JP4202327B2 - 1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシン - Google Patents
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Description
さらに、いずれのグループにおいても、抗ウイルス活性以外のその他の生物活性に関しては何等報告されていない。
また、本発明は、下記の第1工程〜第3工程よりなる、上記式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンの製造方法に関するものである。
式[II]で表される化合物の1級水酸基を保護基により保護した後、ジエチルアミノサルファートリフルオライド(DAST)と反応させて式[III]で表される化合物を得る工程
第2工程:
式[III]で表される化合物を酸化剤と反応させてスルホキシドとした後、酸無水物もしくは酸塩化物で処理することでプンメラー(Pummerer)転移反応に付して式[IV]で表される化合物を得る工程
第3工程:
ルイス酸触媒の存在下、式[IV]で表される化合物とN4−アシルシトシンもしくはシトシンとをグリコシル化反応に付して保護基を有する化合物を得、保護基を除去後、所望により糖部5′位をリン酸化することで式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンを得る工程
さらにまた、本発明は下記の第1工程〜第4工程よりなる、上記式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンの製造方法に関するものである。
式[VI]で表される化合物の5,6位イソプロピリデン基の選択的脱保護、1級水酸基の選択的保護と2級水酸基への脱離基の導入、1級水酸基の脱保護、5,6−エポキシ化、硫化試薬による5,6−チイラン化、および求核試薬によるチイランの開環とアシル基の導入により式[VII]で表される化合物を得る工程
第3工程:
式[VII]で表される化合物の1,2位イソプロピリデン基を加水分解後、酸化剤により酸化的減炭反応を行い、1位をアルコキシ化後、水酸基を保護基で保護して式[VIII]で表される化合物を得る工程
本発明の化合物は、前記式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンであり、当該化合物は塩、水和物または溶媒和物の形態であってもよい。そのような塩としては、Rが水素原子である場合には塩酸塩または硫酸塩などの酸付加物、Rがリン酸残基である場合にはナトリウム塩、カリウム塩またはリチウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩などのアルカリ土類金属塩もしくはアンモニウム塩などの薬学的に許容される任意の塩が例示される。
本発明の化合物は下記の第1工程〜第3工程からなる反応工程により製造することができる。
第1工程は、式[II]で表される化合物の1級水酸基を適当な保護基により保護した後、DASTと反応させて式[III]で表される化合物を得る工程である。
第2工程は、式[III]で表される化合物を酸化剤と反応させてスルホキシドとした後、酸無水物もしくは酸塩化物で処理することでプンメラー転移反応に付して式[IV]で表される化合物を得る工程である。
スルホキシドへの誘導は常法に従って行うことができる。たとえば、塩化メチレン中アルゴンまたは窒素などの不活性ガス気流下、−100〜0℃においてm−クロロ過安息香酸で処理する方法(J. Org. Chem.,61,822(1996))、もしくはメタノールなどのアルコール系の溶媒中、メタ過ヨウ素酸ナトリウムで処理する方法(Tetrahedron Letter,993(1979))などを利用することができる。
第3工程は、ルイス酸触媒の存在下、式[IV]で表される化合物とN4−アシルシトシンもしくはシトシンとをグリコシル化反応に付して保護基を有する化合物を得、保護基を除去後、所望により糖部5′位をリン酸化することにより式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンを得る工程である。
式[IV]化合物のグリコシル化反応は、必要によりアルゴンまたは窒素などの不活性ガス気流下、塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒中、式[IV]化合物1モルに対してN4−アシルシトシンもしくはシトシン1〜10モルとトリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート、四塩化すず、四塩化チタン、塩化亜鉛、三フッ化ホウ素などのルイス酸0.1〜10モルとを用い、反応温度−50〜100℃で反応させることにより実施することができる。
