JP4510381B2 - 水溶性でカチオン性のポリチオフェン誘導体を使用する、負に荷電したポリマーの検出 - Google Patents
水溶性でカチオン性のポリチオフェン誘導体を使用する、負に荷電したポリマーの検出 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4510381B2 JP4510381B2 JP2002579498A JP2002579498A JP4510381B2 JP 4510381 B2 JP4510381 B2 JP 4510381B2 JP 2002579498 A JP2002579498 A JP 2002579498A JP 2002579498 A JP2002579498 A JP 2002579498A JP 4510381 B2 JP4510381 B2 JP 4510381B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polymer
- monomer
- reaction mixture
- nucleic acid
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 0 **C1(CC(CCC2=C*C=C2)CC1)C1CCC1 Chemical compound **C1(CC(CCC2=C*C=C2)CC1)C1CCC1 0.000 description 2
- ONGAZDFLYZYPBO-STVSHKFMSA-N CC[C@](C)(CC[C@H](C)CCOC[C@@]1(C)CC(C)CC1)O Chemical compound CC[C@](C)(CC[C@H](C)CCOC[C@@]1(C)CC(C)CC1)O ONGAZDFLYZYPBO-STVSHKFMSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
- C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
- C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D333/30—Hetero atoms other than halogen
- C07D333/32—Oxygen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D409/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
- C12Q1/6825—Nucleic acid detection involving sensors
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Polyoxymethylene Polymers And Polymers With Carbon-To-Carbon Bonds (AREA)
Description
を有するチオフェンモノマーからなるカチオン性で水溶性のポリマーの合成及び使用に関する。
a)負に荷電したポリマーに相補的な標的を、チオフェンポリマーと接触させ、二本鎖を形成する工程;
b)前記二本鎖を、負に荷電したポリマーと接触させる工程;及び
c)負に荷電したポリマーの存在の指標として、荷電、蛍光、または発色の変化を検出する工程;
を含む、負に荷電したポリマーの存在の検出方法を含む。
a)第一の核酸に相補的な標的を、チオフェンポリマーと接触させ、二本鎖を形成する工程;
b)前記二本鎖を、第一の核酸と接触させ、特異的なハイブリダイゼーションを生成する工程;
c)前記二本鎖を、第二の核酸と接触させ、非特異的なハイブリダイゼーションを生成する工程;及び
d)荷電、蛍光、または発色の変化を検出する工程;
を含む、少なくとも一つのヌクレオチドによって第一の核酸とは異なる第二の核酸から、第一の核酸を識別する方法を含む。
水溶性で、カチオン性で、電気的に活性で、光学活性なポリ(3−アルコキシ−4−メチルチオフェン)の調製のための好ましい合成スキームが以下に示される。
水酸化ナトリウム(0.4g、15mmol)を、50mLのDME中のN,N−ジエチルプロパンアミン(2.0g;15.2mmol)の溶液に、窒素下で0から10℃の間で加え、生成した混合物を環境温度で20分間攪拌した。20mLのDMA(20mL)に溶解した3−ブロモ−4−メチルチオフェン(2.0g、11.3mmol)と、CuI(1.07g、5.65mmol)を反応混合物に加えた。その後反応混合物を95℃で一晩窒素下で攪拌し、塩化メチレンで希釈し、濾過した。有機相を水で3回洗浄し、MgSO4で乾燥し、蒸発させた。粗産物を、溶出液としてCH2Cl2を使用し、その後MeOHを使用して、シリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製した。
1−ブロモエタン(6mL、80.4mmol)を、60mLのアセトニトリル中の化合物3(0.4g、1.8mmol)の溶液に加えた。反応混合物を窒素下で70℃で3日間攪拌した。アセトニトリルの蒸発後、粗産物を無色のパウダーとして酢酸エチルから結晶化した。
1−メチル−イミダゾール(1.0mL、12.3mmol)を、CH3CN(35mL)中に溶解した産物4(0.54g、2.46mmol)の溶液に加えた。精製した反応混合物を、70℃で2日間攪拌した。溶媒の蒸発後、粗産物を暖かい酢酸エチルで二度、室温でジエチルエーテルで二度洗浄し、純白の固体の化合物としてモノマー2を得た。
メタンスルホニルクロリド(2.4mL;31.2mmol)を、ジクロロメタン(50mL)中の3−チオフェンエタノール(2.0g;15.6mmol)とトリエチルアミン(4.3mL;31.2mmol)の溶液に滴下した。反応混合物を室温で2時間攪拌した。有機相をNaHCO3溶液で洗浄し、引き続き水で数回洗浄し、最後にMgSO4で乾燥し、濃縮した。粗産物を、溶出液としてCH2Cl2/ヘキサン(1/1)を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、化合物6を得た(59%):
