JP5819302B2 - プロテアーゼを含有する貯蔵安定性液体洗剤または清浄剤 - Google Patents
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Description
(a1)配列番号1に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも80%同一であって、配列番号1の番号付けにおいて99位にアミノ酸グルタミン酸(E)またはアスパラギン酸(D)を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、または
(a2)配列番号1に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも80%同一であって、配列番号1の番号付けにおいて99位にアミノ酸アスパラギン(N)またはグルタミン(Q)を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、または
(a3)配列番号1に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも80%同一であって、配列番号1の番号付けにおいて99位にアミノ酸アラニン(A)またはグリシン(G)またはセリン(S)を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、および
(b)ホスホネート
を含む、液体洗剤または清浄剤を提供する。
(a)3位にスレオニン(3T)、
(b)4位にイソロイシン(4I)、
(c)61位にアラニン、スレオニンまたはアルギニン(61A、61Tまたは61R)、
(d)154位にアスパラギン酸またはグルタミン酸(154Dまたは154E)、
(e)188位にプロリン(188P)、
(f)193位にメチオニン(193M)、
(g)199位にイソロイシン(199I)、
(h)211位にアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン(211D、211Eまたは211G)、
(i)アミノ酸(a)〜(h)の組み合わせ
のうち少なくとも1つを含むことを特徴とする。
綿上の血液−ミルク/インク:CFT(Center For Testmaterials) B.V. Vlaardingen, Netherlandsから入手可能なプロダクト番号C−05、
綿上の全卵/色素(全卵/煤煙):wfk Testgewebe GmbH; Brueggen−Bracht, Germanyから入手可能なプロダクト番号10N、またはCFT (Centre For Testmaterials) B.V. Vlaardingen, Netherlandsから入手可能なプロダクト番号C−S−37、
ポリエステル/綿上の落花生油−色素/インク:CFT (Center For Testmaterials) B.V. Vlaardingen, Netherlandsから入手可能なプロダクト番号PC−10、
綿上の草:Eidgenoessische Material− und Pruefanstalt (EMPA) Testmaterialien AG, St. Gallen, Switzerlandから入手可能なプロダクト番号164
に対して、洗浄した織物の白さの度合いを測定することによって決定され、該洗浄工程は、少なくとも30分、所望により60分間、20℃の温度で行い、水は、15.5〜16.5°dHの硬度(ドイツ硬度)を示す。
(a)a.配列番号2または配列番号3または配列番号4または配列番号5または配列番号6または配列番号7または配列番号8のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ;
b.配列番号2または配列番号3または配列番号4または配列番号5または配列番号6または配列番号7または配列番号8に対して、少なくとも1つの位置において修飾されたアミノ酸配列を含むプロテアーゼであって、該修飾が配列番号1の番号付けにおいて、
i.3位のスレオニン(3T)、
ii.4位のイソロイシン(4I)、
iii.61位のアラニン、スレオニンまたはアルギニン(61A、61Tまたは61R)、
iv.154位のアスパラギン酸またはグルタミン酸(154Dまたは154E)、
v.188位のプロリン(188P)、
vi.193位のメチオニン(193M)、
vii.199位のイソロイシン(199I)、
