JP5631837B2

JP5631837B2 - 皮膚中濃度増加剤

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Publication number: JP5631837B2
Application number: JP2011226163A
Authority: JP
Inventors: 康之高橋; 伸岳高橋; 俊郎曽根
Original assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Current assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Priority date: 2010-10-18
Filing date: 2011-10-13
Publication date: 2014-11-26
Anticipated expiration: 2031-10-13
Also published as: JP2012106992A

Description

本発明は、皮膚に作用する生理活性成分の皮膚中濃度増加剤に関する。

皮膚に作用して生理活性を示す成分としては、ビタミンＣ又はその誘導体、ビタミンＥ又はその誘導体、ビタミンＡ又はその誘導体、グリチルリチン酸又はその誘導体、トラネキサム酸又はその誘導体等の種々の保湿剤、種々の美白剤、抗炎症剤、抗にきび剤、抗しわ剤、抗酸化剤等の成分が知られており、これらは医薬部外品や化粧品に配合されている（非特許文献１）。これらの生理活性成分は、皮膚の細胞に作用するため、主に外用により局所的に用いられる。従って、皮膚に作用する成分については、皮膚中濃度を増加させる必要がある。生理活性成分の皮膚中濃度を増加させる成分については、セラミド（非特許文献３）、リン脂質（非特許文献４）が知られているが、これらはいずれも高価なものであり、工業的に大量生産するにはコストが高かった。

一方、医薬品分野等における薬剤の効果を高めるために経皮吸収性の検討がなされ、中鎖脂肪酸モノグリセリドを用いる方法（非特許文献２）、モノグリセリン脂肪酸エステル及び脂肪酸を用いる方法（特許文献１）、グリセロールモノラウレートを用いる方法（特許文献２）が見出されている。

国際公開ＷＯ９５／０４５５１号公報特開昭６３−２２７５２０号公報

新化粧品ハンドブック、2006 Chem. Pharm. Bull., 37(5), 1375-1378, 1989 skin pharmacol physiol,2009,22,22-30 J. soc. cosmet. chem. jpn,27(3),216-226,1993

しかしながら、これら従来の経皮吸収性の検討は、いずれも皮膚を透過した後、どれだけの量が血液中に移行するのかを測定し、その血中移行性（皮膚透過性）を指標に行われており、これらの薬物が皮膚中にどれだけ残留しているのかについては全く検討されていない。
一方、皮膚に作用して生理活性を示す成分は、高い皮膚中濃度を保つことによって、十分な生理活性を示す。よって、従来の血中移行性による指標は直接採用できるものではない。
従って、本発明の課題は、安価で工業的に大量生産が可能な、生理活性成分の皮膚中濃度増加剤を提供することである。

本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究をした結果、特定のＨＬＢを有するモノグリセリン脂肪酸エステル、ジグリセリン脂肪酸エステル又はポリグリセリン脂肪酸エステルが皮膚に作用する生理活性成分の皮膚中濃度を増加させることを見出し本発明を完成させた。

すなわち、本発明は、ＨＬＢが９〜１２のモノグリセリン脂肪酸エステル、ＨＬＢが８〜１１のジグリセリン脂肪酸エステル又はＨＬＢが１１〜１４のポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分とする、生理活性成分の皮膚中濃度増加剤を提供するものである。
また本発明は、上記の皮膚中濃度増加剤と生理活性成分とを含有する皮膚外用剤組成物を提供するものである。

本発明の皮膚中濃度増加剤は、生理活性成分に対して優れた皮膚中濃度増加機能を有し、これを配合すれば優れた皮膚中濃度増加作用を示す皮膚外用剤組成物が得られる。

モノグリセリン脂肪酸エステルによる皮膚中濃度増加効果を示す。ジグリセリン脂肪酸エステルによる皮膚中濃度増加効果を示す。ポリグリセリン脂肪酸エステルによる皮膚中濃度増加効果を示す。モノグリセリン脂肪酸エステルによる皮膚中濃度増加効果を示す。モノグリセリン脂肪酸エステルによる皮膚中濃度増加効果を示す。図５中、ＴＸＡはトラネキサム酸を示し、Ｃ１０Ｇは、モノカプリン酸グリセリルを示す。モノグリセリン脂肪酸エステルによる皮膚中濃度増加効果を示す。図６中、ＡＰＭはアスコルビン酸リン酸マグネシウムを示し、Ｃ８Ｇは、モノカプリル酸グリセリルを示す。

