JP4786192B2

JP4786192B2 - 掻痒治療剤

Info

Publication number: JP4786192B2
Application number: JP2005029172A
Authority: JP
Inventors: 史衛佐藤; 巌新井; 憲一高野; 亨田名見; 慎八木
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2004-02-06
Filing date: 2005-02-04
Publication date: 2011-10-05
Anticipated expiration: 2025-02-04
Also published as: JP2005247843A

Description

本発明は止痒剤に関し、さらに詳しくは安全性が高く、優れた効果を有する止痒剤に関する。

プロスタグランジン受容体は様々な生理反応に関与していることが知られている。プロスタグランジン受容体にはＤＰ受容体、ＴＰ受容体、ＩＰ受容体などの受容体をはじめ、それらのサブタイプなど多数の受容体が存在し、それらのプロスタグランジン受容体アゴニスト、アンタゴニストが多数の薬理作用を有することが報告されている。

ＤＰ受容体は血小板凝集阻害、血管拡張、消化管・子宮筋弛緩、睡眠などに関与していることが知られている。また、ＴＰ受容体は血小板凝集に関与していることが知られている。

具体的にはＤＰ受容体アンタゴニスト（拮抗薬）がアレルギー性疾患、痒みを伴う疾患、痒みに伴う行動などの治療に有効な可能性があることが示唆されている（特許文献１）。

一方、ＤＰ受容体アゴニスト（作動薬）、ＥＰ受容体アゴニスト、ＩＰ受容体アゴニストについても、アトピー性皮膚炎による痒みに対する外用止痒剤としての報告がされている（特許文献２）。

一般的にプロスタグランジン受容体に作用する成分は、一つの受容体だけでなく複数の受容体に作用することが多い。したがって目的とする薬効を発現する受容体に対する作用だけでなく、他の受容体に対しても作用することから、目的外の生理反応が副作用や作用低減という形で発現するリスクがある。プロスタグランジンＤ₂がＤＰ受容体だけでなくＴＰ受容体に対しても作動物質であることは報告されている（非特許文献１、２）。

WO01/066520 WO03/070252 The Journal of Pharmacology And Experimental Therapeutics (2003),305,347-352 Br. J. Pharmacol.(1989),96,688-692

ＴＰ受容体作動物質には強力な血管収縮作用、血小板凝集を引き起こす可能性がある。このため、ＤＰ受容体以外にもＴＰ受容体等にも作動物質として作用するＰＧＤ２においては止痒剤としての有用性が制限される。

本発明の目的は、高い安全性と有効性を併せ持った止痒剤を提供することにある。

本発明者らは種々検討した結果、アトピーによる痒みに関与するプロスタグランジン受容体がＤＰ受容体であることを見出した。さらに本発明者らは、従来考えられていたＤＰ受容体拮抗薬ではアトピーによる痒みには効果が認められず、ＤＰ受容体作動薬がアトピーによる痒みに有効であることも見出した。

それらの知見から、選択性が高いＤＰ受容体アゴニストは、アトピーによる痒みに有効で、高い安全性があることを見出し本発明を完成した。

すなわち本発明は
１．ＤＰ受容体選択的アゴニストを有効成分とする止痒剤。
２．アトピー性の痒みまたはIgE抗体が関与する痒みに対する治療剤である１記載の止痒剤。
３．アトピー性の痒みに対する治療剤である１記載の止痒剤。
である。

本発明において、ＤＰ受容体選択的アゴニストとは、プロスタグランジン受容体のうち、ＤＰ受容体に対して強い作動薬として作用し、ＴＰ受容体に対する作用が弱い物質である。具体的には、ヒト血小板ＡＤＰ凝集抑制作用がIC₅₀値で１０nM未満、ヒトＴＰ拮抗作用がIC₅₀値で１０μM以上の物質を示す物質である。その様な作用を持つＤＰ受容体選択的アゴニストである化合物としては、具体的には、式１

で示される化合物（化合物１）などがあげられる。この化合物１はＷＯ９５／１８１０１号公報に開示された化合物であり、同公報に開示された方法で製造することができる。

本発明で効果を発現する痒みとしては、アトピー性の痒み、IgE抗体が関与するアレルギー性の痒みに特に有効である。特にアトピー性の痒みに有効である。

ここで、アトピー性皮膚炎の発症は未だ不明な点が多いが、強烈な痒みに対する引掻き行動により発症すると考えられていることから、本願発明の有効成分はアトピー性皮膚炎の治療または予防に対しても有効なものであると考えられる。

