JP5642333B2 - アルツハイマー病の予防または治療のための併用療法およびそのキット - Google Patents
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Description
従って本発明ではAβ流出誘導薬とAβペプチド特異的アフェレーシスを含む併用療法を提供する。本発明によれば、Aβ流出が誘導(例えば、ゲルソリン、GM1、Aβペプチド特異的な能動的若しくは受動的ワクチン等の薬物により)され、その流出がAβアフェレーシスにより持続される。この関連で、Aβ、Aβ誘導体またはAβミモトープを含むワクチンにより一度または二度分画を誘導するのに十分である。
−血漿中のアミロイドβ(Aβ)の分画を誘導する薬物、および
−血液若しくは血漿流動と接触し、アミロイドβ前駆体タンパク(APP)と結合する受容体を有する固体の担体を含むアフェレーシス器具、を含んでなる。
該キットにおいて、アフェレーシス担体としては無菌で発熱性物質を除去したカラムが好ましくは使用される。
Aβ特異的な能動的ワクチンは好ましくはAβ誘導体またはAβミモトープである。
特に好ましいAβ誘導体はその一部若しくは全体がD-アミノ酸より構成され、および/または天然アミノ酸を含まないペプチドより選択される。
X2はアミノ酸であって、Cではなく、
X3はアミノ酸であって、Cではなく、
X4はアミノ酸であって、Cではなく、
X5はアミノ酸であって、Cではなく、
X6はアミノ酸であって、Cではなく、
また、X1X2X3X4X5X6はDAEFRHではなく、当該ペプチドは天然のN端Aβ42配列のDAEFRHに特異的な抗体に対して結合能力を有し、さらにその5量体は天然のN端Aβ42配列のDAEFRHに特異的な当該抗体に対して結合能力を有する。)
を含み若しくは構成される。
X1はGまたは水酸基若しくは負電荷を有するアミノ酸、好ましくはE、Y、S若しくはDであり;
X2は疎水性アミノ酸または正電荷を有するアミノ酸、好ましくはI、L、V、K、W、R、Y、F、若しくはAであり;
X3は負電荷を有するアミノ酸、好ましくはD若しくはEであり;
X4は芳香族アミノ酸またはL、好ましくはY、F、若しくはLであり;
X5はH、K、Y、F、またはR、好ましくはH、FまたはRであり、
X6はS、T、N、Q、D、E、R、I、K、YまたはG、好ましくはT、N、D、R、I、またはGである。
本発明に従って使用されるミモトープは5から15アミノ酸の好ましい長さを有している。該化合物はワクチン中に単離された(ペプチド)形態で存在してもよいし、例えば、薬学的な担体物質若またはポリペプチド、脂質若しくは炭水化物構造のような他の分子と縮合または複合体化していてもよい。本発明に従うと、ミモトープの長さは好ましくは5から15アミノ酸、6から12アミノ酸残基、特に9から11アミノ酸残基である。しかしながら、そのミモトープは非特異的なリンカー若しくは担体、特にペプチドリンカー若しくはタンパク質単体と縮合する(共有結合的または非共有結合的)ことが可能である。さらに、そのペプチドリンカー若しくはタンパク質単体はヘルパーT細胞エピトープにより構成され、またはこれを含み得る。
抗APP抗体、抗Aβ40抗体若しくは抗Aβ42抗体、APP-結合タンパク、特にゲルソリン、アポJ、アポE、APP-結合ペプチド、APP-結合ガングリオシド、特にGM1、またはAPP−結合核酸、特にアプタマー、またはこれら受容体の混合物が特に好ましい。
APP-結合タンパク受容体の更なる例は、ゲルソリン(マツオカ等(Matsuoka et al.) 2003、上記参照)、アポJおよびアポE(デマトス等(DeMattos et al.), 2001、上記参照)である。GM1はAPP-結合ガングリオシド受容体(マツオカ等(Matsuoka et al.) 2003、上記参照)の例である。
当然ながら、ファージ・ライブラリー、ペプチド・ライブラリー(上記参照)若しくは構造ライブラリー(例えば異なる構造に関するコンビナトリアル・ケミストリーやハイスループット・スクリーニングによって得られる)もまたこのようなAPP-結合受容体を得るのに適している。
従って、好ましくはペプチド、抗体または核酸より構成されるAPP-結合受容体は、アルツハイマー病患者およびアルツハイマー病に罹患するリスクのある人においてAPPおよびそのタンパク分解生成物を体外に除去する担体物質として用いられる。
さらなる側面によれば、本発明は発明の併用療法の範囲内においてそれぞれの患者の治療に用具を適合させることによる、アルツハイマー病若しくはそのような病気の予防のための治療用具、またはその治療のための発明用具の使用に関する。治療を行う場合、APPポリペプチドを効率よく除去するため、患者にアフェレーシス器具を十分長い時間結合し、患者の血液若しくは血漿の流れをAPP結合受容体を含む固体の担体に接触させてAPPおよび/またはAPPのタンパク質分解物、特にAβ42を結合させる。アフェレーシス治療の過程において、十分な抗凝血と、末梢または中枢の静脈血管のアクセスおよび動静脈瘻は確かに確保され、必要な大量および測定データは記録される。その上、アフェレーシス法の多くは適切な血漿処理前に血漿と血液細胞との一次分離を必要とする。そのような予防的措置が必要な特別な人々は、家族性因子高齢者(>50、>60または>70歳)または別のAD危険因子、特に遺伝子因子を有する人々である。
該方法は好ましくは本発明のキットにより実施される。