本発明の皮膚中濃度増加剤は、皮膚を通過して血中に移行する速度を増加させるのではなく、皮膚に適用された生理活性成分の皮膚中濃度を増加させるものであり、その有効成分は、ＨＬＢが９〜１２のモノグリセリン脂肪酸エステル、ＨＬＢが８〜１１のジグリセリン脂肪酸エステル又はＨＬＢが１１〜１４のポリグリセリン脂肪酸エステルである。

本発明で用いるモノグリセリン脂肪酸エステルのＨＬＢは、９〜１２であり、ジグリセリン脂肪酸エステルのＨＬＢは、８〜１１であり、特に１０〜１１が好ましく、ポリグリセリン脂肪酸エステルのＨＬＢは、１１〜１４であり、特に１１が好ましい。またポリグリセリン脂肪酸エステルのグリセリンの平均重合度は３以上であり、３〜１２が好ましく、４〜１０が特に好ましい。

これらのモノグリセリン脂肪酸エステル、ジグリセリン脂肪酸エステル又はポリグリセリン脂肪酸エステルの構成脂肪酸は、飽和でも不飽和でもまた直鎖でも分岐鎖でもよいが、その炭素数は８〜１８が好ましく、モノグリセリン脂肪酸エステルの構成脂肪酸の炭素数は８〜１２が特に好ましい。ジグリセリン脂肪酸エステルの場合は１２〜１８が特に好ましく、１２〜１４がさらに好ましい。ポリグリセリン脂肪酸エステルの場合は１２〜１８が特に好ましく、１６〜１８がさらに好ましい。また、構成脂肪酸は不飽和脂肪酸よりも、飽和脂肪酸が好ましく、直鎖の飽和脂肪酸であるのが特に好ましい。特に好ましい構成脂肪酸は、モノグリセリン脂肪酸エステルの場合は、カプリル酸、カプリン酸又はラウリン酸であり、ジグリセリン脂肪酸エステルの場合は、ステアリン酸、ミリスチン酸、ラウリン酸であり、ポリグリセリン脂肪酸エステルの場合は、ステアリン酸、パルミチン酸、ラウリン酸である。

具体的なモノグリセリン脂肪酸エステル、ジグリセリン脂肪酸エステル又はポリグリセリン脂肪酸エステルの例としては、モノカプリル酸グリセリル、モノカプリン酸グリセリル、モノラウリン酸グリセリル、ラウリン酸ジグリセリル、ミリスチン酸ジグリセリル、ステアリン酸ジグリセリル、ラウリン酸デカグリセリル、ステアリン酸テトラグリセリルとパルミチン酸テトラグリセリルの混合物等が挙げられる。このうち、特に好ましいものとしてモノカプリン酸グリセリル、モノラウリン酸グリセリル、モノカプリル酸グリセリル、ラウリン酸ジグリセリル、ミリスチン酸ジグリセリル、又はステアリン酸テトラグリセリルとパルミチン酸テトラグリセリルの混合物を挙げることができ、本発明の皮膚中濃度増加剤はこれらを好適に用いることができる。

これらのモノグリセリン脂肪酸エステル、ジグリセリン脂肪酸エステル又はポリグリセリン脂肪酸エステルは、１種又は２種以上を混合して用いることができ、その使用量は、皮膚中濃度増加作用の点から、生理活性成分１質量部に対して、０．０１〜２０質量部が好ましく、さらに０．０５〜１５質量部が好ましく、特に０．１〜１０質量部が好ましい。

