JP5797372B2 - Platelet aggregation inhibitor, stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitor, matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity inhibitor, and matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitor - Google Patents

Platelet aggregation inhibitor, stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitor, matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity inhibitor, and matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitor Download PDF

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本発明は、合歓の抽出物を含有する抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤、並びに、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかを利用した化粧料、及び飲食品に関する。   The present invention relates to an antioxidant, an anti-inflammatory agent, a whitening agent, an anti-aging agent, a hair-restoring agent, an anti-obesity agent, and the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, and anti-aging agent, which contain an extract of Nehwa The present invention relates to a cosmetic using at least one of an agent, a hair restorer, and an anti-obesity agent, and a food and drink.

近年、生体成分を酸化させる要因として、活性酸素が注目されており、その生体への悪影響が問題となっている。活性酸素は、生体細胞内のエネルギー代謝過程で生じるものであり、スーパーオキサイド〔即ち、酸素分子の一電子還元で生じるスーパーオキシドアニオン(・O−)、過酸化水素(H)、一重項酸素()、ヒドロキシラジカル(・OH)〕等がある。このような活性酸素は食細胞の殺菌機構にとって必須であり、ウイルスや癌細胞の除去に重要な働きを果たしている。
しかし、前記活性酸素の過剰な生成は、生体内の膜及び組織を構成する生体内分子を攻撃し、各種疾患を誘発する。生体内で生産され、他の活性酸素の出発物質ともなっているスーパーオキサイドは、通常、細胞内に含まれているスーパーオキサイドジスムターゼ(SOD)の触媒作用により逐次消去されている。しかし、スーパーオキサイドの産生が過剰な場合、あるいはSODの作用が低下している場合には、スーパーオキサイドの消去が不十分になってスーパーオキサイド濃度が高くなる。このことが、関節リウマチ、ベーチェット病等の組織障害、心筋梗塞、脳卒中、白内障、シミ、ソバカス、しわ、糖尿病、動脈硬化、肩凝り、冷え性、皮膚の老化などを起こす原因の一つであると考えられている。
In recent years, active oxygen has attracted attention as a factor that oxidizes biological components, and its adverse effect on living organisms has become a problem. Reactive oxygen is generated in the process of energy metabolism in living cells, and superoxide [that is, superoxide anion (· O 2 −) generated by one-electron reduction of oxygen molecules, hydrogen peroxide (H 2 O 2 ), Singlet oxygen ( 1 O 2 ), hydroxy radical (.OH)], and the like. Such active oxygen is essential for the phagocytic sterilization mechanism and plays an important role in removing viruses and cancer cells.
However, excessive generation of the active oxygen attacks in vivo molecules constituting membranes and tissues in the living body and induces various diseases. Superoxide, which is produced in vivo and is a starting material for other active oxygen, is usually eliminated sequentially by the catalytic action of superoxide dismutase (SOD) contained in cells. However, when the production of superoxide is excessive or when the action of SOD is reduced, the superoxide is insufficiently erased and the superoxide concentration becomes high. This is one of the causes of tissue damage such as rheumatoid arthritis, Behcet's disease, myocardial infarction, stroke, cataract, spots, freckles, wrinkles, diabetes, arteriosclerosis, shoulder stiffness, coldness, skin aging, etc. It is considered.

これらの中でも、皮膚は紫外線等の環境因子の刺激を直接受けるため、スーパーオキサイドが生成し易い器官であるから、スーパーオキサイド濃度の上昇により、例えば、コラーゲン等の生体組織を分解、変性、又は架橋したり、また油脂類を酸化して細胞に障害を与える過酸化脂質を生成して、皮膚のしわを形成したり、皮膚の弾力性低下等の老化、炎症、肌の色素沈着を引き起こすという問題がある(非特許文献1参照)。
そこで、活性酸素消去物質、ラジカル消去物質、過酸化水素消去物質等を安全性の点で有利な天然物から得る試みがなされており、アブラナ科ブラシカ属植物の抽出物(特許文献1参照)、ベンケイソウ科リュウキュウベンケイ属植物の抽出物(特許文献2参照)、タマコチョウの抽出物(特許文献3参照)、スイオウの抽出物(特許文献4参照)、などに有効性が確認されている。
Among these, since the skin is directly affected by environmental factors such as ultraviolet rays, superoxide is likely to be generated. Therefore, when the superoxide concentration is increased, biological tissues such as collagen are decomposed, denatured, or crosslinked. Or oxidize fats and oils to produce lipid peroxides that damage cells, forming skin wrinkles, causing skin aging, inflammation, and skin pigmentation (See Non-Patent Document 1).
Therefore, attempts have been made to obtain active oxygen scavenging substances, radical scavenging substances, hydrogen peroxide scavenging substances, etc. from natural products advantageous in terms of safety, and extracts of Brassica Brassica plants (see Patent Document 1), Efficacy has been confirmed for extracts of plants belonging to the genus Ryukyubekei (see Patent Document 2), extracts of scallops (see Patent Document 3), extracts of sulfur (see Patent Document 4), and the like.

また、炎症性の疾患、例えば接触性皮膚炎(かぶれ)、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れを伴う各種皮膚疾患等の原因及び発症機構は多種多様である。その原因として、例えば、一酸化窒素(NO)産生、血小板凝集によるものなどが知られている。   In addition, there are various causes and onset mechanisms of inflammatory diseases such as contact dermatitis (rash), psoriasis, pemphigus vulgaris, and various other skin diseases with rough skin. As the cause thereof, for example, nitric oxide (NO) production and platelet aggregation are known.

前記血小板凝集は、アラキドン酸カスケードのホスホリパーゼA2の活性化を招き、それによりロイコトリエンB及びプロスタグランジンE2等が放出されて起炎物質となる。このため、血小板の凝集を阻害乃至抑制する物質によりアレルギー疾患性疾患、炎症性疾患を予防乃至治療する試みがなされている。このような血小板凝集抑制作用を有する生薬の抽出物としては、例えば、カナリウム属に属する植物の抽出物(特許文献5参照)、コウサンフウ抽出物(特許文献6参照)、藤茶抽出物(特許文献7参照)、などが報告されている。   The platelet aggregation leads to activation of phospholipase A2 in the arachidonic acid cascade, whereby leukotriene B, prostaglandin E2, and the like are released and become a inflammation substance. For this reason, attempts have been made to prevent or treat allergic diseases and inflammatory diseases with substances that inhibit or suppress platelet aggregation. Examples of extracts of herbal medicines having an inhibitory action on platelet aggregation include, for example, an extract of a plant belonging to the genus Canalium (see Patent Document 5), an extract of Kusasanfu (see Patent Document 6), and a Fuji tea extract (Patent Document). 7)) and the like have been reported.

また、皮膚においてメラニンは紫外線から生体を保護する役目も果たしているが、過剰生成や不均一な蓄積は、皮膚の黒化やシミの原因となる。一般に、メラニンは色素細胞の中で生合成される酵素チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化し、次いで、5,6−ジヒドロキシインドフェノール等の中間体を経て形成される。したがって、皮膚の色黒(皮膚色素沈着症)を予防・改善するため、即ち美白のためには、メラニン産生過程を阻害すること、或いは既に産生したメラニンを淡色漂白することが有効であると考えられる。
このようなチロシナーゼ阻害作用を有する生薬としては、例えば、藤茶抽出物(特許文献8参照)、ヤナギタデ抽出物(特許文献9参照)などが報告されている。
Melanin also plays a role in protecting the body from ultraviolet rays in the skin, but overproduction and uneven accumulation cause skin darkening and spots. In general, melanin is changed from tyrosine to dopa and from dopa to dopaquinone by the action of an enzyme tyrosinase biosynthesized in pigment cells, and then formed through an intermediate such as 5,6-dihydroxyindophenol. Therefore, in order to prevent and improve skin darkness (skin pigmentation), that is, for whitening, it is effective to inhibit the melanin production process or to lightly bleach already produced melanin. It is done.
As herbal medicines having such a tyrosinase inhibitory action, for example, Fuji tea extract (see Patent Document 8), Yanagita extract (see Patent Document 9) and the like have been reported.

また、これまでの美白剤開発は、メラニン生成の律速酵素であるチロシナーゼに注力して進められてきたが、最近、紫外線UV−B照射後に表皮ケラチノサイトからの産生が上昇し、色素細胞(メラノサイト)を活性化するサイトカインとして、α−メラノサイト刺激ホルモン(α−MSH)、エンドセリン−1(ET−1)、一酸化窒素、塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)、顆粒球・マクロファージ・コロニー刺激因子(GM−CSF)、幹細胞増殖因子(SCF)等が報告されており、これらが関与する情報伝達系を遮断することにより、メラニン産生を抑制して美白効果を導く物質の開発が盛んに行われるようになってきている。
前記幹細胞増殖因子(Stem Cell Factor,SCF)は、角化細胞、線維芽細胞、血管内皮細胞、骨髄ストローマ細胞等から産生されるタンパク質である。SCFは、多能性造血幹細胞、生殖細胞、肥満細胞、巨核球系前駆細胞、顆粒球・マクロファージ系前駆細胞、色素細胞等の増殖や分化を促進する作用を有することが知られている。また、SCFは、シミ部位や紫外線照射等によって発現が亢進することが知られている(非特許文献2参照)。SCFとしては、273のアミノ酸残基からなる膜結合型SCFと、タンパク質分解酵素の作用により切断され、膜から遊離する分泌型SCFとが知られている。膜結合型SCFは、角化細胞等に結合したまま色素細胞のSCFレセプターに結合し、色素細胞の増殖を促進する。また、分泌型SCFは、その結合部位にて切断され、細胞膜から遊離し、色素細胞のSCFレセプターに結合することによって、色素細胞の増殖を促進する。
そのため、SCFの異常産生は、色素細胞の異常増殖につながり、メラニン産生を亢進させ、シミ、ソバカス、くすみ等の原因となると考えられる。
したがって、SCFの発現上昇を抑制することは、色素細胞の増殖を抑制し、皮膚におけるメラニンの過剰産生を抑制し、日焼け後の色素沈着、シミ、ソバカス等の予防又は抑制に有用であると考えられる。
In addition, the development of whitening agents so far has been focused on tyrosinase, the rate-limiting enzyme for melanin production. Recently, production from epidermal keratinocytes increased after irradiation with ultraviolet UV-B, and pigment cells (melanocytes) Α-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH), endothelin-1 (ET-1), nitric oxide, basic fibroblast growth factor (bFGF), granulocyte / macrophage / colony stimulating factor (GM-CSF), stem cell growth factor (SCF), etc. have been reported. By blocking the information transmission system in which these are involved, development of a substance that suppresses melanin production and leads to a whitening effect is actively performed. It has become like this.
The stem cell growth factor (Stem Cell Factor, SCF) is a protein produced from keratinocytes, fibroblasts, vascular endothelial cells, bone marrow stromal cells and the like. SCF is known to have an action of promoting proliferation and differentiation of pluripotent hematopoietic stem cells, germ cells, mast cells, megakaryocyte precursor cells, granulocyte / macrophage precursor cells, pigment cells and the like. Moreover, it is known that the expression of SCF is enhanced by a spot site, ultraviolet irradiation or the like (see Non-Patent Document 2). As SCF, a membrane-bound SCF composed of 273 amino acid residues and a secreted SCF that is cleaved by the action of a proteolytic enzyme and released from the membrane are known. Membrane-bound SCF binds to the SCF receptor of the pigment cell while bound to keratinocytes and promotes the proliferation of the pigment cell. Secreted SCF is cleaved at the binding site, released from the cell membrane, and bound to the SCF receptor of the pigment cell, thereby promoting proliferation of the pigment cell.
Therefore, abnormal production of SCF is thought to lead to abnormal growth of pigment cells, increase melanin production, and cause stains, buckwheat, dullness, and the like.
Therefore, suppressing the increase in the expression of SCF suppresses the proliferation of pigment cells, suppresses the excessive production of melanin in the skin, and is considered useful for the prevention or suppression of pigmentation, sun spots, buckwheat, etc. after sunburn. It is done.

また、皮膚の表皮及び真皮は、表皮細胞、皮膚線維芽細胞、及び、これらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するコラーゲン等の細胞外マトリックスにより構成されている。若い皮膚においては、これら皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことにより、水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。
ところが、紫外線(UV−A、UV−B)の照射、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄、過酸化水素との接触等の外的因子の影響があったり、加齢が進んだりすると、細胞外マトリックスの主要構成成分であるコラーゲンの産生量が減少すると共に、架橋による弾力低下を起こす。その結果、皮膚は保湿機能や弾力性が低下し、角質は異常剥離を始めるため、肌は張りや艶を失い、荒れ、シワ等の老化症状を呈するようになる。更に、外的因子の影響や加齢に伴い、線維芽細胞の増殖率が低下すると、天然保湿因子であるヒアルロン酸の合成量が低下する。
このように皮膚の老化に伴う変化、即ち、シワ、くすみ、きめの消失、弾力性の低下等には、コラーゲン等の真皮マトリックス成分の減少乃至変性が関与していることが知られている。
また、コラーゲンの中でもI型コラーゲンは、最も多く体内に含まれるコラーゲンであり、皮膚の真皮にも多く含まれ、皮膚の強さを生み出す役割を果たしていることが知られている。
The epidermis and dermis of the skin are composed of epidermal cells, dermal fibroblasts, and an extracellular matrix such as collagen that is outside these cells and supports the skin structure. In young skin, the interaction between these skin tissues is kept constant, so that moisture retention, flexibility, elasticity, etc. are secured, and the skin is maintained in a fresh state with its tension and gloss. .
However, cells are affected by external factors such as ultraviolet (UV-A, UV-B) irradiation, significant drying of air, excessive skin washing, contact with hydrogen peroxide, etc., or aging progresses. The production amount of collagen, which is a main component of the outer matrix, is reduced, and the elasticity is reduced by crosslinking. As a result, the skin's moisturizing function and elasticity are lowered, and the horny layer begins to exfoliate abnormally, so that the skin loses its tension and gloss, and exhibits aging symptoms such as roughness and wrinkles. Furthermore, when the growth rate of fibroblasts decreases with the influence of external factors and aging, the synthesis amount of hyaluronic acid, which is a natural moisturizing factor, decreases.
As described above, it is known that changes accompanying aging of the skin, that is, wrinkles, dullness, disappearance of texture, decrease in elasticity, and the like are associated with reduction or modification of dermal matrix components such as collagen.
Among collagens, type I collagen is the most abundant collagen contained in the body and is also abundant in the dermis of the skin and is known to play a role in producing the strength of the skin.

