JP6082692B2 - プロスタグランジンビスホスホネート結合体化合物およびその作製方法ならびにその使用 - Google Patents

Description

（発明の分野）
本発明は、結合体化合物、ならびにそれを作製する方法および使用する方法に関する。

（発明の背景）
プロスタグランジンは、ほとんどの体組織の中に見られ、平滑筋の収縮、生殖、自己免疫、炎症、眼圧の低下などを含む動物の様々な生理機能に関与しているエイコサノイドのサブクラスである。プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）は、骨形成の刺激、骨量の増加、関節炎、疼痛、炎症、癌、多発性硬化症などの様々な生理学的および／または病理学的状態と関係している。

ＰＧＥ_２は４種類の受容体（ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３、およびＥＰ４）に結合する。ＥＰ４受容体は細胞内のサイクリックアデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）の産生に関係しており、多種多様な組織型に分布しており、平滑筋の弛緩、眼圧、疼痛（特に、炎症性、神経性、および内蔵の疼痛）、炎症、神経保護作用、リンパ球分化、骨代謝プロセス、アレルギー活性、睡眠の促進、腎臓の調節、胃または腸粘液の分泌、および十二指腸の重炭酸塩の分泌のような、ＰＧＥ_２が伝達する生物学的事象における重要な役割が示唆されている。

様々なＥＰ４アゴニストが記載されており、例えば、特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７、特許文献８、特許文献９、または特許文献１０に示されている化合物が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。しかし、多くのＥＰ４アゴニストに全身性副作用が伴う。

ビスホスホネートは骨を強化するために使用されている薬物であり、骨吸収の阻害および骨ターゲッティングに関与している。

プロスタグランジン−ビスホスホネート結合体化合物は、例えば、特許文献１１または特許文献１２に記載されている。

国際公開第０２／２４６４７号 国際公開第０２／４２２６８号 欧州特許第１１３２０８６号明細書 欧州特許第８５５３８９号明細書 欧州特許第１１１４８１６号明細書 国際公開第０１／４６１４０号 国際公開第０１／７２２６８号 国際公開第０５／１１６０１０号 国際公開第０３／０４７４１７号 米国特許第７２３８７１０号明細書 米国特許第５４０９９１１号明細書 米国特許第６１２１２５３号明細書

（発明の要旨）
本発明は、一部において結合体化合物を提供する。本発明はまた、上記化合物を作製するための合成方法と上記化合物の使用も提供する。

１つの態様において、本発明は式Ｉの化合物またはその薬学的に許容され得る塩

［式中、Ｘは、−Ｃ−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり得、Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して−Ｈまたはハロであり得、Ａｒは、アリールであり得、Ｗは、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｖ、または−Ｃ（Ｏ）ＯＶであり得、Ｙは、必要に応じて置換されるテトラゾール、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１または−Ｃ（Ｏ）ＮＨＳＯ_２Ｒ’であり得、ｎは、１、２、または３であり得、Ｖは、必要に応じて置換される低級アルキル、必要に応じて置換されるアリール、または必要に応じて置換されるヘテロアルキルであり得、Ｒ_１は、Ｈまたは必要に応じて置換される低級アルキルであり得、Ｒ’は、必要に応じて置換される低級アルキルまたは必要に応じて置換されるアリールであり得、そして

は、二重結合または単結合であり、そして式中、ＹまたはＷは、ビスホスホネート部分に結合している］
を提供する。

別の実施形態において、ビスホスホネート部分はリンカーを介して結合させられ得る。

別の実施形態において、Ｒ_１は、−（ＣＲ_５Ｒ_６）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ａｒであり得、式中、Ａｒは必要に応じて置換されるアリールであり得、Ｒ_５は、Ｈまたは低級アルキルであり得、そしてＲ_６は、Ｈまたは低級アルキルであり得る。

別の実施形態において、Ｒ_１は、−（ＣＲ_５Ｒ_６）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｃ（ＰＯ_３Ｈ_２）_２ＯＨであり得、式中、Ｒ_５は、Ｈまたは低級アルキルであり得、Ｒ_６は、Ｈまたは低級アルキルであり得、そしてｍは、１、２、３、４、５、または６であり得る。

別の実施形態において、ＷがＨである場合、Ｙは必要に応じて置換されるテトラゾールであり、ＸはＣＨ_２である。

別の実施形態において、Ｙは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１であり得、Ｗは

であり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、そしてＲ_１は低級アルキルであり得る。

別の実施形態において、Ｙは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１、テトラゾール、またはＮ−トリチル−テトラゾールであり得、Ｗは、

であり得、Ｒ_７とＲ_８はそれぞれ独立して、Ｈ、小さいアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ_３であり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、そしてｏは、０、１、２、３、４、５、または６であり得る。

別の態様においては、本発明は、式ＩＶもしくはＶの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩

［式中、Ｘは、−Ｃ−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり得、Ｒ_１とＲ_２は、それぞれ独立して、Ｈ、小さいアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ_３であり得、Ｒ_３は、電子供与基または電子求引基であり得、ｍは、１、２、または３であり得、ｎは、１、２、３、または４であり得、そしてｏは、１、２、３、または４であり得る］
を提供する。

別の実施形態において、上記化合物はインビボで加水分解性であり得る。別の実施形態において、上記化合物は、加水分解前は不活性であり得、そして／または加水分解後は活性であり得る。

別の態様において、本発明は、担体と合わせて本発明の化合物を含む組成物を提供する。

別の態様において、本発明は、薬学的に許容され得る担体と合わせて本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。

別の態様において、本発明は、骨または関連部位に化合物を選択的に送達する方法を提供する。この方法は、有効量の本発明の化合物または組成物をそれが必要な被験体に投与することを含む。

別の実施形態において、関連部位に、処置が必要な骨に隣接する部位が含まれる。別の実施形態において、処置が必要な骨は、若木骨折、開放骨折、外側骨折（ｌａｔｅｒａｌ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、侵襲性腫瘍により生じる病的骨折、圧迫骨折、または骨の再編成のために外科的処置が必要な骨折であり得る。

別の態様において、本発明は、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態を処置あるいは予防する方法を提供し、この方法は、有効量の本発明の化合物または組成物を、それを必要とする被験体に投与することを含む。

別の態様において、本発明は、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態の処置または予防が必要な被験体において、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態を処置あるいは予防するための本発明の化合物または組成物の使用を提供する。

別の実施形態において、上記状態は、骨粗鬆症（例えば、グルココルチコイド誘導性骨粗鬆症）、パジェット病、異常に増大した骨代謝回転、骨移植、歯周病、歯槽の骨量減少、歯牙欠損、骨折、人工関節周囲骨溶解、骨形成不全症、および転移性骨疾患からなる群より選択され得る。

別の実施形態において、被験体はヒトであり得る。

別の態様において、本発明は、Ｃ−１カルボキシル基またはテトラゾイル（ｔｅｔｒａｚｏｙｌ）部分を有しているＥＰ４アゴニストを提供し、遊離第一級または第二級アミノ部分を持つビスホスホネートを提供し、上記ＥＰ４アゴニストと上記ビスホスホネートを結合させることにより、本発明の化合物を作製する方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明はそのような方法により作製された化合物を提供する。

別の態様において、本発明は、有効量の本発明化合物またはその薬学的に許容され得る塩をそれが必要な被験体に投与することによる、骨または関連部位に結合体化合物を選択的に送達する方法を提供する。

別の態様において、本発明は、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態を処置あるいは予防する方法を提供し、この方法は、有効量の本発明結合体化合物またはその薬学的に許容され得る塩を、上記処置あるいは予防が必要な被験体に投与することを含む。

別の態様において、本発明は、被験体における、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態を処置あるいは予防するための、有効量の本発明結合体化合物またはその薬学的に許容され得る塩の使用を提供する。
本発明の好ましい実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩であって、

式中、
Ｘは、−Ｃ−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり、
Ｒ _２ とＲ _３ は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり、
Ａｒは、アリールであり、
Ｗは、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｖ、または−Ｃ（Ｏ）ＯＶであり、
Ｙは、必要に応じて置換されているテトラゾール、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ _１ 、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨＳＯ _２ Ｒ’であり、
ｎは、１、２、または３であり、
Ｖは、必要に応じて置換されている低級アルキル、必要に応じて置換されているアリール、または必要に応じて置換されているヘテロアルキルであり、
Ｒ _１ は、Ｈまたは必要に応じて置換されている低級アルキルであり、
Ｒ’は、必要に応じて置換されている低級アルキルまたは必要に応じて置換されているアリールであり、そして

は、二重結合または単結合であり、
そして式中、ＹまたはＷは、ビスホスホネート部分に結合している、
式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩。
（項目２）
前記ビスホスホネート部分がリンカーを介して結合している、項目１に記載の化合物。
（項目３）
Ｒ _１ が、−（ＣＲ _５ Ｒ _６ ）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ａｒであり、Ａｒが必要に応じて置換されているアリールであり、Ｒ _５ が低級アルキルであり、そしてＲ _６ がＨまたは低級アルキルである、
項目１に記載の化合物。
（項目４）
Ｒ _１ が、−（ＣＲ _５ Ｒ _６ ）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ _２ ） _ｍ −Ｃ（ＰＯ _３ Ｈ _２ ） _２ ＯＨであり、Ｒ _５ が低級アルキルであり、Ｒ _６ がＨまたは低級アルキルであり、そしてｍが、１、２、３、４、５、または６である、
項目１に記載の化合物。
（項目５）
ＷがＨである場合は、Ｙは必要に応じて置換されているテトラゾールであり、ＸはＣＨ _２ である、
項目１に記載の化合物。
（項目６）
Ｙが、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ _１ であり、
Ｗが

であり、
ｍが、１、２、３、４、５、または６であり、そして
Ｒ _１ が低級アルキルである、
項目１に記載の化合物
（項目７）
Ｙが、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ _１ 、テトラゾール、またはＮ−トリチル−テトラゾールであり、
Ｗが

であり、
Ｒ _７ とＲ _８ が、それぞれ独立して、Ｈ、小さいアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ _３ であり、
ｍが、１、２、３、４、５、または６であり、そして
ｏが、０、１、２、３、４、５、または６である、
項目１に記載の化合物。
（項目８）
式ＩＶもしくはＶに記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩であって、

式中、
Ｘが、−Ｃ−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり、
Ｒ _１ とＲ _２ がそれぞれ独立して、Ｈ、小さいアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ _３ であり、
Ｒ _３ が、電子供与基または電子求引基であり、
ｍが、１、２、または３であり、
ｎが、１、２、３、または４であり、そして
ｏが、１、２、３、または４であり、
アルキルまたは必要に応じて置換されているアリール、

が、二重結合または単結合である、
式ＩＶもしくはＶに記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩。
（項目９）
前記化合物がインビボで加水分解性である、項目１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
（項目１０）
前記化合物が加水分解前は不活性である、項目９に記載の化合物。
（項目１１）
前記化合物が加水分解後は活性である、項目９または１０に記載の化合物。
（項目１２）
担体と合わせて項目１〜１１のいずれか１項に記載の化合物を含む、組成物。
（項目１３）
薬学的に許容され得る担体と合わせて項目１〜１１のいずれか１項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
（項目１４）
有効量の項目１〜１１のいずれか１項に記載の化合物または項目１３に記載の医薬組成物をそれが必要な被験体に投与することを含む、骨または関連部位に化合物を選択的に送達する方法。
（項目１５）
前記関連部位に、処置が必要な骨に隣接する部位が含まれる、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記処置が必要な骨が、若木骨折、開放骨折、外側骨折、浸潤性腫瘍により生じる病的骨折、圧迫骨折、および骨の再編成のために外科的処置が必要な骨折からなる群より選択される、項目１４に記載の方法。
（項目１７）
異常なもしくは過剰な骨量減少、または異常なもしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態を処置あるいは予防する方法であって、有効量の項目１〜１１のいずれか１項に記載の化合物または項目１３に記載の医薬組成物を、それが必要な被験体に投与することを含む、方法。
（項目１８）
処置または予防の必要がある被験体において、異常なもしくは過剰な骨量減少、または異常なもしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態を処置あるいは予防するための、項目１〜１１のいずれか１項に記載の化合物または項目１３に記載の医薬組成物の使用。
（項目１８）
前記状態が、骨粗鬆症、パジェット病、異常に増大した骨代謝回転、骨移植、歯周病、歯槽の骨量減少、歯牙欠損、骨折、人工関節周囲骨溶解、骨形成不全症、および転移性骨疾患からなる群より選択される、項目１７に記載の方法または項目１８に記載の使用。
（項目２０）
骨粗鬆症がグルココルチコイド誘導性骨粗鬆症である、項目１９に記載の方法または使用。
（項目２１）
被験体がヒトである、項目１４〜２０のいずれか１項に記載の方法または使用。
（項目２２）
以下の、
ａ）Ｃ−１カルボキシル基またはテトラゾイル部分を有しているＥＰ４アゴニストを提供する工程、
ｂ）遊離の第一級アミノ部分または第二級アミノ部分を持つビスホスホネートを提供する工程、および
ｃ）前記ＥＰ４アゴニストと前記ビスホスホネートを結合させる工程
を含む、項目１〜８のいずれか１項に記載の化合物を作製する方法。
（項目２３）
項目２２に記載の方法により調製された化合物。

本発明のこの概要は本発明の全ての特徴を必ずしも記載しているものではない。

本発明のこれらおよび他の特徴は、添付の図面を参照した上で以下の記述によりさらに明らかになるであろう。

図１は、３７℃のラット血漿中での結合体６の加水分解と１の遊離を示しているグラフである。 図２は、結合体８の加水分解を示しているグラフである。 図３は、結合体５６の加水分解を示しているグラフである。

（詳細な説明）
本発明は一部において、アミノ−ビスホスホネート結合体化化合物とその使用、その作製方法、および上記化合物の作製方法において使用される中間体を提供する。別の実施形態において、本発明は、誘導体化ＥＰ４アゴニスト化合物とその使用、その作製方法、および誘導体化ＥＰ４アゴニスト化合物の作製方法において使用される中間体を提供する。別の実施形態において、本発明は、新規のＥＰ４アゴニスト−ビスホスホネート結合体化合物とその使用、その作製方法、およびＥＰ４アゴニスト−ビスホスホネート結合体化合物の作製方法において使用される中間体を提供する。別の実施形態において、結合体化合物は、ビスホスホネートとビスホスホネートに結合した作用物質の、骨などの作用部位への同時送達を提供する。例えば、ＥＰ４アゴニスト−ビスホスホネート結合体化合物は、骨などの作用部位への、ＥＰ４アゴニストとビスホスホネートの同時送達を提供する。

いくつかの実施形態において、結合体化合物はインビボで加水分解性であり、ビスホスホネートとビスホスホネートに結合した作用物質を放出する。例えば、ＥＰ４アゴニスト−ビスホスホネート結合体化合物はインビボで加水分解性であり、ＥＰ４アゴニストとビスホスホネート成分を放出する。

別の実施形態において、結合体化合物は、加水分解され、ビスホスホネートとビスホスホネートに結合した作用物質が放出されるまで不活性である。例えば、ＥＰ４アゴニスト−ビスホスホネート結合体化合物は、加水分解され、ＥＰ４アゴニストとビスホスホネート成分が放出されるまで不活性である。別の実施形態において、ビスホスホネートに結合した作用物質（例えば、ＥＰ４アゴニスト）とビスホスホネートはそれぞれ独立して、それぞれについて標準的手順により測定すると、放出時には活性である。本明細書中で使用される「放出」とは、加水分解または酵素作用などによる、結合体化合物からのビスホスホネートおよびビスホスホネートに結合した作用物質の遊離を意味する。別の実施形態において、本明細書中で使用される「放出」とは、例えば、加水分解または酵素作用による、本明細書中に記載するＥＰ４アゴニスト−ビスホスホネート結合体化合物からのＥＰ４アゴニスト部分およびビスホスホネート部分の遊離を意味する。別の実施形態において、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質部分および／またはビスホスホネート部分の少なくとも約５％〜約１００％、例えば、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％、あるいはそれらの間の任意の値が、適切な期間に放出される。放出は、例えば、血液または血漿中で、結合体がインビボで骨に結合した後で、あるいは、本明細書中に記載されているかまたは当該分野で公知の任意の適切な系もしくはアッセイにおいて測定され得る。別の実施形態において、放出には、ある一定期間、例えば、約１日〜約３０日、またはこの範囲の間の任意の値もしくは値のセット、例えば、約７日〜約１４日（例えば、約７、８、９、１０、１１、１２、１３、または１４日）の期間がかかり得る。いくつかの実施形態において、放出は、血漿中と骨からでは異なり得る。したがって、いくつかの実施形態において、血漿中で安定しているかまたはゆっくりとした放出を示す結合体化合物は、個々の成分を放出する前に骨への結合が可能であるという点で有用である。別の実施形態においては、骨にターゲッティングされ、そこから放出される結合体化合物の能力が、決定的な特徴であり得る。

いくつかの実施形態において、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質−ビスホスホネート結合体化合物は、骨に直接送達され得る。

いくつかの実施形態において、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質−ビスホスホネート結合体化合物は、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質に付随する全身性副作用を軽減する。

