JP4464048B2 - 血液細胞抗原および該抗原に対して指向される抗体の検出方法 - Google Patents
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Description
集は、例えば抗DをRh陽性テスト赤血球とインキュベートし、続いて抗ヒトグロブリン血清を添加することによって(間接クームス試験)誘発される。
* 単離された(単一)特性を有する赤血球(例えば特徴的な“D”のみを保持する細胞)を得ることが可能でないので、特異的抗体を識別するために、いくつかの(通常は11を越える)テスト赤血球(テスト細胞)を各検査につき使用する必要がある。
* 全ての検査方法は、標準化血小板が通常入手不能であるので労働集約型であり、さら
にエキスパートのみがその検査を実施できる。
(編), Springer-Verlag Berlin (1999), pp.603-609; New diagnostic methods in oncology and hematology, Huhn (編) Springer Verlag, Berlin, (1998), pp. 228-235; Minchinton and Waters, British Journal of Haematology, 56, pp.521-528, (1984), McCullough and William, Transfusion Medicine Reviews, Vol.1, No.3, pp150-160(1987))。
and Mueller-Eckhard in:Transfusionsmedizin[Transfusion medicine]、Mueller-Eckhardt (編), Springer-Verlag Berlin (1999), pp.587-617)。しかしながら、かれらの精力的な努力にもかかわらず、発明者らは、この比較的迅速で実施が容易なテストを他の血液細胞抗原またはこの抗原に対して指向される抗体の検出に用いることには成功しなかった。
インビトロの方法で、以下の手段によって達成される:
(i)ビーズを検出されるべき特定の血液細胞抗原に対して指向される非ヒト抗体で被覆し;
(ii)付属の特定の選択された血液細胞抗原であって、適切な場合には、それ自体は従来技術で既に公知である標準化された血液細胞を可溶化することによって、また別には組換え方法またはタンパク質化学による方法を用いて得ることができる抗原を、(i)で得られた被覆ビーズと混合し;
(iii)上記選択された抗原と(i)のビーズに結合された非ヒト抗体との結合の結果として抗原で被覆されている該ビーズを、検査されるべき患者の血清サンプルと混合し;さらに
(iv)特異的抗ヒト抗体テストを用いて、上記サンプルに由来し、さらに上記ビーズに結合した抗原と結合することができた患者の血液細胞抗原抗体を検出する。
ただ、以下の場合血液細胞抗原に対して指向される抗体を検出する新規な方法のわずかな改変を示す:
(i)ビーズを非抗ヒト種特異的抗体で被覆し;
(ii)標準細胞を可溶化するか、または組換えもしくはタンパク質化学的方法を用いて得られた血液細胞抗原を溶液にし;
(iii)(ii)の結果として生じる、上記可溶化物、または組換えもしくはタンパク質化学的方法を用いて得られた血液細胞抗原の溶液を、検出されるべき抗原に対して指向され、かつ(i)で限定される種に由来する特異的抗体とインキュベートし;さらに
(iv)(i)のビーズと一緒に(iii)で形成された複合体を遠心分離によって単離し;さらに
(v)患者由来の抗体含有血清に対して、凝集テストで直接検査するか、または後で検査する。
インビトロの方法はまた以下によって達成される:
(i)ビーズを検出されるべき特定の血液細胞抗原に対して指向される抗体で被覆し;
(ii)検査されるべき患者に由来する血液サンプルを、その中に含まれている血液細胞とともに、該血液細胞の膜に存在する抗原が可溶化される処理に付し、さらに適切な場合には抗原濃縮分画を調製し;
(iii)(i)で得られた被覆ビーズを(ii)で得られたサンプルと混合し;
(iv)特異的抗体テストを用いて、上記サンプルに由来し、かつ上記ビーズに結合した抗体と結合することができる血液細胞抗原を検出する。
さらにまた以下によってサンプル中の血液抗原を検出することができる:
(i)ビーズを非抗ヒト種特異的抗体で被覆し;
(ii)検査されるべき患者に由来する血液細胞を可溶化し;
(iii)(ii)で得られた可溶化物を、検出されるべき抗原に対して指向され、かつ(i)で限定される種に由来する特異的抗体とインキュベートし;