また、近年、真皮マトリックス成分の減少乃至変性を誘導する因子として、マトリックスメタロプロテアーゼ類(以下、「MMPs」と称することもある)と呼ばれるタンパク質分解酵素群の分解及び再構築がある。
前記MMPsは、その一次構造と基質特異性の違いから、(1)コラゲナーゼ群(MMP−1、MMP−8及びMMP−13)、(2)ゼラチナーゼ群(MMP−2及びMMP−9)、(3)ストロメライシン群(MMP−3及びMMP−10)、(4)膜結合型マトリックスメタロプロテアーゼ群(MMP−14、MMP−15、MMP−16、及びMMP−17)、(5)その他(MMP−7、MMP−11、及びMMP−12)の5つのグループに分類されている(特許文献10参照)。
前記MMPsの中でも、MMP−1及びMMP−14は、皮膚の真皮マトリックスの主な構成成分であるI型コラーゲン、II型コラーゲン、III型コラーゲンを分解する酵素として知られている。また、その発現は紫外線の照射により大きく増加し、紫外線によるコラーゲンの減少乃至変性の一因となり、皮膚のシワ形成等の大きな要因であると考えられる。
In recent years, as a factor for inducing reduction or denaturation of dermal matrix components, there is degradation and reconstruction of a group of proteolytic enzymes called matrix metalloproteases (hereinafter also referred to as “MMPs”).
The MMPs are classified into (1) collagenase group (MMP-1, MMP-8 and MMP-13), (2) gelatinase group (MMP-2 and MMP-9), (1) due to differences in primary structure and substrate specificity. 3) Stromelysin group (MMP-3 and MMP-10), (4) Membrane-bound matrix metalloprotease group (MMP-14, MMP-15, MMP-16, and MMP-17), (5) Others ( MMP-7, MMP-11, and MMP-12) (see Patent Document 10).
Among the MMPs, MMP-1 and MMP-14 are known as enzymes that degrade type I collagen, type II collagen, and type III collagen, which are main components of the dermal matrix of the skin. In addition, the expression is greatly increased by the irradiation of ultraviolet rays, which contributes to decrease or denaturation of collagen by ultraviolet rays, and is considered to be a major factor such as the formation of wrinkles on the skin.

また、加齢に伴う皮膚老化の一因として、女性ホルモンの一種であるエストロゲンの分泌が減退することがある。エストロゲンは成人女性の健康維持に深く関わっており、その分泌不足は種々の内科的疾患を招く他、肌の過敏症、弾力性低下、潤いの減少等の好ましくない肌の変化の原因となることが知られている。   In addition, as a cause of skin aging associated with aging, secretion of estrogen, a type of female hormone, may decrease. Estrogen is deeply involved in maintaining the health of adult women, and its lack of secretion leads to various medical illnesses and can cause unwanted skin changes such as skin sensitivities, reduced elasticity and reduced moisture. It has been known.

したがって、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害、あるいは加齢によるエストロゲン分泌減退を補うことにより、皮膚のしわの形成、弾力性低下等の皮膚の老化を予防乃至治療できると考えられる。
これまでに、エストロゲン様作用剤としては、例えば、ステロイド系エストロゲン、非ステロイド系エストロゲン、フラボン系化合物(特許文献11〜13参照)などが報告されている。
Therefore, the formation of wrinkles in the skin, the decrease in elasticity, etc. are compensated by inhibiting matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity, inhibiting matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity, or decreasing estrogen secretion due to aging. It is thought that skin aging can be prevented or treated.
So far, as estrogenic agents, for example, steroidal estrogens, nonsteroidal estrogens, flavone compounds (see Patent Documents 11 to 13) and the like have been reported.

また、多くのステロイドホルモンは産生臓器から分泌された分子型で受容体と結合してその作用を発現するが、アンドロゲンと総称される男性ホルモンの場合、例えば、テストステロンは標的臓器の細胞内に入ってテストステロン5α−リダクターゼにより、ジヒドロテストステロンに還元されてから受容体と結合し、アンドロゲンとしての作用を発現する。
前記アンドロゲンは重要なホルモンであるが、それが過度に作用すると、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡(ニキビなど)、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等のさまざまな好ましくない症状を誘発する。
In addition, many steroid hormones are expressed in the molecular form secreted from the production organ and bind to the receptor to express its action. In the case of male hormones collectively called androgens, for example, testosterone enters the cells of the target organ. Then, it is reduced to dihydrotestosterone by testosterone 5α-reductase, and then binds to a receptor to express an action as an androgen.
The androgen is an important hormone, but if it acts excessively, it can be affected by various factors such as androgenetic alopecia, hirsutism, seborrhea, acne (such as acne), benign prostatic hyperplasia, prostate tumor, premature male sexuality, etc. Induces undesirable symptoms.

そこで、従来、これらの各種症状を改善するために過剰のアンドロゲンの作用を抑制する方法、具体的には、テストステロンをジヒドロテストステロンに還元するテストステロン5α−リダクターゼの作用を阻害することにより、ジヒドロテストステロンが生じるのを抑制する方法や、テストステロンから生じたジヒドロテストステロンが受容体と結合するのを阻害することによりアンドロゲン活性を発現させない方法が提案されている。
このようなテストステロン5α−リダクターゼの作用を阻害する作用(テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用)を有するものとしては、例えば、ウルシ科Choerospondias属植物の抽出物(特許文献14参照)などが報告されている。
また、ジヒドロテストステロンが受容体と結合するのを阻害する作用(アンドロゲン受容体結合阻害作用)を有するものとしては、例えば、マジト及びカチュアの少なくともいずれかの抽出物(特許文献15参照)などが報告されている。
Therefore, conventionally, in order to improve these various symptoms, a method for suppressing the action of excess androgen, specifically, by inhibiting the action of testosterone 5α-reductase that reduces testosterone to dihydrotestosterone, There have been proposed a method for suppressing the occurrence and a method for preventing the expression of androgen activity by inhibiting the binding of dihydrotestosterone generated from testosterone to the receptor.
For example, an extract of the genus Chorospondias genus plant (see Patent Document 14) has been reported as having such an action of inhibiting the action of testosterone 5α-reductase (testosterone 5α-reductase activity inhibiting action). .
In addition, examples of substances having an action of inhibiting the binding of dihydrotestosterone to a receptor (androgen receptor binding inhibitory action) include, for example, at least one extract of majito and cuta (see Patent Document 15). Has been.

また、肥満の防止には、脂肪の代謝促進に関与しているサイクリックAMPを分解する酵素であるサイクリックAMPホスホジエステラーゼの作用を抑制するのが有効であると考えられる。実際、サイクリックAMPホスホジエステラーゼの作用を抑えると、細胞内サイクリックAMPの濃度が上昇して脂質代謝が活発になり、肥満が解消されることが知られている。
このようなサイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有するものとしては、例えば、藤茶抽出物(特許文献16参照)などが報告されている。
In order to prevent obesity, it is considered effective to suppress the action of cyclic AMP phosphodiesterase, which is an enzyme that degrades cyclic AMP involved in promoting fat metabolism. In fact, it is known that when the action of cyclic AMP phosphodiesterase is suppressed, the concentration of intracellular cyclic AMP increases, lipid metabolism becomes active, and obesity is resolved.
As a substance having such a cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory effect, for example, Fuji tea extract (see Patent Document 16) has been reported.

しかしながら、現在までのところ、入手が容易で安価であり、安全性の高い天然物系のものであって、味、匂い、使用感等の点で添加対象物の品質に悪影響を及ぼさず、化粧料及び飲食品に広く使用可能な抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤は未だ提供されておらず、その速やかな提供が強く求められているのが現状である。   However, until now, however, it is a natural product that is easy to obtain, inexpensive, and highly safe, and does not adversely affect the quality of the additive in terms of taste, smell, feeling of use, etc. Antioxidants, anti-inflammatory agents, whitening agents, anti-aging agents, hair-restoring agents, and anti-obesity agents that can be widely used in foods and foods and drinks have not been provided yet, and their prompt provision is strongly demanded. Is the current situation.

特開2003−81848号公報JP 2003-81848 A 特開2005−29483号公報JP 2005-29483 A 特開2006−321730号公報JP 2006-321730 A 特開2007−8902号公報JP 2007-8902 A 特開2002−53478号公報JP 2002-53478 A 特開2002−53477号公報JP 2002-53477 A 特開2001−97873号公報JP 2001-97873 A 特開2002−370962号公報JP 2002-370962 A 特開2004−083488号公報JP 2004-083488 A 特開2000−344672号公報JP 2000-344672 A 特開2002−226323号公報JP 2002-226323 A 特開2001−316240号公報JP 2001-316240 A 特開2003−55245号公報JP 2003-55245 A 特開2003−55162号公報JP 2003-55162 A 特開2002−241297号公報JP 2002-241297 A 特開2003−12532号公報JP 2003-12532 A

「フレグランスジャーナル」臨時増刊No.14、p156、1995年“Fragrance Journal” Special Issue No. 14, p156, 1995 Hachiya A et al., J. Invest. Dermatol., No.116, 2001, p.578−586Hachiya A et al. , J. et al. Invest. Dermatol. , No. 116, 2001, p. 578-586

本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、優れた抗酸化作用を有し、かつ安全性の高い抗酸化剤、優れた抗炎症作用を有し、かつ安全性の高い抗炎症剤、優れた美白作用を有し、かつ安全性の高い美白剤、優れた抗老化作用を有し、かつ安全性の高い抗老化剤、優れた育毛作用を有し、かつ安全性の高い育毛剤、及び優れた抗肥満作用を有し、かつ安全性の高い抗肥満剤、並びに、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかを利用した化粧料、及び飲食品を提供することを目的とする。   An object of the present invention is to solve the conventional problems and achieve the following objects. That is, the present invention has an excellent antioxidant action and a highly safe antioxidant, an excellent anti-inflammatory action, and a highly safe anti-inflammatory agent, an excellent whitening action, A highly safe whitening agent, an excellent anti-aging effect, a highly safe anti-aging agent, an excellent hair restoring action, a highly safe hair restoring agent, and an excellent anti-obesity effect And anti-obesity agents with high safety, and cosmetics and foods and beverages using at least one of the antioxidants, anti-inflammatory agents, whitening agents, anti-aging agents, hair-restoring agents, and anti-obesity agents The purpose is to provide.

本発明者らは、前記課題を解決するために鋭意検討を行ったところ、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物が、優れた抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、抗老化作用、育毛作用、及び抗肥満作用を有することを知見し、本発明を完成するに至った。 The present inventors have conducted extensive studies to solve the above problems, an extract of Hehuan (Albizzia julibrissin) has excellent antioxidant, anti-inflammatory, whitening effect, anti-aging effect, hair growth effect, And it has been found that it has an anti-obesity action, and has completed the present invention.

本発明は、本発明者らの前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
<1> 合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物を含有することを特徴とする抗酸化剤である。
<2> スーパーオキサイド消去作用、及びラジカル消去作用の少なくともいずれかを有する前記<1>に記載の抗酸化剤である。
<3> 合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤である。
<4> 血小板凝集抑制作用を有する前記<3>に記載の抗炎症剤である。
<5> 合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物を含有することを特徴とする美白剤である。
<6> チロシナーゼ活性阻害作用、及び幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用の少なくともいずれかを有する前記<5>に記載の美白剤である。
<7> 合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物を含有することを特徴とする抗老化剤である。
<8> マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用、エストロゲン様作用、スーパーオキサイド消去作用、及びラジカル消去作用の少なくともいずれかを有する前記<7>に記載の抗老化剤である。
<9> 合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物を含有することを特徴とする育毛剤である。
<10> テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用、及びアンドロゲン受容体結合阻害作用の少なくともいずれかを有する前記<9>に記載の育毛剤である。
<11> 合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物を含有することを特徴とする抗肥満剤である。
<12> サイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有する前記<11>に記載の抗肥満剤である。
<13> 前記<1>から<2>のいずれかに記載の抗酸化剤、前記<3>から<4>のいずれかに記載の抗炎症剤、前記<5>から<6>のいずれかに記載の美白剤、前記<7>から<8>のいずれかに記載の抗老化剤、前記<9>から<10>のいずれかに記載の育毛剤、及び前記<11>から<12>のいずれかに記載の抗肥満剤の少なくともいずれかを含有することを特徴とする化粧料である。
<14> 前記<1>から<2>のいずれかに記載の抗酸化剤、前記<3>から<4>のいずれかに記載の抗炎症剤、前記<5>から<6>のいずれかに記載の美白剤、前記<7>から<8>のいずれかに記載の抗老化剤、前記<9>から<10>のいずれかに記載の育毛剤、及び前記<11>から<12>のいずれかに記載の抗肥満剤の少なくともいずれかを含有することを特徴とする飲食品である。
The present invention is based on the above findings of the present inventors, and means for solving the above problems are as follows. That is,
<1> An antioxidant containing an extract of Albizia julibrissin .
<2> The antioxidant according to <1>, which has at least one of a superoxide scavenging action and a radical scavenging action.
<3> An anti-inflammatory agent characterized by containing an extract of Albizia julibrissin .
<4> The anti-inflammatory agent according to <3>, which has a platelet aggregation inhibitory action.
<5> A whitening agent characterized by containing an extract of Albizizza julibrissin .
<6> The whitening agent according to <5>, which has at least one of a tyrosinase activity inhibitory action and a stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitory action.
<7> An anti-aging agent characterized by containing an extract of Albizia julibrissin .
<8> At least one of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity inhibitory action, matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitory action, estrogen-like action, superoxide scavenging action, and radical scavenging action The anti-aging agent according to <7>.
<9> A hair restorer comprising an extract of Albizia julibrissin .
<10> The hair restorer according to <9>, which has at least one of a testosterone 5α-reductase activity inhibitory action and an androgen receptor binding inhibitory action.
<11> An anti-obesity agent comprising an extract of Albizia julibrissin .
<12> The antiobesity agent according to <11>, which has a cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action.
<13> The antioxidant according to any one of <1> to <2>, the anti-inflammatory agent according to any one of <3> to <4>, and any one of <5> to <6> Whitening agent according to <7> to <8> above, anti-aging agent according to any of <9> to <10> above, and <11> to <12> above A cosmetic comprising at least one of the anti-obesity agents according to any one of the above.
<14> The antioxidant according to any one of <1> to <2>, the anti-inflammatory agent according to any one of <3> to <4>, and any one of <5> to <6> Whitening agent according to <7> to <8> above, anti-aging agent according to any of <9> to <10> above, and <11> to <12> above A food or drink comprising at least one of the anti-obesity agents according to any one of the above.

本発明によると、従来における諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、優れた抗酸化作用を有し、かつ安全性の高い抗酸化剤、優れた抗炎症作用を有し、かつ安全性の高い抗炎症剤、優れた美白作用を有し、かつ安全性の高い美白剤、優れた抗老化作用を有し、かつ安全性の高い抗老化剤、優れた育毛作用を有し、かつ安全性の高い育毛剤、及び優れた抗肥満作用を有し、かつ安全性の高い抗肥満剤、並びに、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかを利用した化粧料、及び飲食品を提供することができる。   According to the present invention, it is possible to solve the conventional problems, achieve the above-mentioned object, have an excellent antioxidant action, and have a high safety, an excellent anti-inflammatory action, and Highly safe anti-inflammatory agent, excellent whitening effect, high safety whitening agent, excellent anti-aging effect, high safety anti-aging agent, excellent hair growth action, And a highly safe hair restoring agent, an anti-obesity agent having excellent anti-obesity action and high safety, and the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restoring agent, and anti-anti-obesity agent Cosmetics using at least one of the obesity agents and foods and drinks can be provided.

(抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤)
本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤は、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物を含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
(Antioxidants, anti-inflammatory agents, whitening agents, anti-aging agents, hair restorers, and anti-obesity agents)
The antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent of the present invention comprise an extract of Albizia julibrissin , and further contain other ingredients as necessary. It contains.

