JP5499732B2 - 生体サンプル像取得装置、生体サンプル像取得方法及び生体サンプル像取得プログラム - Google Patents
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Description
1.第1の実施の形態
2.第2の実施の形態
3.第3の実施の形態
4.第4の実施の形態
5.他の実施の形態
[1−1.生体サンプル像取得装置の構成]
図1において、本一実施の形態による生体サンプル像取得装置1を示す。この生体サンプル像取得装置1は、顕微鏡10と、データ処理部20とを含む構成とされる。
次に、データ処理部20の構成について説明する。このデータ処理部20は、図3に示すように、制御を司るCPU(Central Processing Unit)21に対して各種ハードウェアを接続することにより構成される。
CPU21は、蛍光染色された生体サンプルSPLの像の取得命令を操作入力部24から受けた場合、該取得命令に対応するプログラムにしたがって、図4に示すように、ステージ移動制御部41、生体サンプル像取得部42、データ記録部43として機能する。
次にデータ取得処理で取得された生体サンプル像を表示部26に表示する生体サンプル像補正表示処理について説明する。ここで生体サンプル像補正表示処理においては、図8及び図9を用いながら説明する。
以上の構成において、生体サンプル像取得装置1は、生体サンプルSPLを撮像する際、対物レンズ12Aの焦点面FPを該生体サンプルSPLの厚さ方向に移動させると同時に面方向に移動させる。
第2の実施の形態においては、第1の実施の形態とは、データ取得処理において可動ステージ11の移動制御が異なる。また生体サンプル像補正表示処理において生体サンプル像に対する処理の一部が異なる。なお、生体サンプル像取得装置1の構成については、第1の実施の形態と同様であるためその説明を省略する。
CPU21は、第1の実施の形態と同様に、蛍光染色された生体サンプル像の取得命令を操作入力部24から受けた場合、ステージ移動制御部41、生体サンプル像取得部42、データ記録部43として機能する。
CPU21は、第1の実施の形態と同様に、生体サンプル像補正表示処理手順(図8)に従って処理を実行するが、例えば細胞核内輝点抽出処理と輝点補正処理との間で、長軸/短軸比が閾値以上である輝点BPの厚さ方向の位置を算出する。
以上の構成において、生体サンプル像取得装置1は、対物レンズ12Aの焦点面FPを生体サンプルSPLの厚さ方向に移動させると同時に、厚さ方向に移動させるにつれて面方向の速度が変化するように加速又は減速させながら移動させる。
第3の実施の形態においては、第1の実施の形態とは、データ取得処理において可動ステージ11の移動制御が異なる。また生体サンプル像補正表示処理において生体サンプル像に対する処理の一部が異なる。なお、生体サンプル像取得装置1の構成については、第1の実施の形態と同様であるためその説明を省略する。
CPU21は、第1の実施の形態と同様に、蛍光染色された生体サンプル像の取得命令を操作入力部24から受けた場合、ステージ移動制御部41、生体サンプル像取得部42、データ記録部43として機能する。
CPU21は、第1の実施の形態と同様に、生体サンプル像補正表示処理手順(図11)に従って処理を実行するが、例えば細胞核内輝点抽出処理と輝点補正処理との間で、長軸/短軸比が閾値以上である輝点BPの厚さ方向の位置を算出する。
以上の構成において、生体サンプル像取得装置1は、対物レンズ12Aの焦点面FPを生体サンプルSPLの厚さ方向に移動させると同時に、厚さ方向に移動させるにつれて面方向の移動方向が変化するように移動させる。
ところで、細胞膜を貫通して存在する上皮成長因子受容体(Epidermal Growth Factor Receptor : EGFR)は、過剰発現、変異などにより発癌、癌の増殖、転移などに関与する。
図1との対応部分に同一符号を付した図14において第4の実施の形態における生体サンプル像取得装置100を示す。この生体サンプル像取得装置100は、顕微鏡110及びデータ処理部20を含む構成とされる。
CPU21は、蛍光染色された生体サンプルSPLの像の取得命令を操作入力部24から受ける。このときCPU21は、該取得命令に対応するプログラムにしたがって、図15に示すように、ステージ移動制御部41、生体サンプル像取得部42、データ記録部43、結像位置移動制御部44、距離算出部45及び表示制御部46として機能する。なおCPU21は、プログラムを実行すると光源14から励起光を出射させる。
上述したデータ取得処理の手順について図19に示すフローチャートを用いて説明する。
以上の構成において生体サンプル像取得装置100は、撮像素子30に対して生体サンプルSPLの像の向きを変化させることなく円運動させる結像位置移動部115が設けられる。
なお上述した第1〜第4の実施の形態においては、Z軸方向に可動ステージ11を動かすことによって焦点面FPを生体サンプルSPLに対してZ軸方向に移動させるようにした。本発明はこれに限らず、例えば対物レンズ12AをZ軸方向に可動させ得る移動機構を設け、該対物レンズ12AをZ軸方向に移動させることによって焦点面FPを生体サンプルSPLに対してZ軸方向に移動させるようにしてもよい。
Claims (13)
- 生体サンプルの部位を拡大する対物レンズと、
上記対物レンズにより拡大される部位を結像する撮像素子と、
