JP4679596B2 - 毛髪内水分量の測定方法 - Google Patents
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Description
また、本発明者らは、共焦点ラマン分光法を用いた毛髪内局所の水分量の測定について検討を試みた。しかし、同じ毛髪でも測定ごとに測定値が異なり、非特許文献1や2に記載されているような皮膚測定と同様の手法では、毛髪についてはうまく測定できないことが分かった。
本発明の毛髪内水分量の測定方法は、検量線を作成する工程(工程(a))と、測定対象の毛髪のラマンスペクトルを測定する工程(工程(b))と、当該測定結果と前記検量線とを用いて、測定対象の毛髪内の局所における水分量を求める工程(工程(c))とを含む。ここで、「局所」とは、レーザビームが照射されたときの焦点部分となる毛髪の一部分をいい、レーザビームの照射面積(ビーム径)、及び共焦点ラマン分光器の共焦点光学系のピンホールによって定まる範囲をいう。
ラマンスペクトル中、2900cm-1付近に毛髪のタンパク質に起因するCH伸縮振動のピークが現れ、3400cm-1付近に毛髪中の水分に起因するOH伸縮振動のピークが現れる。本発明では、3400cm-1付近のOH伸縮振動の信号強度IOHと2900cm-1付近のCH伸縮振動の信号強度ICHとから強度比IOH/ICHを算出して、毛髪中の水分についてのラマン散乱強度を求める。
ただし、直線偏光レーザを用いる場合には、毛髪の繊維配向の影響により、毛髪を測定装置のステージ上に配置する向きに依存してラマンスペクトルの計測値が変動してしまう。そのため、検量線作成の際には、毛髪の配置方向を一定にして測定する必要がある。
(1)毛髪を絶対乾燥状態(絶乾状態)とする。具体的には、脂溶性成分を抽出した白髪を五酸化二リンとともに調湿容器に入れ密封し、調湿容器をデシケーター内で一週間保管し、完全に乾燥させる。五酸化二リンは、吸湿力が2×10-5mgであり、優れた乾燥剤である。
(2)絶乾状態の毛髪についてラマン測定および秤量を行う。具体的には、密封した調湿容器内の毛髪のラマンスペクトルを非直線偏光レーザにより測定し、次いで、調湿容器から毛髪を取り出して、毛髪質量を秤量する。
(4)調湿状態の各毛髪についてラマン測定および秤量を行う。具体的には、密封した調湿容器内の吸湿した毛髪のラマンスペクトルを非直線偏光レーザにより測定し、次いで、調湿容器から毛髪を取り出して、毛髪質量を秤量する。
(6)毛髪の含水率を求める。毛髪の含水率Rwaterは、(毛髪中の水の質量)/(毛髪中のタンパク質の乾燥質量)で表すことができ、湿度H%(相対湿度)における毛髪の含水率Rwater(H)は、下式(1)により算出することができる。
含水率Rwater(H)=(W(H)−WDry)/WDry
(7)上記(5)で求めたラマン散乱強度と上記(6)で求めた毛髪の含水率との関係を示す検量線を作成する。
測定対象の毛髪についてのラマンスペクトル測定では、非直線偏光レーザ光が用いられる。非直線偏光レーザは、上述した手段によって得ることが可能である。非直線偏光レーザ光を用いてラマン分光測定を行うことにより、毛髪の繊維配向による影響を受けることなく測定することができる。
測定したラマンスペクトルのうち、3400cm-1付近のOH伸縮振動の信号強度IOHと2900cm-1付近のCH伸縮振動の信号強度ICHとから強度比IOH/ICHを算出し、測定対象の毛髪中の水分についてのラマン散乱強度を求める。
工程(b)で求めた、測定対象の毛髪中の水分についてのラマン散乱強度を、工程(a)で作成した検量線に当てはめることにより、測定対象毛髪内の局所における含水率が求められる。
毛髪中の水分量Cwaterは、(毛髪中の水の質量)/(毛髪の質量)で表すことができる。ここで、毛髪の質量は、(毛髪中の水の質量)+(毛髪中のタンパク質の乾燥質量)で表すことができる。また、湿度H%(相対湿度)における毛髪中の水分量Cwater(H)は、含水率Rwaterを用いて下式(2)により算出することができる。
Cwater(H)[質量%]=(Rwater/(Rwater+1))×100
<装置構成>
ラマン分光器:ナノファインダー30(東京インスツルメンツ社製、商品名)
励起波長632.8nm
対物レンズ:100倍(NA=1.3)、40倍(NA=0.9)
偏光解消板(シグマ光機)
(偏光解消板組み込み冶具)
対物レンズの根本に、アルミ製の偏光解消板組み込み用の冶具を取り付けた。冶具を図1に示す。
(毛髪ラマンスペクトルにおける毛髪繊維配向の影響)
前記装置構成において、偏光解消板を組み込まずに試験を行った。毛髪を共焦点顕微ラマン分光器のステージ上に載せて、毛髪を置く向きを変えて、直線偏光したレーザにより測定した。レーザの向き、偏光方向、試料の向きなどの位置関係を図2に示す。レーザの偏光方向をY軸方向と定め、ラマン分光器のステージ上でY軸と直行する軸をX軸とした。毛髪の配置方向は実験の座標系に対して毛髪軸がX軸方向またはY軸方向になるように置いた。毛髪軸がX軸方向である場合および毛髪軸がY軸方向である場合のそれぞれについて測定したラマンスペクトルを図2に示す。
