JP5858726B2 - インボルクリン発現抑制剤 - Google Patents
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1)ハナイカリ、Begonia pedatifida Levl.、アオイゴケ、シナワスレナグサ及びオオカワヂシャから選ばれる一種以上の植物又はその抽出物を有効成分とするインボルクリン発現抑制剤。
2)ハナイカリ、Begonia pedatifida Levl.、アオイゴケ、シナワスレナグサ及びオオカワヂシャから選ばれる一種以上の植物又はその抽出物を有効成分とするくせ毛改善剤。
3)ハナイカリ、Begonia pedatifida Levl.、アオイゴケ、シナワスレナグサ及びオオカワヂシャから選ばれる一種以上の植物又はその抽出物を含有する皮膚外用剤。
上記植物は、葉、茎、芽、花、種子、果実、全草等の部分が使用可能であるが、何れも全草をそのまま又は粉砕して用いるのが好ましい。
公知の抽出方法としては、例えば、浸漬、煎出、浸出、還流抽出、超臨界抽出、超音波抽出及びマイクロ波抽出等が挙げられる。
斯かる上記製剤は、それぞれ一般的な製造法により、直接又は製剤上許容し得る担体、例えば、各種油剤、界面活性剤、ゲル化剤、防腐剤、酸化防止剤、溶剤、アルコール、水、キレート剤、増粘剤、紫外線吸収剤、乳化安定剤、pH調整剤、色素、香料等とともに混合、分散した後、所望の形態に加工することによって得ることができる。また、これらの化粧品、医薬部外品又は医薬品等には、本発明の植物又はその抽出物、それぞれの製剤に応じて、適宜、植物抽出物、殺菌剤、保湿剤、抗炎症剤、抗菌剤、清涼剤、抗脂漏剤等を本発明の効果を妨害しない範囲で適宜配合することができる。
また、上記化粧品、医薬品又は医薬部外品の適用対象者としては、それを必要としていれば特に限定されないが、インボルクリン発現抑制くせ毛改善を目的とするヒトが好ましい。
(1)ハナイカリ抽出物の製造
中国四川省産のハナイカリ(Halenia elliptica D.Don)(全草)の乾燥抽出物200gに50%エタノール1000mLを加え、85℃加熱下、2時間浸漬後、ろ過した。ろ過後の残渣に50%エタノール1000mLを加え、再度、85℃で1時間抽出を行った。ろ過後、2つのろ液をあわせ、減圧濃縮、乾燥して、50%エタノール抽出物15gを得た。これを固形分濃度1.0w/v%の50vol%エタノール溶液とし、評価エキスとした。
中国四川省産のBegonia pedatifida Levl.(全草)の乾燥抽出物200gに50%エタノール1000mLを加え、85℃加熱下、2時間浸漬後、ろ過した。ろ過後の残渣に50%エタノール1000mLを加え、再度、85℃で1時間抽出を行った。ろ過後、2つのろ液をあわせ、減圧濃縮、乾燥して、50%エタノール抽出物39gを得た。これを固形分濃度1.0w/v%の50vol%エタノール溶液とし、評価エキスとした。
中国四川省産のアオイゴケ(Dichondra repens Forst.)(全草)の乾燥抽出物200gに50%エタノール1000mLを加え、85℃加熱下、2時間浸漬後、ろ過した。ろ過後の残渣に50%エタノール1000mLを加え、再度、85℃で1時間抽出を行った。ろ過後、2つのろ液をあわせ、減圧濃縮、乾燥して、50%エタノール抽出物41gを得た。これを固形分濃度1.0w/v%の50vol%エタノール溶液とし、評価エキスとした。
中国四川省産のシナワスレナグサ(Cynoglossum amabile Staf et Drum.)(全草)の乾燥抽出物100gに50%エタノール1000mLを加え、85℃加熱下、2時間浸漬後、ろ過した。ろ過後の残渣に50%エタノール1000mLを加え、再度、85℃で1時間抽出を行った。ろ過後、2つのろ液をあわせ、減圧濃縮、乾燥して、50%エタノール抽出物16.1gを得た。これを固形分濃度1.0w/v%の50vol%エタノール溶液とし、評価エキスとした。
中国四川省産のオオカワヂシャ(Veronica angalis-aquatica L.)(全草)の乾燥抽出物200gに50%エタノール1000mLを加え、85℃加熱下、2時間浸漬後、ろ過した。ろ過後の残渣に50%エタノール1000mLを加え、再度、85℃で1時間抽出を行った。ろ過後、2つのろ液をあわせ、減圧濃縮、乾燥して、50%エタノール抽出物25gを得た。これを固形分濃度1.0w/v%の50vol%エタノール溶液とし、評価エキスとした。
インボルクリンのタンパク質量定量にはInvolucrin ELISA Assay Kit(BT-650, BTI)を使用した。
24穴プレートにHaCaT細胞を5×104個/ウェルにて播種し、培養した。翌日、製造例1で得られた各植物抽出物を終濃度0.5% v/vを含む培地に交換して更に24時間培養した。抽出物添加から24時間後、細胞をPBS(ギブコ)で2回洗浄し、20mM Tris-HCl(pH:7.5)・2mM EDTAにComplete Mini Protease Inhibitor Cocktail(Roche)を含むbuffer、400μlを細胞に添加した。Protease Inhibitor Cocktailはbuffer 10mlに対して1粒加えた。このbuffer存在下でセルスクレーパーにより、細胞を剥離・回収した後、ソニケーターによる超音波処理を行った。この溶液を遠心して回収した上清をライセートとして評価に用いた。
Claims (1)
- ハナイカリ又はその抽出物を有効成分とするくせ毛改善剤。
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