第2工程は、式[VI]で表される化合物の5,6位イソプロピリデン基の選択的脱保護、1級水酸基の選択的保護と2級水酸基への脱離基の導入、1級水酸基の脱保護と5,6−エポキシ化、硫化試薬による5,6−チイラン化、および求核試薬によるチイランの開環とアシル基の導入により式[VII]で表される化合物を得る工程である。
5,6位イソプロピリデン基の選択的脱保護は、通常の酸加水分解の方法で行えばよく、例えば用いる酸としては、塩酸、硫酸などの鉱酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、p−トルエンスルホン酸などの有機酸を例示することができる。脱保護反応を実施する際、これらの使用する酸を適当な濃度になるように水で希釈し、また、必要の応じTHF、ジオキサンなどの有機溶媒との混合溶媒とし、−50〜150℃で、好ましくは−20〜100℃で撹拌することにより脱保護反応を実施できる。
第3工程は、式[VII]で表される化合物の1,2位イソプロピリデン基を加水分解後、酸化剤により酸化的減炭反応を行い、1位をアルコキシ化後、水酸基を保護基で保護して式[VIII]で表される化合物を得る工程である。
1,2位イソプロピリデン基の加水分解は、上記第2工程で説明した5,6位イソプロピリデン基の脱保護と同様の方法により実施できる。
第4工程は、式[VIII]で表される化合物の1位アルコキシを臭化水素−酢酸溶液で処理してブロモ化し、活性化したシトシンとグリコシル化反応に付して保護基を有する化合物を得、保護基を除去後、所望により糖部5′位をリン酸化することで式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンを得る工程である。
式[VIII]化合物の1位アルコキシ基のブロム化は、式[VIII]化合物1モルに対して0.1〜10モル程度の臭化水素を含有する臭化水素−酢酸中、さらに塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタンなどとの混合溶媒中、−50〜70℃で処理することにより実施できる。
本発明の化合物は、後述の試験例に示すように優れた抗腫瘍作用を有することから、これらを有効成分とする本発明の組成物は悪性腫瘍(例えば、肺癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、膵臓癌、乳癌、腎癌、膀胱癌、子宮癌、骨肉腫、黒色腫)などの治療に有用である。
1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシン〔式[I],R=H〕の合成
(1) 1,4−アンヒドロ−5−O−t−ブチルジフェニルシリル−3−O−ベンジル−2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−D−アラビトール〔式[III],R 1 =Bn,R 2 =TBDPS〕の合成
1,4−アンヒドロ−3−O−ベンジル−4−チオ−D−アラビトール〔式 [II],R1=Bn〕37.7gとイミダゾール11.3gをDMF400mlに溶解し、氷冷下、t−ブチルジフェニルシリルクロライド(TBDPSCl)42.9mlを加え、アルゴン気流下、0℃で一晩撹拌した。水を加えしばらく室温で撹拌した後、溶媒を留去、残渣を酢酸エチル−水で分配し、有機層を更に水で洗浄後、乾燥した。溶媒を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトにより精製し、2〜10%酢酸エチル−n−ヘキサンにより溶出した部分を濃縮し、5−シリル体 53.4g(収率71%)を得た。
1H−NMR(CDCl3)δ7.71−7.63(4H,m,C6H5),7.71−7.63(11H,m,C6H5),5.18(1H,dq,H−2,J=3.5,50.5Hz),4.64(1H,d,C6H5CH2,J=12.0Hz),4.60(1H,d,C6H5CH2,J=12.0Hz),4.35(1H,dt,H−3,J=2.9,11.2Hz),3.76(1H,t,H−5a,J=9.5Hz),3.66(1H,ddd,H−5b,J=2.0,6.1,10.5Hz),3.57−3.53(1H,m,H−4),3.19(1H,ddd,H−1a,J=4.4,12.2,30.3Hz),3.06(1H,ddd,H−1b,J=3.4,12.2,18.1Hz),1.05(9H,s,tBu)。