前記抗酸化剤は、スーパーオキサイド消去作用、及びラジカル消去作用の少なくともいずれかに基づく抗酸化作用を有するものである。
前記抗炎症剤は、血小板凝集抑制作用に基づく抗炎症作用を有するものである。
前記美白剤は、チロシナーゼ活性阻害作用、及び幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用の少なくともいずれかに基づく美白作用を有するものである。
前記抗老化剤は、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用、エストロゲン様作用、スーパーオキサイド消去作用、及びラジカル消去作用の少なくともいずれかに基づく抗老化作用を有するものである。
前記育毛剤は、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用、及びアンドロゲン受容体結合阻害作用の少なくともいずれかに基づく育毛作用を有するものである。
前記抗肥満剤は、サイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用に基づく抗肥満作用を有するものである。
前記合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物が含有する、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、抗老化作用、育毛作用、及び抗肥満作用の少なくともいずれかを発揮する物質の詳細については不明であるが、前記合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物がこのような優れた作用を有し、抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤として有用であることは、従来には全く知られておらず、本発明者らによる新たな知見である。
The antioxidant has an antioxidant action based on at least one of a superoxide scavenging action and a radical scavenging action.
The anti-inflammatory agent has an anti-inflammatory action based on a platelet aggregation inhibitory action.
The whitening agent has a whitening action based on at least one of a tyrosinase activity inhibitory action and a stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitory action.
The anti-aging agent is at least one of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity inhibitory action, matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitory action, estrogen-like action, superoxide scavenging action, and radical scavenging action It has anti-aging action based on crab.
The hair restoring agent has a hair restoring action based on at least one of a testosterone 5α-reductase activity inhibitory action and an androgen receptor binding inhibitory action.
The anti-obesity agent has an anti-obesity action based on a cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action.
Wherein contained in the extract of Hehuan (Albizzia julibrissin), antioxidant, anti-inflammatory, whitening effect, anti-aging effects, it is unclear details of hair restoring action, and exhibits at least one anti-obesity agent However, the extract of the above-mentioned Albizzia julibrissin has such an excellent action and is useful as an antioxidant, an anti-inflammatory agent, a whitening agent, an anti-aging agent, a hair-restoring agent, and an anti-obesity agent. This is a new finding by the present inventors that has not been known at all.

前記合歓(Albizzia julibrissin)は、別名をネムノキともいい、マメ科の植物であり、中国の浙江、安微、江蘇、四川等に分布しており、これらの地域から容易に入手可能である。
抽出原料として使用する前記合歓の部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、花、蕾、果実、果皮、種子、種皮、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根、根茎、根皮、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、花が好ましい。
Said Nemu (Albizzia julibrissin) refers to the alias both Albizzia Julibrissin, is a leguminous plant, China Zhejiang, cheap fine, Jiangsu, are distributed in Sichuan, etc., it is readily available from these areas.
There is no particular limitation on the site of the cheering used as the extraction raw material, and it can be appropriately selected according to the purpose. For example, flowers, persimmons, fruits, pericarps, seeds, seed coats, stems, leaves, branches, branches and leaves, Examples thereof include trunk, bark, root, rhizome, root bark, and a mixture thereof. Among these, flowers are preferable.

抽出原料である前記合歓は、例えば、乾燥した後に、そのままの状態で又は粗砕機等を用いて粉砕した状態で、溶媒抽出に供することができる。中でも、前記抽出原料としては、採取後ただちに乾燥し、粉砕したものが好ましい。前記乾燥は、例えば、天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。なお、前記合歓は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、前記合歓の極性溶媒による抽出処理を、効率よく行うことができる。   For example, the above-mentioned soup that is an extraction raw material can be subjected to solvent extraction in a state of being dried or pulverized using a crusher or the like. Among them, the extraction raw material is preferably dried and pulverized immediately after collection. The drying may be performed, for example, in the sun or using a commonly used dryer. In addition, you may use the said welcome as an extraction raw material, after giving pretreatments, such as a degreasing | defatting, by nonpolar solvents, such as hexane and benzene. By performing pretreatment such as degreasing, the extraction treatment with the above-mentioned polar solvent can be performed efficiently.

前記合歓の抽出物は、植物の抽出に一般に用いられる方法を利用することによって、容易に得ることができる。また、前記合歓の抽出物としては、市販品を使用してもよい。なお、前記合歓の抽出物には、前記合歓の抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又は、これらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。   The extract of the joy can be easily obtained by using a method generally used for plant extraction. Moreover, you may use a commercial item as an extract of the said comfort. It should be noted that the above-mentioned extract of the cheers includes the extract of the cheers, the diluted or concentrated solution of the extract, the dried product of the extract, or any of these roughly purified products or purified products.

前記抽出に用いる溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水、親水性有機溶媒、又は、これらの混合溶媒を、室温又は溶媒の沸点以下の温度で用いることが好ましい。前記合歓に含まれる抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、抗老化作用、育毛作用、及び抗肥満作用の少なくともいずれかを示す成分は、極性溶媒を抽出溶媒とする抽出処理によって、容易に抽出することができる。   There is no restriction | limiting in particular as a solvent used for the said extraction, According to the objective, it can select suitably, For example, water, a hydrophilic organic solvent, or these mixed solvents are room temperature or the temperature below the boiling point of a solvent. It is preferable to use it. Ingredients that exhibit at least one of the antioxidative action, anti-inflammatory action, whitening action, anti-aging action, hair growth action, and anti-obesity action contained in the above-mentioned cheer are easily extracted by an extraction process using a polar solvent as an extraction solvent. can do.

前記抽出溶媒として使用し得る水としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。したがって、前記抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。   The water that can be used as the extraction solvent is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose. For example, pure water, tap water, well water, mineral water, mineral water, hot spring water, spring water, fresh water, etc. In addition, those subjected to various treatments are included. Examples of the treatment applied to water include purification, heating, sterilization, filtration, ion exchange, adjustment of osmotic pressure, buffering, and the like. Therefore, the water that can be used as the extraction solvent includes purified water, hot water, ion exchange water, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, and the like.

前記抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数1〜5の低級アルコール;アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン;1,3−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数2〜5の多価アルコールなどが挙げられ、該親水性有機溶媒と水との混合溶媒なども用いることができる。なお、前記水と前記親水性有機溶媒との混合溶媒を使用する際には、低級アルコールの場合は水10質量部に対して1質量部〜90質量部、低級脂肪族ケトンの場合は水10質量部に対して1質量部〜40質量部を混合したものを使用することが好ましい。また、多価アルコールの場合は水10質量部に対して1質量部〜90質量部を混合したものを使用することが好ましい。   The hydrophilic organic solvent that can be used as the extraction solvent is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include lower ones having 1 to 5 carbon atoms such as methanol, ethanol, propyl alcohol, and isopropyl alcohol. Alcohols: lower aliphatic ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; polyhydric alcohols having 2 to 5 carbon atoms such as 1,3-butylene glycol, propylene glycol, glycerin, etc., and a mixed solvent of the hydrophilic organic solvent and water Etc. can also be used. In addition, when using the mixed solvent of the said water and the said hydrophilic organic solvent, in the case of a lower alcohol, 1 mass part-90 mass parts with respect to 10 mass parts of water, and the water 10 in the case of a lower aliphatic ketone. It is preferable to use what mixed 1 mass part-40 mass parts with respect to the mass part. Moreover, in the case of polyhydric alcohol, it is preferable to use what mixed 1 mass part-90 mass parts with respect to 10 mass parts of water.

抽出原料である前記合歓から、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、抗老化作用、育毛作用、及び抗肥満作用の少なくともいずれかを有する抽出物を抽出するにあたって、特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温又は還流加熱下で、任意の抽出装置を用いて抽出することができる。
具体的には、抽出溶媒を満たした処理槽内に、前記各抽出原料を投入し、更に必要に応じて時々攪拌しながら、30分〜4時間静置して可溶性成分を溶出した後、ろ過して固形物を除去し、得られた抽出液から抽出溶媒を留去し、乾燥することにより抽出物を得ることができる。抽出溶媒量は通常、抽出原料の5倍量〜15倍量(質量比)である。抽出条件は、抽出溶媒として水を用いた場合には、通常50℃〜95℃にて1時間〜4時間程度である。また、抽出溶媒として水とエタノールとの混合溶媒を用いた場合には、通常40℃〜80℃にて30分間〜4時間程度である。なお、溶媒で抽出することにより得られる抽出液は、抽出溶媒が安全性の高いものであれば、そのまま本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の有効成分として用いることができる。
A special extraction method is employed to extract an extract having at least one of an antioxidant action, an anti-inflammatory action, a whitening action, an anti-aging action, a hair-growth action, and an anti-obesity action from the above-mentioned soup that is an extraction raw material. It is not necessary, and extraction can be performed using any extraction device at room temperature or under reflux heating.
Specifically, each of the extraction raw materials is put into a treatment tank filled with an extraction solvent, and the mixture is allowed to stand for 30 minutes to 4 hours with occasional stirring as necessary to elute soluble components, followed by filtration. Then, the solid matter is removed, the extraction solvent is distilled off from the obtained extract, and the extract can be obtained by drying. The amount of extraction solvent is usually 5 to 15 times (mass ratio) of the extraction raw material. The extraction conditions are usually about 1 to 4 hours at 50 to 95 ° C. when water is used as the extraction solvent. Moreover, when the mixed solvent of water and ethanol is used as an extraction solvent, it is normally 30 minutes-about 4 hours at 40 to 80 degreeC. In addition, the extract obtained by extracting with a solvent, as long as the extraction solvent is highly safe, as it is, the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-oxidant of the present invention. It can be used as an active ingredient of an obesity agent.

抽出により得られる前記合歓の抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るため、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。なお、得られる前記合歓の抽出液は、そのままでも抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又はその乾燥物としたものの方が利用しやすい。抽出液の乾燥物を得るにあたっては、常法を利用することができ、また、吸湿性を改善するためにデキストリン、シクロデキストリン等のキャリアーを添加してもよい。また、抽出原料である前記合歓は特有の匂いと味を有している場合があり、そのため、前記合歓の抽出物に対しては、生理活性の低下を招かない範囲で、脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、例えば化粧料に添加する場合などには大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。なお、精製は、具体的には、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行うことができる。   In order to obtain a dilute or concentrated solution of the extract, a dried product of the extract, or a crude purified product or a purified product thereof, the extract of the funeral obtained by extraction is diluted, concentrated, dried according to a conventional method. Treatment such as purification may be performed. In addition, the obtained soy sauce extract can be used as an active ingredient of an antioxidant, an anti-inflammatory agent, a whitening agent, an anti-aging agent, a hair-restoring agent, and an anti-obesity agent as it is. The dried product is easier to use. In obtaining the dried extract, a conventional method can be used, and carriers such as dextrin and cyclodextrin may be added to improve hygroscopicity. In addition, the soy sauce that is an extraction raw material may have a peculiar smell and taste, and therefore, the soy sauce extract may be decolorized, deodorized, etc. within a range that does not cause a decrease in physiological activity. Although it is possible to carry out the desired purification, for example, when it is added to cosmetics, it is not used in a large amount. Specifically, purification can be performed by activated carbon treatment, adsorption resin treatment, ion exchange resin treatment, or the like.

以上のようにして得られる前記合歓の抽出物は、スーパーオキサイド消去作用、ラジカル消去作用、血小板凝集抑制作用、チロシナーゼ活性阻害作用、幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用、エストロゲン様作用、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、及びサイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用の少なくともいずれかを有し、これらの作用に基づき、本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかの有効成分として好適に利用可能なものである。
なお、前記合歓の抽出物は、前記した各作用に基づき、スーパーオキサイド消去剤、ラジカル消去剤、血小板凝集抑制剤、チロシナーゼ活性阻害剤、幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制剤、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害剤、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害剤、エストロゲン様作用剤、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、及びサイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害剤としても、それぞれ好適に利用可能である。
The extract of the above-mentioned funeral obtained as described above has a superoxide scavenging action, radical scavenging action, platelet aggregation inhibitory action, tyrosinase activity inhibitory action, stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitory action, matrix metalloproteinase-1 ( MMP-1) activity inhibitory action, matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitory action, estrogen-like action, testosterone 5α-reductase activity inhibitory action, androgen receptor binding inhibitory action, and cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action Based on these actions, it can be suitably used as an active ingredient of at least one of the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent of the present invention. Is something.
It should be noted that the above-mentioned extract of joy is based on each of the above-mentioned actions, and is based on the above-described actions, superoxide scavenger, radical scavenger, platelet aggregation inhibitor, tyrosinase activity inhibitor, stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitor, matrix metalloproteinase- 1 (MMP-1) activity inhibitor, matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitor, estrogen-like agent, testosterone 5α-reductase activity inhibitor, androgen receptor binding inhibitor, and cyclic AMP phosphodiesterase activity Inhibitors can also be preferably used.

本発明の抗酸化剤における抗酸化作用は、スーパーオキサイド消去作用、及びラジカル消去作用の少なくともいずれかに基づいて発揮される。
本発明の抗炎症剤における抗炎症作用は、血小板凝集抑制作用に基づいて発揮される。
本発明の美白剤における美白作用は、チロシナーゼ活性阻害作用、及び幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用の少なくともいずれかに基づいて発揮される。
本発明の抗老化剤における抗老化作用は、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用、エストロゲン様作用、スーパーオキサイド消去作用、及びラジカル消去作用の少なくともいずれかに基づいて発揮される。
前記スーパーオキサイド消去作用、及びラジカル消去作用に基づく抗老化作用によれば、例えば、皮膚において過剰に生成された活性酸素による皮膚のしわの形成や皮膚の弾力性の低下を抑制することができる。
本発明の育毛剤における育毛作用は、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用、及びアンドロゲン受容体結合阻害作用の少なくともいずれかに基づいて発揮される。
本発明の抗肥満剤における抗肥満作用は、サイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用に基づいて発揮される。
The antioxidant action in the antioxidant of the present invention is exhibited based on at least one of a superoxide scavenging action and a radical scavenging action.
The anti-inflammatory action of the anti-inflammatory agent of the present invention is exhibited based on the platelet aggregation inhibitory action.
The whitening action of the whitening agent of the present invention is exhibited based on at least one of a tyrosinase activity inhibitory action and a stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitory action.
The anti-aging action of the anti-aging agent of the present invention includes matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity inhibitory action, matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitory action, estrogen-like action, superoxide scavenging action, and It is exhibited based on at least one of radical scavenging action.
According to the anti-aging action based on the superoxide scavenging action and the radical scavenging action, for example, it is possible to suppress the formation of wrinkles on the skin and the decrease in the elasticity of the skin due to the active oxygen generated excessively in the skin.
The hair-restoring effect of the hair-restoring agent of the present invention is exhibited based on at least one of a testosterone 5α-reductase activity inhibiting action and an androgen receptor binding inhibiting action.
The anti-obesity action of the anti-obesity agent of the present invention is exhibited based on the cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action.

前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、抗肥満剤中の前記合歓の抽出物の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、また、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、抗肥満剤は、前記合歓の抽出物そのものであってもよい。   The content of the joy extract in the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, anti-obesity agent is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose. In addition, the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent may be the so-called “excitement extract” itself.

また、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、抗肥満剤中に含まれ得る、前記合歓の抽出物以外のその他の成分としても、本発明の効果を損なわない範囲内であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記合歓の抽出物を所望の濃度に希釈等するための、生理食塩液などが挙げられる。また、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、抗肥満剤中の前記その他の成分の含有量にも、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
また、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、抗肥満剤は、必要に応じて製剤化することにより、粉末状、顆粒状、錠剤状等、任意の剤形とすることができる。
In addition, the effects of the present invention are not impaired as other components other than the above-mentioned extract of joy that can be contained in the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent. If it is in the range, there is no particular limitation, and it can be appropriately selected according to the purpose. For example, a physiological saline solution for diluting the extract of the joy to a desired concentration can be mentioned. Further, the content of the other components in the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose. it can.
In addition, the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair-restoring agent, anti-obesity agent can be formulated into powders, granules, tablets, etc. in any dosage form by formulating as necessary. It can be.

