JP4904498B2

JP4904498B2 - Ｒａｒ活性化を起こす天然化合物

Info

Publication number: JP4904498B2
Application number: JP2006511413A
Authority: JP
Inventors: 徹川西; 琢雄鈴木; 知子最上; 和秀井上; 堯夫早川; 義範浅川; 敏弘橋本
Original assignee: Japan Health Sciences Foundation
Current assignee: Japan Health Sciences Foundation
Priority date: 2004-03-29
Filing date: 2005-03-03
Publication date: 2012-03-28
Anticipated expiration: 2025-03-03
Also published as: JPWO2005092322A1; WO2005092322A1

Description

本発明は、レチノイン酸様の生理活性を有する化合物に関するものである。

技術背景

レチノイン酸（ビタミンＡ酸）はビタミンＡの活性代謝産物であり、発生途上にある未熟な細胞を特有な機能を有する成熟細胞へと分化させる作用や、細胞の増殖促進作用や生命維持作用などの極めて重要な生理作用を有している。また、これまでにレチノイン酸と同様な生理作用を有する種々のビタミンＡ誘導体が合成されている。レチノイン酸及びレチノイン酸様の生物活性を有する化合物はレチノイドと総称されている。

レチノイン酸は細胞核内に存在する核内レセプター・スーパーファミリー (Evans, R.M., Science, 240, pp.889-895, 1988) に属するレチノイン酸レセプター（RAR）にリガンドとして結合して、動物細胞の増殖・分化あるいは細胞死などを制御することが明らかにされている(Petkovich, M., et al., Nature, 330, pp.444-450, 1987)。レチノイン酸様の生物活性を有する化合物も、レチノイン酸と同様にRAR に結合して生理活性を発揮する。

レチノイドは、臨床的には、ビタミンＡ欠乏症、上皮組織の角化症、リウマチ、遅延型アレルギー、骨疾患、及び白血病やある種の癌の治療や予防に有用であることが見出されている。RARは3種のサブタイプよりなり、このうちRARβが細胞生育や癌（肺がん等）の抑制に関与しているという報告がなされている。これに対しRARαについては急性前骨随球性白血病における分化の促進、RARγに関してはニキビの治療等の効果が報告されている。実際、レチノイドは乾癬の内服治療薬や前骨髄球性白血病の内服治療薬として認可されている。また、海外では乾癬や白血病に加えて、にきびや老化した皮膚を対象としても数種類の薬剤が認可使用されている。またそのガン細胞に対する分化誘導作用に期待して海外では数々の合成レチノイドの開発や臨床治験が進められている。数種の合成レチノイドが乾癬や悪性腫瘍の治療薬として臨床治験中である。

しかしながら、これらのレチノイドは多様な生物活性を有しているがゆえに、副作用（例えばトリグリセリドの上昇、皮膚の炎症等）の観点からは必ずしも満足すべき医薬とはいえない。従って、特徴的な作用を有するレチノイドやその制御分子の創製が切望されていた。例えば抗ガン作用に注目した場合、 3種類のRARサブタイプの内RARβに結合性の高い化合物が治療のためにより有効であると期待される。

本発明の課題は、レチノイン酸様の生物活性を有する新規な化合物を提供することにあり、より具体的にいうと、従来のレチノイドとは異なる新規な骨格を有する化合物であって、特徴的なレチノイン酸様活性を有する化合物を提供することが本発明の目的である。

本発明者は上記の課題を解決すべく鋭意努力した結果、カフェ酸誘導体がRARの活性を上昇させる働きを有することを見いだし、本発明の完成に至った。

すなわち本発明は下記一般式（１）に示した化合物を新規レチノイドとして提供するものである。

式中、Ｒは同一又は異なって水素原子、アシル基、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基及びアリール基から選ばれる官能基を示し、Ｘはベンジル基、フェニルエチル基、フェニルプロピル基等のアルキルフェニル基、及び２，２-ジメチルアリル基、ゲラニル基、ファルネシル基、ゲラニルゲラニル基、フィチル基等のプレニル基を示す。なお本発明の化合物にはナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等の薬学的に許容される塩も含まれる。