本発明の止痒剤は外用剤として患部に塗布して使用することができる。したがって、患部に速やかに投与できるだけでなく、代謝による無効化や副作用などが発生しにくいという特徴を有している。

本発明の止痒剤の投与量は、年齢、性別、体重等により異なるが、有効成分濃度が０．１〜０．０００１％程度の製剤を患部に適量塗布することにより投与する。

本発明の止痒剤は、有効成分のほか必要な基剤、ゲル化剤、溶解剤、溶解補助剤、ｐＨ調節剤、他の薬効成分などを配合し、一般的な方法で、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、液剤、エアゾール剤、貼付剤などの外用剤にすることができる。

本発明の有効成分は、ＤＰ受容体に対して選択的な強い作動効果を有し、ＴＰ受容体に対しては作動効果を示さないことから、アトピー性の痒みに対して選択的な止痒効果を有する。

以下、本発明を実施例および試験例によりさらに詳細に説明する。

以下の方法で本願発明有効成分である化合物１と対照例としてＰＧＤ_２を用いて、各種プロスタグランジン受容体結合選択性を求めた。

１．ヒト血小板凝集抑制作用
ヒト血小板ADP凝集抑制作用
試験は購入した多血小板血漿（ＰＲＰ）(6x10⁸platelets/ml)を用い、血小板凝集の測定はＢｏｒｎの方法（Ｎａｔｕｒｅ，第１９４巻，第９２７ページ，１９６２年）に準じて行なった。ＰＲＰ１００μｌにエタノールに溶解した３０μMの被検薬物溶液５μｌを加え、３７℃、１０００ｒｐｍ攪拌下、１分間インキュベートした。これに５μｌの凝集惹起剤［ＡＤＰ（３μＭ）］を添加して血小板凝集を惹起し、血小板凝集計（アグリゴメーター）により最大凝集率（血小板の凝集を惹起してから５分以内の光透過度の最大変化）を求めた。被検薬物の凝集抑制率を、被検薬物溶液のかわりにエタノールを用いた場合の最大凝集率に対する被検薬物の最大凝集率から算出し、その用量反応曲線からＩＣ₅₀値を求めた。その結果、化合物１のＩＣ₅₀は4.27ｎM、PGD2のＩＣ₅₀は11ｎMであった。

２．モルモット血小板凝集抑制作用
モルモット血小板ADP凝集抑制作用
採血およびplatelet rich plasma(PRP)とplatelet poor plasma(PPP)の調製
9〜10週齢Hartley系雄性モルモットをペントバルビタール(30 mg/kg i.p.)により麻酔し、腹大動脈より3.8%クエン酸ナトリウム2.0 mL含有注射筒に血液を20 mL採血した。血液は直ちに20℃、900rpm、10分間遠心分離し上清であるPRPを回収した。さらに20℃、3,000rpm、10分間遠心分離し上清であるPPPを回収した。

血小板凝集能の測定には、血小板凝集能測定装置(PAM-8C)を使用した。PRP 274μLに被験物質1μLを添加し、1000rpmの攪拌下に３分間インキュベートした。インキュベート後、２５μLのＡＤＰ(３μＭ)にて血小板凝集を惹起し、５分間の最大凝集率を測定した。

その結果、化合物１のＩＣ₅₀値は６．２±２．３ｎＭ、ＰＧＤ２のＩＣ₅₀値は５４．３±２３．０ｎＭであった。

３．ヒトTP拮抗作用
文献（A. Hedberg et. al., J. Pharmacol. Exp. Ther 1988, 245: 786-792））に記載された方法に準拠して、ヒト洗浄血小板への[³H]SQ29548結合に対する被検薬の拮抗作用を検討した。

その結果、化合物１は１０μＭで２８％、１μＭで７％の結合阻害率を示した。一方、陽性対照薬として用いたＵ４４０６９のＩＣ₅₀値は2.4μＭであった。

参考例１
DP₁受容体選択的antagonist(BW A868C)による拮抗作用の検討
287nmol/Lの化合物１および300nmol/LのPGD₂が、それぞれのコントロールに対して有意な血小板凝集抑制作用を示すことを確認した。

血小板凝集能は、血小板凝集能測定装置を使用し、比濁法にて測定した。PRP 273μLに各濃度のDP₁受容体選択的アンタゴニストであるBW A868Cを１μL添加し、1000rpmの攪拌下37℃で3分間プレインキュベートした。