本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、抗肥満剤は、優れた抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、抗老化作用、育毛作用、抗肥満作用を有すると共に、安全性に優れるため、例えば、後述する本発明の化粧料、本発明の飲食品などへの利用に好適である。   The antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer and anti-obesity agent of the present invention have excellent antioxidant action, anti-inflammatory action, whitening action, anti-aging action, hair growth action and anti-obesity action. In addition to being excellent in safety, it is suitable for use in, for example, the cosmetics of the present invention described later and the food and drink of the present invention.

(化粧料)
本発明の化粧料は、前記した本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかを含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
前記化粧料は、前記合歓の抽出物を、その活性を妨げないように任意の化粧料に配合したものであってもよいし、前記合歓の抽出物を主成分とした化粧料であってもよい。また、前記化粧料は、前記合歓の抽出物そのものであってもよい。
(Cosmetics)
The cosmetic of the present invention contains at least one of the above-described antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent of the present invention. It contains.
The cosmetic may be a composition in which the extract of the cheer is blended with an arbitrary cosmetic so as not to hinder the activity thereof, or may be a cosmetic mainly composed of the extract of the cheer. Good. In addition, the cosmetic may be the comforting extract itself.

本発明の化粧料は、高い安全性を有し、優れたスーパーオキサイド消去作用、ラジカル消去作用、血小板凝集抑制作用、チロシナーゼ活性阻害作用、幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用、エストロゲン様作用、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、及びサイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用の少なくともいずれかを発揮するものである。   The cosmetic of the present invention has high safety and has excellent superoxide scavenging action, radical scavenging action, platelet aggregation inhibitory action, tyrosinase activity inhibitory action, stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitory action, matrix metalloprotease- 1 (MMP-1) activity inhibitory action, matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitory action, estrogen-like action, testosterone 5α-reductase activity inhibitory action, androgen receptor binding inhibitory action, and cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action It exhibits at least one of the actions.

ここで、前記化粧料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、皮膚化粧料、頭髪化粧料などが挙げられる。
前記化粧料の用途としては、特に制限はなく、各種用途から適宜選択することができ、例えば、軟膏、クリーム、乳液、化粧水、ローション、パック、ゼリー、リップクリーム、口紅、入浴剤、アストリンゼント、ヘアトニック、シャンプー、リンスなどが挙げられる。
Here, there is no restriction | limiting in particular as said cosmetics, According to the objective, it can select suitably, For example, skin cosmetics, hair cosmetics, etc. are mentioned.
The use of the cosmetic is not particularly limited and can be appropriately selected from various uses. For example, ointment, cream, emulsion, lotion, lotion, pack, jelly, lip balm, lipstick, bath preparation, astringent, Hair tonic, shampoo, rinse etc. are mentioned.

前記化粧料は、更に必要に応じて本発明の目的及び作用効果を損なわない範囲で、その化粧料の製造に通常使用される各種主剤及び助剤、その他の成分を添加することができる。
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、収斂剤、殺菌剤、抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料、などが挙げられる。
If necessary, the cosmetic can further contain various main ingredients and auxiliaries usually used in the production of the cosmetic and other components as long as the objects and effects of the present invention are not impaired.
The other components are not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, astringents, bactericides, antibacterial agents, whitening agents, ultraviolet absorbers, humectants, cell activators, fats and oils Waxes, hydrocarbons, fatty acids, alcohols, esters, surfactants, fragrances, and the like.

前記化粧料中の、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかの含有量としては、特に制限はなく、化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整することができるが、例えば、前記合歓の抽出物の量として、0.0001質量%〜10質量%が好ましく、0.001質量%〜5質量%がより好ましい。   The content of at least one of the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent in the cosmetic is not particularly limited, and the type and extraction of the cosmetic Although it can adjust suitably according to the physiological activity etc. of a thing, 0.0001 mass%-10 mass% are preferable as an amount of the extract of the said comfort, for example, 0.001 mass%-5 mass% are more preferable.

(飲食品)
本発明の飲食品は、前記した本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかを含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
ここで、前記飲食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品などの区分に制限されるものではなく、例えば、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品、医薬部外品、医薬品などを幅広く含むものを意味する。
前記飲食品は、前記合歓の抽出物を、その活性を妨げないように任意の飲食物に配合したものであってもよいし、前記合歓の抽出物を主成分とする栄養補助食品であってもよい。また、前記飲食品は、前記合歓の抽出物そのものであってもよい。
(Food)
The food / beverage product of the present invention contains at least one of the above-described antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent of the present invention. It contains.
Here, the food and drink are those which are less likely to harm human health and are taken by oral or gastrointestinal administration in normal social life. It is not limited to the category of goods, etc., and means, for example, a wide range of foods that are taken orally, such as general foods, health foods, health functional foods, quasi drugs, and pharmaceuticals.
The food or drink may be any food or drink blended with any extract of the cheer extract so as not to interfere with its activity. Also good. In addition, the food and drink may be the joy extract itself.

本発明の飲食品は、高い安全性を有し、優れたスーパーオキサイド消去作用、ラジカル消去作用、血小板凝集抑制作用、チロシナーゼ活性阻害作用、幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用、エストロゲン様作用、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、及びサイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用の少なくともいずれかを発揮するものである。   The food / beverage product of the present invention has high safety and excellent superoxide scavenging action, radical scavenging action, platelet aggregation inhibitory action, tyrosinase activity inhibitory action, stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitory action, matrix metalloprotease- 1 (MMP-1) activity inhibitory action, matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitory action, estrogen-like action, testosterone 5α-reductase activity inhibitory action, androgen receptor binding inhibitory action, and cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action It exhibits at least one of the actions.

前記飲食品としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料;アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓;そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類;飴、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パン等の菓子類;カニ、サケ、アサリ、マグロ、イワシ、エビ、カツオ、サバ、クジラ、カキ、サンマ、イカ、アカガイ、ホタテ、アワビ、ウニ、イクラ、トコブシ等の水産物;かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品;加工乳、発酵乳等の乳製品;サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品;ソース、たれ等の調味料;カレー、シチュー、親子丼、お粥、雑炊、中華丼、かつ丼、天丼、うな丼、ハヤシライス、おでん、マーボドーフ、牛丼、ミートソース、玉子スープ、オムライス、餃子、シューマイ、ハンバーグ、ミートボール等のレトルトパウチ食品;種々の形態の健康食品や栄養補助食品;錠剤、カプセル剤、ドリンク剤、トローチ等の医薬品、医薬部外品などが挙げられる。   There is no restriction | limiting in particular as said food-drinks, According to the objective, it can select suitably, For example, drinks, such as a soft drink, a carbonated drink, a nutrition drink, a fruit drink, a lactic acid drink; Ice cream, ice sherbet, shaved ice, etc. Noodles such as buckwheat noodles, udon, harusame, gyoza skin, sweet husk, Chinese noodles, instant noodles; rice cakes, candy, gum, chocolate, tablet confectionery, snack confectionery, biscuits, jelly, jam, cream, baked confectionery, Sweets such as bread; crab, salmon, clams, tuna, sardines, shrimp, skipjack, mackerel, whale, oyster, saury, squid, red sea bream, scallops, abalone, sea urchin, crabs, tocobushi, etc .; kamaboko, ham, sausage Processed fishery and livestock products such as dairy products such as processed milk and fermented milk; salad oil, tempura oil, margarine, mayonnaise, and short nibs Fats and processed oils such as whipped cream and dressings; seasonings such as sauces and sauces; curry, stew, oyakodon, rice cakes, miso cooked rice, Chinese rice cakes, and rice cakes, tempura, eel rice, hayashi rice, oden, marvodorf, Retort pouch foods such as beef bowl, meat sauce, egg soup, omelet rice, dumplings, shumai, hamburger, meatballs; various forms of health foods and nutritional supplements; pharmaceuticals such as tablets, capsules, drinks, troches, etc. Examples include foreign products.

前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、飲食品を製造するにあたって通常用いられる、補助的原料又は添加物などが挙げられる。
前記補助的原料又は添加物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、L−アスコルビン酸、dl−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンB類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
There is no restriction | limiting in particular as said other component, According to the objective, it can select suitably, For example, the auxiliary | assistant raw material or additive etc. which are normally used in manufacturing food-drinks are mentioned.
The auxiliary raw material or additive is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, glucose, fructose, sucrose, maltose, sorbitol, stevioside, rubusoside, corn syrup, lactose, citric acid , Tartaric acid, malic acid, succinic acid, lactic acid, L-ascorbic acid, dl-α-tocopherol, sodium erythorbate, glycerin, propylene glycol, glycerin fatty acid ester, polyglycerin fatty acid ester, sucrose fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, Arabia Examples include gum, carrageenan, casein, gelatin, pectin, agar, vitamin Bs, nicotinic acid amide, calcium pantothenate, amino acids, calcium salts, pigments, fragrances, preservatives and the like.

前記飲食品中の、前記抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかの含有量としては、対象となる飲食品の種類に応じて異なり、一概には規定することができないが、例えば、飲食品本来の味を損なわない範囲で任意の飲食物に配合することを目的とする場合には、有効成分である前記合歓の抽出物の量として、0.001質量%〜50質量%が好ましく、0.01質量%〜20質量%がより好ましい。また、例えば、前記合歓の抽出物を主成分とする顆粒、錠剤、カプセル形態等の栄養補助飲食品を製造することを目的とする場合には、有効成分である前記合歓の抽出物の量として、0.01質量%〜100質量%が好ましく、5質量%〜100質量%がより好ましい。   The content of at least one of the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent in the food / beverage product varies depending on the type of the food / beverage product. For example, when it is intended to be blended in any food or drink within a range that does not impair the original taste of the food or drink, the amount of the extract of the cheerful ingredient that is an active ingredient cannot be specified. As 0.001 mass%-50 mass% are preferable, and 0.01 mass%-20 mass% are more preferable. In addition, for example, when the purpose is to produce nutritional supplement foods and drinks such as granules, tablets, capsules and the like mainly composed of the extract of Nehwa, the amount of the Nehwa extract as an active ingredient 0.01 mass% to 100 mass% is preferable, and 5 mass% to 100 mass% is more preferable.

(効果)
本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤、並びに、化粧料及び飲食品は、日常的に使用することが可能であり、有効成分である前記合歓の抽出物の働きによって、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、抗老化作用、育毛作用、及び抗肥満作用の少なくともいずれかを、極めて効果的に発揮させることができるものである。
(effect)
The antioxidants, anti-inflammatory agents, whitening agents, anti-aging agents, hair-restoring agents, anti-obesity agents, cosmetics and foods and beverages of the present invention can be used on a daily basis and are active ingredients. By the action of the extract of joy, at least one of an antioxidant action, an anti-inflammatory action, a whitening action, an anti-aging action, a hair growth action and an anti-obesity action can be exhibited extremely effectively.

なお、本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤、並びに、化粧料及び飲食品は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、その作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物(例えば、マウス、ラット、ハムスター、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、サルなど)に対して適用することも可能である。また、本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤、並びに、化粧料及び飲食品は、天然由来の前記合歓の抽出物を有効成分としたものであり、安全性に優れる点でも、有利である。   The antioxidants, anti-inflammatory agents, whitening agents, anti-aging agents, hair-restoring agents, anti-obesity agents, and cosmetics and foods and beverages of the present invention are preferably applied to humans. It is also possible to apply to animals other than humans (for example, mice, rats, hamsters, dogs, cats, cows, pigs, monkeys, etc.) as long as their effects are exhibited. Further, the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair-restoring agent, anti-obesity agent, and cosmetics and foods and beverages of the present invention have the above-mentioned extract of natural fun as an active ingredient. It is also advantageous in that it is excellent in safety.

以下、本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。   Examples of the present invention will be described below, but the present invention is not limited to these examples.

(製造例1)
−合歓(Albizzia julibrissin)の水抽出物の製造−
合歓の花の粉砕物に、質量比で10倍量の水を加え、80℃で2時間加熱し、ろ過した。残渣に同量の水を加え、80℃で2時間加熱し、ろ過した。ろ液を濃縮、凍結乾燥して、合歓の水抽出物(凍結乾燥品)を得た。なお、得られた合歓の水抽出物の抽出率は、31.5%であった。
(Production Example 1)
-Manufacture of water extract of Albizia julibrissin-
Ten times the amount of water by mass ratio was added to the crushed flower of the cheering flowers, heated at 80 ° C. for 2 hours, and filtered. The same amount of water was added to the residue, heated at 80 ° C. for 2 hours, and filtered. The filtrate was concentrated and freeze-dried to obtain a water extract (freeze-dried product). In addition, the extraction rate of the obtained water extract of Nehwa was 31.5%.

(製造例2)
−合歓(Albizzia julibrissin)の50質量%エタノール抽出物の製造−
合歓の花の粉砕物に、質量比で10倍量の50質量%エタノールを加え、80℃で2時間加熱し、ろ過した。残渣に同量の50質量%エタノールを加え、80℃で2時間加熱し、ろ過した。ろ液を濃縮、凍結乾燥して、合歓の50質量%エタノール抽出物(凍結乾燥品)を得た。なお、得られた合歓の50質量%エタノール抽出物の抽出率は、29.8%であった。
(Production Example 2)
- preparation of 50 wt% ethanol extract of Hehuan (Albizzia julibrissin) -
Ten masses of 50% by mass of ethanol was added to the crushed flower of Nehwa, heated at 80 ° C. for 2 hours, and filtered. The same amount of 50% by mass ethanol was added to the residue, heated at 80 ° C. for 2 hours, and filtered. The filtrate was concentrated and freeze-dried to obtain a 50% by weight ethanol extract (freeze-dried product). In addition, the extraction rate of the obtained 50% by mass ethanol extract of Nehwa was 29.8%.

(製造例3)
−合歓(Albizzia julibrissin)の80質量%エタノール抽出物の製造−
合歓の花の粉砕物に、質量比で10倍量(質量比)の80質量%エタノールを加え、80℃で2時間加熱し、ろ過した。残渣に同量の80質量%エタノールを加え、80℃で2時間加熱し、ろ過した。ろ液を濃縮、凍結乾燥して、合歓の80質量%エタノール抽出物(凍結乾燥品)を得た。なお、得られた合歓の80質量%エタノール抽出物の抽出率は、26.9%であった。
(Production Example 3)
-Production of 80% by weight ethanol extract of Albizia julibrissin-
10 masses (mass ratio) of 80% by mass ethanol was added to the pulverized flower of Nehwa, heated at 80 ° C. for 2 hours, and filtered. The same amount of 80% by mass ethanol was added to the residue, heated at 80 ° C. for 2 hours, and filtered. The filtrate was concentrated and freeze-dried to obtain a 80% by weight ethanol extract (freeze-dried product). In addition, the extraction rate of the obtained 80% by mass ethanol extract of Nehwa was 26.9%.

参考例1:スーパーオキサイド消去作用試験(NBT法))
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法によりスーパーオキサイド消去作用を試験した。
( Reference Example 1: Superoxide scavenging action test (NBT method))
The superoxide scavenging action was tested by the following test method using the extract of each cheers obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample.