別の実施形態において、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質−ビスホスホネート結合体化合物は、個々の成分のそれぞれと比較して低用量で投与され得る。

別の実施形態において、ＥＰ４アゴニスト−ビスホスホネート結合体化合物では、骨ターゲッティングプロドラッグにおいて、骨成長刺激性ＥＰ４受容体選択的アゴニストと骨吸収阻害性アミノ−ビスホスホネートを組み合わせる。骨ターゲッティングプロドラッグは、全身投与されると骨に結合し、インサイチュで２つの成分の両方を酵素的に、時間をかけてゆっくりと遊離させ、これによりＥＰ４アゴニストに伴う全身性副作用を回避または軽減する。いくつかの実施形態において、本発明の結合体化合物は、１週間に１回投与すればよい速度で加水分解される。

ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質およびビスホスホネートの作用は付加的であっても、相乗的であってもよい。

別の実施形態において、本発明は、デュアル・プロドラッグを提供するために、テトラゾールを第一級または第二級アミンと直接カップリングさせる方法を提供する。デュアル・プロドラッグは、加水分解されると２つの成分を完全な状態で放出する。例えば、本発明は、デュアル・プロドラッグを提供するために、例えば、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質のテトラゾール部分を第一級または第二級アミンと直接カップリングさせる方法を提供する。デュアル・プロドラッグは、加水分解されると２つの成分を完全な状態で放出する。

別の実施形態において、本発明は、デュアル・プロドラッグを提供するために、例えば、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質のカルボン酸部分を第一級または第二級アミンと直接カップリングさせる方法を提供する。デュアル・プロドラッグは、加水分解されると２つの成分を完全な状態で放出する。

別の実施形態において、本発明は、デュアル・プロドラッグを提供するために、例えば、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質のアルコール部分を第一級または第二級アミンと直接カップリングさせる方法を提供する。デュアル・プロドラッグは、加水分解されると２つの成分を完全な状態で放出する。

結合体とその製法
本明細書中で使用される「ビスホスホネート」とは、アミノ−ビスホスホネート化合物を意味する。ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質とのカップリングが可能である第二級または第一級アミン官能基を有しており、インビボで骨にターゲッティングされている任意の既知のビスホスホネートが、その特定のビスホスホネートが骨吸収阻害活性を有しているか否か、または本明細書中に記載される障害の処置に有用であるか否かにはかかわらず、使用され得る。

いくつかの実施形態において、ビスホスホネートは以下の一般的構造

を有し得、式中、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得る。

本明細書中で使用される「ビスホスホネート部分」は、ＥＰ４アゴニストまたは他の作用物質などの別の化合物にアミノ基を介して結合したビスホスホネートの部分である。「結合した（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ）」とは、一般的には本明細書中に記載されるかまたは当該分野で公知であるようなリンカーを介した、ビスホスホネートとビスホスホネートに結合した作用物質との連結を意味する。一般的に、上記連結は切り離し可能であり、この連結は、結合した化合物が骨へ結合した後にインサイチュで起こる。

ビスホスホネートとしては、アレンドロン酸、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸；アレンドロネート（アレンドロン酸ナトリウムまたはアレンドロネート一ナトリウム三水和物としても知られている）、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸一ナトリウム三水和物；（アレンドロン酸およびアレンドロネートは、１９９０年５月１日に発行されたＫｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉらの米国特許第４９２２００７号；１９９１年５月２８日に発行されたＫｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉらの同第５０１９６５１号；１９９６年４月２３日に発行されたＤａｕｅｒらの同第５５１０５１７号；１９９７年７月１５日に発行されたＤａｕｅｒらの同第５６４８４９１号に記載されている）；６−アミノ−１−ヒドロキシヘキシリデン−１，１−ビスホスホン酸（ネリドロネート）；３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（パミドロネート）；またはそれらの薬学的に許容され得る塩、あるいはそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。

ＥＰ４アゴニストとしては、例えば、国際公開第０２／２４６４７号、国際公開第０２／４２２６８号、欧州特許第１１３２０８６号、欧州特許第８５５３８９号、欧州特許第１１１４８１６号、国際公開第０１／４６１４０号、国際公開第０１／７２２６８号などに示されているような、カルボキシルもしくはテトラゾール基、またはアルコール基を含有している化合物が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。いくつかの実施形態において、１５位にヒドロキシル基、または１位にカルボン酸もしくはテトラゾール基を有しているＥＰ４アゴニストは、本明細書中で記載されるアミノビスホスホネートと反応し得る。

ＥＰ４アゴニストの例として化合物１および２が挙げられ、臨床的に活性なビスホスホネート（ＢＰ）の例として、アレンドロネート／アレンドロン酸（３）、パミドロネート（４）、またはネリドロネート（５）

が挙げられる。

いくつかの実施形態において、本発明化合物は式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩

［式中、
Ｘは、−Ｃ−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり得、
Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり得、
Ａｒは、アリールであり、
Ｗは、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｖ、または−Ｃ（Ｏ）ＯＶであり得、
Ｙは、必要に応じて置換されるテトラゾール、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨＳＯ_２Ｒ’であり得、
ｎは、１、２、または３であり得、
Ｖは、必要に応じて置換される低級アルキル、必要に応じて置換されるアリール、または必要に応じて置換されるヘテロアルキルであり得、
Ｒ_１は、Ｈまたは必要に応じて置換される低級アルキルであり得、
Ｒ’は、必要に応じて置換される低級アルキルまたは必要に応じて置換されるアリールであり得、そして

は、二重結合または単結合であり、
そして式中、ＹまたはＷは、ビスホスホネート部分に結合している］
を含む。

いくつかの実施形態において、式Ｉでは、Ｒ_１は、−（ＣＲ_５Ｒ_６）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ａｒであり得、式中、Ａｒは必要に応じて置換されるアリールであり得、Ｒ_５は、Ｈまたは低級アルキルであり得、Ｒ_６は、Ｈまたは低級アルキルであり得る。

別の実施形態において、式Ｉでは、Ｒ_１は、−（ＣＲ_５Ｒ_６）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｃ（ＰＯ_３Ｈ_２）_２ＯＨであり得、式中、Ｒ_５は、Ｈまたは低級アルキルであり得、Ｒ_６は、Ｈまたは低級アルキルであり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得る。

いくつかの実施形態において、式Ｉでは、ＷがＨである場合、Ｙは必要に応じて置換されるテトラゾールであり、ＸはＣＨ_２である。

いくつかの実施形態において、式Ｉでは、Ｃ１〜Ｃ７鎖基には、例えば、Ｃ５−Ｃ６位に二重結合が含まれ得、これはシスであってもトランスであってもよい。別の実施形態において、式Ｉでは、Ｃ１〜Ｃ７鎖基に、ＯもしくはＳのような、または本明細書中に記載されるようなヘテロ原子が含まれ得る。

いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物は化合物８

を特に排除する。

いくつかの実施形態において、本発明化合物は、式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩

［式中、
Ｘは、−Ｃ−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり得、
Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり得、
Ａｒは、アリールであり、
ｎは１、２、または３であり得、
ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、
Ｒ_１は、低級アルキルであり得、そして

は、二重結合または単結合である］
を含む。

いくつかの実施形態において、式ＩＩの化合物では、Ｒ_１がＥｔであり、Ｒ_２とＲ_３がＦであり、Ａｒがフェニルである場合、Ｘは−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり得、ｎは２または３であり得、そしてｍは１、２、４、５、または６であり得る。

いくつかの実施形態において、式ＩＩの化合物は、化合物８

を特に排除する。

いくつかの実施形態において、本発明化合物は、式ＩＩＩの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩

［式中、
Ｘは、−Ｃ−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり得、
Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり得、
Ａｒは、アリールであり、
ｎは１、２、または３であり得、
Ｒ_７とＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈ、小さいアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ_３であり得、
ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、
ｏは、０、１、２、３、４、５、または６であり得、
Ｚは、ＣＯＯＲ_１テトラゾール、またはＮ−トリチル−テトラゾールであり得、
Ｒ_１は、Ｈまたは必要に応じて置換される低級アルキルであり得、そして

は、二重結合または単結合である］
を含む。

いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、式ＩＶもしくは式Ｖの化合物、またはそれらの薬学的に許容され得る塩

［式中、
Ｒ_１とＲ_２は、Ｈ、小さいアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ_３であり得、
Ｒ_３は、芳香族系上の１つ以上の多電子供与基および電子求引基であり得る。電子求引基（ＥＷＧ）としては、４−ＮＯ_２、２，４−ジＮＯ_２、Ｆなどが挙げられるがこれらに限定されるわけではない。電子供与基（ＥＤＧ）としては、ＯＣＨ_３、ＯＲ、またはＮＲ_２が挙げられるがこれらに限定されるわけではなく、式中、「Ｒ」は低級アルキルなどであり、
ｍは、１、２、または３であり得、
ｎは、１、２、３、または４であり得、そして
ｏは、１、２、３、または４であり得る］
を含む。

本明細書中で使用される「アルキル」は、炭素原子と水素原子だけからなり、不飽和を含まず、例えば、１〜１０個の炭素原子を含み、単結合により分子の残りに結合している、直鎖または分枝状炭化水素鎖の基を意味する。明細書中で特に明記されない限り、アルキル基は、必要に応じて本明細書中に記載される１つ以上の置換基により置換され得る。本明細書中で特に明記されない限り、置換はアルキル基のいずれの炭素でも起こり得ると理解される。直鎖または分枝鎖アルキル基の例としては、メチル、トリフルオロメチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、１−ブチル、２−ブチル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピル、１−ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、２−メチル−１−ブチル、３−メチル−１−ブチル、２−メチル−３−ブチル、２，２−ジメチル−１−プロピル、１−ヘキシル、２−ヘキシル、３−ヘキシル、２−メチル−１−ペンチル、３−メチル−１−ペンチル、４−メチル−１−ペンチル、２−メチル−２−ペンチル、３−メチル−２−ペンチル、４−メチル−２−ペンチル、２，２−ジメチル−１−ブチル、３，３−ジメチル−１−ブチル、２−エチル−１−ブチル、１−ヘプチル、または１−オクチルが挙げられるが、これらに限定されない。

「環構造」とは、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、または必要に応じて置換され得る任意の環構造を意味する。

本明細書中で使用される「アリール」は、例えば、フェニル基またはナフチル基のような単環式または二環式の環構造を意味し、ここでは、全ての環が芳香族であり、炭素原子から形成されている。本明細書中で特に明記されない限り、用語「アリール」は、本明細書中に記載される１つ以上の置換基により必要に応じて置換されるアリール基を含むものとする。したがって、いくつかの実施形態において、用語「アリール」は、Ｎ、Ｓ、またはＯのような１個または２個のヘテロ原子を含む、例えば、５個または６個またはそれ以上の原子の環を持つヘテロアリールを意味し得る。

「ハロ」は、ブロモ、クロロ、フルオロ、ヨードなどのようなハロゲン基を意味する。いくつかの実施形態においては、適切なハロゲンとしてフッ素が挙げられる。

本明細書中に記載される任意の基は置換されていても、非置換であってもよい。置換される場合、１つの基が、以下の群の１つ以上のような任意の所望される置換基（単数または複数）で置換され得る：Ｈ、アルキル（Ｃ_１〜１０）、アルケニル（Ｃ_２〜１０）、アルキニル（Ｃ_２〜１０）、アリール（５〜１２員）、アリールアルキル、アリールアルケニル、またはアリールアルキニル（これらはそれぞれ、Ｏ、Ｓ、Ｐ、Ｎ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＢより選択される１つ以上のヘテロ原子を必要に応じて含み得、また、それぞれ、例えば＝Ｏによってさらに置換され得る）；あるいは、アシル、アリールアシル、アルキル−、アルケニル−、アルキニル−、もしくはアリールスルホニルの必要に応じて置換されていてもよい形態、およびアルキル、アルケニル、アルキニル、もしくはアリール部分にヘテロ原子を含むその形態；ハロゲン（例えば、クロロ、ヨード、ブロモ、またはフルオロ）；ヒドロキシル；Ｃ_１〜１０アルコキシル；アミノ（第一級、第二級、または第三級）；ニトロ；チオール；チオエーテル；イミン；シアノ；アミド；カルバモイル；ホスホネート；ビスホスホネート；ホスフィン；カルボキシル；チオカルボニル；スルホニル；スルホンアミド；ケトン；アルデヒド；エステル；オキソ；ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）；シクロアルキル（これは、単環式または縮合型多環式もしくは非縮合型多環式（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシル）、または非芳香族複素環式（これは、単環式または縮合型多環式もしくは非縮合型多環式であり得る）（例えば、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、またはチアジニル）；ならびに、芳香族炭素環式もしくは複素環式、単環式または縮合型多環式もしくは非縮合型多環式（例えば、フェニル、ナフチル、ピロリル、インドリル、フラニル、チオフェニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニル、アクリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチオフェニル、またはベンゾフラニル）であり得る）。具体的な置換基としては、ベンジルオキシ；Ｏ−アルキル；Ｏ−アリール；アリール；アリール−低級アルキルなどが挙げられる。置換された基は、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個の置換基を有し得る。これらの置換基は、必要に応じて本明細書中に列挙される置換基でさらに置換され得る。置換基はまた、必要に応じて架橋構造（例えば、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−）により置換され得る。いくつかの実施形態において、置換基はそれ以上置換されない。

「任意選択の」または「必要に応じて」は、その後に記載される状況の事象が起こっても起こらなくてもよいこと、そしてその記述に、上記事象または状況が起こる場合と起こらない場合が含まれることを意味する。例えば、「必要に応じて置換されるアルキル」は、アルキル基が置換されても置換されていなくてもよいこと、そしてその記述には置換されたアルキルと置換されていないアルキルの両方が含まれることを意味する。必要に応じて置換されるアルキル基の例として、メチル、エチル、プロピルなどが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。同様に、「必要に応じて置換されるテトラゾール」は、テトラゾール基が置換されても置換されていなくてもよいこと、そしてその記述には置換されたテトラゾールと置換されていないテトラゾールの両方が含まれることを意味する。

化合物は、酸、塩基、または塩の形態であり得る。

本明細書全体を通じて、用語「化合物」または「（複数の）化合物」は、本明細書中で検討される化合物および結合体を意味し、これには、上記化合物の前駆体、中間体、およびアシル保護誘導体を含む上記化合物の誘導体、ならびに上記化合物、前駆体、および誘導体の薬学的に許容され得る塩が含まれるものとする。本発明にはまた、上記化合物のプロドラッグ、上記化合物と薬学的に許容され得る担体を含む医薬組成物、および上記化合物のプロドラッグと薬学的に許容され得る担体を含む医薬組成物が含まれる。

いくつかの実施形態において、本発明化合物は全て、少なくとも１つのキラル中心を含む。いくつかの実施形態において、本発明化合物は１つ以上のキラル中心および／または二重結合を有し得る。いくつかの実施形態において、本発明化合物を含有している処方物、調製物、および組成物に、立体異性体の混合物、個々の立体異性体、および鏡像異性体混合物、複数の立体異性体、二重結合異性体（すなわち、幾何Ｅ／Ｚ異性体）、またはジアステレオ異性体（例えば、鏡像異性体（すなわち、（＋）または（−））あるいはシス／トランス異性体）の混合物が含まれ得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に示される化学構造、ひいては本発明化合物は、立体的に純粋な形態（例えば、幾何学的に純粋な、鏡像異性的に純粋な、またはジアステレオ異性的に純粋な形態）と、鏡像異性体混合物および立体異性体混合物（例えば、ラセミ体）の両方である、対応する立体異性体を全て包含する。一般的に、化合物は、任意の所望される程度のキラル純度で供給され得る。

本発明化合物の鏡像異性体混合物および立体異性体混合物は、典型的には、それらの構成成分である鏡像異性体または立体異性体に、周知の方法（例えば、キラル相ガスクロマトグラフィー、キラル相高速液体クロマトグラフィー、化合物のキラル塩錯体としての結晶化、またはキラル溶媒中での化合物の結晶化）により分割することができる。鏡像異性体と立体異性体はまた、立体的または鏡像異性的に純粋な中間体、試薬、および触媒から、周知の不斉合成方法によって得ることもできる。

本明細書中で使用される単数形の「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、明確に指示がない限り、複数形についての言及が含まれる。例えば、「化合物」は、１つ以上のそのような化合物と、当業者に公知であるその等価物を意味する。

ＥＰ４アゴニスト−ビスホスホネート結合体は、本明細書中または別の場所に記載された要領で調製され得る。標準的な技術を使用して行われるか、または日常的に行われている実験により達成される場合は、本明細書中に記載される方法およびスキームの改変が本明細書中に含まれるものとする。

いくつかの実施形態において、適切な結合体は、例えば、本明細書中に記載される技術またはその改変を使用し、遊離の第一級または第二級アミノ部分を持つビスホスホネートを使用して、化合物（例えば、抗腫瘍薬）のテトラゾール、カルボン酸、またはヒドロキシル部分を連結させることにより調製され得る。

いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物は、
ａ）Ｃ−１カルボキシル基またはテトラゾール部分を有しているＥＰ４アゴニストを提供すること、
ｂ）遊離の第一級または第二級アミノ部分を持つビスホスホネートを提供すること、
ｃ）上記ＥＰ４アゴニストとビスホスホネートを結合させること
により調製され得る。

いくつかの実施形態において、適切な結合体は、例えば、
１）ＥＰ４アゴニストのテトラゾール部分をビスホスホネートと連結させること（例えば、１のテトラゾール部分を、推定的加水分解性リンカー（例えば、６および７）を介してアレンドロン酸に連結させる場合）、
２）ＥＰ４アゴニストの１５−ヒドロキシル基をビスホスホネートに連結させること（例えば、化合物を１５−ヒドロキシル基（例えば、８）を介してアレンドロン酸に連結させる場合の１または２の結合体の調製）；あるいは、
３）ＥＰ４アゴニストのカルボン酸基をビスホスホネートに連結させること（例えば、２のカルボン酸基を、メチルオキシカルボニル連結基（例えば、９）を介してアレンドロン酸に連結させる）
により調製され得る。

化合物６〜１１において、Ｒは、Ｈまたは低級アルキルである。

いくつかの実施形態において、カルバメート結合体（例えば、化合物Ｆ）は、スキームＩに示されるように調製され得る。

このスキームにおいては、一般的構造ＥＰ４ａのＥＰ４アゴニストを、ジイソプロピルエチルアミンのような非求核性塩基の存在下でＡのようなハロ−カルボニルオキシアリール化合物と反応させると、付加物Ｅが生じる。次に、Ｅを、Ｂ（一般的には、無水ＤＭＦのような溶媒中でそのモノ−テトラブチルアンモニウム塩の形態で）のようなアミノアルキルビスホスホネートと、過剰量の非求核性塩基の存在下で反応させると、結合体Ｆが得られる。

スキームＩにおいて、ＥＷＧ＝電子求引基は、例えば、４−ＮＯ_２、２，４−ジＮＯ_２、Ｆなどであり、Ｘは、Ｃ、ＮＨ、Ｓ、またはＯであり得、ｎは、１、２、または３であり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、Ａｒは、アリールであり、Ｒ_１は、低級アルキルまたはＨであり得、Ｒ_２は、ＨまたはＦであり得、Ｒ_３は、ＨまたはＦであり得る。「ｍ」について、鎖長は合成にとって重要ではなく、そして任意の適切な鎖長が使用され得るものとする。

いくつかの実施形態において、フェノール−酸結合体（例えば、化合物１２）が、スキームＩＩに示されるように調製され得る。

このスキームにおいて、一般的構造ＥＰ４ｂのＥＰ４アゴニストを、Ｃのような保護されたヒドロキシアリールアルキルカルボニルクロライド（または対応するカルボン酸の他の反応性形態）と、非求核性塩基の存在下で反応させると、中間体１３が得られる。保護基Ｒ’を除去して１４を得、１４を、過剰量の非求核性塩基の存在下でＡと反応させると、結合体１５が得られる。次に、１５を、Ｂのようなアミノアルキルビスホスホネートと、一般的には無水ＤＭＦのような溶媒中でそのモノ−テトラブチルアンモニウム塩の形態で、過剰量の非求核性塩基の存在下で反応させると、保護された結合体１２ａが得られる。Ｚ＝Ｎ−トリチル−テトラゾールである場合、これはＴＦＡのような強酸での処理により脱保護されて、１２（ここでは、Ｚ＝テトラゾール）が得られる。

スキームＩＩにおいては、ＥＷＧ＝電子求引基、例えば、４−ＮＯ_２、２，４−ジＮＯ_２、Ｆなどであり、Ｘは、Ｃ、ＮＨ、Ｓ、またはＯであり得、ｎは、１、２、または３であり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、ｏは、０、１、２、３、４、５、または６であり得、Ａｒは、アリールであり、Ｚは、ＣＯＯＲ_１、テトラゾール、またはＮ−トリチル−テトラゾールであり得、Ｒ_１は、Ｈまたは低級アルキルであり得、Ｒ_２は、ＨまたはＦであり得、Ｒ_３は、ＨまたはＦであり得、Ｒ’は、Ｈまたは保護基であり得る。「ｍ」について、鎖長は合成にとっては重要ではなく、そして任意の適切な鎖長が使用され得るものとする。

いくつかの実施形態において、酸を介する結合体（例えば、化合物２１）は、スキームＩＩＩに示されるように調製され得る。

このスキームにおいて、一般式ＥＰ４ａのＥＰ４アゴニストは、適切な除去可能な保護基ＰＧで遊離ヒドロキシル基が保護されており、基Ｒ_１を除去し、得られた遊離カルボン酸を、次にＤのようなハロアルキルオキシカルボニルオキシアリール化合物と、非求核性塩基を持つ触媒を用いて反応させる。この場合、カルボン酸が最初に水銀塩または銀塩に変換されて、中間体１９が得られる。保護基ＰＧを除去して２０を得、次に、２０を、Ｂのようなアミノアルキルビスホスホネートと、一般的には無水ＤＭＦのような溶媒中でそのモノ−テトラブチルアンモニウム塩の形態で、過剰量の非求核性塩基の存在下で反応させると、結合体２１が得られる。

スキームＩＩＩにおいて、ＥＷＧ＝電子求引基、例えば、４−ＮＯ_２、２，４−ジＮＯ_２、Ｆなどであり、Ｘは、Ｃ、ＮＨ、Ｓ、またはＯであり得、ｎは、１、２、または３であり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、Ａｒは、アリールであり、Ｒ_１は、低級アルキルまたはＨであり得、Ｒ_２は、ＨまたはＦであり得、Ｒ_３は、ＨまたはＦであり得、Ｒ_４は、ＨまたはＰＧであり得、この場合、ＰＧは、当該分野で公知の様々な除去可能な保護基より選択され得、Ｒ_５は低級アルキルであり得、Ｒ_６は、Ｈまたは低級アルキルであり得、Ｙはハロゲンであり得る。「ｍ」について、鎖長は合成にとっては重要ではなく、そして任意の適切な鎖長が使用され得るものとする。

スキームＩ、ＩＩＩ、またはＩＩＩにしたがって調製された結合体の例として、表Ｉに示されるものが挙げられる。

表Ｉにおいて、Ｘは、Ｃ、ＮＨ、Ｓ、またはＯであり得、ｎは１、２、または３であり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、ｏは、０、１、２、３、４、５、または６であり得、Ｒ_１は、低級アルキルまたはＨであり得、Ｒ_２は、ＨまたはＦであり得、Ｒ_３は、ＨまたはＦであり得、Ｒ_４は、Ｈであり得、Ｒ_５は、Ｈまたは低級アルキルであり得、Ｒ_６は、Ｈまたは低級アルキルであり得る。

別の実施形態において、他の結合体は、スキームＩＶに示されるように調製され得る。

スキームＩＶにおいて、一般式ＥＰ４ｃのＥＰ４アゴニストをトリチルクロライドと反応させるとＧが生じ、ＧをＡと反応させるとＨが生じ、次に、Ｂと反応させるとＩが生じる。その後、ＴＦＡでのＩの処理によりＪが遊離する。

このスキームにおいて、Ｘは、Ｃ、ＮＨ、Ｓ、またはＯであり得、ｎは１、２、または３であり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得る。「ｍ」について、鎖長は合成にとっては重要ではなく、そして任意の適切な鎖長が使用され得るものとする。

スキームＩＶにしたがって調製された結合体化合物の具体例は以下のとおりである。

別の実施形態においては、他の結合体が、スキームＶに示されるように調製され得る。

本発明の結合体の例として、表ＩＩに示されるものが挙げられる。

表ＩＩにおいて、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、ｏは、０、１、２、３、４、５、または６であり得る。

別の実施形態においては、他の結合体が、スキームＶＩに示されるように調製され得る。

このスキームにおいて、Ｘは、Ｃ、ＮＨ、Ｓ、またはＯであり得、ｎは１、２、または３であり得、ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、Ｒ_１は、低級アルキルまたはＨであり得、Ｒ_２は、ＨまたはＦであり得、Ｒ_３は、ＨまたはＦであり得る。「ｍ」について、鎖長は合成にとっては重要ではなく、そして任意の適切な鎖長が使用され得るものとする。

本発明の結合体のさらなる例として、表ＩＩＩに示されるものが挙げられる。

表ＩＩＩにおいて、Ｘは、Ｃ、Ｓ、Ｏ、またはＮＨであり得、ｎは１、２、または３であり得、Ｒ_２は独立して、Ｈまたはハロゲンであり得る。

別の実施形態において、結合体の調製において使用される中間体は、スキームＶＩＩに示されるように調製され得る。

本発明化合物として、本明細書中に記載される結合体化合物、ならびにそのような化合物の調製に使用される中間体、およびその誘導体、塩、または立体異性体が挙げられる。いくつかの実施形態においては、特定の化合物（例えば、化合物８）が、本発明の化合物、組成物、方法、または使用の１つ以上から特に排除される。

別の態様において、本発明は、アミノ−ビスホスホネートに対する、テトラゾール、カルボン酸、またはヒドロキシル部分を含有している他の作用物質の結合を提供する。例えば、抗腫瘍化合物のような薬理学的に活性な作用物質が、アミノ−ビスホスホネートに結合し得る。

治療上の適応症
ヒトおよび他の哺乳動物の様々な状態もしくは障害が、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝を伴うか、あるいはそれらと関係がある。そのような状態または障害として、骨粗鬆症（低い骨量と骨組織の微小構造の解体を含み得、結果として、骨のもろさの増大と骨折しやすさが起こり得る）、グルココルチコイド誘導性骨粗鬆症、パジェット病、異常に増大した骨代謝回転、骨移植、歯周病、歯槽の骨量減少、歯牙欠損、骨折、人工関節周囲骨溶解、骨形成不全症、転移性骨疾患などが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。

したがって、本明細書中に記載される結合体化合物は、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態または障害を処置あるいは予防するために使用され得るか、または、骨に対して治療薬をターゲッティングすることにより利益を享受するであろう状態または障害を処置するために使用され得る。

別の実施形態において、本発明は、獣医学的被験体およびヒト被験体のような動物被験体において、骨刺激のレベルを強化または上昇させる、あるいは骨吸収を阻害する方法を提供する。この上昇または阻害は、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態または障害の予防あるいは処置に有用であり得る。

異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態または障害の予防あるいは処置における化合物の有効性は、標準的な技術を使用して骨刺激を強化するかまたは高めるか、あるいは骨吸収を阻害する化合物の能力を試験することにより確認され得る。

例えば、結合体は、血漿中での安定性についてインビトロで最初に評価され得、その後、骨への選択的取り込み、および２構成成分のゆっくりとした放出について、正常な動物（例えば、ラット）において評価され得る。適切な結合体（単数または複数）が同定された場合、最適化された化合物（単数または複数）が、骨粗鬆症の動物モデルにおいて、または例えば、骨粗鬆症のインビトロモデル（すなわち、新生仔ラット頭蓋冠細胞培養物）において評価され得る。その後、化合物は、本明細書中に記載されるかまたは当該分野で見られる障害および状態の処置のための新規の治療法としてのさらなる開発に適する効力と忍容性を示すために、例えば、インビボで、または他のアッセイにおいて使用され得る。

一般的に、本発明方法は、本発明の結合体化合物をそれが必要な被験体に投与することにより、または細胞もしくは試料を本発明化合物、例えば、治療有効量の化合物を含有している医薬組成物と接触させることにより行われる。

医薬組成物および獣医学的組成物、投薬量、ならびに投与
本発明の結合体化合物を含有しているか、または本発明にしたがって使用される医薬組成物は、本発明の範囲内にあると考えられる。いくつかの実施形態においては、有効量の本明細書中に記載される結合体化合物を含有している医薬組成物が提供される。

いくつかの実施形態において、本発明の結合体化合物は、骨成長の刺激または骨吸収の阻害が必要な骨または部位にターゲッティングされている。そのような部位には、処置が必要な被験体において処置が必要な骨の部分または骨の群に隣接する領域、あるいは骨もしくは骨の群において自然に起こるかまたは意図的に作られた、骨折または隙間の部位を含む骨の内部領域の両方が含まれる。処置が必要な骨には、若木骨折、開放骨折、外側骨折、浸潤性腫瘍により生じる病的骨折、圧迫骨折、および骨の再編成のために外科的処置が必要な骨折が含まれ得る。

結合体化合物、ならびにそれらの薬学的に許容され得る塩、立体異性体、溶媒和物、および誘導体は、これらが、ヒトを含む動物において薬理学的活性を有するとの理由から有用である。いくつかの実施形態において、本発明の結合体化合物は、被験体に投与された場合に、血漿中で安定している。

いくつかの実施形態において、本発明の結合体化合物、または本発明にしたがって使用される結合体化合物は、任意の他の活性作用物質または医薬組成物と合わせて提供され得、ここで、そのような併用療法が異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態または障害を処置あるいは予防するのに、例えば、本明細書中に記載される任意の状態もしくは障害、または骨に治療薬をターゲッティングすることにより利益を享受するであろう任意の状態もしくは障害を処置するのに有用である。

いくつかの実施形態において、本発明の結合体化合物、または本発明にしたがって使用される結合体化合物は、本明細書中に記載される任意の状態もしくは障害、または骨に治療薬をターゲッティングすることにより利益を享受するであろう任意の状態もしくは障害を処置するために、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態または障害の予防あるいは処置に有用な１つ以上の作用物質と合わせて提供され得る。

本発明の結合体化合物または本発明にしたがって使用される結合体化合物と、異常もしくは過剰な骨量減少、異常もしくは低い骨吸収、異常なカルシウム代謝と関係がある状態または障害、癌、または、骨と関係があるかもしくは骨への治療薬のターゲッティングにより利益を享受するであろう任意の障害の予防あるいは処置に有用である他の治療法との組み合わせが、別々に、あるいは一緒に投与され得る。１種類の作用物質または結合体化合物の投与は、他の作用物質（単数または複数）または結合体化合物の投与前、投与と同時、または投与後に行われ得る。

別の実施形態において、本発明の結合体化合物は、それ自体が「プロドラッグ」と考えられ得るが、結合体化合物は、被験体への投与後に化合物を放出するさらなるプロドラッグまたは保護形態として供給され得る。例えば、化合物は、体液中、例えば、血流中で加水分解により脱離する保護基を持ち得、これにより、活性化合物を放出するか、または体液中で酸化または還元されて化合物を放出する。したがって、「プロドラッグ」は、生理学的条件下で（例えば、酵素により）または加溶媒分解により本発明の生物学的に活性な化合物に変換され得る化合物を示すものとする。したがって、用語「プロドラッグ」は、薬学的に許容され得る本発明化合物の代謝前駆体を意味する。プロドラッグは、それが必要な被験体に投与されたとき、不活性であり得るが、インビボで本発明の活性化合物に変換される。プロドラッグは典型的には、例えば、血液中での加水分解により、本発明の親化合物を生じるようにインビボで迅速に転換される。プロドラッグ化合物は、多くの場合、可溶性、組織適合性、または被験体中での遅延放出という利点をもたらす。

用語「プロドラッグ」はまた、上記プロドラッグが被験体に投与されたときにインビボで本発明の活性化合物を放出する任意の共有結合した担体を含むものとする。本発明化合物のプロドラッグは、日常的に行われている操作においてまたはインビボで修飾が開裂して本発明の親化合物になるような方法で、本発明化合物中に存在する官能基を修飾することにより調製され得る。プロドラッグには、ヒドロキシ、アミノまたはメルカプト基が、本発明化合物のプロドラッグが哺乳動物被験体に投与されると開裂して遊離ヒドロキシ、遊離アミノまたは遊離メルカプト基をそれぞれ形成する任意の基に結合している、本発明化合物が含まれる。プロドラッグの例として、アルコールの酢酸エステル、ギ酸エステル、および安息香酸エステル誘導体、ならびに、本発明の化合物中のアミン官能基のアセトアミド、ホルムアミド、およびベンズアミド誘導体などが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。

プロドラッグについての議論は、「Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｗｉｌｌｉａｍｓ’ Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ ｔｈｅ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ」、Ｈ．Ｊ．Ｓｍｉｔｈ，Ｗｒｉｇｈｔ、第２版、ロンドン（１９８８）；Ｂｕｎｄｇａｒｄ，Ｈ．，Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（１９８５），ｐｐ．７−９，２１−２４（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，アムステルダム）；Ｔｈｅ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｃａｍｉｌｌｅ Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈら、第３１章，（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９９６）；Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｐ．Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｏｎおよび Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編、第５章、１１３−１９１頁（Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９１）；Ｈｉｇｕｃｈｉ，Ｔ．，ら、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ，第１４巻；またはＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｅｄｗａｒｄ Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，１９８７（これらは全て、その全体が参考として援用される）の中に見ることができる。

本発明化合物の適切なプロドラッグ形態には、ヒドロキシル基のうちの１つがＣ（Ｏ）ＯＲで置換されており、式中のＲが、必要に応じて置換されるアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、またはヘテロアリールである実施形態が含まれる。これらの場合、エステル基はインビボで（例えば、体液中で）加水分解されて活性化合物を放出し得る。