従って本発明はまた、上述のとおりAβミモトープの使用に関し、これはADの治療若しくは予防のための発明の併用治療に用いられる。
本発明は続く実施例によりより詳細に説明されるが、これは決して制限するものではない。
1.1 モノリスカラム
製造者の指示書に従い、CIM(登録商標)エポキシモノリスカラム(BIAセパレーションズ、SI)を0.5M Na-リン酸緩衝液、pH8.0で平衡化し、Aβペプチドに対するモノクローナル抗体も製造者の指示書に従って活性化してCIMカラムと結合させる。このカラムをリン酸緩衝液(+1M NaCl)で数回洗浄し、任意で余ったエポキシ基をブロックする。
品質保証は洗浄および平衡溶出液の制御により行う;溶出液中に活性なエポキシ基および抗体の漏れがないカラムのみを次工程に供し、アフェレーシス器具に取り付ける。
1.2 セファロースカラム
バルクのアガロース原料(セファロースCL4B)を無菌のまま殺菌済みの発熱物質なしの容器に満たして無菌的に洗浄する;ここでそのゲル原料は各洗浄ごとに減圧下で完全に乾燥させる。それから、このセファロースをオートクレーブ中115℃で30分間蒸気にて殺菌する。
無菌ろ過した抗体液(それぞれm266およびm243)を反応容器に入れて少なくとも90分間撹拌した。最後に溶出液中に反応生成物が検出できなくなるまで反応溶液を徹底的に洗浄し(等張リン酸緩衝液)、抗体結合セファロースを殺菌済み、発熱物質フリーの焼結ガラス付ガラス製カラムに充填して、最後の品質保証を実施する(反応生成物および重金属等について溶出液分析;粒子分析、発熱、無菌性)。
2.アルツハイマー病患者のアフェレーシス治療の動物モデル
近年、ドイツ国カールスブルグの糖尿病協会「ゲルハルトカッツェ」で、自由に動き回る小動物において実験的なアフェレーシスのための空間体外系が開発された。このアフェレーシス療法は一匹のそして同じ動物に対して繰り返し適用ができる。その上、用いられた動物は次のアフェレーシス療法の長期の評価研究でも利用される。当該実験的アフェレーシス系の使用はいくつかのラット種において成功裏に示された。繰り返しアフェレーシス療法はI型糖尿病およびII型コラーゲン誘発関節炎ラットにおいて体重250g以上の場合耐えることができる。
或いはLDLについてDALIアフェレーシスをするようにそれと同様の全血アフェレーシスも実施してもよい。
3.動物モデルにおける独創的な併用療法
動物モデルにおける併用療法は基本的に、アフェレーシスの前、途中または後にAβの流出が生じるようになされる。さらに、二つの療法の適用の頻度は互いに変化させることができる。
Claims (8)
- アルツハイマー病(AD)を治療しまたは予防するためのキットであって;
-EIDYHR、ELDYHR、EVDYHR、DIDYHR、DLDYHR、DVDYHR、DIDYRR、DLDYRR、DVDYRR、DKELRI、DWELRI、YREFFI、YREFRI、YAEFRG、EAEFRG、DYEFRG、ELEFRG、DRELRI、DKELKI、DRELKI、GREFRN、EYEFRG、DWEFRDA、SWEFRT、DKELR、DAEFRWP、DNEFRSP、SAEFRTQ、SAEFRAT、SWEFRNP、SWEFRLY、SWELRQA、SVEFRYH、SYEFRHH、SQEFRTP、SSEFRVS、DWEFRD、DAELRY、DWELRQ、SLEFRF、GPEFRW、GKEFRT、およびSFEFRGからなる群から選択されるペプチドを含むAβミモトープ、ならびに
-血液流または血漿流と接触させることができ、抗APP抗体、Aβ結合受容体、APP結合タンパク、APP結合ペプチド、APP結合グリコリピド、およびAPP結合核酸、ならびにこれら受容体の混合物からなる群から選択されるアミロイドβ-前駆体タンパク(APP)と結合する受容体を有する固体の担体を含むアフェレーシス器具、を含むキット。 - 該Aβ結合受容体が抗Aβ40抗体または抗Aβ42抗体である、請求項1のキット。
- 該APP結合タンパクがゲルソリン、アポJまたはアポEである、請求項1〜2のいずれかのキット。
- 該APP結合核酸がアプタマーである、請求項1〜3のいずれかのキット。
- 該APP結合グリコリピドがガングリオシドである、請求項1〜4のいずれかのキット。
- 該ガングリオシドがGM1である、請求項5のキット。
- 該担体が無菌であって、かつ発熱物質を含まないカラムであることを特徴とする、請求項1〜6のいずれかのキット。
- ADを予防し又は治療するための請求項1の併用療法で用いる薬物を製造するための、EIDYHR、ELDYHR、EVDYHR、DIDYHR、DLDYHR、DVDYHR、DIDYRR、DLDYRR、DVDYRR、DKELRI、DWELRI、YREFFI、YREFRI、YAEFRG、EAEFRG、DYEFRG、ELEFRG、DRELRI、DKELKI、DRELKI、GREFRN、EYEFRG、DWEFRDA、SWEFRT、DKELR、DAEFRWP、DNEFRSP、SAEFRTQ、SAEFRAT、SWEFRNP、SWEFRLY、SWELRQA、SVEFRYH、SYEFRHH、SQEFRTP、SSEFRVS、DWEFRD、DAELRY、DWELRQ、SLEFRF、GPEFRW、GKEFRT、およびSFEFRGからなる群から選択されるペプチドを含むAβミモトープの使用。
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