JP4895219B2

JP4895219B2 - Ｒｏｃｋ阻害剤を含有する疼痛治療剤

Info

Publication number: JP4895219B2
Application number: JP2007503701A
Authority: JP
Inventors: 暢昭竹下
Original assignee: Astellas Pharma Inc
Current assignee: Astellas Pharma Inc
Priority date: 2005-02-16
Filing date: 2006-02-16
Publication date: 2012-03-14
Anticipated expiration: 2026-02-16
Also published as: EP1854484A4; US20100216778A1; WO2006088088A1; JPWO2006088088A1; EP1854484A1; US20090029970A1

Description

本発明は、ＲＯＣＫ阻害剤を使用する疼痛の治療に関するものである。

疼痛は、実在または潜在性の組織損傷を反映する自覚的な複合感覚、およびそれに対する情緒的反応であり、多種多様である。また、疼痛は体性と心因性に大別され、前者はさらに侵害受容性疼痛、神経障害性疼痛に分類される。侵害受容性疼痛は外的刺激による痛みや内臓性の病態によって生じる痛みである。侵害受容性疼痛の多くは、基礎疾患が治癒すれば消失する急性のもので、障害による生物学的信号としての役割を果たしている。神経障害性疼痛は、末梢神経あるいは中枢神経における神経系の機能不全による慢性的な痛みで、糖尿病に起因するものや、神経圧迫、脊髄損傷などがこれにあたる。心因性疼痛は、身体的障害というよりむしろ精神的障害による器質的に説明がつかない慢性的な痛みで、慢性頭痛、原因不明の腹痛などがこれにあたる。慢性疼痛は患者の苦痛も大きく治療の対象となる。特に関節炎や糖尿病、癌などに伴う慢性疼痛では、基礎疾患の治療に加えて疼痛に対する治療も求められているが、既存の鎮痛剤は薬効、安全性の面で充足されていない。

軟骨組織は、軟骨細胞および軟骨基質から構成される組織であり、骨とともに骨格系を形成する。軟骨組織の変形や損傷に関連する疾患として、変形性関節症、変形性脊椎症、慢性関節リウマチなどの多くの疾患が知られている。変形性関節症は、関節軟骨が慢性的に磨耗または欠損し、関節の形態が変形する疾患である。変形性関節症には、一次性および二次性の２種の変形性関節症があり、筋肉の退行、肥満、力学的ストレスなどの要因に起因するものを一次性変形性関節症、外傷、疾患など明確な要因に起因するものを二次性変形性関節症という。慢性関節リウマチは、原因不明の慢性関節炎を特徴とする疾患であり、関節滑膜に炎症が生じ、進行すると、軟骨、骨の破壊や関節の変形を生じる疾患である。

関節軟骨は、主にコラーゲン、プロテオグリカン、軟骨細胞、水から構成され、軟骨細胞が、コラーゲンおよびプロテオグリカンを産生し、これらが、軟骨マトリクスを構成する。関節軟骨には、血管、リンパ管、神経がなく、滑膜から分泌される関節液から栄養を受けている。軟骨は損傷すると修復されにくく、特に関節表層を覆う硝子軟骨が一旦損傷されると元の完全な形態に修復され難い。これらの病態が進行した場合には、関節形成術、関節置換術などの外科的処置が必要となり、これらは、患者に過度の負担を強いるものである。

軟骨組織の損傷が修復され難く、外科的処置も永久ではなく感染の懸念もあることから、近年では、軟骨組織の変形や破壊を伴う軟骨関連疾患を治療する方法として、軟骨組織の再生が着目されている。これまで、軟骨組織の再生については、ＴＧＦ−β、ＢＭＰ−２、コンカナバリンＡなどの高分子タンパク質を利用した研究が進められているが、現在、臨床で使用されているものはない。

