JP2018501314A

JP2018501314A - ジアリールメチリデンピペリジン誘導体およびデルタオピオイド受容体アゴニストとしてそれらの使用

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Publication number: JP2018501314A
Application number: JP2017551989A
Authority: JP
Inventors: メンチャー，ベングトフォン; スターク，インゲマール; ブラント，ピーター
Original assignee: ファームノヴォエービー
Priority date: 2014-12-19
Filing date: 2015-12-17
Publication date: 2018-01-18
Anticipated expiration: 2035-12-17
Also published as: DK3233825T3; ES2808667T3; PL3233825T3; WO2016099393A1; EP3233825A1; HUE050241T2; AU2015363757A1; SI3233825T1; EP3233825B1; CN107531670A; RS60744B1; JP6691135B2; AU2015363757B2; US10118921B2; US20170327491A1; PT3233825T; LT3233825T; HRP20201050T1; CA2970256A1; CN107531670B

Abstract

疼痛治療において用いられる式Iの化合物および前記化合物を含む医薬組成物が提供される。【選択図】なし

Description

本発明は、新規化合物、それらの調製方法、それらの使用、および新規化合物を含む医薬組成物に関する。新規の選択的δ−オピオイド受容体アゴニストは、治療、特に疼痛、不安およびうつ病の治療に有用である。

デルタオピオイド受容体（ＤＯＲ）は、疼痛状態、うつ病および不安障害を緩和する可能性のある対象と考えられている。物理的な疼痛は、有害な刺激または身体的害という不快な感覚と評されうる典型的な知覚経験である。人は様々な日常的な傷や疼痛を経験し、さらに重大な傷害や病気を経験することもある。科学的および臨床的目的のために、疼痛は「国際疼痛学会（ＩＡＳＰ）」によって「実際のまたは潜在的な組織損傷に関連する、またはそのような損傷という言葉で表現される不快な感覚的および感情的な経験」として定義される。

疼痛は医師の診察を受ける一般的な理由である。これは、多くの病状において重大な症状であり、人の生活の質および一般的な機能を著しく阻害する。診断は、期間、強度、タイプ（鈍い疼痛、燃えるような疼痛、動悸がするような疼痛、刺すような疼痛）、原因、身体の場所に応じて、さまざまな方法で疼痛を特徴づけることに基づいている。通常、休息をとるまたは鎮痛薬を服用するといった単純な処置または対応策を取らなくても疼痛は止まり、これは「急性」疼痛と呼ばれる。しかし、疼痛が手に負えなくなり、慢性疼痛と呼ばれる状態、すなわち疼痛がもはや徴候ではなく病気そのものとみなされる状態に発展することもある。

疼痛は、患者が医学的なアドバイスおよび治療を求める最も一般的な症状である。疼痛は急性または慢性であり得る。急性疼痛は通常自然に治まるが、慢性疼痛は３ヶ月以上持続し、患者の性格、生活習慣、機能的能力または全体的な生活の質に著しい変化をもたらす（ＫＭＦｏｌｅｙ、Ｐａｉn、ＣｅｃiｌＴｅｘｔｂｏｏｋｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ１００−１０７、Ｊ．Ｃ．ＢｅｎｎｅｔｔａｎｄＦ．Ｐｌｕｍｅｄｓ．，２０ｔｈｅｄ．１９９６）。

現在の鎮痛療法は貧弱な効果しかなく、特に慢性疼痛に関しては、重大な副作用を伴う。

慢性的な疼痛の影響は、軽度の不快感から、想像し得る最悪の疼痛まで様々で、患者およびその家族に甚大な結果をもたらす。疼痛の種類は多様であり、腰痛、関節炎（特に変形性関節症）、頭痛（片頭痛を含む）、線維筋痛症、神経損傷（神経障害）、神経疾患（例えば、多発性硬化症）、およびウイルス性疾患（例えば、帯状疱疹）を含む。

アルツハイマ−病およびパ−キンソン病などの他のＣＮＳ関連疾患は、関連する疼痛の罹患率が高い。慢性疼痛の発生率は、進行するにつれて増加し、うつ病および睡眠の喪失と関連し、潜在的に増加する可能性がある。