1,4−アンヒドロ−5−O−t−ブチルジフェニルシリル−3−O−ベンジル−2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−D−アラビトール2.58gを塩化メチレン15mlに溶解し、アルゴン気流下、−78℃に冷却し、80%m−クロロ過安息香酸1.15gを溶解した塩化メチレン溶液を滴下した。30分間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え反応を止め、室温に戻しクロロホルムで抽出、有機層を乾燥した。溶媒を留去し、残渣を無水酢酸30mlに溶解し、アルゴン気流下、2時間110℃に保った。室温にまで冷却した後、減圧下溶媒を留去した。残渣を酢酸エチルに溶解し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で分配し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下、溶液を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトにより精製し、5〜10%酢酸エチル−n−ヘキサンにより溶出した部分を濃縮し、目的物1.57g(収率54%)を得た。
1H−NMR(CDCl3)δ7.68−7.62(4H,m,C6H5),7.46−7.25(11H,m,C6H5),6.06(1H,d,H−1,J=4.4Hz),5.11(1H,ddd,H−2,J=4.4,8.3,51.0Hz),4.78(1H,d,C6H5CH2,J=11.7Hz),4.60(1H,d,C6H5CH2,J=11.7Hz),4.38(1H,ddd,H−3,J=7.3,8.3,11.7Hz),3.81(1H,dd,H−5a,J=4.4,10.5Hz),3.74(1H,dd,H−5b,J=5.9,10.5Hz),3.34(1H,ddd,H−4,J=4.4,5.9,7.3Hz),2.05(3H,s,Ac),1.07(9H,s,tBu)。
1−O−アセチル−5−O−t−ブチルジフェニルシリル−3−O−ベンジル−2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−D−アラビノース 971mgをアセトニトリル20mlに溶解し、この溶液にシリル化したN4−アセチルシトシン(N4−アセチルシトシン832mgを触媒量の硫酸アンモニウムとともにヘキサメチルジシラザン中、5時間還流することにより調製)、四塩化すず1M塩化メチレン溶液3.60mlを加え室温で3時間撹拌した。更に四塩化すず1M塩化メチレン溶液1.80mlを加え、室温で1時間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、不溶物をセライトでろ過し、クロロホルムで3回抽出し有機層を乾燥した。ろ液を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトにより精製し、1%メタノール−n−クロロホルムで溶出した部分を集め、濃縮し、保護された目的物672mg(収率59%)を得た。
1H−NMR(DMSO−d6)δ7.98(1H,dd,H−6,J=1.0,7.2Hz),7.26,7.19(2H,br,NH2),6.47(1H,dd,H−1′,J=5.4,13.2Hz),5.85(1H,d,3′−OH,J=4.9Hz),5.77(1H,d,H−5,J=7.3Hz),5.22(1H,t,5′−OH,J=5.4Hz),4.91(1H,dt,H−2′,J=5.4,50.8Hz),4.25(1H,ddt,H−3′,J=4.9,5.4,11.2Hz),3.72(1H,dt,H−5′a,J=5.4,11.2Hz),3.60(1H,dt,H−5′b,J=5.9,11.2Hz),3.22(1H,dt,H−4′,J=5.4,5.9Hz)。
1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシン〔式[I],R=H〕の合成
(1) 1,2:5,6−ジ−O−イソプロピリデン−3−デオキシ−3−フルオロ−α−D−グルコフラノース〔式[VI]〕の合成
1,2:5,6−ジ−O−イソプロピリデン−α−D−アロフラノース[式V]20.0g(76.84mmol)をCH2Cl2 240mlに溶解し、0℃でSO2Cl2 12.35ml(153.68mmol)を滴下し、15分間撹拌後、イミダゾール52.3g(768.40mmol)を氷冷下で少量ずつ加え、室温で2〜3時間撹拌した。sat.NaHCO3で反応停止後、CHCl3で抽出し、有機層をNa2SO4で乾燥させ溶媒を留去した。残渣を2−メトキシエタノール240mlに溶解し、フッ化カリウム(スプレードライ品)44.64g(768.40mmol)を加えて130℃で4〜6時間還流した。放冷後、溶媒を留去し、残渣を酢酸エチルと水で分配した。有機層をH2O×2,brineで洗浄し、Na2SO4乾燥後、減圧乾固し、シリカゲルカラム精製(400cc,5〜20% AcOEt(Hex中))を行い、目的物を12.98g(49.49mmol)、収率64%で得た。