3mmol/Lのキサンチン、3mmol/LのEDTA、1.5mg/mLの牛血清アルブミン(BSA)溶液、0.75mmol/Lのニトロブルーテトラゾリウム(NBT)各0.1mL、及び0.05mol/LのNaCO緩衝液(pH10.2)2.4mLを試験管にとり、これに各試料溶液0.1mLを添加し、25℃で10分間放置した。次いで、キサンチンオキシダーゼ溶液を加えて素早く攪拌し、25℃で20分間静置した。その後、6mmol/Lの塩化銅0.1mLを加えて反応を停止させ、波長560nmにおける吸光度を測定した。このとき測定した吸光度を「試料溶液添加、酵素溶液添加時の吸光度」とした。
また、同様の操作と吸光度の測定を、酵素溶液を添加せずに行った。このとき測定した吸光度を「試料溶液添加、酵素溶液無添加時の吸光度」とした。
また、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。このとき測定した吸光度を「試料溶液無添加、酵素溶液添加時の吸光度」とした。
また、酵素溶液を添加せず、更に試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。このとき測定した吸光度を「試料溶液無添加、酵素溶液無添加時の吸光度」とした。
そして、測定結果から、下記数式1によりスーパーオキサイド消去率を求めた。結果を表1に示す。なお、被験試料は、試料濃度100μg/mL、50μg/mL、25μg/mLで使用した。
<数式1>
スーパーオキサイド消去率(%)={1−(A−B)/(C−D)}×100
A:試料溶液添加、酵素溶液添加時の吸光度
B:試料溶液添加、酵素溶液無添加時の吸光度
C:試料溶液無添加、酵素溶液添加時の吸光度
D:試料溶液無添加、酵素溶液無添加時の吸光度
3 mmol / L xanthine, 3 mmol / L EDTA, 1.5 mg / mL bovine serum albumin (BSA) solution, 0.75 mmol / L nitroblue tetrazolium (NBT) 0.1 mL each, and 0.05 mol / L 2.4 mL of Na 2 CO 3 buffer (pH 10.2) was placed in a test tube, 0.1 mL of each sample solution was added thereto, and the mixture was allowed to stand at 25 ° C. for 10 minutes. Subsequently, the xanthine oxidase solution was added, it stirred rapidly, and it left still at 25 degreeC for 20 minutes. Thereafter, 0.1 mL of 6 mmol / L copper chloride was added to stop the reaction, and the absorbance at a wavelength of 560 nm was measured. The absorbance measured at this time was defined as “absorbance upon addition of sample solution and enzyme solution”.
The same operation and measurement of absorbance were performed without adding the enzyme solution. The absorbance measured at this time was defined as “absorbance when the sample solution was added and no enzyme solution was added”.
The same measurement was performed when distilled water was added without adding the sample solution. The absorbance measured at this time was defined as “absorbance when no sample solution was added and enzyme solution was added”.
Moreover, the same measurement was performed when distilled water was added without adding the enzyme solution and without adding the sample solution. The absorbance measured at this time was defined as “absorbance when no sample solution was added and no enzyme solution was added”.
And the superoxide elimination rate was calculated | required by following Numerical formula 1 from the measurement result. The results are shown in Table 1. The test samples were used at sample concentrations of 100 μg / mL, 50 μg / mL, and 25 μg / mL.
<Formula 1>
Superoxide erasure rate (%) = {1- (AB) / (CD)} × 100
A: Absorbance when sample solution is added and enzyme solution is added B: Absorbance when sample solution is added and enzyme solution is not added C: Absorbance when sample solution is not added and enzyme solution is added D: When sample solution is not added and enzyme solution is not added Absorbance of

次に、試料濃度を段階的に減少させて上記スーパーオキサイド消去率の測定を行い、スーパーオキサイドの消去率が50%になる試料濃度(以下、「IC50」と称することがある。)(μg/mL)を内挿法により求めた。結果を表2に示す。 Next, the superoxide erasure rate is measured by gradually reducing the sample concentration, and the sample concentration at which the superoxide erasure rate becomes 50% (hereinafter sometimes referred to as “IC 50 ”) (μg). / ML) was determined by interpolation. The results are shown in Table 2.

Figure 0005797372
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表1から2の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、中程度のスーパーオキサイド消去作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
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From the results of Tables 1 and 2, it was confirmed that the extract of Nehwa in Production Examples 1 to 3 had a moderate superoxide scavenging action.

参考例2:DPPHに対するラジカル消去作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法により非常に安定なラジカルである1,1−diphenyl−2−picrylhydrazyl radical(DPPH)を使用してラジカル消去作用を試験した。
( Reference Example 2: Radical scavenging action test for DPPH)
Using each of the extracts of the cheers obtained in Preparation Examples 1 to 3 as test samples, 1,1-diphenyl-2-picrylhydradyl radical (DPPH), which is a very stable radical, was used according to the following test method. The radical scavenging action was tested.

1.5×10−4mol/LのDPPHエタノール溶液3mLに各試料溶液3mLを加え、直ちに容器を密栓して振り混ぜ、30分間静置した後、波長520nmの吸光度を測定した。
コントロールとして、試料溶液の代わりに試料溶液を溶解した溶媒を用いて同様に操作し、波長520nmの吸光度を測定した。また、ブランクとして、エタノールに試料溶液3mLを加えた後、直ちに波長520nmの吸光度を測定した。
そして、測定結果から、下記数式2によりラジカル消去率(%)を求めた。結果を表3に示す。なお、被験試料は、試料濃度200μg/mL、100μg/mL、50μg/mLで使用した。
<数式2>
ラジカル消去率(%)={1−(B−C)/A}×100
A:コントロールの吸光度
B:試料溶液を添加した場合の吸光度
C:ブランクの吸光度
3 mL of each sample solution was added to 3 mL of 1.5 × 10 −4 mol / L DPPH ethanol solution, and the container was immediately sealed and shaken and allowed to stand for 30 minutes, and then the absorbance at a wavelength of 520 nm was measured.
As a control, the same operation was performed using a solvent in which the sample solution was dissolved instead of the sample solution, and the absorbance at a wavelength of 520 nm was measured. Further, as a blank, after adding 3 mL of the sample solution to ethanol, the absorbance at a wavelength of 520 nm was measured immediately.
And from the measurement result, radical elimination rate (%) was calculated | required by following Numerical formula 2. The results are shown in Table 3. The test samples were used at sample concentrations of 200 μg / mL, 100 μg / mL, and 50 μg / mL.
<Formula 2>
Radical scavenging rate (%) = {1− (BC) / A} × 100
A: Absorbance of control B: Absorbance when sample solution is added C: Absorbance of blank

次に、試料濃度を段階的に減少させて上記ラジカル消去率の測定を行い、DPPHラジカルの消去率が50%になる試料濃度(以下、「IC50」と称することがある。)(μg/mL)を内挿法により求めた。結果を表4に示す。 Next, the radical scavenging rate is measured by decreasing the sample concentration step by step, and the sample concentration at which the DPPH radical scavenging rate is 50% (hereinafter sometimes referred to as “IC 50 ”) (μg / mL) was determined by interpolation. The results are shown in Table 4.

Figure 0005797372
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表3から4の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、DPPHに対するラジカル消去作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
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From the results of Tables 3 to 4, it was confirmed that the extract of Nehwa in Production Examples 1 to 3 had a radical scavenging action on DPPH.

参考例1から2の結果から、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物は、スーパーオキサイド消去作用、及びラジカル消去作用の少なくともいずれかを有することが確認され、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物が、抗酸化剤、及び抗老化剤の有効成分として、好適に利用可能であることが示唆された。 The results from Example 1 2, extract of Hehuan (Albizzia julibrissin) is superoxide scavenging action, and was confirmed to have at least one radical scavenging action, an extract of Hehuan (Albizzia julibrissin), anti It was suggested that it can be suitably used as an active ingredient of an oxidizing agent and an anti-aging agent.

(実施例3:血小板凝集抑制作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法により血小板凝集抑制作用を試験した。
(Example 3: platelet aggregation inhibitory action test)
Using the extract of each cheer obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample, the platelet aggregation inhibitory action was tested by the following test method.

日本薬局方ヘパリンナトリウム注射液を1/10量加えて採血したウサギの血液を遠心分離(180×g、10分間、室温)して血小板浮遊液(P.R.P.)を得た。これを血小板浮遊液とした。血小板浮遊液223μLに200mmol/L塩化カルシウム溶液1μLを加え、37℃で1分間反応した。これに被験試料溶液1μLを加え、さらに2分間反応し、撹拌子を入れて1分間撹拌した後、コラーゲン溶液を25μL添加して37℃で10分間の凝集を血小板凝集測定装置PAM12CL(メバニクス株式会社製)を用いて、凝集率(A)を測定した。別に、試料溶液の代わりに試料溶液の溶媒を添加し、上記と同様に操作し、凝集率(B)を測定し、下記数式3により血小板凝集抑制率を求めた。結果を表5に示す。なお、被験試料は、試料濃度400μg/mL、100μg/mLで試験を行った。
<数式3>
血小板凝集抑制率(%)={(A−B)/A}×100
A:コントロールの血小板凝集率
B:被験試料溶液添加時の血小板凝集率
Rabbit blood collected by adding 1/10 volume of Japanese Pharmacopoeia heparin sodium injection solution was centrifuged (180 × g, 10 minutes, room temperature) to obtain a platelet suspension (PRP). This was used as a platelet suspension. 1 μL of 200 mmol / L calcium chloride solution was added to 223 μL of platelet suspension and reacted at 37 ° C. for 1 minute. Add 1 μL of the test sample solution to this, react for another 2 minutes, add a stir bar and stir for 1 minute, add 25 μL of collagen solution, and perform aggregation for 10 minutes at 37 ° C. Platelet aggregation measuring device PAM12CL (Mebanics Corporation) Was used to measure the agglomeration rate (A). Separately, the solvent of the sample solution was added instead of the sample solution, the same operation as described above was performed, the aggregation rate (B) was measured, and the platelet aggregation inhibition rate was determined by the following formula 3. The results are shown in Table 5. The test samples were tested at sample concentrations of 400 μg / mL and 100 μg / mL.
<Formula 3>
Platelet aggregation inhibition rate (%) = {(A−B) / A} × 100
A: Platelet aggregation rate of control B: Platelet aggregation rate upon addition of test sample solution

Figure 0005797372
表5の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、血小板凝集抑制作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results of Table 5, it was confirmed that the extract of Nehwa of Production Examples 1 to 3 had a platelet aggregation inhibitory action.

実施例3の結果から、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物は、血小板凝集抑制作用を有することが確認され、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物が、抗炎症剤の有効成分として、好適に利用可能であることが示唆された。 From the results of Example 3, extract of Hehuan (Albizzia julibrissin), it was confirmed to have a platelet aggregation inhibitory action, an extract of Hehuan (Albizzia julibrissin) is, as an active ingredient of anti-inflammatory agents, suitably used It was suggested that

参考例4:チロシナーゼ活性阻害作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法によりチロシナーゼ活性阻害作用を試験した。
( Reference Example 4: Tyrosinase activity inhibitory action test)
Using the extract of each cheer obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample, the tyrosinase activity inhibitory action was tested by the following test method.

48穴プレートに、Mcllvaine緩衝液(pH6.8)0.2mL、0.3mg/mL チロシン溶液0.06mL、被験試料の25%DMSO溶液0.18mLを加え、37℃で10分間静置した。これに、2,500units/mL チロシナーゼ溶液0.02mLを加え、引き続き37℃で15分間反応した。反応終了後、波長475nmにおける吸光度を測定した。同様の方法で空試験を行い補正した。
チロシナーゼ活性阻害率は、下記数式4により求めた。結果を表6に示す。なお、被験試料は、試料濃度400μg/mLで使用した。
<数式4>
チロシナーゼ活性阻害率(%)={1−(St−Sb)/(Ct−Cb)}×100
St:被験試料溶液の波長475nmにおける吸光度
Sb:被験試料溶液ブランクの波長475nmにおける吸光度
Ct:コントロール溶液の波長475nmにおける吸光度
Cb:コントロール溶液ブランクの波長475nmにおける吸光度
To a 48-well plate, 0.2 mL of Mclvaine buffer (pH 6.8), 0.06 mL of 0.3 mg / mL tyrosine solution, and 0.18 mL of 25% DMSO solution of the test sample were added, and allowed to stand at 37 ° C. for 10 minutes. To this, 2,500 units / mL tyrosinase solution 0.02 mL was added, followed by reaction at 37 ° C. for 15 minutes. After completion of the reaction, the absorbance at a wavelength of 475 nm was measured. A blank test was performed and corrected in the same manner.
The tyrosinase activity inhibition rate was determined by the following mathematical formula 4. The results are shown in Table 6. The test sample was used at a sample concentration of 400 μg / mL.
<Formula 4>
Tyrosinase activity inhibition rate (%) = {1− (St−Sb) / (Ct−Cb)} × 100
St: Absorbance of the test sample solution at a wavelength of 475 nm Sb: Absorbance of the test sample solution blank at a wavelength of 475 nm Ct: Absorbance of the control solution at a wavelength of 475 nm Cb: Absorbance of the control solution blank at a wavelength of 475 nm

Figure 0005797372
表6の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、チロシナーゼ活性阻害作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results in Table 6, it was confirmed that the extract of Nehwa in Production Examples 1 to 3 had a tyrosinase activity inhibitory action.

(実施例5:幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法により幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用を試験した。
(Example 5: Stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitory effect test)
Using the extract of each chewy obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample, the inhibitory effect on stem cell growth factor (SCF) mRNA expression was tested by the following test method.