ＤＯＲは、疼痛の他にも、うつ病、不安、てんかんおよびストレスなどの中枢神経系障害、下痢、術後イレウス、潰瘍および過敏性腸症候群などの胃腸障害、変形性関節症などの関連炎症性障害、および呼吸器症、アルコ−ル依存症および肥満／過食を含む他の症候群において多様に役割を果たしている。

オピオイド受容体（δ）、（μ）および（κ）という少なくとも３つの異なる集団を同定することは、現在十分に確立されており、この３つはすべて、ヒトを含む多くの種の中枢および末梢神経系の両方において明らかである。

１６カ国の４万５０００人以上の人々を対象とした最近の調査によれば、欧州人口のほぼ５分の１が６か月以上持続する中程度または重度の疼痛を患っていることが明らかになった。したがって、慢性的な疼痛は、国家経済と患者の生活の質に大きな負担をかける。様々な慢性疼痛の段階の数を考えると、患者集団は著しく変化するが、神経障害および関節痛が特に顕著である高年齢層に偏っている可能性が非常に高い。たとえば、治療を開始した高齢者の患者においては、最大８０％が現在の疼痛の問題を報告しているが、大部分は不十分な鎮痛療法を受けている。したがって、副作用のリスクが低い長期間有効な新規疼痛治療が緊急に必要とされている。

コデイン、ジヒドロコデイン（軽度から中程度の疼痛向け）、オキシコドン、トラマドール（重度の疼痛向け）などの一般的に使用されているオピオイドは、非選択的であり、３つのオピオイド受容体サブタイプすべてに作用するか、または幾分μ受容体に偏って作用し、有益な効果と望ましくない効果の両方を幅広く生み出す。

ＣＮＳおよび末梢組織においてオピオイド受容体サブタイプが広範に分布していることで、混合オピオイドリガンドによって生成される吐き気、便秘、かゆみおよび生命を脅かす呼吸抑制の副作用がもたらされる。耐性が発達することで、臨床効果はさらに制限される。

耐性の発達が臨床効果をさらに制限する。慢性疼痛状態における従来のオピオイドおよび他の一般的に使用される鎮痛薬の臨床効果に関するメタ分析に由来するエビデンスは弱いか、または否定的である。すなわち、アミトリプチリン（神経因性疼痛の第一次鎮痛薬）は４０％未満の患者に有効であり、ガバペンチンで治療された患者の約３分の１しか効果的に疼痛を軽減できない。また、現在利用可能な電位活性化型のナトリウムチャネル遮断薬は、有効性が非常に限定され、重大なCＮSおよび心臓毒性リスクを有する。

この共通性によって、δ−オピオイド受容体（ＤＯＲ）のような個々の対象の活性を修正することが疼痛治療において利益をもたらすという可能性が出てくる。

本発明の化合物は、ＤＯＲに対して選択的な高い効力を示す。本発明の化合物は、広範な治療ウインドウを提供し、中程度の鎮痛効果しか提供しない鎮痛薬とは対照的に、呼吸抑制および便秘を含む望ましくない効果が出るリスクを抑えながら、疼痛状態において持続的な鎮痛効果を生み出す可能性を有する。

本発明の化合物は臨床医の治療選択肢を大幅に拡大し、膨大な数の患者の生活の質を向上させる。

本発明は、式（Ｉ）の化合物

またはその薬学的に許容される塩を提供し、
式中、
Ｒは

のいずれかから選択される。

本発明の態様によれば、式（Ｉ）の化合物は以下である。

本発明の別の態様によれば、式（Ｉ）の化合物は以下である。

本発明のある態様によれば、式（Ｉ）の化合物は、急性疼痛および慢性疼痛の処置などの疼痛治療に使用される。

本発明の化合物は非常に強力であり、反復投与で鎮痛効力を保持する。本発明の化合物は、治療、特に慢性疼痛、神経因性疼痛、急性疼痛、癌性疼痛、関節リウマチ、骨関節炎、線維筋痛症、偏頭痛、内臓痛、糖尿病性疼痛などによって引き起こされる疼痛といった様々な疼痛状態の処置に有用である。