viii.211位のアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン(211D、211Eまたは211G)、
ix.アミノ酸(i)〜(viii)の組み合わせ
からなる群から選択されるプロテアーゼ、
(b)ホスホネート
を含む液体洗浄または清浄剤を提供する。
i.アニオンおよび/またはポリアニオン物質、および/または
ii.カチオンおよび/またはポリカチオン物質、および/または
iii.ヒドロキシルおよび/またはポリヒドロキシル基を含む物質
から選択される成分を含むことを特徴とする。
ここに、Rは、−CH=CH−R2、−C=C−R2、−C(R2)=CH2、−C(R2)=C(R3)、−CH=NR2、−C(R2)=N−R3、置換または非置換の4−7C環系、置換または非置換の4−7窒素ヘテロ環、またはR1、R2またはR3から選択される置換基を有する1〜5個の二重または三重結合を有するC2ないしC8鎖であり、
ここに、−R1は、H、−R、−NO2、−CN、ハライド置換基、−N3、−C1−8アルキル、−(CH2)NCO2R2、−C2−8アルケニル−CO2R2、−O(CH2)NCO2R2、−C(O)NR2R3、−P(O)(OR2)2、アルキル−置換されたテトラゾール−5−イル、−(CH2)nO(CH2)n−アリール、−NR2R3、−(CH2)n−OR2、−(CH2)n−SR2、−N(R2)C(O)R3、−S(O2)NR2R3、−N(R2)S(O)2)R3、−(CHR2)n−NR2R3、−C(O)R3、(CH2)n−N(R3)C(O)R3、−N(R2)CR2R3、置換または非置換の(CH2)n−シクロアルキル、置換または非置換の(CH2)N−フェニル、または−環であり、ここに、nは1より大きい数字であり、
−R2は、H、ハライド置換基、アルキル、ハロアルキル、−(CH2)N−フェニル、−(CH2)1−3−ビフェニル、−(CH2)1−4−Ph−N(SO2−C1−2−アルキル)2、−CO(CHR1)n−OR1、−(CHR1)n−複素環、−(CHR1)n−NH−CO−R1、−(CHR1)n−NH−SO2R1、−(CHR1)n−Ph−N(SO2−C1−2−アルキル)2、−(CHR1)n−C(O)(CHR1)−NHR1、−(CHR1)n−C(S)(CHR1)−NHR1、−(CH2)nO(CH2)nCH3、−CF3、−C2−C5アシル、−(CHR1)nOH、−(CHR1)nCO2R1、−(CHR1)n−O−アルキル、−(CHR1)n−O−(CH2)n−O−アルキル、−(CHR1)n−S−アルキル、−(CHR1)n−S(O)−アルキル、−(CHR1)n−S(O)2)−アルキル、−(CHR1)n−S(O2)−NHR3、−(CHR3)n−N3、−(CHR3)nNHR4、1〜5個の二重結合を有するC2ないしC8鎖状アルケン鎖、1〜5個の三重結合を有するC2ないしC8鎖状アルキン鎖、置換または非置換の−(CHR3)n複素環、置換または非置換の飽和または不飽和−(CHR3)nシクロアルキルであり、ここに、nは1より大きい数字であり、R1およびR3は、同一であっても異なっていてもよく、
−R3は、H、−OH、−CN、置換アルキル、−C2ないしC8アルケニル、置換または非置換のシクロアルキル、−N(R1)R2、4ないし7C原子の飽和または不飽和C5ないしC7複素環または複素二環、4ないし7C原子の飽和または不飽和複素環または複素二環からなる−NR1、−NR2、−NR1R2であり、
−R4は、H、−(CH2)nOH、−C(O)OR5、−C(O)SR5、−(CH2)n−C(O)NR6R7、−O−C(O)−O−R6、アミノ酸またはペプチドであり、ここに、nは0〜4の数字であり、
−R5はHであり、
−R6は、−C(R7)−(CH2)n−O−C(O)−R8、−(CH2)n−C(R7)−O−C(O)R8、−(CH2)n−C(R7)−O−C(O)−O−R8、または−C(R7)−(CH2)n−O−C(O)−O−R8であり、ここに、nは、0〜4の数字であり、
−R7およびR8は、各ケースにおいて、H、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、複素環、置換複素環、アルキルアリール、置換アルキルアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、またはCH2CO2−アルキルであり、ここに、R7およびR8は同一であっても異なっていてもよい。