1H−NMR(CDCl3)δppm 5.95(d,1H,H−1,J1,2=3.9Hz),5.01(dd,1H,H−3,J3,4=2.2Hz,J3,F=49.8Hz),4.70(dd,1H,H−2,J1,2=3.9Hz,J2,F=10.7Hz),4.29(1H,ddd,H−5,J4,5=8.3Hz,J5,6a=5.9Hz,J5,6b=4.9Hz),4.12(dd,1H,H−6a,J5,6a=5.9Hz,J6a,b=8.8Hz),4.11(ddd,1H,H−4,J3,4=2.2Hz,J4,5=8.3Hz,J4,F=29.0Hz),4.03(dd,1H,H−6b,J5,6b=4.9Hz,J6a,b=8.8Hz),1.50,1.45,1.37,1.33(s,each 3H,ipr)。
1,2:5,6−ジ−O−イソプロピリデン−3−デオキシ−3−フルオロ−α−D−グルコフラノース 10.9g(41.56mmol)をTHF 40ml,2N HCl 40mlに溶解し、室温で撹拌した。反応終了後、NaHCO3で中和し、不溶物をろ去した。ろ液をCHCl3で抽出し、有機層をbrineで洗浄し、Na2SO4で乾燥後溶媒を留去した後、シリカゲルカラム精製(320cc,3〜6% MeOH(CHCl3中))を行い、1,2−O−イソプロピリデン−3−デオキシ−3−フルオロ−α−D−グルコフラノース8.02g(36.09mmol)を得た。得られた1,2−O−イソプロピリデン−3−デオキシ−3−フルオロ−α−D−グルコフラノースはCH2Cl2 120mlに溶解し、ピリジン3.20ml,DMAP 44mgを加え、−5℃でBzCl 4.61ml(39.68mmol)のCH2Cl250mlを滴下した。−5℃で5時間反応を行い、反応終了確認後、MeOHで1時間撹拌し反応を停止した。CHCl3とH2Oで分配し、有機層を0.5N HCl×2,sat.NaHCO3×2,brineで洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を留去し、シリカゲルカラム精製(320cc,10〜25% AcOEt(Hex中))を行い、6−O−ベンゾイル−1,2−O−イソプロピリデン−3−デオキシ−3−フルオロ−α−D−グルコフラノースを9.33g(28.59mmol)、収率79%で得た。
1H−NMR(CDCl3)δppm 8.09−8.05(m,2H,Bz),7.60−7.42(m,3H,Bz),5.99(d,1H,H−1,J1,2=3.9Hz),5.14(dd,1H,H−3,J3,4=2.0Hz,J3,F=49.8Hz),4.74−4.70(m,2H,H−2,H−6a),4.46(dd,1H,H−6b,J5,6b=5.9Hz,J6a,b=12.2Hz),4.27−4.18(m,2H,H−4,H5),2.83(br,1H,5−OH),1.47,1.33(s,each 3H,ipr)。
1H−NMR(CDCl3)δppm 6.04(d,1H,H−1,J1,2=3.9Hz),4.96(dd,1H,H−3,J3,4=2.4Hz,J3,F=50.3Hz),4.71(dd,1H,H−2,J1,2=3.9Hz,J2,F=11.2Hz),3.89(ddd,1H,H−4,J3,4=2.4Hz,J4,5=5.9,J4,F=30.3Hz),3.22(1H,ddd,H−5,J4,5=5.9Hz,J5,6a=4.4Hz,J5,6b=2.9Hz),2.88(t,1H,H−6a,J=4.4Hz),2.71(dd,1H,H−6b,J5,6b=2.9Hz,J6a,b=4.9Hz),1.47,1.33(s,each 3H,ipr)。
融点:88.9−90.4℃
元素分析値:C13H19O6SF
計算値 C : 48.44, H : 5.94
分析値 C : 48.49, H : 6.00
1H−NMR(CDCl3)δppm 5.98(d,1H,H−1,J1,2=3.9Hz),4.96(dd,1H,H−3,J3,F=49.6Hz),4.68(dd,1H,H−2,J1,2=3.9Hz),4.46−4.37(m,3H,H−6a,H−6b,H−4),4.11(dt,1H,H−5),2.36(s,3H,Ac),2.06(s,3H,Ac),1.49(s,3H,ipr),1.33(s,3H,ipr)。
