜３００ｍｇの用量において、公知の市販の組成物または組成物に類似して使用される。１日用量は、好ましくは０．００１〜２５０ｍｇ／ｋｇ体重、特には０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重が好ましい。調製物は、例えば１日あたり２回、３回または４回など、１日あたり１回または２回以上投与され得る。しかしながら、患者に対する個々の用量は、個々の多数の因子に、例えば、使用される特定の化合物の有効性に、年齢、体重、一般の健康状態、性別、栄養吸収に、投与の時間および方法に、排泄率に、他の医薬との組み合わせに、ならびに特定の疾患の重症度および期間に、依存する。

生体内への医薬活性成分の取込みの尺度はその生物学的利用能である。医薬活性成分が、生体へ静脈内に注射溶液の形態で送達される場合、その絶対生物学的利用能、すなわち、そのままの形態で全身の血流、すなわち広範な血行に達する薬剤の割合は１００％である。治療活性成分の経口投与の場合において、活性成分は、一般に、製剤中、固体の形態であり、したがって、例えば胃腸管、口腔粘膜、鼻の膜もしくは皮膚などの進入障壁、特に角質層、を克服することができるように、または体に吸収され得るように、最初に溶解されなければならない。薬物動態、すなわち生物学的利用能に関するデータは、J. Shaffer et al., J. Pharm. Sciences, 88 (1999), 313-318の方法に類似して得られ得る。

さらに、このタイプの医薬は、薬学の技術分野において一般に公知の方法の１つを用いて調製され得る。

医薬は、例えば経口（口腔もしくは舌下を含む）、経直腸、経肺、経鼻、局所（口腔、舌下もしくは経皮を含む）、経膣または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内および特に関節内を含む）の経路などによる、所望の好適な経路のいずれかを介して、投与に適応され得る。このタイプの医薬は、例えば活性化合物を賦形剤（単数もしくは複数）またはアジュバント（単数もしくは複数）と組み合わせるなどによって、薬学の技術分野において公知の全ての方法を用いて調製され得る。

非経口投与は、好ましくは、本発明による医薬の投与に好適である。非経口投与の場合において、関節内投与が特に好ましい。

よって、本発明はまた、好ましくは、骨関節炎、外傷性の軟骨損傷、関節炎、疼痛、異痛症または痛覚過敏からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における関節内投与のための本発明による医薬組成物の使用にも関する。

関節内投与は、本発明による化合物が、関節軟骨の近くの滑液中へ直接投与され得、またそこから軟骨組織中へ拡散することもできるという利点を有する。よって、本発明による医薬組成物はまた、関節間隙へ直接注射されることもでき、ひいては、意図するように作用部位で直接、それらの作用を発現させ得る。本発明による化合物はまた、活性成分のゆっくりとした、持続した、および／または、制御された放出を有する、非経口的に投与される医薬の調製にも好適である。よって、それらはまた、投与が比較的長い時間間隔で行われれば足りるので、患者にとっては有利である遅延放出性の製剤の調製にも好適である。

特に好ましくは、骨関節炎、リウマチ性関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症および痛覚過敏からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における関節内投与のための、本発明による医薬組成物の使用である。

非経口投与に適応された医薬は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および溶質を含む水性および非水性の滅菌注射溶液；ならびに懸濁媒体および増粘剤を含み得る水性ならびに非水性の滅菌懸濁液も含み、これにより、製剤は、処置されるレシピエントの血液または滑液で等張にされる。製剤は、例えば注射目的のための水などの滅菌担体液体の添加しか使用直前に必要とされないように、例えば封がされたアンプルおよびバイアルなどの単回用量または多数回用量の容器において送達され得、フリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存され得る。レシピに従って調製された注射溶液および懸濁液は、無菌の粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。

本発明による化合物はまた、例えば単層小ベシクル、単層大ベシクルおよび多層ベシクルなどのリポソーム送達系の形態でも投与され得る。リポソームは、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどのさまざまなリン脂質から形成され得る。

本発明による化合物はまた、標的とされた医薬の賦形剤としての可溶性ポリマーにカップリングされることもできる。かかるポリマーは、パルミトイルラジカルで置換された、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールまたはポリエチレンオキシドポリリジンを包含し得る。本発明による化合物はさらに、医薬の徐放を達成するのに好適な生分解性ポリマーのクラス、例えばポリ乳酸、ポリ−イプシロン−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロキシピラン、ポリシアノアクリレート、ポリ乳酸−グリコール酸共重合体、例えばデキストランとメタクリレートとのコンジュゲートなどのポリマー、ポリホスホエステル、さまざまな多糖類およびポリアミンならびにポリ−ε−カプロラクトン、アルブミン、キトサン、コラーゲンまたは変性ゼラチン、ならびに、架橋または両親媒性の、ヒドロゲルのブロックコポリマーなどとカップリングされ得る。

腸内投与（経口または経直腸）に好適なものは、特に、錠剤、糖衣錠、カプセル、シロップ、ジュース、ドロップまたは坐薬であり、局所使用に好適なものは、軟膏、クリーム、ペースト、ローション、ゲル、スプレー、泡、エアロゾル、溶液（例えば、エタノールもしくはイソプロパノール、アセトニトリル、ＤＭＦ、ジメチルアセトアミド、１，２−プロパンジオールなどのアルコール、もしくは、それら互いの混合物および／または水とそれらとの混合物中の溶液）または粉末である。リポソーム組成物はまた、局所使用に特に好適である。

軟膏とするための製剤の場合において、活性成分は、パラフィン系クリーム基剤または水混和性クリーム基剤のいずれかとともに用いられ得る。代わりに、活性成分は、水中油のクリーム基剤または油中水の基剤を有するクリームへ処方され得る。

経皮投与に適応された医薬製剤は、レシピエントの表皮と広範かつ密接に接触させるための、独立した膏薬として、投与され得る。よって、例えば、活性成分は、一般論としてPharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)に記載されるように、イオン泳動により膏薬から送達され得る。

特に前述した構成成分に加えて、本発明による医薬はまた、特定のタイプの医薬製剤に関し、当該技術分野において通常の他の剤をも含んでよいことは言うまでもない。

本発明はまた、
（ａ）有効量の、式Ｉで表される化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよびその立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物、ならびに、
（ｂ）有効量のさらなる医薬活性成分
の個別のパックからなるセット（キット）にも関する。

セットは、好適な容器、例えば箱、カートン、個別のボトル、袋またはアンプルなどを含む。セットは、例えば、それぞれが、有効量の式Ｉで表される化合物および／またはその薬学的に許容し得る誘導体、溶媒和物、プロドラッグおよび立体異性体ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物、ならびに、溶解されたか、または凍結乾燥された形態の有効量のさらなる医薬活性成分を含有する、小分けされたアンプルを含んでもよい。

さらに、本発明による医薬は、ある知られた治療において、相加効果もしくは相乗効果を提供するために使用され得るか、および／または、ある既存の治療の有効性を取り戻すために使用され得る。

本発明による化合物に加えて、本発明による医薬組成物はまた、例えば骨関節炎の処置における使用のための、他のＤＤＲ２阻害剤、カテプシンＤ阻害剤、ＡＤＡＭＴＳ５阻害剤、ＮＳＡＩＤＳ、Ｃｏｘ−２阻害剤、グルココルチコイド、ヒアルロン酸、アザチオプリン、メトトレキサート、例えば抗ＩＣＡＭ−１抗体などの抗ＣＡＭ抗体、ＦＧＦ−１８などの、さらなる医薬活性成分を含んでもよい。言及された他の疾患の処置のため、本発明による医薬組成物はまた、本発明による化合物の他、それらの処置において当業者に知られているさらなる医薬活性成分を含んでもよい。

さらなる解説がなくとも、当業者は、上の記載を最も広い範囲において使用することができるものと考えられる。したがって、好ましい態様は、絶対的にいかようにも限定的でない、記述的開示として単に見なされるべきである。

よって、以下の例は、本発明を限定せずにそれを説明することが意図される。別段の指示がない限り、パーセントデータは重量パーセントを示す。全ての温度はセルシウス度で示される。「慣用のワークアップ」：必要な場合に水を加え、必要な場合にｐＨを２〜１０の値に調整し、最終産物の組成に依るが、混合物を、酢酸エチルまたはジクロロメタンで抽出し、相を分離し、有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発させ、生成物を、シリカゲル上のクロマトグラフィでおよび／または結晶化で精製する。
シリカゲル上のＲｆ値；質量分析：ＥＩ（電子衝突電離）：Ｍ^＋、ＦＡＢ（高速原子衝突）：（Ｍ＋Ｈ）^＋、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、ＮＭＰ（Ｎ−メチルピロリドン）、ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）、ＥＡ（酢酸エチル）、ＭｅＯＨ（メタノール）、ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィ）。

以下の物質を合成し、特徴付けした。しかしながら、物質の製造および特徴付けはまた、当業者による他の方法によっても行うことができる。

例１：式Ｉで表される例示化合物

いかなる疑義をも避けるため、本発明による化合物の化学名と本発明による化合物の化学構造の描写が誤って合致しない全ての場合において、本発明による化合物は、化学構造の描写によって一義的に定義される。