プレインキュベート後、EtOHまたは試験物質（化合物１：最終濃度287nmol/LまたはPGD₂：最終濃度 300 nmol/L）を１μL添加し、1000rpmの攪拌下37℃で３分間インキュベートした。インキュベート後、25μLのADP(最終濃度３μmol/L)にて血小板凝集を惹起し、５分間の最大凝集率を測定した。

その結果、287nmol/Lの化合物１による血小板凝集抑制作用は、BW A868Cの添加濃度の増加に伴って拮抗され、0.1μmol/L以上の濃度により有意に拮抗された。300nmol/LのPGD₂による血小板凝集抑制作用も同様に測定した結果、化合物１と同様BW A868Cの添加濃度の増加に伴って拮抗され、0.3 μmol/L以上の濃度により有意に拮抗された。

このことから本発明の好ましい化合物である化合物１およびＰＧＤ₂は、ＤＰ受容体に対するアゴニストであることが明らかになった。

以上の結果から明らかなように本発明の好ましい化合物である化合物１はＤＰ受容体選択的アゴニストであることがわかった。

試験例１：NCマウス自発掻痒行動に対する作用
（実験方法）
体重約３０ｇの２０週齢NC/Ngaマウス（購入元ＳＬＣ）の両足に磁石を植え込み、その磁力感知により、足の動きを測定した。引掻き行為の内、１．５秒以上のものを掻痒行動としてその回数を継続的に測定した。掻痒行動には日内リズムがあるため、試験前日から２４時間の各動物個体の日内掻痒リズムを測定後、９９．５％エタノールに溶解した各薬物０．２ｍＬ／匹の割合で背部皮膚に塗布した。その後２４時間の掻痒行動を測定し薬物投与前後の掻痒行動数を比較した。実験データは、薬物塗布前後２４時間の総掻痒回数から掻痒抑制率を算出した。有意差検定は、各薬物濃度塗布群の個々動物における薬物塗布前後の掻痒回数について対応のあるｔ検定(paired t-test)を用いて処理した。
掻痒抑制率（％）＝（塗布前掻痒回数−塗布後掻痒回数）x100／塗布前掻痒回数
その結果、化合物１は、薬物濃度０．０００００１％濃度で掻痒抑制率４３．２６％であった。一方ＰＧＤ_２は０．００００１％で掻痒抑制率１９．４４％であり、PGE₁、PGE₂およびPGEＦ_2αでは０．０１％においても有意な抑制作用は示さなかった。

試験例２：アレルギー性の痒みに対する作用
（実験方法）４週齢の雄性BALB/c系マウスに、生理食塩水で溶かした卵白アルブミン（ＯＶＡ; ５０μｇ／２ｍｇアルミニウムゲル／０．５ｍＬＰＢＳ／匹）を２週間に１回背部皮下投与により感作し、最終感作の２週間後に０．１％ＯＶＡ／５０μＬを背部皮内注入により掻痒行動を惹起させた。掻痒回数は、ＯＶＡ注入後３０分間の掻破回数を両足に植え込んだ磁石を感知し、足の動きが０．３秒以上持続するものを掻痒行動としてその回数を測定した。薬物はＯＶＡ注入１時間前に０．１ｍＬ/匹の割合でＯＶＡ注入部位に塗布した。止痒効果の評価は、溶媒であるエタノール塗布群の掻痒回数と薬物塗布群の掻痒回数の比較で行った。結果を表１に示した。

表から明らかなように、ＯＶＡ感作マウスへのＯＶＡ皮内注入により掻痒行動の有意な増加が観察された。この現象はIgEを介し肥満細胞中のヒスタミンが遊離されることによるアレルギー反応により惹起されるものと考えられる。この掻痒行動の増加に対し、化合物１にのみ有意な抑制作用が観察された。以上の結果より、化合物１はアトピー性掻痒以外のアレルギー性掻痒に対してもPGD₂, PGE₁及びPGF_2αに比較し強い効果を示すことがわかった。

本発明の有効成分は、優れた効果を持ちながら副作用が少ない止痒剤、アトピー性皮膚炎の治療または予防剤などとして利用可能である。

Claims

アトピー性の痒みに対する治療剤である下記式

で示される化合物０．０００００１％を有効成分とする外用液剤の止痒剤。