本発明の化合物は、上述したように、様々なタイプの疼痛状態について有用であるのと同様に、うつ病および不安の処置に等しく有用である。

本発明の化合物は、尿失禁、種々の精神病、咳、肺水腫、種々の胃腸障害（過敏性腸症候群、過敏性腸疾患）、脊髄損傷およびアルコール、ニコチン、オピオイドおよび他の薬物乱用を含む薬物中毒、および交感神経系の障害、例えば高血圧症の処置、に使用することができる。

本発明の化合物は、特に関節炎などの自己免疫疾患、皮膚移植片および臓器移植のための免疫調節剤として有用である。

本発明の化合物は、オピオイド受容体の変性または機能不全がそのパラダイムに存在するか、または関連する疾患状態において有用である。これは、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）のような診断手法および画像処理アプリケーションにおいて、本発明の化合物が同位体的に標識されたバ−ジョンを使用することを含んでもよい。

本発明の化合物は、全身麻酔およびモニタリングされた麻酔ケア中に使用するための鎮痛剤として有用である。麻酔状態（例えば、記憶喪失、鎮痛、筋弛緩および鎮静）を維持するために必要な効果のバランスをとるために、異なる特性を有する薬剤がしばしば組み合わされて使用される。この組み合わせには、吸入麻酔薬、催眠薬、抗不安薬、神経筋遮断薬、神経ペプチド受容体遮断薬および他のオピオイドが含まれる。

本発明の化合物は、他の疼痛に有効な化合物との併用療法において使用することができる。

本発明の範囲内では、上記の任意の状態の治療のための医薬品を製造するために、上記式（Ｉ）の化合物が使用される。

本発明のさらなる態様は、上記の式（Ｉ）の化合物の有効量を、そのような治療を必要とする患者に投与することによって、上記の任意の症状に苦しむ治療対象の治療方法である。

本発明のさらなる態様は、有効成分として少なくとも式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容される塩を、薬学的に許容される担体と共に含む医薬組成物である。

調製の方法

模式図１に概略を示したように、式（Ｉ）の化合物は調製される。

模式図１

以下の略称が使用される。
Ｄｐｐｆ＝（ジフェニルホスフィノ）フェロセン
ＨＡＴＵ＝１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］ −１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−b］ピリジニウム−３−オキシドヘキサフルオロホスフェート

実施例
本発明は、以下の実施例によって例証される。

実施例Ｉａ．４−［（３−カルバモイルフェニル）（１−｛［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］メチル｝ピペリジン−４−イリデン）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド

４−［（３−カルバモイルフェニル）（ピペリジン−４−イリデン）メチル］−Ｎ、Ｎ−ジメチルベンズアミド（４０ｍｇ、１１ｍＭｏｌ）および６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−カルバルデヒド（２１.２ｍｇ、０.１２ｍＭｏｌ）をジクロロエタン（１.５ｍＬ）中に溶解した。酢酸（６.３μL、０.１１ｍＭｏｌ）を加え、反応物を室温で１０分間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（３７.３ｍｇ、０.１８ｍＭｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２日間撹拌した。塩化メチレン（１ｍＬ）を加え、混合物を水（１ｍＬ）で洗浄した。水相を塩化メチレン（１ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（ＮＨ_４ＨＣＯ_{３（ａｑ）}５０ｍＭ中の３０〜６５％のＣＨ_３ＣＮ）で精製して、標題化合物（１９.０ｍｇ、収率３３％）を淡黄色固体として得た。ＭＳＥＳＩ^＋ｍ／ｚ５２３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｉｂ．４−［（３−カルバモイルフェニル）［１−（１，３−チアゾール−５−イルメチル）ピペリジン−４−イリデン］メチル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド

４−［（３−カルバモイルフェニル）（ピペリジン−４−イリデン）メチル］−Ｎ、Ｎ−ジメチルベンズアミド（４０ｍｇ、１１ｍＭｏｌ）および１，３−チアゾール−５−カルバルデヒド（１３.７ｍｇ、０.１２ｍＭｏｌ）をジクロロエタン（１.５ｍＬ）中に溶解した。酢酸（６.３μL、０.１１ｍＭｏｌ）を加え、反応物を室温で１０分間撹拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（３７.３ｍｇ、０.１８ｍＭｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２日間撹拌した。塩化メチレン（１ｍＬ）を加え、混合物を水（１ｍＬ）で洗浄した。水相を塩化メチレン（１ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（ＮＨ_４ＨＣＯ_{３（ａｑ）}５０ｍＭ中２５〜６５％のＣＨ_３ＣＮ）で精製して、表題化合物（８.２ｍｇ、１６％収率）を白色固体として得た。ＭＳＥＳＩ^＋ｍ／ｚ４６１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｉｃ．４−［（３−カルバモイルフェニル）（｛１ − ［（４−メチル−１H−イミダゾ−ル−５−イル）メチル］ピペリジン−４−イリデン｝）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド

４−［（３−カルバモイルフェニル）（ピペリジン−４−イリデン）メチル］−Ｎ、Ｎ−ジメチルベンズアミド（４０ｍｇ、１１ｍＭｏｌ）および４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−カルバルデヒド（１３.３ｍｇ、０.１２ｍＭｏｌ）をジクロロエタン（１.５ｍＬ）中に溶解した。酢酸（６.３μL、０.１１ｍＭｏｌ）を加え、反応物を室温で１０分間撹拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（３７.３ｍｇ、０.１８ｍＭｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２日間撹拌した。塩化メチレン（１ｍＬ）を加え、混合物を水（１ｍＬ）で洗浄した。水相を塩化メチレン（１ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（ＮＨ_４ＨＣＯ_{３（ａｑ）}５０ｍＭ中１０〜５０％のＣＨ_３ＣＮ）で精製して、表題化合物（１４ｍｇ、２８％収率）を白色固体として得た。ＭＳＥＳＩ^＋ｍ／ｚ４５８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間生成物の調製

実施例ＩＩＩ．タート−ブチル−４−｛ブロモ［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］メチリデン｝ピペリジン−１−カルボキシレート

ＤＭＦ（８.０ｍＬ）中の４−（｛１−（タート−ブトキシ）カルボニル］ピペリジン−４−イリデン｝（３−カルバモイルフェニル）メチル）安息香酸（１.００ｇ、２.５２ｍＭｏｌ）にＨＡＴＵ（１.１５ｇ、３.０２ｍＭｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１.８ｍＬ、１０.１ｍＭｏｌ）を加え、反応物を室温で６分間撹拌した。その後、ジメチルアミン−ＨＣｌ（０.６１７ｇ、７.５７ｍＭｏｌ）を加え、反応物を室温で一晩撹拌した。酢酸エチルを加え、溶液を氷冷した１ＭＨＣｌ、ＮａＨＣＯ_{３（ｓａｔ} _ａｑ）およびブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮して１.３３ｇの粗生成物を得、これをさらに精製することなく次の工程に進む。ＭＳＥＳＩ^＋ｍ／ｚ３６７［Ｍ＋Ｈ］^＋−ｔ−Ｂｕ。

実施例ＩＶ．タート−ブチル４−［（３−カルバモイルフェニル）［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］メチリデン］ピペリジン−１−カルボキシレート

タート−ブチル４−｛ブロモ［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］メチリデン｝ピペリジン−１−カルボキシレ−ト（０.５３３ｇ、１.２６ｍＭｏｌ）および（３−カルバモイルフェニル）ボロン酸（０.２４９ｇ、１.５１ｍＭｏｌ）をジメトキシエタン（１７ｍＬ）中に溶解し、２ＭＫ_２ＣＯ_{３（ａｑ）}（０.６ｍＬ）およびＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）（０.０５１ｇ、０.０６３ｍＭｏｌ）を窒素下で加え、反応物を８０℃で３.５時間加熱した。反応物を室温に冷却し、週末の間放置した。塩化メチレンおよび水を加え、相を分離した。水相を塩化メチレン（３Ｘ）で抽出した。合わせた相をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、濃縮して０.６３０ｇの褐色油状物である粗生成物を得、これをさらに精製することなく次の工程に進む。ＭＳＥＳＩ^＋ｍ／ｚ４０８［Ｍ＋Ｈ］^＋−ｔ−Ｂｕ。

