JP5464344B2 - 抗アンドロゲンペプチドおよび癌治療におけるその使用 - Google Patents
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Description
アンドロゲンレセプター(AR)は、内在性アンドロゲンと共にその活性を通じて男性の性的発育および機能の誘導を媒介するリガンド活性化転写調節タンパク質である(Royら、1999年)。アンドロゲンは一般的に男性性ホルモンとして知られている。アンドロゲンホルモンはステロイドであり、これは精巣および副腎皮質により身体内で産生されるまたは実験室で合成することができる。アンドロゲン性ステロイドは、筋肉と骨量、前立腺成長、精子形成および男性髪型などの男性性徴の発達および維持を含む多くの生理学的過程において重要な役割を果たしている(SiiteriとWilson、1974年)。内在性ステロイド性アンドロゲンには、テストステロンおよびジヒドロテストステロン(DHT)が挙げられる。テストステロンは精巣により分泌される主要ステロイドであり、男性の血漿中に存在する一次循環アンドロゲンである。テストステロンは、多くの末梢組織において酵素5−α−還元酵素によりDHTに転換される。したがって、DHTは、大半のアンドロゲン作用のための細胞内媒介物としての働きをすると考えられている。
フルタミド(Eulexin(登録商標))、ビクルタミド(Casodex(登録商標))またはニルタミド(Anandron(登録商標))などの非ステロイド性抗アンドロゲンは、ホルモン応答性前立腺癌療法において使用されてきた。同様に、タモキシフェン(Nolvadex(登録商標))またはICI 182,780(Fulvestrant(登録商標))による抗エストロゲン療法は、ホルモン応答乳癌において一般に使用されている。不運なことに、これらのおよび類似するアプローチは、薬物抵抗性の発現のために効き目が悪くなることが多い。さらに、これらの化合物には、心血管系合併症の危険性の増加、および慢性使用の後の子宮癌の発生のわずかな増加のようないくつかの好ましくない副作用がある。したがって、非毒性代替化合物を使用してもっと特異的な形で前立腺癌および乳癌を治療する緊急の必要性が存在する。ホルモンまたは成長因子に刺激されたアンドロゲンレセプターはチロシンキナーゼSrcと相互作用をして、「インビトロ」で前立腺癌および乳癌細胞増殖を誘導することが最近見出された(Castoriaら、1999年;Migliaccioら、1996年;2000年;2005年)。
(式中、Xは、H、アセチル基もしくは任意の天然アミノ酸であるか、または遊離NH2基もしくは少なくともアセチル誘導体化NH2基の付いたアミノ酸の配列であり、Yは、OH基、NH2基もしくは任意のアミノ酸であるか、またはC末端カルボキシ−アミド基を有するアミノ酸の配列であり、「n」は1〜10の整数であり、「m」は1〜3のうちの整数である)
Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys(配列番号1)
により表わされるアミノ酸配列を含み、各アミノ酸はそのいかなる誘導体または類似体によっても置き換えることができるペプチドを含む組成物に関する。
Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys(配列番号2)
により表わされるアミノ酸配列を含み、各アミノ酸はそのいかなる誘導体または類似体によっても置き換えることができるペプチドを含む組成物に関する。
Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys(配列番号3)
により表わされるアミノ酸配列を含み、各アミノ酸はそのいかなる誘導体または類似体によっても置き換えることができるペプチドを含む組成物に関する。
Gly-Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys(配列番号4)
により表わされるアミノ酸配列を含み、各アミノ酸はそのいかなる誘導体または類似体によっても置き換えることができるペプチドを含む組成物に関する。