ＲＯＣＫ（Rho kinase）とは、低分子量ＧＴＰ結合タンパク質の１つであるＲｈｏの下流で働くセリン／スレオニンキナーゼであり、本酵素は、細胞運動、細胞骨格制御、血管収縮、炎症など様々な生理機能への関与が示唆されている。ＲＯＣＫ阻害剤の骨・軟骨細胞に対する作用として、Ｙ２７６３２が骨形成タンパク質（ＢＭＰ）による骨形成作用を増強するということ（例えば、特許文献１および特許文献２）、および、Ｙ２７６３２がインビトロにて軟骨前駆細胞の軟骨細胞への分化を誘導すること（例えば、非特許文献１）が報告されているが、インビボ軟骨病変疾患モデル（変形性関節症、慢性関節リウマチ）や臨床におけるＲＯＣＫ阻害剤の有効性・治療効果については全く報告はない。

また、ＲＯＣＫ阻害剤の鎮痛に関する報告としては、Ｙ２７６３２が種々の刺激によって誘発される痛覚過敏に関与していることを示したもの（例えば、特許文献３および非特許文献２）、Ｈ１１５２が侵害性刺激による疼痛、神経因性疼痛に関与していることを示したもの（非特許文献３）があるが、臨床及びインビボの慢性リウマチモデルや変形性関節症モデルに於いて、発症後投与で疼痛に対する有効性を示した報告はない。

国際公開第００／７８３５１号パンフレット国際公開第０１／１７５６２号パンフレット国際公開第０１／２２９９７号パンフレットワンら、「ローエー/ロックシグナリングサプレッシズハイパートロフィックコンドロサイトディファレンシエーション」、ジャーナルオブバイオロジカルケミストリー、２００４、２７９、p. １３２０５−１３２１４、（G. Wang et al，「RhoA/ROCK Signaling Suppresses Hypertrophic Chondrocyte Differentiation」、The Journal of Biological Chemistry」、2004, 279, p. 13205-13214）イノウエら、「イニシエーションオブニューロパティックペインリクワイアズライソフォスファチジックアシッドレセプターシグナリング」、ネーチャーメディスン、２００４、１０、p. ７１２−７１８、（Inoue et al，「Initiation of neuropathic pain requires lysophosphatidic acid receptor signaling」、Nature Medicine，2004, 10, p. 712-718）タツミら、「インボルブメントオブローキナーゼインインフラメートリーアンドニューロパティックペインスルーフォスフォリレーションオブミリストイレイティッドアラニン-リッチｃ−キナーゼサブストレート（マルクス）」、ニューロサイエンス、２００５、１３１、p. ４９１−４９８、（Tatsumi et al, 「Involvement of Rho-kinase in Inflammatory and Neuropathic Pain through Phosphorylation of Myristoylated Alanine-Rich C-Kinase Substrate (Marcks)」, Neuroscience, 2005, 131, p. 491-498）

現在、軟骨関連疾患に対する治療薬としては、メトトレキサート、金剤、Ｄ−ペニシラミンなどが病態進行抑制薬として、ステロイド剤、NSAIDs、Cox-2阻害剤等が消炎鎮痛薬として使用されている。また、近年、リウマチ治療に於いては、抗TNF抗体が鎮痛作用と病態進行を併せ持つ作用を示し注目されている。

しかし、何れも、治療効果は限定的であり、長期使用による副作用も懸念されている。特に変形性関節症は強い炎症を伴わないにもかかわらず慢性的に疼痛が続くことから患者の負担は大きい。疼痛治療薬としては、主として非ステロイド性消炎鎮痛薬が使用されているが、奏功しない患者も多く、その効果は不十分であり、また消化管障害や心血管リスクなどの副作用も問題となっていることから、有効性が高く副作用の軽減された疼痛治療薬の創製が望まれている。また、軟骨の破壊を抑制または、軟骨再生を促進し、病態進行を抑制する薬剤の創製も強く求められている。

本発明者らは、前記課題を解決すべくＲＯＣＫ阻害剤について種々の試験を行った結果、ＲＯＣＫ阻害剤がラットを用いた種々の疼痛モデルにおいて、病態発症後の単回投与にて強力な鎮痛作用を有すること（実施例１および実施例２）、さらには、変形性関節症、慢性関節リウマチなどの、軟骨損傷、軟骨形成異常または軟骨細胞障害が著しく激しい疾患群において局所的に軟骨組織を再生または軟骨破壊を抑制すること（実施例３）を見出した。また、この鎮痛効果について詳細に検討した結果、構造の異なる種々のＲＯＣＫ阻害剤が軟骨保護作用を伴うことなく変形性関節症および慢性関節リウマチの疼痛を軽減するという新たな知見を見出し、本発明を完成した。