実施例Ｖ．４−［（３−カルバモイルフェニル）（ピペリジン−４−イリデン）メチル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド

タート−ブチル４−［（３−カルバモイルフェニル）［４−（ジメチルカルバモイル）フェニル］メチリデン］ピペリジン−１−カルボン酸（０.６３０ｇ、１.３６ｍＭｏｌ）を塩化メチレン（３ｍＬ）中に溶解し、トリフルオロ酢酸／塩化メチレン（３.５ｍＬ）の混合物を添加した。反応物を室温で１時間１５分撹拌した。反応混合物を蒸発させ、残留物を塩化メチレンに再溶解した。有機相をＫ_２ＣＯ_{３（ｓａｔ} _ａｑ）（２×）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、濃縮して粗生成物０.５５０ｇを褐色の油状物として得、これをさらに精製することなく次の工程に進む。ＭＳＥＳＩ^＋ｍ／ｚ３６４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

医薬組成物

ある症状に罹患しているかまたは罹患しやすい人に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む、症状の処置方法が提供される。本発明の化合物は、経口、局所、非経口、静脈内、筋肉内、皮下、関節内注射、または他の注射可能な方法、頬側、舌下、直腸、膣、経皮、および／または鼻腔を通じ、および／または吸入によって、有効成分またはその薬学的に許容される塩を含む医薬調製物の形態で、薬学的に許容される剤形で投与され得る。処置される障害および患者および投与経路に応じて、組成物は、様々な用量で投与され得る。

ヒトの治療的処置における本発明の化合物の適切な１日の用量は、体重当たり約０.０００１−１００ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは体重当たり０.０１−１０ｍｇ／ｋｇである。

経口製剤は、０.００７ｍｇから７００ｍｇの範囲の活性化合物の用量、例えば、１ｍｇ、３ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２５０ｍｇおよび５００ｍｇを提供するために、当業者に公知の方法によって処方され得る錠剤またはカプセルである。

最適投与量および投与頻度は、処置される特定の状態およびその重症度、患者の種類；特定の患者の年齢、性別、体型および体重、食事および一般的な身体状態；脳／体重比；患者が服用しているかもしれない他の投薬；投与経路；製剤；医師および当業者に知られている様々な他の要因に依存する。

したがって、本発明のさらなる態様によれば、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤および／または担体と混合した、本発明の化合物のいずれか、またはその医薬的に許容される誘導体を含む医薬製剤が提供される。

本発明の化合物は、製剤全体の０.１から９９.５重量％、例えば０.５から９５重量％の濃度で医薬製剤中に存在してもよい。

経口投与のために、本発明の化合物は、アジュバントまたは担体、例えば、ラクトース、サッカロース、ソルビト−ル、マンニトール；デンプン、例えばジャガイモデンプン、コーンスターチまたはアミロペクチン；セルロ−ス誘導体；結合剤、例えばゼラチンまたはポリビニルピロリドン；および／または潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ポリエチレングリコール、ワックス、パラフィンなどと混合してもよく、次いで圧縮して錠剤にしてもよい。コーティングされた錠剤が必要な場合、上記のように調製された核は、例えば、アラビアゴム、ゼラチン、タルクおよび二酸化チタンを含有し得る濃縮糖溶液でコーティングしてもよい。あるいは、錠剤は、易揮発性有機溶媒に溶解した適切なポリマーでコ−ティングしてもよい。

軟質ゼラチンカプセルの調製のために、本発明の化合物は、例えば、植物油またはポリエチレングリコールと混合してもよい。硬ゼラチンカプセルは、錠剤のための上記の賦形剤のいずれかを用いて、化合物の顆粒を含有してもよい。また、本発明の化合物の液体または半固体製剤を硬ゼラチンカプセルに充填してもよい。

経口投与のための液体製剤は、シロップまたは懸濁液の形態でもよく、例えば本発明の化合物を含有し、残りは糖およびエタノール、水、グリセロールおよびプロピレングリコールの混合物である水溶液であってもよい。随意に、このような液体調製物は、着色剤、香味剤、サッカリンおよび／またはカルボキシメチルセルロースを増粘剤として含有してもよく、または当業者に公知の他の賦形剤を含有してもよい。

