JP4731131B2 - タンパク質の等電点電気泳動 - Google Patents
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- 生体分子をそれらの等電点に基づいて分離するゲル電気泳動システムであって、
第1の端部と、第2の端部と、前記第1端部および前記第2端部の間に延伸し、前記第1端部および前記第2端部の間の長手方向に沿ってpH勾配を設けるゲル媒体と、を含む電気泳動セルと、
前記ゲルに近接して設けられ、狭い間隔で平行に配置された複数の電極を含む電極グリッドであって、前記セルの前記長手方向に対してほぼ直角な方向に前記電極が延伸するように前記セルに対して配置されている電極グリッドと、
第1の多相電気信号を供給する第1の電圧制御器であって、前記電極グリッドの少なくとも一方の領域に電気的に接続されている第1の電圧制御器と、第2の多相電気信号を供給する第2の電圧制御器であって、前記電極グリッドの少なくとも他方の領域に電気的に接続されている第2の電圧制御器と、を有する電圧制御器を有し、
前記第1の電圧制御器は、プラスの信号波である第1の多相電気信号を生成し、第1の多相電気信号は、pH勾配が設けられたゲル媒体の前記第1端部から前記第2端部へ通過し、
前記第2の電圧制御器は、マイナスの信号波である第2の多相電気信号を生成し、第2の多相電気信号は、pH勾配が設けられたゲル媒体の前記第2端部から前記第1端部へ通過し、
前記第1の電圧制御器と第2の電圧制御器は、交互に、第1の多相電気信号と第2の多相電気信号をそれぞれ供給することを特徴とするゲル電気泳動システム。 - 生体分子のサンプルの等電点電気泳動の実施にかかる時間を短縮するゲル電気泳動システムであって、
第1端部と第2端部とを有するストリップであって、第1端部および第2端部の間に延伸し、第1端部から第2端部の間の長手方向に沿ってpHが徐々に高くなる媒体を含む固定化pH勾配(IPG)ストリップと、
前記ストリップに密接に配置され、前記ストリップの長手軸線をほぼ横断する方向に延伸する複数の平行な電極を含む電極グリッドと、
第1の多相電気信号を供給する第1の電圧制御器であって、前記電極グリッドの少なくとも一方の領域に電気的に接続されている第1の電圧制御器と、第2の多相電気信号を供給する第2の電圧制御器であって、前記電極グリッドの少なくとも他方の領域に電気的に接続されている第2の電圧制御器と、を有する電圧制御器を有し、
前記第1の電圧制御器は、プラスの信号波である第1の多相電気信号を生成し、第1の多相電気信号は、前記固定化pH勾配(IPG)ストリップの前記第1端部から前記第2端部へ通過し、
前記第2の電圧制御器は、マイナスの信号波である第2の多相電気信号を生成し、第2の多相電気信号は、前記固定化pH勾配(IPG)ストリップの前記第2端部から前記第1端部へ通過し、
前記第1の電圧制御器と第2の電圧制御器は、交互に、第1の多相電気信号と第2の多相電気信号をそれぞれ供給することを特徴とするゲル電気泳動システム。 - ゲル電気泳動システムの電気泳動セル内の第1の位置及び第2の位置にそれぞれ載置された第1の生体分子と第2の生体分子をそれぞれ等電点に集束させる方法であって、前記システムは、(i)第1の端部と、第2の端部と、前記第1端部および前記第2端部の間に延伸し、前記第1端部および前記第2端部の間の長手方向に沿ってpH勾配を設けるゲル媒体を含む前記電気泳動セルと、(ii)前記セルに密接に配置された電極グリッドであって、狭い間隔で平行に設けられた複数の電極を含み、前記第1端部および前記第2端部の間の長手方向に対して直角に前記電極が延伸するように前記セルに対して配置されている電極グリッドと、(iii)第1の多相電気信号を供給する第1の電圧制御器であって、前記電極グリッドの少なくとも一方の領域に電気的に接続されている第1の電圧制御器と、(iv)第2の多相電気信号を供給する第2の電圧制御器であって、前記電極グリッドの少なくとも他方の領域に電気的に接続されている第2の電圧制御器と、を有し、
第1の生体分子を前記電気泳動セルの第1位置に載置する工程と、
第2の生体分子を前記電気泳動セルの第2位置に載置する工程と、
前記電極グリッドの第1領域に第1の多相電気信号を供給し、前記第1の多相電気信号は、前記電極グリッドの前記第1領域から前記電極グリッドの前記第2領域へ伝わる際に、前記セル上の第1の位置にある第1の生体分子を通過し、第1の生体分子を等電点に集束させる工程と、
前記電極グリッドの第2領域に第2の多相電気信号を供給し、前記第2の多相電気信号は、前記電極グリッドの前記第2領域から前記電極グリッドの前記第1領域へ伝わる際に、前記セル上の第2の位置にある第2の生体分子を通過し、第2の生体分子を等電点に集束させる工程と、を含む方法。 - 電気泳動システム内の固定化pH勾配(IPG)ストリップにおける、少なくとも2つの生体分子バンドを集束させる方法であって、前記システムは、(i)前記ストリップに密接に配置された電極グリッドであって、狭い間隔で平行に設けられた複数の電極を含み、前記ストリップに対してほぼ直角に前記電極が延伸するように配置されている電極グリッドと、(ii)第1の多相電気信号を供給するよう構成され、前記グリッドの少なくとも一部に電気的に接続している第1の電圧制御器と、(iii)第2の多相電気信号を供給し、前記グリッドの少なくとも他の一部に電気的に接続している第2の電圧制御器と、を有し、
前記ストリップの第1端部に最も近い第1のバンド内の生体分子の生来の電荷を特定する工程と、
前記ストリップの第2端部に最も近い第2のバンド内の生体分子の生来の電荷を特定する工程と、
前記第1電圧制御器を作動させて前記第1の多相電気信号を生成し、前記第1の信号を前記ストリップの前記第1端部から前記ストリップの前記第2端部に向けて通過させる工程であって、前記第1の信号は、前記第1のバンド内の前記生体分子の前記生来の電荷とは逆の極性を有する工程と、
前記第2電圧制御器を作動させて前記第2の多相電気信号を生成し、前記第2の信号を前記ストリップの前記第2端部から前記ストリップの前記第1端部に向けて通過させる工程であって、前記第2の信号は、前記第2のバンド内の前記生体分子の前記生来の電荷とは逆の極性を有する工程と、を含む方法。
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