JP6138853B2 - 固相酵素製剤およびその製造方法 - Google Patents
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Description
本発明は、a)少なくとも1つの酵素ならびに少なくとも1つの一価または二価金属カチオンの有機もしくは無機塩からなる少なくとも1つの粒子状、粒状酵素組成物と、b)少なくとも1つの生理的に適合可能な粒子状の無機または有機支持体と、c)接着特性を有する少なくとも1つの疎水性液体、特に−60℃〜30℃、特に−50℃〜0℃、例えば、−40℃〜−5℃または−30℃〜−10℃の範囲に融点を有する疎水性液体とからなる混合物を含んでなる固相酵素製剤に関する。
a)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中の酵素を含んでなる粒子状酵素組成物;
b)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中の互いに異なる少なくとも二つの酵素を含んでなる粒子状酵素組成物;あるいは
c) 互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物であって、当該二つの組成物は少なくとも1つの異なる酵素を含む点において異なっており、各組成物中の当該酵素は少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に存在する、上記組成物。
a) 重量測定によるダスト値 (実施例に記載される方法によって測定)が0〜0.5重量%、0.001〜0.3重量%または0.01〜0.2重量%の範囲にある;
b) 容積密度が200〜700g/l、300〜500g/l、350〜450g/lの範囲にある(DIN EN ISO 60に特定されるように定められる)
c) ffc値を有する流動性(Schulzeリングせん断試験によって決定する)が3〜30、5〜15または6〜10の範囲にある。
a)少なくとも1つの酵素組成物であって、この酵素成分は硫酸マグネシウムとの混合物中の前記キシラナーゼ、グルカナーゼおよびそれらの混合物から選択され、当該硫酸マグネシウムの割合は乾燥酵素組成物の総重量に基いて約5〜25重量%または15〜20重量%である、上記酵素組成物;
b)少なくとも1つのコムギセモリナブラン支持体であって、酵素組成物:支持体の混合比が1:5〜1:500または1:10〜1:100の範囲にある、上記支持体;ならびに
c)酵素製剤の最終重量に基いて約0.1〜1重量%または0.3〜0.6重量%の割合の植物油。
a)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中の酵素(特にキシラナーゼまたはグルカナーゼ)を含んでなる粒子状酵素組成物を得ること;
b)キシラナーゼまたはグルカナーゼから選択される互いに異なる少なくとも二つの酵素を含んでなる粒子状酵素組成物を、少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に得ること;または
c)互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物を得ること(少なくとも1つの異なる酵素を含む点において二つの組成物は異なっており、各組成物中の酵素は少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に存在する)、
を含む方法に関する。
a)少なくとも二つの酵素組成物のそれぞれを粒子状無機または有機支持体と混合するか、あるいは
b)粒子状無機または有機支持体を少なくとも二つの酵素組成物と混合し、そして
改良法a)または改良法b)により作製された混合物を疎水性液体を用いて湿らすこと、
を含む方法が好ましい。
a)少なくとも1つの酵素含有液を、噴霧乾燥してまたは、噴霧乾燥および凝集して少なくとも1つの酵素組成物を得る工程であって、当該組成物の酵素成分はキシラナーゼ、グルカナーゼおよびそれらの混合物からなる群から選択され、当該酵素成分は硫酸マグネシウムとの混合物中の液体中に存在し、当該硫酸マグネシウムは乾燥酵素組成物の総重量に基いて約10〜25重量%である、上記工程;
b)得られた酵素組成物を粒子状無機または有機支持体と混合する工程;そして
c)酵素/支持体の混合物を−60℃〜30℃の融点を有する疎水性液体を用いて湿らす工程。
a)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのキシラナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を得る工程;