例２：本発明による化合物の調製
クレームされた化合物は、以下の合成順序により、当業者にとって合成的に入手しやすいものである。例には合成が記載されているが、例はそれを、示される例に限定するものではない。
合成順序：

市販の構成単位Ａから容易に合成されるグルタマート誘導体Ｂに基づき、ＬｉＨＤＭＳのなどの強塩基を使用する低温での脱プロトン化、続くジアステレオ選択的アルキル化によって、中間体Ｃがもたらされる。この方法を適用する際、アルキル−、アリル−またはベンジル−ハロゲン化物（ヨウ化物）またはエポキシドまたは他の活性化アルキル化剤などの、様々な反応性アルキル化剤を用いてもよい。これらのアルキル化剤はまた、追加の官能基をも、好ましくは保護された形態で、持ち得る。

第２の脱プロトン化−アルキル化の順序によってもまた、Ｃ１などのジアルキル化化合物は入手しやすいものとなる：

以下の中間体を、この順序を使用して生成してもよいが、それを示される例に限定するものではない：

Ｄ＝−Ｅ−Ｇ−ＫまたはＬ、および、Ｅが、芳香族、ヘテロ芳香族、脂環式またはヘテロ脂環式の部分である式Ｉで表される化合物の入手は、以下の順序で達成される：

ベンジルエステルの水素化分解的切断、当業者に知られている標準的カップリング法（例えばＥＤＣＩ−カップリング、または、クロロギ酸イソブチルおよびＮＭＭの使用など）を使用するアミド形成、酸性条件下（例えばＤＣＭ中のＴＦＡ、または、ジオキサン中のＨＣｌなど）によるＢＯＣ切断によって、中間体Ｄが提供される。ラセミ化を防止するために、酸塩化物Ｄ−ＣＯＣｌを使用するアミド形成、または、対応する酸およびｎ活性化試薬（例えばＴ３Ｐなど）を使用する他のカップリング法、続く穏和な条件（水、メタノール、ＴＨＦまたは類似溶媒または適切な混合物中のＬｉＯＨ）下のメチルエステル切断によって、式で表される化合物がもたらされる。

必要な酸塩化物Ｄ−ＣＯＣｌが必要となる場合、それらは、市販されているか、または、例に示される様々な方法によって生成するかのいずれかである対応する酸から調製し得る。必要なアミン構成単位ＮＨ_２−Ｑ−Ｙの場合も同じである。

Ｄ＝−Ｅ−Ｇ−ＫまたはＬであり、Ｅが、Ｎ−ピペリジニルまたはＮ−ピペラジニル部分である式Ｉで表される化合物の入手は、以下の順序によって達成される：

例３：４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（５−フェニル−ピリジン−２−カルボニル）−アミノ］−酪酸（表１ａ、化合物１３）
ステップ１：（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ペンタン二酸１−ベンジルエステル５−メチルエステル

（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ペンタン二酸１−ベンジルエステル（１０ｇ、２９．６３ｍｍｏｌ）を、乾燥炭酸カリウム（６．１３ｇ、４４．４５ｍｍｏｌ）とともに無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）中に取り、０℃まで冷却した。これへ、ヨウ化メチル（２．０２ｍＬ、３２．６０ｍｍｏｌ）を滴加し、３時間撹拌することで反応を完了させた。フラスコの内容物をセライトパッドに通して濾過し濃縮することで粗生成物が得られ、それをカラムクロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル２５％）で精製し、表題の生成物が灰白色固体として得られた。
収率：９．５ｇ、（９１％、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ｃ）２５２．０（Ｍ−ＢＯＣ）、Ｒｔ．４．９４分、９８．２％ＡＤＣ１Ａ）。

ステップ２：（２Ｓ，４Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−メチル−ペンタン二酸１−ベンジルエステル５−メチルエステル

乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ペンタン二酸１−ベンジルエステル５−メチルエステル（５ｇ、１４．２４ｍｍｏｌ）を、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（ＴＨＦ中１Ｍ溶液）（２９．９ｍＬ、２９．９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液へ、−７８℃で加え、同じ温度で１時間撹拌した。ヨウ化メチル（２．６４ｍＬ、４２．７２ｍｍｏｌ）を、反応物の塊へ滴加し、−７８℃で１時間撹拌することで、反応を完了させた。フラスコの内容物を、塩化アンモニウムの飽和溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出し、水およびブラインでそれぞれ洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで粗生成物が得られ、それをカラムクロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル１５％）で精製した。
収率：３．８ｇ、（７３％、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）２６６．０（Ｍ−ＢＯＣ）、Ｒｔ．５．１３分、９０．５％（最大）、８８．８６％（２２０ｎｍ）。

ステップ３：（２Ｓ，４Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−メチル−ペンタン二酸５−メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−メチル−ペンタン二酸１−ベンジルエステル５−メチルエステル（２．５ｇ、６．８４ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール（５０ｍＬ）中に取り、炭素上１０％パラジウム（２５０ｍｇ）をそれに加え、水素袋の中で(under a hydrogen bladder)１時間撹拌し、反応を完了させた。反応物の塊をセライトに通して濾過し濃縮することで、生成物が無色油として得られた。
収率：１．６ｇ、（８５％、無色油）。
ＬＣＭＳ：（方法Ｃ）１７６．０（Ｍ−ＢＯＣ）、Ｒｔ．３．３３分、９８．５％（ＡＤＣ１Ａ）。

ステップ４：（２Ｓ，４Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−メチル−ペンタン二酸５−メチルエステル（２ｇ、７．２６ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（１ｇ、１０．８９ｍｍｏｌ）を、トルエン（２５ｍＬ）中に取り、２−（４−フルオロフェニル）１，１−ジメチルエチルアミン（１．３３ｇ、７．９０ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸イソブチル（１．２ｍＬ、８．７４ｍｍｏｌ）をそれに加えた。反応物の塊をＲＴで１時間撹拌し、反応を完了させた。反応物の塊を水でクエンチし、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで粗生成物が得られ、それをカラムクロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル２５％）で精製した。
収率：２．７５ｇ、（９２％、無色ゴム）。
ＬＣＭＳ：（方法Ｃ）４２５．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．３５分、９９．５％（ＡＤＣ１Ａ）。

ステップ５：（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩
（２Ｓ，４Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル（２．７５ｇ、６．４８ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＣＭ（２０ｍＬ）中に取り、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）をそれへ滴加し、５時間撹拌して反応を完了させた。反応物の塊を濃縮し、トルエンと２回共沸させる(azeotrope)ことで、表題の塩が無色油として得られた。
収率：２ｇ、（７２％、無色油）。
ＬＣＭＳ：（方法Ｃ）３２５．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．３．４８分、９８．７％（ＡＤＣ１Ａ）、８１．８（２２０ｎｍ）。

ステップ６：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（５−フェニル−ピリジン−２−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル

（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩（０．４３ｇ、１ｍｍｏｌ）および５−フェニルピリジン−２−カルボン酸（０．２ｇ、１ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中に取り、トリエチルアミン（０．４２ｍＬ、３ｍｍｏｌ）をそれへ加えた。フラスコの内容物を０℃まで冷却し、酢酸エチル（０．６３ｇ、２ｍｍｏｌ）中Ｔ３Ｐの５０％溶液をそれへ滴加し、２時間撹拌することで反応を完了させた。反応物の塊を、水、ブラインで洗浄した。有機相を、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、それをカラムクロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル１５％）で精製し、灰白色固体として表題の生成物が得られた。
収率：０．２ｇ、（４０％、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５０６．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．７５分、９１．３２％（最大）。

ステップ７：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（５−フェニル−ピリジン−２−カルボニル）−アミノ］−酪酸

（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（５−フェニル−ピリジン−２−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル（０．２ｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を、溶媒ＴＨＦ（３ｍＬ）、メタノール（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）の混合物中に取り、水酸化リチウム一水和物（３３ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）をそれに加え、２時間撹拌することで、反応を完了させた。フラスコの内容物を濃縮し、粗製物の塊を、ＨＣｌの希釈水溶液でクエンチした。得られた個体を濾過し、水で洗浄し、吸引乾燥させて、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：０．１７ｇ、（８９％、灰白色固体）。

ＬＣＭＳ：（方法Ｂ）４９２．３（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．０１分、９５．１％（最大）、９４．３％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．９６分、９５．８％（最大）、９６．６％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：９５．７５％

例４：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（６−フェニル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酪酸（表１ａ、化合物１４）
ステップ１：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（６−フェニル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
６−フェニルニコチン酸（８０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）および（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩（０．１８ｇ、０．４ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ６と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：０．１２ｇ、（６０％、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５０６．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．８７分、９７．９％（最大）、９７．７％（２５４ｎｍ）。

ステップ２：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（６−フェニル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酪酸
４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（６−フェニル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル（０．１ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ７と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：３０ｍｇ、（３１％、灰白色固体）。

