JP6067019B2 - 代謝的に活性な細胞の酸化還元状態を評価するための化合物及び方法、ならびにnad(p)/nad(p)hを測定するための方法 - Google Patents
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Description
本出願は、2011年9月2日に出願された米国仮特許出願第61/530,559号(参照により本明細書に組み込まれる)の利益を主張するものである。
本発明は、代謝的に活性な細胞の酸化還元状態を評価するための化合物及び方法、ならびに酸化還元を定義する補因子NAD(P)/NAD(P)Hの測定を組み合わせることにより、酵素活性及び/又は代謝産物レベルを評価するための方法を提供する。
NAD(P)/NAD(P)H
定義
化合物
による化合物であって、
式中、Aは、生物発光レポーター部分であり、
R14は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、C2-4アミドであり、
R9及びR10は、C1-4アルキルから独立して選択され、
R11、R12、及びR13は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、ブロモ、クロロ、もしくはアミノから独立して選択されるか、又はR11及びR12は、縮合フェニル環を形成することができ、
Xは、O、NH、又は直接結合であり、
Lは、直接結合、又は−C6(R16)4CH2−、又は(CH2)mC(R17)2(CH2)n−Y−C(O)−であり、
R16は、独立して、H、ハロゲン、CH3、OCH3、又はNO2であり、
R17は、独立して、H、C1-4アルキルであるか、又は両方のR17が一緒になって3〜7個の炭素を有するアルキル環を形成することができ、
mは、0〜2の整数であり、
nは、0〜2の整数であり、
Yは、O又はNR15であり、
R15は、H、C1-4アルキル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドである、化合物を提供する。
による化合物であって、
式中、R1は、H、C1-4アルキル、C1-4ヒドロキシルアルキル、C3-7環式環、アリール、ベンジル、又は置換ベンジル環、複素環、ヘテロアリール、及び(CH2)n’−P(Ph)3であり、
R4及びR5は、H、ハロゲン、メチル、及びトリフルオロメチルから独立して選択され、
R14は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
R9及びR10は、C1-4アルキルから独立して選択され、
R11、R12、及びR13は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、ブロモ、クロロ、もしくはアミノから独立して選択されるか、又はR11及びR12は、縮合フェニル環を形成することができ、
Xは、O、NH、又は直接結合であり、
Lは、直接結合、又は−C6(R16)4CH2−、又は(CH2)mC(R17)2(CH2)n−Y−C(O)−であり、
R16は、独立して、H、ハロゲン、CH3、OCH3、又はNO2であり、
R17は、独立して、H、C1-4アルキルであるか、又は両方のR17が一緒になって3〜7個の炭素を有するアルキル環を形成することができ、
mは、0〜2の整数であり、
nは、0〜2の整数であり、
Yは、O又はNR15であり、
R15は、H、C1-4アルキル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
n’は、2〜7の整数である、化合物も提供する。
による化合物であって、
式中、R4及びR5は、H、ハロゲン、メチル、及びトリフルオロメチルから独立して選択され、
R14は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
R9及びR10は、C1-4アルキルから独立して選択され、
R11、R12、及びR13は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、ブロモ、クロロ、もしくはアミノから独立して選択されるか、又はR11及びR12は、縮合フェニル環を形成することができ、
Xは、O、NH、又は直接結合であり、
Lは、直接結合、又は−C6(R16)4CH2−、又は(CH2)mC(R17)2(CH2)n−Y−C(O)−であり、
R16は、独立して、H、ハロゲン、CH3、OCH3、又はNO2であり、
R17は、独立して、H、C1-4アルキルであるか、又は両方のR17が一緒になって3〜7個の炭素を有するアルキル環を形成することができ、
mは、0〜2の整数であり、
nは、0〜2の整数であり、
Yは、O又はNR15であり、
R15は、H、C1-4アルキル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドである、化合物も提供する。
による化合物であって、
式中、R2は、CH2−アリール又は−CH2−ヘテロアリールから選択され、
R5は、−CH2−アリール又は−CH2−ヘテロアリールから選択され、
R7は、アリール又はヘテロアリールから選択され、
R14は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
R9及びR10は、C1-4アルキルから独立して選択され、
R11、R12、及びR13は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、ブロモ、クロロ、もしくはアミノから独立して選択されるか、又はR11及びR12は、縮合フェニル環を形成することができ、
Xは、O、NH、又は直接結合であり、
Lは、直接結合、又は−C6(R16)4CH2−、又は(CH2)mC(R17)2(CH2)n−Y−C(O)−であり、
R16は、独立して、H、ハロゲン、CH3、OCH3、又はNO2であり、
R17は、独立して、H、C1-4アルキルであるか、又は両方のR17が一緒になって3〜7個の炭素を有するアルキル環を形成することができ、
mは、0〜2の整数であり、
nは、0〜2の整数であり、
Yは、O又はNR15であり、
R15は、H、C1-4アルキル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドである、化合物も提供する。
化合物の合成
使用方法
代謝的に活性な細胞の酸化還元状態を測定するための方法
NAD(P)/NAD(P)Hのレベル及び比率を測定するための方法
酵素活性を測定するための方法
細胞代謝産物を測定するための方法
一般的な情報
の化合物であって、
式中、Aは、限定されないが、フルオレセイン誘導体、ローダミン誘導体、ロドール誘導体、レゾルフィン、又はクレシルバイオレットを含む蛍光レポーター部分であり、
R14は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
R9及びR10は、C1-4アルキルから独立して選択され、
R11、R12、及びR13は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、ブロモ、クロロ、もしくはアミノから独立して選択されるか、又はR11及びR12は、縮合フェニル環を形成することができ、
Xは、O、NH、又は直接結合であり、
Lは、直接結合、又は−(C6H4)CH2−、又は(CH2)mC(R17)2(CH2)n−Y−C(O)−であり、
R16は、独立して、H、ハロゲン、CH3、OCH3、又はNO2であり、
R17は、独立して、H、C1-4アルキルであるか、又は両方のR17が一緒になって3〜7個の炭素を有するアルキル環を形成することができ、
Yは、O又はNR15であり、
R15は、H、C1-4アルキル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
mは、0〜2の整数であり、
nは、0〜2の整数である、化合物も好適である。