(iv)(i)のビーズと一緒に(iii)で形成された複合体を遠心分離によって単離し;さらに
(v)凝集テストで上記サンプルを検査する。
Anstee, D. (編) : APPLIED BLOOD GROUP SEROLOGY, Montgomery Scientific Publications, Durham, North Carolina, USA。好ましくは本発明を用いて検出される特に重要な血液群抗原は以下のとおりである:ABO;C、CW、C、D、E、e、K、k、Fy(a)、Fy(b)、Jk(a)、Jk(b)、S、s、M、N、P(1)、Le(a)、Le(b)。
な本発明の利点は、被覆ビーズの実質的により長期にわたる耐久性のために、これらのプロトコルが、該プロトコルに適合する検査室で大規模に実施できるということである。
1)抗原に対して指向される抗体の存在を患者の血清中で検出しようとする場合は、生成された複合体を続いて直接血清とインキュベートすることができる。存在し得るいずれの抗体もその抗原と反応し該複合体と結合する。検出されるこれらの抗体はヒト由来であるので、検出される抗体は、テスト混合物から分離された後抗ヒト抗体および周知の方法を用いて結合させることができる。
患者の血清サンプルで血液細胞抗原に対して指向される抗体を検出するインビトロの方法の場合:
(i)検出されるべき抗原に対して指向されるビオチン化非ヒト抗体を、対応する天然の血液細胞抗原を保有するヒトテスト細胞と接触させ;
(ii)(i)で生成された複合体を上記血液細胞が可溶化される条件に付し;
(iii)抗原およびビオチン化抗体からなる上記複合体を、ストレプトアビジン被覆またはアビジン被覆微粒子を用いて上記サンプルから取り出し;
(iv)(iii)で生成された複合体を検査されるべき患者由来の血清サンプルと接触させ;さらに
(v)抗ヒト抗体テストを用いて、特異的抗体が上記血清サンプルに存在するときにビオチン化抗体、抗原および該血清中のヒト抗体から生成される複合体を、該複合体をいっ
たんサンプルから分離して検出する。
(i)検出されるべき抗原に対して指向されるビオチン化抗体を、対応する天然の血液細胞抗原を保有するヒトテスト細胞と接触させ;
(ii)(i)で生成された複合体を上記血液細胞が可溶化される条件に付し;
(iii)抗原およびビオチン化抗体からなる上記複合体を、ストレプトアビジン被覆またはアビジン被覆微粒子を用いて上記サンプルから取り出し;
(iv)(iii)で生成された複合体を、上記抗原に対して指向される好ましくは標識された第二の抗体と接触させ;さらに
(v)慣例の方法を用いて、ビオチン化抗体、抗原および第二の抗体から生成される複合体を、該複合体をいったんサンプルから分離して検出する。
直径:2〜4mm
密度:1.1〜1.8g/cm3
磁気質量モーメント(magnetic mass moment):100±25×10-6m3/kg
懸濁液は好ましくは10mg粒子/mL(6.7×108/mLに該当)を含む。
1mgのM280ストレプトアビジンダイナビーズは5−10gのビオチン化抗体と結合することができる(100%飽和の、ポリスチレンの表面と共有結合したストレプトアビジン)。
その常磁性特性の結果として、これらの粒子はビオチン−抗体−抗原複合体を不均質混合物(例えば細胞溶解物)から単に磁石(磁性粒子濃縮装置)を用いることによって単離するために適切である。
* 着色−蛍光粒子が存在しない;
* フローサイトメトリーによって分析することができない。
直径:2〜4mm
密度:1.1〜1.8g/cm3
ビオチン抗体結合に関するストレプトアビジンの密度及び性質はダイナビーズと同じで
ある(上記参照)。
* それらは赤色蛍光を発し、したがって読み取りを容易にする。
* 性能もまたフローサイトメトリーでモニターすることができる。
可溶化緩衝液:1.21gのトリスを950mLのNaCl(pH7.4)に添加し、さらに5mLのTriton X−100を添加して1000mLとする。
テスト細胞(血小板)を卓上遠心機(Hettich製)で10000rpmで1分沈澱させ
る。上清を吸引除去し、細胞ペレットを100μLの可溶化緩衝液に採取する。
続いて、上記ビーズを可溶化された血液細胞とインキュベートし、さらに第二の蛍光標識抗体を添加する。陽性テストアッセイの特徴はその二次抗体の上記複合体との結合の増加で、これは、続いて単離したビーズ−第一の抗体−抗原−第二の抗体複合体の蛍光(これは上記結合によって付与された)によって測定することができる。
このようにして、極めて簡単な態様で血中のGPIIa−IIIb抗原を検出することができた。