は、「Genencor detergent cellulase L」およびIndiAgeRNeutraである。
(a1)配列番号1に示されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一であって、配列番号1の番号付けにおいて99位に、アミノ酸グルタミン酸(E)またはアスパラギン酸(D)を含むアミノ酸配列を含み、または
(a2)配列番号1に示されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一であって、配列番号1の番号付けにおいて99位に、アミノ酸アスパラギン(N)またはグルタミン(Q)を含むアミノ酸配列を含み、または
(a3)配列番号1に示されるアミノ酸配列と少なくとも80%同一であって、配列番号1の番号付けにおいて99位に、アミノ酸アラニン(A)またはグリシン(G)またはセリン(S)を含むアミノ酸配列を含む
プロテアーゼの使用を提供する。
(a)3位にスレオニン(3T)、
(b)4位にイソロイシン(4I)、
(c)61位にアラニン、スレオニンまたはアルギニン(61A、61Tまたは61R)、
(d)154位にアスパラギン酸またはグルタミン酸(154Dまたは154E)、
(e)188位にプロリン(188P)、
(f)193位にメチオニン(193M)、
(g)199位にイソロイシン(199I)、
(h)211位にアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン(211D、211Eまたは211G)、
(i)アミノ酸(a)〜(h)の組み合わせ
のうち少なくとも1つを含むことを特徴とする。
a.配列番号2または配列番号3または配列番号4または配列番号5または配列番号6または配列番号7または配列番号8のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ;
b.配列番号2または配列番号3または配列番号4または配列番号5または配列番号6または配列番号7または配列番号8に対して、少なくとも1つの位置において修飾されたアミノ酸配列を含むプロテアーゼであって、該修飾が配列番号1の番号付けにおいて、
i.3位のスレオニン(3T)、
ii.4位のイソロイシン(4I)、
iii.61位のアラニン、スレオニンまたはアルギニン(61A、61Tまたは61R)、
iv.154位のアスパラギン酸またはグルタミン酸(154Dまたは154E)、
v.188位のプロリン(188P)、
vi.193位のメチオニン(193M)、
vii.199位のイソロイシン(199I)、
viii.211位のアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン(211D、211Eまたは211G)、
ix.アミノ酸(i)〜(viii)の組み合わせ
からなる群から選択されるプロテアーゼ
からなる群から選択されるプロテアーゼの使用を提供する。
本発明の液体洗浄剤の清浄性能の決定
該実施例の場合、EMPA Testmaterialien AG(St. Gallen, Switzerland)、wfk Testgewebe GmbH(Brueggen−Bracht, Germany)またはCenter For Testmaterials(CFT, Vlaardingen, Netherlands)から入手された標準的汚れを有する織物を用いた。下記の汚れおよび織物を用いた。
A:綿上の草:Eidgenoessische Material− und Pruefanstalt(EMPA) Testmaterialien AG, St. Gallen, Switzerland由来のプロダクト番号164。
B:ポリエステル/綿上の落花生油−染料/インク:CFT(Center For Testmaterials) B.V. Vlaardingen, Netherlands由来のプロダクト番号PC−10。
C:wfk Testgewebe GmbH; Brueggen−Bracht, Germany由来の綿上の全卵/染料(全卵/煤煙):プロダクト番号10N。
D:CFT(Center For Testmaterials) B.V. Vlaardingen, Netherlandsから入手可能な綿上の血液−ミルク/インク:プロダクト番号C−05。
本発明の液体自動食器洗浄剤の清浄性能の決定