実施例
実施例1.PBI1482の合成
メタンスルホン酸50ml中の2,3,5−トリメチルヒドロキノン(10g、0.0657mol)及びメチル1,1−ジメチルアクリレート(7.5g、0.0657)の混合物を70℃まで2時間加熱した。室温まで冷却してから、混合物を100mlの氷冷水に注ぎ入れた。得られた混合物を酢酸エチルで3回抽出し、合わせた有機層を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。大半の酢酸エチルを除去した後、混合物を−20℃に冷却した。濾過により淡白色の固体を収集し、冷酢酸エチルで洗浄し、真空オーブンで乾燥させた。収率は75%であった。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δppm:4.69(s,1H,OH),2.59(s,2H,CH2),2.53(s,3H,CH3),2.35(s,3H,CH3),2.20(s,3H,CH3),1.57(s,3H,CH3),1.44(s,3H,CH3);MS(m/e):235(M+)。
アセトニトリル(600ml)、アセトン(50ml)、及び水(300ml)の混合物中の6−ヒドロキシ−4,4,5,7,8−ペンタメチルクロマン−2−オン(15g、0.064mol)の溶液に、NBS(11.4g、0.064mol)を加えた。得られた混合物を室温で30分撹拌した。ほとんどの有機溶媒を除去した後、濾過により黄色固体を収集し、水で洗浄し、真空乾燥して96%の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ3.0(s,2H,CH2),2.13(s,3H,CH3),1.94(s,3H,CH3),1.92(s,3H,CH3),1.44(s,6H,CH3);MS(m/e):251(M+)。
10mlの乾燥THF中の3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタン酸(0.72g、3.09mmol)及びクロロギ酸イソブチル(0.44g、3.24mmol)の溶液に、N−メチルモルホリン(0.34ml)を0℃で加えた。得られた混合物を0℃で30分撹拌し、6−アミノ−2−シアノベンゾチアゾール(0.36g、2.06mmol)を加えた。得られた混合物を一晩撹拌した。溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するフラッシュシリカカラムを用いて化合物を直接精製し、10%の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.57(d,J=2.0,2H),8.06(d,J=9.0,2H),7.67(s,1H),7.40(dd,J=2.1,8.9,1H),3.08(s,2H,CH2),2.22(s,3H,CH3),2.22(s,3H,CH3),1.99(s,3H,CH3),1.97(s,3H,CH3),1.50(s,6H,CH3)。MS(m/e):408(M+)。
MeOH/CH2Cl2(10ml)中のN−(2−シアノベンゾ[d]チアゾール−6−イル)−3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタンアミド(0.05g、0.128mmol)の溶液に、水3ml中のD−システイン(0.45g、0.256mmol)及びTEA(0.070ml)を加えた。混合物を10分撹拌し、酢酸を用いてpHをpH6に調整した。CH2Cl2を除去した後、溶出剤として0.1%TFA/アセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を精製した。 1H NMR(300MHz,CD3CN)δ8.67(s,br,1H,NH),8.38(s,1H),7.95(d,J=8.9,1H),7.48(d,J=8.9,1H),5.37(t,J=9.2,1H),3.74(d,J=9.2,2H,SCH2),3.08(s,2H,CH2),2.12(s,3H,CH3),1.94(s,6H,CH3),1.48(s,6H,CH3);MS(m/e):512.3(M+);HPLC純度:330nmで97%。
実施例2.PBI 4200の合成
20mlの乾燥THF中の3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタン酸(1.75g、7.46mmol)及びクロロギ酸イソブチル(1.11g、8.12mmol)の溶液に、N−メチルモルホリン(0.82ml)を0℃で加えた。得られた混合物を0℃で30分撹拌し、4−アミノベンジルアルコール(1.38g、11.2mmol)を加え、得られた混合物を一晩撹拌した。濾過により固体を除去した後、溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を直接精製し、74%の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ7.40(d,J=9,2H),7.28(d,J=9,2H),7.19(s,br,1H,NH),4.61(s,2H,CH2O),2.99(s,2H,CH2),2.14(s,3H,CH3),1.97(s,6H,CH3),1.55(s,3H,CH3),1.48(s,3H,CH3)。MS(m/e):356(M+)。
塩化メチレン(30ml)中のN−(4−(ヒドロキシメチル)フェニル)−3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタンアミド(1.35g、3.98mmol)及び四臭化炭素(3.96g、11.9mmol)の溶液に、Ph3P(1.30g、4.77mmol)を0℃で加えた。混合物を室温で3時間撹拌した。溶出剤としてヘプタン/酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を直接精製し、31%の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ7.41(d,J=8.7,2H),7.32(d,J=8.7,2H),7.25(s,br,1H,NH),4.50(s,2H,CH2Br),3.00(s,2H,CH2),2.14(s,3H,CH3),1.95(d,6H,CH3),1.48(s,6H,CH3)。MS(m/e):418,420(1:1,M+)。
15mlの乾燥THF中のN−(4−(ブロモメチル)フェニル)−3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタンアミド(0.23g、0.57mmol)、6−ヒドロキシ−2−シアノベンゾチアゾール(0.15g、0.86mmol)、2,4,6−コリジン(0.125ml)、及びAg2CO3(0.24g、0.86mmol)の混合物を、室温で一晩撹拌した。濾過により固体を除去した後、溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製し、40%の収率を得た。HPLCにより生成物を更に精製し、2−シアノ−6−ヒドロキシベンゾチアゾールの小さい汚染物質を除去した。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ7.4−7.5(m,3H),7.35−7.42(m,2H),7.32(dd,1H),7.25(s,br,1H,NH),7.18(dd,1H),5.15(s,2H,CH2O),2.99(s,2H,CH2),2.14(s,3H,CH3),1.92(s,6H,CH3),1.47(s,6H,CH3).MS(m/e):514.2(M+)