各被験化合物のRAR活性化効果を示したレポータージーンアッセイの結果を示す。

本発明の化合物はレチノイド様の生物作用、例えば、細胞分化作用、細胞増殖促進作用、及び生命維持作用などを有しており、ビタミンＡ欠乏症、上皮組織の角化症、乾癬、アレルギー疾患、リウマチなどの免疫性疾患、骨疾患、白血病、又は癌の予防・治療のための医薬の有効成分として用いることができる。本発明の化合物からなる医薬は、それ自体を投与してもよいが、好ましくは、当業者に周知の方法によって製造可能な経口用あるいは非経口用の剤形として投与することが好ましい。経口投与に適する剤形としては、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、及びシロップ剤等を挙げることができ、非経口投与に適する剤形としては、例えば、注射剤、坐剤、吸入剤、点眼剤、点鼻剤、軟膏剤、クリーム剤、及び貼付剤等を挙げることができる。

上記の剤形は、薬理学的、製剤学的に許容しうる添加物を加えて製造することができる。薬理学的、製剤学的に許容しうる添加物の例としては、例えば、賦形剤、崩壊剤ないし崩壊補助剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、色素、希釈剤、基剤、溶解剤ないし溶解補助剤、等張化剤、pH調節剤、安定化剤、噴射剤、及び粘着剤等を挙げることができる。また、本発明の化合物の投与量は、通常１〜５０mg/体重kgであり、好ましくは５〜２０mg/体重kgである。投与対象は、哺乳動物であり、通常ヒトである。

(実施例)レポータージーンアッセイによるRAR活性化化合物の評価
RAR結合配列(RARE)下にCMV promoterの3'側201 bpとenhanced yellow fluorescent protein (EYFP)遺伝子をつないだプラスミド(レポータープラスミド)とSV40 promoter下にenhanced cyan fluorescent protein (ECFP)遺伝子をつないだプラスミド(内部標準測定用プラスミド)、核内受容体発現用プラスミドとしてRXR遺伝子を有するプラスミド及びRAR遺伝子を有するプラスミドの4種をCOS7細胞に導入した。なお、RARそれぞれのサブタイプに対する活性化能の差を確認するためにRARとしてはRARα、RARβ、RARγそれぞれのサブタイプを発現するプラスミドを用意した。

上記プラスミドを導入した細胞の培養液中に被験化合物を添加し、約40時間後に培地を除きPBSでwashした後EYFPとECFPの蛍光を測定した。細胞内へのプラスミドの導入効率等の補正を行うために、内部標準として測定したECFPの蛍光値でEYFPの蛍光値の補正を行った。すなわちFXRの転写活性は(EYFPの蛍光値) / (ECFPの蛍光値)の値により評価を行った。

一般式(１)で示される化合物の内、下記化合物Caffeic acid phenethyl ester (式（２）の化合物)30 μM、及び下記化合物Geranyl caffeate (式（３）の化合物) 30μM、Farnesyl caffeate (式（４）の化合物) 10μMを添加した結果を図に示した。縦軸にコントロールであるDMSO 0.1%を添加した場合と比較したEYFP/ECFP値の変動の率を示した。これら化合物はRARの活性化を引き起こすことが明らかとなった。なおcaffeic acid phenethyl esterについてはRARベータの活性化能の選択性が他のサブタイプにおける選択性より強く、実用化への期待が大きいことが明らかとなった。

上記化合物は、RARの転写活性の促進を行う。これらは既知のレチノイドとは異なる構造をもち、より副作用が少ない治療薬となる可能性がある。特に式(１)中RがH、XがフェニルエチルであるCaffeic acid phenethyl ester（式 (２)の化合物）はRARβに対する活性化効果が高く悪性腫瘍（肺がん等）の治療薬として期待される。

Claims

下記の式（３）又は（４）の化合物を有効成分として含有するレチノイド作用剤。
下記の式（２）〜（４）のいずれかの化合物を有効成分として含有する、ビタミンＡ欠乏症、又は骨疾患の予防・治療のための医薬剤。
下記の式（２）〜（４）のいずれかの化合物を有効成分として含有する、上皮組織の角化症、又は乾癬の予防・治療のための医薬剤。