正常ヒト新生児包皮表皮角化細胞(normal human epidermal keratinocyte;NHEK)を、80cmフラスコで正常ヒト表皮角化細胞長期培養用増殖培地(EpiLife−KG2)において、37℃、5%CO下で前培養し、トリプシン処理により細胞を集めた。
次に、EpiLife−KG2を用いて35mmシャーレ(FALCON社製)に40×10cells/2mL/シャーレずつ播き、37℃、5%CO下で一晩培養した。24時間後に培養液を捨て、HEPES緩衝液1mLを加え、UV−B照射(50mJ/cm)を行い、その後、EpiLife−KG2で必要濃度に溶解した被験試料を各シャーレに2mLずつ添加し、37℃、5%CO下で24時間培養した。培養後、培養液を捨て、TRIzol(R) Reagent(Invitrogen社製;Cat.no.15596−026)にてtotal RNAを抽出し、それぞれのRNA量を分光光度計にて測定し、200ng/μLになるようにtotal RNAを調製した。
このtotal RNAを鋳型とし、SCF(Stem Cell Factor)、及び内部標準であるGAPDHのmRNAの発現量を測定した。検出はリアルタイムPCR装置(Smart Cycler(R)、Cepheid社製)を用いて、Takara One Step SYBR(R) RT−PCR Kit(Perfect Real Time、code No.RR046A)によるリアルタイム One Step RT−PCR反応により行った。
SCFのmRNAの発現量は、「紫外線未照射、被験試料無添加」、「紫外線未照射、被験試料添加」、「紫外線照射、被験試料無添加」、及び「紫外線照射、被験試料添加」でそれぞれ培養した細胞から調製した総RNA標品を基にして、GAPDHの値で補正値を求め、更に「紫外線未照射、被験試料無添加」の補正値を100とした時の「紫外線照射、被験試料無添加」、「紫外線未照射、被験試料添加」、及び「紫外線照射、被験試料添加」の補正値を算出した。
幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制率は、下記数式5により求めた。結果を表7に示す。なお、被験試料は、試料濃度10μg/mL、1μg/mLで使用した。
<数式5>
幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制率(%)={(A−B)−(A−C)}/(A−B)×100
A:紫外線未照射、被験試料無添加時の補正値
B:紫外線照射、被験試料無添加時の補正値
C:紫外線照射、被験試料添加時の補正値
Normal human newborn foreskin keratinocytes (NHEK) in a normal human epidermal keratinocyte long-term growth medium (EpiLife-KG2) in an 80 cm 2 flask at 37 ° C. under 5% CO 2. The cells were cultured and collected by trypsinization.
Next, seeded by 40 × 10 4 cells / 2mL / dish in 35mm petri dish (FALCON Corp.) using EpiLife-KG2, 37 ° C., and cultured overnight at 5% CO 2. After 24 hours, discard the culture solution, add 1 mL of HEPES buffer, perform UV-B irradiation (50 mJ / cm 2 ), and then add 2 mL of each test sample dissolved in EpiLife-KG2 to the required concentration, The cells were cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 24 hours. After culturing, the culture medium was discarded, TRIzol (R) Reagent (Invitrogen Corporation; Cat.no.15596-026) total RNA was extracted by the respective amount of RNA was measured by spectrophotometer, 200 ng / [mu] L Total RNA was prepared so that
Using this total RNA as a template, the expression level of SCF (Stem Cell Factor) and GAPDH, which is an internal standard, was measured. Detection is performed by real-time One Step RT-PCR reaction using Takara One Step SYBR (R) RT-PCR Kit (Perfect Real Time, code No. RR046A) using a real-time PCR apparatus (Smart Cycler (R) , manufactured by Cepheid ) . went.
The expression levels of SCF mRNA are “no UV irradiation, no test sample added”, “UV no irradiation, test sample addition”, “UV irradiation, no test sample addition”, and “UV irradiation, no test sample addition”, respectively. Based on the total RNA preparation prepared from the cultured cells, a correction value is obtained with the value of GAPDH, and when the correction value of “no UV irradiation, no test sample added” is 100, “UV irradiation, test sample” Correction values for “no addition”, “no UV irradiation, test sample addition”, and “UV irradiation, test sample addition” were calculated.
The stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibition rate was determined by the following formula 5. The results are shown in Table 7. The test sample was used at a sample concentration of 10 μg / mL and 1 μg / mL.
<Formula 5>
Stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibition rate (%) = {(A−B) − (A−C)} / (A−B) × 100
A: Correction value when UV irradiation is not performed and test sample is not added B: Correction value when UV irradiation is performed and test sample is not added C: Correction value when UV irradiation is applied and test sample is added

Figure 0005797372
表7の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results in Table 7, it was confirmed that the extract of Nehwa in Production Examples 1 to 3 had an action of suppressing the expression of stem cell growth factor (SCF) mRNA.

参考例4から実施例5の結果から、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物は、チロシナーゼ活性阻害作用、及び幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制作用の少なくともいずれかを有することが確認され、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物が、美白剤の有効成分として、好適に利用可能であることが示唆された。 From the results of Reference Example 4 to Example 5, it was confirmed that the extract of Albizia julibrissin had at least one of a tyrosinase activity inhibitory action and a stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitory action. It has been suggested that an extract of ( Albizia julibrissin ) can be suitably used as an active ingredient of a whitening agent.

(実施例6:マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法によりマトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用を試験した。この試験方法は、Wunsch and Heidrich法を一部改変したものである。
(Example 6: Matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity inhibition test)
Using the extract of each cheer obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample, the matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity inhibitory action was tested by the following test method. This test method is a partial modification of the Wunsch and Heidrich method.

蓋付試験管にて、20mmol/mLの塩化カルシウム含有0.1mol/LのTris−HCl緩衝液(pH7.1)に溶解した各試料溶液50μL、MMP−1溶液50μL、及びPz−peptide溶液400μLを混合し、37℃にて30分間反応させた後、25mmol/Lのクエン酸溶液1mLを加え反応を停止した。その後、酢酸エチル5mLを加え、激しく振とうした。これを遠心(1,600×g、10分)し、酢酸エチル層の波長320nmにおける吸光度を測定した。同様の方法で空試験を行い補正した。
なお、MMP−1としては、COLLAGENASE Type IV from Clostridium histolyticum(シグマ社製)を使用した。
Pz−peptideとしては、Pz−Pro−Leu−Gly−Pro−D−Arg−OH(BACHEM Fenichemikalien AG社製)を使用した。
そして、得られた結果から、下記数式6によりMMP−1活性阻害率を求めた。結果を表8に示す。なお、被験試料は、試料濃度400μg/mL、100μg/mLで使用した。
<数式6>
MMP−1活性阻害率(%)={1−(C−D)/(A−B)}×100
A:試料溶液無添加、酵素添加での波長320nmにおける吸光度
B:試料溶液無添加、酵素無添加での波長320nmにおける吸光度
C:試料溶液添加、酵素添加での波長320nmにおける吸光度
D:試料溶液添加、酵素無添加での波長320nmにおける吸光度
In a test tube with a lid, each sample solution 50 μL, MMP-1 solution 50 μL, and Pz-peptide solution 400 μL dissolved in 0.1 mol / L Tris-HCl buffer (pH 7.1) containing 20 mmol / mL calcium chloride Were mixed and reacted at 37 ° C. for 30 minutes, and then 1 mL of a 25 mmol / L citric acid solution was added to stop the reaction. Thereafter, 5 mL of ethyl acetate was added and shaken vigorously. This was centrifuged (1,600 × g, 10 minutes), and the absorbance of the ethyl acetate layer at a wavelength of 320 nm was measured. A blank test was performed and corrected in the same manner.
As MMP-1, COLLAGENASE Type IV from Clostridium histolyticum (manufactured by Sigma) was used.
As Pz-peptide, Pz-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg-OH (manufactured by BACHEM Fenchemikaline AG) was used.
And the MMP-1 activity inhibition rate was calculated | required by the following Numerical formula 6 from the obtained result. The results are shown in Table 8. The test samples were used at sample concentrations of 400 μg / mL and 100 μg / mL.
<Formula 6>
MMP-1 activity inhibition rate (%) = {1− (C−D) / (A−B)} × 100
A: Absorbance at a wavelength of 320 nm without addition of a sample solution and addition of an enzyme B: Absorbance at a wavelength of 320 nm without addition of a sample solution and addition of an enzyme C: Absorbance at a wavelength of 320 nm with addition of a sample solution and addition of an enzyme D: Addition of a sample solution Absorbance at a wavelength of 320 nm with no enzyme added

Figure 0005797372
表8の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results shown in Table 8, it was confirmed that the extract of Nehwa in Production Examples 1 to 3 had a matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity inhibitory action.

(実施例7:マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法によりマトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用を試験した。
(Example 7: Matrix metalloprotease-14 (MMP-14) activity inhibitory action test)
Using the extract of each chewy obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample, the matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity inhibitory action was tested by the following test method.

96穴マイクロプレートにて、50mmol/LのHEPES、10mmol/LのCaCl、0.05質量%のBrij−35、1mmol/LのDTNB〔5,5’−dithiobis(2−nitoro−benzoic acid)〕緩衝液(pH7.5)で調製したMMP−14溶液20μL、及び50mmol/LのHEPES、10mmol/LのCaCl、0.05質量%のBrij−35、1mmol/LのDTNB〔5,5’−dithiobis(2−nitoro−benzoic acid)〕緩衝液で調製した各試料溶液20μLを混合した。37℃にて45分間反応させた後、10μLの基質溶液を添加し、反応を開始した。基質分解産物のメルカプト基と緩衝液中のDTNBとの反応生成物である2−nitro−5−thiobenzoic acidの量を波長412nmで30分間の吸光度を測定し、1分間当たりの生成量に基づいて30分間の傾斜度の値を求めた。同様の方法で空試験を行い補正した。
MMP−14としては、Enzyme(Human,Recombinant) From:E.coli recombinant human MMP−14 catalytic domain(Biomol社製)を用いた。
基質としては、thiopeptide(Ac−PLG−[2−mercapto−4−methyl−pentanoyl]−LG−OC)(Biomol社製)を用いた。
そして、得られた結果から、下記数式7により、MMP−14活性阻害率を求めた。結果を表9に示す。なお、被験試料は、試料濃度400μg/mLで使用した。
<数式7>
MMP−14活性阻害率(%)=(A−B)/A×100
A:試料溶液無添加時の30分間における傾斜度の値
B:試料溶液添加時の30分間における傾斜度の値
In a 96-well microplate, 50 mmol / L HEPES, 10 mmol / L CaCl 2 , 0.05 mass% Brij-35, 1 mmol / L DTNB [5,5′-dithiobis (2-nitro-benzoic acid) ] 20 μL of MMP-14 solution prepared in buffer (pH 7.5), 50 mmol / L HEPES, 10 mmol / L CaCl 2 , 0.05 mass% Brij-35, 1 mmol / L DTNB [5,5 20 μL of each sample solution prepared with a buffer solution of “-dithiobis (2-nitro-benzoic acid)” was mixed. After reacting at 37 ° C. for 45 minutes, 10 μL of the substrate solution was added to start the reaction. The amount of 2-nitro-5-thiobenzoic acid, which is a reaction product of the mercapto group of the substrate degradation product and DTNB in the buffer solution, was measured for absorbance at a wavelength of 412 nm for 30 minutes, and based on the amount produced per minute The value of the inclination for 30 minutes was determined. A blank test was performed and corrected in the same manner.
As MMP-14, Enzyme (Human, Recombinant) From: E.M. E. coli recombinant human MMP-14 catalytic domain (Biomol) was used.
As a substrate, thiopeptide (Ac-PLG- [2-mercapto-4-methyl-pentanoyl] -LG-OC 2 H 5 ) (manufactured by Biomol) was used.
And the MMP-14 activity inhibition rate was calculated | required by the following Numerical formula 7 from the obtained result. The results are shown in Table 9. The test sample was used at a sample concentration of 400 μg / mL.
<Formula 7>
MMP-14 activity inhibition rate (%) = (A−B) / A × 100
A: Inclination value for 30 minutes when no sample solution is added B: Inclination value for 30 minutes when the sample solution is added

Figure 0005797372
表9の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results shown in Table 9, it was confirmed that the extract of the cheers from Production Examples 1 to 3 had an activity of inhibiting matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity.

(実施例8:エストロゲン様作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法によりエストロゲン様作用を試験した。
(Example 8: Estrogen-like action test)
The extract of each cheer obtained in Production Examples 1 to 3 was used as a test sample, and the estrogenic action was tested by the following test method.

ヒト乳癌由来細胞(MCF−7)を10%の牛胎児血清(FBS)、1質量%のNEAA、及び1mmol/Lのピルビン酸ナトリウムを含有するMEMを用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を活性炭処理した10%のFBS、1質量%のNEAA、及び1mmol/Lのピルビン酸ナトリウムを含有するフェノールレッド不含MEM(T−MEM)を用いて3.0×10cells/mLの濃度に希釈した後、48穴マイクロプレートに1穴あたり450μLずつ播種し、細胞を定着させるため培養した。6時間後(0日目)にT−MEMで終濃度の10倍に調製した各試料溶液を各穴に50μLずつ添加し、培養を続けた。3日目に培地を抜き、T−MEMで終濃度に調製した試料溶液を各穴に0.5mL添加し、更に培養を続けた。
エストロゲン様作用は、MTTアッセイを用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、1質量%のNEAA、1mmol/Lのピルビン酸ナトリウムを含有するMEMに終濃度0.4mg/mLで溶解したMTT〔3−(4,5−Dimethyl−2−thiazolyl)−2,5−diphenyl−2H−tetrazolium Bromide〕を各穴に200μLずつ添加した。2時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを2−プロパノール200μLで抽出した。抽出後、波長570nmにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長650nmにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。ポジティブコントロールとして、10−9mol/Lのエストラジオールを使用した。
そして、得られた測定結果から、下記数式8によりエストロゲン様作用(エストロゲン依存性増殖作用)率を求めた。結果を表10に示す。なお、被験試料は、試料濃度3.125μg/mLで使用した。
<数式8>
エストロゲン様作用率(%)=(A/B)×100
A:試料溶液添加の場合の吸光度
B:試料溶液無添加の場合の吸光度
Human breast cancer-derived cells (MCF-7) were cultured using MEM containing 10% fetal bovine serum (FBS), 1% by mass of NEAA, and 1 mmol / L sodium pyruvate, and the cells were treated with trypsin. It was collected. The collected cells were treated with activated carbon-treated 10% FBS, 1% by mass NEAA, and 1 mmol / L sodium pyruvate-containing MEM containing no phenol red (T-MEM) at 3.0 × 10 4 cells / After diluting to a concentration of mL, 450 μL was seeded per well in a 48-well microplate, and cultured to fix the cells. Six hours later (day 0), 50 μL of each sample solution prepared to 10 times the final concentration with T-MEM was added to each well, and the culture was continued. On the third day, the medium was removed, 0.5 mL of the sample solution prepared to the final concentration with T-MEM was added to each well, and the culture was further continued.
Estrogen-like effects were measured using the MTT assay. After completion of the culture, the medium was removed, and MTT [3- (4,5-Dimethyl-2-thiazolyl) dissolved in MEM containing 1% by mass of NEAA and 1 mmol / L sodium pyruvate at a final concentration of 0.4 mg / mL. ) -2,5-diphenyl-2H-tetrazolium Bromide] was added to each well in an amount of 200 μL. After culturing for 2 hours, blue formazan produced in the cells was extracted with 200 μL of 2-propanol. After extraction, the absorbance at a wavelength of 570 nm was measured. At the same time, the absorbance at a wavelength of 650 nm was measured as turbidity, and the difference between the two was used as the amount of blue formazan produced. As a positive control, 10 −9 mol / L estradiol was used.
And from the obtained measurement result, the estrogen-like action (estrogen-dependent proliferation action) rate was calculated by the following formula 8. The results are shown in Table 10. The test sample was used at a sample concentration of 3.125 μg / mL.
<Formula 8>
Estrogen-like action rate (%) = (A / B) × 100
A: Absorbance when sample solution is added B: Absorbance when sample solution is not added

Figure 0005797372
表10の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、エストロゲン様作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results shown in Table 10, it was confirmed that the extract of Nehwa in Production Examples 1 to 3 had an estrogen-like action.

実施例6から8の結果から、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物は、マトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害作用、マトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害作用、及びエストロゲン様作用の少なくともいずれかを有することが確認され、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物が、抗老化剤の有効成分として、好適に利用可能であることが示唆された。 From the results of Examples 6 to 8, the extract of Albizzia julibrissin was found to inhibit matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) activity, matrix metalloproteinase-14 (MMP-14) activity, and estrogen-like. It was confirmed that it had at least one of the actions, and it was suggested that the extract of Albizia julibrissin can be suitably used as an active ingredient of an anti-aging agent.

参考例9:テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法によりテストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用を試験した。
( Reference Example 9: Testosterone 5α-reductase activity inhibition test)
Using the extract of each cheer obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample, the testosterone 5α-reductase activity inhibitory action was tested by the following test method.