本発明の結合体化合物、または本発明にしたがって使用される結合体化合物は、単独で、あるいはリポソーム、アジュバント、または任意の薬学的に許容され得る担体、希釈剤、もしくは賦形剤の存在下で他の化合物と組み合わせて、例えば、ヒト、ウシ、ヒツジなどの哺乳動物のような被験体への投与に適切な形態で提供され得る。所望される場合、本発明の化合物での処置は、本明細書中に記載される治療適応症についてのより従来型の既存の治療法と組み合わせられ得る。本発明化合物は長期にわたり提供される場合も、断続的に提供される場合もある。「長期」投与は、長期間にわたり最初の治療効果（活性）を維持するための、急性の態様とは反対の連続的な態様での化合物（単数または複数）の投与を表す。「断続的」投与は、連続しては行われないが中断されることのない、むしろ本質的に周期的な処置である。本明細書中で使用される用語「投与」、「投与可能」、または「投与すること」は、処置が必要な被験体への本発明化合物の提供を意味するものとする。

「薬学的に許容され得る担体、希釈剤、または賦形剤」としては、ヒトまたは家畜動物での使用が認められ得るものとして、例えば、米国食品医薬品局または他の政府機関により承認されている、任意のアジュバント、担体、賦形剤、流動促進剤、甘味剤、希釈剤、防腐剤、染料／着色剤、調味料、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定剤、等張剤、溶媒、または乳化剤が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。

本発明化合物は、薬学的に許容され得る塩の形態で投与され得る。そのような場合、本発明の医薬組成物は、当該分野で公知である、そのような化合物の塩、好ましくは、生理学的に許容され得る塩を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中で使用される用語「薬学的に許容され得る塩」は、特に、この塩の形態が、活性成分の遊離形態または他のこれまでに開示されている塩形態と比較して改良された薬物動態特性を活性成分にもたらす場合には、その塩形態で使用される、活性成分含有結合体化合物を意味する。

「薬学的に許容され得る塩」には、酸付加塩および塩基付加塩の両方が含まれる。「薬学的に許容され得る酸付加塩」は、遊離塩基の生物学的有効性および特性を保持しており、生物学的にも別の意味でも望ましくないものではない、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など）および有機酸（例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸など）と形成された塩を意味する。

「薬学的に許容され得る塩基付加塩」は、遊離酸の生物学的有効性および特性を保持しており、生物学的にも別の意味でも望ましくないものではない塩を意味する。これらの塩は、遊離酸への無機塩基または有機塩基の付加により調製される。無機塩基から誘導された塩として、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、マンガン塩、アルミニウム塩などが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。好ましい無機塩は、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、およびマグネシウム塩である。有機塩基から誘導された塩としては、第一級アミン、第二級アミン、および第三級アミン、天然に存在している置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂などの塩が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。特に好ましい有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリンおよびカフェインである。

したがって、用語「薬学的に許容され得る塩」は、酢酸塩、ラクトビオン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、リンゴ酸塩、重炭酸塩、マレイン酸塩、重硫酸塩、マンデル酸塩、重酒石酸塩、メシル酸塩、ホウ酸塩、臭化メチル、臭化物、亜硝酸メチル、エデト酸カルシウム、メチル硫酸塩、カンシル酸塩、ムチン酸塩、炭酸塩、ナプシル酸塩、塩化物、硝酸塩、クラブラン酸塩、Ｎ−メチルグルカミン、クエン酸塩、アンモニウム塩、二塩酸塩、オレイン酸塩、エデト酸塩、シュウ酸塩、エジシル酸塩、パモ酸塩（エンボネート（ｅｍｂｏｎａｔｅ））、エストレート、パルミチン酸塩、エシレート、パントテン酸塩、フマル酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、グルセプト酸塩、ポリガラクツロン酸塩、グルコン酸塩、サリチル酸塩、グルタム（ｇｌｕｔａｍｅ）、ステアリン酸塩、グリコリルアルサニレート（ｇｌｙｃｏｌｌｙｌａｒｓａｎｉｌａｔｅ）、硫酸塩、レゾルシン酸ヘキシル、塩基性酢酸塩、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｄａｍｉｎｅ）、コハク酸塩、臭化水素酸塩、タンニン酸塩、塩酸塩、酒石酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、テオクル酸塩、ヨウ化物、トシル酸塩、イソチオネート、トリエチオダイド、乳酸塩、パモ酸塩（ｐａｎｏａｔｅ）、吉草酸塩などを含めた許容され得る塩を全て含むが、これらに限定されるわけではない。

本発明化合物の薬学的に許容され得る塩は、溶解度または加水分解特性を改変させるための調剤として使用することができるか、または、徐放性処方物もしくはプロドラッグ処方物において使用することもできる。また、本発明化合物の薬学的に許容され得る塩には、ナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、亜鉛のような陽イオンから形成されるもの、ならびに、アンモニア、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−グルタミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ν，Ν’−ジベンジルエチレン−ジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチル−アミン、ジエチルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、およびテトラメチルアンモニウムヒドロキシドのような塩基から形成されるものが含まれ得る。

医薬製剤は、典型的には、調製物の投与方法（これは、注射、吸入、局所投与、洗浄、または選択された処置に適している他の方法）に対して許容され得る１つ以上の担体を含む。適切な担体は、上記投与方法での使用について当該分野で公知のものである。

適切な医薬組成物は、当該分野で公知の手段により製剤化され得、それらの投与方法と用量は専門家により決定され得る。非経口投与については、化合物は、滅菌水または食塩水、またはビタミンＫについて使用されるもののような非水溶性化合物の投与に使用される薬学的に許容され得る賦形剤中に溶解させられ得る。経腸投与については、化合物は、錠剤、カプセル剤中で投与され得るか、または液体形態に溶解させられ得る。錠剤またはカプセル剤は腸溶性コーティングされてもよく、徐放性製剤であってもよい。放出される化合物を封入しているポリマー性またはタンパク質微粒子、軟膏、ゲル剤、ヒドロゲル、あるいは溶液（これらは、化合物を投与するために局部的もしくは局所的に使用することができる）を含む多くの適切な処方物が公知である。徐放性パッチまたはインプラントは、長期間にわたる放出をもたらすように使用され得る。専門家に公知である多くの技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、Ａｌｆｏｎｓｏ Ｇｅｎｎａｒｏ，第２０版、Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，（２０００年）に記載されている。非経口投与のための処方物は、例えば、賦形剤、ポリアルキレングリコール（例えば、ポリエチレングリコール）、植物起源の油、または水素添加ナフタレンを含み得る。生体適合性、生体分解性ラクチドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマー、またはポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーは、化合物の放出を制御するために使用され得る。調節性化合物についての他の可能性のある有用な非経口送達システムとして、エチレン−酢酸ビニルコポリマー粒子、浸透圧ポンプ、埋め込み型注入システム、およびリポソームが挙げられる。吸入用処方物は、賦形剤、例えば、ラクトースを含み得るか、または、例えば、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、グリココレート（ｇｌｙｃｏｃｈｏｌａｔｅ）、およびデオキシコレートを含有している水溶液であり得るか、または、点鼻剤形態で、もしくはゲルとしての投与のための油性溶液でもあり得る。

本発明の結合体化合物または医薬組成物は、経口または非経口で、例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内、嚢内注射または注入、皮下注射、経皮または経粘膜経路により投与され得る。いくつかの実施形態において、本発明の結合体化合物もしくは医薬組成物、または本発明で使用される結合体化合物もしくは医薬組成物は、インプラント、移植片、人工補綴物、ステントなどのような医療用デバイスまたは機器により投与され得る。そのような化合物または組成物を含み、それらを放出するように意図されるインプラントが考案され得る。一例は、結合体化合物またはその個々の構成成分を一定期間にわたり放出するように適合させたポリマー材料からつくられたインプラントである。結合体化合物は、単独で、または薬学的に許容され得る担体との混合物として、例えば、錠剤、カプセル剤、粒剤、散剤などのような固体処方物；シロップ剤、注射剤などのような液体処方物；注射剤、滴剤、坐剤、膣坐剤として投与され得る。いくつかの実施形態において、本発明の結合体化合物もしくは医薬組成物、または本発明で使用される結合体化合物もしくは医薬組成物は、吸入スプレー、鼻腔、膣、直腸、舌下、または局所経路により投与され得、それぞれの投与経路に適している慣用的な非毒性の薬学的に許容され得る担体、アジュバントおよび賦形剤を含有している適切な投薬単位処方物に、単独でまたは一緒に製剤化され得る。

本発明の結合体化合物は、マウス、ラット、ウマ、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコ、およびサルを含む動物を処置するために使用され得る。しかし、本発明化合物は、鳥類（例えば、ニワトリ）のような他の生物においても使用され得る。本発明化合物はまた、ヒトでの使用にも有効であり得る。用語「被験体」（あるいは本明細書中では「患者」と呼ばれる）は、処置、観察、または実験の対象となっている動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味するものとする。しかし、本発明の結合体化合物、方法、および医薬組成物は、動物の処置に使用され得る。したがって、本明細書中で使用される、「被験体」は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ラット、マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなどであり得る。被験体は、異常もしくは過剰な骨量減少、または異常もしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態または障害、癌、骨と関係がある障害、あるいは、骨に対して治療薬をターゲッティングすることにより利益を享受するであろう障害を有していると疑われ得るか、あるいはそれらを有するリスクがあり得る。

本発明化合物の「有効量」には、治療有効量または予防有効量が含まれる。「治療有効量」は、骨吸収の阻害、骨成長の刺激、または本明細書中に記載される任意の状態の処置のような所望される治療結果を達成するのに必要な投薬および期間で有効な量をいう。化合物の治療有効量は、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに個体において所望される応答を誘発する化合物の能力などの因子により異なり得る。

投薬計画は、最適な治療応答を提供するように調整され得る。治療有効量は、化合物のあらゆる毒性または有害作用を治療上有益な効果が上回る量でもある。「予防有効量」は、骨吸収の阻害、骨成長の刺激、または本明細書中に記載される任意の状態の予防のような所望される予防的結果を達成するのに必要な投薬および期間で有効な量をいう。典型的には、予防用量は、発病前または疾患の初期段階で被験体において使用され、したがって、予防有効量は治療有効量より少ない量であり得る。化合物の治療有効量または予防有効量の適切な範囲は、０．１ｎＭ〜０．１Ｍ、０．１ｎＭ〜０．０５Ｍ、０．０５ｎＭ〜１５μＭ、または０．０１ｎＭ〜１０μＭの任意の値であり得る。

別の実施形態において、骨成長または骨吸収またはカルシウム代謝の調節が必要な状態の処置あるいは予防において、適切な投与量レベルは、一般的には、１日あたり被験体体重１ｋｇあたり約０．０１〜１０００ｍｇであり、単回用量または複数回用量で投与され得る。いくつかの実施形態において、投与量レベルは、１日あたり約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇとなる。特定の患者についての具体的な用量レベルおよび投薬頻度は様々であり得、使用される特定化合物の活性、代謝安定性、その化合物の作用の長さ、年齢、体重、全体的な健康状態、性別、食事療法、投与方法および時間、排泄速度、薬物の併用、特定の状態の重篤度、ならびに患者が受けている治療を含む様々な因子により異なることが理解されるはずである。

投薬量値は、緩和しようとする状態の重篤度に応じて様々であり得ることに注意すべきである。特定の被験体について、特定の投薬計画は、個々の必要性と、組成物を投与する人または組成物の投与を管理する人の専門的判断にしたがって経時的に調整され得る。本明細書中に示される投薬量の範囲は例にすぎず、医師により選択され得る投薬量の範囲を限定するものではない。組成物中の活性化合物（単数または複数）の量は、被験体の疾患状態、年齢、性別、および体重などの因子により様々であり得る。投薬計画は、最適な治療応答を提供するように調整され得る。例えば、単回のボーラスを投与することができ、いくつかの分割量を経時的に投与することができるか、または、治療状況の緊急性による指示に応じて用量を比例的に減らすことも増やすこともできる。投与の容易さと投薬量の均一性のために、投薬単位形態で非経口組成物を製剤化することが有利であり得る。一般的に、本発明化合物は、実質的な毒性を引き起こすことなく使用されるべきであり、本明細書中に記載されるように、本発明化合物は、治療用途に適している安全プロフィールを示す。本発明化合物の毒性は、標準的な技術を使用して、例えば、細胞培養物もしくは実験動物で試験し、治療指数、すなわち、ＬＤ５０（集団の５０％を死に至らしめる用量）とＬＤ１００（集団の１００％を死に至らしめる用量）の比を決定することにより、決定され得る。しかし、重篤な疾患の状態などの状況によっては、実質的に過剰量の組成物を投与することが必要な場合もある。

いくつかの実施形態において、本発明の結合体化合物は、１週間に１回の投薬でよい速度で加水分解される。

本発明の様々な代替的実施形態と実施例が本明細書中に記載される。これらの実施形態と実施例は例示であり、本発明の範囲を限定するものとみなすべきではない。

以下の実施例において本発明をさらに説明する。

実施例１：ベンジルテトラゾールのベンジルアミンとのモデルカップリング
本発明者らは最初に、スキーム１に示すように、市販されているベンジルテトラゾール２５を使用するモデル実験を行った。

これらの試験は、ベンジルテトラゾール水銀塩をクロロメチルオキシ−カルボニルオキシ−ｐ−ニトロベンゼン（Ｄ２ａ）と反応させて中間体２６ａと２６ｂを低収率から中程度の収率までで得ることができ、これらを次にジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中のモデルアミン（ベンジルアミン）と反応させると、モデル結合体２７を得ることができることを示した（スキーム１）。最初にいくつかの問題に直面して、酸化水銀を使用する反応の文献の方法を用いて２５の水銀塩を確実に調製することは困難であった。塩の形成は不規則で、収率に再現性はなかった。次に、本発明者らは、代わりに、テトラゾールの銀塩の使用に変更し、ヨードメチルオキシカルボニルオキシ−ｐ−ニトロベンゼン（Ｄ２ａ）を用いたトリフルオロメタンスルホン酸銀とのベンジルテトラゾールの反応により、所望される中間体２６ａと２６ｂが良好な収率で得られ、次に、ＤＭＦ中でのベンジルアミンとの反応により、モデル結合体（２７）が許容され得る収率で得られることを見出した。２６ａと２６ｂは、所望される場合にはクロマトグラフィーにより分離することができた。

実施例２：ベンジルテトラゾールのアレンドロネートとのモデルカップリング
次の問題は、同様の方法で２６ａおよび／または２６ｂをアレンドロン酸（３）と反応させることができることを実証することであった。水以外のものの中での３の低い溶解度が難題を突き付けてきた。複数の試薬をＤＭＦ水溶液と混合することができたが、３中のアミノ基の遊離（カップリングに必要）には、かなり高いｐＨが必要であり、２６ａの競合加水分解が反応の失敗につながった。この問題は、アレンドロン酸を水中でのテトラブチルアンモニウムヒドロキシドとの反応によりそのモノ−テトラブチルアンモニウム塩（３ａ）に容易に変換することができ、その後の凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｙｌｉｚａｔｉｏｎ）により塩が水和物として得られるという本発明者らの新規の観察により解決された。３ａは、無水ＤＭＦ、ならびに、ジオキサン、エタノール、およびさらにはジクロロメタンのような様々な他の溶媒に溶けやすく、これによりカップリング反応のより慎重な制御が可能となることが明らかになった。したがって、３ａは、４〜５当量の非求核性塩基、ジ−イソプロピルエチルアミンの存在下で無水ＤＭＦ中の２６ａとスムーズに反応し、高い収率で所望されるモデル結合体１６が得られる（スキーム２）。

無水溶媒中の３ａの容易な溶解が、通常は水と不適合である様々な反応性求電子試薬での単純な直接のＮ置換を可能にし、本発明者らは、ＤＭＦまたはジクロロメタン中での安息香酸無水物、ベンジルオキシクロロホルメート、およびシンナモイル−オキシカルボニル−オキシ−ｐ−ニトロフェニルベンゼンのような多種多様の求電子試薬との反応により、高い収率で誘導体２８、２９、および３０が得られることを実証することができた（スキーム３：アレンドロネートテトラｎ−ブチルアンモニウム塩のアシル化）。

実施例３：結合体６および７の調製
ＥＰ４受容体アゴニストテトラゾール１を、トリフルオロメタンスルホン酸銀と反応させ、その後、Ｄ２ａと反応させると、中間体２２と２３が妥当な収率で得られた。続いて本発明者らは、１の水銀塩（酢酸水銀との交換により形成させた）が反応して、再現性がある高い収率で２２と２３が得られることを見出した。次に、２２および／または２３をＤＭＦ中の３ａと反応させると、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム塩として目的の結合体６および７が得られた。これらの結合体を、（テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムイオンをプロトンに交換するための）イオン交換により精製し、次に、逆相クロマトグラフィーにより精製すると、高い収率で６と７が得られた（スキーム４）。結合体６および７には、活性化された中間体（例えば、２２および２３）の合成と、それに続くアレンドロン酸（３）との反応が必要であった。そのような化合物は文献で公知ではなく、２２または２３のような中間体と３ａとの反応は、水以外のあらゆる溶媒中でのアレンドロン酸（３）の低い溶解度が原因で特に困難であると考えられた。したがって、結合反応においてアレンドロン酸（３）を使用することは可能であるが、化合物３ａの方が優れた結果を与えた。