図2から明らかなように、毛髪を置く向きにより、ピークA(α−ヘリックスのC−Cの骨格振動)、ピークB(α−ヘリックスのC−Hの変角振動)、ピークC(アミドI)、ピークD(NH伸縮振動とOH伸縮振動が重なっている領域)の形状が変化していることが分かった。
その結果、毛髪軸がX軸方向である場合の水分量は7.0%であるのに対し、毛髪軸がY軸方向である場合の水分量は12.9%であり、同一の毛髪でも約6%の差が生じることがわかった。
このように毛髪を置く向きに依存してスペクトルが変わるのは、毛髪繊維の配向の影響がラマンスペクトルに現れたためであると考えられる。
(非直線偏光レーザ毛髪ラマンスペクトルにおける毛髪繊維配向の影響の解消)
偏光解消板を組み込んだ装置を用いたこと以外は参考例1と同様にして試験を行った。具体的には、毛髪を共焦点顕微ラマン分光器のステージ上に載せて、毛髪を置く向きを変えて、偏光解消板を用いて励起レーザを非直線偏光(より具体的には非偏光)とした装置構成により測定した。毛髪軸がX軸方向である場合および毛髪軸がY軸方向である場合のそれぞれについて測定したラマンスペクトルを図3に示す。
図3から明らかなように、毛髪を置く向きに依存したピーク形状の変化がほぼ無いことが分かった。この結果、非直線偏光レーザ光を用いてラマン分光測定を行うことにより、毛髪の繊維配向による影響を受けずにラマンスペクトルを測定できることがわかった。
(検量線の作成)
白髪(n=18本)を用いて、以下のようにして検量線を作成した。
まず、脂溶性成分を抽出した白髪を五酸化二リンとともに調湿容器に入れ密封し、調湿容器をデシケーター内で一週間保管し、完全に乾燥させた。五酸化二リンは乾燥状態で使用した。この状態を絶乾状態とみなした。この絶乾状態の毛髪についてラマン測定および秤量を行った。具体的には、密封した調湿容器内の毛髪のラマンスペクトルを非直線偏光レーザにより測定した。その後、調湿容器から毛髪を取り出して、毛髪質量を秤量した。
大気下(R.H.30%)中で、測定対象の毛髪について毛髪表面からの深さを変えてラマンスペクトルを測定した。また、同様に、測定対象の毛髪を水に30分浸漬させた後に、水中でラマンスペクトルを測定した。
測定したラマンスペクトルのうち、3400cm-1付近のOH伸縮振動の信号強度IOHと2900cm-1付近のCH伸縮振動の信号強度ICHとから強度比IOH/ICHを算出し、測定対象の毛髪中の水分についてのラマン散乱強度を求め、上記の作成した検量線に当てはめて、測定対象毛髪内の局所における含水率を求めた。求めた含水率を前記数式(2)により毛髪の水分量(質量%)を測定した。毛髪の水分量と毛髪表面からの深さとの関係を図6に示す。
Claims (6)
- (a)水分量既知の基準毛髪にレーザ光を照射してラマンスペクトルを測定し、毛髪の含水率とラマン散乱強度との関係を示す検量線を作成する工程と、
(b)非直線偏光レーザ光を測定対象の水分量未知の毛髪に照射して、当該毛髪のラマンスペクトルを測定する工程と、
(c)前記工程(b)で得られた測定結果と前記工程(a)で得られた検量線とを用いて、前記の測定対象毛髪内の局所における水分量を求める工程
とを含む、毛髪内水分量の測定方法。 - 前記工程(a)で使用するレーザ光が非直線偏光レーザ光である、請求項1記載の毛髪内水分量の測定方法。
- 前記非直線偏光レーザ光が、レーザ源から照射される偏光レーザ光の偏光成分を解消する光学手段を介することで得られるものである、請求項1又は2に記載の毛髪内水分量の測定方法。
- 前記非直線偏光レーザ光が円偏光レーザ光である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の毛髪内水分量の測定方法。
- 前記工程(a)において、基準毛髪について測定したラマンスペクトルのうち、3400cm-1付近のOH伸縮振動の信号強度IOHと2900cm-1付近のCH伸縮振動の信号強度ICHとから強度比IOH/ICHを算出し、これによって検量線を作成する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の毛髪内水分量の測定方法。
- 前記工程(c)において、前記工程(b)で得られた測定対象毛髪についてのラマンスペクトルのうち、3400cm-1付近のOH伸縮振動の信号強度IOHと2900cm-1付近のCH伸縮振動の信号強度ICHとから強度比IOH/ICHを算出し、これによって毛髪内の水分量を求める、請求項1〜5のいずれか1項に記載の毛髪内水分量の測定方法。
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