ＬＣＭＳ：（方法Ｂ）４９０．３（Ｍ−１）、Ｒｔ．４．７３分、９５．２％（最大）、９５．２％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．５２分、９６．１％（最大）、９５．６％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：１００％

例５：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−３−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸（表１ａ、化合物１６）
ステップ１：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−３−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル
４−ピリジン−３−イル安息香酸（１２０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）および（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩（０．２６ｇ、０．６ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ６と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：１３０ｍｇ、（３９％、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５０６．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．３．８９分、９９．３％（最大）、９８．２％（２５４ｎｍ）。

ステップ２：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−３−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−３−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル（０．１ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ７と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：４０ｍｇ、（４６％、灰白色固体）。

ＬＣＭＳ：（方法Ｂ）４９０．３（Ｍ−１）、Ｒｔ．４．３４分、９９．７％（最大）、９９．３％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．３．４９分、９９．３％（最大）、９８．６％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：１００％
カップリングパートナーとして適切な酸を使用し、例３のステップ６に記載の手順を適用して、以下のエステルを調製した：

例６：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−２−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）（Ｍ＋１）、５０６．２、Ｒｔ．３．９４分、８６．６％（最大）。

例７：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（３−フルオロ−ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５２３．３（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．８２分、９９．３％（最大）、９９．１％（２５４ｎｍ）。

例８：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸メチルエステル
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５０９．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．６４分、９５．６％（最大）。

例９：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［５−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−２−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５３０．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．７０分、９４．４％（最大）、９０．７％（２２０ｎｍ）。

例１０：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［２−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−５−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５３０．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．３９分、９８．９％（最大）、９９．１％（２２０ｎｍ）。

例１１：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸メチルエステル
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５２６．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．１５分、９４．４％（最大）、８４．０％（２５４ｎｍ）。

例１２：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［１−（４−フルオロ−フェニル）−ピペリジン−４−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５３０．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．０３分、９８．１％（最大）、９８．６％（２２０ｎｍ）。

例１３：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラゾール−１−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４９５．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．９０分、９５．２％（最大）、９３．０％（２２０ｎｍ）。

例１４：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペリジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩（２００ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１７５ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（１０ｍＬ）中に取り、０℃まで冷却した。炭酸ジスクシンイミジル（１３８ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）をそれへ加え、反応物の塊をＲＴで１時間撹拌した。４−フェニルピペリジン（８７ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロウンデカ−７−エン（８２ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を、０℃で反応物の塊へ加え、ＲＴで１６時間撹拌することで反応を完了させた。

反応物の塊を重炭酸ナトリウムの水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ濃縮することで粗生成物が得られ、それをカラムクロマトグラフィで精製し、表題の化合物が無色油として得られた。
収率：１３０ｍｇ、（５６％、無色油）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５１２．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．４６分、９３．５％（最大）、９２．９％（２２０ｎｍ）。
例３のステップ７に記載の手順を適用し、以下の酸を、対応のエステルから調製した：

例１５：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−２−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸（表１ａ、化合物１０）
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４９２．３（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．３４分、９６．９％（最大）、９８．８％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．３．５３分、９６．６％（最大）、９７．９％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：９９．７％

例１６：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（３−フルオロ−ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸（表１ａ、化合物１１）
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５０９．３（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．２７分、９５．５％（最大）、９５．９％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．５．２９分、９５．８％（最大）、９５．１％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：１００％

例１７：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸（表１、化合物９）
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４９５．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．１５分、９５．８％（最大）、９４．５％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．１１分、９６．２％（最大）、９３．１％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：１００％

例１８：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［５−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−２−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸（表１ａ、化合物２）
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５１６．３、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．１９分、９８．９％（最大）、９８．４％（２２０ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．５．２１分、９７．１％（最大）、９５．６％（２２０ｎｍ）。
キラル純度：１００％

例１９：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［２−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−５−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸（表１ａ、化合物２０）
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５１６．０、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．１９分、９６．３％（最大）、９４．２％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．９３分、９６．９％（最大）、９４．７％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：９４．２％

例２０：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸（表１ａ、化合物１９）
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５１２．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．６４分、９８．８％（最大）、９７．７％（２２０ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．６７分、９８．７％（最大）、９７．５％（２２０ｎｍ）。
キラル純度：９９．６％

例２１：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラゾール−１−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４８１．０、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．３３分、９７．２％（最大）、９４．９％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．３６分、９７．９％（最大）、９５．５％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：９９．６％

例２２：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［１−（４−フルオロ−フェニル）−ピペリジン−４−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸（表１ａ、化合物１２）
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５１６．３、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．３，６＾１３．６１分、９８．３％（最大）、９７．８％（２２０ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．３．６４分、９９．１％（最大）、９９．１％（２２０ｎｍ）。
キラル純度：１００％

例２３：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペリジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸（表１ａ、化合物１８）
ＬＣＭＳ：（方法Ｂ）４９８．３、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．９１分、９５．０％（最大）、９４．４％（２２０ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ｂ）Ｒｔ．４．９４分、９４．７％（最大）、９０．９％（２２０ｎｍ）。
キラル純度：１００％

例２４：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペラジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩（２００ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）および４−フェニルピペラジン（１４４ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を使用し、例１３と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が無色油として得られた。
収率：１２０ｍｇ、（５４％、無色油）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５１３．３、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．３８分、９５．９％（最大）。

例２５：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペラジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸（表１ａ、化合物１５）
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４９９．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．３．９３分、９６．８％（最大）、９６．２％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．３．９１分、９４．４％（最大）、９６．１％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：１００％

例２６：４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸（表１ａ、化合物１）
ステップ１：（２Ｓ，４Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−メチル−ペンタン二酸５−メチルエステル（４００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）および３，４，５−トリメトキシベンジルアミン（３１０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ４と類似のプロトコールと使用して合成することで、表題の化合物が無色ゴムとして得られた。
収率：０．３ｇ、（４８％、無色ゴム）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４５５．３、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．３．９７分、９８．５％（最大）、９８．７％（２２０ｎｍ）。

ステップ２：（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩
（２Ｓ，４Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸メチルエステル（３００ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）を使用し、例１のステップ５と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物がＴＦＡ塩として得られた。
収率：０．２５ｇ、（８３％、無色ゴム）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）３５５．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．２．３９分、９３．８％（最大）、９３．７％（２２０ｎｍ）。

ステップ３：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩（２５０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）およびビフェニル−４−カルボン酸（１０５ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ６と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：１１０ｍｇ、（３８％、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５３５．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．７２分、９５．５％（最大）。

ステップ４：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸
（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸メチルエステル（１００ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ７と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物を灰白色固体として得られた。
収率：６０ｍｇ、（６２％、灰白色固体）。

ＬＣＭＳ：（方法Ａ）５２１．３、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．１０および４．２１分、（４８．８および５０．１）％（最大）、（４９．３および５０．１）％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．１３および４．２５分、（４９．６および４９．１）％（最大）、（４９．２および４９．３）％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：Ｃ２での立体中心の部分的なラセミ化。

例２７および２８：
ステップ１：（２Ｓ，４Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−メチル−ペンタン二酸５−メチルエステル（１．５ｇ、５．４５ｍｍｏｌ）および１−（４−フルオロフェニルプロパン−２−アミン塩酸塩（１．１２ｇ、５．９９ｍｍｏｌ）を使用し、例のステップ４と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が無色ゴムとして得られた。
収率：０．９ｇ、（４０％、無色ゴム）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４１１．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．７４分、８１．２％（最大）。

ステップ２：（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩
（２Ｓ，４Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル（９００ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）を使用し、例１のステップ５と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物がＴＦＡ塩として得られた。
収率：０．６ｇ、（６５％、無色ゴム）。

ステップ３：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩（６００ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）およびビフェニル−４−カルボン酸（２８４ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ６と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。該化合物は、キラル調製によって分離され、キラル純度において２つの異性体を示した。得られた２つの異性体は以下のデータを示した。

異性体Ａ
収率：８０ｍｇ、（１２％、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４９１．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．２６分、９６．９％（最大）、９３．９％（２５４ｎｍ）。

異性体Ｂ
収率：９０ｍｇ、（１３％、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４９１．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．５．２８分、９８．８％（最大）、９７．２％（２５４ｎｍ）。

ステップ４：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
表１ａ、化合物１７：
（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル（異性体Ａ）（８０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ７と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：５０ｍｇ、（６５％、灰白色固体）。

ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４７７．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．７９分、９８．７％（最大）、９８．５％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．８１分、９８．７％（最大）、９８．４％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：９０．７２％

表１ａ、化合物３：
（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル（異性体Ｂ）（９０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ７と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：５５ｍｇ、（６３％、灰白色固体）。

ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４７７．２、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．７４分、９７．７％（最大）、９８．０％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．４．７７分、９８．９％（最大）、９７．７％（２５４ｎｍ）。
キラル純度：９９．０２％

例２９：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸
ステップ１：（２Ｓ，４Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−メチル−ペンタン二酸５−メチルエステル（０．３７ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）および（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イルエチル）アミン（０．２ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ４と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が無色ゴムとして得られた。
収率：０．１２ｇ、（２３％、無色ゴム）。
ＬＣＭＳ：（方法Ｃ）４０８．３、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．４．８７分、９４．０％（ＡＤＣ１Ａ）。