本発明の皮膚中濃度増加剤の対象となる生理活性成分は、皮膚作用性生理活性成分であれば、特に制限されないが、水溶性の成分であるのが皮膚中濃度増加作用の点で好ましい。

本発明に用いられる生理活性成分の例としては、保湿剤、美白剤、抗にきび剤、抗しわ剤、抗炎症剤、抗酸化剤等が挙げられるが、具体的には、ビタミンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｐ、Ｕ等のビタミン類、アスコルビン酸グルコシド、アスコルビン酸リン酸塩、トラネキサム酸又はその塩等の美白剤、アミノ酸、糖、グリセリン等の保湿剤、グリチルリチン酸ジカリウム、グリチルレチン酸、アラントイン、トラネキサム酸又はその塩等の抗炎症剤及び／又はそれらの誘導体などが挙げられる。さらに好ましいものとしてアスコルビン酸、アスコルビン酸グルコシド、グリチルリチン酸ジカリウム、アスコルビン酸リン酸マグネシウム（ＡＰＭ）、トラネキサム酸又はその塩、若しくはその誘導体を例示することができる。

本発明の皮膚中濃度増加剤と皮膚作用性生理活性成分とを配合すれば、当該生理活性成分の皮膚中濃度が増加する皮膚外用剤組成物が得られる。当該皮膚外用剤組成物中の生理活性成分と皮膚中濃度増加剤との含有比は、前記と同様である。
モノグリセリン脂肪酸エステル、ジグリセリン脂肪酸エステル又はポリグリセリン脂肪酸エステルの皮膚外用剤組成物中の含有量は、０．０１〜１０質量％（以下、単に「％」という）が好ましく、特に０．１〜５％が好ましい。

本発明の皮膚外用剤組成物の形態は、特に限定されず、ローション類、乳液類、クリーム類、パック類等の基礎化粧料、シャンプー、リンス、トリートメント、ヘアトニック、ヘアリキッド、ヘアクリーム、ヘアミルク等の頭髪用製品、入浴剤や石鹸などの浴用化粧品、ファンデーション、口紅、マスカラ、アイシャドウなどのメーキャップ化粧料、日焼け止めなどの特殊化粧品等、種々の形態とすることができる。当該皮膚外用剤組成物には、前記成分以外に、界面活性剤、油脂成分、アルコール類、保湿剤、増粘剤、防腐剤、酸化防止剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、香料、色素、紫外線吸収・散乱剤、アミノ酸、水溶性高分子、発泡剤、顔料、植物抽出物、乳酸菌培養物又はその加工物などを配合することができる。なお、本発明の皮膚外用剤組成物において、組成物自体がゲル化することを防止するためにコレステロール等のステロール類を添加してもよい。

次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

〔試験例１〕
（試料の作成）
１％モノグリセリン脂肪酸エステル、ジグリセリン脂肪酸エステル又はポリグリセリン脂肪酸エステル及び０〜０．７５％コレステロールとなるように試験管にそれぞれ秤量し、精製水を投入した。このものを室温〜７０℃の条件下にて超音波分散（Ｂｒａｎｓｏｎｓｏｎｉｆｅｒ２５０）した（Ａ液）。
０．１５％ウラニンとなるように２０ｍＭリン酸塩（ｐＨ＝７．６）及び１２０ｍＭ塩化ナトリウムとなる溶液で溶解した（Ｂ液）。
Ａ液とＢ液を等量混合し試料とした。最終濃度で０．０７５％ウラニン、０．５％グリセリン脂肪酸エステル、ジグリセリン脂肪酸エステル又はポリグリセリン脂肪酸エステルとなる。

（実験方法）
ヘアレスラット（ＷＢＮ／ＩＬＡ−ＨＴ系、８週齢、オス）の腹部の皮膚を摘出し、真皮側の脂肪を取り除いた後−８０℃にて凍結保存した。本実験ではこの凍結した皮膚を室温にて１５分以上解凍し使用した。
ヘアレスラット皮膚を３２℃の水を循環させた、レシーバーセル体積６．５ｃｍ³、有効拡散面積１．７７ｃｍ²のフランツ型拡散セル（水平型）にセットした。真皮側のレシーバーセル及び角層側のドナーセルに１０ｍＭリン酸塩（ｐＨ＝７．６）及び６０ｍＭ塩化ナトリウムとなる溶液（溶液Ｃ）を満たし、１時間水和を行った後ドナーセルの溶液を取り除き試料を投入した。