10mlのCH2Cl2/MeOH中のN−(4−(((2−シアノベンゾ[d]チアゾール−6−イル)オキシ)メチル)フェニル)−3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタンアミド(0.052g、0.101mmol)の溶液に、水3ml中のD−システイン(0.0354g、0.202mmol)及びTEA(0.041g、0.0405mmol)を加えた。混合物を10分撹拌し、次いで、酢酸を用いてpH6に酸性化した。溶出剤として0.1%ギ酸及びアセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を精製した。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ7.99(d,J=8.9,1H),7.54−7.28(m,6H),7.19(d,J=9.0,1H),5.41(t,J=9.4,1H,CH),5.07(s,2H,CH2O),3.78(d,J=9.6,2H,CH2S),3.01(s,2H,CH2),2.14(s,3H),1.95(s,6H),1.48(s,6H,CH3)。MS(m/e):618.3(M+);HPLC純度:330nmで98.3%。
実施例3.PBI 4267の合成
実施例4.PBI 4296の合成
50mlの乾燥THF中の3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタン酸(2.0g、7.99mmol)及びクロロギ酸イソブチル(1.2g、8.79mmol)の溶液に、N−メチルモルホリン(0.88ml)を0℃で加えた。得られた混合物を0℃で30分撹拌し、3−N−メチルプロパノール(0.85g、9.59mmol)を加えた。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を直接精製し、100%の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ3.2−3.6(m,4H,NCH2+CH2O),2.8−3.1(m,5H,NCH3+CH2),2.12(s,3H,CH3),2.93(s,6H,CH3),1.5−1.7(m,2H,CH2),1.42(s,6H,CH3);MS(m/e):322.1。
20mlの乾燥CH2Cl2中のN−(3−ヒドロキシプロピル)−N,3−ジメチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタンアミド(1.0g、3.11mmol)及びトリホスゲン(0.34g、1.09mmol)の溶液に、ピリジン(0.25g、3.11mmol)を0℃で加え、得られた混合物を室温で30分撹拌した。真空下で溶媒を除去した後、残渣を乾燥THF(20ml)に溶解し、THF10ml中の2−シアノ−6−ヒドロキシベンゾチアゾール(0.55g、3.11mmol)及びTEA(0.433ml)を0℃で加えた。混合物を室温で2時間撹拌した。溶出剤としてヘプタン/酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製し、38%の収率を得た。化合物は、トリメチル基の立体効果によって引き起こされる非自由回転に起因して、2つの回転異性体(7:3)として存在するかもしれない。回転異性体1(大):1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.21(d,J=9.0,1H),7.90(d,J=2.3,1H),7.50(dd,J=9.0,J=2.5,1H),4.21(t,J=6,2H,OCH2),3.41(t,J=6,2H,NCH2),2.9−3.1(m,5H,NCH3+CH2),2.12(s,3H,CH3),1.8−2.0(m,8H,2CH3+CH2),1.42(s,6H,CH3)。回転異性体2(小):1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.25(d,J=9.0,1H),7.92(d,J=2.3,1H),7.53(dd,J=9.0,J=2.5,1H),4.35(t,J=6,2H,OCH2),3.47(t,J=6,2H,NCH2),2.9−3.1(m,5H,NCH3+CH2),2.11(s,3H,CH3),1.8−2.0(m,8H,2CH3+CH2),1.42(s,6H,CH3)。MS(m/e):524(M+)。
10mlのCH2Cl2/MeOH中の2−シアノベンゾ[d]チアゾール−6−イル(3−(N,3−ジメチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタンアミド)プロピル)カーボネート(0.23g、0.44mmol)に、水5ml中のD−システイン(0.115g、0.66mmol)及びTEA(0.133g、1.31mmol)を加えた。混合物を10分撹拌し、次いで、酢酸を用いてpH6に酸性化した。溶出剤として0.1%のギ酸及びアセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を精製した。化合物は、2つの回転異性体(7:3)として存在するかもしれない。回転異性体1(大):1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.12(d,J=9.0,1H),7.85(d,J=3.0,1H),7.38(dd,J=9.0,J=3.0,1H),5.46(t,J=9,1H,CH),4.23(t,J=6,2H,OCH2),3.84(d,J=9,2H,SCH2),3.42(t,J=6,2H,NCH2),2.9−3.1(m,5H,NCH3+CH2),2.11(s,3H,CH3),1.8−2.0(m,6H,CH3),1.43(s,6H,CH3)。回転異性体2(小):1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.15(d,J=9.0,1H),7.86(d,J=2.3,1H),7.41(dd,J=9.0,J=2.5,1H),5.46(t,J=9,1H,CH),4.36(t,J=6,2H,OCH2),3.84(d,J=9,2H,SCH2),3.47(t,J=6,2H,NCH2),2.9−3.1(m,5H,NCH3+CH2),2.11(s,3H,CH3),1.8−2.0(m,8H,2CH3+CH2),1.43(s,6H,CH3)。MS(m/e):628.2(M+),650.1(MNa+);HPLC純度:295nmで99.5%(2つの回転異性体を分離することはできない)。
実施例5.PBI 4308の合成
30mlの乾燥THF中の3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタン酸(1.5g、5.99mmol)及びクロロギ酸イソブチル(0.90g、6.59mmol)の溶液に、N−メチルモルホリン(0.67g、6.59mmol)を0℃で加え得た。得られた混合物を0℃で30分撹拌し、モノBOC−N,N’−ジメチルプロパンジアミン(1.45g、7.19mmol)を加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を直接精製し、91%の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ3−3.3(m,4H,NCH2),2.95(m,3H,NCH3),2.80(m,3H,NCH3),2.10(s,2H,CH2),1.8−2.0(m,3H,Ch3),1.35−1.5(m,15H)。MS(m/e):355(M+−Boc)。
10mlの二塩化メチレン中のキノン−トリメチルロック−C3−ジアミン−Boc(1.0g、2.30mmol)の溶液に、トリイソプロピルシラン(0.1ml)、続いてTFA10mlを加えた。混合物を室温で2時間撹拌した。溶媒を除去した後、生成物を真空下で乾燥させ、精製せずに直接次のステップで使用した。