ステップ２：（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩
（２Ｓ，４Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸メチルエステル（１１０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）を使用し、例１のステップ５と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物がＴＦＡ塩として得られた。これをそのまま次のステップに使用した（ＴＬＣのみによって確認した）。
収率：５０ｍｇ、（４４％、無色ゴム）。

ステップ３：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸メチルエステル
（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸メチルエステルＴＦＡ塩（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびビフェニル−４−カルボン酸（２４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ６と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物が灰白色固体として得られた。
収率：２０ｍｇ、（２０ｍｇ、灰白色固体）。
ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４８８．３、（Ｍ＋１）、Ｒｔ．３．８７分、３６．１％（最大）。

ステップ４：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸（表１ａ、化合物４）
（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸メチルエステル（２０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を使用し、例１のステップ７と類似のプロトコールを使用して合成することで、表題の化合物をそのＴＦＡ塩（調製後）として得られた。
収率：１０ｍｇ、（４１％、黄色ゴム固体）。

ＬＣＭＳ：（方法Ａ）４７４．２、（Ｍ−ＴＦＡ）、Ｒｔ．３．４８分、９２．９％（最大）、９０．２％（２５４ｎｍ）。
ＨＰＬＣ：（方法Ａ）Ｒｔ．３．４６分、９１．５％（最大）、９３．８％（２５４ｎｍ）。

例３０：（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−エチル｝−ペンタン酸（表１ａ、化合物７）
ステップ２においてアルキル化剤として臭化アリルを使用すること、続いて二重結合を水素化すること、および、ステップ６においてビフェニル−４−カルボン酸を使用すること以外は、例１のステップ２〜７に記載の手順を適用することで、表題の化合物がもたらされた。

ＬＣＭＳ：５１９．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．３．７６分、（方法：カラム：Waters XBridge（C18、５０×２．１ｍｍ、３．５ミクロン）、バルブ：０、フロー：０．８ｍｌ／分、カラム温度：３５℃、溶離液Ａ：アセトニトリル中０．１％ギ酸、溶離液Ｂ：水中０．１％ギ酸、直線勾配：ｔ＝０分５％Ａ、ｔ＝３．５分９８％Ａ、ｔ＝６分９８％Ａ、検出：ＤＡＤ（２２０〜３２０ｎｍ）、検出：ＭＳＤ（ＥＳＩポジ／ネガ）、質量範囲：１００〜８００。）

例３１：（２Ｓ，４Ｓ）−２−ベンジル−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−酪酸（表１ａ、化合物６）
ステップ２においてアルキル化剤として臭化ベンジルを使用すること、および、ステップ６においてビフェニル−４−カルボン酸を使用すること以外は、例１のステップ２〜７に記載の手順を適用することで、表題の化合物がもたらされた。

ＬＣＭＳ：５６７．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．２．２７分、（方法：カラム：Waters XBridge（C18、３０×２．１ｍｍ、３．５ミクロン）、バルブ：６、フロー：１ｍｌ／分、カラム温度：３５℃、溶離液Ａ：アセトニトリル中０．１％ギ酸、溶離液Ｂ：水中０．１％ギ酸、直線勾配：ｔ＝０分５％Ａ、ｔ＝１．６分９８％Ａ、ｔ＝３分９８％Ａ、検出：ＤＡＤ（２２０〜３２０ｎｍ）、検出：ＭＳＤ（ＥＳＩポジ／ネガ）、質量範囲：１００〜８００。）

例３２：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メトキシメチル−酪酸（表１ａ、化合物８）
ステップ２においてアルキル化剤として臭化メトキシメチルを使用すること、および、ステップ６においてビフェニル−４−カルボン酸を使用すること以外は、例１のステップ２〜７に記載の手順を適用することで、表題の化合物がもたらされた。

ＬＣＭＳ：５２１．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．２．２７分、（方法：カラム：Waters XBridge（C18、５０×２．１ｍｍ、３．５ミクロン）、バルブ：０、フロー：０．８ｍｌ／分、カラム温度：３５℃、溶離液Ａ：アセトニトリル中０．１％ギ酸、溶離液Ｂ：水中０．１％ギ酸、直線勾配：ｔ＝０分５％Ａ、ｔ＝３．５分９８％Ａ、ｔ＝６分９８％Ａ、検出：ＤＡＤ（２２０〜３２０ｎｍ）、検出：ＭＳＤ（ＥＳＩポジ／ネガ）、質量範囲：１００〜８００。）

例３３：（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸（表１ａ、化合物５）
例１のステップ２〜７に記載の手順を適用し、ステップ６においてビフェニル−４−カルボン酸を使用することによって、表題の化合物がもたらされた。

ＬＣＭＳ：４９１．２（Ｍ＋１）、Ｒｔ．３．５９分、（方法：カラム：Waters XBridge（C18、５０×２．１ｍｍ、３．５ミクロン）、バルブ：０、フロー：０．８ｍｌ／分、カラム温度：３５℃、溶離液Ａ：アセトニトリル中０．１％ギ酸、溶離液Ｂ：水中０．１％ギ酸、直線勾配：ｔ＝０分５％Ａ、ｔ＝３．５分９８％Ａ、ｔ＝６分９８％Ａ、検出：ＤＡＤ（２２０〜３２０ｎｍ）、検出：ＭＳＤ（ＥＳＩポジ／ネガ）、質量範囲：１００〜８００。）
１ＨＮＭＲ：
Bruker 400 MHz

ＬＣＭＳ：
方法Ａ
方法：Ａ−Ｈ_２Ｏ中０．１％ＴＦＡ、Ｂ−ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ：フロー−２．０ｍＬ／分。
カラム：XBridge C8（５０×４．６ｍｍ、３．５μ）、ポジティブモード
方法Ｂ
Ａ：１０ｍＭＮＨ_４ＨＣＯ_３、Ｂ：ＡＣＮ；フロー速度：１．０ｍｌ／分
カラム：XBridge C8（５０×４．６ｍｍ、３．５μ）、ポジティブモード
方法Ｃ（ＥＬＳＤ）
Ａ：Ｈ_２Ｏ中０．１％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ；フロー速度：２．０ｍｌ／分
カラム：XBridge C8（５０×４．６ｍｍ、３．５Ａ）、ポジティブモード

ＨＰＬＣ：
方法Ａ
方法：Ａ−Ｈ_２Ｏ中０．１％ＴＦＡ、Ｂ−ＡＣＮ中０．１％ＴＦＡ：フロー−２．０ｍＬ／ｍｉｎ。
カラム：XBridge C8（５０×４．６ｍｍ、３．５μｍ）。
方法Ｂ：Ａ：Ｈ_２Ｏ中１０ｍＭのＮＨ_４ＨＣＯ_３、Ｂ：ＡＣＮ；フロー速度：０．８ｍｌ／ｍｉｎ
カラム：XBridge C8（１５０×４．６）ｍｍ、３．５μｍ
キラル純度:
方法情報：移動相：ヘキサン：ＩＰＡ：：８０：２０中０．１％ＤＥＡ
カラム：CHIRALCEL OJ-H（２５０×４．６）ｍｍ、５μｍ
フロー速度：１．０ｍｌ／分

例３４：ＡＤＡＭＴＳ−５の生化学活性試験：アグリカンペプチド切断アッセイ
ＡＤＡＭＴＳ−５は、グルタミル−エンドプロテアーゼ活性を有するメタロプロテアーゼであり、球間(interglobular)ドメインのＥ３７３−Ａ３７４においてアグリカンコアタンパク質を切断する。ＡｄａｍＴＳ−５活性に対する化合物の阻害可能性を完全に分析するために、基質として４３マーのアグリカンオリゴペプチドを用いてAlphascreen（登録商標）アッセイを実施した。ＡＤＡＭＴＳ−５による切断によって、Ｃ末端断片におけるネオエピトープＮ末端ＡＲＧＳの生成が引き起こされた。この生成物の検出は、ビオチン標識に結合するストレプトアビジン−AlphaScreen（登録商標）ドナービーズ、および、生じた断片の他端へ抗マウスＩｇＧ被覆AlphaLisa（登録商標）アクセプタービーズをしっかり固定する抗ネオエピトープ（「ＡＲＧＳＶ」）抗体を用いて実施する。それによって、ドナーおよびアクセプタービーズが接近し、Alphascreen（登録商標）シグナルの発光が、一重項酸素を介して生じる。切断活性は、Alphascreen（登録商標）シグナルの増大によって直接検出可能であった。