（皮膚中濃度の測定）
試料を投入してから２２時間後の皮膚を取り出し、０．５ｍＬの溶液Ｃで皮膚を洗浄した後、脱脂綿でふき取った。この作業を表裏３回行った。この皮膚を０．３８５ｃｍ²切り取りデシケータ内で乾燥し重量を測定し、５ｍＬの等張リン酸緩衝液（ＰＢＳ）にて４８時間、室温で抽出しウラニンを定量した。検出されたウラニン量（ｇ）／皮膚重量（ｇ）を皮膚中濃度とした。

（ＨＬＢの算出）
有機概念図より下記式にて算出し（新化粧品ハンドブック、２００６）、さらに小数第１位を四捨五入した値を本発明におけるＨＬＢとする。
ＨＬＢ＝（Σ無機性値／Σ有機性値）×１０

（ウラニンの定量）
９６ウェル（Black）プレートに４００ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ＝８．６）５０μｌ、および抽出液２７０μｌを滴下し、励起波長４８５ｎｍ、検出波長５３５ｎｍにて蛍光強度（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ社製、ＳＰＥＣＴＲＡＭＡＸＧＥＭＩＮＩ）を測定した。

（結果）
モノグリセリン脂肪酸エステル（ＭＧ）を用いた試験結果を表１及び図１に示す。また、実施例１、３は特許請求の範囲外の参考例である。

表１及び図１の結果から、ＨＬＢが９〜１２のモノグリセリン脂肪酸エステルは、ウラニンの皮膚中濃度を顕著に増加させることが示された。

ジグリセリン脂肪酸エステル（ＤＧ）を用いた試験結果を表２及び図２に示す。また、実施例４〜６は特許請求の範囲外の参考例である。

表２及び図２の結果から、ＨＬＢが８〜１１のジグリセリン脂肪酸エステルはウラニンの皮膚中濃度を顕著に増加させることが示された。

ポリグリセリン脂肪酸エステル（ＰＧ）を用いた試験結果を表３及び図３に示す。
また、実施例７、８は特許請求の範囲外の参考例である。

表３及び図３の結果から、ＨＬＢが１１〜１４のポリグリセリン脂肪酸エステルはウラニンの皮膚中濃度を顕著に増加させることが示された。

〔試験例２〕
（試料の作成）
１％モノカプリン酸グリセリル及び０〜０．７５％コレステロールとなるように試験管にそれぞれ秤量し、精製水を投入した。このものを室温〜７０℃の条件下にて超音波分散(Ｂｒａｎｓｏｎｓｏｎｉｆｅｒ２５０)した（Ｄ液）
６．０％アスコルビン酸リン酸マグネシウム（ＡＰＭ）となるように２０ｍＭリン酸塩(ｐＨ＝７．６)、１２０ｍＭ塩化ナトリウム及び０．２％イミダゾールとなる溶液で溶解した（Ｅ液）。
Ｄ液とＥ液を等量混合し試料とした。最終濃度で３％ＡＰＭ、０．５％モノカプリン酸グリセリルとなる。

（実験方法）
ヘアレスラット(ＷＢＮ／ＩＬＡ−ＨＴ系、８週齢、オス)の腹部の皮膚を摘出し、真皮側の脂肪を取り除いた後−８０℃にて凍結保存した。本実験ではこの凍結した皮膚を室温にて１５分以上解凍し使用した。
ヘアレスラット皮膚を３２℃の水を循環させた、レシーバーセル体積６．５ｃｍ³、有効拡散面積１．７７ｃｍ²のフランツ型拡散セル（水平型）にセットした。真皮側のレシーバーセル及び角層側のドナーセルに１０ｍＭリン酸塩(ｐＨ＝７．６)、６０ｍＭ塩化ナトリウム及び０．１％イミダゾールとなる溶液（溶液Ｆ）を満たし、1時間水和を行った後ドナーセルの溶液を取り除き試料を投入した。