上記生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向に上記対物レンズの焦点を移動させると同時に、上記撮像素子に結像される上記対物レンズにより拡大される部位の像を面方向に移動させる移動制御部と、
上記移動制御部が移動させる間、上記撮像素子を露光させることにより上記部位の生体サンプル像を取得する生体サンプル像取得部と
を具える生体サンプル像取得装置。 - 上記移動制御部は、
上記生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向に上記対物レンズの焦点を移動させると同時に、上記生体サンプルと上記撮像素子との相対位置を面方向に移動させる
請求項1に記載の生体サンプル像取得装置。 - 上記生体サンプル像取得部により取得された像において、上記移動制御部により移動されたことに基づくぶれの有無に応じてノイズを除去した上記生体サンプルの像を抽出する抽出部
をさらに具える請求項2に記載の生体サンプル像取得装置。 - 上記移動制御部は、
上記生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向に上記対物レンズの焦点を移動させる間に、上記生体サンプルと上記撮像素子との相対位置を面方向に移動速度が変化するように移動させる
請求項2に記載の生体サンプル像取得装置。 - 上記移動制御部は、
上記生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向に上記対物レンズの焦点を移動させる間に、上記生体サンプルと上記撮像素子との相対位置を面方向に移動方向が変化するように移動させる
請求項2に記載の生体サンプル像取得装置。 - 上記移動制御部は、
上記生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向に上記対物レンズの焦点を移動させる間に、上記生体サンプルと上記撮像素子との相対位置を面方向に円運動させる
請求項5に記載の生体サンプル像取得装置。 - 上記対物レンズと上記撮像素子との間に設けられ、上記移動制御部の制御に基づいて、上記撮像素子に結像される上記部位の像の向きを変化させることなく円運動させる結像位置移動部
をさらに具える請求項1に記載の生体サンプル像取得装置。 - 上記結像位置移動部は、
上記対物レンズと上記撮像素子と間の光軸に平行に配される軸と、
上記軸を回転させる駆動部と、
上記軸に対して所定角度に傾いて固定され、一部が上記対物レンズと上記撮像素子との間に配され、上記対物レンズにより拡大される部位の像を透過する平行板と
を具える請求項7に記載の生体サンプル像取得装置。 - 上記対物レンズと上記撮像素子との間に設けられ、上記対物レンズにより拡大される部位の像を透過し、該部位の像以外の光を遮断するエミッションフィルタをさらに具え、
上記結像位置移動部は、
上記エミッションフィルタを移動させることにより、上記対物レンズにより拡大される部位の像の向きを変化させることなく円運動させる
請求項7に記載の生体サンプル像取得装置。 - ターゲットに標識される蛍光マーカを励起する光を、該蛍光マーカが染色された生体サンプルに対して照射する光源と、
上記生体サンプル像における、上記ターゲットに標識される蛍光マーカが発する蛍光の像を輝点として抽出し、抽出した輝点の傾きを算出した後、該輝点の傾きに基づいて、該輝点に対応する蛍光マーカの厚さ方向の位置を算出する算出部と
を具える請求項6に記載の生体サンプル像取得装置。 - 上記移動制御部は、
上記生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向にだけ上記対物レンズの焦点を移動させ、また上記生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向に上記対物レンズの焦点を移動させる間に、上記生体サンプルと上記撮像素子との相対位置を面方向に、上記対物レンズの焦点を厚さ方向にだけ移動させた際の位置を中心として円運動させ
上記算出部は、
上記移動制御部が上記対物レンズの焦点を厚さ方向にだけ移動させた際に取得した生体サンプル像と、上記移動制御部が上記対物レンズの焦点を厚さ方向に移動させる間に円運動させた際に取得した生体サンプル像とに基づいて上記輝点の傾きを算出する
請求項10に記載の生体サンプル像取得装置。 - 対物レンズにより拡大された生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向に該対物レンズの焦点を移動させると同時に、所定の撮像素子に結像される上記対物レンズにより拡大される部位の像を面方向に移動させる移動制御ステップと、
上記移動制御ステップで移動させる間、上記撮像素子を露光させることにより上記部位の生体サンプルを取得する生体サンプル像取得ステップと
を具える生体サンプル像取得方法。 - コンピュータに対して、
対物レンズにより拡大された生体サンプルの対象とすべき部位の厚さ方向に該対物レンズの焦点を移動させると同時に、所定の撮像素子に結像される上記対物レンズにより拡大される部位の像を面方向に移動させる移動制御ステップと、
上記移動制御ステップで移動させる間、上記撮像素子を露光させることにより上記部位の生体サンプルを取得する生体サンプル像取得ステップと
を実行させる生体サンプル像取得プログラム。
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