20mlの乾燥塩化メチレン中のキノン−トリメチルロック−C3−ジアミンTFA塩(0.33g、0.74mmol)の溶液に、トルエン中のホスゲン溶液(20%、9.1g)を加えた。次いで、0℃のTEA(0.148g、1.48mmol)を滴下で加えた(溶液の酸性が強すぎる場合、より多くのTEAが必要である)。混合物を0℃で30分撹拌し、TLCを行って、出発材料が残っていないことを確認した。真空トラップ内でブチルアミンをホスゲン捕捉試薬として使用する濾過により固体を慎重に除去した。溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより残渣を精製し、0.292g(100%)の収率を得た。
乾燥塩化メチレン(10ml)中のキノン−トリメチルロック−C3−ジアミンカルボニルクロリド(0.292g、0.736mmol)の溶液に、2−シアノ−6−ヒドロキシベンゾチアゾール(0.194g、1.10mmol)、TEA(0.112g、1.1mmol)、及びDMAP(0.134g、1.1mmol)を加えた。得られた混合物を一晩撹拌した。溶出剤としてヘプタン/酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を直接精製し、0.233g(59%)の収率を得た。化合物は、2つの回転異性体(7:3)として存在するかもしれない。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.15−8.26(d1d2(3:7),J=9.0,1H),7.85(d1d2(3:7),J=3.0,1H),7.4−7.5(dd1,dd2(3:7),J=9,J=3,1H),3.25−3.50(m,4H,2NCH2),2.7−3.2(m,8H,2NCH3+COCH2),2.11(s,3H,CH3),1.6−1.9(m,8H,2CH3+CH2),1.42(s,6H,CH3)。MS(m/e):537(M+)。
20mlのCH2Cl2/MeOH中のキノン−トリメチルロック−C3−ジアミン2−シアノカルバミン酸ベンゾチアゾール(0.177g、0.317mmol)の溶液に、水5ml中のD−システイン(0.144g、0.819mmol)及びTEA(0.164g、1.63mmol)を加えた。混合物を10分撹拌し、次いで、酢酸を用いてpH6に酸性化した。塩化メチレンを除去した後、溶出剤として0.1%ギ酸及びアセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を精製した。化合物は、2つの回転異性体(7:3)として存在するかもしれない。 1H NMR(300MHz、CD2Cl2)δ8.11(dd(7:3),J=9.0,1H),7.85(dd(7:3),J=3.0,1H),7.38(m,1H),5.45(t,J=9,1H,CH),3.81(d,J=9,2H,SCH2),3.42(t,J=6,2H,NCH2),3.25−3.50(m,4H,2NCH2),2.7−3.2(m,8H,2NCH3+COCH2),2.11(ss(7:3),3H,CH3),1.7−1.9(m,8H,2CH3+CH2),1.42(s,6H,CH3)。MS(m/e):641(M+)。C18カラム上のHPLC純度:330nmで98.5%;キラルカラム上の異性体比(31%:69%)。
実施例6.PBI 4586の合成
実施例7.PBI 4312の合成
実施例8.PBI 4585の合成
実施例9.PBI 4516の合成
100mlのアセトニトリル中の6−ヒドロキシヘキシルブロミド(10.36g、0.057mol)及びトリフェニルホスフィン(5g、0.019mol)の混合物を2日間還流させた。溶媒を除去した後、残渣をエーテルで3回洗浄した。溶出剤としてヘプタン/酢酸エチル及び塩化メチレン/MeOHを使用するシリカクロマトグラフィーにより固体を精製し、粘性のある淡白色の物質を得た。
Boc−Trityl−D−cys(1.67g、3.61mmol)の溶液に、DCC(2.98g、14.44mmol)、DMAP(0.881g、7.22mmol)、及び(6−ヒドロキシヘキシル)−トリフェニルホスホニウムブロミド(1.60g、3.61mmol)を0℃で加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。不溶性の固体を除去した後、溶出剤として塩化メチレン/MeOHを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製し、93%(2.78g)の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.17(dd,J=1.6,5.0,2H),7.93−7.64(m,13H),7.46−7.15(m,13H),6.51(dd,J=1.6,5.0,2H),5.33(m,1H),4.06(td,J=3.0,6.5,2H,OCH2),3.57(m,2H,SCH2),2.55(d,J=5.1,2H,PCH2),1.5−2.0(m,8H,CH2),1.40(s,9H,CH3)。MS(m/e):808(M+)。
10mlの二塩化メチレン中の(S)−(6−((2−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)−3−(トリチルチオ)プロパノイル)オキシ)ヘキシル)−トリフェニルホスホニウム(0.315g、0.68mmol)の溶液に、トリイソプロピルシラン(0.1ml)、続いてTFA10mlを加えた。混合物を室温で2時間撹拌した。高真空下で溶媒を除去した後、生成物は、更に精製せずに直接次のステップで使用した。
上記残渣をDMFに溶解した。キノン−トリメチルロック−C2−ジアミン2−シアノカルバミン酸ベンゾチアゾール(PBI 4586)(0.10g、0.191mmol)を加え、TEAを用いて溶液のpHをpH8に調整した。得られた混合物を室温で30分撹拌した。溶出剤としてギ酸(0.1%)/アセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を直接精製した。MS(m/e):971(M+)。
実施例10.PBI 4550の合成
10mlのメチレン中のキノン−トリメチルロック−N−メチルベンジルアルコール(0.53g、1.43mmol)及びトリホスゲン(0.153g、0.516mmol)の溶液に、ピリジン(0.17g、2.15mmol)を0℃で加え、混合物を0℃で30分撹拌した。2−シアノ−6−アミノベンゾチアゾール(0.377g、2.15mmol)及びTEA(0.3ml)を加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。濾過により不溶性の固体を除去した後、溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を直接精製し、22%(0.18g)の収率を得た 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.45(d,J=2.3,1H),8.13(d,J=8.9,1H),7.50(d,J=8.0,2H),7.45(dd,J=8.9,2.7,2H),7.24(d,J=7.9,2H),5.29(s,2H,OCH2),3.97(s,3H,NCH3),2.74(s,2H,CH2),2.09(s,3H,CH3),1.98(s,3H,CH3),1.95(s,3H,CH3),1.30(s,br,6H)。MS(m/e):571(MH+)。
20mlのCH2Cl2/MeOH中のキノン−トリメチルロック−N−メチル−ベンジルアルコール2−シアノ−6−アミノベンゾチアゾールカルバメート(0.10g、0.175mmol)の溶液に、水3ml中のD−システイン(0.046g、0.262mmol)及びTEA(0.053g、0.52mmol)を加えた。混合物を10分撹拌し、次いで、酢酸を用いてpH6に酸性化した。塩化メチレンを除去した後、溶出剤として0.1%ギ酸及びアセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を精製した。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.35(d,J=2.2,1H),8.25(s,1H,NH),8.01(d,J=8.9,1H),7.5−7.7(m,3H),7.29(d,J=7.9,2H),5.41(t,J=9,1H,CH),5.27(s,2H,OCH2),3.77(d,J=9,2H,SCH2),3.12(s,br,3H,NCH3),2.72(s,br,2H,CH2),2.07(s,3H,CH3),1.96(s,3H,CH3),1.94(s,3H,CH3),1.30(s,br,6H)。MS(m/e):675(M+)。HPLC純度:330nmで96.6%。