窒素下のクロロホルム(23mL)中の三塩化鉄(0.94g、5.8mmol)の溶液に対して、クロロホルム(15mL)中のモノマー1(0.487g、1.4mmol)の溶液を滴下した。混合物を室温で2日間攪拌した。反応混合物を蒸発させて乾燥し、粗産物をメタノールで迅速に洗浄し、過剰なアセトンに溶解し、過剰な塩化テトラブチルアンモニウムまたは臭化テトラブチルアンモニウムの添加により沈降した。暗赤色のポリマーをメタノール中に溶解し、数滴のヒドラジンの添加により脱ドープ処理した。最終溶液を蒸発させた。生成ポリマーを、アセトン中の塩化テトラブチルアンモニウムまたは臭化テトラブチルアンモニウムの飽和溶液で数回洗浄し、6時間に亘りアセトンでSoxlet抽出し、次いで減圧下で乾燥し、ポリマー1を得た(0.32g、66%)。
i)合成オリゴヌクレオチド
クォーツUVキュベットにおいて、100μL(7.47×10−8の正の荷電の繰り返し単位(RU))のポリマー2の溶液を、0.1MのNaClまたは10Mmのトリスバッファープラス0.1MのNaCl(pH=8)のそれぞれを含む水溶液(3mL)に加えた。混合物を5分間55℃に加熱し、黄色の出現物を得た。次いで12μL(7.47×10−8の負の荷電のRU)のオリゴヌクレオチド溶液(キャプチャープローブ)を加え、生成した赤色の溶液をさらに5分間55℃で維持した。適切なオリゴヌクレオチド標的を、55℃で5分間かけて溶液に加えた。最終の黄色はポジティブの結果を示し、完全なハイブリダイゼーションが生じたことを意味する。他方で、赤色または赤ピンク色は、それぞれ特異的なハイブリダイゼーションが存在しないこと、または部分的なハイブリダイゼーション(二つのミスマッチ)を示す(それぞれ図1−3)。
PCR産物から得たアンプリコン(二本鎖149塩基対)を、Qiagen社により市販されている<QIAquick>によって事前精製した。H2O(90μL)を遠心チューブに加え、次いで6.7μL(5.03×10−9molの正の荷電)のポリマー2の溶液を加え、次いでオリゴヌクレオチドキャプチャープローブY1(2μL;5.03×10−9molの負の荷電)を加え、最後に1MのNaCl(20μL)を加えた。生成した混合物を50℃で10分間加熱した。精製したPCR産物を新たに変性し、冷水で冷却し、次いで前述の溶液に加えた。ハイブリダイゼーション反応を50℃で35分間維持し、発色の変化を視覚的またはUV測定によって観察した(図4)。
蛍光測定計を使用することを除いて、光学的検出について記載されたものと同様の方法を使用した。「二本鎖」(正に荷電したポリマーとオリゴヌクレオチドキャプチャープローブの間の会合)の蛍光強度は、凝集形態のポリマーの蛍光クエンチング特性のため、弱いまたは有意ではなかった(実質的にゼロ)。完全なハイブリダイゼーションが生じた場合、蛍光シグナルはより有意となる(図7)。
ハイブリダイゼーションの電気化学的試験を、コントロールブランクと関連させて実施した。60μL(1.44×10−8molの負の荷電)のキャプチャーオリゴヌクレオチドY1を、環境温度で5分間アミノ化ITO電極(S=50mm2)に沈着させた。水で洗浄後、60μL(1.44×10−9molの負の荷電)の標的オリゴヌクレオチドX1を加え、ハイブリダイゼーションを55℃で20分かけて実施した。次いで電極を10分かけて室温に冷却し、0.3MのNaCl、0.03MのNaOAc、及び0.1%のSDS(pH7)及び水で二度洗浄した。100μL(1×10−8molの正の荷電)のポリマー1または2の溶液を5分間変性電極に広げ、次いでCH3CN/H2O(1/4)及び水で洗浄した。サイクル電流電圧測定を、水性0.1MのNaCl溶液で実施した(図10及び11)。
i)ITO電極に対するDNAプローブの共有結合(ポリマー2)
ITOスライドを、ヘキサン(10分)、メタノール(10分)、及び超純水(10分)でソニケートし、次いで40℃で30分の期間、王水溶液(H2O2/H2O/NH4OH,1/5/1)で処理した。生成したスライドを水で迅速に洗浄し、次いで水中及びアセトン中でソニケートし、空気、窒素またはアルゴンで乾燥し、110℃で2から10分加熱した。これに引き続き、スライドを3時間不活性雰囲気下で、5%メルカプトプロピルトリメトキシシランを含む酸性化エタノール溶液(95%エタノール中の1mM酢酸)に浸液し、引き続き新鮮なエタノール(95%)及び超純粋滅菌水でソニケートした。最後にスライドを110℃で少なくとも1時間加熱し、室温に冷却し、その後DNAで変性した。
50μLのRC−DNA(Y1)またはプローブX1(ブランク試験)(2×SSC中に25μM)を、DNAスポットに沈着する。次いでスライドを加湿環境で55℃で約3時間加熱し、次いで15分間室温に冷却する。非反応DNAを流し、スライドを2×SSC、NaCl(0.1M)で洗浄し、1×SSC+0.1%Tween20で洗浄し、NaCl(0.1M)で洗浄する。
ポリマー2を電極に沈着する。スライドを室温で5分間ポリマー2の溶液(0.01MのNaCl中に10−4Mの2mL)に垂直に浸液する。次いでスライドを2mLのNaCl溶液(0.01M)に浸し、次いで2mLのCH3CN/H2O(1/4)溶液に浸し、最後に2mLのNaCl溶液(0.01M)に浸す。
30μLのY1(2.5μM/0.1MのNaCl)を、ITO電極の表面に配置されたハイブリダイゼーションチェンバーに挿入する。スライドを加湿環境で55℃で約2時間加熱し、次いで室温に冷却する。ハイブリダイゼーションチェンバーを除去し、スライドを0.1MのNaCl溶液で洗浄し、最後にアルゴンで乾燥する。
ポリマー3を電極に沈着する。30μLのポリマー3の水溶液(10−4M)を、ITO電極の表面に配置されたハイブリダイゼーションチェンバーに挿入する。スライドを55℃で20分加熱する。ハイブリダイゼーションチェンバーを除去し、スライドを0.8MのNaCl溶液の第一の部分で55℃で洗浄し、次いで新たな部分で室温に冷却しながら洗浄する。最後にスライドを0.1MのNaCl溶液で室温ですすぐ。
金スライドを、ヘキサン、メタノール、及び水で連続的にすすぐ。次いでプレートを約15分の期間ピラナフ(pyranah)溶液(H2O230%/H2SO4濃縮/;30/70)で処理する。次いでスライドをナノピュア滅菌水で徹底的に洗浄し、アルゴンで乾燥する。