秤量蓋付V底試験管にて、プロピレングリコールで調製した4.2mg/mL テストステロン 20μL、1mg/mL NADPH含有5mmol/L Tris−HCl緩衝液(pH7.13)825μLを混合した。これに、エタノール、50%エタノール、若しくは精製水で調製した被験試料80μL、及び、粗酵素液(S−9)(オリエンタル酵母社製)75μLを加え再び混合し、37℃にて30分反応させた後、塩化メチレン1mLを加え反応を停止した。これを遠心(1,600×g、10分)し、塩化メチレン層を下記の条件でガスクロマトグラフィー分析した。同様の方法で空試験を行った。
予め、3α−アンドロスタンジオール、ジヒドロテストステロン(DHT)、及び、テストステロンの標準品の塩化メチレン溶液を同様にガスクロマトグラフィー分析し、これら3化合物の精秤量とピーク面積よりピーク面積あたりの化合物量を算出しておき、S−9による反応後の3α−アンドロスタンジオール、ジヒドロテストステロン(DHT)、及び、テストステロンそれぞれのピーク面積あたりの濃度を求めた(数式9)。その後、数式10に従い、被験試料の変換率を求めた。
<数式9>
濃度(%)=被験試料のピーク面積×標準品濃度/標準品のピーク面積
<数式10>
変換率(%)=(A+B)/(A+B+C)
A:3α−アンドロスタンジオールの濃度
B:ジヒドロテストステロン(DHT)の濃度
C:テストステロンの濃度
テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害率は、上記変換率に基づいて、下記数式11により求めた。
<数式11>
テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害率(%)=(1−E/D)×100
D:空試験での変換率
E:被験試料添加での変換率
なお、ガスクロマトグラフィーの条件は、以下のとおりである。
[ガスクロマトグラフィーの条件]
・使用機器:Shimadzu GC−7A(株式会社島津製作所製)
・カラム:DB−1701(直径0.53mm×30m、膜厚:1.0μm)
・カラム温度/注入温度:240℃/300℃
・検出器:FID
・キャリアガス:窒素ガス
In a V-bottom test tube with a weighing lid, 4.2 mg / mL testosterone 20 μL prepared with propylene glycol, 1 mg / mL NADPH-containing 5 mmol / L Tris-HCl buffer (pH 7.13) 825 μL were mixed. To this, 80 μL of a test sample prepared with ethanol, 50% ethanol, or purified water and 75 μL of a crude enzyme solution (S-9) (manufactured by Oriental Yeast) were added and mixed again, and reacted at 37 ° C. for 30 minutes. After that, 1 mL of methylene chloride was added to stop the reaction. This was centrifuged (1,600 × g, 10 minutes), and the methylene chloride layer was analyzed by gas chromatography under the following conditions. A blank test was conducted in the same manner.
In advance, 3α-androstanediol, dihydrotestosterone (DHT), and testosterone standard methylene chloride solution were similarly analyzed by gas chromatography, and the amount of compound per peak area was determined from the exact amount and peak area of these three compounds. The concentration per peak area of 3α-androstanediol, dihydrotestosterone (DHT), and testosterone after the reaction by S-9 was calculated (Formula 9). Then, according to Formula 10, the conversion rate of the test sample was obtained.
<Formula 9>
Concentration (%) = peak area of test sample × standard product concentration / standard product peak area <Equation 10>
Conversion rate (%) = (A + B) / (A + B + C)
A: Concentration of 3α-androstanediol B: Concentration of dihydrotestosterone (DHT) C: Concentration of testosterone The testosterone 5α-reductase activity inhibition rate was determined by the following formula 11 based on the conversion rate.
<Formula 11>
Testosterone 5α-reductase activity inhibition rate (%) = (1−E / D) × 100
D: Conversion rate in blank test E: Conversion rate in addition of test sample The conditions of gas chromatography are as follows.
[Conditions for gas chromatography]
-Equipment used: Shimadzu GC-7A (manufactured by Shimadzu Corporation)
Column: DB-1701 (diameter 0.53 mm × 30 m, film thickness: 1.0 μm)
Column temperature / injection temperature: 240 ° C / 300 ° C
・ Detector: FID
・ Carrier gas: Nitrogen gas

次に、試料濃度を段階的に減少させて、上記、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害率の測定を行い、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害率が50%になる試料濃度(以下、「IC50」と称することがある。)(μg/mL)を内挿法により求めた。結果を表11に示す。 Next, the sample concentration is decreased stepwise, the testosterone 5α-reductase activity inhibition rate is measured, and the sample concentration at which the testosterone 5α-reductase activity inhibition rate becomes 50% (hereinafter referred to as “IC 50 ”). (Μg / mL) was determined by interpolation. The results are shown in Table 11.

Figure 0005797372
表11の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results of Table 11, it was confirmed that the extract of Nehwa in Production Examples 1 to 3 had a testosterone 5α-reductase activity inhibitory action.

参考例10:アンドロゲン受容体結合阻害作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法によりアンドロゲン受容体結合阻害作用を試験した。
( Reference Example 10: Androgen receptor binding inhibitory action test)
Using the extract of each cheer obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample, the androgen receptor binding inhibitory action was tested by the following test method.

マウス自然発生乳がん(シオノギ癌;SC115)よりクローニングされたSC−3細胞(アンドロゲン依存性マウス乳癌細胞)を、2%DCC−FBS、及び10mol/Lテストステロン含有MEM(以下、「MEM/2」と称することがある。)を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。
回収した細胞を1.0×10cells/mlの濃度に2%DCC−FBS含有MEMで希釈し、96穴プレートに1穴当たり100μLずつ播種し、37℃、5%CO下で一晩培養した。
培養終了後、培地を抜き、10−9mol/Lのジヒドロテストステロン(DHT)を含む0.5%BSA含有Ham F12+MEM(以下、「HMB」と称することがある。)に溶解した被験試料を100μL添加し、48時間培養した。
その後、終濃度0.4mg/mLで2%DCC−FBS含有MEMに溶解したMTTを各穴に100μL添加し、2時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを2−プロパノール200μLで抽出した。
抽出後、ブルーホルマザンを含有するイソプロパノールについて、ブルーホルマザンの吸収極大点がある570nmの吸光度を測定した。同時に濁度として、650nmにおける吸光度を測定し、両吸光度の差をもってブルーホルマザンの生成量とした(下記結合阻害率の計算式における吸光度はこの補正済み吸光度である)。
空試験としてHMBのみで培養した細胞を用い、陽性対照として10−9mol/LのDHTのみを含有したHMBで培養した細胞を用い、同様の方法で試験を行って補正した。
アンドロゲン受容体結合阻害率(%)は、下記数式12により求めた。
<数式12>
アンドロゲン受容体結合阻害率(%)={1−(C−D)/(A−B)}×100
A:DHT添加、被験試料無添加の場合の吸光度
B:DHT無添加、被験試料無添加の場合の吸光度
C:DHT添加、被験試料添加の場合の吸光度
D:DHT無添加、被験試料添加の場合の吸光度
SC-3 cells (androgen-dependent mouse breast cancer cells) cloned from mouse spontaneous breast cancer (Shionogi cancer; SC115) were mixed with MEM containing 2% DCC-FBS and 10 8 mol / L testosterone (hereinafter referred to as “MEM / 2”). The cells were collected by trypsin treatment.
The collected cells are diluted with MEM containing 2% DCC-FBS to a concentration of 1.0 × 10 5 cells / ml, seeded at 100 μL per well in a 96-well plate, and overnight at 37 ° C. under 5% CO 2. Cultured.
After completion of the culture, the medium was removed, and 100 μL of a test sample dissolved in 0.5% BSA-containing Ham F12 + MEM (hereinafter sometimes referred to as “HMB”) containing 10 −9 mol / L dihydrotestosterone (DHT). Added and incubated for 48 hours.
Thereafter, 100 μL of MTT dissolved in MEM containing 2% DCC-FBS at a final concentration of 0.4 mg / mL was added to each well, and after culturing for 2 hours, blue formazan produced in the cells was extracted with 200 μL of 2-propanol. .
After the extraction, the absorbance at 570 nm having the absorption maximum of blue formazan was measured for isopropanol containing blue formazan. At the same time, the absorbance at 650 nm was measured as turbidity, and the difference between the two absorbances was used as the amount of blue formazan produced (the absorbance in the formula for calculating the binding inhibition rate below is this corrected absorbance).
A cell cultured with only HMB was used as a blank test, and a cell cultured with HMB containing only 10 −9 mol / L DHT was used as a positive control.
The androgen receptor binding inhibition rate (%) was determined by the following formula 12.
<Formula 12>
Androgen receptor binding inhibition rate (%) = {1− (C−D) / (A−B)} × 100
A: Absorbance when DHT is added and test sample is not added B: Absorbance when DHT is not added and test sample is not added C: Absorbance when DHT is added and test sample is added D: When DHT is not added and test sample is added Absorbance of

次に、試料濃度を段階的に減少させて、上記、アンドロゲン受容体結合阻害率の測定を行い、アンドロゲン受容体結合阻害率が50%になる試料濃度(以下、「IC50」と称することがある。)(μg/mL)を内挿法により求めた。結果を表12に示す。 Next, the sample concentration is decreased stepwise and the above-mentioned androgen receptor binding inhibition rate is measured, and the sample concentration at which the androgen receptor binding inhibition rate becomes 50% (hereinafter referred to as “IC 50 ”). (Μg / mL) was determined by interpolation. The results are shown in Table 12.

Figure 0005797372
表12の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、アンドロゲン受容体結合阻害作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results of Table 12, it was confirmed that the extract of Nehwa in Production Examples 1 to 3 had an androgen receptor binding inhibitory action.

参考例9から10の結果から、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物は、テストステロン5α−リダクターゼ活性阻害作用、及びアンドロゲン受容体結合阻害作用の少なくともいずれかを有することが確認され、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物が、育毛剤の有効成分として、好適に利用可能であることが示唆された。 From the results of Reference Examples 9 to 10, it was confirmed that the extract of Albizzia julibrissin had at least one of a testosterone 5α-reductase activity inhibitory action and an androgen receptor binding inhibitory action, and Albyzzia julibrissin . It was suggested that this extract can be suitably used as an active ingredient of a hair restorer.

参考例11:サイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用試験)
前記製造例1から3で得られた各合歓の抽出物を被験試料として用い、下記の試験方法によりサイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用を試験した。
( Reference Example 11: Cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibition test)
Cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action was tested by the following test method using the extract of each cheer obtained in Production Examples 1 to 3 as a test sample.

5mmol/L 塩化マグネシウム含有50mmol/L Tris−HCl緩衝液(pH7.5)0.2mLに、2.5mg/mL ウシ血清アルブミン溶液0.1mL及び0.1mg/mL ホスホジエステラーゼ溶液0.1mL、更に被験試料溶液0.05mLを加え、37℃で5分間予備反応した。これに0.5mg/mL サイクリックAMP(cAMP)溶液0.05mLを加え、37℃で30分間反応した。沸騰水浴上で3分間煮沸することにより反応を停止し、これを遠心(2,260×g、10分、4℃)し、上清中の反応基質であるサイクリックAMPを下記の条件でHPLC分析した。同様の方法で空試験を行い補正した。
[HPLCの条件]
Column:Wakosil C18−ODS 5μm
Mobil phase:1mM TBAP in 25mM KHPO:CHCN=90:10
Flow rate:1.0mL/min
Detector:260nm
次に、サイクリックAMP標準品のピーク面積(A)、試料無添加時におけるサイクリックAMP標準品とサイクリックAMPホスホジエステラーゼとの反応溶液の上清のピーク面積(B1)および試料添加時におけるサイクリックAMP標準品とサイクリックAMPホスホジエステラーゼとの反応溶液の上清のピーク面積(B2)を求めた。得られた結果から、下記式より試料無添加時のサイクリックAMP標準品分解率(C)及び試料添加時のサイクリックAMP標準品の分解率(D)を算出した。
試料無添加時の標準品の分解率(C)(%)=(1−B1/A)×100
試料添加時の標準品の分解率(D)(%)=(1−B2/A)×100
その後、上記式により算出した各分解率(C)及び(D)に基づいて、下記数式13によりサイクリックAMPホスホジエステラーゼ阻害率(%)を算出した。結果を表13に示す。なお、被験試料は、試料濃度200μg/mL、50μg/mLで使用した。
<数式13>
サイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害率(%)=(1−D/C)×100
0.2 mL of 50 mmol / L Tris-HCl buffer (pH 7.5) containing 5 mmol / L magnesium chloride, 0.1 mL of 2.5 mg / mL bovine serum albumin solution and 0.1 mL of 0.1 mg / mL phosphodiesterase solution, further test 0.05 mL of the sample solution was added and pre-reacted at 37 ° C. for 5 minutes. To this, 0.05 mL of a 0.5 mg / mL cyclic AMP (cAMP) solution was added and reacted at 37 ° C. for 30 minutes. The reaction was stopped by boiling on a boiling water bath for 3 minutes, and this was centrifuged (2,260 × g, 10 minutes, 4 ° C.), and cyclic AMP, which is a reaction substrate in the supernatant, was subjected to HPLC under the following conditions. analyzed. A blank test was performed and corrected in the same manner.
[HPLC conditions]
Column: Wakosil C18-ODS 5 μm
Mobile phase: 1 mM TBAP in 25 mM KH 2 PO 4 : CH 3 CN = 90: 10
Flow rate: 1.0 mL / min
Detector: 260nm
Next, the peak area (A) of the cyclic AMP standard product, the peak area (B1) of the supernatant of the reaction solution of the cyclic AMP standard product and cyclic AMP phosphodiesterase when no sample is added, and the cyclic when the sample is added The peak area (B2) of the supernatant of the reaction solution of AMP standard product and cyclic AMP phosphodiesterase was determined. From the obtained results, the cyclic AMP standard product decomposition rate (C) when no sample was added and the cyclic AMP standard product decomposition rate (D) when the sample was added were calculated from the following formulas.
Decomposition rate of standard product without addition of sample (C) (%) = (1−B1 / A) × 100
Decomposition rate of standard product at the time of sample addition (D) (%) = (1−B2 / A) × 100
Thereafter, based on the respective degradation rates (C) and (D) calculated by the above formula, the cyclic AMP phosphodiesterase inhibition rate (%) was calculated by the following formula 13. The results are shown in Table 13. The test samples were used at sample concentrations of 200 μg / mL and 50 μg / mL.
<Formula 13>
Cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibition rate (%) = (1−D / C) × 100

Figure 0005797372
表13の結果から、製造例1から3の合歓の抽出物が、サイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有することが確認できた。
Figure 0005797372
From the results shown in Table 13, it was confirmed that the extract of the cheers of Production Examples 1 to 3 had a cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action.

参考例11の結果から、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物は、サイクリックAMPホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有することが確認され、合歓(Albizzia julibrissin)の抽出物が、抗肥満剤の有効成分として、好適に利用可能であることが示唆された。 From the result of Reference Example 11, it is confirmed that the extract of Albizza julibrissin has a cyclic AMP phosphodiesterase activity inhibitory action, and the extract of Albizzia julibrissin is suitable as an active ingredient of an antiobesity agent. It is suggested that it can be used.