本発明は、精製された、および好ましい実施形態では、実質的に精製された、抗癌特性を有するプロリンリッチなペプチド誘導体を提供する。本明細書で使用する用語「精製されたペプチド」は、前記ペプチドリッチなペプチドが、その天然に入手可能な状態と比べてどんな程度であれ精製されているタンパク質組成物に言及することを意図する。したがって、精製されたペプチドまたはペプチドは、そのペプチドまたはタンパク質が天然に存在する環境から遊離しているペプチドまたはタンパク質にも言及する。
本発明は、ほとんどどんな供給源からも単離することができ、全ゲノムDNAから遊離しており、本明細書に開示する新規のペプチドの全体または一部をコードするDNAセグメントにも関する。新規のペプチド種をコードするポリヌクレオチドは、当業者に公知の方法を使用して完全にインビトロで合成できる。
本発明のペプチドの発現における使用に加えて、本明細書で企図される核酸配列は種々の他の使用も有する。
本発明は、開示された抗アンドロゲンペプチドのいずれかを含む組成物も開示し、クレームする。前記組成物は、抗アンドロゲンペプチドをコードする核酸セグメントを発現する1つもしくは複数の宿主細胞、前記ペプチドもしくは前記ペプチドを含む融合タンパク質を発現する組換え宿主細胞、開示された抗アンドロゲンペプチドを含有する細胞懸濁液、細胞抽出物、細胞封入体、または組織培養物もしくは培養抽出物、培養上清、破壊細胞、細胞抽出物、細胞溶解物、細胞ホモジネート等に含まれていてもよい。前記組成物は、水性形でも、代わりに、乾燥、半湿潤、もしくは細胞ペースト、細胞ペレットなどの類似の形でも、代わりに、フリーズドライ化、粉末化、凍結乾燥、蒸発、または類似の方法で乾燥した形をしてもよい。抗アンドロゲンペプチドを調製するためのそのような手段は、タンパク質単離および精製の分野の当業者には公知である。ある種の実施形態では、抗アンドロゲンペプチドは、精製しても、濃縮しても、他の試薬と混合しても、または目的の最終的な形まで加工してもよい。好ましくは、前記組成物は、抗アンドロゲンペプチドを約1重量%から約90重量%の範囲で、さらに好ましくは、約5重量%から約50重量%の範囲で含むことになる。
本発明の治療キットは、本明細書に開示されるプロリンリッチなペプチドを含むタンパク質、ペプチド、阻害剤、遺伝子、ベクターまたは他のペプチド結合タンパク質エフェクターを含むキットである。そのようなキットは、一般に、許容可能な製剤中に本明細書に開示されるプロリンリッチなペプチドを含むタンパク質、ペプチド、阻害剤、遺伝子、ベクターもしくは他のペプチド結合タンパク質エフェクター、または、これらのいずれかを発現させるベクターを含有する許容可能な製剤を適切な収容手段で含み、随意に他の抗癌剤を含んでいてもよい。キットは、単一の容器手段を有してもよく、化合物ごとに別々の容器手段を有してもよい。
ある種の実施形態では、本明細書に開示する核酸セグメントを使用して適切な宿主細胞をトランスフェクトすることが企図されている。DNAを細胞に導入するための技術は当業者には公知である。核セグメントを細胞に送達するための4種類の一般的方法としてはは、
(1)化学的方法(GrahamとVanDerEb、1973年)
(2)マイクロインジェクション(Capecchi、1980年)、エレクトロポレーション(WongとNeumann、1982年;Frommら、1985年)および遺伝子銃(Yangら、1990年)などの物理的方法
(3)ウイルスベクター(Clapp、1993年;Eglitisら、1988年;EglitisとAnderson、1988年)、ならびに
(4)レセプター媒介機構(Curielら、1991年;Wagnerら、1992年)
が考えられる。
ある種の実施形態では、発明者は、ペプチド組成物を宿主細胞に導入するためのリポソームおよび/またはナノカプセルの使用を企図している。そのような製剤は、本明細書に開示するポリペプチド、医薬品、および/または抗体の医薬的に許容可能な製剤の導入に好ましいものであろう。リポソームの形成および使用は、一般に当業者には公知である(例えば、細胞内細菌感染および疾病の標的抗体療法におけるリポソームおよびナノカプセルの使用を記載している、Couvreurら、1977年を参照)。さらに最近では、血清安定性および循環半減時間が改良されたリポソームが開発された(GabizonとPapahadjopoulos、1988年;AllenとChoun、1987年)。