本発明に記載されたポリマーは、負に荷電した分子、特に核酸に対して高いアフィニティーを有する。さらに、それら水溶液に可溶性であり、広範囲の温度で非常に安定である。それ故、これらの特性を、核酸及び他の負に荷電した分子の精製に使用することが可能である。クロマトグラフィー分離は、以下の工程を含むであろう:(1)ポリマーを固定化する工程;(2)静電的相互作用が分析物とポリマーの間で可能なような条件下で、固定化したポリマーで分離されるように分析物を適用する工程;及び(3)分析物とポリマーの間の静電的相互作用が離れる条件を適用することによって、分析物を溶出する工程。
精製され、in vitroで転写され、ポリアデニル化された、NAC1をコードするArabidopsis thaliana遺伝子のメッセンジャーRNAをStratageneから購入した。完全にマッチした相補的DNAオリゴヌクレオチドN1(5' CGAGGCTTCCATCAATCTTA 3')を、Perkin-Elmer 391合成器でホスホルアミダイト化学により合成した。非関連のY2DNAオリゴヌクレオチドを同様な態様で得た。全ての試薬、及びRNAと接触される液体操作材料を、RNアーゼフリーであることを確認し、またはRNアーゼを不活性化するためにジエチルピロカルボナートで処理した(J. Sambrook及びD. W. Russel, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, CSHL Press, 2001)。検出器に100ボルトを適用し、420±10nmで励起セットで、530±5nmで蛍光放射を測定して、Variant Cary Eclipse分光光度計で42.5℃で蛍光測定を実施した。
Claims (27)
- 式中、
a)「m」=3であり;
b)R*は+NEt3であり;
c)Yは酸素原子であり;及び
d)R1はメチル基である
請求項1に記載のモノマー。 - 請求項1から9のいずれか一項記載のモノマー単位を複数含む多分散ポリマー。
- 前記ハロゲン化銅がCuIである、請求項11に記載の方法。
- 前記酸化剤がFeCl3またはK2S2O8である、請求項16に記載の方法。
- R1がメチル基であり、前記ポリマーが部位規則的で水溶性である、請求項16に記載の方法。
- 前記ポリマーが熱安定性であり、請求項18に記載の方法。
- 請求項16から18のいずれか一項記載の方法から得られるポリマー。
- 請求項1に記載の繰り返しチオフェン部分を含む正に荷電した多分散ポリマーの荷電、蛍光、または発色の変化を検出することによる、核酸の存在を検出するための、請求項1に記載の繰り返しチオフェン部分を含む正に荷電した多分散ポリマーの使用。
- 前記正に荷電したポリマーが、前記核酸に相補的な標的と反応させられる、請求項21に記載の使用。
- 前記正に荷電したポリマーが、前記相補的な標的にイオン的に結合されている、請求項22に記載の使用。
- 前記核酸に相補的な標的が固体の支持体に結合され、次いで前記核酸が前記相補的な標的と反応させられ、前記固体の支持体によってその捕獲が生じて複合体が形成され、次いで前記正に荷電したポリマーが、前記相補的な標的と前記核酸との前記複合体と反応させられる、請求項21に記載の使用。
- 前記核酸に相補的な標的が固体の支持体に結合され、次いで前記正に荷電したポリマーが前記相補的な標的と反応させられ、前記固体の支持体によってその捕獲が生じて複合体が形成され、次いで前記核酸を、前記相補的な標的と前記正に荷電したポリマーとの前記複合体と反応させられる、請求項21に記載の使用。
- 前記固体の支持体が、電極、光ファイバー、ガラススライド、及びガラスビーズからなる群から選択される、請求項24または25に記載の使用。
- 核酸の精製のための、請求項24から26のいずれか一項に記載の使用。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US28137101P | 2001-04-05 | 2001-04-05 | |
US28418401P | 2001-04-18 | 2001-04-18 | |
US28844201P | 2001-05-04 | 2001-05-04 | |
PCT/CA2002/000485 WO2002081735A2 (en) | 2001-04-05 | 2002-04-05 | Detection of negatively charged polymers using water-soluble, cationic, polythiophene derivatives |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2004534013A JP2004534013A (ja) | 2004-11-11 |
JP4510381B2 true JP4510381B2 (ja) | 2010-07-21 |
Family
ID=27403221
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002579498A Expired - Fee Related JP4510381B2 (ja) | 2001-04-05 | 2002-04-05 | 水溶性でカチオン性のポリチオフェン誘導体を使用する、負に荷電したポリマーの検出 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US7083928B2 (ja) |
EP (2) | EP2404915A1 (ja) |
JP (1) | JP4510381B2 (ja) |
AU (1) | AU2002252868C1 (ja) |
CA (1) | CA2442860C (ja) |
WO (1) | WO2002081735A2 (ja) |
Families Citing this family (34)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4510381B2 (ja) * | 2001-04-05 | 2010-07-21 | ジェネオーム・サイエンシズ・カナダ・インコーポレーテッド | 水溶性でカチオン性のポリチオフェン誘導体を使用する、負に荷電したポリマーの検出 |