（皮膚中濃度の測定）
試料を投入してから２２時間後の皮膚を取り出し、０．５ｍＬの溶液Ｆで皮膚を洗浄した後、脱脂綿でふき取った。この作業を表裏３回行った。この皮膚を０．８８５ｃｍ³切り出し凍結乾燥させ、重量を測定し、５ｍＬの等張リン酸緩衝液(ＰＢＳ、０．１%イミダゾール入り)にて８０℃にて２０分加熱後、４８時間、５℃にて抽出しＡＰＭを定量した。検出されたＡＰＭ量（ｇ）／皮膚重量（ｇ）を皮膚中濃度とした。

（アスコルビン酸リン酸マグネシウムの定量）
高速液体クロマトグラフィ（alliance Waters社製）を用い、下記の条件下で定量分析を行った。
移動相：１００ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ＝２．０５）
流量：０．７５ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：３０℃
検出波長（ＵＶ）：２３８ｎｍ
カラム：Develosil RPAQUEOUS AR-３（４．６×２５０ｎｍ、野村化学社製）

（結果）
試験結果を表４及び図４に示す。

表４及び図４の結果から、ＨＬＢが１０のモノグリセリン脂肪酸エステルであるモノカプリン酸グリセリルは、美白剤であるアスコルビン酸リン酸マグネシウムの皮膚中濃度を顕著に増加させることが示された。

〔試験例３〕
（試料の作成）
１．０％モノカプリン酸グリセリル（Ｃ１０Ｇ）となるように試験管にそれぞれ秤量し、精製水を投入した。このものを室温〜７０℃の条件下にて超音波分散（Ｂｒａｎｓｏｎｓｏｎｉｆｅｒ２５０）した（Ｇ液）。
１０％トラネキサム酸（ＴＸＡ）となるように２０ｍＭリン酸塩（ｐＨ＝７．６）及び１２０ｍＭ塩化ナトリウムとなる溶液で溶解した（Ｈ液）。
Ｇ液若しくは精製水とＨ液を等量混合し試料とした。最終濃度で５％ＴＸＡ、０若しくは０．５％モノカプリン酸グリセリルとなる。

（実験方法）
ヘアレスラット（ＷＢＮ／ＩＬＡ−ＨＴ系、８週齢、オス）の腹部の皮膚を摘出し、真皮側の脂肪を取り除いた後−８０℃にて凍結保存した。本実験ではこの凍結した皮膚を室温にて１５分以上解凍し使用した。
ヘアレスラット皮膚を３２℃の水を循環させた、レシーバーセル体積６．５ｃｍ³、有効拡散面積１．７７ｃｍ²のフランツ型拡散セル（水平型）にセットした。真皮側のレシーバーセル及び角層側のドナーセルに１０ｍＭリン酸塩（ｐＨ＝７．６）及び６０ｍＭ塩化ナトリウムとなる溶液（溶液Ｉ）を満たし、１時間水和を行った後ドナーセルの溶液を取り除き試料を投入した。

（ＴＸＡの定量）
高速液体クロマトグラフィ（alliance Waters社製）を用い、下記の条件下で定量分析を行った。
移動相：９０ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ＝２．５）：アセトニトリル＝７０：３０
流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
検出波長（UV）：２１０ｎｍ
カラム：CAPCELL PAK SCX(４．６×２５０ｎｍ、SHISEIDO）

（皮膚中濃度の測定）
試料を投入してから２２時間後の皮膚を取り出し、０．５ｍＬの溶液Ｉで皮膚を洗浄した後、脱脂綿でふき取った。この作業を表裏３回行った。この皮膚を０．８８５ｃｍ²切り出し凍結乾燥させ、重量を測定し、４ｍＬの等張リン酸緩衝液（ＰＢＳ）を加え、４８時間、５℃にて抽出しＴＸＡを定量した。検出されたＴＸＡ量（ｇ）／皮膚重量（ｇ）を皮膚中濃度とした。