固相法(Bodansky MとBodansky A、1995年)および科学文献に大部分が記載されており(CarpinoとHan、1972年;FieldsとNoble、1990年)当業者には公知であるFmoc/tBu(Fmoc:9−フルオレニル−メトキシカルボニル)化学を用いることにより、ペプチド1から4は都合よく手作業で調製することができる。前記調製を迅速に処理し促進するために、自動多重ペプチド合成装置(automatic multiple peptide synthesizer)を利用することができる。どんな種類の化学的方法または単一もしくは複数のチャネルを備えた機械的合成装置も都合よく使用しても、最終化合物の生物学的特性に影響を与えることなく、前記合成を実施することができる。
1.250μモル(117mg)のFmoc−L−Lys(Boc)−OH(Novabiochem、カタログ番号04−12−1026)を500μLの無水DMF中に溶解する。
2.保護したアミノ酸を、400μLの溶液Aおよび400μLの溶液Bを用いて、室温で攪拌下4分間かけて前活性化する。
溶液Aは、DMF中に0.5Mの2−(1H−ベンゾトリアゾール−イル)−1,1,3,3−テトラメチル−ウロニウムテトラフルオロボレート(TBTU、>99%,Chem−Impex Intl、カタログ番号02056)および0.5Mの1−ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt、SIGMA−ALDRICH社、カタログ番号H2006)を含有する。
溶液Bは、DMF中に1Mのジイソプロピル−エチルアミン(DIEA、SIGMA−ALDRICH社、カタログ番号D−3887)を含有する。
3.前記溶液を樹脂上に移し、30分間攪拌する。
4.前記試薬を減圧下で取り除き、前記樹脂は1.0mLの無水DMFで4回洗浄する。
5.前記樹脂は、再び、DMFを溶媒とする1.0mLの20%v/vピペリジン溶液で攪拌下室温で15分間処理して、N−末端Fmocを取り除く。
6.前記樹脂は1.0mLのDMFで3回洗浄する。
10nM R1881合成アンドロゲンでのヒト前立腺癌LNCaPの治療はDNA合成を劇的に促進することは実証されている。したがって、LNCaP細胞は、ルーチンで、フェノールレッド、2mM L−グルタミン(GIBCO社)、ペニシリン(100U/ml)、ゲンタマイシン(50μl/ml)、インスリン(ヒューマリンI 0.2U.I/ml、Roche社)および10%ウシ胎仔血清を補充したRPMI 1640培地(GIBCO社)中、大気中5%CO2中で増殖させる。次に、細胞は、前もってゼラチン被膜したカバーガラス上に約40%コンフルエンスで播種し、インスリンおよび活性炭処理ウシ血清を含有するフェノールレッド無添加RPMI−1640中で維持し、3日間ステロイド汚染が最小限度以下であることを確認する(Shiら、1994年)。次に、LNCaP細胞は、10nMの合成アンドロゲンR1881(Astra−Zeneca社)だけで、または1000倍モル過剰の抗アンドロゲンCasodex(Astra−Zeneca社)もしくは表示されるペプチドの存在下で10nMの合成アンドロゲンR1881で24時間処理される。
DNA合成は、100μM(最終濃度)BrdU(Boeheringer社)での6時間パルスにより単細胞で評価される。カバーガラス上の細胞を固定し、希釈(PBS中1:1)フルオレセイン結合マウス抗BrdU mAbs(Boheringer Mannheim社製、インディアナ州のクローンBMC9318)とともにインキュベートし、次に、PBSで3回洗浄する。マウス抗体は、希釈(PBS中1:200)Texas−red結合ヤギ抗マウス抗体(Calbiochem社、カリフォルニア州)を使用して検出する。カバーガラスはすべてPBSで3回洗浄し、反転させてスライドガラス上でMoviol(Calbiochem社、カリフォルニア州)でマウントする。スライドはAxiophot蛍光顕微鏡(Zeiss社)を使用して分析する。