実施例11.PBI 4565の合成
200mlのギ酸エチル中の2,2−ジメチルプロパニルジアミン(25g、0.245mmol)の混合物を2日間にわたって還流加熱した。真空下で溶媒を除去した後、溶出剤としてヘプタン/酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製し、50%(19g)の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.20(s,1H),6.68(s,br,1H,NH),3.05(d,J=6,4H,CH2),0.9(s,6H,CH3)。MS(m/e):159(M+)。
250mLのエーテル及び10gのLiAlH4(95%)の混合物(0℃)に、9.88g(62.5mmol)のN,N’−ジホルミル−2,2−ジメチルプロパン−1,3−ジアミンを少しずつ加えた。添加後、反応混合物を室温で20時間撹拌した。次いで、エーテル及び水を用いて混合物を加水分解し、Celiteを通した濾過により白色固体を除去し、無水Na2SO4で濾液を乾燥させた。溶媒を除去した後、無色の油として生成物を得た。MS(m/e):131(M+)。
30mlの塩化メチレン中のN,N’,2,2−テトラメチルプロパン−1,3−ジアミン(1.32g、10.14mmol)及びTEA(2.83ml)の溶液に、Boc−無水物の溶液(1.10g、5.04mmol)を0℃で加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。溶液を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去した後、化合物は、更に精製せずに次のステップで使用した。
30mlの乾燥THF中の3−メチル−3−(2,4,5−トリメチル−3,6−ジオキシシクロヘキサ−1,4−ジエン−1−イル)ブタン酸(1.09g、4.34mmol)及びクロロギ酸イソブチル(0.592g、4.34mmol)の溶液に、N−メチルモルホリン(0.44g、4.34mmol)を0℃で加えた。得られた混合物を0℃で30分撹拌し、モノBoc−N,N’,2,2−テトラメチルプロパンジアミン(1.0g、4.34mmol)を加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を直接精製し、52%(1.02g)の収率を得た。MS(m/e):463(M+)。
10mlの二塩化メチレン中のキノントリメチルロックBoc−N,N’,2,2−テトラメチルプロパン−1,3−ジアミン(0.87g、1.88mmol)の溶液に、トリイソプロピルシラン(0.1ml)、続いてTFA10mlを加えた。混合物を室温で2時間撹拌した。溶媒を除去した後、生成物は、精製せずに直接次のステップで使用した。MS(m/e):463(M+)。
塩化メチレン(20ml)中のキノン−トリメチルロックN,N’,2,2−テトラメチルプロパンジアミンTFA塩(0.894g、1.88mmol)の溶液に、トルエン(20%、14g)中のホスゲン溶液を加え、続いて0℃のTEA(0.57g、5.64mmol)を滴下で加えた(溶液の酸性が強すぎる場合、より多くのTEAが必要である)。混合物を30分撹拌し、TLCを行って、出発材料が残っていないことを確認した。真空トラップ内でブチルアミンをホスゲン捕捉試薬として使用する濾過により固体を慎重に除去した。溶出剤としてヘプタン及び酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより残渣を精製し、0.422g(53%)の収率を得た。
10mlの乾燥塩化メチレン中のキノン−トリメチルロックN,N’,2,2−テトラメチルプロパンジアミンカルボニルクロリド(0.42g、0.988mmol)の溶液に、2−シアノ−6−ヒドロキシベンゾチアゾール(0.26g、1.48mmol)、TEA(0.206ml)、及びDMAP(0.18g、1.47mmol)を加えた。得られた混合物を一晩撹拌した。溶出剤としてヘプタン/酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を直接精製し、0.177g(32%)の収率を得た。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.19(d,J=8.7,1H),7.87−7.75(m,1H),7.42(d,J=9.0,1H),3.37−2.97(m,12H,2NCH3+2NCH2+CH2),1.7−2.2(m,9H,3CH3),1.41(s,3H,CH3),1.42(s.3H,CH3),1.14(s,3H,CH3),1.09(s,3H,CH3)。MS(m/e):565(M+),587(MNa+)。
5mlのMeOH中のキノントリメチルロックN,N,2,2−テトラメチルプロパンジアミン2−シアノカルバミン酸ベンゾチアゾール(0.020g、0.046mmol)の溶液に、水2ml中のD−システイン(0.016g、0.092mmol)及びTEA(0.018g、0.184mmol)を加えた。混合物を10分撹拌し、次いで、酢酸を用いてpH6に酸性化した。溶出剤として0.1%ギ酸及びアセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を精製した。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.02(dd,J=6.0,8.9,1H),7.70(s,1H),7.26(dd,J=2.3,8.9,1H),5.31(t,J=9.6,1H,CH),3.70(d,J=11.9,2H,SCH2),3.1−3.4(m,6H,2NCH2+CH2),3.06(s,3H,CH3),3.03(s,3H,CH3),1.82−2.2(m,9H,CH3),1.42(s,3H,CH3),1.41(s,3H,CH3),1.01(s,3H,CH3),0.96(s,3H,CH3)。MS(m/e):669(MH+)。HPLC純度:330nmで98.5%。
実施例12.PBI 4384の合成
エーテル/水(400ml/200ml)中の2,5−ジメチルシクロヘキサ−2,5−ジエン−1,4−ジオン(10g、73.45mmol)の溶液に、NaBH4(11.12g、0.293mol)を0℃で加えた。黄色が消失するまで混合物を振盪した。次いで、酢酸を用いて混合物を酸性化し、エーテルで3回抽出し、合わせた有機層をNa2SO4で乾燥させた。溶媒を除去した後、化合物は直接次のステップで使用した。
上記未精製物に、2,5−ジメチルビスフェノールメチルメタクリレート(8.38g、73.45mmol)及びメタンスルホン酸(100ml)を加えた。混合物を90℃まで2時間加熱した。室温まで冷却してから、混合物を氷冷水中に注ぎ入れ、酢酸エチルを用いて3回抽出し、合わせた有機層をNa2SO4で乾燥させ、溶出剤として酢酸エチル及びヘプタンを使用するシリカクロマトグラフィーにより精製した。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ4.84(s,1H),2.55(s,2H,CH2),2.32(s,3H,CH3),2.21(s,3H,CH3),1.46(s,6H,CH3)。MS(m/e):221(M+)。