このようにしてまた、極めて簡単な態様で血中のGPIIa−IIIb抗原を検出できた。
このようにしてまた、極めて簡単な態様でGPIIa−IIIb抗原を検出できた。
患者/ドナーおよびサンプル物質:20μLの血清(56℃で30分不活化)
試薬および装置:赤色蛍光高密度ストレプトアビジンポリスチレン粒子(Diamed)
物理的特性:直径は2〜4μm、
密度は1.1〜1.8g/cm3
懸濁液は0.075%(v/v)の粒子を含み、この理由でこれらビーズを50μLの容積で用いた(ダイナビーズの場合には10μLと比較)。
結合特性:ビオチン抗体との結合に対するストレプトアビジンの密度および性質はダイナビーズの場合と同じである。
利点:粒子は赤色の蛍光を発し、これは読み取りを容易にし、その性能はまたフローサイトメトリーの方法を用いてモニターすることができる(フローサイトメトリーは当業者には周知である)。
欠点:この粒子は持続的に高い吸収性を示すので、被覆後に粒子をPBS−BSAでブロックすることが必要なようである。
粒子緩衝液:
10mMPBS溶液(pH7.4)、0.1%Tween20
PBS−BSA(濃度2%):
ダルベッコ(Dulbecco's)リン酸緩衝生理食塩水×10
蒸留水で1:10に希釈(pH7.2)
22%(1:10)のウシアルブミンを添加
可溶化緩衝液:
1.21gのトリスを950mLのNaCl(pH7.4)に添加し、さらに5mLのTritonX−100を添加して1000mLとする。
ミリポアウルトラフリーMC30フィルターユニット(Millipore Corporation, Bedford, USA)でビオチン化後にろ過(ろ過限界30kDa)。
メンブレン:低結合再生セルロース
偶発的凝集をテストし陰性コントロールを含める。新しいバッチ毎にまたはカップリング毎に、フローサイトメトリー分析で定量的にチェックする。これに関連して、抗原被覆粒子をこの抗原に対して特異的に指向される蛍光標識抗体とインキュベートする。粒子表面の蛍光の強さ(フローサイトメトリーで容易に測定できる)は被覆の程度に比例する。
性能管理:陽性および陰性コントロール血清を含める。
ビオチン化モノクローナル抗体の調製
ビオチンは、カルボキシラーゼのための補助因子として機能するビタミン(244ダルトン)である。サイズが小さいことの結果として、ビオチンは、結合後に原則として巨大分子の特性に対して影響を及ぼさない。ビオチンのための反応基はリジンおよびチロシンのε−アミノ基で(NHS−ビオチン)、アミン結合が形成される。抗体はまた可変領域にリジンを含むことができるので、ビオチン化によって抗原の検出が失われる。この作用を排除または減少させるために、抗体結合の機能的領域が混乱されない最適ビオチン濃度(ビオチン過剰)を各抗体について見つけなければならない(Ternyck and Avrameas, 1990)。NHS−LC−ビオチンの使用は巨大分子(例えば糖タンパク質)にとって有利であることが判明した。この場合には、巨大分子の立体的妨害の可能性はいずれも、6炭素分子を含むさらに別の鎖(ヘキサノエートスペーサー、22A)によって防止される。溶解されたビオチンは加水分解に非常に感受性が高いので、スルホ−NHS−LC−ビオチンを溶液にした後は迅速に処理することが推奨される。
1mLのPBSにタンパク質を溶解し、以下を計算する:過剰ビオチン(率、10〜15)のmmol:タンパク質のmmol×(12または20)=添加されるビオチン試薬のmmol:ピペットで添加されるビオチンのmmol×556*=添加されるビオチン
試薬のmg
(*556はスルホ−NHS−LCビオチンの分子量)計算:タンパク質のmg/タンパク質の分子量=タンパク質のmmol
例えば1.3/150000=8.7×10-6mmolのIgG、
8.7×10-6×20=1.73×10-4mmolのビオチン試薬、
1.73×10-4×556=0.096373mg(0.1mg)のビオチン。
2.1mgのスルホ−NHS−LC−ビオチンを1000μLの蒸留水(1μg=1μL)に溶解する。
3.室温で30分インキュベートする(また別には氷上で2時間インキュベートする)。
4.ミリポアMC30フィルターを用いて未結合ビオチンをPBS中で遠心分離して除去する。
5.遠心分離機の設定はタンパク質に応じて変動する。原則として、10000rpmで10〜15分で十分である。また別には3500rpmで30分である。
6.ビオチン化抗体は0.01%の酸化ナトリウム(sodium acid)中で4℃で保存する。