アグリカンペプチド切断アッセイを、Perkin Elmer 384 AlphaPlate（proxiplate）浅型ウェルマイクロタイタープレートにおいて、３８４ウェルAlphaScreen（登録商標）（Perkin Elmer）アッセイ形式として実施し、１０μｌの総アッセイ体積におけるハイスループットスクリーニング用に使用した。４．５ｎＭのヒト組換えＡｄａｍＴＳ−５（R&D systems, Wiesbaden, Germany）および基質としての３０ｎＭのビオチン化ペプチドＩＴＶＱＴＶＴＷＰＤＭＥＬＰＬＰＲＮＩＴＥＧＥＡＲＧＳＶＩＬＴＶＫＰＩＦＥＶＳＰＳＰＬ−Ｋ（ビオ）（オーダーメイド、Biosynthan, Berlin, Germany）を、６μｌの総体積（１００ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＣａＣｌ_２、０．０５％のＢｒｉｊ（登録商標）−３５、１％のＤＭＳＯ、０．０８４％のＢＳＡ、ｐＨ７．５）中、試験化合物（１０倍希釈濃度）の有無で、３７℃１８０分間、インキュベートした。反応を停止させ、第１の検出ステップを、２μｌの検出溶液１（４８ｍＭのＥＤＴＡ、８ｎＭのアグリカン抗体Ｎ末端ネオエピトープＡＲＧ、マウスモノクローナルＢＣ３抗体（MDBioproducts, Egg, Switzerland）、１００ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ中１００μｇ／ｍｌのストレプトアビジンAlphascreen（登録商標）ドナービーズ（Perkin Elmer, Rodgau, Germany）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のBrij（登録商標）-35、０．１％のＢＳＡ、ｐＨ７．５）の添加により実施した。３７℃で１時間のインキュベーション後、２μｌの第２検出溶液（１００ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ中２５μｇ／ｍｌの抗マウスAlphaLisa（登録商標）アクセプタービーズ（Perkin Elmer, Rodgau, Germany）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のBrij（登録商標）-35、０．１％のＢＳＡ、ｐＨ７．５）を加えた。プレートを暗所で、３７℃で２時間インキュベートした。

AlphaScreenシグナルを、Perkin Elmer（レーザーモード）発光波長５７０ｎｍから、Alphascreenプロトコールを用いて、Envisionマルチモードリーダー（Perkin Elmer LAS Germany GmbH）で測定した。使用した、限度いっぱいの値は、阻害剤フリーの反応であった。ゼロ値として、薬理学的基準を使用した。化合物の阻害値（ＩＣ５０）を、GeneDataからのプログラムSymyx Assay Explorer（登録商標）またはCondosseo（登録商標）のいずれかを使用して決定した。

例３５：ＭＭＰ１＆ＭＭＰ１４の生化学活性試験：クエンチされたペプチドプロテアーゼアッセイ
ＭＭＰ−１およびＭＭＰ−１４それぞれのプロテアーゼ活性の調整を決定するために、合成ペプチド基質（該ペプチド上の第２標識Ｄｎｐ（２，４ジニトロフェニル）によってクエンチされるフルオロフォアＭＣＡ（（７−メトキシクマリン−４−イル）アセチル）で標識された）を用いる連続酵素試験を、３８４ウェルのGreiner低体積非結合マイクロタイタープレートにおいて実施し、ハイスループットスクリーニング用に使用した。ＭＭＰ−１／１４によるペプチド基質の切断によって、蛍光強度が増大する。化合物の阻害活性を測定するために、基質の変換に直接相関する蛍光強度の時間依存的（反応速度測定）増大を決定した。

１０ｎＭのヒト組換えＭＭＰ−１触媒ドメイン（Enzo Life Sciences, Loerach, Germany）および２．３ｎＭのヒト組換えＭＭＰ−１４触媒ドメイン（Enzo Life Sciences, Loerach, Germany）を、１０μｌの総体積（２５ｍＭのＨｅｐｅｓ、１００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＣａＣｌ_２、０．０２％のBrij（登録商標）-35、１％のＤＭＳＯ、ｐＨ７．６）中７．５μＭのペプチド基質ＭＣＡ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｄａｐ（ＤＮＰ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ_２（Enzo Life Sciences, Loerach, Germany）と、試験化合物（１０倍希釈濃度）の有無で、混合した。基質の添加後、第１の蛍光強度測定（時点１）を、Envisionマルチモードリーダー（Perkin Elmer LAS Germany GmbH）を用いて、励起波長３４０ｎｍおよび発光波長４５０ｎｍで実施した。室温で１５０分間、反応をインキュベートした後、第２の測定を、前述と同じパラメータを用いて実施した。ＭＭＰの活性を分析するために、蛍光強度における差異を算出した。使用した、限度いっぱいの値は、阻害剤フリーの反応であった。使用した薬理学的ゼロ値は、それぞれ３４０ｎｍおよび１６０ｎｍの終濃度でのGM6001（Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Germany）であった。阻害値（ＩＣ５０）は、GeneDataからのプログラムSymyx Assay Explorer（登録商標）およびCondosseo（登録商標）のいずれかを使用して決定した。

例３６：ＡＤＡＭＴＳ−５阻害剤の試験のためのＩＬ−１誘導軟骨崩壊アッセイ
アッセイは、直径４ｍｍおよび厚さ１〜２ｍｍを有する中手関節（ＭＣＰ）からのウシ軟骨外植片に基づく。外植片は、屠殺の日に回収し立てのものである。実験の開始前、外植片を、ＤＭＥＭ培地＋１０％血清＋３０μｇ／ｍｌアスコルビン酸中、４８時間インキュベートする（２００μｌ）。プレインキュベーションを、アッセイ窓を大きくするために実施する。外植片を、３７℃および７．５％ＣＯ_２でインキュベートする。全群における複製数は、ｎ＝４である。

軟骨分解の誘導は、血清フリー培地中ＩＬ−１アルファ（１０ｎｇ／ｍｌ）による外植片の５日間の処置によって誘導する。陰性対照として、外植片を、血清フリーＤＭＥＭ培地中で、非処置のままにする。この対照は、基準値算出の一部ではなく、ＩＬ１−アルファの質に厳密に依存する、分解度のための内部対照である。ＩＬ−１アルファは、マトリックスを次々に分解するＡＤＡＭＴＳ−５およびＭＭＰなどのプロテアーゼの活性を誘導する。上清中のマトリックスの分解生成物（ＧＡＧ：グリコサミノグリカン）は測定可能である。ＩＬ１−アルファに誘導されるＧＡＧ放出のレベルを、０％効果レベルとして定義する。培地へのＧＡＧ放出の低下に反映されるＡＤＡＭＴＳ−５の阻害のための陽性対照として、WO2007008994の化合物（（Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−酪酸（２１μＭ）を使用する。これを、１００％効果レベルとみなす。可能性のあるＡＤＡＭＴＳ−５阻害剤を、１μＭの濃度で最初に試験する。ＧＡＧ放出を最大５０％まで低下させる化合物を、０．１μＭの濃度で追試験する。次いで、ＧＡＧ放出に対し＞５０％の効果を有する化合物を、総用量反応のために選択する（３０μＭ、１０μＭ、３μＭ、１μＭ、０．３μＭ、０．１μＭ、０．０３μＭ、０．０１μＭ）。このＤＲＣを、ＩＣ５０算出用の基礎とする。

ＩＬ−アルファおよびＡＤＡＭＴＳ−５阻害剤を、５日間インキュベートし、次いで上清中のＧＡＧを測定する。外植片をパパインで消化し、外植片中のＧＡＧ量を決定する。

例３７：軟骨の外植片アッセイ
潜在性カテプシンＤ阻害剤の軟骨分解に対する効果を調査するため、ウシの外植片に基づくｐＨ誘発性モデルを使用する。外植片を培養する培地のｐＨを、関節炎を罹った膝の病態生理学的なｐＨと、ここで一致させる。このｐＨはｐＨ５．５である。このex vivoモデルにおいて、可能性のあるカテプシンＤ阻害剤を、軟骨分解過程の停止に関するそれらの作用について、次いで調査する。軟骨が破壊されている場合、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）が、細胞培養物上清中へ放出される。遊離ＧＡＧの量は、ＤＭＭＢ（ジメチルメチレンブルー塩酸塩）を用いて定量的に決定し得る。硫酸化ＧＡＧが、ジメチルメチレンブルー塩酸塩を使用して検出される場合、６３３ｎｍでの吸収の低下を利用する。また作業が、極めて低いＧＡＧ濃度でも行うことができることから、染料／ＧＡＧ複合体は、ＧＡＧとＤＭＭＢとの長時間のインキュベーション後であっても、沈殿することはない。それはときに、他の測定方法においては、わずかな短時間後に起こることもある。濃度を決定するため、較正線もまた、コンドロイチン硫酸を使用して記録する。ＧＡＧ値を用いて、ＩＣ_５０値、すなわち基質がその作用の５０％を呈する濃度を計算することができる。

溶液：
インキュベーション培地、ｐＨ７．４：
１％のPen/Strepおよび３０μｇ／ｍｌのアスコルビン酸を加えた、ＦＢＳなしのＤＭＥＭ、該培地は保存しない。
インキュベーション培地、ｐＨ５．５：
ＦＢＳなしのＤＭＥＭ、ｐＨをＭＥＳの添加により調整し、ｐＨメーターを使用してモニターし、１％のPen/Strepおよび３０μｇ／ｍｌのアスコルビン酸を加える。