（結果）
試験結果を表５及び図５に示す。

表５及び図５から、ＨＬＢが１０のモノグリセリン脂肪酸エステルであるモノカプリン酸グリセリル（Ｃ１０Ｇ）は、抗炎症剤であり、美白剤でもあるトラネキサム酸（ＴＸＡ）の皮膚濃度を顕著に増加させる作用を有する。

〔試験例４〕
（試料の作成）
１．０％モノカプリル酸グリセリル(Ｃ８Ｇ)となるように試験管にそれぞれ秤量し、精製水を投入した。このものを室温〜７０℃の条件下にて超音波分散（Ｂｒａｎｓｏｎｓｏｎｉｆｅｒ２５０）した（Ｊ液）。
６％アスコルビン酸リン酸マグネシウム塩(ＡＰＭ)となるように、２０ｍＭリン酸塩（ｐＨ＝７．６）、１２０ｍＭ塩化ナトリウムおよび０．２％イミダゾールとなる溶液で溶解した（Ｋ液）。
Ｊ液若しくは精製水とＫ液を等量混合し試料とした。最終濃度で３％ＡＰＭ、０若しくは０．５％Ｃ８Ｇとなる。

（実験方法）
ヘアレスラット（ＷＢＮ／ＩＬＡ−ＨＴ系、８週齢、オス）の腹部の皮膚を摘出し、真皮側の脂肪を取り除いた後−８０℃にて凍結保存した。本実験ではこの凍結した皮膚を室温にて１５分以上解凍し使用した。
ヘアレスラット皮膚を３２℃の水を循環させた、レシーバーセル体積６．５ｃｍ³、有効拡散面積１．７７ｃｍ²のフランツ型拡散セル（水平型）にセットした。真皮側のレシーバーセル及び角層側のドナーセルに１０ｍＭリン酸塩（ｐＨ＝７．６）、６０ｍＭ塩化ナトリウムおよび０．１％イミダゾールとなる溶液（溶液Ｌ）を満たし、１時間水和を行った後ドナーセルの溶液を取り除き試料を投入した。

（ＡＰＭの定量）
高速液体クロマトグラフィ（alliance Waters社製）を用い、下記の条件下で定量分析を行った。
移動相：１００ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ＝２．０５）
流量：０．７５ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：３０℃
検出波長（UV）：２３８ｎｍ
カラム：Develosil RPAQEUOU
S AR−3(４．６×２５０ｎｍ、野村化学社製）

（皮膚中濃度の測定）
試料を投入してから２２時間後の皮膚を取り出し、０．５ｍＬの溶液Ｌで皮膚を洗浄した後、脱脂綿でふき取った。この作業を表裏３回行った。この皮膚を０．８８５ｃｍ²切り出し凍結乾燥させ、重量を測定し、５ｍＬの等張リン酸緩衝液(ＰＢＳ、0.1%イミダゾール入り)を加え、４８時間、５℃にて抽出しAPMを定量した。検出されたAPM量（ｇ）／皮膚重量（ｇ）を皮膚中濃度とした。

（結果）
試験結果を表６及び図６に示す。

表６及び図６の結果から、ＨＬＢが１２のモノグリセリン脂肪酸エステルであるモノカプリル酸グリセリルは、美白剤であるアスコルビン酸リン酸マグネシウムの皮膚中濃度を顕著に増加させることが示された。

表１〜表６及び図１〜図６から明らかなように、ＨＬＢが９〜１２のモノグリセリン脂肪酸エステル、ＨＬＢが８〜１１のジグリセリン脂肪酸エステル又はＨＬＢが１１〜１４のポリグリセリン脂肪酸エステルは、生理活性成分の皮膚中濃度を顕著に増加させる作用を有する。

Claims

モノカプリン酸グリセリルを有効成分とする、トラネキサム酸、アスコルビン酸、アスコルビン酸グルコシド、又はアスコルビン酸リン酸マグネシウムの皮膚中濃度増加剤。
モノカプリン酸グリセリルの使用量が、トラネキサム酸、アスコルビン酸、アスコルビン酸グルコシド、又はアスコルビン酸リン酸マグネシウム１質量部に対して０．０１〜２０質量部である請求項１記載の皮膚中濃度増加剤。