ビオチン化の程度は、HABA試薬(2−ヒドロキシアゾベンゼン−4−カルボン酸)を用いて測光法により決定される。このために、500nmでのHABA試薬(360μL)の吸収を先ず初めにそれだけで測定し、続いてビオチン化サンプル(40μL)を添加する。添加後5分して吸収をもう一度500nmで測定する。HABA分子中での競合結合の結果として、サンプルのビオチン含有量に応じて色の変化が出現する。すなわち、サンプルのビオチン化の程度はΔAに正比例する。
2.ビオチン化タンパク質のmmol/mL=ビオチン化タンパク質のmg/mLサンプル
3.ビオチンのμモル/mL反応混合物=A500
HABA試薬テストの代替として、各使用タンパク質についてビオチン化校正曲線を構築することができる。この曲線を用いて、タンパク質毎およびバッチ毎に固有の最適ビオチン量(最適ビオチン量は各タンパク質について異なる)を決定することができる。
上記性質の校正曲線は図2に示されている。
2×107のテスト細胞(標準化細胞)をエッペンドルフチューブで10000rpmで1分遠心分離し、上清を吸引し、細胞ペレットを30μLのPBS−2%BSAに再懸濁する。
37℃で30分インキュベートする。
溶解物を13000rpmで30分遠心分離する(4℃、細胞膜残渣を除去する)。
溶解物を遠心分離している間に、DiaMedストレプトアビジン粒子を1回粒子緩衝液中10000rpmで1分間洗浄する。10μLの粒子(濃度0.5%)を70μLの血小板溶解物に添加する。
37℃で30分インキュベートする。
上清を吸引除去する。
粒子を抗原で被覆し、粒子緩衝液に再懸濁し濃度を0.075%にした後、テスト系に導入することができる。
20μLの血清を粒子ペレットに添加し、ペレットをよく再懸濁する。
37℃で30分インキュベートする。
100μLの粒子緩衝液をピペットで粒子に添加する。
毎回100μLの粒子緩衝液で粒子を2回洗浄する。
50μLの粒子緩衝液にペレットを採取し、注意深くそれを混合する。
さらにインキュベートすることなく、そのカードをカード遠心装置(DiaMed)において900rpmで10分遠心する。
本テストの高い感度は明瞭である。
判定(図1参照)
陽性:凝集ビーズはゲル上に赤い線を形成するか、またはゲル内に配分される(++++から+)。
陰性:IDカード内の窪みの底部に密に詰まった粒子が沈澱する。
Claims (11)
- ヒトのサンプルで血液細胞抗原、または血液細胞抗原に対して指向される抗体を検出するインビトロの方法であって、
天然の血液細胞抗原、または天然の血液細胞抗原に対して指向される抗体は、直径が2〜4μmであり、密度が1.1〜1.8g/cm3のビーズを有するモノクローナル抗体を使用することによりサンプルから探し出され、そして
血液細胞抗原、または血液細胞抗原に対して指向される抗体の検出は、検出に適した、血液細胞抗原を検出するために使用する抗体が由来する種、または検出される血液細胞抗原に対して指向される抗体が由来する種に対して指向される種特異的抗体を含有するゲルカード中での凝集により行われることを特徴とする前記方法。 - ヒトのサンプルで血液細胞抗原に対して指向される抗体を検出するインビトロの方法であって、
(i)ビーズを特定の血液細胞抗原に対して指向される非ヒト抗体で被覆し;
(ii)特定の選択された血液細胞抗原であって、適切な場合には、それ自体は従来技術で既に公知である標準化された血液細胞を可溶化することによって、または組換え方法もしくはタンパク質化学的方法により得ることができる抗原を、(i)で得られた被覆されたビーズと混合し;
(iii)非ヒト抗体で被覆されたビーズおよび選択された血液細胞抗原からなる調製された複合体を、検査する患者の血清サンプルと混合し;さらに
(iv)複合体に結合しうる患者の血液細胞抗原抗体をゲルカード中での凝集により検出する
ことを特徴とする請求項1記載の方法。 - 血液細胞抗原に対して指向される抗体を検出するインビトロの方法であって、
(i)ビーズを非抗ヒト種特異的抗体で被覆し;
(ii)標準細胞を可溶化するか、または組換えかもしくはタンパク質化学的に得られた血液細胞抗原を溶液にし;
(iii)(ii)から得られた可溶化物、または組換えかもしくはタンパク質化学的に得られた血液細胞抗原の溶液を、抗原に対して指向され、かつ(i)で述べた種に由来する特異的抗体とインキュベートし;
(iv)(i)のビーズを使用して(iii)で形成された複合体を遠心分離によって単離し;
(v)直ちにまたは後で患者由来の抗体含有血清とインキュベートし;さらに
(vi)複合体に結合した抗体をゲルカード中での凝集により検出する
ことを特徴とする請求項1記載の方法。 - 血液細胞抗原を検出するインビトロの方法であって、