硬い滑らかな表面を有する容器に、標準化された方法において、各汚れを供し、従来の市販の家庭用食器洗浄機を用いて40℃および50℃で洗浄した。各洗浄サイクルは、液体またはゲル形態の従来の市販の2.4重量%ホスホネート(HEDP)を含有する自動食器洗浄剤30mlを用いて行った。洗浄は、硬度が約21° dH(ドイツ硬度)である主要水を用いて行った。使用されたプロテアーゼは、Savinase ultra 16L(Novozymes,処方1)および配列番号2のアミノ酸配列を含む本発明のプロテアーゼ(処方2)であった。該プロテアーゼは、酵素タンパク質に対して同一の重量で使用された(清浄剤30mlあたり、0.68g Savinase ultra 16Lまたは同一重量の本発明のプロテアーゼの酵素タンパク質)。
本発明の液体洗浄剤の貯蔵安定性の決定
実施例1の処方1および2の洗浄剤を貯蔵安定性について試験した。この目的を達成するために、該洗浄剤を各ケースにおいて、30℃で記載の期間保管し、基質からのクロモフォアパラ−ニトロアニリン(PNA)の遊離に基づいて、各々の残留タンパク質分解活性を決定した。該基質は、suc−L−Ala−L−Ala−L−Pro−L−Phe−p−ニトロアニリド(suc−AAPF−pNA)である。プロテアーゼは、基質を分解し、pNAを遊離する。PNAの遊離は、410nmの吸光度の増加をもたらし、その時間プロフィールは、酵素活性の測定値である(Del Marら、1979参照)。該測定は、25℃の温度にて、pH8.6および波長410nmにて行われた。測定時間は、測定間隔20秒〜60秒にて5分であった。得られた残留活性値を下記の表4に示す。
Claims (17)
- (a)配列番号1に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも90%同一であって、配列番号1の番号付けにおいて99位にアミノ酸グルタミン酸(E)を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、および
(b)ホスホネート
を含む、液体洗剤または清浄剤。 - 配列番号1の番号付けにおいて、プロテアーゼがさらに、下記のアミノ酸:
(a)3位にスレオニン(3T)、
(b)4位にイソロイシン(4I)、
(c)61位にアラニン、スレオニンまたはアルギニン(61A、61Tまたは61R)、
(d)154位にアスパラギン酸またはグルタミン酸(154Dまたは154E)、
(e)188位にプロリン(188P)、
(f)193位にメチオニン(193M)、
(g)199位にイソロイシン(199I)、
(h)211位にアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン(211D、211Eまたは211G)、
(i)アミノ酸(a)〜(h)の組み合わせ
のうち少なくとも1つを含む、請求項1記載の洗剤または清浄剤。 - (b)a.配列番号2のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ;
b.配列番号2に対して、少なくとも1つの位置において修飾されたアミノ酸配列を含むプロテアーゼであって、該修飾が配列番号1の番号付けにおいて、
i.3位のスレオニン(3T)、
ii.4位のイソロイシン(4I)、
iii.61位のアラニン、スレオニンまたはアルギニン(61A、61Tまたは61R)、
iv.154位のアスパラギン酸またはグルタミン酸(154Dまたは154E)、
v.188位のプロリン(188P)、
vi.193位のメチオニン(193M)、
vii.199位のイソロイシン(199I)、
viii.211位のアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン(211D、211Eまたは211G)、
ix.アミノ酸(i)〜(viii)の組み合わせ
からなる群から選択される、プロテアーゼ、
(c)ホスホネート
を含む、液体洗剤または清浄剤。 - ホスホネートが、1−ヒドロキシエタン−1,1−ジホスホン酸(HEDP)、アミノトリ(メチレンホスホン酸)(ATMP)、ジエチレントリアミンペンタ(メチレンホスホン酸)(DTPMPまたはDETPMPまたはDTPNT)、エチレンジアミンテトラ(メチレンホスホン酸)(EDTMP)、2−ホスホノブタン−1,2,4−トリカルボン酸(PBS−AM)およびその組み合わせからなる群から選択される、請求項1〜3のいずれか1項記載の洗剤または清浄剤。