b)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのグルカナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を得る工程;
c)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのキシラナーゼおよび少なくとも1つのグルカナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を得る工程;または
d)互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物を得る工程であって、1の組成物は少なくとも1つのキシラナーゼを含み、かつその他の組成物は少なくとも1つのグルカナーゼを含み、各組成物中の酵素は硫酸マグネシウムとの混合物中に存在する、上記工程。
本発明で用いられる酵素は特に限定されることはなく、天然物または組換え体起源のものであっても良い。当該酵素は植物、菌類、細菌または酵母由来の酵素であり得る。微生物起源(例えば、細菌、酵母または菌類)由来の酵素が好ましい。当該酵素は公知の技術によって各微生物より得ることができる。当該技術は一般的に、酵素産生微生物を好適な培地中にて発酵させること、およびその後酵素または酵素濃縮物を発酵培地より標準的な技術で単離することを含む。
これらは、正式名称エンド-1,4-β-キシラナーゼを有するクラスEC 3.2. 1.8の酵素である。系統名は、1,4-β-D-キシランキシラノヒドロラーゼである。同様に用いられる他の名称は、エンド-(1-4)-β-キシラナーゼ;(1-4)-β-キシラン4-キシラノヒドロラーゼ;エンド-1,4-キシラナーゼ;キシラナーゼ;β-1,4-キシラナーゼ;エンド-1,4-キシラナーゼ; エンドβ-1,4-キシラナーゼ;エンド-1,4-β-D-キシラナーゼ;1,4-β-キシラン キシラノヒドロラーゼ;β-キシラナーゼ;β-1,4-キシランキシラノヒドロラーゼ;エンド-1,4-β-キシラナーゼ;β-D-キシラナーゼである。この酵素はキシランの1,4-β-D-キシロシディック(xylosidic)結合のエンドハイドロリシスを触媒する。
エンドグルカナーゼはEC 3.2.1.4として分類され、しばしばセルラーゼと呼ばれている。その他の名称はエンド-グルカナーゼ、エンド-1,4-β-グルカナーゼ、セルラーゼ Aまたはカルボキシメチルセルラーゼである。この酵素は、セルロース中の1,4-β-D-グルコシド結合(glucosidic bond)、およびまたβ-D-グルカン(さらに、1,3-結合を含む)中の1,4-結合のエンドハイドロリシスを触媒する。
言及し得る好適な安定化添加物の例としては、無機または有機塩が挙げられる。
ジンクスルフェート(0.5〜10または3〜8重量%)
カルシウムスルフェート (1〜30または10〜25重量%)
硫酸マグネシウム (5〜30または10〜25重量%)
ナトリウムスルフェート (1〜30または10〜20重量%)
d) 好適な支持体
支持体材料の例としては、以下のものが挙げられる:炭水化物、特に糖類およびデンプン(例えば、コーン、コメ、ポテト、コムギおよびキャッサバ);変性デンプン(例えば、オクテニル無水コハク酸);セルロースおよび微結晶性セルロース;無機ミネラルまたはローム(例えば、クレイ、コール、珪藻土、ケイ酸、タルクおよびカオリン;セモリナ(例えば、コムギセモリナ)、ブラン(例えば、コムギブランまたはコムギセモリナ)、小麦粉;塩、例えば金属塩、特に、有機酸のアルカリ金属およびアルカリ土類金属塩(例えば、Mg, Ca, Zn, Na, Kのクエン酸塩、酢酸塩、ギ酸塩およびギ酸水素塩)、無機塩類(例えば、Mg, Ca, Zn, Na, Kの硫酸塩、炭酸塩、ケイ酸塩またはリン酸塩);アルカリ土類金属酸化物(例えば、CaOおよびMgO);無機緩衝剤、例えば、アルカリ金属リン酸水素塩、特にリン酸水素ナトリウムおよびリン酸水素カリウム(例えば、K2HPO4, KH2PO4およびNa2HPO4)。
言及し得る好適な疎水性液体の例としては以下のものが挙げられる:
原則として、全ての疎水性液体(疎水性分子部分を有し、−60℃〜30℃の範囲に融点を有する)が、食品または飼料添加物として好適である限り有用である。天然の植物性または動物性の液体、例えば、リン脂質およびモノ‐、ジ‐およびトリアシルグリセリドならびにそれらの混合物が、より好ましい。
本発明の酵素製剤は、先行技術の自体公知の方法(例えば、Molletら、Formulierungstechnik [Formulation technique], 2000, Verlag Wiley-VCH, WeinheimまたはHeinze, Handbuch der Agglomerationstechnik [Handbook of agglomeration technique], 2000, Verlag Wiley-VCH, Weinheimに記載されるもの)を使用して製造される。