SE0201468D0 (sv) * | 2002-05-13 | 2002-05-13 | Peter Aasberg | Metod att använda luminescenta polymerer för detektion av biospecifik växelverkan |
US7144950B2 (en) | 2003-09-17 | 2006-12-05 | The Regents Of The University Of California | Conformationally flexible cationic conjugated polymers |
US7214489B2 (en) | 2002-06-20 | 2007-05-08 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for detection and analysis of polynucleotides using light harvesting multichromophores |
US9371559B2 (en) | 2002-06-20 | 2016-06-21 | The Regents Of The University Of California | Compositions for detection and analysis of polynucleotides using light harvesting multichromophores |
US10001475B2 (en) | 2002-06-20 | 2018-06-19 | The Regents Of The University Of California | Light harvesting multichromophore compositions and methods of using the same |
CN102021243A (zh) | 2002-08-26 | 2011-04-20 | 加州大学评议会 | 利用集光多发色团的多核苷酸的检测和分析的方法以及组合物 |
AU2004215006A1 (en) | 2003-02-13 | 2004-09-10 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for detection and analysis of polynucleotide-binding protein interactions using light harvesting multichromophores |
US20080050842A1 (en) * | 2003-02-15 | 2008-02-28 | Golovlev Valeri V | Method of visualization and quanitification of biopolymer molecules immobilized on solid support |
CA2430910A1 (en) * | 2003-06-03 | 2004-12-03 | Infectio Diagnostic (I.D.I.) Inc. | Optical sensors based on hybrid aptamer/conjugated polymer complexes |
DE112004001737B4 (de) | 2003-09-17 | 2016-08-11 | The Regents Of The University Of California | Verfahren umfassend lösliche, konjugierte Polymere zur Ausbildung benachbarter Schichten auf einem Substrat oder zum Hinzufügen einer Polymerschicht zu einem Substrat, mehrschichtige elektronische Vorrichtung und Verwendung in elektronischen Bauteilen |
US20070178470A1 (en) * | 2003-12-12 | 2007-08-02 | Infectio Recherche Inc. | System for charge-based detection of nucleic acids |
SE0401219D0 (sv) | 2004-05-10 | 2004-05-10 | Biochromix Ab | Metoder för detektera konformationsförändringar eller aggregering hos proteiner med hjälp av konjugerade polyelektrolyter |
WO2006029231A1 (en) | 2004-09-03 | 2006-03-16 | The Regents Of The University Of California | Soluble conjugated polymers |
DE112005002103T5 (de) | 2004-09-03 | 2007-07-26 | The Regents Of The University Of California, Oakland | Lösliche konjugierte Polymere verwendende Verfahren und Vorrichtungen |
CA2594458C (en) | 2005-01-10 | 2016-08-23 | The Regents Of The University Of California | Cationic conjugated polymers suitable for strand-specific polynucleotide detection in homogeneous and solid state assays |
WO2006074482A2 (en) | 2005-01-10 | 2006-07-13 | The Regents Of The University Of California | Methods and kits for strand-specific polynucleotide detection with cationic multichromophores |
