JP4781037B2 - ヒト歯髄細胞の判別及び選択方法 - Google Patents
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好ましくは、1×103個/cm2から5×103個/cm2の範囲内の密度でヒト歯髄細胞を播種して培養し、培養7日後の細胞数が20倍以上に増殖するヒト歯髄細胞を硬組織形成能の高い細胞として判別及び選択する。
好ましくは、形成される硬組織は象牙質、セメント質又は骨である。
本発明によるヒト歯髄細胞の中から硬組織形成能の高い細胞を判別及び選択する方法は、ヒト歯髄細胞を培養し、その増殖速度を指標として、硬組織形成能の高い細胞を判別及び選択することを特徴とする方法である。
以下の実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されるものではない。
医師によるインフォームドコンセントの得られた患者の智歯を使用した。治療のため抜歯した智歯(18歳男性、25歳女性)をタービンで削り、歯髄を露出させ、無菌的に歯髄組織を採取し、10%抗生剤入りPBS溶液にて保存した。
メスにて歯髄組織を約2mmの小片にし、PBS溶液にて5回洗浄した。
医師によるインフォームドコンセントの得られた患者の智歯を使用した。治療のため抜歯した智歯(23歳男性、25歳男性)をタービンで削り、歯髄を露出させ、無菌的に歯髄組織を採取し、10%抗生剤入りPBS溶液にて保存した。
メスにて歯髄組織を約2mmの小片にし、PBS溶液にて5回洗浄した。
医師によるインフォームドコンセントの得られた患者の智歯を使用した。治療のため抜歯した智歯(18歳男性、25歳女性)をタービンで削り、歯髄を露出させ、無菌的に歯髄組織を採取し、10%抗生剤入りPBS溶液にて保存した。
メスにて歯髄組織を約2mmの小片にし、PBS溶液にて5回洗浄した。
移植後6週にて試料を採取した。摘出した試料は、4%Paraformaldehyde(以下PFAと略す)溶液にて固定し、常法に従ってパラフィンに包埋して連続組織切片を作成した。その後、切片にヘマトキシリン-エオジン染色を施し、組織学的に観察した。
医師によるインフォームドコンセントの得られた患者の智歯を使用した。治療のため抜歯した智歯(23歳男性、25歳男性)をタービンで削り、歯髄を露出させ、無菌的に歯髄組織を採取し、10%抗生剤入りPBS溶液にて保存した。
メスにて歯髄組織を約2mmの小片にし、PBS溶液にて5回洗浄した。
移植後6週にて試料を採取した。摘出した試料は、4%PFA溶液にて固定し、常法に従ってパラフィンに包埋して連続組織切片を作成した。その後、切片にヘマトキシリン-エオジン染色を施し、組織学的に観察した。
Claims (3)
- ヒト歯髄細胞を培養し、その増殖速度を指標として、硬組織形成能の高い細胞を判別及び選択することを特徴とする、ヒト歯髄細胞の中から硬組織形成能の高い細胞を判別及び選択する方法において、1×10 3 個/cm 2 から5×10 3 個/cm 2 の範囲内の密度でヒト歯髄細胞を、牛胎児血清及びアスコルビン酸を含む培地に播種して、室温から37℃で5%CO 2 インキュベーター中にて静置培養し、培養7日後の細胞数が35倍以上に増殖するヒト歯髄細胞を硬組織形成能の高い細胞として判別及び選択する、上記の方法。
- 1×10 3 個/cm 2 から5×10 3 個/cm 2 の範囲内の密度でヒト歯髄細胞を、15%牛胎児血清及び100μmol/lアスコルビン酸を含むDulbecco’s Modified Eagle Medium培地:Nutrient Mixture F12=1:1の混合培地に播種して、37℃で5%CO 2 インキュベーター中にて静置培養し、培養7日後の細胞数が35倍以上に増殖するヒト歯髄細胞を硬組織形成能の高い細胞として判別及び選択する、請求項1に記載の方法。
- 分離したヒト歯髄細胞を使用する、請求項1又は2に記載の方法。
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