5,6−ジ−S,O−アセチル−1,2−O−イソプロピリデン−5−チオ−α−D−グルコフラノース 100mg(0.31mmol)を90%トリフルオロ酢酸(1.5ml)に溶解し、0℃で4時間撹拌した。酢酸エチルで希釈し、有機層をH2O×3,sat.NaHCO3×2,brineで洗浄し、Na2SO4乾燥後、溶媒留去した。この残渣をMeOH 0.8mlに溶解し、NaIO4 58.4mg(0.27mmol)のH2Oの溶液0.8mlを室温で加え、反応終了後グリセリンを加えて30分撹拌し、反応を停止した。不溶物をろ去し、ろ液を減圧乾固後、H2O×3/CHCl3で分配し、有機層をbrineで洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒留去し、残渣を5%HCl/MeOH 2mlに溶解し、4時間還流した。NaHCO3で中和後、不溶物をろ去、溶媒留去をした。残渣をピリジン2mlに溶解し、BzCl 150μl(1.29mmol)を0℃で加え、室温で2.5時間撹拌した。sat.NaHCO3で反応を停止後、CHCl3で抽出し、有機層を0.5N HCl,sat.NaHCO3,brineで洗浄し、Na2SO4で乾燥した。減圧乾固し、フラッシュシリカゲルカラム精製(15cc,5%AcOEt(Hex中))を行い、α及びβアノマーをそれぞれ28mg、24.5mg、更にアノマーの混合物として13.1mg(total 54%)の目的物を得た。
1H−NMR(CDCl3)δppm 8.03−7.99(4H,m,Bz),7.60−7.35(6H,m,Bz),5.77(1H,dt,H−1),5.28(1H,dd,H−2,J2,F=48.3Hz),5.24(1H,d,H−3,J2,3=2.0Hz),4.61−4.47(2H,m,H−5a,5b),4.05(1H,dt,H−4),3.42(3H,s,OMe)。
1H−NMR(CDCl3)δppm 8.04−8.02(4H,m,Bz),7.59−7.31(6H,m,Bz),6.09(1H,dt,H−1,J1,2=3.9Hz),5.35(1H,ddd,H−2,J2,F=51.5Hz),4.96(1H,d,H−3),4.57(2H,ddd,H−5a,5b,J5a,b=11.2Hz,J5a,4=J4,5b=6.4Hz),3.69(1H,dt,H−4,J4,5a=J4,5b=6.4Hz),3.43(3H,s,OMe)。
メチル 3,5−ジ−O−ベンゾイル−2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−α− 及び −β−D−アラビノフラノース 24.2mg(0.062mmol)をAcOH:Ac2O=2ml:2mlに溶解し、濃硫酸 0.25mlを0℃で加え、室温で1時間撹拌した。NaOAc 4.5gで中和した後、CH2Cl2とH2Oで分配し、有機層をNa2SO4で乾燥した。溶媒留去後シリカゲルカラム精製(10cc 10%AcOEt(Hex中))を行い、23.5mg(0.056mmol)、収率91%で1−O−アセチル−3,5−ジ−O−ベンゾイル−2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−D−アラビノフラノースをα、βアノマーの混合物として得た。
1H−NMR(CDCl3)δppm 8.06−7.94(m,4H,Bz),7.62−7.30(m,6H,Bz),6.24(dd,0.42H,H−1α,J1,2=2.0Hz,J1,F=14.2Hz),6.18(d,0.58H,H−1β,J1,2=4.4Hz),6.08(ddd,0.58H,H−3β,J3,4=7.3Hz,J2,3=9.3Hz,J3,F=11.7Hz),5.85(dt,0.42H,H−3α,J2,3=J3,4=3.9Hz,J3,F=12.2Hz),5.39(ddd,0.42H,H−2α,J1,2=2.0Hz,J2,3=3.9Hz,J2,F=47.9Hz),5.31(ddd,0.58H,H−2β,J1,2=4.4Hz,J2,3=9.3Hz,J2,F=50.8Hz),4.69(dd,0.58H,H−5βa,J4,5a=6.4Hz,J5a,b=11.2Hz),4.55(dd,0.42H,H−5αa,J4,5a=7.8Hz,J5a,b=11.7Hz),4.49(dd,0.58H,H5βb,J4,5b=6.4,J5a,b=11.2Hz),4.47(dd,0.42H,H−5αb,J4,5b=1.5Hz,J5a,b=11.7Hz),4.11(ddd,0.42H,H−4α,J3,4=4.4Hz,J4,5a=7.8Hz,J4,5b=1.5Hz),3.74(q,0.58H,H−4β,J3,4=J4,5a=J4,5b=6.4Hz),2.12,2.11(s,total 3H,Ac)。
(方法)
96穴プレートにサンプル溶液あるいはMEM−ハンクス培地10μlをあらかじめ入れておき、対数増殖期の細胞を5000細胞/90μl/ウェルとなるように10%牛胎児血清添加RPMI1640培地で希釈後播種し、37℃で3日間炭酸ガスインキュベ−タ−中で培養した。培養終了後、各ウェルに10μlのMTT溶液(5mg/ml(PBS中))を加え、更に37℃で4時間炭酸ガスインキュベ−タ−中で培養した。培養終了後、各ウェルに100μlの0.02N塩酸/50%ジメチルホルムアミド/20%SDSを加え、撹拌して生成したホルマザンを溶解し、マイクロプレートリーダー(東ソーMPR4Ai)により、570nm(試験波長)、690nm(参照波長)における吸光度を測定した。50%阻止率を示すサンプル濃度(IC50)をプロビット法によりコンピューターソフトを用いて算出した。