塩安定化、好ましくは凝集した酵素組成物を乾燥して製造するために、様々な技術を検討する。特に、例えば以下のものが挙げられる:
‐噴霧乾燥
‐流動層造粒
‐流動層凝集
‐流動噴霧乾燥 (FSD) 技術
‐Glatt由来のProcell技術 (WO 2004/108911)。
自体公知の技術を組み合わせて使用して、噴霧乾燥した(適切な場合)凝集生成物(乾燥酵素組成物)を上記支持体材料と混合する。このために、酵素製剤を支持体に添加し、これを必要であれば、しばらくの間(例えば、1〜5分間)均一に分布するまで混合する。そして疎水性液体を加える。疎水性液体は混合しながら、上記混合物上にまたは中に噴霧、滴下または注ぐことができる。添加完了の後、混合作業を例えば、5〜45分間、油が均一に分布するまで継続する。得られた生成物は非常に低いダスト率である。さらなる操作工程は、通常は必要ではない。
本発明により製造される酵素製剤は特に、食品および飼料を添加するのに好適である。
a)乾燥質量含有率が約20〜35重量%、pH 3.5〜5.0 、および60000〜100000 TXU/gの活性を有する水性キシラナーゼ濃縮物中に、濃縮物に基いて10〜20重量%の硫酸マグネシウム7水和物を4〜10℃にて溶解した。
a)乾燥質量含有率が約20〜35重量%、pH 3.5〜5.0、および150000〜400000 TGU/gの活性を有する水性β-グルカナーゼ濃縮物中に、濃縮物に基いて10〜20重量%の硫酸マグネシウム7水和物を4〜10℃にて溶解した。
酵素製剤を製造するために、コムギセモリナブラン (672g)を研究用ミキサー(Lodige)に投入し、室温で、170回転/分にてホモジェナイズした。これらの条件下にて、上記製造例V1 c)にて製造した21 gの酵素組成物および上記製造例V2 c)にて製造した3.5 gの酵素組成物をミキサーに添加し、5分間混合した。その後、大豆油をピペットでゆっくりと滴下して加え、その後30分間混合する。
a)乾燥質量含有率が約20〜35重量%、pH 3.5〜5.0、および150000〜400000 TGU/gの活性を有する水性β-グルカナーゼ濃縮物と、乾燥質量含有率が約20〜35重量%、pH 3.5〜5.0、および60000〜100000 TXU/gの活性を有する水性キシラナーゼ濃縮物とを1:8の比率で混合した。この混合物中に、濃縮物に基いて10〜30重量%の硫酸マグネシウム7水和物を4〜10℃にて溶解した。
本発明における混合物のダスト値 (生成物の総量に基づく%)を油の添加有り、なしで測定する。
各3つのサンプル(それぞれ10 ± 0.03 gの試験用固相)をゆっくりと(およそ2〜3秒かけて)フォーリングチューブ(長さ= 60 cm; 直径 = 3 cm) を通して容器 (高さ20.2 cm、幅19.5 cm、長さ19.5 cm;サクションチューブをおよそ13cmの高さで側壁に配置し、フォーリングチューブに対して直角 (90°)でマウントする)に注ぐ。サクションチューブを介して容器に連結されたオイルポンプを使用して、生じたダストを容器から吸引し、一定の速度 (15 ± 0.5 l/min)で1分間、フィルター上に回収する。このために、好適なフィルター (例えば、Sartoriusグラスファイバープレフィルター, 13400-37-S; 直径 35 mm)を備えたガラスバキュームフィルター (直径 35 mm, D2, 50 ml)を使用する。吸引により取り出されたダストの量を、分析用てんびんを使用して計測し、用いたサンプル量と関連付け、%で表す。測定した%ダスト値によると、サンプルのダスト挙動は以下のとおりに示される:
キシラナーゼ粉体 (XEA): 活性: 229300 TXU/g;平均粒径 = 171; (20重量% 硫酸マグネシウム7水和物);製造例V1と同様の方法で乾燥
コムギセモリナブラン (WGK) (Hildebrandmuhlen);平均粒径 = 370
大豆油
サンプルの混合:
WGKをLodigeミキサーに投入し、それにSD粉体を添加して室温で5分間、170 rpmにて予め混合する。大豆油をおよそ80℃に加熱して、微細ピペットでゆっくりと滴下して加え、その後30分間混合する。各ケースについて、1000 gの混合物を調製する。様々な混合物について測定したダスト値、ならびに純XEAおよび純WGKについて測定したダスト値を以下の表にまとめる:
本発明の酵素製剤の流動挙動を公知の方法で測定する。先行技術において、原則として好適な様々な方法が開示されている (Schmittら、Part. Part. Syst. Charact. 21 (2004) 403-410参照).
