JP2020529606A - スキンケアに適用するための側方流動分析及び装置 - Google Patents
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Abstract
Description
a) 前記テストサンプルを採取する際に使用する分離綿材200、301、該綿材は、支持部材202に付着したサンプルコレクションパッド201、101を有し、及び
b) 前記分離綿材を受け入れ、かつこれを保持するように構成された側方流動分析装置、
からなる診断キットを提供することである。
a)本明細書で定義したサンプルコレクションパッド201を有する分離綿材202を提供するステップ、該サンプルパッドは、前記分離綿材を使用した、対象の皮膚表面から採取したテストサンプルを有し、
b)前記テストサンプルを有するサンプルコレクションパッドからなる綿材を、分離綿材を受け入れるように構成された側方流動分析装置に挿入するステップ、
c)側方流動分析を進めるステップ、
からなる方法を提供することである。
a)前記テストサンプルを採取するために使用するように構成された、支持部材202に付着させたサンプルコレクションパッド201、101を有する分離綿材200、301と、
b)前記分離綿材を受け入れ、保持するように構成された側方流動分析装置300、
から構成されている。
a) 本明細書で定義したサンプルコレクションパッド201を有する分離綿材200を提供するステップ、ここで該サンプルパッドは、前記分離綿材を使用して、対象の皮膚表面から採取したテストサンプルを有し、
b) 前記テストサンプルを含むサンプルコレクションパッドからなる綿材を、該分離綿材を受け入れるようにした側方流動装置に挿入するステップ、
c) 側方流動分析を進めるステップ、
から構成される。
a) サンプルコレクションパッド201からなる綿材200を使って、対象の皮膚表面からテストサンプルを採取し、
b) 前記テストサンプルを含むサンプルコレクションパッドからなる綿材を、前記分離綿材を受け入れるように構成された側方流動分析装置に挿入するステップ、
c) 側方流動分析を進めるステップ、
から構成される。
a) 前記テストサンプルを採取するにあたり使用するように構成された分離綿材200、301、該綿材は、支持部材202に付着したサンプルコレクションパッド201、101を有し、
b) 前記分離綿材を受け入れ、保持するように構成された側方流動分析装置300、とから構成される。
a)先行アイテムのどれかに定義したサンプルコレクションパッド201からなる分離綿材200を提供するステップ、該サンプルパッドは、前記分離綿材を使用した、哺乳類の皮膚表面から採取したテストサンプルであり、
b)前記テストサンプルを有するサンプルコレクションパッドからなる綿材を、先行アイテムのどれかに定義したように、分離綿材を受け入れるように構成された側方流動分析装置に挿入するステップ、
c)側方流動分析を進めるステップ、
からなる。
「サンプルパッド材及び処理」
「例1 サンプルパッド材のインビトロテスト」
サンプルコレクション材として異なる材料をテストした。
サンプルを採取し、取り除く最良材料のインビトロテストを行った。80μlの標準的なタンパク質溶液(2ng/ml IL8、4ng/ml IL 1A、8ng/ml IL 1RA組み換えたんぱく質を含むPBS)をピペットでパラフィルムに乗せ、1×1cmの異なるサンプルパッド材(ブロック及び非ブロック)を使って吸収させた。サンプルパッドを室温で5分、インキュベートし、SELFカセットに挿入し、FibroTxサンプルパッド担体(透明なプラスチック片、サンプルパッドは取り除いた)で被覆し、カセットを閉じ、80μlのランニングバッファ(PBS +1% Tween20)を塗り、20分継続した後、Qiagen ESEQuant LR3側方流動リーダーで結果を読み取った。信号強度の結果はmVで示した。
インビボテストのために、インビトロ結果に基づいた最良材を選択した。即ち、皮膚でテストするために、C083、C048(2層)、111(2層)、222(全てブロック)を選択した。最初のFibro Tx サンプルパッド(C095、非ブロック)も含めた。
皮膚の上にサンプルパッドを置き、Fibro Txサンプルパッド包帯で被覆した(サンプルパッドは取り除いた)。90μlのPBSを添加し、サンプルパッドを15分、皮膚の上でインキュベートした。サンプルパッドをカセット(パッド担体を含んだ)に挿入し、80μlのランニングバッファ(PBS +1% Tween20)を添加し、20分継続した後、Qiagen ESEQuant LR3側方流動リーダーで結果を読み取った。信号強度の結果はmVで示した。太陽に晒された領域(額)と晒されていない領域(腕の内側)の皮膚を平行してテストした。
この材料のために、2つの異なるブロッキングバッファをテストした。
・より単純な溶液 1% BSA+PBS
・より複雑な溶液 10mM Borate、3% BSA、1% PVP-40 、0.25% Triton-X100、 pH8.0
皮膚上でサンプルパッドをインキュベートすることにより、又は、皮膚上でサンプルパッドを拭き取る(拭く/こする)ことにより、バイオメーカーのサンプルを得ることが出来る。これらの方法は、顧客からのサンプル採取を単純化し、全テスト時間を短縮する目的で、拭き取りを使うことが出来るかどうかを比較するためのものである。