US7666594B2 (en) | 2005-01-31 | 2010-02-23 | The Regents Of The University Of California | Methods for assaying a sample for an aggregant |
WO2006094101A1 (en) | 2005-03-01 | 2006-09-08 | The Regents Of The University Of California | Multilayer polymer light-emitting diodes for solid state lighting applications |
CA2598096C (en) * | 2005-03-03 | 2014-02-11 | National Research Council Of Canada | Methods and compositions for the detection and analysis of nucleic acids by signal amplification |
WO2007131354A1 (en) * | 2006-05-11 | 2007-11-22 | Universite Laval | Methods for detection of target on responsive polymeric biochips |
EP2164988B1 (en) | 2006-10-06 | 2016-02-17 | Sirigen Inc. | Fluorescent methods and materials for directed biomarker signal amplification |
EP2079750A1 (en) * | 2006-11-10 | 2009-07-22 | Agency for Science, Technology and Research | Dna complexing agents |
EP2217613A1 (en) | 2007-04-18 | 2010-08-18 | BioChromix AB | Binding of pathological forms of proteins using conjugated polyelectrolytes |
WO2009009889A1 (en) * | 2007-07-13 | 2009-01-22 | National Research Council Of Canada | Ultrasensitive detection of target using target-ready particles |
US20090215050A1 (en) * | 2008-02-22 | 2009-08-27 | Robert Delmar Jenison | Systems and methods for point-of-care amplification and detection of polynucleotides |
WO2009117798A2 (en) | 2008-03-24 | 2009-10-01 | Universidade Federal De Pernambuco - Ufpe | Fluorescent nanoparticle composites themselves, process for the preparation of such composites, and use in rapid diagnosis systems with affinity to biological molecules |
DE102008019928A1 (de) * | 2008-04-21 | 2009-12-31 | Siemens Healthcare Diagnostics Gmbh | Polyelektrolyt-Monoschichten mit kovalenten Bindungsstellen für optische Signalwandler |
WO2010151807A1 (en) | 2009-06-26 | 2010-12-29 | Sirigen, Inc. | Signal amplified biological detection with conjugated polymers |
CN103328532B (zh) | 2010-01-19 | 2016-05-25 | 赛里根Ii有限公司 | 用于定向生物标志信号放大的试剂 |
WO2016113622A1 (en) | 2015-01-12 | 2016-07-21 | Nanomark Pesquisa E Desenvolvimento Tecnológico Ltda | Magnetic nanocomposite retrieval of nucleotide sequence |
EP3356825A4 (en) | 2015-10-01 | 2019-04-03 | Richter Life Science Development AB | DETECTION OF MICROBIENT PEPTIDES |
WO2020218976A1 (en) * | 2019-04-25 | 2020-10-29 | Nanyang Technological University | Membrane protease-based methods for detection of bacteria |
CN116531848B (zh) * | 2023-06-26 | 2023-09-12 | 江苏奥凯环境技术有限公司 | 一种用于烟气净化的有色芳纶过滤材料及其生产工艺 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE1278348B (de) | 1965-10-09 | 1968-09-19 | Jakob Orttenburger Fa | Einrichtung zum Transport von mit stehenden Gasflaschen gefuellten Behaeltern auf Fahrzeugen |
DE1935558A1 (de) * | 1969-07-12 | 1971-01-28 | Hoechst Ag | Tiophenaether und Verfahren zu deren Darstellung |