さらに具体的には、合成工程は以下の通りであった。

化合物１の調製

ｐ−ニトロフェノール（１．１５ｇ、８．２９ｍｍｏｌ、１当量）を、アルゴン下で２０ｍＬのＣＨ_２Ｃ１_２に溶解させ、続いてモルホリン（０．９１ｍＬ、８．２９ｍｍｏｌ、１当量）を添加した。この反応混合物を−７８℃に冷却し、ＣｌＣＨ_２ＯＣＯＣｌ（０．７４ｍＬ、８．２９ｍｍｏｌ、１当量）を添加した。この反応物を一晩撹拌した。溶媒をロータリーエバポレーターにより除去し、酢酸エチルと水で抽出した。有機層を収集し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。生成物Ｄ１をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより単離した（Ｇｅｄｉｙａ，Ｌａｌｊｉ Ｋ．；Ｋｈａｎｄｅｌｗａｌ，Ａａｋａｎｋｓｈａ；Ｐａｔｅｌ，Ｊｙｏｔｉ；Ｂｅｌｏｓａｙ，Ａａｓｈｖｉｎｉ；Ｓａｂｎｉｓ，Ｇａｕｒｉ；Ｍｅｈｔａ，Ｊｈａｌａｋ；Ｐｕｒｕｓｈｏｔｔａｍａｃｈａｒ，Ｐｕｒａｎｉｋ；Ｎｊａｒ，Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｃ．Ｏ．「Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｏｖｅｌ Ｍｕｔｕａｌ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（Ｈｙｂｒｉｄ Ｄｒｕｇｓ）ｏｆ Ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−Ｒｅｔｉｎｏｉｃ Ａｃｉｄ ａｎｄ ＨｉｓｔｏｎｅＤｅａｃｅｔｙｌａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｗｉｔｈ Ｅｎｈａｎｃｅｄ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ ａｎｄ Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌｓ ｉｎ Ｖｉｔｒｏ」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００８，５１，３８９５−３９０４）。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）：δ ５．８５ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４３ （ｄ， ２Ｈ）， ８．３１ （ｄ， ２Ｈ）。

化合物２の調製

化合物Ｄ１（１当量）とＮａＩ（１０当量）をアルゴン下でフラスコに入れた。４０ｍＬのアセトンをこれに添加し、還流条件下で２４時間撹拌した。反応混合物を水で洗浄し、有機層を収集した。ヘキサンと酢酸エチルを用いた勾配シリカカラムにより、化合物Ｄ２ａが得られた（Ｇｅｄｉｙａ，Ｌａｌｊｉ Ｋ．；Ｋｈａｎｄｅｌｗａｌ，Ａａｋａｎｋｓｈａ；Ｐａｔｅｌ，Ｊｙｏｔｉ；Ｂｅｌｏｓａｙ，Ａａｓｈｖｉｎｉ；Ｓａｂｎｉｓ，Ｇａｕｒｉ；Ｍｅｈｔａ，Ｊｈａｌａｋ；Ｐｕｒｕｓｈｏｔｔａｍａｃｈａｒ，Ｐｕｒａｎｉｋ；Ｎｊａｒ，Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｃ．Ｏ．“Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｏｖｅｌ Ｍｕｔｕａｌ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（Ｈｙｂｒｉｄ Ｄｒｕｇｓ）ｏｆ Ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−Ｒｅｔｉｎｏｉｃ Ａｃｉｄ ａｎｄ ＨｉｓｔｏｎｅＤｅａｃｅｔｙｌａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｗｉｔｈ Ｅｎｈａｎｃｅｄ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ ａｎｄ Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌｓ ｉｎ Ｖｉｔｒｏ”、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００８，５１，３８９５−３９０４）。１Ｈ ＮＭＲ： δ ６．０７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．４３ （ｄ， ２Ｈ）， ８．３１ （ｄ， ２Ｈ）。

化合物６および７の調製

化合物１（１当量）とＨｇ（ＯＡｃ）_２（０．５当量）をアルゴン雰囲気下でフラスコに入れ、続いて１０ｍＬのＣＨ_３ＣＮを添加した。これを２時間撹拌した。溶媒を減圧して除去した。減圧下に３時間置いた。次に、この混合物にさらに１０ｍＬのＣＨ_３ＣＮを添加した。４時間撹拌し、次いで、減圧して溶媒を除去し、一晩減圧下に置いた。化合物３ａ（１当量）と溶媒Ｃ_２Ｈ_４Ｃｌ_２をアルゴン下でこの反応混合物に添加し、２４時間還流させた。ロータリーエバポレーターを使用して溶媒を除去した。化合物２２と２３を、シリカ上でのヘキサンと酢酸エチルの勾配カラムクロマトグラフィーにより単離した。２２ １Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： δ ８．２８−８．３１ （ｄ， ２Ｈ）， ７．４３−７．４８ （ｍ， ５Ｈ）， ７．３８−７．４３ （ｄ， ２Ｈ）， ６．５６ （ｓ， ２Ｈ）， ５．６５−５．７１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５１−４．６２ （ｍ， １Ｈ）， ４．００−４．０６ （ｍ， １Ｈ）， ３．３５−３．４４ （ｍ， １Ｈ）， ２．９０−２．９７ （ｔ， ２Ｈ）， ２．７０−２．７６ （ｍ， １Ｈ）， ２．６４ （ｓ， １Ｈ）， ２．２５−２．４０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１６−２．２１ （ｍ， １Ｈ）， １．７６−１．８４ （ｍ， ２Ｈ）， １．５７−１．６８ （ｍ， ２Ｈ）， １．３５−１．４５ （ｍ， ５Ｈ）， １．１５−１．３２ （ｍ， ７Ｈ）． １３Ｃ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： δ １７４．８， １６８．２， １５４．８， １５１．０， １４５．８， １３５．２， １３０．３， １２５．４， １２１．６， ７４．２， ６０．１， ４０．５， ２９．９， ２９．７， ２８．５， ２７．５， ２７．０， ２６．２， ２５．４， ２５．２。２３ １Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： δ ８．２７ − ８．３１ （ｄ， ２Ｈ）， ７．４−７．５ （ｍ， ５Ｈ）， ７．３５−７．３８ （ｄ， ２Ｈ）， ６．３５ （ｓ， ２Ｈ）， ５．６０−５．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５３−４．６２ （ｍ， １Ｈ）， ４．００−４．０５ （ｍ， １Ｈ）， ２．９６−３．００ （ｔ， ２Ｈ）， ２．７５−２．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２５−２．４０ （ｍ， ３Ｈ）， ２．１５−２．２４ （ｍ， １Ｈ）， １．８３−１．９０ （ｍ， ２Ｈ）， １．５８−１．７０ （ｍ， ２Ｈ）， １．３５−１．５０ （ｍ， ５Ｈ）， １．１５−１．３５ （ｍ， ７Ｈ）． １３Ｃ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： δ １７５．１， １５６．３， １５４．６， １５１．２， １４５．９， １３５．０， １２５．９， １２５．５， １２１．６， ６９．８， ６０．３， ４０．４， ３０．０， ２９．７， ２８．３， ２６．８， ２６．６， ２６．０， ２５．４， ２２．８。

化合物６の調製
アルゴン雰囲気下で、化合物２２（１当量）と化合物３ａ（１．１当量）をフラスコに入れ、溶媒として１ｍＬのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を添加した。その後、ジイソプロピルエチルアミン（５当量）を添加し、室温で２４時間撹拌した。その後、ロータリーエバポレーターによりＤＭＦを除去した。残りの混合物を水（１０ｍＬ）およびＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）に溶解させた。水層の中の生成物６を収集し、有機層は廃棄した。水層７を１０ｍＬ量のＣＨ_２Ｃｌ_２でさらに数回洗浄した。水を減圧下で除去した。その後、ｍｉｌｌｉ−Ｑ水を使用してイオン交換（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅイオン交換樹脂、Ｈ^＋の形態）による分離を行った。水を減圧下で除去した。生成物を、水とメタノールの勾配溶媒系を使用してＣ−１８ ｓｅｐ−ｐａｃｋによりさらに精製した。６ ^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： δ ７．４０−７．５５ （ｍ， ５Ｈ）， ６．４２ （ｓ， ２Ｈ）， ５．５５−５．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６２−４．７３ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５−４．２３ （ｍ，１Ｈ）， ３．１３−３．２１ （ｍ， １Ｈ）， ３．０９−３．１３ （ｔ， １Ｈ）， ２．９０−２．９５ （ｔ， １Ｈ）， ２．４８−２．５６ （ｍ， １Ｈ）， ２．３４−２．４０ （ｔ， ２Ｈ）， ２．１５−２．２５ （ｍ， １Ｈ）， １．８６−１．９８ （ｍ， ２Ｈ）， １．６３−１．８５ （ｍ， ５Ｈ）， １．１１−１．３５ （ｍ， ７Ｈ）． １３Ｃ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： δ １７８．０， １７１．０， １６７．５， １５５．６， １３６．１， １３０．６， １２７．６， １２５．６， ７４．２， ７４．０， ７３．８， ７３．７， ７２．４， ６０．９， ４１．２， ４０．６， ３０．８， ３０．０， ２７．４， ２６．６， ２５．９， ２５．３， ２４．４， ２４．２， ２３．７， ２３．６． ＨＲＭＳ 計算値 ７２５．２２７１ （Ｃ_２７Ｈ_４０Ｆ_２Ｎ_６Ｏ_１１Ｐ_２Ｈ^＋）， 実測値 ７２５．２２９３。

化合物７を同様に調製した。^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： δ ７．４０−７．５５ （ｍ， ５Ｈ）， ６．２６ （ｓ， ２Ｈ）， ５．５５−５．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６２−４．７３ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５−４．２３ （ｍ，１Ｈ）， ３．１５−３．２５ （ｍ， １Ｈ）， ３．０８−３．１４ （ｔ， ２Ｈ）， ３．０３−３．０８ （ｔ， ２Ｈ）， ２．５３−２．６３ （ｍ， １Ｈ）， ２．３４−２．４２ （ｔ， ２Ｈ）， ２．１５−２．２７ （ｍ， １Ｈ）， １．８５−１．９７ （ｍ， ２Ｈ）， １．７５−１．８５ （ｍ， ３Ｈ）， １．６５−１．７４ （ｍ， １Ｈ）， １．２５−１．３９ （ｍ， ４Ｈ）， １．１５−１．２５ （ｍ， ２Ｈ）． ＨＲＭＳ 計算値 ７４７．２０９１ （Ｃ_２７Ｈ_４０Ｆ_２Ｎ_６Ｏ_１１Ｐ_２Ｎａ^＋）， 実測値 ７４７．２１２８。

実施例４：結合体６および７の安定性
結合体６および７の安定性を、化学的、およびラット血漿中インビトロでの両方で評価した。骨のインビボでの有効性試験をラットにおいて行ったので、化合物が、１−ヒドロキシ−１，１−ビスホスホネート部分の結合を介して骨の中に取り込まれるのに十分に長い間血流中で存続するように十分に安定しているかどうかを決定することが所望された。６の１ＮのＮａＯＨでの処理により、１（そして３も）の完全な加水分解と遊離が１０分以内に起きた。６と７の混合物を新鮮なラット血漿中３７℃でインキュベートし、この結合体の安定性を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによる１の出現によってモニターした。この結合体は極めて安定していたが、なだらかな、しかしゆっくりとした１の遊離が９６時間にわたり観察された（図１を参照のこと）。

実施例５：結合体８の調製と評価
結合体８の調製には、ＥＰ４選択的アゴニスト２の合成が必要であった。この１１工程の合成を、（＋）−Ｄ−ピログルタミン酸から開始して大規模で行って、２とそのエチルエステル（２ａ）（約２ｇの総量）を得た。合成は文献に記載されているように大規模で行ったが（Ｙ．Ｈａｎら、米国特許第７１０９２２３ Ｂ２号、２００６年９月１９日）、過還元を回避するためにケトンの最終的なジアステレオ選択的還元においていくらかの改良を加えた。２ａをクロロカルボニルオキシ−ｐ−ニトロベンゼン（Ａ１）と反応させて、高い収率で反応性炭酸塩２４を得た。次に、２４をＤＭＦ中のアレンドロン酸モノ−テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム塩（３ａ）と反応させると、（イオン交換と逆相クロマトグラフィーによる精製後）結合体８が３５〜４０％の収率で得られ、等量の２ａが回収された（スキーム５）。

化合物２４の調製
ジクロロメタン（０．２Ｍ）中のアルコール２ａ（１．０当量）の溶液を０℃に冷却し、トリエチルアミン（２．０当量）と４−ニトロフェニルクロロホルメート（１．０当量）で処理する。この混合物をゆっくりと室温に温め、室温で１８時間撹拌する。次に、この反応をＮＨ_４Ｃｌ水溶液でクエンチし、その後、層を分離させ、水相をジクロロメタンで抽出する（３回）。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、そして濃縮すると油状物が得られる。これをフラッシュクロマトグラフィー（８０％の酢酸エチル／ヘキサン）により精製すると、無色の油として２４が得られる。

^１Ｈ ＮＭＲ （６００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ ８．２６ （ｄ， Ｊ ＝ ９．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．５２−７．４５ （ｍ， ５Ｈ）， ７．２７ （ｄ， Ｊ ＝ ９．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．３， ７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．３， ６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５９ （ｔｄ， Ｊ ＝ １０．２， ６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１１ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０７ （ｔｄ， Ｊ ＝ ７．８， ５．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４７ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １５．６， ８．４， ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．６１ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １３．８， ８．７， ５．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．４１−２．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２４−２．１８ （ｍ， １Ｈ）， １．７２−１．６６ （ｍ， １Ｈ）， １．６０ （ｄｔ， Ｊ ＝ １５．２， ７．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４６−１．２６ （ｍ， ４Ｈ）， １．２５−１．２０ （ｍ， ２Ｈ）， １．２４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。

^１３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ １７４．６ （Ｃ_４）， １７３．７ （Ｃ_４）， １５５．０ （Ｃ_４）， １５１．３ （Ｃ_４）， １４５．６ （Ｃ_４）， １３９．３ （ＣＨ）， １３２．９ （Ｃ_４， ｔ， Ｊ_Ｆ ＝２５．１ Ｈｚ）， １３０．８ （ＣＨ）， １２８．６ （ＣＨ）， １２５．８ （ＣＨ）， １２５．３ （ＣＨ）， １２２．７ （ＣＨ）， １２１．６ （ＣＨ）， １１８．９ （Ｃ_４， ｔ， Ｊ_Ｆ ＝ ２４７．６ Ｈｚ）， ７９．１ （ＣＨ， ｔ， Ｊ_Ｆ ＝ ３２．３ Ｈｚ）， ６０．２ （ＣＨ_２）， ５９．５ （ＣＨ）， ４０．５ （ＣＨ_２）， ３４．２ （ＣＨ_２）， ２９．７ （ＣＨ_２）， ２８．７ （ＣＨ_２）， ２７．１ （ＣＨ_２）， ２６．５ （ＣＨ_２）， ２５．０ （ＣＨ_２）， ２４．８ （ＣＨ_２）， １４．２ （ＣＨ_３）。

化合物８の調製
乾燥ＤＭＦ中のカーボネート２４（１．０当量）の溶液（０．２Ｍ）に、乾燥ＤＭＦ中のテトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムアレンドロネート・５．５Ｈ_２Ｏ（１．０当量）とジイソプロピルエチルアミン（５．０当量）の溶液（０．２Ｍ）をカニューレで加え（ｃａｎｎｕｌａｔｅ）、得られる混合物を室温で３時間撹拌する。ＤＭＦを蒸発させ、得られる黄色の油状物を酢酸エチルと水の１：１混合物に溶かす。層を分離させ、水相を酢酸エチルで抽出する（３回）。残っている水相をＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２０Ｈ^＋イオン交換樹脂カラムに通過させ、凍結乾燥させる。残っている化合物を少量の水に溶かし、Ｓｅｐ−Ｐａｃ Ｃ１８逆相フラッシュクロマトグラフィー（１００％のＨ_２Ｏ〜５０％のＨ_２Ｏ／ＭｅＯＨ）を使用して精製すると、白色固体としてカルバメート８が得られる。

^１Ｈ ＮＭＲ （６００ ＭＨｚ， ＣＤ_３ＯＤ） δ ＝ ７．５２−７．４６ （ｍ， ５Ｈ）， ５．７３−５．６２ （ｍ， ３Ｈ）， ４．１７ （ｑ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１１ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３７−３．３４ （ｍ， １Ｈ）， ３．１０−３．０７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７１ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １２．０， ８．４， ５．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３９−２．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２５−２．１９ （ｍ， １Ｈ）， ２．０５−１．９８ （ｍ， ２Ｈ）， １．８８−１．８３ （ｍ， ２Ｈ）， １．７１−１．６６ （ｍ， １Ｈ）， １．６０ （ｄｔ， Ｊ ＝ １４．５， ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４８−１．２９ （ｍ， ４Ｈ）， １．２５−１．２２ （ｍ， ２Ｈ）， １．２４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。