(方法)
S−180マウス肉腫細胞をICRマウスの腹腔内で継代した。移植6〜7日目の腹部の膨らんだマウスを選び、腹水を採取し、滅菌PBSで5x107細胞/mlになるように希釈し、調製した細胞懸濁液を5週齢、雌性のICRマウスの体側皮下にマウス当たり0.1ml(5×106細胞)ずつ移植した。サンプルを生理食塩水に溶解し、移植3日後から1日1回10日間マウスの体重10g当たり0.1mlの量で静脈内投与した。対照群には用いたビヒクルを投与した。
移植4週間後に腫瘍を摘出して重量を測定し、投与群の腫瘍の重量を対照群の重量と比較することにより抗腫瘍効果を評価した。
(方法)
SW−48細胞を10%牛胎児血清を含むRPMI1640培地中で培養し、対数増殖期にハーベストして、1x107細胞/マウスとなるように5週齢の雌のBALB/cヌードマウスの体側皮下に移植した。サンプルを生理食塩水に溶解後、移植7日目から1日1回10日間(qd x 10)マウスに静脈内投与した。対照群には用いたビヒクル(vehicle)を投与した。
測定結果を図1に示す。なお、図中、Thio−FACは本発明の化合物を、5−FUは5−フルオロウラシルを、およびFurtulonはフルツロンを示す。
(方法)
SW−48細胞を10%牛胎児血清を含むRPMI1640培地中で培養し、対数増殖期にハーベストして、1x107細胞/マウスとなるように5週齢の雌のBALB/cヌードマウスの体側皮下に移植した。サンプルを0.5%カルボキシメチルセルロース含有生理食塩水に溶解または懸濁後、移植7日目から連日10回または3日毎に4回経口投与した。対照群には用いたビヒクルを投与した。
測定結果を図2に示す。なお、図中、Thio−FACは本発明の化合物を、、およびFurtulonはフルツロンを示す。
本発明の化合物 30.0mg
微粉末セルロース 25.0mg
乳糖 39.5mg
スターチ 40.0mg
タルク 5.0mg
ステアリン酸マグネシム 0.5mg
上記組成から常法によって錠剤を調製する。
本発明の化合物 30.0mg
乳糖 40.0mg
スターチ 15.0mg
タルク 5.0mg
上記組成から常法によってカプセル剤を調製する。
本発明の化合物 30.0mg
グルコース 100.0mg
上記組成を注射用精製水に溶解して注射剤を調製する。
Claims (2)
- 下記の第1工程〜第3工程よりなる、下式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンの製造方法:
第1工程:
式[II]で表される化合物の1級水酸基を保護基により保護した後、ジエチルアミノサルファートリフルオライド(DAST)と反応させて式[III]で表される化合物を得る工程
第2工程:
式[III]で表される化合物を酸化剤と反応させてスルホキシドとした後、酸無水物もしくは酸塩化物で処理することでプンメラー(Pummerer)転移反応に付して式[IV]で表される化合物を得る工程
第3工程:
ルイス酸触媒の存在下、式[IV]で表される化合物とN4−アシルシトシンもしくはシトシンとをグリコシル化反応に付して保護基を有する化合物を得、保護基を除去後、所望により糖部5′位をリン酸化することで式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンを得る工程
- 下記の第1工程〜第4工程よりなる、下式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンの製造方法:
第1工程:
式[V]で表される化合物の水酸基に脱離基を導入した後、フッ素原子を導入することの可能な求核試薬で処理し、式[VI]で表される化合物を得る工程
式[VI]で表される化合物の5,6位イソプロピリデン基の選択的脱保護、1級水酸基の選択的保護と2級水酸基への脱離基の導入、1級水酸基の脱保護、5,6−エポキシ化、硫化試薬による5,6−チイラン化、および求核試薬によるチイランの開環とアシル基の導入により式[VII]で表される化合物を得る工程
第3工程:
式[VII]で表される化合物の1,2位イソプロピリデン基を加水分解後、酸化剤により酸化的減炭反応を行い、1位をアルコキシ化後、水酸基を保護基で保護して式[VIII]で表される化合物を得る工程
第4工程:
式[VIII]で表される化合物の1位アルコキシ基を臭化水素−酢酸溶液で処理してブロモ化し、活性化したシトシンとグリコシル化反応に付して保護基を有する化合物を得、保護基を除去後、所望により糖部5′位をリン酸化することで式[I]で表される1−(2−デオキシ−2−フルオロ−4−チオ−β−D−アラビノフラノシル)シトシンを得る工程
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