ＧＡＧ測定のための溶液：
ＤＭＭＢ着色溶液（Ｖ＝５００ｍｌ）：
２．５ｍｌのエタノール＋１ｇのギ酸ナトリウム＋１ｍｌのギ酸に、８ｍｇのＤＭＭＢ（ジメチルメチレンブルー）を溶解し、２回蒸留(bidistilled)水で５００ｍｌにする。
インキュベーション培地：ＦＢＳ（ＦＢＳなしの培地）

コンドロイチン硫酸溶液（標準曲線）
以下の濃度：５０μｇ／ｍｌ；２５μｇ／ｍｌ；１２．５μｇ／ｍｌ；６．２５μｇ／ｍｌ；３．１２５μｇ／ｍｌ；１．５６μｇ／ｍｌ；０．７８μｇ／ｍｌを有する標準溶液および培地のブランク対照の調製。標準溶液の調製を、実験もまた実行した培地中で行う。

１．）手順：ウシ外植片の、ｐＨ誘発性軟骨分解
まずウシ外植片を調製する。軟骨分解の誘発を、９６ウェルプレート中で行う。ウェルあたり１つの外植片を培養する。それぞれの場合において、２００μｌのＦＢＳなしＤＭＥＭ（培養培地、ｐＨ５．５）＋３０μｇ／ｍｌのアスコルビン酸を加える。陰性対照として外植片（ｎ＝４）をｐＨ７．４でインキュベートする（ＦＢＳなし）。この対照は、データの計算に含めないが、その代わりに、ｐＨ変化がＧＡＧの遊離に対する所望の効果を有することを裏付けるものである。この時点で、試験物質を添加する。外植片のプレインキュベーションは行わない。外植片を、対応する基質とともに３日間、３７℃で７．５％ＣＯ_２のインキュベーター中、培養する。

２．）インキュベーション手順
カテプシンＤ阻害剤のＧＡＧ（グリコサミノグリカン）の遊離に対する効果を調査するため、物質を所望の濃度で用いて、３日間培養する。試験化合物を、１μＭの濃度および１％のＤＭＳＯでの最初の実験において試験する。ＧＡＧの遊離に対する＞５０％の効果を有する物質（これは、アッセイ Explorerにおいて対照の＜５０％に対応する）を、１００ｎＭおよび１％のＤＭＳＯでの次の実験において試験する。これらの条件下でのＧＡＧの遊離に対する＞５０％の効果を有する物質（これは、アッセイ Explorerにおいて対照の＜５０％に対応する）を、濃度／効果の関係において試験する。ここで化合物を、以下の濃度：３０μＭ、１０μＭ、３μＭ、１μＭ、０．３μＭ、０．１μＭ、０．０３μＭ、０．０１μＭにおいて調査する。

使用した陽性対照は、０．０１μＭの濃度を有するペプスタチンＡである。アッセイ窓を、０％効果として定義される対照（ｐＨ５．５）および１００％効果として定義される対照（ｐＨ５．５）＋０．０１μＭペプスタチンＡによって定義する。３日間のインキュベーション後、細胞培養物上清を回収し、−２０℃で保存するか、または直接測定する。遊離ＧＡＧの量を、測光法で測定する。

陽性対照（ｐＨ５．５＋０．０１μＭのペプスタチンＡ）および陰性対照（ｐＨ５．５）に基づき、％におけるそれぞれの物質の効果（１つの値）を、１μＭおよび１００ｎＭの濃度について報告する。数値は、４つのレプリカントの平均を表す。濃度／効果の関係の決定において、ＩＣ_５０値を、データベース（アッセイ Explorer）へ報告する。

４．）測定
細胞培養物上清（２００μｌ）を、直接測定または−２０℃での保存のいずれかを行う。ＧＡＧの濃度（上清中のＧＡＧのμｇ／ｍｌ）の正確な決定を裏付けるため、測定値は、標準曲線の直線領域に位置付させなければならない。これを裏付けるために、さまざまな希釈をルーチン的に導入する（１／５、１／１０、１／２０、１／４０）。希釈物を培地で調製し、３８４ウェルプレート（１５μｌ）中へ自動的に導入する（Hamilton）。６０μｌのＤＭＭＢ溶液を同様に自動的に（またはマルチチャンネルピペットを使用して）加える。急速な着色反応が生じ、続いてプレートリーダー（例えばEnvisionなど）を使用して６３３ｎｍで測定する。
存在するサンプルの量に応じて、少なくとも１回、二重決定を行う。

データが、ＭＴＰリーダーによってｃｓｖまたはｘｌｓファイルとして提供され、このフォーマット（ｘｌｓ）に基づく生データとして保存するか、または特定の化合物のパーセンテージ効果の計算のために使用する。

５．）定性的な対照
ｐＨ誘発性軟骨分解の誘導のための対照として、４つの外植片をｐＨ７．４でインキュベートする。これは、軟骨の生理学的なｐＨに対応し、よって、ＧＡＧの遊離に対する効果はここでは期待されない。したがってこれらのＧＡＧ値（上清のμｇ／ｍｌ）は、ｐＨ５．５でのインキュベーションのＧＡＧ値より常に著しく低い。
実験のチェックのために役立ち、アッセイ窓の定義のためにも重要である、さらなる対照は、ペプスタチン対照（ｐＨ５．５＋０．０１μＭのペプスタチンＡ）である。この物質は、最も多くのプロテアーゼの活性を非特異的に遮断し、ひいては化合物の起こり得る最大効果を決定する。

（１）Klompmakers, A. & Hendriks, T. (1986) Anal. Biochem. 153, 80-84, Spectrophotometric Determination of Sulfated Glycosaminoglycans.
（２）Groves, P.J. et al. (1997) Anal. Biochem. 245, 247-248
Polyvinyl alcohol-stabilised binding of sulfated GAGs to dimethylmethylene blue.

６．）結果
ＩＣ_５０値を、このアッセイを使用して、例１の表のいくつかの化合物に関して決定した。これらを例１の表に示す。

例３８：動物における抗痛覚過敏効果の調査
炎症反応を誘導するため、カラギーナン溶液（ＣＡＲ、１％、５０μｌ）を、一側のラット膝関節中へと関節内注射した。注射しなかった側は対照目的で使用した。群あたり６匹の動物を使用した。閾値を、マイクロメータねじ（正中線上〜外側、膝関節上）により決定し、温熱性痛覚過敏を、Hargreavesの方法（Hargreaves et al., 1988）により、足の底に対し定方向の赤外光源を用いて決定した。炎症の部位（膝関節）が測定の部位（足底）と異なるため、ここで、第２の温熱性痛覚過敏という用語の使用がなされ、その機構は、効果的な鎮痛薬の発見に重要である。

温熱性痛覚過敏の実験の説明（Hargreaves試験）：実験動物を、石英シート上のプラスチックチャンバー中に配置する。まず試験前に、環境に自体慣化させるため、実験動物に約５〜１５分間の時間を与える。実験動物が、慣化期後（探索期の終期）、あまり頻繁には動かなくなってすぐに、焦点がガラス底の平面にある赤外光源を、刺激するべき後脚直下に配置する。そして、ボタンを押し、試験実行を開始する：赤外光は、後脚の皮膚温度の上昇をもたらす。実験は、実験動物が後脚を上げるか（疼痛の閾値に達したことを表すものとして）、または予め定めた最高温度に達したときに赤外光源のスイッチが自動的にオフになるかのいずれかによって終結する。脚部により反射された光を、実験動物がじっとしている限りで記録する。脚部退避により、この反射は中断され、その後赤外光源のスイッチがオフになり、スイッチオンからスイッチオフまでの時間が記録される。この機器を、赤外光源が皮膚温度を１０ｓで約４５セルシウス度まで上昇するように、較正する（Hargreaves et al. 1988）。この目的のためにUgo Basileによって製造された機器を、本試験のために使用する。

ＣＡＲをSigma-Aldrichから購入した。特異性カテプシンＤ阻害剤である化合物番号２３（例１、表１から、（Ｓ）−２−［（２Ｓ，３Ｓ）−２−（（３Ｓ，４Ｓ）−３−アミノ−４−｛（Ｓ）−３−メチル−２−［（Ｓ）−４−メチル−２−（３−メチル−ブチリルアミノ）−ペンタノイルアミノ］−ブチリルアミノ｝−５−フェニル−ペンタノイルアミノ）−３−メチル−ペンタノイルアミノ］−３−メチル−酪酸）の投与を、ＣＡＲの３０分前に関節内に行った。トリアムシノロン（ＴＡＣ）を１０μｇ／関節の量で、陽性対照として使用し、溶媒（ビヒクル）を陰性対照として使用した。痛覚過敏は、赤外照射した足と赤外照射なしの脚部退避時間における差で値付ける。

結果：ＴＡＣは、ＣＡＲ誘導性腫脹を低減させることができたが、特定のＤＤＲ２阻害剤はできなかった。対照的に、特定のＤＤＲ２阻害剤は、その用量の関数として、温熱性痛覚過敏の程度を低減させることができた。
評価：本発明の化合物が抗痛覚過敏作用を発揮することが示された。本発明の化合物が炎症性の腫れに対し何も影響呈しなかったため、これは知覚過敏のトリガーである得る。よって、本発明の化合物が、ヒトにおける疼痛低減作用を発するものと推測し得る。