ホルモン結合ARは、おそらくプロリンストレッチを通じてSrcキナーゼのSH3ドメインと相互作用することはすでに実証されている(Migliaccioら、2000年)。この相互作用の結果として、前記キナーゼおよび下流シグナル経路は活性化され、最終的に、DNA合成が活性化される。この相互作用に関与するARのドメインを模倣する小ペプチド配列を使用すれば、競合によりAR−Src会合を阻害しDNA合成を遮断することができるはずである。この仮説を試験するために、LNCaP細胞は、ルーチンで、フェノールレッド、2mM L−グルタミン(GIBCO社)、ペニシリン(100U/ml)、ゲンタマイシン(50μl/ml)、インスリン(0.2U.I./ml)および10%ウシ胎仔血清を補充したRPMI 1640培地(GIBCO社)中、大気中5%CO2中で増殖させる。次に、前記細胞は、フェノールレッドなしで、上記のグルタミン、ペニシリン、ゲンタマイシンおよびインスリンを補充され、10%活性炭処理ウシ胎仔血清を含有するRPMI 1640でさらに4日間維持する。次に、細胞は、10nM R1881だけで、または1000倍過剰量の抗アンドロゲンCasodex、もしくは1nMの配列番号1ペプチドもしくは1nMのペプチド配列番号1のシャッフル配列(配列番号7)の存在下で10nM R1881で2分間刺激し、溶解する。細胞ライセートは、マウスモノクロナール抗Src抗体(クローン327、Oncogene Science社、マンハセット、ニューヨーク州)を使用して免疫沈降に付する。免疫沈降タンパク質は12%SDSポリアクリルアミドゲルで分離し、その後ニトロセルロースフィルター上に移す。前記フィルターは、抗Src抗体またはマウスモノクロナール抗AR抗体のいずれかとともにインキュベートする。ニトロセルロースフィルター上の免疫複合体は、化学発光基質(Pierce Chemicals社、イリノイ州)結合ペルオキシダーゼ連結抗マウス抗体を使用して検出する。
細胞ライセートの調製。細胞は1mlの溶解用緩衝液:5mM MgCl2、150mM NaCl、0.5%Triton X−100を含有する50mM Tris−HCl、pH7.40に懸濁し、4℃で2分間穏やかな振盪下に置く。次に、懸濁液を約800gで30分間遠心分離し、上清を回収して免疫沈降に使用する。
ERはARと一緒にSrcと三元複合体を形成することは以前明らかにされている(Migliaccioら、2000年)。ERまたはARのいずれかとSrcの相互作用を阻害すると、この三元複合体は破壊され、Src媒介シグナル伝達が阻害される。したがって、SH3バインダーペプチド(複数可)によりAR−Src相互作用を阻害すれば、SrcとのERα会合およびエストラジオール誘導シグナル伝達も阻害されるはずである。この点に取り組むために、乳癌由来MCF−7細胞を、フェノールレッド、2mM L−グルタミン(GIBCO社)、ペニシリン(100U/ml)、ゲンタマイシン(50μl/ml)、ヒドロコルチゾン(3.75ng/ml)、インスリン(0.2U.I./ml)および5%ウシ胎仔血清を補充したDMEM培地(GIBCO社)中、大気中5%CO2中で増殖させる。次に、前記細胞を、フェノールレッドなしの、上記のグルタミン、ペニシリン、ゲンタマイシンおよびインスリンを補充され、5%活性炭処理ウシ胎仔血清を含有するDMEMでさらに4日間維持する。次に、前期細胞を、10nM 17βエストラジオールだけで、または1000倍過剰量の抗エストロゲンICI 182,780、もしくは1nMの配列番号1ペプチド、もしくはペプチド配列番号1のシャッフル配列の存在下で10nM 17βエストラジオールで3分間刺激し、溶解する。細胞ライセートは、マウスモノクロナール抗Src抗体(Oncogene Science社、マンハセット、ニューヨーク州)を使用して免疫沈降に付する。免疫沈降タンパク質は12%SDSポリアクリルアミドゲルで分離し、その後ニトロセルロースフィルター上に移す。前記フィルターを、抗Src抗体またはマウスモノクロナール抗AR抗体のいずれかとともにインキュベートする。ニトロセルロースフィルター上の免疫複合体は、上記の化学発光基質付きのペルオキシダーゼ連結抗マウス抗体を使用して検出する。