サンプルパッドを皮膚の上でインキュベートすることによるサンプル採取
サンプルパッド(C083 ブロック)を皮膚に載せ、Fibro Txサンプルパッド包帯で被覆する。アクチベーションバッファ(PBS)を2滴添加し、サンプルパッドを10分間皮膚に載せておく。
志願者は、次の指令を与えられた。即ち、サンプルパッド上にPBSを2滴添加し、担体付きパッドを包帯から取り除き、サンプルパッドを皮膚上で異なる2つの方法(サンプルパッド領域の両面はさわらない)で擦る。
a) サンプルコレクション領域をZ形状に移動させて拭く
b) サンプルコレクション領域を円形状に移動させて、約5cm領域内で5秒間拭く。
美容上の目的で、サンプル採取を拭き取る方法を選んだ。この方が、顧客にとって、サンプル採取を大幅に時間が短縮でき、単純化したからである。
サンプルパッドにPBSを2滴添加し、次の3つの方法で皮膚上で拭き取った。
・ サンプルコレクション領域をZ形状に移動させて拭く
・ サンプルコレクション領域を円形状に移動させて、約5cm領域内で5秒間拭く。
・ サンプルコレクション領域を円形状に移動させて、約5cm領域内で30秒間拭く。
5分間拭き取りは、Z形状移動の拭き取りと比較して、皮膚から2倍多く材料を得た。より長い時間(30秒)拭き取りは、よりいっそう多くの量を得たが、10秒以上拭き取ると、サンプルパッド材が砕かれ(顧客による拭き取りの強さ及び圧力に依存して)るので、機能テストには向かない。
SELFテスト前に皮膚の処置/洗浄する効果を分析して、該処置後に皮膚にSELF包帯を付けるまでに必要な時間を決める。
mQ水/エタノールで湿潤した或いは、コスメティックワイプで湿潤したコットンパッドで、腕内側を拭く。
a) 主にIL 1RAレベルで、最大の効果を狙って70%のエタノールで洗浄
b) IL 1Aと IL 1RAの右は全ての処理で少し減った(IL 8は健康な皮膚からは検出されなかった)。
c) 5分後、IL 1Aと IL 1RAのレベルは復帰したように見える。
d) 皮膚テスト前に、顧客は、自分の通常のスキンケアルーチンを行うことが出来る。即ち、通常の洗浄を行い、通常のクリーム/ローション/セラム等をぬる。
e) 皮膚テスト前3日間は、強い日光浴、ケミカル/メカニカルピーリング等の、肌にとって極端な手順(それが研究の本質により要求されない限り)をしないとは言わないが、肌テスト中は、結果に影響が出るかもしれないので、オイリーなクリーム/セラム/ローションを多くつけることや、激しいメイク(例えば、コンシーラー、メイクアップクリーム、コンパクトパウダー等)をつけないように忠告される。
Claims (22)
- 1. 哺乳類の皮膚表面から採取したテストサンプル内に1以上のテスト分析物が存在するかどうかを検出し、又はその量を検知する診断用キットであり、該診断キットは、
a) 前記テストサンプルを採取するにあたり使用するように構成された分離綿材200、301、該綿材は、支持部材202に付着させたサンプルコレクションパッド201、101を有し、
b) 1以上の多孔性要素からなり、前記分離綿材を受け入れ、保持するように構成された側方流動分析装置300、とから構成され、
前記サンプルコレクションパッド201、101は、前記綿材200、301が側方流動分析装置300に挿入されたとき、多孔性支持アセンブリ100の一部を形成するように構成される。 - 前記支持部材202の末端部204の一端に切り込み206を有しており、前記側方流動装置は、前記綿材が該側方流動装置に挿入された時、前記支持部材の末端部を方向付け、位置決めするように構成された湾曲部303を有していることを特徴とする、請求項1記載の診断キット。
- 前記分離綿材200は、前記支持部材202の末端部204の端部上に、またはその近くに切り込み206を有しており、前記側方流動装置300は、支持部材上で切り込み206とぴったり合う湾曲部303を有しており、これにより、前記綿材200のサンプルコレクションパッド201、101は、該側方流動装置300に挿入された際、多孔性支持アセンブリ100の一部を形成することを特徴とする、請求項1又は2記載の診断キット。
- 前記支持部材202の末端部204は、開口部205を有しており、前記サンプルコレクションパッド201、101は記支持部材202に付着して、サンプルコレクションパッドが該開口部205を被覆することを特徴とする、請求項1〜3記載の診断キット。
- 前記側方流動装置は、前記綿材の前記開口部205と並ぶように構成された開口部304を有し、該綿材が側方流動装置に挿入された際、サンプルコレクションパッド201、101が、前記開口部304を介して露出することを特徴とする、請求項1〜4記載の診断キット。
- 前記支持部材202は、該支持部材の長手軸に沿って柔軟であることを特徴とする、請求項1〜5記載の診断キット。
- 前記支持部材202は柔軟性を有する材料でできており、テストサンプルを採取するために前記サンプルコレクションパッド201、101を皮膚に対して押圧し、該皮膚上で動かすと、支持部材202がわずかに撓むことを特徴とする、請求項1〜6記載の診断キット。