本発明において、流動性の測定はSchulzeリングせん断テスター RST.01-pcを使用して行う。実験はASTM D6773法(Schulze Ring Shear Tester 2002)によって行う。
測定セルにおけるサンプルの保存時間: 0時間
温度: 22°C
相対空気湿度: 70%
連結力 (load): σ1= 11.18 kPa
ASTM D6773法を使用して、流動性ffc= 8.8を得た。したがって、生成物は高い流動性を有する。
本発明の実施形態として例えば以下を挙げることができる。
[実施形態1]
以下の混合物を含む固相酵素製剤:
a)少なくとも1つの酵素ならびに少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機もしくは無機塩からなる少なくとも1つの粒子状酵素組成物と、
b)少なくとも1つの粒子状無機または有機支持体と、
c)少なくとも1つの疎水性液体。
[実施形態2]
a)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に酵素を含んでなる粒子状酵素組成物、
b)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に互いに異なる少なくとも二つの酵素を含んでなる粒子状酵素組成物、あるいは
c)互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物であって、各組成物は少なくとも1つの異なる酵素を含むために該二つの組成物は異なっており、各組成物中における該酵素は少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に存在する、上記粒子状酵素組成物、
を含む、実施形態1記載の酵素製剤。
[実施形態3]
酵素組成物に対する支持体の平均粒径の比率が約0.125〜8の範囲である、実施形態1または2記載の酵素製剤。
[実施形態4]
酵素組成物および支持体の平均粒径は互いに独立して、それぞれ約50〜500μmの範囲である、実施形態3記載の酵素製剤。
[実施形態5]
酵素組成物および支持体の混合比が約1:1000〜1:5重量部の範囲である、実施形態1〜4のいずれか1項記載の酵素製剤。
[実施形態6]
疎水性液体が酵素製剤の総重量に基いて0.1〜5重量%である、実施形態1〜5のいずれか1項記載の酵素製剤。
[実施形態7]
酵素組成物中の塩が酵素組成物の総重量に基いて1〜30重量%の範囲である、実施形態1〜6のいずれか1項記載の酵素製剤。
[実施形態8]
酵素がキシラナーゼ、グルカナーゼ、セルラーゼ、プロテアーゼ、ケラチナーゼ、アミラーゼおよびそれらの混合物からなる群から選択される、実施形態1〜7のいずれか1項記載の酵素製剤。
[実施形態9]
酵素がエンド-1,4-β-キシラナーゼ(EC 3.2.1.8),エンド-1,4-β-グルカナーゼ(EC 3.2.1.4)およびそれらの混合物からなる群から選択される、実施形態8記載の酵素製剤。
[実施形態10]
以下の特性の少なくとも1つをさらに有する、実施形態1〜9のいずれか1項記載の酵素製剤。
:
a)重量測定によるダスト値が0.001〜0.2%の範囲;
b)容積密度が200〜700 g/lの範囲;
c)流動性ff c (Schulzeリングせん断試験によって測定)が3〜30の範囲。
[実施形態11]
以下のものからなる混合物を含む、実施形態1〜10のいずれか1項記載の酵素製剤:
a)少なくとも1つの酵素組成物であって、該酵素の成分は硫酸マグネシウムとの混合物中のキシラナーゼ、グルカナーゼおよびそれらの混合物から選択され、該硫酸マグネシウムは乾燥酵素組成物の総重量に基いて約5〜25重量%である、上記酵素組成物;
b)少なくとも1つのコムギセモリナブラン支持体であって、酵素組成物:支持体の混合比が1:5〜1:500の範囲である、上記支持体;ならびに
c)酵素製剤の最終重量に基いて約0.1〜1重量%で含まれる植物油、
ここで酵素組成物および支持体の平均粒径は約150〜500μmであり、キシラナーゼは製剤1gにつき約3000〜30000 TXUであり、そしてグルカナーゼは製剤1gにつき約2000〜20000 TGUである。
[実施形態12]
酵素成分がキシラナーゼである酵素組成物を含んでなる、実施形態11記載の酵素製剤。
[実施形態13]
酵素成分がグルカナーゼである酵素組成物を含んでなる、実施形態11記載の酵素製剤。
[実施形態14]
酵素の成分がキシラナーゼおよびグルカナーゼからなる混合物である酵素組成物を含んでなる、実施形態11記載の酵素製剤。
[実施形態15]
異なる酵素からなる2つの酵素組成物を含んでなる、実施形態11記載の酵素製剤であって、1の酵素成分がグルカナーゼであり、もう1つの酵素成分がキシラナーゼである、上記酵素製剤。