いくつかの他の活性カーボネート中間体（例えば、ペンタフルオロフェニルオキシカルボニル−および２，４−ジニトロフェニルオキシカルボニル−）を評価したが、余りに不安定であることが判明したか、またはこれらの実験において収率の改善が得られなかった。

実施例６：結合体８の安定性
結合体８を、０．１ＮのＮａＯＨとともに室温で２４時間インキュベートすると、エチルエステルは本質的に定量的に加水分解されたが、カルバメートカップリングは加水分解されなかった。結合体８を新鮮なラット血漿中３７℃でインキュベートし、このインキュベーションを、２の出現についてのＬＣ／ＭＳ／ＭＳでのモニタリングにより経時的に追跡した（図２）。９６時間後、２の顕著な遊離は観察されなかった。これはこの結合体が血液中で安定していることを示している。インビボでこの結合体を評価するために、本発明者らは放射性標識した２を調製した。本発明者らは、２ａの最後から２番目の前駆体であるケトンの、トリチウム化物（ｔｒｉｔｉｉｄｅ）試薬での還元が容易な方法であり得ることを決定した。市販されているトリチウム化ホウ素ナトリウムでの還元は、不活性１５−Ｒ−ヒドロキシルジアステレオ異性体を主にもたらすので除外した。本発明者らは、先のと同じキラルルテニウム触媒による移動水素化を使用することを決定した（スキーム６）が、ギ酸の代わりにトリチウム化（ｔｒｉｔｉｏ）ギ酸を使用した。前例はないが、これは、シュウ酸のＴ_２Ｏでの交換、続く密閉チューブ中での熱分解により首尾よく実行し、トリチウム化ギ酸が生じた。冷却後、触媒構成成分を熱分解容器に添加して、インサイチュで還元型触媒を形成させ、その後、ケトン（過剰量）を添加した。

ゆっくりと注意深く還元して確実に過還元がないようにした後、後処理および精製により、必要なトリチウム標識された２ａが３５％の放射化学収率で得られた（スキーム６）。この合成は、第二級アルコールのエナンチオ選択的標識への適用に相当の可能性があり、当然、放射性合成（ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）分野において全般的に興味深いものである（Ｓ．Ａｒｎｓ，Ａ．ＭｏｒｅａｕおよびＲ．Ｎ．Ｙｏｕｎｇ，Ｊ．Ｌａｂｅｌ Ｃｏｍｐｄ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ，２０１０，５３，２０５−２０７）。トリチウム標識された２ａを使用して、結合体８の合成を、ラットへの投与、ならびに、インビボでの安定性、骨への取り込み、および２の放出速度の決定に使用するために繰り返した。

実施例７：インビボでの有効性
放射性標識した６と７の混合物と、別に、放射性標識した８を必要に応じて未標識化合物で希釈し、次にラット（それぞれ、２匹または３匹）に、５ｍｇ／ｋｇの用量で水中静脈内投与により投与する。忍容性を確認し、血液試料を様々な時点で採血し、血液由来の標識および結合体の両方の消滅を、インラインシンチレーション測定を用いてＨＰＬＣにより約４時間にわたりモニターする。加えて、ラットに同様の方法で投与し、投与後の様々な時点（４時間、１日、３日、７日）（１時点あたり２〜３匹のラット）でラットを屠殺し、長骨を切り開き、洗浄し、乾燥させ、重量を測定し、その後、捕捉されている遊離水を組織バーナーで熱分解し、シンチレーション計数管において計数する。これにより、投与後４時間での最初の取り込みと、その後の骨からのトリチウム標識した１または２の放出を測定する。結合体のスケールアップを開始して、骨減少症の雌のラットにおける２８日間の有効性試験ができるようにする。

結合体８の取り込みと放出：ＰＢＳ中のカルバメート結合体８（比放射能＝１５．４ｍＣｉ／ｍｍｏｌ）の溶液を調製した。この結合体を、５ｍｇ／ｋｇで雌のＳｐｒａｕｇｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに静脈内投与した。ラットの３連のセットを、１日目、７日目、１４日目、および２８日目に安楽死させ、骨中のトリチウムレベルを生物学的酸化剤中での長骨の焼却により測定した。９．４％の最初の１日の取り込みの後、最初の投与量のうちの５．６％が１４日後に残っていた。

実施例８：結合体５６の調製
ヒドロキシフェニル酢酸Ｃ１５ヒドロキシル結合体を以下のように合成した。

化合物５１
カルボン酸５０（Ｏ．Ｂｒｕｍｍｅｒ，Ｔ．Ｚ．Ｈｏｆｆｍａｎ，Ｄ．−Ｗ．Ｃｈｅｎ，Ｋ．Ｄ．Ｊａｎｄａ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．２００１，１９−２０）（１．０当量）をＤＭＦに溶解させ、ＤＣＣ（１．１当量）とペンタフルオロフェノール（１．２当量）で処理した。この混合物を室温で１８時間撹拌し、その後、沈殿物を吸引濾過により除去し、溶媒を減圧下で除去した。生成物を、溶離溶媒として５％の酢酸エチル／ヘキサンを使用したシリカのショートパッドを通した濾過により単離すると、無色液体として化合物５１が得られた。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ ７．２１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８９ （ｓ， ２Ｈ）， ０．９８ （ｓ， ９Ｈ）， ０．２０ （ｓ， ６Ｈ）．^１３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ １６７．９ （Ｃ_４）， １５５．５ （Ｃ_４）， １４２．１ （ｍ， Ｃ_４）， １４０．５ （ｍ， Ｃ_４）， １３８．９ （ｍ， Ｃ_４）， １３７．２ （ｍ， Ｃ_４）， １３０．４ （ＣＨ）， １２４．８ （Ｃ_４）， １２０．６ （ＣＨ）， ３９．６ （ＣＨ_２）， ２５．８ （ＣＨ_３）， １８．４ （Ｃ_４）， −４．３ （ＣＨ_３）．ＨＲＭＳ （ＥＳＩ）：実測値 （Ｍ＋Ｈ）^＋ 、４３３．１２５７ （Ｃ_２０Ｈ_２２Ｆ_５Ｏ_３Ｓｉ）。計算値、４３３．１２５８。

化合物５３。アルコール５２（１．０当量）をＴＨＦに溶解させ、ＮａＨ（油中６０％、１．０当量）で処理した。１０分後、ペンタフルオロフェニルエステル５１（１．０当量）をＴＨＦ中の溶液として添加し、混合物を室温で３時間撹拌した。反応をＮＨ_４Ｃｌ（飽和、水溶液）の添加によりクエンチした。層を分離させ、水相をジエチルエーテルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、そして生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより単離すると、無色の油として化合物５３が得られた。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ ７．４７−７．３７ （ｍ， ５Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １１．６， ９．３， ６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．４， ６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．３， ８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１３ （ｑ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．００ （ｔｄ， Ｊ ＝ ８．０， ５．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５４ （ｄ， Ｊ ＝ １．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５１−３．４１ （ｍ， １Ｈ）， ２．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．６３ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １３．７， ８．４， ５．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３７−２．２７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２０−２．１１ （ｍ， １Ｈ）， １．６６−１．５７ （ｍ， ３Ｈ）， １．４５−１．１９ （ｍ， ５Ｈ）， １．２６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， １．００ （ｓ， ９Ｈ）， ０．２０ （ｓ， ６Ｈ）．^１３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ １７４．８ （Ｃ_４）， １７３．８ （Ｃ_４）， １７０．０ （Ｃ_４）， １５５．１ （Ｃ_４）， １３７．４ （ＣＨ）， １３３．７ （Ｃ_４， ｔ， Ｊ ＝ ２５．４ Ｈｚ）， １３０．５ （ＣＨ）， １３０．３ （ＣＨ）， １２８．４ （ＣＨ）， １２５．９ （ＣＨ， ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ）， １２５．９ （Ｃ_４）， １２４．２ （ＣＨ， ｔ， Ｊ ＝ ２．７ Ｈｚ）， １２０．３ （ＣＨ）， １１９．５ （Ｃ_４， ｔ， Ｊ ＝ ２４６．１ Ｈｚ）， ７４．２ （ＣＨ， ｔ， Ｊ ＝ ３３．７ Ｈｚ）， ６０．３ （ＣＨ_２）， ５９．８ （ＣＨ）， ４０．６ （ＣＨ_２）， ４０．４ （ＣＨ_２）， ３４．３ （ＣＨ_２）， ２９．９ （ＣＨ_２）， ２８．９ （ＣＨ_２）， ２７．２ （ＣＨ_２）， ２６．６ （ＣＨ_２）， ２５．８ （ＣＨ_３）， ２５．２ （ＣＨ_２）， ２４．９ （ＣＨ_２）， １８．３ （Ｃ_４）， １４．４ （ＣＨ_３）， −４．３ （ＣＨ_３）． ＨＲＭＳ （ＥＳＩ）：実測値（Ｍ＋Ｎａ）^＋、６９４．３４０１（Ｃ_３７Ｈ_５１Ｆ_２ＮＯ_６ＳｉＮａ）。計算値、６９４．３３５１。

化合物５４。シリルエーテル５３（１．０当量）をＴＨＦに溶解させ、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．０Ｍ、２．０当量）で処理した。室温で２時間撹拌した後、反応をＮＨ_４Ｃｌ（飽和、水溶液）の添加によりクエンチした。層を分離させ、水相をジエチルエーテルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、そして生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより単離すると、黄色の油として化合物５４が得られた。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ ７．４７−７．３９ （ｍ， ５Ｈ）， ７．０１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７０−５．６５ （ｍ， １Ｈ）， ５．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．４， ５．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．４， ９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１２ （ｑ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９４−３．９０ （ｍ， １Ｈ）， ３．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ４．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４２−３．３７ （ｍ， １Ｈ）， ２．４８−２．４３ （ｍ， １Ｈ）， ２．３０−２．２４ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１３−２．０６ （ｍ， １Ｈ）， １．６１−１．５５ （ｍ， ２Ｈ）， １．４９−１．４３ （ｍ， １Ｈ）， １．３９−１．１６ （ｍ， １０Ｈ）。フェノールのＯＨは観察されなかった。^１３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ １７５．４ （Ｃ_４）， １７４．１ （Ｃ_４）， １６９．９ （Ｃ_４）， １５６．０ （Ｃ_４）， １３５．４ （ＣＨ）， １３３．６ （Ｃ_４， ｔ， Ｊ ＝ ２０．３ Ｈｚ）， １３０．６ （ＣＨ）， １３０．４ （ＣＨ）， １２８．４ （ＣＨ）， １２６．０ （Ｃ_４， ｔ， Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ）， １２４．８ （ＣＨ）， １２４．３ （ＣＨ）， １１９．５ （Ｃ_４， ｔ， Ｊ ＝ １９７．１ Ｈｚ）， １１６．２ （ＣＨ）， ７３．５ （ＣＨ， ｔ， Ｊ ＝ ２６．４ Ｈｚ）， ６０．４ （ＣＨ_２）， ６０．０ （ＣＨ）， ４０．８ （ＣＨ_２）， ４０．５ （ＣＨ_２）， ３４．３ （ＣＨ_２）， ２９．９ （ＣＨ_２）， ２８．８ （ＣＨ_２）， ２６．９ （ＣＨ_２）， ２６．５ （ＣＨ_２）， ２５．０ （ＣＨ_２）， ２４．８ （ＣＨ_２）， １４．３ （ＣＨ_３）． ＨＲＭＳ （ＥＳＩ）：実測値（Ｍ＋Ｈ）^＋ 、 ５５８．２６５３（Ｃ_３１Ｈ_３８Ｆ_２ＮＯ_６）。計算値、５５８．２６６７。

化合物５５。フェノール５４（１．０当量）をジクロロメタンに溶解させ、Ｅｔ_３Ｎ（３．０当量）と４−ニトロフェニルクロロホルメート（１．１当量）で処理した。室温で２時間撹拌後、反応をＮＨ_４Ｃ１（飽和、水溶液）の添加によりクエンチした。層を分離させ、水相をジクロロメタンで抽出した（３回）。有機層を合わせ、Ｈ_２Ｏおよび食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。粗生成物をシリカゲルのショートパッドを通して迅速に濾過し、生成物５５をそれ以上の操作を行わずに次の工程で直接使用した。

化合物５６。カーボネート５５（１．０当量）を１，４−ジオキサンに溶解させた。これに、水中のアレンドロン酸（１．２５当量）およびＥｔ_３Ｎ（６．０当量）の溶液を添加すると、直ちに黄色が生じた。２．５時間後、反応物をＨ_２Ｏで希釈し、層を分離させた。水相をジクロロメタンで抽出し（３回）、その後、これを凍結乾燥させると蝋状の黄色い固体が生じた。この生成物をＨ_２ＯからＭｅＯＨまでの勾配溶離を使用してＣ１８逆相フラッシュクロマトグラフィーにより単離すると、白色固体として化合物５６が得られた。^１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ ７．４５−７．４２ （ｍ， １Ｈ）， ７．３９−７．３２ （ｍ， ４Ｈ）， ７．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．６４ （ｂｓ， １Ｈ）， ５．７２−５．６６ （ｍ， １Ｈ）， ５．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．３， ６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．３， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７０ （ｂｓ， ４Ｈ）， ４．１１ （ｑ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０１−３．９７ （ｍ， １Ｈ）， ３．５５ （ｓ， ２Ｈ）， ３．４６−３．４０ （ｍ， １Ｈ）， ３．３１−３．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ９．２Ｈ−１．５２・Ｅｔ_３Ｎ塩からのプロトン）， ２．６３−２．５７ （ｍ， １Ｈ）， ２．３７−２．２６ （ｍ，４Ｈ）， ２．１９−２．０１ （ｍ， ５Ｈ）， １．６４−１．５６ （ｍ， ３Ｈ）， １．４３−１．１９ （ｍ， １０Ｈ）， １．２５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， １３．８Ｈ−１．５２・Ｅｔ_３Ｎ塩からのプロトン）．^１３Ｃ ＮＭＲ （１５０ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ １７４．８ （Ｃ_４）， １７３．９ （Ｃ_４）， １６９．７ （Ｃ_４）， １５４．９ （Ｃ_４）， １５０．９ （Ｃ_４）， １３７．８ （ＣＨ）， １３３．６ （ｔ， Ｊ_Ｆ ＝ ２５．５ Ｈｚ， Ｃ_４）， １３０．７ （ＣＨ）， １３０．１ （ＣＨ）， １２９．６ （Ｃ_４）， １２８．６ （ＣＨ）， １２５．８ （ｔ， Ｊ_Ｆ ＝ ６．１ Ｈｚ， ＣＨ）， １２４．２ （ＣＨ）， １２２．０ （ＣＨ）， １１９．５ （ｔ， Ｊ_Ｆ ＝ ２４８．２ Ｈｚ， Ｃ_４）， ７４．４ （ｔ， Ｊ_Ｆ ＝ ３２．８ Ｈｚ， ＣＨ）， ７３．８ （Ｃ_４）， ６０．３ （ＣＨ_２）， ５９．８ （ＣＨ）， ４５．３ （ＣＨ_２）， ４２．１ （ＣＨ_２）， ４０．６ （ＣＨ_２）， ３１．５ （ＣＨ_２）， ３０．０ （ＣＨ_２）， ２９．８ （ＣＨ_２）， ２８．９ （ＣＨ_２）， ２７．２ （ＣＨ_２）， ２６．６ （ＣＨ_２）， ２５．３ （ＣＨ_２）， ２５．０ （ＣＨ_２）， ２４．１ （ＣＨ_２）， １４．４ （ＣＨ_３）， ８．７ （ＣＨ_３）．ＨＲＭＳ （ＥＳＩ）：実測値（Ｍ＋Ｈ）^＋ 、８３３．２６０２（Ｃ_３６Ｈ_４９Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_１４）。 計算値、８３３．２６２７。ＱＴＯＦ−ＭＳにおいては遊離酸が検出された。

実施例９：４−ヒドロキシフェニル酢酸Ｃ１５ヒドロキシル結合体５６についての生物学的結果
結合体の血漿安定性。ＰＢＳ中の化合物５６のストック溶液からのアリコートを使用して、１００μＬの最終容量で、新鮮なラットの血漿中、および沸騰させたラットの血漿中の結合体の１００μｇ／ｍＬの試料を調製した。これらの試料を３７℃で２４時間インキュベートした。各時点で適切な試料をアセトニトリル（１００μＬ）とともに注射し、遠心分離した。上清溶液を、ＬＣ−ＭＳ（ＱＴＯＦ）を使用して、遊離したＥＰ４アゴニスト酸２の存在についての標準曲線との比較により分析した。エステル３は、新鮮なラットの血漿中、または沸騰させたラットの血漿中で迅速に酸２に加水分解する（ｔ_１／２＜５分）。