- 活性タンパク質に対して、ホスホネートが0.01〜4重量%の量で存在し、および/またはプロテアーゼが1×10−8〜5重量%の量で存在する、請求項1〜4のいずれか1項記載の洗剤または清浄剤。
- さらに、
i.アニオンおよび/またはポリアニオン物質、および/または
ii.カチオンおよび/またはポリカチオン物質、および/または
iii.ヒドロキシルおよび/またはポリヒドロキシル基を含む物質
から選択される成分を含む、請求項1〜5のいずれか1項記載の洗剤または清浄剤。 - 少なくとも1つのさらなる成分を含む、請求項1〜6のいずれか1項記載の洗剤または清浄剤。
- 少なくとも1つのさらなる成分が、界面活性剤、ビルダー、ペルオキシ化合物、漂白活性化剤、アルコール、酸、灰色化阻害剤、光学的光沢剤、発泡阻害剤、水溶性塩、増粘剤、揮発性アルカリおよび/または塩基、親水性化剤およびその組み合わせからなる群から選択される、請求項7記載の洗剤または清浄剤。
- 少なくとも1つのさらなる酵素を含有する、請求項1〜8のいずれか1項記載の洗剤または清浄剤。
- 少なくとも1つのさらなる酵素が、プロテアーゼ、アミラーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、マンナナーゼ、タンナーゼ、キシラナーゼ、キサンタナーゼ、β−グルコシダーゼ、カラギナーゼ、ペルヒドロラーゼ、オキシダーゼ、オキシドレダクターゼまたはリパーゼ、またはその混合物である、請求項9記載の洗剤または清浄剤。
- 織物または硬表面からプロテアーゼ感受性の汚れを除去するための、請求項1〜10のいずれか1項記載の洗剤または清浄剤の使用。
- 請求項1〜10のいずれか1項記載の洗剤または清浄剤を少なくとも1方法工程において使用する、織物または硬表面を清浄する方法。
- ホスホネートが洗浄液中、0.00075〜0.05重量%の濃度で存在し、および/またはプロテアーゼが洗浄液中、0.0005〜0.03重量%の濃度で存在する、請求項12記載の方法。
- 10℃〜60℃の温度で実施される、請求項12または請求項13記載の方法。
- ホスホネートをさらに含む液体洗浄剤または清浄剤においてタンパク質分解活性を提供するための、配列番号1に示されるアミノ酸配列と少なくとも90%同一であって、配列番号1の番号付けにおいて99位に、アミノ酸グルタミン酸(E)を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼの使用。
- 配列番号1の番号付けにおいて、プロテアーゼがさらに、下記のアミノ酸:
(a)3位にスレオニン(3T)、
(b)4位にイソロイシン(4I)、
(c)61位にアラニン、スレオニンまたはアルギニン(61A、61Tまたは61R)、
(d)154位にアスパラギン酸またはグルタミン酸(154Dまたは154E)、
(e)188位にプロリン(188P)、
(f)193位にメチオニン(193M)、
(g)199位にイソロイシン(199I)、
(h)211位にアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン(211D、211Eまたは211G)、
(i)アミノ酸(a)〜(h)の組み合わせ
のうち少なくとも1つを含む、請求項15記載の使用。 - ホスホネートをさらに含む液体洗浄剤または清浄剤においてタンパク質分解活性を提供するための、
a.配列番号2のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ;
b.配列番号2に対して、少なくとも1つの位置において修飾されたアミノ酸配列を含むプロテアーゼであって、該修飾が配列番号1の番号付けにおいて、
i.3位のスレオニン(3T)、
ii.4位のイソロイシン(4I)、
iii.61位のアラニン、スレオニンまたはアルギニン(61A、61Tまたは61R)、
iv.154位のアスパラギン酸またはグルタミン酸(154Dまたは154E)、
v.188位のプロリン(188P)、
vi.193位のメチオニン(193M)、
vii.199位のイソロイシン(199I)、
viii.211位のアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン(211D、211Eまたは211G)、
ix.アミノ酸(i)〜(viii)の組み合わせ
からなる群から選択されるプロテアーゼ
からなる群から選択されるプロテアーゼの使用。
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