[実施形態16]
実施形態1〜15のいずれか1項記載の固相酵素製剤を製造するための方法であって、少なくとも1つの酵素ならびに少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機もしくは無機塩を含んでなる少なくとも1つの粒子状酵素組成物を少なくとも1つの粒子状無機または有機支持体と混合し、そして混合物を疎水性液体を用いて湿らすことを含む、上記方法。
[実施形態17]
a)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中の酵素を含んでなる粒子状酵素組成物を提供するか、
b)互いに異なる少なくとも二つの酵素を含んでなる粒子状酵素組成物を少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に提供するか;あるいは
c)互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物を提供し、該2つの組成物は少なくとも1つの異なる酵素を含む点において異なっており、各組成物中の酵素は少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に存在する、実施形態16記載の方法。
[実施形態18]
酵素組成物が酵素含有液の噴霧乾燥によってまたは噴霧乾燥および凝集によって得られ、該酵素組成物中に少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩が取り込まれている、実施形態16、17a)または17b)のいずれか1項記載の方法。
[実施形態19]
互いに異なる酵素からなる少なくとも二つの酵素組成物を少なくとも二つの異なる酵素含有液の噴霧乾燥によってまたは噴霧乾燥および凝集によって得、該酵素組成物中に少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩を取り込み、
a)少なくとも二つの酵素組成物はそれぞれ、粒子状無機または有機支持体と混合されるか、または
b)粒子状無機または有機支持体は少なくとも二つの酵素組成物と混合され、そして
改良法a)または改良法b)によって作製された混合物を疎水性液体を用いて湿らす、実施形態16または17c)記載の方法。
[実施形態20]
酵素含有液が少なくとも1つのキシラナーゼ、少なくとも1つのグルカナーゼまたはそれらの混合物を含む、実施形態16〜19のいずれか1項記載の方法。
[実施形態21]
用いられる酵素組成物中の塩が、酵素組成物の総重量に基いて1〜30重量%の範囲である、実施形態16〜20のいずれか1項記載の方法。
[実施形態22]
支持体および酵素組成物の平均粒径の比率が約0.125〜8の範囲である支持体および酵素組成物を使用する、実施形態16〜21のいずれか1項記載の方法。
[実施形態23]
酵素組成物および支持体の平均粒径が互いに独立して、それぞれ約50〜500μmの範囲である、実施形態22記載の方法。
[実施形態24]
酵素組成物および支持体の混合比が約1:1000〜1:5の範囲に設定される、実施形態16〜23のいずれか1項記載の方法。
[実施形態25]
疎水性液体が酵素製剤の総重量に基いて0.1〜5重量%である、実施形態16〜24のいずれか1項記載の方法。
[実施形態26]
キシラナーゼ、グルカナーゼおよびそれらの混合物から選択される少なくとも1つの酵素を含んでなる固相酵素製剤の製造方法であって、以下の工程:
a)少なくとも1つの酵素含有液を噴霧乾燥してまたは噴霧乾燥および凝集して、少なくとも1つの酵素組成物を得る工程であって、該酵素組成物の酵素成分はキシラナーゼ、グルカナーゼおよびそれらの混合物から選択され、該酵素成分は硫酸マグネシウムとの混合物中の液体中に存在し、かつ硫酸マグネシウムが乾燥酵素組成物の総重量に基いて約5〜25重量%である、上記工程;
b)得られた酵素組成物を粒子状無機または有機支持体と混合する工程;ならびに
c)酵素/支持体混合物を疎水性液体を用いて湿らす工程。
[実施形態27]
a)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのキシラナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を提供するか、
b)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのグルカナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を提供するか、
c)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのキシラナーゼおよび少なくとも1つのグルカナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を提供するか、または