結合体５６の取り込みと放出。ＰＢＳ中の結合体５６（Ｓ．Ａｒｎｓ，Ａ．Ｍｏｒｅａｕ，Ｒ．Ｎ．Ｙｏｕｎｇ．Ｊ．Ｌａｂｅｌｌｅｄ Ｃｏｍｐｄ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０１０，２０５−２０７に記載されているようにＣ１５炭素で放射性標識されたもの、比放射能＝７．２５ｍＣｉ／ｍｍｏｌ）の溶液を調製した。この結合体を１０ｍｇ／ｋｇで雌のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに静脈内投与した。ラットの３連のセットを、６時間、４８時間、１６８時間、および３３６時間で安楽死させ、骨中のトリチウムレベルを生物学的酸化剤での長骨の焼却により測定した。最初の６時間の後には５．９％が取り込まれており、１４日後には最初の投与量のうちの１．４％が残っていた。

実施例１０：モデル結合体の調製

化合物５８の合成：化合物５７（２．１３７５ｇ、１４．０５ｍｍｏｌ）、１，８−ジアザビシクロウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）（２．５２１１ｍＬ、１６．８６ｍｍｏｌ）および臭化ベンジル（１．８３ｍＬ、１５．４５ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で３０ｍＬのＣＨ_３ＣＮ中に溶解させた。その後、１８時間還流させ、続いて１００ｍＬのＥｔＯＡｃを添加した。有機層を１００ｍＬ量の食塩水溶液で２回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。ロータリーエバポレーターを使用して溶媒を除去した。その後、ヘキサンとＥｔＯＡｃを用いた勾配フラッシュカラムを行って、生成物５８を収集した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ７．４０−７．２９ （ｍ， ５Ｈ）， ７．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．８３−６．７３ （ｍ， ２Ｈ）， ５．１３ （ｓ， ２Ｈ）， ３．６０ （ｓ， ２Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １３０．５， １２８．５， １２８．２， １１５．４， ６６．６， ４０．４。

化合物５９の合成：化合物５８（２．６７８６ｇ，１１．０５ｍｍｏｌ）とイミダゾール（１．６５５９ｇ、２４．３２ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下でジメチルアミノホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解させた。ＴＩＰＳＣ１（２．８ｍＬ、１３．２７ｍｍｏｌ）をこの反応混合物にゆっくりと添加した。１８時間後、ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去した。次に、５０ｍＬのＥｔＯＡＣを添加し、５０ｍＬの飽和クエン酸溶液を粗混合物に添加した。有機層を分離した。この有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄した。この有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。溶媒を減圧して除去した。その後、ヘキサン−ＥｔＯＡｃ勾配フラッシュカラムを行って、生成物５９を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ７．４２−７．３０ （ｍ， ５Ｈ）， ７．１９−７．１１ （ｍ， ２Ｈ）， ６．８８−６．８１ （ｍ， ２Ｈ）， ５．１５ （ｓ， ２Ｈ）， ３．６２ （ｓ， ２Ｈ）， １．３８−１．２０ （ｍ， ３Ｈ）， １．１６−１．０４ （ｍ， １８Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １７１．７， １５５．２， １３５．９， １３０．２， １２８．５， １２８．１， １２６．３， １１９．９， ６６．５， ４０．６， １７．９， １２．７。

化合物６０の合成：化合物５９（４．４０７１ｇ、１１．０６ｍｍｏｌ）とＰｄ／Ｃ（０．２２５４ｇ）を、水素雰囲気下で丸底フラスコに入れた。その後、このフラスコにＭｅＯＨ（１５ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）の混合物を添加した。２４時間撹拌した。次に、この混合物を、セライトプラグ（ｐｌｕｇｈ）を通して濾過した。ロータリーエバポレーターにより溶媒を除去した。その後、ヘキサン−ＥｔＯＡｃ勾配フラッシュカラムを行って、生成物６０を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ７．１２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５７ （ｓ， ２Ｈ）， １．３１−１．１７ （ｍ， ３Ｈ）， １．１３−１．０３ （ｍ， １８Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １７７．３， １５５．４， １３０．３， １２５．６， １２０．０， ４０．１， １７．９， １２．７。

化合物６２の合成：アルゴン雰囲気下で、６０（０．３７２０ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃ１_２（５ｍＬ）に溶解させた。続いて、（ＣＯＣｌ）_２（０．３１ｍＬ、３．６１ｍｍｏｌ）と２０μＬのＤＭＦを添加した。反応を一晩置いた。ロータリーエバポレーターによって溶媒と未反応の（ＣＯＣｌ）_２を除去した。１０ｍＬのトルエンをフラスコに添加し、ロータリーエバポレーターによって再び溶媒を除去した。６１の形成をＩＲによってチェックした。それ以上の精製は行わずに、反応の次の工程に進んだ。蒸留したＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）とＺｒＣｌ_４をフラスコに添加した。緑色の溶液が瞬時に形成された。その後、トリオキサン（０．１０８６ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）（５ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２に予め溶解させておいた）を反応混合物に添加した。緑色がゆっくりと消え、淡黄色の溶液が形成された。２時間後、１０ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ_３溶液を添加して反応を停止させた。その後、抽出を行い、有機層を収集した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。次に、ヘキサン−ＥｔＯＡｃ勾配カラムクロマトグラフィーを行って、生成物６２を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ７．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．６２ （ｓ， ２Ｈ）， ３．５４ （ｓ， ２Ｈ）， １．２５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．０， ７．３ Ｈｚ， ３Ｈ）， １．０５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．４， ３．６ Ｈｚ， １８Ｈ）。

化合物６３の合成：アルゴン雰囲気下で、６２（０．０８５０ｇ、０．２３８１ｍｍｏｌ）とＮａＩ（０．３５６９ｇ、２．３８１２ｍｍｏｌ）を乾燥アセトン（１０ｍＬ）に溶解させた。一晩還流させた。ロータリーエバポレーターを使用して溶媒を除去した。２０ｍＬのＥｔＯＡｃおよび２０ｍＬの水を添加して反応混合物を溶解させた。有機層を収集した。この有機層を飽和Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３溶液で洗浄して、混合物から過剰のヨウ素を除去した。その後、ヘキサン−ＥｔＯＡｃ勾配カラムクロマトグラフィーを行って生成物６３を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ７．１３−７．０７ （ｍ， ２Ｈ）， ６．８７−６．７８ （ｍ， ２Ｈ）， ５．９０ （ｓ， ２Ｈ）， ３．５７ （ｓ， ２Ｈ）， １．３０−１．１７ （ｍ， ３Ｈ）， １．１３−１．０６ （ｍ， １８Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１２６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １６９．９， １５５．５， １３０．３， １２４．８， １２０．１， １１９．９， ４０．５， ３０．７， １７．９， １２．６。

化合物６６の合成：アルゴン雰囲気下で、０．０３８５ｇ（０．１４４３ｍｍｏｌ）の６４と０．１２９５ｇ（０．２８９０６ｍｍｏｌ）の６３を１０ｍＬのＣ_２Ｈ_４Ｃｌ_２に溶解させた。その後、２４時間加熱して還流させた。ＴＬＣによって反応が完了したことを確認する。その後、ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去した。この時点で、反応混合物には６５と６６の混合物が含まれている。ＴＩＰＳ保護を除去するために、粗反応混合物を１０ｍＬのＴＨＦに溶解させた。２当量のＴＢＡＦを添加し、２時間撹拌した。次に、溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、続いてＣ_２Ｈ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨ（０〜２０％のＭｅＯＨ）を用いて勾配フラッシュを行った。化合物１８が全体で２６％の収率で単離された。

化合物６８の合成：アルゴン雰囲気下で、６６（０．０２７８ｇ、０．０８５７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬの乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解させた。Ｅｔ_３Ｎ（３６μＬ、０．２５７１ｍｍｏｌ）をこの混合物に添加した。６７（０．０２０７ｇ、０．１０２８６ｍｍｏｌ）（５ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解させた）をこの反応混合物に添加し、２４時間撹拌した。次に、ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去し、ヘキサンとＥｔＯＡｃを用いて（シリカ上で）勾配フラッシュカラムを行った。純粋な生成物６８が得られた。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ８．３９−８．２９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５４−７．４７ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４０−７．２４ （ｍ， ７Ｈ）， ７．２２−７．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ６．０５ （ｄ， Ｊ ＝ １２．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．３８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．６１ （ｓ， ２Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １６９．６， １５５．２， １５０．９， １５０．１， １４５．７， １３３．６， １３０．７， １３０．５， １３０．２， １２９．２， １２８．９， １２８．５， １２７．９， １２７．６， １２６．２， １２５．４， １２１．７， １２１．２， １１５．８， ， ６７．０， ３９．７， ３１．８。

化合物６９の合成：アルゴン雰囲気下で、ＤＭＦに、６８（０．０１８９ｇ、０．０３８６１ｍｍｏｌ）、ジヨードプロピルエチルアミン（ｄｉｉｄｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）（３４μＬ、０．１９３０７ｍｍｏｌ）、およびベンジルアミン（５μＬ、０．０４２４７５ｍｍｏｌ）を溶解させた。２４時間撹拌した。次に、ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去し、ヘキサン−ＥｔＯＡｃ系を用いて勾配フラッシュシリカカラムを行うと、純粋な６９が得られた。^１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ７．４４−７．３０ （ｍ， ７Ｈ）， ７．２９−７．２２ （ｍ， ３Ｈ）， ７．１２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．３ Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．７７ （ｓ， １Ｈ）， ５．４２ （ｓ， １Ｈ）， ４．４７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．３， ６．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６４ （ｓ， ２Ｈ）。

化合物７０の合成：０．０２１０ｇ（０．０４２９ｍｍｏｌ）の６８をジオキサン（１０ｍＬ）に溶解させた。アレンドロン酸（０．０１２８ｇ、０．０５１４９ｍｍｏｌ）とＥｔ_３Ｎ（３０μＬ、０．２１４５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬの水に別々に溶解させた。次に、水溶液をジオキサン溶液に添加し、２４時間撹拌した。２５ｍＬの水をこの反応混合物に添加した。この溶液を２０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回洗浄した。次に、水層を置いて凍結乾燥させた。１Ｈによって固体（ｓｏｉｄ）をチェックしたところ、生成物が存在すると思われた。その後、これをＣ１８ ｓｅｐ−ｐａｃｋに通し、溶媒系として水−ＭｅＯＨを使用して生成物を精製すると、精製された生成物が得られた。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， Ｄ_２Ｏ） δ ７．３８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ４Ｈ）， ７．３４−７．２７ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．１０ （ｓ， １Ｈ）， ６．３５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．３５ （ｓ， ２Ｈ）， ２．２２ （ｓ， ４Ｈ）， ２．１１−１．７９ （ｍ， ２Ｈ）。

実施例１１：結合体７５の調製

化合物７１の合成：化合物５７（３．４１ｇ、２２．４１２ｍｍｏｌ）とＢｕ_４Ｎ．ＨＳＯ_４（０．７６０９ｇ、２．２４１２ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのＣ_２Ｈ_２Ｃｌ_２中で混合した。続いて、ＮａＨＣＯ_３溶液（３．７６５６ｇ、４４．８２４ｍｍｏｌ、これを４０ｍＬの水に溶解させた）をこの混合物にゆっくりと添加した。この時点で、ＣＯ_２の発生により気泡が発生した。次に、１．１３３６ｍＬのＣｌＣＨ_２ＯＳＯ_２Ｃｌ（１１．２０６ｍｍｏｌ）をこの反応混合物にゆっくりと添加した。この反応物を一晩置いた。翌朝、有機層を収集した。水層をＥｔＯＡｃで１回抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。ロータリーエバポレーターによる溶媒の除去後、生成物７１を、シリカカラムを用いた勾配カラム（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）クロマトグラフィーにより精製した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ７．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７０ （ｓ， ２Ｈ）， ４．９７ （ｓ， １Ｈ）， ３．６３ （ｓ， ２Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１２６ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １３０．６， １１５．６， ６８．９， ３１．６。

化合物７２の合成：アルゴン雰囲気下で、化合物２３（１．７９８８ｇ、８．９６６２ｍｍｏｌ）を０℃でＣＨ_２Ｃｌ_２（１５ｍＬ）に溶解させた。１．４９９６ｍＬ（１０．７５９４ｍｍｏｌ）のＥｔ_３Ｎを反応混合物に添加した。続いて、５ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解させた６７（２．１６８０ｇ、１０．７５９４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物をゆっくりと室温に到達させ、２４時間撹拌した。ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去し、勾配（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）カラム（シリカ）クロマトグラフィーを行って、純粋な生成物７２を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ８．３７−８．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５５−７．４６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．３， ２．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７４ （ｓ， ２Ｈ）， ３．７６ （ｓ， ２Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １６９．２， １５５．２， １５０．９， １５０．０， １３１．２， １３０．７， １２５．４， １２１．７， １２１．０， ６９．０， ４０．２。

化合物７３の合成：アルゴン雰囲気下で、７２（０．６７８７ｇ、１．８５５８ｍｍｏｌ）を乾燥アセトン（２０ｍＬ）に溶解させた。ＮａＩ（２．７８１６ｇ、１８．５５８ｍｍｏｌ）をフラスコに添加し、１時間還流させた。次に、ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去した。５０ｍＬの飽和Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３溶液と５０ｍＬのＥｔＯＡｃをフラスコに添加した。次に、有機層を抽出した。この有機層を食塩水溶液で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去した。次いで、ヘキサンとＥｔＯＡｃを用いて勾配シリカカラムを行って、純粋な生成物７３を収集した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ８．３９−８．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５５−７．４６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３２−７．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ５．９５ （ｓ， ２Ｈ）， ３．７１ （ｓ， ２Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １６９．２， １５５．２， １５０．９， １５０．０， １３１．１， １３０．７， １２５．４， １２１．７， １２１．０， ４０．５， ３０．３。

アルゴン雰囲気下で、７１（０．０８６５ｇ、０．４３１１ｍｍｏｌ）を乾燥アセトン（１５ｍＬ）に溶解させ、この溶液にＮａＩ（０．６４６３ｇ、４．３１１６ｍｍｏｌ）を添加した。次に、この混合物を一晩還流させた。ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去した。３０ｍＬのＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３飽和溶液と３０ｍＬのＥｔＯＡｃを添加して全てを溶解させた。有機層を抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。ロータリーエバポレーターによって溶媒を除去し、粗７４を収集した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ７．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．８７−６．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ５．９２ （ｓ， ２Ｈ）， ３．８３ （ｓ， １Ｈ）， ３．５９ （ｓ， ２Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ２１０．９， １６９．９， １５５．２， １３０．５， １２４．４， １１５．６， ６９．６， ４０．３６。次に、この化合物を１０ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解させ、ジイソプロピルエチルアミン（０．２２ｍＬ、１．２９３５ｍｍｏｌ）をこの溶液に添加した。続いて、６７（０．１０４２ｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）を添加した。１時間後、溶媒を除去した。ＴＬＣによると、粗生成物は、極めて近い保持時間を持つ非常に多くの化合物の組み合わせであると思われる。しかし、生成物７３のピークは存在した。他の方法により高収率で７３が得られるので、それ以上の精製は行わなかった。

化合物６８の合成：アルゴン雰囲気下で、６４（０．１９９５ｇ、０．３８３６１ｍｍｏｌ）、７３（０．１７５３ｇ、０．３８３６ｍｍｏｌ）、および５０ｍＬのＣ_２Ｈ_４Ｃｌ_２を丸底フラスコに入れ、２４時間還流させた。溶媒を除去し、ヘキサンとＥｔＯＡｃを用いた勾配シリカカラムを行った。生成物６８ａと６８ｂの２種類の異性体を単離した。

６８ａ ^１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ８．３４−８．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５５−７．４５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４１−７．２１ （ｍ， ９Ｈ）， ６．４７ （ｓ， ２Ｈ）， ４．２９ （ｓ， ２Ｈ）， ３．７４ （ｓ， ２Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １６９．３， １６６．６， １６１．８， １５５．２３ （ｓ）， １５１．０， １５０．１， １３５．８， １３０．９， １３０．７， １２８．８， １２７．２， １２５．５， １２１．８， １２１．１， ７１．６， ３９．８， ３１．７。

６８ｂ ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ８．３６−８．２８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５３−７．４２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３６−７．２７ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２６ （ｄ， Ｊ ＝ １．７ Ｈｚ， ４Ｈ）， ７．２０−７．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ６．０５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３６ （ｓ， ２Ｈ）， ３．５９ （ｓ， ２Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １７１．１， １６９．６， １５５．２， １５４．６， １５０．９， １５０．２， １４５．７， １３３．６， １３０．７， １２９．２， １２８．５， １２７．９， １２５．４， １２１．７， １２１．２， ６７．０， ３９．７， ３１．６。