15mlの乾燥塩化メチレン中のキノン−トリメチルロック−C3−ジアミンカルボニルクロリド(0.44g、1.15mmol)の溶液に、ルシフェリンメチルエステル(0.37g、1.26mmol)、TEA(0.127g、1.26mmol)、及びDMAP(0.18g、1.47mmol)を加えた。得られた混合物を一晩撹拌した。溶出剤としてヘプタン/酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製した。 1H NMR(300MHz,CD2Cl2)δ8.35(s,1H),8.01−8.15(m,1H),7.7−7.9(m,1H),7.3−7.4(m,1H),6.37(s,1H),3.97n(s,3H,OCH3),3.25−3.5(m,4H,NCH2),2.7−3.25(m,8H,NCH3+CH2),1.8−2.2(m,6H,2CH3),1.7−1.9(m,2H,CH2),1.42(s,9H,CH3)。MS(m/e):639(M+)。(NMR及びMSにより生成物がデヒドロルシフェリンであることを確認した)。
実施例13.PBI 4412の合成
実施例14.PBI 4413の合成
実施例15.PBI 4440の合成
実施例16.PBI 4441の合成
実施例17.PBI 4552の合成
実施例18.PBI 4543の合成
100mlのアセトニトリル中のtert−ブチル(3−ブロモプロピル)カルバメート(5.45g、22.88mmol)及びトリフェニルホスフィン(6.0g、22.88mmol)の混合物を2日間還流加熱した。室温まで冷却してから、溶出剤として塩化メチレン/メタノールを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製し、64%(6.15g)の収率を得た。
トリイソプロピルシラン(0.2ml)を含有するTFA/CH2Cl2(1:1、50ml)の溶液を(3−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)プロピル)トリフェニルホスホニウムブロミド(6.15g、14.6mmol)に加えた。混合物を2時間撹拌した。溶媒を除去した後、化合物を真空乾燥し、直接次のステップで使用した。
20mlのDMF中の(3−アンモニオプロピル)トリフェニルホスホニウムブロミド(0.28g、0.54mmol)の溶液に、TEA(0.163g、1.164mmol)及び5,6−ジアセチルFAM−SE(0.30g、0.54mmol)を加え、混合物を一晩撹拌した。メタノール(10ml)を加えてアセチルエステルを加水分解し、得られた混合物を30分撹拌した。溶媒を除去した後、溶出剤として塩化メチレン/MeOHを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製した。MS(m/e):679.4(M+)
FAM−C3−TPP(PBI 4544)(0.10g、0.132mmol)、キノントリメチルロックC2−ジアミンカルボニルクロリド(0.20g、0.527mmol)、DMAP(0.064g、0.527mmol)、及びTEA(0.053g、0.0527mmol)の混合物を一晩混合した。シリカクロマトグラフィーにより過剰なキノントリメチルロックC2−ジアミンカルボニルクロリドを除去した後、溶出剤として0.1%ギ酸/アセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を更に精製した。MS(m/e):1371.4(M+)
実施例19.PBI 4547の合成
200mlのCH2Cl2中の6−アミノヘキサン−1−オル(10.0g、85.33mmol)及びTEA(12ml)の溶液に、50mlの塩化メチレン中のboc無水物の溶液(18.62g、85.33mmol)を0℃で加え、混合物を一晩撹拌した。混合物を水で洗浄し、有機層をNa2SO4で乾燥させた。溶媒を除去した後、真空下で化合物を乾燥させて87%(16.07g)の収率を得、それを更に精製せずに直接使用した。
100mlの塩化メチレン中のtert−ブチル(6−ヒドロキシヘキシル)カルバメート(12.18g、56.05mmol)及びTEA(8.51g、84.08mmol)の溶液に、塩化メタンスルホニル(9.63g、84.08mmol)を0℃で徐々に加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。溶出剤としてヘプタン/酢酸エチルを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製した。
ACN/DMF(3:1.120ml)中の6−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)ヘキシルメタンスルホン酸(8.0g、27.08mmol)、トリフェニルホスフィン(10.65g、40.62mmol)、及びKBr(6.45g、54.16mmol)の混合物を2日間還流加熱した。溶媒を除去した後、溶出剤としてCH2Cl2/MeOHを使用して化合物を精製し、65%(8.20g)の収率を得た。
トリイソプロピルシラン(0.2ml)を含有するTFA/CH2Cl2(1:1、50ml)の溶液を(6−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)ヘキシル)トリフェニルホスホニウムブロミド(8.0g)に加えた。混合物を2時間撹拌した。溶媒を除去した後、化合物を真空乾燥し、直接次のステップで使用した。
20mlのDMF中の(3−アンモニオヘキシル)トリフェニルホスホニウムブロミド(0.87g、1.79mmol)の溶液に、TEA(0.54g、5.37mmol)及び5,6−ジアセチルFAM−SE(1.0g、0.1.79mmol)を加え、混合物を一晩撹拌した。メタノール(10ml)を加えてアセチルエーテルを加水分解し、得られた混合物を30分撹拌した。溶媒を除去した後、溶出剤として塩化メチレン/MeOHを使用するシリカクロマトグラフィーにより化合物を精製し、46%(0.59g)の収率を得た。MS(m/e):721.4(M+);HPLC純度:254nmで94.7%(5−/6−異性体比:40.9%/53.8%)。
10mlの二塩化メチレン中のFAM−C6−TPP(0.10g、0.124mmol)、キノントリメチルロックC2−ジアミンカルボニルクロリド(0.19g、0.498mmol)、DMAP(0.064g、0.527mmol)、及びTEA(0.053g、0.0527mmol)の混合物を一晩撹拌した。シリカクロマトグラフィーにより過剰なキノントリメチルロックC2−ジアミンカルボニルクロリドを除去した後、溶出剤として0.1%ギ酸/アセトニトリルを使用するHPLCにより化合物を更に精製した。MS(m/e):1413.5(M+);HPLC純度:254nmで85%(5−/6−FAM異性体をHPLCによって分離することはできない)。
実施例20.PBI 4442の合成
実施例21.PBI 4600の合成
実施例22.PBI 4601の合成
実施例23.異なる細胞型における基質の分析
実施例24.酸化還元状態の判定
実施例25.生細胞の蛍光撮像
実施例26.ミトコンドリア標的化基質
実施例27.細胞機能アッセイ
実施例28.キノン誘導体を用いて代謝的に活性な細胞を測定する
A.キノンセレンテラジン誘導体
B.キノンフルオレセイン誘導体
実施例29.細胞生存率に影響を及ぼす化合物のスクリーニング
実施例30.乳酸、エタノール、又はグルコキナーゼの検出
A.細胞中の乳酸の検出
B.エタノールの検出
C.グルコース−6−ホスフェートの検出
D.細胞中のグルコキナーゼの検出
実施例31.NADHの検出及び測定
A.PBI−4312、4550、又は4565を使用するNADHの検出
実施例34.蛍光NADH検出アッセイ
実施例37.同時のNADH検出及び光生成
実施例38.NADの検出及び測定
実施例39.NADPの検出及び測定
実施例40.検出系の特異性
実施例41.細胞中の還元されたNADH/NADPH総量の検出
実施例42.細胞中の酸化及び還元されたジヌクレオチドの総量の検出