d)互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物を提供する、ここで1の組成物は少なくとも1つのキシラナーゼを含み、他の組成物は少なくとも1つのグルカナーゼを含み、各組成物における酵素は硫酸マグネシウムとの混合物中に存在する、
実施形態26記載の方法。
[実施形態28]
酵素組成物を少なくとも1つのコムギセモリナブラン支持体と混合し、その際の酵素組成物:支持体の混合比が1:5〜1:1000の範囲にある、実施形態26または27記載の方法。
[実施形態29]
2つの異なる酵素組成物を少なくとも1つのコムギセモリナブラン支持体と混合し、その際の酵素組成物:支持体の混合比が1:5〜1:1000の範囲にある、実施形態26または27記載の方法。
[実施形態30]
酵素製剤の最終重量に基いて約0.1〜1重量%にて、植物油を混合しながら加える、実施形態26〜29のいずれか1項記載の方法。
[実施形態31]
用いられる酵素組成物と用いられる支持体の平均粒径が互いに独立して、それぞれ約150〜500μmの範囲にある、実施形態26〜30のいずれか1項記載の方法。
[実施形態32]
キシラナーゼが製剤1gにつき約3000〜30000 TXUであり、および/またはグルカナーゼが製剤1gにつき約2000〜20000 TGUである、実施形態26〜31のいずれか1項記載の方法。
[実施形態33]
食品、補助食品または動物飼料を製造するための、実施形態1〜15のいずれか1項記載の乾燥酵素製剤または実施形態16〜32のいずれか1項記載の方法により得られる乾燥酵素製剤の使用。
[実施形態34]
実施形態1〜15のいずれか1項記載の乾燥酵素製剤または実施形態16〜32のいずれか1項記載の方法により製造される乾燥酵素製剤を含んでなる動物飼料、食品または補助食品。
[実施形態35]
実施形態1〜15のいずれか1項記載の乾燥酵素製剤または実施形態16〜32のいずれか1項記載の方法により製造される乾燥酵素製剤を含んでなる動物飼料。
[実施形態36]
酵素製剤を約0.001〜1重量%含んでなる、実施形態35記載の動物飼料。
Claims (40)
- 以下の混合物を含む、動物飼料、食品または補助食品を製造するための固相酵素製剤:
a)少なくとも1つの酵素ならびに少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩を含む少なくとも1つの粒子状酵素組成物と、
b)少なくとも1つの粒子状無機または有機支持体と、
c)少なくとも1つの疎水性液体、
であって、酵素組成物に対する支持体の平均粒径の比率が1〜2の範囲であり、かつ酵素組成物および支持体の混合比が1:500〜1:20重量部の範囲であり、かつ酵素組成物および支持体の平均粒径は互いに独立して、それぞれ150〜350μmの範囲であり、かつ疎水性液体の割合が酵素製剤の総重量に基いて0.1〜1.5重量%であり、かつ酵素製剤が5〜15の範囲の流動性ffc(Schulzeリングせん断試験によって測定)を示す、上記固相酵素製剤。 - a)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に酵素を含んでなる粒子状酵素組成物、
b)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に互いに異なる少なくとも二つの酵素を含んでなる粒子状酵素組成物、あるいは
c)互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物であって、各組成物は少なくとも1つの異なる酵素を含むために該二つの組成物は異なっており、各組成物中における該酵素は少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中に存在する、上記粒子状酵素組成物、
を含む、請求項1記載の酵素製剤。 - 酵素組成物および支持体の混合比が1:100〜1:20重量部の範囲である、請求項1または2記載の酵素製剤。
- 疎水性液体の割合が酵素製剤の総重量に基いて0.3〜0.7重量%である、請求項1〜3のいずれか1項記載の酵素製剤。
- 酵素組成物中の塩の割合が酵素組成物の総重量に基いて1〜30重量%の範囲である、請求項1〜4のいずれか1項記載の酵素製剤。
- 酵素がキシラナーゼ、グルカナーゼ、セルラーゼ、プロテアーゼ、ケラチナーゼ、アミラーゼおよびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項1〜5のいずれか1項記載の酵素製剤。