生物学的評価
インビトロ
δ−オピオイド受容体（ＤＯＲ）は、アデニリルシクラーゼ活性を阻害し、Ｋ^＋チャネルを開き、Ca^２＋チャネルを遮断する阻害性Ｇタンパク質（Ｇｉ／ｏ）に結合する。それらはまた、アゴニスト依存的な方法で、β−アレスチン２に結合し、脱感作をもたらし、およびＭＡＰキナ−ゼ（ＥＲＫ）リン酸化反応に結合することができる。

δ−オピオイドアゴニストの効能のインビトロ評価：
ｃＡＭＰ測定は、ＤｉｓｃｏｖｅＲｘｃＡＭＰＨｕｎｔｅｒ（商標）アッセイキットを用いて、増加するアゴニスト濃度に暴露されたδ−オピオイド発現ＣＨＯ細胞において行われ、β−アレスチンの補充はＤｉｓｃｏｖｅＲｘＰａｔｈｕｎｔｅｒ（登録商標）キットを使用して、アゴニスト濃度が増加している状態で測定される。μおよびκオピオイド受容体の選択は、整理番号１３９２及び２０７１（ＣｅｒｅｐＬｅＢｏｉｓＬ’ｅｖｅｑｕｅ、８６６００ＣｅｌｌｅＬ’ｅｖｅｓｃａｕｌｔ、Ｆｒａｎｃｅ）からのＣｅｒｅｐｃＡＭＰ評価を用いて行われる。

インビボ
慢性疼痛セルツァーモデル
セルツァーアセスメントは、慢性疼痛を評価するために用いられる。３０匹の雄ＣＤ１マウス（２９から３７ｇ）がこの研究に含まれる。マウスはＣｈａｒｌｅｓ−Ｒｉｖｅｒ社から入手し、標準的な飼料および水を自由に与え、２４から２５℃で、ペーチ大学のｔｈｅＡｎｉｍａｌＦａｃｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙに保管した。すべての実験手順は、ＡｎｉｍａｌＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎに関するハンガリー議会の１９９８／ＸＸＶＩＩＩＡｃｔおよびＣｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎＤｅｃｒｅｅｏｆＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＰｒｏｃｅｄｕｒｅｓｏｆＡｎｉｍａｌＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ（２４３／１９８８）に従って実施され、ヘルシンキ宣言の勧告を遵守した。研究は、ｔｈｅＥｔｈｉｃａｌＣｏｄｅｘｏｆＡｎｉｍａｌＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓに基づいて、ペ−チ大学の動物研究に関するｔｈｅＥｔｈｉｃｓＣｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認され、ライセンスが与えられた（ライセンス番号：ＢＡ０２／２０００−１１−２００６）。条件付け測定後、３つの信頼できる制御機械的侵害受容閾値が３日間連続してすべてのマウスについて判定され、手術がその後に行われる。神経結紮後の７日目に、機械的侵害受容閾値を判定し、腹腔内に薬物投与した前及び１５分後、注射前と注射後の閾値の差を観察する。最小で３０％の注射前痛覚過敏性を有するマウスのみがこの研究に含まれる。

血液および脳の試料を薬物投与の６０分後に深いケタミン−キシラジン麻酔下で採取し、さらなる分析のために送る。血液（０.５−１.５ｍＬ）をＥＤＴＡ含有チューブに心臓穿刺により採取し、遠心分離する。血漿試料は−７０℃で保存する。小脳と脳幹を有する脳全体を切開し、エッペンドルフチューブに入れ、直ちに液体窒素中で凍結させ、それらを−７０℃で保存する。