(i)ビーズを検出する特定の血液細胞抗原に対して指向される抗体で被覆し;
(ii)検査する患者からの血液サンプル、およびその中に含まれている血液細胞を、該血液細胞の膜に含まれる抗原が可溶化される処理に付し、さらに適切な場合には抗原濃縮分画を調製し;
(iii)(i)で得られた被覆ビーズを(ii)で得られたサンプルと混合し;
(iv)ビーズ、検出する特定の血液細胞抗原に対して指向される抗体、および血液細胞抗原からなる複合体を血液細胞抗原に対して特異的な抗体とインキュベートし;さらに
(v)複合体に結合した抗体をゲルカード中での凝集により検出する
ことを特徴とする請求項1記載の方法。 - 血液細胞抗原を検出するインビトロの方法であって、
(i)ビーズを非抗ヒト種特異的抗体で被覆し;
(ii)検査する患者からの血液細胞を可溶化し;
(iii)(ii)で得られた可溶化物を、検出する抗原に対して指向され、かつ(i)で述べた種に由来する特異的抗体とインキュベートし;
(iv)(i)のビーズを使用して(iii)で形成された複合体を遠心分離によって単離し;
(v)複合体を抗原に対して指向される抗体とインキュベートし;さらに
(vi)複合体に結合する抗体をゲルカード中での凝集により検出する
ことを特徴とする請求項1記載の方法。 - 患者の血清サンプルで血液細胞抗原に対して指向される抗体を検出するインビトロの方法であって、
(i)抗原に対して指向されるビオチン化非ヒト抗体を、天然の血液細胞抗原を保有するヒトテスト細胞と接触させ;
(ii)(i)で生成された複合体を上記血液細胞が可溶化される条件に付し;
(iii)抗原およびビオチン化抗体からなる上記複合体を、ストレプトアビジンまたはアビジンで被覆されたビーズを用いて上記サンプルから取り出し;
(iv)(iii)で生成された複合体を検査する患者由来の血清サンプルと接触させ;さらに
(v)特異的抗体が血清サンプル中に存在するときに形成される複合体であって、ビオチン化抗体、抗原、および血清からのヒト抗体からなる複合体を、いったん該複合体をサンプルから分離してゲルカード中での凝集により検出する
ことを特徴とする請求項1記載の方法。 - 選択された血液細胞抗原を検出するインビトロの方法であって、
(i)検出する抗原に対して指向されるビオチン化抗体を、天然の血液細胞抗原を保有しうる検査される試料に由来するヒト細胞と接触させ;
(ii)(i)で生成された複合体を上記血液細胞が可溶化される条件に付し;
(iii)抗原およびビオチン化抗体からなる上記複合体を、ストレプトアビジンまたはアビジンで被覆されたビーズを用いて上記サンプルから取り出し;
(iv)(iii)で生成された複合体を、上記抗原に対して指向される好ましくは標識された第二の抗体と接触させ;さらに
(v)ビオチン化抗体、抗原および第二の抗体からなる生成される複合体を、いったん該複合体をサンプルから分離してゲルカード中での凝集により検出する
ことを特徴とする請求項1に記載の方法。 - 蛍光または酵素で標識された抗体が用いられる請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- ビオチン化抗体がストレプトアビジンおよび/またはアビジンで被覆されたビーズを用いて結合される、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
- 少なくとも、直径が2〜4μmであり、密度が1.1〜1.8g/cm3のビーズ、血液細胞抗原に対して指向される特異的抗体、および特異的抗ヒト抗体を含むゲルカードを含む、血液細胞抗原に対して指向される抗体を検出するキット。
- 少なくとも、直径が2〜4μmであり、密度が1.1〜1.8g/cm3のビーズ、第一の検出される抗原に対して指向される抗体、第二の検出する抗原に対して指向される抗体、および検出される抗原に対して指向される第二の抗体に対して指向される第三の種特異的抗体を含むゲルカードを含む、血液細胞抗原を検出するキット。
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US7732569B2 (en) | 2006-10-19 | 2010-06-08 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Zein-based peptide tags for the expression and purification of bioactive peptides |