(配合例1)
−乳液−
下記組成に従い、乳液を常法により製造した。
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の50質量%エタノール抽出物(製造例2)・・・0.10g
・ホホバオイル・・・4.00g
・1,3−ブチレングリコール・・・3.00g
・アルブチン・・・3.00g
・ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.O.)・・・2.50g
・オリーブオイル・・・2.00g
・スクワラン・・・2.00g
・セタノール・・・2.00g
・モノステアリン酸グリセリル・・・2.00g
・オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.)・・・2.00g
・パラオキシ安息香酸メチル・・・0.15g
・グリチルリチン酸ステアリル・・・0.10g
・黄杞エキス・・・0.10g
・グリチルリチン酸ジカリウム・・・0.10g
・イチョウ葉エキス・・・0.10g
・コンキオリン・・・0.10g
・オウバクエキス・・・0.10g
・カミツレエキス・・・0.10g
・香料・・・0.05g
・精製水・・・残部(合計100.00g)
(Formulation example 1)
-Emulsion-
A milky lotion was produced by a conventional method according to the following composition.
・ 50% ethanol extract of Albizzia julibrissin flower (Production Example 2) 0.10 g
・ Jojoba oil: 4.00 g
・ 1,3-Butylene glycol ・ ・ ・ 3.00g
・ Arbutin ... 3.00g
・ Polyoxyethylene cetyl ether (20E.O.) ... 2.50 g
・ Olive oil ... 2.00g
・ Squalane ... 2.00g
・ Cetanol ... 2.00g
・ Glyceryl monostearate ... 2.00g
・ Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.O.) ... 2.00g
・ Methyl paraoxybenzoate 0.15 g
・ Stearyl glycyrrhizinate ... 0.10g
・ Twilight extract ... 0.10g
・ Dipotassium glycyrrhizinate ... 0.10g
・ Ginkgo biloba extract ... 0.10g
・ Conchiolin ... 0.10g
・ Oat extract ... 0.10g
-Chamomile extract ... 0.10g
・ Fragrance ... 0.05g
・ Purified water: remainder (total 100.00 g)

(配合例2)
−化粧水−
下記組成に従い、化粧水を常法により製造した。
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の水抽出物(製造例1)・・・0.10g
・グリセリン・・・3.00g
・1,3−ブチレングリコール・・・3.00g
・アスコルビン酸グルコシド・・・2.00g
・オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.)・・・2.00g
・パラオキシ安息香酸メチル・・・0.15g
・グリチルリチン酸二カリウム・・・0.10g
・クエン酸・・・0.10g
・クエン酸ソーダ・・・0.10g
・油溶性甘草エキス・・・0.10g
・海藻エキス・・・0.10g
・クジンエキス・・・0.10g
・キシロビオースミクスチャー・・・0.05g
・香料・・・0.05g
・精製水・・・残部(合計:100.00g)
(Formulation example 2)
-Lotion-
In accordance with the following composition, lotion was produced by a conventional method.
- Nemu (Albizzia julibrissin) of the flower of the water extract (Production Example 1) ··· 0.10g
・ Glycerin ... 3.00g
・ 1,3-Butylene glycol ・ ・ ・ 3.00g
・ Ascorbic acid glucoside ・ ・ ・ 2.00g
・ Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.O.) ... 2.00g
・ Methyl paraoxybenzoate 0.15 g
・ Dipotassium glycyrrhizinate ... 0.10g
・ Citric acid ... 0.10g
・ Sodium citrate: 0.10 g
・ Oil-soluble licorice extract ... 0.10g
・ Seaweed extract ... 0.10g
・ Cudin extract ... 0.10g
・ Xylobiose Mixture ... 0.05g
・ Fragrance ... 0.05g
・ Purified water: remainder (total: 100.00 g)

(配合例3)
−クリーム−
下記組成に従い、クリームを常法により製造した。
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の80質量%エタノール抽出物(製造例3)・・・0.10g
・スクワラン・・・10.00g
・1,3−ブチレングリコール・・・6.00g
・流動パラフィン・・・5.00g
・サラシミツロウ・・・4.00g
・セタノール・・・3.00g
・モノステアリン酸グリセリル・・・3.00g
・ラノリン・・・2.00g
・オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.)・・・1.50g
・パラオキシ安息香酸メチル・・・1.50g
・ステアリン酸・・・1.00g
・アスコルビン酸リン酸マグネシウム・・・0.10g
・グリチルレチン酸・・・0.10g
・酵母抽出液・・・0.10g
・シソ抽出液・・・0.10g
・シナノキ抽出液・・・0.10g
・ジユ抽出液・・・0.10g
・香料・・・0.10g
・精製水・・・残部(合計:100.00g)
(Formulation example 3)
-Cream-
According to the following composition, the cream was manufactured by a conventional method.
-80% by mass ethanol extract of flower of Nebizzia julibrissin (Production Example 3) ... 0.10g
・ Squalane ... 10.00g
・ 1,3-butylene glycol ... 6.00g
・ Liquid paraffin ・ ・ ・ 5.00g
・ Salah beeswax 4.00 g
・ Cetanol ... 3.00g
・ Glyceryl monostearate ... 3.00 g
・ Lanoline ... 2.00g
・ Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.O.) ... 1.50 g
・ Methyl paraoxybenzoate ... 1.50g
・ Stearic acid: 1.00 g
・ Magnesium ascorbate phosphate ... 0.10g
・ Glycyrrhetinic acid ... 0.10g
・ Yeast extract ... 0.10g
・ Perilla extract ... 0.10g
-Linden extract ... 0.10g
・ Jiuyu extract ... 0.10g
・ Fragrance ... 0.10g
・ Purified water: remainder (total: 100.00 g)

(配合例4)
−パック−
下記組成に従い、パックを常法により製造した。
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の50質量%エタノール抽出物(製造例2)・・・0.20g
・ポリビニルアルコール・・・15.00g
・エタノール・・・10.00g
・プロピレングリコール・・・7.00g
・ポリエチレングリコール・・・3.00g
・セージ抽出液・・・0.10g
・トウキ抽出液・・・0.10g
・ニンジン抽出液・・・0.10g
・パラオキシ安息香酸エチル・・・0.05g
・香料・・・0.05g
・精製水・・・残部(合計:100.00g)
(Formulation example 4)
−Pack−
According to the following composition, the pack was produced by a conventional method.
・ 50% ethanol extract of Albizzia julibrissin flower (Production Example 2) 0.20 g
・ Polyvinyl alcohol: 15.00g
・ Ethanol ... 10.00g
・ Propylene glycol: 7.00 g
・ Polyethylene glycol ... 3.00g
・ Sage extract ... 0.10g
・ Toki extract ... 0.10g
・ Carrot extract ... 0.10g
・ Ethyl paraoxybenzoate 0.05g
・ Fragrance ... 0.05g
・ Purified water: remainder (total: 100.00 g)

(配合例5)
−ヘアトニック−
下記組成の育毛作用を有するヘアトニックを、常法により製造した。
・塩酸ピリドキシン・・・0.1g
・レゾルシン・・・0.01g
・D−パントテニルアルコール・・・0.1g
・グリチルリチン酸ジカリウム・・・0.1g
・l−メントール・・・0.05g
・1,3−ブチレングリコール・・・4.0g
・センブリエキス・・・0.1g
・ニンジンエキス・・・0.1g
・クジンエキス・・・0.1g
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の水抽出物(製造例1)・・・0.2g
・香料・・・適量
・精製水・・・残部(合計:100.00g)
(Formulation example 5)
-Hair tonic-
A hair tonic having a hair growth action having the following composition was produced by a conventional method.
・ Pyridoxine hydrochloride ... 0.1g
・ Resorcin ・ ・ ・ 0.01g
・ D-pantothenyl alcohol ... 0.1g
・ Dipotassium glycyrrhizinate ... 0.1g
・ L-Menthol 0.05g
・ 1,3-Butylene glycol ・ ・ ・ 4.0g
・ Assembly extract ... 0.1g
・ Carrot extract ... 0.1g
・ Cudin extract ... 0.1g
・ Water extract of Albizzia julibrissin flower (Production Example 1) 0.2 g
-Fragrance-appropriate amount-Purified water-the balance (total: 100.00 g)

(配合例6)
−シャンプー−
下記組成に従い、シャンプーを常法により製造した。
・ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム・・・30.0g
・ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸アンモニウム・・・20.0g
・ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン・・・6.0g
・ヤシ油脂肪酸モジエタノールアミド・・・4.0g
・ジステアリン酸エチレングリコール・・・2.0g
・防腐剤(パラオキシ安息香酸メチル)・・・0.15g
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の80質量%エタノール抽出物(製造例3)・・・0.2g
・ムクロジエキス・・・0.2g
・黄杞エキス・・・0.5g
・オウバクエキス・・・0.3g
・ローズマリーエキス・・・0.5g
・香料・・・0.01g
・1,3−ブチレングリコール・・・3.0g
・精製水・・・残部(合計:100.00g)
(Formulation example 6)
-Shampoo-
A shampoo was produced by a conventional method according to the following composition.
・ Polyoxyethylene alkyl ether sodium sulfate 30.0 g
・ Polyoxyethylene alkyl ether ammonium sulfate ... 20.0g
・ Palm oil fatty acid amidopropyl betaine ... 6.0g
・ Palm oil fatty acid modiethanolamide: 4.0 g
・ Ethylene glycol distearate ... 2.0g
・ Preservative (methyl paraoxybenzoate) ... 0.15g
-80% by weight ethanol extract of flower of Albizzia julibrissin (Production Example 3) 0.2 g
・ Muguroji extract ... 0.2g
・ Cotton extract ... 0.5g
・ Oat extract ... 0.3g
・ Rosemary extract 0.5g
・ Perfume 0.01g
・ 1,3-Butylene glycol ・ ・ ・ 3.0g
・ Purified water: remainder (total: 100.00 g)

(配合例7)
−リンス−
下記組成に従い、リンスを常法により製造した。
・塩化ステアリルトリメチルアンモニウム・・・1.5g
・ポリオキシエチレンセチルエーテル・・・1.0g
・セチルアルコール・・・2.0g
・オクチルドデカノール・・・1.0g
・カチオン化セルロース・・・0.5g
・プロピレングリコール・・・5.0g
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の50質量%エタノール抽出物(製造例2)・・・0.2g
・ムクロジエキス・・・0.2g
・黄杞エキス・・・0.5g
・オウバクエキス・・・0.3g
・ローズマリーエキス・・・0.5g
・香料・・・3.0g
・精製水・・・残部(合計:100.00g)
(Formulation example 7)
-Rinse-
According to the following composition, the rinse was manufactured by the conventional method.
・ Stearyltrimethylammonium chloride 1.5g
・ Polyoxyethylene cetyl ether ... 1.0g
・ Cetyl alcohol: 2.0g
・ Octyldodecanol ・ ・ ・ 1.0g
・ Cationized cellulose: 0.5g
・ Propylene glycol ... 5.0g
・ 50% ethanol extract of Albizzia julibrissin flower (Production Example 2) 0.2 g
・ Muguroji extract ... 0.2g
・ Cotton extract ... 0.5g
・ Oat extract ... 0.3g
・ Rosemary extract 0.5g
・ Fragrance ... 3.0g
・ Purified water: remainder (total: 100.00 g)

(配合例8)
−錠剤状栄養補助食品−
下記の混合物を打錠して、錠剤状栄養補助食品を製造した。
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の50質量%エタノール抽出物(製造例2)・・・30g
・粉糖(ショ糖)・・・178g
・ソルビット・・・10g
・グリセリン脂肪酸エステル・・・12g
(Formulation example 8)
-Tablet dietary supplements-
The following mixture was tableted to produce a tablet-shaped dietary supplement.
-50 % ethanol extract of Albizzia julibrissin flower (Production Example 2) 30 g
・ Powdered sugar (sucrose) 178g
・ Sorbit ・ ・ ・ 10g
・ Glycerin fatty acid ester: 12g

(配合例9)
−顆粒状栄養補助食品−
下記の混合物を顆粒状に形成して、顆粒状栄養補助食品を製造した。
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の80質量%エタノール抽出物(製造例3)・・・20g
・ビートオリゴ糖・・・1,000g
・ビタミンC・・・167g
・ステビア抽出物・・・10g
(Formulation example 9)
-Granular dietary supplement-
The following mixture was formed into granules to produce a granular dietary supplement.
・ 80% by mass ethanol extract of flower of Nebizzia julibrissin (Production Example 3) 20g
・ Beat oligosaccharide ... 1,000g
・ Vitamin C ... 167g
・ Stevia extract ... 10g

(配合例10)
−顆粒状栄養補助食品−
下記の混合物を顆粒状に形成して、顆粒状栄養補助食品を製造した。
・合歓(Albizzia julibrissin)の花の水抽出物(製造例1)・・・20g
・ビートオリゴ糖・・・1,000g
・ビタミンC・・・167g
・ステビア抽出物・・・10g
(Formulation example 10)
-Granular dietary supplement-
The following mixture was formed into granules to produce a granular dietary supplement.
- Nemu flower of the water extract of (Albizzia julibrissin) (Production Example 1) ··· 20g
・ Beat oligosaccharide ... 1,000g
・ Vitamin C ... 167g
・ Stevia extract ... 10g

本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかを配合した化粧料は、優れた抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、抗老化作用、育毛作用、及び抗肥満作用の少なくともいずれかを有し、かつ安全性にも優れているので、例えば、軟膏、クリーム、乳液、化粧水、ローション、パック、ゼリー、リップクリーム、口紅、入浴剤、アストリンゼント、ヘアトニック、シャンプー、リンスなどに好適に利用可能である。
また、本発明の抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、抗老化剤、育毛剤、及び抗肥満剤の少なくともいずれかを配合した飲食品は、経口摂取によっても優れた抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、抗老化作用、育毛作用、及び抗肥満作用の少なくともいずれかを有し、かつ安全性にも優れているので、例えば、健康食品、栄養補助食品などに好適に利用可能である。
A cosmetic comprising at least one of the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent of the present invention has an excellent antioxidant effect, anti-inflammatory effect, whitening effect, Since it has at least one of aging action, hair growth action and anti-obesity action and is excellent in safety, for example, ointment, cream, emulsion, lotion, lotion, pack, jelly, lip balm, lipstick, It can be suitably used for bathing agents, astringents, hair tonics, shampoos, rinses and the like.
In addition, foods and drinks containing at least one of the antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, anti-aging agent, hair restorer, and anti-obesity agent of the present invention have an excellent anti-oxidant action and anti-inflammatory effect even when taken orally. It has at least one of action, whitening action, anti-aging action, hair-growth action, and anti-obesity action, and is excellent in safety, so it can be suitably used for health foods, dietary supplements, etc. .

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合歓(Albizzia julibrissin)の花の抽物を含有することを特徴とする血小板凝集抑制剤。 Huan platelet aggregation inhibitor characterized by containing the flower Extraction of (Albizzia julibrissin). 合歓(Albizzia julibrissin)の花の抽物を含有することを特徴とする幹細胞増殖因子(SCF)mRNA発現抑制剤。 Nemu stem cell growth factor (SCF) mRNA expression inhibitor characterized by containing the Extraction of flower (Albizzia julibrissin). 合歓(Albizzia julibrissin)の花の抽物を含有することを特徴とするマトリックスメタロプロテアーゼ−1(MMP−1)活性阻害剤。 Nemu matrix metalloproteinase -1 (MMP-1), characterized in that it contains a flower Extraction of (Albizzia julibrissin) activity inhibitor. 合歓(Albizzia julibrissin)の花の抽物を含有することを特徴とするマトリックスメタロプロテアーゼ−14(MMP−14)活性阻害剤。 Nemu matrix metalloproteinase -14 (MMP-14), characterized in that it contains Extraction of (Albizzia julibrissin) Flowers activity inhibitor.
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