- 前記支持部材202は、プラスチック材で作られ、該プラスチック材の厚みは、1mm未満等の、約2mm未満であることを特徴とする、請求項1〜7記載の診断キット。
- 前記支持部材は、フィンガーグリップとして構成された近端部203を有しており、反対側の末端部204には、前記サンプルコレクションパッド201、101が付着されることを特徴とする、請求項1〜8記載の診断キット。
- 前記サンプルパッド201、101は、ニトロセルロース、ポリエーテルスルホン、ポリエチレン、ナイロンポリフッ化ビニリデン(PVDF)、ポリエステル、ポリプロピレン、グラスファイバー、コットン、クロス等の、セルロース材やセルロース誘導体でできており、随意的にサンプルパッド201、101は、ブロッキングバッファで前処理することを特徴とする、請求項1〜9記載の診断キット。
- 前記サンプルコレクションパッド201、101を、1%BSAからなるPBSバッファ、又は10mMホウ酸塩、3%BSA 、1%PVP-40、0.25%トリトンX100 pH8.0からなるバッファ等の、ブロッキングバッファを使って前処理することを特徴とする、請求項1〜10記載の診断キット。
- 前記サンプルコレクションパッド201,101は、2枚のシートからなる層等の、1以上のシートからなる層の形を有していることを特徴とする、請求項1〜11記載の診断キット。
- 前記サンプルコレクションパッド201、101の厚さは、1~0.80mm等の2mm未満、好ましくは、0.95mm未満等の、1mm未満、例えば、0.85~0.80mm等の0.85mm以下であることを特徴とする、請求項1〜12記載の診断キット。
- 前記サンプルパッド201、101は、2枚のシートからなる層の形を有しており、各シートの厚みは、0.49mm~0.40mm等の、0.50mm未満であることを特徴とする、請求項1〜13記載の診断キット。
- 前記側方流動装置は、前記サンプルコレクションパッド201、101、301の側方流動装置内での位置が確実になるように、前記綿材の前記末端部を受け入れるように構成されたサンプルパッドスロット306を有していることを特徴とする、請求項1〜14記載の診断キット。
- 前記側方流動装置は、前記綿材の末端部を保持し、前記サンプルコレクションパッド201、101からなる綿材の末端部の位置を確実にするように構成された保持部材302を有し、該保持部材302は、前記綿材の末端部上で折りたたまれ、側方流動装置の本体にロックされると共に、該保持部材302は、前記開口部304を有していることを特徴とする、請求項1〜15記載の診断キット。
- 前記側方流動装置は、前記綿材に付着した前記サンプルコレクションパッドと結合した時、多孔性支持アセンブリ100を形成するように構成され、該サンプルコレクションパッドと結合した該側方流動装置300は、溶出ゾーン101、結合パッド102の形である、結合ゾーン及び検知領域DA、随意的に吸い上げパッド104からなり、該検知領域DAは、1以上のテスト分析物を選択的に保持する1以上の親和性分子有する検知ゾーン105、及び随意的に1以上のインジケータ親和性分子を選択的に保持する1以上の親和性分子を有するインジケータゾーン106、及び随意的に検知領域DAを視覚的に検知するように構成された反応窓305から構成されることを特徴とする、請求項1〜16記載の診断キット。
- 1以上のテスト分析物の存在又は量を検知する方法であって、該方法は、
a)先行クレームのどれかに定義したサンプルコレクションパッド201からなる分離綿材200を提供するステップ、該サンプルパッドは、前記分離綿材を使用して、人間等の、哺乳類の皮膚表面から採取したテストサンプルであり、
b)前記テストサンプルを有するサンプルコレクションパッドからなる綿材を、先行クレームのどれかに定義したように、分離綿材を受け入れるように構成された側方流動分析装置に挿入し、随意的に、前記側方流動装置に挿入されたサンプルコレクションパッドにランニングバッファを添加するステップ、及び
c)側方流動分析を進めるステップ、
からなる。 - ブロッキングバッファを使ってサンプルコレクションパッド201、101を前処理し、該ブロッキングバッファは、1%BSAからなる、PBSバッファ、又は10mMホウ酸塩、3%BSA、1%PVP-40, 0.25%トリトンX100 pH8.0からなるバッファであることを特徴とする、請求項18記載の方法。
- 前記サンプルコレクションパッド201、101を、サンプルを採取する前にプリウェットすることを特徴とする、請求項18〜19記載の方法。
- 前記テスト分析物は、IL‐8、IL‐1a、IL‐1RAであることを特徴とする、請求項18〜20記載の方法。
- 更に、d)検知領域DAの画像を取り込み、該画像を、画像処理装置及びデータベースからなるコンピュータシステムに送信するステップを有しており、画像特徴を該画像処理装置により抜き出し、該画像特徴をデータベースに記憶し、該コンピュータシステムは、この画像特徴に基づいて少なくとも1つの出力データを生成し、画像を取り込むように構成された携帯電話等の、モバイル機器を使用して画像を取り込むと共に、コンピュータシステムにより生成された出力データを前記モバイル機器に伝送することを特徴とする、請求項18〜21記載の方法。
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