- 酵素がエンド-1,4-β-キシラナーゼ(EC 3.2.1.8)、エンド-1,4-β-グルカナーゼ(EC 3.2.1.4)およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項6記載の酵素製剤。
- 以下の特性の少なくとも1つをさらに有する、請求項1〜7のいずれか1項記載の酵素製剤:
a)重量測定によるダスト値が0.001〜0.2%の範囲;
b)容積密度が200〜700 g/lの範囲;
c)流動性ffc(Schulzeリングせん断試験によって測定)が6〜10の範囲。 - 以下の混合物を含む、請求項1〜8のいずれか1項記載の酵素製剤:
a)少なくとも1つの酵素組成物であって、該酵素の成分は硫酸マグネシウムとの混合物中のキシラナーゼ、グルカナーゼおよびそれらの混合物から選択され、該硫酸マグネシウムの割合は乾燥酵素組成物の総重量に基いて5〜25重量%である、上記酵素組成物;
b)少なくとも1つのコムギセモリナブラン支持体であって、酵素組成物:支持体の混合比が1:20〜1:500の範囲である、上記支持体;ならびに
c)酵素製剤の最終重量に基いて0.1〜1重量%の割合で含まれる植物油、
ここで酵素組成物および支持体の平均粒径は150〜350μmであり、キシラナーゼの割合は製剤1gにつき3000〜30000 合計キシラナーゼ単位(TXU)であり、そしてグルカナーゼの割合は製剤1gにつき2000〜20000 合計グルカナーゼ単位(TGU)である。 - 酵素成分がキシラナーゼである酵素組成物を含んでなる、請求項9記載の酵素製剤。
- 酵素成分がグルカナーゼである酵素組成物を含んでなる、請求項9記載の酵素製剤。
- 酵素の成分がキシラナーゼおよびグルカナーゼの混合物である酵素組成物を含んでなる、請求項9記載の酵素製剤。
- 異なる酵素を含む2つの酵素組成物を含んでなる、請求項9記載の酵素製剤であって、1の酵素成分がグルカナーゼであり、もう1つの酵素成分がキシラナーゼである、上記酵素製剤。
- 粒子状酵素組成物の酵素含有量が、酵素組成物の総重量に基いて、20〜99重量%である、請求項1記載の酵素製剤。
- 粒子状酵素組成物が、少なくとも1つの酵素、および少なくとも1つの一価または二価のカチオンの無機塩を含む、請求項1記載の酵素製剤。
- 粒子状酵素組成物が、少なくとも1つの酵素、ならびにMg、Ca、Zn、NaおよびKの硫酸塩、炭酸塩、ケイ酸塩またはリン酸塩から選択される無機塩を含む、請求項1記載の酵素製剤。
- 上記粒子状支持体b)が有機支持体である、請求項1記載の酵素製剤。
- 上記粒子状支持体b)が、セルロース、微結晶性セルロース、セモリナ、ブラン、および小麦粉から選択される有機支持体である、請求項1記載の酵素製剤。
- 請求項1〜18のいずれか1項記載の固相酵素製剤を製造するための方法であって、少なくとも1つの酵素ならびに少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩を含んでなる少なくとも1つの粒子状酵素組成物を少なくとも1つの粒子状無機または有機支持体と混合し、そして混合物を疎水性液体を用いて湿らすことを含む、上記方法。
- a)少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物中の酵素を含んでなる粒子状酵素組成物を提供するか、
b)互いに異なる少なくとも二つの酵素を含んでなる粒子状酵素組成物を少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物として提供するか;あるいは
c)互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物を提供し、該2つの組成物は少なくとも1つの異なる酵素を含む点において異なっており、各組成物中の酵素は少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩との混合物として存在する、
請求項19記載の方法。 - 酵素組成物が、少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩が取り込まれる酵素含有液の噴霧乾燥によってまたは噴霧乾燥および凝集によって得られる、請求項19、20a)または20b)のいずれか1項記載の方法。
- 互いに異なる酵素を含む少なくとも二つの酵素組成物を、少なくとも1つの一価または二価のカチオンの有機または無機塩が取り込まれる少なくとも二つの異なる酵素含有液の噴霧乾燥によってまたは噴霧乾燥および凝集によって得、
a)少なくとも二つの酵素組成物はそれぞれ、粒子状無機または有機支持体と混合されるか、または
b)粒子状無機または有機支持体は少なくとも二つの酵素組成物と混合され、そして
改良法a)または改良法b)によって作製された混合物を疎水性液体を用いて湿らす、
