JP6004470B2 - 試料の固定化方法 - Google Patents
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Description
電子顕微鏡を用いて試料を観察するためには、導電性基板上に試料を固定化する必要がある。本実施の形態の試料の固定化方法は、電子顕微鏡による観察に供するプレパラートの作製に利用することができるが、勿論、当該目的に限定されない。
本発明において、固定化される試料は観察の対象となる試料であって、電荷を有する試料である。
本発明に係る試料の固定化方法は、上記導電性基板を少なくとも一方の電極として含む電極対の間に、上記試料とは逆の電荷を有するイオンを含むイオン溶液を配置するイオン供給工程を含んでいる。
本発明に係る試料の固定化方法は、上記電極対に電圧を印加することによって、上記試料とは逆の電荷を有するイオンを上記導電性基板上に誘引するとともに分散させるイオン分散工程を含んでいる。
本発明に係る試料の固定化方法は、上記イオン溶液に含まれる溶媒を除去する第1溶媒除去工程を含んでいる。上記構成によれば、表面にイオンが吸着している導電性基板を作製することができる。
本発明に係る試料の固定化方法は、上記イオンが分散された上記導電性基板上に、上記試料を含む試料溶液を配置し、上記イオンを介して上記試料を上記導電性基板上に固定化する試料固定化工程を含んでいる。
本発明に係る試料の固定化方法では、上記試料溶液に含まれる溶媒を除去する第2溶媒除去工程を含んでいる。上記構成によれば、イオンを介して表面に試料が固定化されている導電性基板を作製することができる。
まず、図2に示すように、導電性基板1を良好な導電性を有する材料3へ固定した。本実施例では、導電性基板1としてHOPG基板を用い、良好な導電性を有する材料3として真鍮基板を用いた。HOPG基板と真鍮基板とは銀ペーストを用いて接着した。その後、HOPG基板の表面に存在する埃の除去を行い、原子レベルで平らな表面を出すためにメンディングテープを用いてHOPG基板を劈開した。劈開したHOPG基板の表面のAFM画像を図4に示す。図4に見られる模様は炭素原子の作る六員環によるものであると考えられる。
MgCl2水溶液の濃度を40μmol/l、電圧を2V、DNA水溶液を滴下してから水分を除去するまでの放置時間を60分として試料をHOPG基板上に固定化した。当該試料のAFMおよびFE−SEM(日立、S−5000L)による観察結果を図6に示す。
MgCl2水溶液の濃度を100μmol/l、電圧を2V、DNA水溶液を滴下してから水分を除去するまでの放置時間を20分として試料をHOPG基板上に固定化した。なお、HOPG基板上に固定化された試料の高さ方向の情報を得るため、観察にはAFMを用いた。
HOPG基板の間にMgCl2水溶液を配置せずに、DNA水溶液を直接HOPG基板上に配置し、電圧を印加した。上記の点以外は上述の〔試料の固定化〕に示した手順に従って実験を行った。なお、HOPG基板上に固定化された試料の高さ方向の情報を得るため、観察にはAFMを用いた。
2 イオン溶液
3 良好な導電性を有する材料
4 電源
5 オン/オフスイッチ
21 陽イオンを含んでいる溶液
22 陰イオンを含んでいる溶液
Claims (7)
- 電荷を有する試料を導電性基板上に固定化する、試料の固定化方法であって、
上記導電性基板を少なくとも一方の電極として含む電極対の間に、上記試料とは逆の電荷を有するイオンを含むイオン溶液を配置するイオン供給工程と、
上記電極対に電圧を印加することによって、上記試料とは逆の電荷を有するイオンを上記導電性基板上に誘引するとともに分散させるイオン分散工程と、
上記イオン溶液に含まれる溶媒を除去する第1溶媒除去工程と、
上記イオンが分散された上記導電性基板上に、上記試料を含む試料溶液を配置し、上記イオンを介して上記試料を上記導電性基板上に固定化する試料固定化工程と、
上記試料溶液に含まれる溶媒を除去する第2溶媒除去工程と、を含んでいることを特徴とする試料の固定化方法。 - 上記導電性基板は、表面が原子レベルで平坦であることを特徴とする請求項1に記載の試料の固定化方法。
- 上記導電性基板は、高配向性焼結グラファイトによって形成されていることを特徴とする請求項2に記載の試料の固定化方法。
- 上記電極対は、1対の導電性基板からなることを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載の試料の固定化方法。
- 上記イオン分散工程では、上記1対の導電性基板のうち、一方の導電性基板上に陽イオンを分散させ、もう一方の導電性基板上に陰イオンを分散させることを特徴とする請求項4に記載の試料の固定化方法。
- 上記試料は、核酸、タンパク質またはナノ粒子であることを特徴とする請求項1〜5のいずれか1項に記載の試料の固定化方法。
- 上記試料は、50塩基以下または50塩基対以下の核酸であることを特徴とする請求項6に記載の試料の固定化方法。
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