KR20000067967A (ko) * | 1996-07-22 | 2000-11-25 | 진 이본 티모시 | 신규 자체 산-도핑된 고전도성 폴리티오펜 |
AU1328099A (en) * | 1997-11-21 | 1999-06-15 | Universite De Montreal | Assembly of polythiophene derivative on a self-assembled monolayer (sam) |
JP4510381B2 (ja) * | 2001-04-05 | 2010-07-21 | ジェネオーム・サイエンシズ・カナダ・インコーポレーテッド | 水溶性でカチオン性のポリチオフェン誘導体を使用する、負に荷電したポリマーの検出 |
-
2002
- 2002-04-05 JP JP2002579498A patent/JP4510381B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-04-05 US US10/474,230 patent/US7083928B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-04-05 EP EP11008084A patent/EP2404915A1/en not_active Withdrawn
- 2002-04-05 AU AU2002252868A patent/AU2002252868C1/en not_active Ceased
- 2002-04-05 EP EP02721888A patent/EP1373246B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-05 WO PCT/CA2002/000485 patent/WO2002081735A2/en active Application Filing
- 2002-04-05 CA CA2442860A patent/CA2442860C/en not_active Expired - Fee Related
-
2006
- 2006-03-07 US US11/370,158 patent/US7446213B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-10-07 US US12/247,058 patent/US7601503B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2009
- 2009-10-09 US US12/576,911 patent/US20100035272A1/en not_active Abandoned
-
2010
- 2010-07-16 US US12/838,337 patent/US7897348B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US7446213B2 (en) | 2008-11-04 |
EP1373246B1 (en) | 2012-09-12 |
US7601503B2 (en) | 2009-10-13 |
CA2442860C (en) | 2011-02-01 |
EP2404915A1 (en) | 2012-01-11 |
US20060160124A1 (en) | 2006-07-20 |
US7897348B2 (en) | 2011-03-01 |
US20090081684A1 (en) | 2009-03-26 |
WO2002081735A2 (en) | 2002-10-17 |
AU2002252868C1 (en) | 2008-04-17 |
AU2002252868B2 (en) | 2007-08-23 |
US20100035272A1 (en) | 2010-02-11 |
JP2004534013A (ja) | 2004-11-11 |
EP1373246A2 (en) | 2004-01-02 |
CA2442860A1 (en) | 2002-10-17 |
US20040171001A1 (en) | 2004-09-02 |
US20100294723A1 (en) | 2010-11-25 |
US7083928B2 (en) | 2006-08-01 |
WO2002081735A3 (en) | 2003-04-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4510381B2 (ja) | 水溶性でカチオン性のポリチオフェン誘導体を使用する、負に荷電したポリマーの検出 | |
AU2002252868A1 (en) | Detection of negatively charged polymers using water-soluble, cationic, polythiophene derivatives | |
Chen et al. | In situ hybridization chain reaction amplification for universal and highly sensitive electrochemiluminescent detection of DNA | |
Fan et al. | Detection of microRNAs using target-guided formation of conducting polymer nanowires in nanogaps | |
Cha et al. | DNA hybridization electrochemical sensor using conducting polymer | |
Ho et al. | Optical sensors based on hybrid aptamer/conjugated polymer complexes | |
Yu et al. | Electronic detection of single-base mismatches in DNA with ferrocene-modified probes | |