化合物７４の合成
アルゴン雰囲気下で、７４（０．０７７７ｇ、０．１２５４ｍｍｏｌ）、７３（０．２２９２ｇ、０．５０１７ｍｍｏｌ）、および１０ｍＬのＣ_２Ｈ_４Ｃｌ_２を丸底フラスコに入れ、２４時間還流させた。溶媒を除去し、ヘキサンとＥｔＯＡｃを用いて勾配シリカカラムを行って生成物７４を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ８．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ９．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．５６−７．４０ （ｍ， ７Ｈ）， ７．３５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３０−７．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ６．４６ （ｓ， ２Ｈ）， ５．６９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６８−４．４９ （ｍ， １Ｈ）， ４．１０−３．９８ （ｍ， １Ｈ）， ３．７５ （ｓ， ２Ｈ）， ３．５０−３．２６ （ｍ， １Ｈ）， ２．９６−２．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８３−２．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４５−２．２７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２５−２．１２ （ｍ， １Ｈ）， １．７９ （ｓ， ２Ｈ）， １．６８ （ｓ， ２Ｈ）， １．５４−１．３４ （ｍ， ４Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ １７４．８， １６９．２， １６７．８， １５５．２， １５０．９， １５０．１， １４５．７， １３５．２， １３１．０， １３０．７， １３０．３， １２８．３， １２７．５， １２５．９， １２５．４， １２１．７， １２１．０， ７４．３， ７４．０， ７１．４， ６０．１， ４０．５， ３９．８， ３０．０， ２８．５， ２７．５， ２７．０， ２６．３， ２５．３。

同様の手順で、３Ｈで標識した化合物７４の合成を行った。

化合物７５の合成：丸底フラスコ中で、化合物７４（０．０３６５ｇ、０．０４８７ｍｍｏｌ）をジオキサン（４ｍＬ）に溶解させた。別のフラスコの中で、アレンドロン酸（０．０１４６ｇ、０．０５８５ｍｍｏｌ）とＥｔ_３Ｎ（４１μＬ、０．２９２５ｍｍｏｌ）を４ｍＬの水に溶解させた。この水溶液はこの時点でｐＨ８を有していた。次に、この水溶液をジオキサン溶液に添加した。必要に応じてさらにＥｔ_３Ｎを添加することにより、この溶液のｐＨを８に維持した。混合物を２時間撹拌した。２５ｍＬの水と２５ｍＬのＥｔＯＡｃを添加した。水層を収集した。その後、この粗混合物を凍結乾燥させた。Ｃ１８ ｓｅｐ−ｐａｃｋカラムに通すことによりさらなる精製を行った。純粋な化合物を、生成物画分の凍結乾燥後に収集した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ） δ ７．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １８．８， ３．３ Ｈｚ， ５Ｈ）， ７．３２−７．２１ （ｍ， １Ｈ）， ７．１６−６．９８ （ｍ， １Ｈ）， ６．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ５．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７９−５．５７ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７４ （ｓ， ２Ｈ）， ２．９４−２．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．５， ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ３．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２９−１．９１ （ｍ， ４Ｈ）， １．８８−１．５９ （ｍ， ４Ｈ）， ０．９２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １Ｈ）。

同様の手順で、３Ｈで標識した化合物７５の合成を行った。

化合物７４〜７５のさらなる合成方法

化合物７４の合成
アルゴン雰囲気下で、１（０．４７７３ｇ、０．４６０１ｍｍｏｌ）、７３（１．２６２１ｇ、２．７６０６ｍｍｏｌ）および５ｍＬのＣ_２Ｈ_４Ｃｌ_２を丸底フラスコに入れ、２４時間還流させた。溶媒を減圧して除去し、ヘキサンとＥｔＯＡｃを用いて勾配シリカカラムを行って生成物７４ａと７５ｂを単離した。７４ａ ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ８．３９−８．２９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５５−７．４１ （ｍ， ５Ｈ）， ７．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２６ （ｄ， Ｊ ＝ ２．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．４６ （ｓ， １Ｈ）， ５．６８ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６７−４．５３ （ｍ， １Ｈ）， ４．０９−４．００ （ｍ， １Ｈ）， ３．７５ （ｓ， １Ｈ）， ３．４７−３．３５ （ｍ， １Ｈ）， ２．９６−２．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８１−２．６９ （ｍ， １Ｈ）， ２．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ５．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２６−２．１２ （ｍ， １Ｈ）， １．８５−１．７３ （ｍ， ２Ｈ）， １．７３−１．６３ （ｍ， ２Ｈ）， １．４９−１．３５ （ｍ， ４Ｈ）， １．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．０， ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ）。７４ｂ ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ８．３８−８．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５６−７．４１ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３６−７．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２８−７．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ６．２３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．２， ６．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６６−４．５２ （ｍ， １Ｈ）， ４．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３ （ｓ， ２Ｈ）， ３．４８−３．３０ （ｍ， １Ｈ）， ２．９４−２．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８１ （ｓ， ２Ｈ）， ２．４４−２．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２３ （ｓ， １Ｈ）， １．８０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．８， ５．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．９， ９．４ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．４３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．９， ６．８ Ｈｚ， ５Ｈ）， ０．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．７ Ｈｚ， １Ｈ）。

同様の手順で、３Ｈで標識した化合物７４の合成を行った。

化合物７５ａの合成
手順Ａ：丸底フラスコ中で、化合物７４ａ（０．０３６１ｇ、０．０４８２ｍｍｏｌ）を１ｍＬのＤＭＦに溶解させた。その後、０．０３３６ｇ（０．０５７９ｍｍｏｌ）のアレンドロン酸モノテトラ−ｎ−ブチルアンモニウム塩とＥｔ_３Ｎ（４１μＬ、０．２８９５ｍｍｏｌ）をこのフラスコに添加した。１時間撹拌した。溶媒を凍結乾燥技術により除去した。この粗化合物をＮａ^＋イオン交換カラムに通した。これにより、ニトロフェノールと共に生成物のＮａ^＋塩が残った。この粗化合物を水に溶解させ、水層をエーテルで２回洗浄して、望ましくないニトロフェノールを除去した。水層を収集し、この水層を凍結乾燥させると、生成物のＮａ^＋塩形態が得られた。Ｈ^＋イオン交換カラムに通過させた後、この塩を遊離形態７５ａに変換させることができた。^１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ） δ ７．４８ （ｄｔ， Ｊ ＝ １４．０， ６．７ Ｈｚ， ５Ｈ）， ７．２６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．０６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．６８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２６．０， ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８１−３．６３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３７ （ｓ， １Ｈ）， ３．２３ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７３ （ｓ， １Ｈ）， ２．４２−２．２９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２２ （ｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．１２ （ｄ， Ｊ ＝ １５．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０５−１．８７ （ｍ， ２Ｈ）， １．７７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．７， ７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７０ （ｓ， １Ｈ）， １．５２−１．１９ （ｍ， ７Ｈ）． ^１３Ｃ ＮＭＲ （１２６ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ） δ １７６．１， １６９．７， １６７．３， １３４．３， １２９．９， １２９．７， １２７．８， １２５．８， １２１．５， ７３．８， ７１．３， ６０．４， ４１．１， ４０．２， ３９．０， ２９．６， ２８．１， ２７．３， ２６．５， ２５．９， ２４．９， ２４．５． ＨＲＭＳ計算値８５９．２６３９ （Ｃ_３５Ｈ_４６Ｆ_２Ｎ_６Ｏ_１３Ｐ_２ ＋ Ｈ），実測値８５９．２６２７。

手順Ｂ：化合物７４ａを０．２ｍＬのジオキサンに溶解させた。０．２ｍＬの水中のアレンドロン酸（０．０５７９ｍｍｏｌ）とＥｔ_３Ｎ（０．１５１８ｍｍｏｌ）のストック溶液をこの溶液に添加した。続いて、さらに２４μＬのＥｔ_３Ｎ（０．１７３７ｍｍｏｌ）をこの溶液に添加した。この溶液を１時間撹拌した。この溶液を凍結乾燥させ、これにより、粗生成物に対して過剰のＥｔ_３Ｎを除去した。この時点では、粗生成物に生成物２７ａ、Ｅｔ_３Ｎ、およびニトロフェノールが含まれていた。粗生成物を水に溶解させた。この水溶液をエーテルで洗浄して過剰のニトロフェノールを除去した。次に、水層を凍結乾燥させた。粗生成物を、５０−５０の水−メタノール混合物に溶解させた。次いで、酸イオン交換カラムに通過させて、生成物７５ａを単離した。

同様の手順で、^３Ｈで標識した化合物７５ａの合成を行った。

化合物７５ｂの合成
化合物７４ｂ（０．２６８１ｇ、０．３５８１ｍｍｏｌ）を１．５ｍＬのジオキサンに溶解させた。１．５ｍＬの水中のアレンドロン酸（０．４２９７ｍｍｏｌ）とＥｔ_３Ｎ（０．８５９４ｍｍｏｌ）のストック溶液をこの溶液に添加した。続いて、さらに１８１μＬのＥｔ_３Ｎ（１．２８９０ｍｍｏｌ）をこの溶液に添加した。この溶液を１時間撹拌した。この溶液を凍結乾燥させ、これによりこの粗生成物から過剰のＥｔ_３Ｎを除去した。この時点で、この粗生成物には、生成物７５ｂ、Ｅｔ_３Ｎおよびニトロフェノールが含まれていた。粗生成物を水に溶解させた。この水溶液をエーテルで洗浄して、過剰量のニトロフェノールを除去した。次に、水層を凍結乾燥させた。１Ｈ ＮＭＲとＨＲＭＳによって生成物７５ｂを確認した。^１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ） δ ７．５８−７．３６ （ｍ， ５Ｈ）， ７．２８ （ｄ， Ｊ ＝ ３３．７， ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．０４ （ｄ， Ｊ ＝ ２３．０， ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．３５ （ｓ， ２Ｈ）， ５．６９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２６．１， ７．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３ （ｓ， １Ｈ）， ３．４８ （ｓ， １Ｈ）， ３．３８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．７， ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １９．３， １１．７ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．８３ （ｓ， １Ｈ）， ２．７８−２．６３ （ｍ， １Ｈ）， ２．３５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．５， ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．９， ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．１７−１．９６ （ｍ， ７Ｈ）， １．７７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １５．２， ７．６ Ｈｚ， ３Ｈ）， １．４１ （ｔ， Ｊ ＝ ２５．３ Ｈｚ， ４Ｈ）． ＨＲＭＳ計算値８５７．２４９３ （Ｃ_３５Ｈ_４６Ｆ_２Ｎ_６Ｏ_１３Ｐ_２， Ｍ−Ｈイオン）、実測値８５７．２４８８。

全ての引用文献は、本明細書中で参考として援用される。

本発明は、１つ以上の実施形態に関して記載されている。しかし、多数の変形形態および改変を、特許請求の範囲において定義される本発明の範囲から逸脱することなく行うことができることは当業者に明らかであろう。

Claims (19)

1. 式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩であって、
   式中、
   Ｘは、−ＣＨ_２−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり、
   Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり、
   Ａｒは、必要に応じて置換されているアリールであり、
   Ｗは、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｖ、または−Ｃ（Ｏ）ＯＶであり、
   Ｙは、−Ｃ（Ｒ_１ ） _２ −Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｃ（ＰＯ_３Ｈ_２）_２ＯＨに結合された、必要に応じて置換されているテトラゾールであって、ここで、各Ｒ_１は、独立してＨまたは１〜１０個の炭素原子を含むアルキルであり、そしてｍは、１、２、３、４、５、または６であり、ｎは、１、２、または３であり、
   Ｖは、必要に応じて置換されている１〜１０個の炭素原子を含むアルキル、必要に応じて置換されているアリール、または必要に応じて置換されているヘテロアルキルであり、そして
   は、二重結合または単結合である、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩。
2. 式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩であって、
   式中、
   Ｘは、−ＣＨ_２−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり、
   Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり、
   Ａｒは、必要に応じて置換されているアリールであり、
   Ｗは、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｖ、または−Ｃ（Ｏ）ＯＶであり、
   Ｙは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１であり、
   ｎは、１、２、または３であり、
   Ｖは、必要に応じて置換されている１〜１０個の炭素原子を含むアルキル、必要に応じて置換されているアリール、または必要に応じて置換されているヘテロアルキルであり、
   Ｒ_１は、−（ＣＲ_５Ｒ_６）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｃ（ＰＯ_３Ｈ_２）_２ＯＨであり、Ｒ_５は１〜１０個の炭素原子を含むアルキルであり、Ｒ_６はＨまたは１〜１０個の炭素原子を含むアルキルであり、そしてｍは、１、２、３、４、５、または６であり、
   そして
   は、二重結合または単結合である、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩。
3. 式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩であって、
   式中、
   Ｘは、−ＣＨ_２−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり、
   Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり、
   Ａｒは、必要に応じて置換されているアリールであり、
   Ｙは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１であり、
   Ｗが
   であり、
   ｍが、１、２、３、４、５、または６であり、そして
   Ｒ_１が、Ｈまたは１〜１０個の炭素原子を含むアルキルであり、
   ｎが、１、２または３であり、
   は、二重結合または単結合であり、
   ここで、該化合物は、
   ではない、
   式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩。
4. 式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩であって、
   式中、
   Ｘは、−ＣＨ_２−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり、
   Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり、
   Ａｒは、必要に応じて置換されているアリールであり、
   Ｙが、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１、テトラゾール、またはＮ−トリチル−テトラゾールであり、
   Ｗが
   であり、
   Ｒ_７とＲ_８が、それぞれ独立して、Ｈ、１〜１０個の炭素原子を含むアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ_３であり、
   ｍが、１、２、３、４、５、または６であり、そして
   ｏが、０、１、２、３、４、５、または６であり、
   ｎが、１、２または３であり、
   Ｒ_１が、Ｈまたは必要に応じて置換されている１〜１０個の炭素原子を含むアルキルであり、
   は、二重結合または単結合である、
   式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容され得る塩。
5. 式ＩＩＩ、式ＩＶもしくは式Ｖのいずれか一つに記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩
   ［式中、
   Ｘは、−ＣＨ_２−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり得、
   Ｒ_２とＲ_３は、それぞれ独立して、−Ｈまたはハロであり得、
   Ａｒは、必要に応じて置換されているアリールであり、
   ｎは１、２、または３であり得、
   Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈ、１〜１０個の炭素原子を含むアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ_３であり得、
   ｍは、１、２、３、４、５、または６であり得、
   ｏは、０、１、２、３、４、５、または６であり得、
   Ｚは、ＣＯＯＲ_１、テトラゾール、またはＮ−トリチル−テトラゾールであり得、
   Ｒ_１は、Ｈ、または１〜１０個の炭素原子を含む必要に応じて置換されているアルキルであり得、そして
   は、二重結合または単結合である］
   
   ［式中、
   Ｘが、−ＣＨ_２−、−Ｓ−、−Ｏ−、または−ＮＨ−であり、
   Ｒ_１とＲ_２とがそれぞれ独立して、Ｈ、１〜１０個の炭素原子を含むアルキル、シクロアルキル基、またはＣＦ_３であり、
   Ｒ_３が、存在しないか、または電子供与基または電子求引基であって、該電子求引基が４−ＮＯ_２、２，４−ジＮＯ_２またはＦから選択され、該電子供与基がＯＣＨ_３、ＯＲまたはＮＲ_２から選択され、そしてＲが１〜１０個の炭素原子を含むアルキルであり、
   ｍが、１、２、または３であり、
   ｎが、１、２、３、または４であり、そして
   ｏが、１、２、３、または４である］。
6. 前記化合物がインビボで加水分解性である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
7. 前記化合物が加水分解前は不活性である、請求項６に記載の化合物。
8. 前記化合物が加水分解後は活性である、請求項６または７に記載の化合物。
9. 担体と合わせて請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を含む、組成物。
10. 薬学的に許容され得る担体と合わせて請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
11. 骨または関連部位に化合物を選択的に送達することを必要とする被験体に対して、骨または関連部位に化合物を選択的に送達するための組成物であって、有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または請求項１０に記載の医薬組成物を含む組成物。
12. 前記関連部位に、処置が必要な骨に隣接する部位が含まれる、請求項１１に記載の組成物。
13. 前記処置が必要な骨が、若木骨折、開放骨折、外側骨折、浸潤性腫瘍により生じる病的骨折、圧迫骨折、および骨の再編成のために外科的処置が必要な骨折からなる群より選択される、請求項１１に記載の組成物。
14. 処置または予防の必要がある被験体において、異常なもしくは過剰な骨量減少、または異常なもしくは低い骨吸収、または異常なカルシウム代謝と関係がある状態を処置あるいは予防するための組成物であって、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または請求項１０に記載の医薬組成物を含む組成物。
15. 前記状態が、骨粗鬆症、パジェット病、異常に増大した骨代謝回転、骨移植、歯周病、歯槽の骨量減少、歯牙欠損、骨折、人工関節周囲骨溶解、骨形成不全症、および転移性骨疾患からなる群より選択される、請求項１４に記載の組成物。
16. 前記骨粗鬆症がグルココルチコイド誘導性骨粗鬆症である、請求項１５に記載の組成物。
17. 前記被験体がヒトである、請求項１１〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
18. 以下の、
    ａ）Ｃ−１カルボキシル基またはテトラゾイル部分を有しているＥＰ４アゴニストを提供する工程、
    ｂ）遊離の第一級アミノ部分または第二級アミノ部分を持つビスホスホネートを提供する工程、および
    ｃ）前記ＥＰ４アゴニストと前記ビスホスホネートとを結合させる工程
    を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を作製する方法。
19. 以下の化学構造：
    
    で表される化合物またはその薬学的に許容され得る塩。