慢性疼痛ＭＮＸＯＡモデル
ラットを、１リットル／分の流速の酸素中で２.５％イソフルラン（Ａｂｂｏｔｔ、Ｍａｉｄｅｎｈｅａｄ、ＵＫ）を用いて麻酔する。左脚を剃毛し、外科的に準備する。内側の側副靱帯が露出し、その一部が除去されて半月板が露出する。半月板は、最も幅が狭い点で厚さにわたって切断される。次いで、結合組織層および皮膚を、それぞれコーティングされたＶｉｃｒｙｌ８−０および４−０縫合糸（Ｅｔｈｉｃｏｎ、Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ、ＵＫ）で閉じる。疼痛による行動は実験結果の尺度となるため、術後の鎮痛薬は投与しない。模擬手術を受けた動物は、半月板が切断されないことを除いて、同一の手順を受ける。左（同側）膝および右（対側）膝にかかる体重分布に対する治療の効果は、インキャパシタンスメーター（ａｎｉｎｃａｐａｃｉｔａｎｃｅｍｅｔｅｒ）（ＬｉｎｔｏｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓＵＫ）を用いて評価される。後肢重量分布の変化は、右対側対照肢と左同側処置肢との体重量の差を左右の脚の体重×１００の合計で割ったものとして定義される。機械的刺激に対する後肢を引っ込める閾値は、アップダウン法を用いて較正されたｖｏｎＦｒｅｙモノフィラメントを用いて測定される。実験動物は、実験の開始前に少なくとも２つの機会において順応させられている。
ベースライン行動の疼痛測定は、モデル導入前の０日目、次いで１４日目、２８日目、３５日目、および４９日目に行われる。

急性カラギ−ナン誘発炎症性疼痛
λ−カラギーナン（１００μL、生理食塩水中２％；Ｓｉｇｍａ、Ｐｏｏｌｅ、ＵＫ）をラット後肢の足底面に注射する。カラギーナンを注射し、後脚をひっこめる反応を記録した後、機械的刺激（８−１００ｇｖｏｎＦｒｅｙモノフィラメント）を１０分間間隔で１８０分間末梢受容野に（昇順で）適用する。後足の周の長さは、中足レベルで足の周りに輪をかけた縫合糸を用いて測定され、そっと締め付けられる。次に、糸を開いて、最も近いミリメートルまで測定される。測定はカラギーナン注射前に行われ、その後６０分間隔で測定する。

行動研究

ロータロッド
協調動作（ロータロッド）；ロータロッドアセスメントは、一般的な協調動作（ｃｏ−ｏｒｄｉｎａｔｏｒｂｅｈａｖｉｏｒ）を評価するために使用される。それは、マウスを３日間訓練するロ−タロッド装置（ＵｇｏＢａｓｉｌｅ）上のパフォーマンスによって評価され、この装置で各マウスは２４ｒｐｍまでの速度で回転するロッド上に２分間マウスを置くことからなる１日当たり４回の訓練試験を受け、ロータロッドから発泡ゴムパッディング上に落下するレイテンシが測定され、マウスが落ちていない場合、２分後に試験が終了する。

オープンフィールド
オープンフィールド動作；オープンフィールドアセスメントは、一般的な社会的行動を評価するために使用される。実験動物は標準オープンフィールドアリーナ内に置かれ、動作がコンピュータトラッキング（Ｅｔｈｏｖｉｓｉｏｎ）によって１日あたり最大２時間モニタリングされる。移動全体が測定され、アリーナの中央部にいた時間および後脚で立っていた時間が、不安を感じているような行動の指標となるであろう。

Claims

式（Ｉ）の化合物

またはその薬学的に許容可能な塩であって、
式中、
Rは

のいずれかから選択される、化合物。
式（Ｉ）の化合物が

である、請求項１に記載の化合物。
式（Ｉ）の化合物が

である、請求項１に記載の化合物。
式（Ｉ）の化合物が

である、請求項１に記載の化合物。
疼痛状態に用いられる、請求項１から４のいずれか１つに記載の式（Ｉ）の化合物。
前記疼痛状態が急性疼痛を指す、請求項５に記載の式（Ｉ）の化合物。
前記疼痛状態が慢性疼痛を指す、請求項５に記載の式（Ｉ）の化合物。
前記疼痛状態が、変形性関節症または線維筋痛症によって引き起こされる痛みなどの慢性関節痛を指す、請求項7に記載の式（Ｉ）の化合物。
有効成分として請求項1から４に記載の少なくとも1つの式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容可能な塩を、薬学的に許容可能な担体と一緒に含む医薬組成物。