例３９：本発明による化合物のウシ滑液中の安定性
ウシ滑液の抽出：
ウシ外植片の調製物において（拡散チャンバーまたは他のアッセイのための）、ウシひずめ（中手骨の関節）またはウシ膝のいずれかを使用する。滑液は、両関節から得ることができる。この目的のために、滑液を、１０ｍｌシリンジおよびカニューレを使用して、開放した関節から注意深く除去し、用意した２ｍｌEppendorf容器中に移す。Eppendorf容器に、動物に応じてラベルする（ウシパスポートが利用可能である）。ここで関節の調製の間にわたり、関節間隙に血液が入らないようにしなければならない。こうなってしまった場合、滑液は赤色を帯びてしまい、その結果廃棄しなければならなくなってしまう。滑液は、基本的には粘性が高く、色は透明〜帯黄色である。滑液は除去とともに肉眼的観察をし、記録する。

ＳＦ中の物質の安定性を試験するためのバッチ：
個々の化合物の安定性をチェックするため、４つの異なるウシ滑液のプールを混合する。この目的のために、ＳＦあたり約１ｍｌを使用する。混合物を、５ｍｌガラス容器中に直接調製する。ＳＦを、徹底的に、しかし慎重に、混合する。気泡も泡も発生させてはならない。この目的のために、ボクテックスユニットは最低速で使用する。試験化合物を、（特に必要のある場合を除いて）１μＭの初濃度で試験する。物質の添加後、バッチを徹底的かつ慎重に再度混合する。視覚モニタリングのため、全ＳＦバッチを撮影し、画像を、対応する実験用のeLabBioファイルにとじる。図１は、このタイプの画像記録(photodocumentation)を例として示す。バッチを、３７℃、７．５％のＣＯ_２で、４８時間インキュベーター中でインキュベートする。

サンプリング：
サンプリングを、予め調整した時刻後に行う（特に必要な場合を除き、以下参照）。２００μｌのＳＦを、時間ごとに混合物から取り出し、０．５ｍｌの「低結合性」Eppendorf容器中へと直接移す。「低結合性」Eppendorf容器は、該容器のプラスチックと物質との相互作用を最小化するために、使用する。２００μｌのアセトニトリルは既にEppendorf容器中へと導入していており、その後ＳＦと１＋１の混合物を形成する。これは、後続の分析を簡素化するものであるが、タンパク質の沈殿は、ＳＦの添加後すぐに生じ得る。これはプロトコールに書き留めるべきことである。０時間サンプルを、物質添加直後に取得する。これは、安定性計数において１００％値に相当する。ここで理想的には、採用した濃度を、読み出すべきである。サンプルは−２０℃で凍結させることができる。

・０時間
・６時間
・２４時間
・４８時間
使用する陰性対照は、物質なしのＳＦである。使用する陽性対照は、１μＭの物質を有するＳＦである。これは、０時間の数値、つまり１００％安定性に相当する。
サンプルを「低結合性」Eppendorf容器中−２０℃で保存する。次いでサンプルを、定量的に測定する。

データ処理：
測定された濃度（ｎｇ／ｍｌ）を、グラフ中、時間に対してプロットする（GraphPad Prism（登録商標））。物質のパーセンテージ安定性をここで決定する。使用する１００％値は、０時間時点のＳＦにおける初期値である。データを、それぞれの実験数の下eLabBio中に保存し、ＭＳＲデータベースに報告する（対応するインキュベーション時間後のパーセント安定性として）。
結果：
測定した全化合物は安定性を保っていた（例１の表を参照）。化合物の安定性は、４８時間後の＞８０％化合物回収として定義する。

例４０：注射バイアル
３ｌの２回蒸留水中の１００ｇの式Ｉで表される化合物および５ｇのリン酸水素二ナトリウムの溶液を、２Ｎの塩酸を使用してｐＨ６．５に調整し、滅菌条件下で濾過し、注射バイアル中へ移し、滅菌条件下で凍結乾燥し、滅菌条件下で密封する。各注射バイアルは５ｍｇの式Ｉで表される化合物を含有する。

例４１：溶液
溶液を、９４０ｍｌの２回蒸留水中の、１ｇの式Ｉで表される化合物、９．３８ｇのＮａＨ_２ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ、２８．４８ｇのＮａ_２ＨＰＯ_４・１２Ｈ_２Ｏおよび０．１ｇの塩化ベンザルコニウムから調製する。ｐＨを６．８に調整し、溶液を１ｌにし、放射線により滅菌する。この溶液は点眼剤の形態で使用することができる。

例４２：軟膏
５００ｍｇの式Ｉで表される化合物を、無菌条件下で、９９．５ｇのワセリンと混合する。

例４３：アンプル
６０ｌの２回蒸留水中の１ｋｇの式Ｉで表される化合物の溶液を滅菌条件下で濾過し、アンプルへと移し、滅菌条件下で凍結乾燥し、滅菌条件下で密封した。各アンプルは、１０ｍｇの式Ｉで表される化合物を含有する。