エストロゲンおよびアンドロゲンレセプターはSrcを刺激し、次にSrcがホスファチジル−3−キナーゼ(PI3−K)経路を活性化する(Castoriaら、2000年)。PI3−Kを活性化すれば、PKB/Aktキナーゼがリン酸化され、サイクリンD1発現が増加する。これにより、ホルモン依存性細胞が細胞周期G1/S移行期に向けて駆り立てられる(Castoriaら、2000年)。SrcまたはPI3−Kが阻害されると、細胞がG1期に停滞しDNA合成が遮断される。したがって、SH3バインダーペプチドを使用すれば、SrcキナーゼおよびPI−3K依存性サイクリンD1発現を阻害することができると考えられる。この可能性を立証するため、SH3バインダーペプチド(配列番号1)をアンドロゲンで刺激したMCF−7およびLNCaP細胞に添加する。MCF−7およびLNCaP細胞はルーチンで上記の通りに増殖させる。次に、細胞は、上記の通りに補充され、ステロイド濃度を最小限にとどめるためにデキストラン被膜活性炭処理ウシ胎仔血清を添加したレッドフェノール無添加培地で少なくとも4日間維持する。次に、細胞は、10nM R1881だけで、または1nM SH3バインダーペプチド(SH3,配列番号1)、もしくは1nMのペプチド配列番号1のシャッフル配列(配列番号7)の存在下で10nM R1881で6時間処理し、その後溶解し、抗サイクリンD1抗体を使用したウェスタンブロットに付する(図3A、上および下パネル)。予想通り、アンドロゲンはMCF−7およびLNCaP細胞においてサイクリンD1発現を刺激する。濃度5μMのPI3−K阻害剤(LY294,002)およびSrc阻害剤(PP2)(非表示)はホルモン刺激サイクリン発現を阻害する。1nM SH3バインダーペプチド(配列番号1)(SH3)を添加するとR1881によるサイクリンD誘導も抑制されるが、ペプチド配列番号1のシャッフル配列(Ss)はこの効果を部分的に減少させるだけである。
エストロゲン刺激サイクリンD1発現に対するSH3バインダーペプチド(配列番号1)の効果を試験するため、このペプチドを10nM 17βエストラジオールで刺激したLNCaPおよびMCF−7細胞に添加する(図3B)。MCF−7およびLNCaP細胞はルーチンで上記の通りに増殖させる。次に、細胞は、上記の通りに補充され、ステロイド濃度を最小限にとどめるためにデキストラン被膜活性炭処理ウシ胎仔血清を添加したレッドフェノール無添加培地で少なくとも4日間維持する。次に、細胞を、10nM 17βエストラジオールだけで、またはPI−3K阻害剤のLY294,002(5μM)、もしくは1nMのSH3バインダーペプチド(配列番号1)、もしくは1nMのペプチド配列番号1のシャッフル配列(配列番号7)のいずれかの存在下で10nM 17βエストラジオールで6時間処理し(図3B、上および下パネル)、その後溶解し、上記のように抗サイクリンD1抗体を使用したウェスタンブロットに付する。アンドロゲンと同様に、17βエストラジオールはサイクリンD1発現を刺激する。PI3−K阻害剤のLY294,002は、この場合もホルモン刺激サイクリン発現を阻害する。1nMのSH3バインダーペプチド(配列番号1)(SH3)はエストロゲンによるサイクリンD誘導を完全に抑制するが、並べ替えペプチド配列番号1(Ss)はわずかな効果しかない。
ステロイド系レセプターは一般にリガンド活性化転写因子として知られている。したがって、SH3バインダー抗アンドロゲンペプチド効果がアンドロゲンレセプターの転写活性に関与するかどうかを評価することは重要である。LNCaP細胞を、フェノールレッド、2mM L−グルタミン(GIBCO社)、ペニシリン(100U/ml)、ゲンタマイシン(50μl/ml)、インスリンおよび10%ウシ胎仔血清を補充したRPMI 1640培地(GIBCO社)中、大気中5%CO2中で維持し、アンドロゲン応答性エレメント(ARE3416)の制御下のルシフェラーゼ遺伝子を含むpSG5発現ベクターに工学的に組み込まれたレポーター遺伝子でトランスフェクトする(Verrijdtら、2000年)。トランスフェクションの6時間後、培地を新しい培地と交換し、細胞は、10nM R1881の不在下で、あるいは10nM R1881だけの存在下で、または1000倍過剰量のCasodex、1nM SH3バインダーペプチド配列番号1、もしくは1nMの組換えたペプチド配列番号1(配列番号7)と10nM R1881の存在下でさらに24時間維持した。細胞ライセートのルシフェラーゼ活性を評価する。同一実験が繰り返して、ヒト乳癌細胞におけるエストロゲンレセプターの転写活性に対する抗アンドロゲンペプチド効果を分析する。MCF−7細胞を、フェノールレッド、2mM L−グルタミン(GIBCO社)、ペニシリン(100U/ml)、ゲンタマイシン(50μl/ml)、ヒドロコルチゾン(3.75ng/ml)、インスリン(0.2U.I./ml)および5%ウシ胎仔血清を補充したDMEM培地(GIBCO社)中、大気中5%CO2中で維持し、アンドロゲン応答性エレメント(ARE3416)の制御下のルシフェラーゼ遺伝子を含むpSG5発現ベクターにクローニングしたレポーター遺伝子QUALEでトランスフェクトする。最終的に、細胞ライセートのルシフェラーゼ活性を評価する。