請求項19または20c)記載の方法。 - 酵素含有液が少なくとも1つのキシラナーゼ、少なくとも1つのグルカナーゼまたはそれらの混合物を含む、請求項19〜22のいずれか1項記載の方法。
- 用いられる酵素組成物中の塩の割合が、酵素組成物の総重量に基いて1〜30重量%の範囲である、請求項19〜23のいずれか1項記載の方法。
- 支持体および酵素組成物の平均粒径の比率が1〜2の範囲である支持体および酵素組成物を使用する、請求項19〜24のいずれか1項記載の方法。
- 酵素組成物および支持体の平均粒径が互いに独立して、それぞれ150〜350μmの範囲である、請求項25記載の方法。
- 酵素組成物および支持体の混合比が1:500〜1:20の範囲に設定される、請求項19〜26のいずれか1項記載の方法。
- 疎水性液体の割合が酵素製剤の総重量に基いて0.1〜1.5重量%である、請求項19〜27のいずれか1項記載の方法。
- キシラナーゼ、グルカナーゼおよびそれらの混合物から選択される少なくとも1つの酵素を含んでなる固相酵素製剤の製造方法:
a)少なくとも1つの酵素含有液を噴霧乾燥してまたは噴霧乾燥および凝集して、少なくとも1つの酵素組成物を得る工程であって、該酵素組成物の酵素成分はキシラナーゼ、グルカナーゼおよびそれらの混合物から選択され、該酵素成分は硫酸マグネシウムとの混合物中の液体中に存在し、かつ硫酸マグネシウムの割合が乾燥酵素組成物の総重量に基いて5〜25重量%である、上記工程;
b)得られた酵素組成物を粒子状無機または有機支持体と混合する工程;ならびに
c)酵素/支持体混合物を疎水性液体を用いて湿らす工程;
ここで、
酵素組成物を少なくとも1つのコムギセモリナブラン支持体と混合し、その際の酵素組成物:支持体の混合比が1:20〜1:500の範囲にある、又は2つの異なる酵素組成物を少なくとも1つのコムギセモリナブラン支持体と混合し、その際の酵素組成物:支持体の混合比が1:20〜1:500の範囲にあり、
酵素製剤の最終重量に基いて0.1〜1重量%の割合にて、植物油を混合しながら加え、
用いられる酵素組成物と用いられる支持体の平均粒径が互いに独立して、それぞれ150〜350μmの範囲にあり
酵素組成物に対する支持体の平均粒径の比率が1〜2の範囲である、上記方法。 - a)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのキシラナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を提供するか、
b)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのグルカナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を提供するか、
c)硫酸マグネシウムとの混合物中の少なくとも1つのキシラナーゼおよび少なくとも1つのグルカナーゼを含んでなる粒子状酵素組成物を提供するか、または
d)互いに異なる少なくとも二つの粒子状酵素組成物を提供する、ここで1の組成物は少なくとも1つのキシラナーゼを含み、他の組成物は少なくとも1つのグルカナーゼを含み、各組成物における酵素は硫酸マグネシウムとの混合物中に存在する、
請求項29記載の方法。 - キシラナーゼの割合が製剤1gにつき3000〜30000 合計キシラナーゼ単位(TXU)であり、および/またはグルカナーゼの割合が製剤1gにつき2000〜20000 合計グルカナーゼ単位(TGU)である、請求項29または30記載の方法。
- 粒子状酵素組成物の酵素含有量が、酵素組成物の総重量に基いて、20〜99重量%である、請求項29記載の方法。
- 粒子状酵素組成物が、少なくとも1つの酵素、および少なくとも1つの一価または二価のカチオンの無機塩を含む、請求項29記載の方法。
- 粒子状酵素組成物が、少なくとも1つの酵素、ならびにMg、Ca、Zn、NaおよびKの硫酸塩、炭酸塩、ケイ酸塩またはリン酸塩から選択される無機塩を含む、請求項29記載の方法。
- 上記粒子状支持体b)が有機支持体である、請求項29記載の方法。
- 上記粒子状支持体b)が、セルロース、微結晶性セルロース、セモリナ、ブラン、および小麦粉から選択される有機支持体である、請求項29記載の方法。
- 食品、補助食品または動物飼料を製造するための、請求項1〜18のいずれか1項記載の乾燥酵素製剤または請求項19〜36のいずれか1項記載の方法により得られる乾燥酵素製剤の使用。
- 請求項1〜18のいずれか1項記載の乾燥酵素製剤を含んでなる動物飼料、食品または補助食品。
- 請求項1〜18のいずれか1項記載の乾燥酵素製剤を含んでなる動物飼料。
- 酵素製剤を0.001〜1重量%の割合で含んでなる、請求項39記載の動物飼料。
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