Claims

式Ｉ
式中、
Ｘは、ＣＨＲ^１またはＣＲ^１Ｒ^２であり、ここで任意にＲ^１およびＲ^２が、それらが結合しているＣ原子とともに、３〜７個のＣ原子を含有するシクロアルキルまたはヘテロシクリルを形成し、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＮＲＳＯ_２Ｒ’−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、ならびに、ここで任意に１〜１１個のＨ原子は、ＦまたはＣｌで置換され、
Ｄは、−Ｅ−Ｇ−Ｋまたは−Ｌであり、
Ｅ、Ｋは、互いに独立して、非置換であるかまたはＲ^１もしくはＲ^２で１〜４回置換された、飽和の、不飽和のまたは芳香族の炭化水素環、あるいは、非置換であるかまたはＲ^１、Ｒ^２、＝Ｓ、＝ＮＲ^１もしくは＝Ｏで一、二または三置換された、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する単環式の飽和の、不飽和のまたは芳香族のヘテロ環であり、
Ｇは、単結合であり、
Ｌは、−Ｅ−Ｇ−Ｋであり、ここでＥおよびＫが、単結合Ｇに加えて、１〜３個のＣ原子を含有する追加のアルキルリンカーを介して連結され、ここで任意に１個のＣＨ_２基は、−ＣＲ^１Ｒ^２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^１−、−ＯＣＯ−、−ＮＲ^１ＣＯＮＲ^２−、−ＮＲ^１ＣＯ−、−ＮＲ^１ＳＯ_２Ｒ^２−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ^１−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、
Ｙは、Ｈ、Ｒ^１、あるいは、非置換であるかまたはＲ^１で１〜４回置換された飽和の、不飽和のまたは芳香族の炭化水素環、あるいは、非置換であるかまたはＲ^１、＝Ｓ、＝ＮＲ^１もしくは＝Ｏで一、二または三置換された、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する単環式の飽和の、不飽和のまたは芳香族のヘテロ環であり、
Ｑは、単結合、あるいは、１〜１０個のＣ原子を含有する直鎖状、分枝状または単環式または二環式のアルキルリンカーであり、ここで任意に１〜５個のＣＨ_２基は、−ＣＲ^３Ｒ^４−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^３−、−ＯＣＯ−、−ＮＲ^３ＣＯＮＲ^４−、−ＮＲ^３ＣＯ−、−ＮＲ^３ＳＯ_２Ｒ^４−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ^３−で置換され、ならびに、ここで任意に１〜２０個のＨ原子は、ＦまたはＣｌで置換され、ここでＲ^３およびＲ^４が、それらが結合する原子とともに、３〜７個のＣ原子を含有するシクロアルキルまたはヘテロシクリルを任意に形成し、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＮＲＳＯ_２Ｒ’−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、ならびに、ここで任意に１〜１１個のＨ原子が、ＦまたはＣｌで置換され、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は、互いに独立して、Ｈａｌ、Ｅ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＳＯ_２ＮＲＲ’、ＣＮ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’、ＮＲＳＯ_２Ｒ’、ＮＲＣＯＲ’、非置換であるかまたは＝Ｓ、＝ＮＲ、＝Ｏ、Ｅ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＳＯ_２ＮＲＲ’、ＣＮ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’、ＮＲＳＯ_２Ｒ’もしくはＮＲＣＯＲ’で一、二または三置換された１〜１０個のＣ原子を含有する直鎖状または分枝状のアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基が、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＮＲＳＯ_２Ｒ’−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ−、−Ｃ≡Ｃ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、ここで任意に１〜２０個のＨ原子が、ＦまたはＣｌで置換され、ならびに、非置換であるかまたは＝Ｓ、＝ＮＲ、＝Ｏ、Ｅ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＳＯ_２ＮＲＲ’、ＣＮ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’、ＮＲＳＯ_２Ｒ’もしくはＮＲＣＯＲ’で一、二または三置換された３〜７個のＣ原子を含有するシクロアルキルまたはヘテロシクリル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基が、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＮＲＳＯ_２Ｒ’−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、ここで任意に１〜１１個のＨ原子が、ＦまたはＣｌで置換される、からなる群から選択され、
Ｒ、Ｒ’は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、Ｅ、Ｒ^５、ＯＲ^５、ＮＲ^５、ＳＯ_２Ｒ^５、ＳＯ_２ＮＲ^５Ｒ^６、ＣＮ、ＣＯＯＲ^５、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６、ＮＲ^５ＣＯＲ^６、非置換であるかまたは＝Ｓ、＝ＮＲ^５、＝Ｏ、Ｈａｌ、Ｅ、Ｒ^５、ＯＲ^５、ＮＲ^５、ＳＯ_２Ｒ^５、ＳＯ_２ＮＲ^５Ｒ^６、ＣＮ、ＣＯＯＲ^５、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６もしくはＮＲ^５ＣＯＲ^６で一、二または三置換された１〜１０個のＣ原子を含有する直鎖状または分枝状のアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^５−、−ＯＣＯ−、−ＮＲ^５ＣＯＮＲ^６−、−ＮＲ^５ＣＯ−、−ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ^５−、−Ｃ≡Ｃ−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、ここで任意に１〜２０個のＨ原子が、ＦまたはＣｌで置換され、ならびに、非置換であるかまたは＝Ｓ、＝ＮＲ^５、＝Ｏ、Ｈａｌ、Ｅ、Ｒ^５、ＯＲ^５、ＮＲ^５、ＳＯ_２Ｒ^５、ＳＯ_２ＮＲ^５Ｒ^６、ＣＮ、ＣＯＯＲ^５、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６もしくはＮＲ^５ＣＯＲ^６で一、二または三置換された３〜７個のＣ原子を含有するシクロアルキルまたはヘテロシクリル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^５−、−ＯＣＯ−、−ＮＲ^５ＣＯＮＲ^６−、−ＮＲ^５ＣＯ−、−ＮＲ^５ＳＯ_２Ｒ^６−、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＲ^５−または−ＣＨ＝ＣＨ−で置換され、および、ここで任意に１〜１１個のＨ原子は、ＦまたはＣｌで置換される、からなる群から選択され、
Ｒ^５、Ｒ^６は、互いに独立して、Ｈ、アルキル、あるいは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を有する単環式または二環式の飽和の、不飽和のまたは芳香族の炭化水素環またはヘテロ環であり、
Ｒ^７は、Ｈ、または、１〜７個のＣ原子を含有するアルキルであり、ならびに、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである、
で表される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体。
Ｅが、
であり、
Ｋが、
であり、
Ｑが、
であり、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｇ、Ｌ、Ｙ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、請求項１に開示された意味を有する、
請求項１に記載の化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体。
Ｅが、
であり、
Ｋが、
であり、
Ｑが、
であり、
Ｒ^１、Ｒ^２が、互いに独立して、非置換であるかまたはＥ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＲ’もしくはＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’で一、二または三置換された１〜５個のＣ原子を含有する直鎖状または分枝状のアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基が、−Ｏ−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子が、Ｆで置換され、あるいは、非置換であるかまたはＥ、ＯＲ、ＮＲＲ’、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲＲ’、ＮＲＣＯＲ’もしくはＮＲＣＯＮＲ’Ｒ’’で一、二または三置換された３〜６個のＣ原子を含有するシクロアルキル、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基が、−Ｏ−、−ＮＲ−、−ＯＣＯ−、−ＮＲＣＯＮＲ’−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＯ−または−ＣＯＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子が、Ｆで置換される、であり、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｇ、Ｌ、Ｙ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、請求項１に開示された意味を有する、
請求項１に記載の化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体。
Ｅが、
であり、
Ｋが、
であり、
Ｑが、
であり、
Ｒ^１、Ｒ^２は、互いに独立して、非置換であるかまたはＥもしくはＯＲで一、二または三置換された、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、２−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、ＯＨまたはＯＲであり、ここで任意に１〜３個のＣＨ_２基が、−Ｏ−または−ＮＲ−で置換され、および、ここで任意に１〜１０個のＨ原子が、Ｆで置換され、ならびに、
Ｘ、Ｄ、Ｇ、Ｌ、Ｙ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７が、互いに独立して、請求項１に開示された意味を有する、
請求項１に記載の化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体。
ａ）４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸
ｂ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［５−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−２−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸
ｃ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［（Ｓ）−２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
ｄ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸
ｅ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
ｆ）（２Ｓ，４Ｓ）−２−ベンジル−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−酪酸
ｇ）（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−エチル｝−ペンタン酸
ｈ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メトキシメチル−酪酸
ｉ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸
ｊ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−２−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｋ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（３−フルオロ−ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
ｌ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［１−（４−フルオロ−フェニル）−ピペリジン−４−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸
ｍ）４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（５−フェニル−ピリジン−２−カルボニル）−アミノ］−酪酸
ｎ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（６−フェニル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酪酸
ｏ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペラジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸
ｐ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−３−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｑ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸
ｒ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［２−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−５−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸
ｓ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラゾール−１−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｔ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−アミノ−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｕ）２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（６−フェニル−ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
ｖ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−３−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル
ｗ）２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピリジン−２−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル
ｘ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（３−フルオロ−ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｙ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸メチルエステル
ｚ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［５−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−２−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ａａ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［２−（４−フルオロ−フェニル）−チアゾール−５−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｂｂ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸メチルエステル
ｃｃ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−４−｛［１−（４−フルオロ−フェニル）−ピペリジン−４−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｄｄ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラゾール−１−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸メチルエステル
ｅｅ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペリジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
ｆｆ）２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（４−フェニル−ピペラジン−１−カルボニル）−アミノ］−酪酸メチルエステル
ｇｇ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジルカルバモイル）−酪酸メチルエステル
ｈｈ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１−メチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｉｉ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−２−メチル−酪酸メチルエステル
ｊｊ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラジン−２−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｋｋ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−４−（１，１，３−トリメチル−ブチルカルバモイル）−酪酸
ｌｌ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［（５−フェニル−ピラジン−２−カルボニル）−アミノ］−酪酸
ｍｍ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−（４−ピラゾール−１−イル−ベンゾイルアミノ）−酪酸
ｎｎ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［４−（１−ジフルオロメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾイルアミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
ｏｏ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２−メチル−４−［４−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾイルアミノ］−酪酸
ｐｐ）（Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−１，１−ジメチル−エチルカルバモイル］−２，２−ジメチル−酪酸
ｑｑ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−［３−（４−フルオロ−ベンジル）−オキセタン−３−イルカルバモイル］−２−メチル−酪酸
ｒｒ）（２Ｓ，４Ｓ）−４−［（ビフェニル−４−カルボニル）−アミノ］−４−（１，１−ジメチル−プロピルカルバモイル）−２−メチル−酪酸
からなる群から選択される化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体。
ＡＤＡＭＴＳ５阻害剤としての、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、または、それらの生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体。
請求項１〜５のいずれか一項の記載の少なくとも１種の化合物、および／または、それらの生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体を含む、医薬組成物。
賦形剤および／またはアジュバントをさらに含む、請求項７に記載の医薬組成物。
請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１種の化合物、および／または、それらの生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体と、少なくとも１種のさらなる医薬活性成分とを含む、医薬組成物。
請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体の１種を、固体、液体もしくは半流動体の賦形剤またはアジュバントと一緒に、好適な投薬形態とすることを特徴とする、医薬組成物の調製のための方法。
生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１種の化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、溶媒和物または立体異性体の１種を含む、医薬。
骨関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症、痛覚過敏、リウマチ性関節炎、関節損傷、反応性関節炎、硬変症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、胃炎、乾癬、湿疹および皮膚炎としての炎症性疾患、喘息、アレルギー反応、慢性閉塞性肺疾患、肺線維症、急性呼吸窮迫（ＡＲＤＳ）、肺感染症、間質性肺炎、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、加齢性黄斑変性、心筋梗塞、角膜潰瘍、がん、腫瘍転移および浸潤、骨関節炎において見られる細胞外マトリックスの非制御分解、中枢神経系疾患、異常な創傷治癒、多発性硬化症、血管新生および再狭窄からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１種の化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物または立体異性体の１種を含む、医薬。
骨関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症、痛覚過敏、リウマチ性関節炎、関節損傷、反応性関節炎、中枢神経系疾患、多発性硬化症、血管新生、がん、腫瘍転移および浸潤からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１種の化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物または立体異性体の１種を含む、医薬。
骨関節炎、リウマチ性関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症および痛覚過敏からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における使用のための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の少なくとも１種の化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物または立体異性体の１種を含む、医薬。
骨関節炎、リウマチ性関節炎、外傷性の軟骨損傷、疼痛、異痛症および痛覚過敏からなる群から選択される生理学的および／または病態生理学的な状態の処置および／または予防における、関節内投与のための、請求項７〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
ａ）請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、および／または、その生理学的に許容し得る塩、誘導体、溶媒和物または立体異性体の有効量、ならびに、
ｂ）さらなる医薬活性成分の有効量
の別個のパックからなるセット（キット）。