JP4469990B2 - 粒子凝集判定用容器 - Google Patents
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Description
底面が種々の傾斜角度(30°、45°、60°、75°)の斜面をなすロート状容器を準備した。一方、不溶性粒子としてガラスビーズ(UB67LRS;(株)ユニオン)をBSA含有PBS溶液に懸濁させた懸濁液を調製した。それぞれのロート状容器に上記懸濁液を分注してガラスビーズを沈殿させた。次に、懸濁液の上部にA型ドナー血漿100μLおよび0.5%に希釈したA型血球(Ortho社アファーマジェン)100μLを分注し、36G〜570Gにおいて5分間遠心を行い、陰性パターンを観察した。この結果を表1に示す。
図1に示すように、マイクロプレート11に開口部の直径が約1cm、斜面をなす底面13の傾斜角度が60°であるウェル12を複数形成した。一方、不溶性粒子として粒径約100μmのガラスビーズ(UB67LRS;(株)ユニオン)を、抗A或いは抗B血清を含むBSA含有PBS溶液に懸濁させて懸濁液を調製した。各懸濁液をそれぞれのウェルに分注した後、スペーサー14をウェル12内に挿入し、ウェル底面13とスペーサー14の下面との間の間隙に層状の流動性分離層15を形成した。このとき、流動性分離層15の上面がウェル底面13の傾斜が始まる位置とほぼ一致するように懸濁液の量を調整した。
実施例2と同様に、図1に示すように、マイクロプレート11に開口部の直径が約1cm、斜面をなす底面13の傾斜角度が60°であるウェル12を複数形成した。一方、不溶性粒子として粒径約100μmのガラスビーズ(UB67LRS;(株)ユニオン)を、BSA/PBS溶液に懸濁させて懸濁液を調製した。この懸濁液をそれぞれのウェルに分注した後、スペーサー14をウェル12内に挿入し、ウェル底面13とスペーサー14の下面との間の間隙に層状の流動性分離層15を形成した。このとき、流動性分離層15の上面がウェル底面13の傾斜が始まる位置とほぼ一致するように懸濁液の量を調整した。
実施例2、3と同様に、図1に示すように、マイクロプレート11に開口部の直径が約1cm、斜面をなす底面13の傾斜角度が60°であるウェル12を複数形成した。一方、不溶性粒子として粒径約100μmのガラスビーズ(UB67LRS;(株)ユニオン)を、抗ヒトグロブリン試薬(Ortho社)に懸濁させて懸濁液を調製した。この懸濁液をそれぞれのウェルに分注した後、スペーサー14をウェル12内に挿入し、ウェル底面13とスペーサー14の下面との間の間隙に層状の流動性分離層15を形成した。このとき、流動性分離層15の上面がウェル底面13の傾斜が始まる位置とほぼ一致するように懸濁液の量を調整した。
11…透明容器本体
12…検体収容部
13、13a、13b…底面
14…スペーサー
15…流動性分離層
16…凝集物
17…保持部
18…反応槽
19…小孔またはメッシュ
30…粒子凝集判定用容器
31…底部透明板状部材
32…上部透明板状部材
33…流動性分離層
35…凝集物
81…自動判定装置
82…マイクロプレート
83…蛍光管
84…光散乱板
85…CCDカメラ
86…画像処理回路
Claims (9)
- 抗体または抗原を含む検体と凝集用粒子との反応を含む凝集反応により生成する凝集物に基づいて免疫学的分析を行う粒子凝集判定用容器であって、互いに対向する内面どうしの間に層状の間隙を形成するようにそれぞれ傾斜して配置された底部透明板状部材および上部透明板状部材と、前記層状の間隙に形成された、凝集物を分離する不溶性粒子を含む流動性分離層とを具備したことを特徴とする粒子凝集判定用容器。
- 前記底部透明板状部材の内面の傾斜角度が、水平面から45°以上75°以下であることを特徴とする請求項1記載の粒子凝集判定用容器。
- 前記底部透明板状部材および前記上部透明板状部材の平面形状が、深部に向かうほど幅が狭くなる形状であることを特徴とする請求項1または2記載の粒子凝集判定用容器。
- 前記前記底部透明板状部材の内面が粗面化されていることを特徴とする請求項1ないし3のいずれか1項記載の粒子凝集判定用容器。
- 前記流動性分離層の厚さが0.5〜2mmであることを特徴とする請求項1ないし4のいずれか1項記載の粒子凝集判定用容器。
- 前記不溶性粒子が粒径25〜200μmのガラスビーズまたは架橋ポリマーであることを特徴とする請求項1ないし4のいずれか1項記載の粒子凝集判定用容器。
- 前記流動性分離層が抗血清を含むことを特徴とする請求項1ないし6のいずれか1項記載の粒子凝集判定用容器。
- 請求項1〜7のいずれか1項に記載の粒子凝集判定用容器を用いた凝集パターンの形成方法であって、
抗体または抗原を含む検体と凝集用粒子とを反応させる工程と、
反応後の検体および凝集用粒子を、前記判定用容器の上部から深部に向けて遠心力で移動させる工程と
を含み、
ここで前記移動工程が、前記反応後の凝集用粒子が前記流動性分離層において凝集パターンを形成するまで続けられることを特徴とする方法。 - 請求項8に記載の凝集パターンの形成方法であって、前記凝集パターンが、
(i)前記判定用容器の上部に、凝集した粒子が分布し、
(ii)前記判定用容器の深部に向かうほど、より凝集が弱い粒子が分布し、
(iii)前記判定用容器の最下部に、非凝集の粒子が分布する
ものであることを特徴とする方法。
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