実施例43.NAD生合成の阻害のモニタリング
実施例44.ラット赤血球からの総NAD+NADHの測定
実施例45.薬物によって誘発される総NAD(P)/NAD(P)Hレベルの変化のモニタリング
実施例46.サイクリング反応:動態測定及びメナジオン添加後の測定
実施例47.還元されたジヌクレオチドの酸化の測定
実施例48.酸化及び還元されたジヌクレオチドの混合物の酸抽出は、還元型を除去し、酸化型の測定を可能にする
Claims (21)
- 次式(II)、
(II)
で示される化合物。
式中、
R1は、H、C1-4アルキル、C1-4ヒドロキシルアルキル、C3-7環式環、アリール、ベンジル、又は置換ベンジル環、複素環、ヘテロアリール、及び−(CH2)n’−P(Ph)3であり、
R4及びR5は、H、ハロゲン、メチル、及びトリフルオロメチルから独立して選択され、
R14は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C 2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
R9及びR10は、C1-4アルキルから独立して選択され、
R11、R12、及びR13は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、ブロモ、クロロ、もしくはアミノから独立して選択されるか、又はR11及びR12は、縮合フェニル環を形成することができ、
Xは、O又はNHであり、
Lは、−C6(R16)4CH2−、又は−(CH2)mC(R17)2(CH2)n−Y−C(O)−であり、
R16は、独立して、H、ハロゲン、CH3、OCH3、又はNO2であり、
R17は、独立して、H、C1-4アルキルであるか、又は両方のR17が一緒になって3〜7個の炭素を有するアルキル環を形成することができ、
mは、0〜2の整数であり、
nは、0〜2の整数であり、
Yは、O又はNR15であり、
R15は、H、C1-4アルキル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
n’は、2〜7の整数である。) - 次式(III)、
(III)
(式中、R4及びR5は、H、ハロゲン、メチル、及びトリフルオロメチルから独立して選択され、
R14は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C 2-4カルボン酸、又はC2-4アミドであり、
R9及びR10は、C1-4アルキルから独立して選択され、
R11、R12、及びR13は、H、C1-4アルキル、C1-4アルコキシル、ブロモ、クロロ、もしくはアミノから独立して選択されるか、又はR11及びR12は、縮合フェニル環を形成することができ、
Xは、O又はNHであり、
Lは、−C6(R16)4CH2−、又は−(CH2)mC(R17)2(CH2)n−Y−C(O)−であり、
R16は、独立して、H、ハロゲン、CH3、OCH3、又はNO2であり、
R17は、独立して、H、C1-4アルキルであるか、又は両方のR17が一緒になって3〜7個の炭素を有するアルキル環を形成することができ、
mは、0〜2の整数であり、
nは、0〜2の整数であり、
Yは、O又はNR15であり、
R15は、H、C1-4アルキル、C2-4ヒドロキシルアルキル、C2-4アルコキシル、C2-4カルボン酸、又はC2-4アミドである。)
で示される化合物。 - 代謝的に活性な細胞試料の酸化還元状態を分析するための方法であって、
a.前記代謝的に活性な細胞試料を請求項1又は2に記載の化合物と接触させて第1の混合物を形成する工程、
b.前記第1の混合物の少なくとも一部をルシフェラーゼ反応混合物と接触させる工程、及び
c.生物発光を検出する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記代謝的に活性な細胞試料が、細胞、生理液、単離された細胞小器官、ミトコンドリアもしくはミトコンドリア複合体、又は酵素を含み、前記代謝的に活性な細胞試料が、任意に動物中に存在する、請求項3に記載の方法。
- 前記生物発光が、細胞生存率を示唆する、請求項3〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 試料中の細胞代謝産物を検出するための方法であって、
a.前記試料を、請求項1又は2に記載の化合物、増幅酵素系、NAD又はNADP、ジアホラーゼ、及びルシフェラーゼ反応混合物と接触させる工程、
b.前記試料を、任意に、ジアホラーゼ阻害剤と接触させる工程、
c.生物発光を検出する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記化合物、増幅酵素、ジアホラーゼ、及びNAD又はNADPが、単一組成物中に存在し、前記単一組成物が、任意に、ジアホラーゼ阻害剤を含む、請求項6に記載の方法。
- 細胞毒性、細胞生存率、又は細胞の酸化還元状態に影響を及ぼす化合物をスクリーニングする方法であって、
a.細胞を試験化合物と接触させて第1の混合物を形成する工程、
b.前記第1の混合物を、請求項1又は2に記載の化合物、及び任意選択的に、ルシフェラーゼ反応混合物と接触させる工程、
c.生物発光シグナルを検出する工程であって、前記シグナルは、前記試験化合物が前記細胞に及ぼす影響を示唆する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記細胞は、動物の中に存在する、請求項8に記載の方法。
- 前記生物発光が、定量化される、請求項8又は9に記載の方法。
- 試料中のNADH又はNADPH又は試料中のNAD又はNADPを検出する方法であって、
a.前記試料を、請求項1又は2に記載の化合物、ジアホラーゼ、及びルシフェラーゼ反応混合物と接触させる工程、
b.任意に、前記試料をジアホラーゼ阻害剤と接触させる工程、
c.生物発光を検出する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 試料中のNAD、NADP、NADH、又はNADPHを利用又は生成する酵素の存在を検出するための方法であって、
a.前記試料を前記酵素の基質及びNAD又はNADPと接触させて第1の混合物を形成する工程、
b.前記第1の混合物を、請求項1又は2に記載の化合物、ジアホラーゼ、及びルシフェラーゼ反応混合物と接触させる工程、
c.生物発光を検出する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 試料中のNAD、NADP、NADH、又はNADPHを利用又は生成しない酵素の存在を検出するための方法であって、
a.前記試料を前記酵素の基質と接触させて第1の混合物中に生成物を形成する工程、
b.前記第1の混合物を、前記生成物を利用する酵素と接触させて第2の混合物を形成する工程、
c.前記第2の混合物を、請求項1又は2に記載の化合物、ジアホラーゼ、及びルシフェラーゼ反応混合物と接触させる工程、
d.生物発光を検出する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 試料中のNAD(P):NAD(P)Hの比率を測定する方法であって、
a.前記試料からNAD(P)及びNAD(P)Hを差次的に抽出する工程、
b.各差次的に抽出した試料を増幅酵素系と接触させる工程、
c.b)の両方の反応物に、請求項1又は2に記載の化合物、ジアホラーゼ、及びルシフェラーゼ反応混合物を加える工程、
d.任意に、前記試料の一方又は両方に、ジアホラーゼ阻害剤を添加する工程、
e.両方の抽出した試料中の生物発光を測定する工程、
f.2つの溶液のシグナルを比較して前記比率を測定する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 試料中の総NAD(P)/NAD(P)Hを測定する方法であって、
a.前記試料を増幅酵素系と接触させる工程、
b.a)の反応物に、ジアホラーゼ、請求項1又は2に記載の化合物、及びルシフェラーゼ反応混合物を加える工程、
c.任意に、ジアホラーゼ阻害剤を添加する工程、
d.生物発光を検出する工程、
を含むことを特徴とする方法 - 前記増幅酵素系は、増幅酵素及び前記増幅酵素の基質を含み、前記増幅酵素が、任意にデヒドロゲナーゼである、請求項6、14及び15のいずれか1項に記載の方法。
- 前記増幅酵素系、ジアホラーゼ、及びルシフェラーゼの反応混合物は、単一組成物中に存在し、該単一組成物が、請求項1又は2に記載の化合物を任意に含有し、かつ任意にジアホラーゼ阻害剤を含有する、請求項6及び14〜16のいずれか1項に記載の方法。
- 試料中の総NAD(P)/NAD(P)Hを測定する方法であって、
a.前記試料を、増幅酵素、ジアホラーゼ、及び請求項1又は2に記載の化合物、及びルシフェラーゼ検出混合物と接触させる工程、
b.生物発光を検出する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 細胞中のNAD、もしくはNADH、もしくはNADP、もしくはNADPH、又はそれらの任意の組み合わせの有無を検出するためあるいは量を測定するための方法であって、
a.前記細胞を、細胞溶解試薬及びルシフェラーゼ検出混合物と接触させる工程であって、前記細胞溶解試薬が、任意に、界面活性剤を含有する工程、
b.工程a)で調製された前記混合物を請求項1又は2に記載の化合物と接触させる工程、
c.生物発光を検出し、それによってNAD、もしくはNADH、もしくはNADP、もしくはNADPH、又はそれらの任意の組み合わせの有無を検出することあるいは量を測定する工程、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記ルシフェラーゼ検出混合物が、ジアホラーゼを含有し、前記ルシフェラーゼ検出混合物が、任意に酵素増幅系を含み、該酵素増幅系における増幅酵素が、任意に、デヒドロゲナーゼを含む、請求項19に記載の方法。
- 請求項1又は2に記載の化合物を含む、キット。
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---|---|---|---|---|
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Families Citing this family (31)
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---|---|---|---|---|
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Family Cites Families (18)
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---|---|---|---|---|
US5683888A (en) * | 1989-07-22 | 1997-11-04 | University Of Wales College Of Medicine | Modified bioluminescent proteins and their use |
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US5998204A (en) | 1997-03-14 | 1999-12-07 | The Regents Of The University Of California | Fluorescent protein sensors for detection of analytes |
JP2004508833A (ja) * | 2000-09-13 | 2004-03-25 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング | バイオマスの検出および測定のための方法 |
US7268229B2 (en) | 2001-11-02 | 2007-09-11 | Promega Corporation | Compounds to co-localize luminophores with luminescent proteins |
JP4451663B2 (ja) | 2002-02-01 | 2010-04-14 | プロメガ コーポレイション | 生物発光プロテアーゼ分析方法 |
ATE513838T1 (de) * | 2002-09-20 | 2011-07-15 | Promega Corp | Auf lumineszenz basierende verfahren und sonden zur messung der cytochrom-p450-aktivität |
DE10303265A1 (de) * | 2003-01-28 | 2004-07-29 | Roche Diagnostics Gmbh | Fluorimetrische Bestimmung von Analyten durch ein intramolekulares Quencher-Fluorophor-Konjugat |
WO2005003369A2 (en) * | 2003-05-23 | 2005-01-13 | The Arizona Board Of Regents | Methods for detection and quantification of analytes |
EP1700865A1 (en) * | 2005-03-11 | 2006-09-13 | AXXAM S.r.l. | Photoproteins with enhanced bioluminescence and their use as intracellular calcium indicators |
EP3312292B1 (en) * | 2005-05-31 | 2019-09-25 | Promega Corporation | Luminogenic and fluorogenic compounds and methods to detect molecules or conditions |
EP2327768B1 (en) | 2006-04-03 | 2015-09-09 | Promega Corporation | Permuted and nonpermuted luciferase biosensors |
KR101531424B1 (ko) * | 2006-10-24 | 2015-06-24 | 진 스트림 피티와이 리미티드 | 루시퍼라아제 신호 향상 조성물 |
WO2008118445A1 (en) | 2007-03-26 | 2008-10-02 | Promega Corporation | Methods to quench light from optical reactions |
TWI354101B (en) | 2008-08-19 | 2011-12-11 | Univ Nat Taipei Technology | Fluorimetric indicator for biosensing and manufact |
US9487520B2 (en) * | 2010-11-02 | 2016-11-08 | Promega Corporation | Coelenterazine derivatives and methods of using same |
WO2013033515A1 (en) | 2011-09-02 | 2013-03-07 | Promega Corporation | Compounds and methods for assaying redox state of metabolically active cells and methods for measuring nad(p)/nad(p)h |
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