インビトロおよびインビボ腫瘍増殖研究の結果は多岐にわたることがあるために、インビボでの抗アンドロゲンペプチドに対するLNCaPおよびMCF−7細胞の増殖応答性を試験した。LNCaP癌細胞を、上記のルーチン条件下で増殖させ、無菌PBS中50%(vol/vol)マトリゲル溶液(pH7.4)中に懸濁し、ホルモン刺激なしで2.5×106細胞/動物(CDマウス、Charles−River社)でオス胸腺欠損マウスの背側後方領域に皮下注射する。
上記の合成ペプチドおよび組換えペプチドは、動物またはヒトにおける免疫応答の発生に、およびこれらのエピトープに特異的な抗体の調製に使用できる。ワクチンおよび抗体の調製は、上記本明細書に記載するように、当業者には公知である。簡単に述べると、本発明の新規のペプチドは、以下のようにして動物における抗原として使用することができる:
各ペプチドはkeyhole limpet hemocyanin(KLH)に結合させ、BALB/cマウスを皮下免疫するのに使用してよい。最初の注射は250pgタンパク質を含み、マウスは7週間後にそれぞれのKLH結合ペプチド250μgで追加免疫し、次に、1週間後に採血する。注射されたマウスにより産生されるポリクロナール抗体について、ELISAアッセイでペプチド抗原を認識する能力を試験する。また、前記抗体について、AR誘導DNA合成を阻害する能力も評価する。
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Claims (14)
- 一般式:
X-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-Y(配列番号1)
によって示され、単離または精製または部分精製された状態のペプチド由来分子。
(式中、Xは、H又はアセチル基であり、Yは、OH基又はNH2基である。) - アンドロゲンレセプター(AR)とチロシンキナーゼSrcのSH3ドメインとの相互作用を阻害または阻止することができる、請求項1に記載のペプチド由来分子。
- インビトロまたはインビボで抗腫瘍活性を有する、請求項1または2に記載のペプチド由来分子。
- 配列番号1のアミノ酸配列からなり、かつ、Xはアセチル基であり、YはNH 2 基である、請求項1から3のいずれか1項に記載のペプチド由来分子。
- 薬物として使用するための、請求項1から4のいずれか1項に記載のペプチド由来分子。
- 抗腫瘍剤として使用するための、請求項1から4のいずれか1項に記載のペプチド由来分子。
- (i)抗乳癌剤もしくは抗前立腺癌剤として、および/または(ii)アンドロゲンレセプターを単独でもしくはエストラジオールレセプターとともに発現している他の癌に対して使用するための、請求項6に記載のペプチド由来分子。
- 請求項1から4のいずれか1項に記載のペプチド由来分子を医薬的に許容可能かつ有効な量で含む、癌治療用薬剤組成物。
- 前記癌が乳房細胞または前立腺細胞である、請求項8に記載の組成物。
- (i)前記ペプチドが、BSAもしくはKLHなどの担体分子に連結されていてもよく、かつ/または脂質粒子、ナノカプセル、リポソームもしくは脂質ベシクルなどの脂質組成物に医薬品賦形剤と共に含まれ、ならびに/あるいは(ii)少なくとも第2の抗癌剤をさらに含む、請求項8又は9に記載の組成物。
- 請求項1から4のいずれか1項に記載のペプチドをコードする核酸。
- 請求項1から4に記載のペプチドを発現する組換えベクター。
- 請求項11に記載の核酸もしくは請求項12に記載の組換えベクターを含む、哺乳動物、ヒトまたは細菌宿主細胞。
- 乳房細胞または前立腺細胞等の癌細胞を死滅させるインビトロでの方法であって、請求項1から4のいずれか1項に記載のペプチド由来分子を前記細胞に提供することを含む、方法。
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