Yang et al. | A multicolor fluorescence nanoprobe platform using two-dimensional metal organic framework nanosheets and double stirring bar assisted target replacement for multiple bioanalytical applications | |
Peng et al. | Ultrasensitive fluorescent assay based on a rolling-circle-amplification-assisted multisite-strand-displacement-reaction signal-amplification strategy | |
JP2002510791A (ja) | インターカレート性のレドックス活性部分を使用する電気化学的センサ | |
Das et al. | Water‐soluble ionic polythiophenes for biological and analytical applications | |
Zhou et al. | Labeling-free fluorescent detection of DNA hybridization through FRET from pyrene excimer to DNA intercalator SYBR green I | |
Cheng et al. | Hairpin probes based click polymerization for label-free electrochemical detection of human T-lymphotropic virus types II | |
Navarro et al. | Automated synthesis of new ferrocenyl-modified oligonucleotides: study of their properties in solution | |
US20060228703A1 (en) | Displacement assay for the detection of nucleic acid oligomer hybridization events | |
JP2008201782A (ja) | 新規のターチオフェン‐3−カルボキシル酸化合物とその製造方法、該化合物をモノマーとした機能性電導性ターチオフェンポリマー、該ポリマーを利用したdnaハイブリダイゼーション検出方法、ならびにプローブdnaの製造方法 | |
Li et al. | Flourescent switch constructed based on hemin-sensitive anionic conjugated polymer and its applications in DNA-related sensors | |
Li et al. | Electrogenerated chemiluminescence aptasensor for ultrasensitive detection of thrombin incorporating an auxiliary probe | |
JP2003335846A (ja) | 新規の伝導性高分子、これを利用したセンサー及び標的物質検出方法 | |
JP4701176B2 (ja) | 遺伝子検出方法、及び挿入剤 | |
JP2003075402A (ja) | 核酸断片固定電極及びその利用 | |
LECLERC et al. | Patent 2442860 Summary | |
Burke | Aptamer Functionalized Electroactive Polymers for Detection of Biomolecules | |
Tansil | Design, synthesis, and application of electroactive reporters for nucleic acid biosensing | |
JP2006343156A (ja) | 遺伝子検出方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20050316 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20081202 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090226 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090305 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090602 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20090804 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20091203 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20100312 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100406 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100430 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130514 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140514 Year of fee payment: 4 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313117 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313117 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |