JP4601461B2 - 電気泳動装置における検体塗布機構 - Google Patents

Description

本発明は血清などの検体に含まれる蛋白質の分画比などをセルロースアセテート膜を支持体とする電気泳動で複数試料を同時に測定するための自動電気泳動装置において、検体を支持体に添加するための塗布機構に関する技術分野に関する。

従来より、血清中蛋白質の電気泳動による分画分析法は、たった一滴の血液から様々な疾患情報を得る手段として頻用されている。とくに、多発性骨髄腫にみられる免疫グロブリン分泌細胞の単クローン性増殖においては、血清蛋白分画で特徴的なＭ蛋白像が出現するため、確定診断や病期分類に利用されている（非特許文献１参照）。

セルロースアセテート膜は、常温乾燥状態で保存できるなど取り扱いが便利なため、電気泳動用支持体として広く用いられてきた。セルロースアセテート膜電気泳動は、セルロ−スアセテ−ト膜の支持体上に、試料を塗布した上で通電し、電気泳動による血清の分画パタ−ンを形成せしめ、その後、染色液にて染色し、血清以外の部分を脱色させたものを濃度計にて測定・定量する方法であり、自動装置にて測定することができる（非特許文献２参照）。膜に塗布する試料の量が偏っていたり歪んでいたりすると分画パターンが歪み、濃度計による測定・定量に影響を与える（非特許文献３参照）。正確な測定結果を得るためには、一定量の試料を一定面積に偏り・歪みなく塗布する必要があることがわかっている。

これまでの自動電気泳動装置における検体塗布は、先端に溝を形成したり二枚の金属製片を組合せたりした塗布チップを１０乃至４０並べて設置した塗布腕を上下左右に動作させ、試料を吸引しその後塗布チップをセルロースアセテート膜上に接触させ塗布する塗布機構を用いている（特許文献１参照）。塗布チップは１回塗布ごとに自動洗浄機構により洗浄されるが、たとえば専用洗剤に９０秒間浸漬し、流水に浸した後風乾するといった手順で行われる。

なお、１９９６年にアメリカＣＤＣが提唱したガイドライン「スタンダードプレコーション（標準予防策）」により、すべての患者検体は感染性物質として扱うという考えかたが広まっており、検体の付着した塗布チップの滅菌処理も重要視されるようになってきている。
特開平２−１２６１５１号公報 小阪昌明ほか「多発性骨髄腫の診断プロトコル」、Ｍｅｄｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ第３０巻１号ｐ６〜１７、医歯薬出版社、２００２年 ＪＩＳ Ｋ ３８３７：１９９５「酢酸セルロースアセテート膜自動電気泳動装置」（２００２年確認） 「デンシトメトリーおよびデンシトメーター」、電気泳動学会、１９８０年、ｐ１２〜１４

免疫グロブリン分泌細胞の単クローン性増殖の結果として産生されたＭ蛋白を含む血清は、粘ちょう度が高いことが多く、洗浄操作を行っても塗布チップにこびりついたまま落ちないことがあった。洗浄操作によって落ちないＭ蛋白は、ブラシ等で物理的にこすり落とすか、たとえば次亜塩素酸ナトリウムのような強力な洗浄剤を用いて溶解させる必要があったが、塗布チップは精密な構造のため破損しやすく、強力な洗浄剤によって劣化するおそれがあった。

また、ブラシによる洗浄は感染性物質の飛散の危険性があり、強力な洗浄剤の人体への影響も無視できないため、自動洗浄機構に頼りがちとなり、充分な洗浄がなされない結果、汚れだけでなく感染性物質が残るおそれがあった。

本発明は、紙の毛細管現象を利用して試料を吸引することにより、安価で使用後は焼却可能な使い捨て塗布器を用いた塗布機構を持つ自動電気泳動装置を提供する。

使い捨て塗布器の形状は、一定の長さと間隔、例えば８ミリメートルの直線を２ミリメートルの間隔をあけて直列に塗布できるものであればよく、望ましくは図１に示したような櫛型である。紙は検体を毛細現象にて吸引するのに必要な厚さであればよく、望ましくは０．３ミリメートル乃至０．７ミリメートルである。当該塗布器は、必要な検体数だけ簡単に切り離すことができるようミシン目を入れてあるが（図２）、ミシン目はなくてもよく、日常使用するハサミ等でも簡単に切り離すことができる。

使い捨て塗布器は、着脱簡易な状態で自動泳動装置の血清塗布機構に装着されているので、使用後は使い捨て塗布器のみを外し新しい紙製使い捨て塗布器を装着することで次々に塗布ができる。

なお、着脱簡易な状態とは、たとえば、血清塗布機構に固定されたばね式の保持具に挟んだ状態である（図３、図４）。保持具の挟み込み部が直線状であれば、櫛の先端を一直線に配置することができるので、使い捨て塗布器の装着と同時に、複数試料の分画パターンの再現性を確保することもできる。

また、使い捨て塗布器を装着した保持具を複数設置することによっても、次々に塗布するようにできる。

安価なため患者検体が付着した使用済塗布器を使い捨てにできるようになり、塗布装置に汚れや感染性物質が残ったり周囲に飛散したりする危険性がなくなった。使用済紙製使い捨て塗布器は軽くかさばらず、簡単に焼却処分することが可能となり、衛生上および感染防御上の問題も解決した。

紙製使い捨て簡易塗布器の形状を図１、図２に示した。図３に保持具として着脱簡易なばね式保持具を装着した場合を示した。図４に、従来の塗布チップの代わりに保持具を装着した簡易塗布器を設置した状態を示した。

以下の方法で血清蛋白分画を行った。全自動電気泳動装置ＡＬＣ−７６０（常光製）に、従来の塗布チップのかわりに使い捨て塗布器を図４のように設置し、全自動蛋白分画測定を行った。結果を図５に示した。

紙製使い捨て簡易塗布器の平面図である。 紙製使い捨て簡易塗布器に入れるミシン目を点線で表した平面図である。 保持具を装着した紙製使い捨て簡易塗布器の全体図である。 自動電気泳動装置に設置した、保持具を装着した紙製使い捨て簡易塗布器の模式図である。 実施例の結果得られた蛋白分画像の写真である。

符号の説明

１ 紙製使い捨て簡易塗布器
２ 保持具
３ ばね
４ 上下機構

Claims (2)

1. 緩衝液で湿潤させた支持体上に１または複数の検体を同時に一定量塗布する機構を持つ自動電気泳動装置であって、検体を毛細現象にて吸引するのに必要な厚さの１枚または２枚の紙を櫛型に形成した使い捨て塗布器を、前記血清塗布機構に着脱簡易な状態で装着し、用いる装置。
2. 櫛の先端を区切る切れ込み部分の延長線上または櫛の切れ込みの先端同士を結ぶ位置もしくはその両方に、折り線またはミシン目を入れてなる使い捨て塗布器を用いる請求項１の装置。

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