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GB0706558D0 (en) * | 2007-04-03 | 2007-05-09 | Common Services Agency For The | Diagnostic assay |
CN101957366A (zh) * | 2009-07-15 | 2011-01-26 | 英科新创(厦门)科技有限公司 | 人红细胞膜抗原包被的微球及其应用 |
US20130143239A1 (en) * | 2011-12-01 | 2013-06-06 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Melittin Peptide Conjugates And Methods Employing Same |
ES2657236T3 (es) * | 2013-04-26 | 2018-03-02 | Davos Diagnostics Ag | Tipificaciones de aloantígenos plaquetarios y pruebas de anticuerpos plaquetarios |
CN116148463A (zh) * | 2022-09-08 | 2023-05-23 | 浙江省血液中心 | 一种磁珠-抗体-膜糖蛋白复合物、应用及试剂盒 |
Family Cites Families (10)
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---|---|---|---|---|
US5223441A (en) * | 1986-10-09 | 1993-06-29 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Receptors for immune complexes |
JPH01147367A (ja) * | 1987-12-03 | 1989-06-09 | Dai Ichi Pure Chem Co Ltd | 凝血因子の測定方法及び測定用試薬 |
US6379895B1 (en) * | 1989-06-07 | 2002-04-30 | Affymetrix, Inc. | Photolithographic and other means for manufacturing arrays |
US5286452A (en) * | 1991-05-20 | 1994-02-15 | Sienna Biotech, Inc. | Simultaneous multiple assays |
DE4228395A1 (de) * | 1992-08-26 | 1994-03-03 | Loeliger Christoph Cornelius D | Immunadsorbentien |
US6159748A (en) * | 1995-03-13 | 2000-12-12 | Affinitech, Ltd | Evaluation of autoimmune diseases using a multiple parameter latex bead suspension and flow cytometry |
US5985543A (en) * | 1996-10-11 | 1999-11-16 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for detection of antibody binding to cells |
PT849595E (pt) * | 1996-12-18 | 2001-10-31 | Stiftung Fur Diagnostische For | Particulas sinteticas como reagentes de aglutinacao |
US6586259B1 (en) * | 1999-11-15 | 2003-07-01 | Pharmanetics Incorporated | Platelet/leukocyte interaction assay and reagent therefor |
ES2283398T3 (es) * | 2000-03-15 | 2007-11-01 | Orbusneich Medical, Inc. | Recubrimiento que mejora la adherencia de celulas endoteliales. |
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