具体的には、本発明は、以下を提供する。

すなわち本発明は、１つの局面において、疼痛を有する患者の治療または軟骨関連疾患を有する患者の治療をするＲＯＣＫ阻害剤を含有する治療剤を提供する。

１つの実施形態において、前記疾患に基づく疼痛が軽減される。

１つの実施形態において、前記軟骨関連疾患の軟骨組織が再生または破壊が抑制される。

１つの実施形態において、前記軟骨関連疾患が、変形性関節症である。

１つの実施形態において、前記ＲＯＣＫ阻害剤が、（＋）−（Ｒ）−トランス−４−（１−アミノエチル）−Ｎ−（４−ピリジル）シクロヘキサンカルボキサミド、４[（１Ｒ）−１−アミノエチル]−Ｎ−（４−ピリジル）ベンズアミド、２−[４−（１Ｈ−インダゾール−５−イル）フェニル]−２−プロパンアミン、Ｎ−（３−メトキシベンジル）−４−(４−ピリジル)ベンズアミド、４−[（トランス−４−アミノシクロヘキシル）アミノ]−２，５−ジフルオロベンズアミド、４−[（トランス−４−アミノシクロヘキシル）アミノ]−５−クロロ−２−フルオロベンズアミドおよび５−(ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン−1−イルスルフォニル)イソキノリンからなる群より選ばれる化合物および/またはそれらの製薬上許容されうる酸付加塩である。

また、別の局面において、疼痛を有する患者または軟骨関連疾患を有する患者を処置するための方法を提供し、該方法は、該疾患を有する患者に治療有効量のＲＯＣＫ阻害剤を投与して疼痛を軽減する。

また、別の局面において、疼痛を有する患者を処置するための、または軟骨関連疾患を有する患者を処置するための医薬の製造におけるＲＯＣＫ阻害剤の使用を提供し、該医薬は、該疾患を有する患者において疼痛を軽減するための有効量のＲＯＣＫ阻害剤を含有する。

１つの実施形態において、前記軟骨関連疾患の軟骨組織を再生または破壊が抑制される。

尚、臨床の場で用いられる鎮痛剤は、患者が既に疼痛を訴えていることから、発症している痛みに対して速やかな効果を発揮することが期待される。本発明においてＲＯＣＫ阻害剤の即効的な鎮痛作用を鋭意検討した結果、非ステロイド性消炎鎮痛剤（NSAIDS）が無効である変形性関節症モデルの疼痛に対して、単回投与で効果を見出したことは予想外の発見である。変形性関節症においてはNSAIDSが奏効しない患者が存在する。本発明の証明に用いたラットＭＩＡ誘発変形性関節症モデルにおいては、NSAIDS(ジクロフェナク)が病態初期には有効であるが、膝関節軟骨障害が成立した後では無効であることから、本モデルは臨床症状を良く反映した評価系といえる（J. Vet. Med. Sci., 65,1195-1199(2003), Neuroscience lett., 370,236-240(2005)）。我々は、ＲＯＣＫ阻害剤が、意外にも、本モデルに於いて病態成立後の単回投与でも有効であることを見出した。このときNSAIDS（ジクロフェナク）は無効であった。

さらに、本発明者らはＲＯＣＫ阻害剤の重度の軟骨損傷に対する作用を検討した結果、損傷領域において軟骨組織を再生または破壊抑制し、かつ疼痛を軽減するという予想外の効果を見出した。

本発明は、軟骨損傷領域における疼痛軽減効果、さらには、軟骨組織の再生または破壊抑制に基づき、軟骨関連疾患を処置するために有用である。ＲＯＣＫ阻害剤は、NSAIDSが奏効しないラットＭＩＡ誘発変形性関節症モデルにおいて、病態成立後の単回投与で有効性を示したこと、および、複数回投与で軟骨障害を軽減したことより、変形性関節症治療剤としての有用性は高い。

以下に、本発明について詳述する。

本明細書中に使用される、「ＲＯＣＫ」とは、Ｒｈｏの下流で働くセリン／スレオニンキナーゼをいい、現在までに、ＲｈｏＡに作用するＲＯＣＫＩ（ＲＯＫβまたはｐ１６０ＲＯＣＫとも呼ばれる）およびＲＯＣＫＩＩ（ＲＯＫαまたはＲｈｏキナーゼとも呼ばれる）が同定されている（Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．,４，４４６−４５６（２００３））。本発明において使用される「ＲＯＣＫ阻害剤」は、これらの両方またはいずれかのＲＯＣＫを阻害する化合物であり、特に限定されず、例えば、国際公開第９８／０６４３３号パンフレット、国際公開第００／７８３５１号パンフレット、国際公開第０１／１７５６２号パンフレット、国際公開第０２／０７６９７６号パンフレット、国際公開第０２／０７６９７７号パンフレット、国際公開第０３／０８２８０８号パンフレット、国際公開第０５／０３５５０６号パンフレット、国際公開第０５／０７４６４３号パンフレット等に記載のものが挙げられる。好ましくは、本発明において使用されるＲＯＣＫ阻害剤は、Ｙ２７６３２；（＋）−（Ｒ）−トランス−４−（１−アミノエチル）−Ｎ−（４−ピリジル）シクロヘキサンカルボキサミドジヒドロクロリド、または、Ｗｆ５３６；４−[（１Ｒ）−１−アミノエチル]−Ｎ−（４−ピリジル）ベンズアミドモノヒドロクロリド、または、Ｆａｓｕｄｉｌ；５−(ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−ジアゼピン−1−イルスルフォニル)イソキノリンヒドロクロリド、または、化合物１；４−[（トランス−４−アミノシクロヘキシル）アミノ]−２，５−ジフルオロベンズアミド、または、化合物２；４−[（トランス−４−アミノシクロヘキシル）アミノ]−５−クロロ−２−フルオロベンズアミド、または、化合物３；２−[４−（１Ｈ−インダゾール−５−イル）フェニル]−２−プロパンアミンジヒドロクロリド、または、化合物４；Ｎ−（３−メトキシベンジル）−４−(４−ピリジル)ベンズアミドである。

上記の化合物は、必要に応じて、医薬として許容される無機酸または有機酸との酸付加塩とすることができる。そのような酸付加塩としては、たとえば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸などの鉱酸との塩；ギ酸、酢酸、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、アスパラギン酸、グルタミン酸などの有機カルボン酸との塩；メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ヒドロキシベンゼンスルホン酸、ジヒドロキシベンゼンスルホン酸などのスルホン酸との塩等が挙げられる。
また、化合物およびそれらの酸付加塩は、それらの無水物、水和物または溶媒和物であってもよい。

本発明を使用して処置され得る「軟骨関連疾患」としては、軟骨損傷、軟骨形成の異常および／または軟骨細胞の障害を有する、任意の軟骨関連疾患（例えば、変形性関節症、慢性関節リウマチ）が挙げられ、特に、変形性関節症が本発明の方法によって効果的に処置され得る。

本発明の方法において使用されるＲＯＣＫ阻害剤の投与経路としては、経口投与、関節内投与、皮下投与、静脈内投与、鼻内投与、経皮投与、またはこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

本発明のＲＯＣＫ阻害剤を薬学的組成物として使用する場合、これを処方調剤の一部として利用することも望ましい。このような薬学的組成物は、少なくとも１つ、あるいはいくつかの適当な、有機または無機の担体または賦形剤、あるいは他の薬理学的な治療剤との混合物として含有し、例えば、固体、半固体または液体の形の医薬製剤の形態で使用でき、有効成分は、例えば、製薬上通常の無毒性担体と混合して、顆粒剤、錠剤、ペレット剤、トローチ剤、カプセル剤、坐剤、クリーム剤、軟膏剤、エアゾール剤、吹入用粉剤、注射用液剤、乳剤、または懸濁剤等の液体形態；経口摂取剤；点眼剤；その他の使用に適した任意の形態とすることができる。そして、必要ならば、安定剤、増粘剤、湿潤剤、硬化剤、着色剤等の補助剤；香料または緩衝剤；その他任意の常用添加剤を上記製剤に添加できる。

軟骨関連疾患を処置するために投与される本発明のＲＯＣＫ阻害剤の有効量は、その患者の年齢および状態によって異なり、その治療剤が投与される処方のタイプおよびその投与形式、疾患の段階または投与間隔にも依存するが、通常、１日について、約０．０００１〜１０００ｍｇの用量、好ましくは０．００１〜５００ｍｇの用量、さらに好ましくは０．０１〜１００ｍｇの用量の範囲で投与される。しかし、投与量は、種々の条件を考慮し、必要に応じて、上記範囲よりもより少量またはより多量に変更され得る。

以下に、本発明をより詳細に説明するために実施例として、インビボラット疾患モデルに対するアッセイを記載するが、本発明はこれらの実施例によって限定されない。

（実施例１）
（モノヨードアセテート（ＭＩＡ）誘発変形性関節症モデルにおけるＲＯＣＫ阻害剤の治療効果−後肢荷重評価による鎮痛試験）
本疾患モデルの作製は、ＴｏｘｉｃｏｌＰａｔｈｏｌ３１（６），６１９−６２４（２００３）の記載に基づいて行った。雌性ＳＤラット（６−７週齢、日本チャールズリバー）を、ハロセン（武田薬品）で麻酔し、右膝の膝蓋下靭帯を介して、１ｍｇのヨード酢酸一ナトリウム（ＭＩＡ；Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）を関節腔内に単回注射した。ＭＩＡは、生理食塩水に溶解し、２７ゲージの０．５インチ針を用いて５０μｌの用量で投与した。ＭＩＡ投与の３週間後（変形性関節症の病態が成立後）にＲＯＣＫ阻害剤またはジクロフェナクを単回経口投与し、２時間後のラット左右後肢荷重をインキャパシタンステスター(ＬｉｎｔｏｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ，Ｎｏｒｆｏｒｋ，ＵＫ)を用いて測定しED₅₀値（表１）を得た。なお、ＭＩＡを投与することにより、ラット後肢左右荷重差は平均約40gであった。

（実施例２）
（ブラジキニン誘発関節痛モデルに対するＲＯＣＫ阻害剤の疼痛軽減効果）
本疾患モデルの作製および疼痛の評価を、Ｆｏｌｉａｐｈａｒｍａｃｏｌ．ｊａｐｏｎ．９２，１７−２７（１９８８）の記載に基づいて行った。雌性ＳＤラット（６−７週齢、日本チャールズリバー）を、ハロセン（武田薬品）で麻酔し、後肢膝関節腔内にＷｆ５３６または化合物２の生理食塩水溶液を、２７ゲージの０．５インチ針を用いて、０．０３μｇ／部位、０．３μｇ／部位および３μｇ／部位で単回注射した。薬剤投与３０分後に、ブラジキニンの生理食塩水溶液（３μＭ／部位／５０μｌ）を後肢膝関節腔内に注射し、ブラジキニン投与後の痛みの反応を観察した。疼痛の程度は、以下のように、０〜４の５段階で評点化した。評点０：跛行なし〜１０秒以内；評点１：跛行１０〜３０秒以内；評点２：１０秒以内に足を上げるか、または、跛行３１秒以上、評点３：１０秒以内に三足歩行、その後跛行；評点４：１０秒以上の三足歩行、その後跛行。実験は各群１０匹程度で行った。ブラジキニン注射により評点３程度の痛みの反応が確認された。Ｗｆ５３６投与によりブラジキニンによる痛みの反応は用量依存的に改善され、特に３μｇ／部位の投与では評点２．６から１．２に減少し有意に改善された。また、化合物２を０．３μｇ／部位に投与した時には、評点２．６から１．１に減少し有意に改善された。

（実施例３）
（モノヨードアセテート（ＭＩＡ）誘発変形性関節症モデルにおけるＲＯＣＫ阻害剤の治療効果）
本疾患モデルの作製は、ＴｏｘｉｃｏｌＰａｔｈｏｌ３１（６），６１９−６２４（２００３）の記載に基づいて行った。雌性ＳＤラット（６−７週齢、日本チャールズリバー）を、ハロセン（武田薬品）で麻酔し、右膝の膝蓋下靭帯を介して、１ｍｇのヨード酢酸一ナトリウム（ＭＩＡ；Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）を関節腔内に単回注射した。ＭＩＡは、生理食塩水に溶解し、２７ゲージの０．５インチ針を用いて５０μｌの用量で投与した。投与の３週間後に、脛骨を摘出し、脛骨遠位端の形態変化を評点付け（０〜４；図１）した。実験は各群８匹程度で行った。ＭＩＡ注射により３週間後、評点３程度の軟骨損傷が確認された。Ｗｆ５３６または化合物２をＭＩＡ投与当日から週2回（２〜3日ごと）０．０３μｇ／部位、０．３μｇ／部位および３μｇ／部位の濃度で関節内に注射した。Ｗｆ５３６投与により３週間後、ＭＩＡによる軟骨損傷は用量依存的に改善され、特に３μｇ／部位の投与で評点は３から２．２に減少し有意に改善された。また、化合物２を０．３μｇ／部位に投与した時は、評点３から２．３に減少し有意に改善された。

図１は、ＭＩＡ誘発変形性関節症モデルにおける脛骨遠位端の形態変化の評点付け（０〜４）を示す。０：損傷なし；１：軟骨表面の損傷；２：軟骨分解；３：軟骨分解および軟骨下骨の損傷；４：軟骨分解、軟骨下骨の損傷および骨棘の形成。

Claims

変形性関節症に基づく疼痛を有する患者の治療剤であって、該疾患を有する患者において疼痛を軽減するための有効量のＲＯＣＫ阻害剤を含有し、前記ＲＯＣＫ阻害剤が、４[（１Ｒ）−１−アミノエチル]−Ｎ−（４−ピリジル）ベンズアミドまたは４−[（トランス−４−アミノシクロヘキシル）アミノ]−５−クロロ−２−フルオロベンズアミドからなる群より選ばれる化合物および/またはそれらの製薬上許容されうる酸付加塩である、治療剤。
変形性関節症の治療剤であって、該疾患を有する患者において軟骨組織を再生または破壊を抑制するための有効量のＲＯＣＫ阻害剤を含有し、前記ＲＯＣＫ阻害剤が、４[（１Ｒ）−１−アミノエチル]−Ｎ−（４−ピリジル）ベンズアミドまたは４−[（トランス−４−アミノシクロヘキシル）アミノ]−５−クロロ−２−フルオロベンズアミドからなる群より選ばれる化合物および/またはそれらの製薬上許容されうる酸付加塩である、治療剤。
変形性関節症に基づく疼痛を処置するための医薬の製造におけるＲＯＣＫ阻害剤の使用であって、該医薬は、該疾患を有する患者において疼痛を軽減するための有効量のＲＯＣＫ阻害剤を含有する、前記ＲＯＣＫ阻害剤が、４[（１Ｒ）−１−アミノエチル]−Ｎ−（４−ピリジル）ベンズアミドまたは４−[（トランス−４−アミノシクロヘキシル）アミノ]−５−クロロ−２−フルオロベンズアミドからなる群より選ばれる化合物および/またはそれらの製薬上許容されうる酸付加塩である、使用。
変形性関節症を処置するための医薬の製造におけるＲＯＣＫ阻害剤の使用であって、該医薬は、該疾患を有する患者において軟骨組織を再生または破壊を抑制するための有効量のＲＯＣＫ阻害剤を含有する、前記ＲＯＣＫ阻害剤が、４[（１Ｒ）−１−アミノエチル]−Ｎ−（４−ピリジル）ベンズアミドまたは４−[（トランス−４−アミノシクロヘキシル）アミノ]−５−クロロ−２−フルオロベンズアミドからなる群より選ばれる化合物および/またはそれらの製薬上許容されうる酸付加塩である、使用。