JP4068099B2 - 生体構成要素速度測定装置、及びそのプログラム - Google Patents
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Description
Aoki et al. Am J Physiol,273,H2361,1997)
また、このように構成することによって、赤血球、白血球、血小板、又はがん細胞に関して、個々の細胞の軌道、及び速度分布マップを生成することができる。
共焦点スキャナユニット5には、Nipkow円盤内蔵共焦点スキャナユニット(製品名:CSU−20(登録商標)、横河電機社製)を用いた。一般に、ニポウディスクスキャナー(Nipkow disk scanner)とは、光学的文字認識をする場合に、端に一列、もしくは多数列の孔を螺旋状にあけたディスクから成るデバイスのことである。この孔はディスクを回転することによって、文書の機械的な走査ができるように連続して開けてあり、可視パターンを電気的なパターンに変換するのに用いられる。試料から反射した光は垂直スリットを通って回転ディスクに焦点を結ぶ。ディスク内で孔を通過した光は光電子増倍管に進む。
図2は、本実施形態における画像解析装置9の内部構成を示す。画像解析装置9は、少なくとも、大容量記憶装置10、メモリ11、出力インターフェース13、入力インターフェース14、CPU(中央処理装置)15、及びこれらを接続するバス12から構成される。そして、出力インターフェース17には表示装置17が接続され、入力インターフェース14にはフレームグラバーボード3が接続されている。なお、画像解析装置9は、通常のパーソナルコンピュータでもよい。
次に、隣り合うフレームでのラベル赤血球の移動距離とフレーム時間間隔とから、隣接するフレーム画像間での赤血球の移動速度を計算する。そして、解析対象の全フレームについて計算することにより、速度分布2次元マップ(図8参照)として表示することができる(S15)。
図7は、本実施形態におけるラベル赤血球の2次元軌跡マップを示す。各点は、関心領域における各時間での各赤血球の位置を示している。個々のFITCラベル赤血球の挙動を点線上に表し、個別にトラッキングすることが可能である。
2 デジタルイメージングシステム
3 フレームグラバーボード
4 レーザー光源
5 共焦点スキャナユニット
6 顕微鏡
8 ステージ
9 画像解析装置
10 大容量記憶装置
11 メモリ
12 バス
13 出力インターフェース
14 入力インターフェース
15 CPU
16 入力装置
17 表示装置
Claims (6)
- 生体用高速レーザー共焦点顕微鏡を用いて検体の生体組織の所定領域の観察を行って得られた生体構成要素の画像から該生体構成要素の速度を測定する処理を、コンピュータに実行させる生体構成要素速度測定プログラムにおいて、
前記生体用高速レーザー共焦点顕微鏡から、前記所定領域が撮影された時系列に連続している複数のフレーム画像データを取得する取得処理と、
前記各フレーム画像内にある全画素の輝度値の平均を算出し、前記各フレーム画像データから該平均の所定の閾値以下の輝度値を有する画素データを取り除く低画素除去処理と、
前記各フレーム画像データ内のうち連続したフレーム画像データから、複数連続する画素データであって所定の形状と認識される該画素データを同一の生体構成要素を示す生体構成要素画素データとして取得するとともに、生体構成要素画素データの中心座標を取得する生体構成要素画素データ取得処理と、
前記隣接するフレーム画像データ同士について、一方のフレーム画像データで認識された該生体構成要素の前記中心座標から所定の範囲内にある生体構成要素を他方のフレーム画像データ内で検索することにより、前記同一の生体構成要素画素データの移動量を判定する移動量判定処理と、
前記移動量判定処理の判定結果、前記移動量が所定の範囲に含まれる生体構成要素画素データを取得し、前記隣接するフレーム画像データの時間差と該移動量とから、前記生体構成要素画素データの示す生体構成要素の速度を算出する速度算出処理と、
前記速度算出処理による算出結果に基づいて、前記生体構成要素の速度分布を生成する速度分布生成処理と、
を、コンピュータに実行させることを特徴とする生体構成要素速度測定プログラム。 - 前記生体構成要素速度測定プログラムは、さらに、
前記生体用高速レーザー共焦点顕微鏡を光軸方向にスキャンさせて焦点深度の異なるフレーム画像データ毎に、前記取得処理、前記除去低画素除去処理、前記生体構成要素画素データ取得処理、前記移動量判定処理、前記速度算出処理、及び前記速度分布生成処理を実行して、前記生体構成要素の速度の3次元的分布を生成する3次元分布生成処理と、
を、コンピュータに実行させることを特徴とする請求項1に記載の生体構成要素速度測定プログラム。 - 前記生体構成要素は、赤血球、白血球、血小板、又はがん細胞であることを特徴とする請求項1または2に記載の生体構成要素速度測定プログラム。
- 生体用高速レーザー共焦点顕微鏡を用いて検体の生体組織の所定領域の観察を行って得られた生体構成要素の画像から該生体構成要素の速度を測定する生体構成要素速度測定装置において、
前記生体用高速レーザー共焦点顕微鏡から、前記所定領域が撮影された時系列に連続している複数のフレーム画像データを取得する取得手段と、
前記各フレーム画像内にある全画素の輝度値の平均を算出し、前記各フレーム画像データから該平均の所定の閾値以下の輝度値を有する画素データを取り除く低画素除去手段と、
前記各フレーム画像データ内のうち連続したフレーム画像データから、複数連続する画素データであって所定の形状と認識される該画素データを同一の生体構成要素を示す生体構成要素画素データとして取得するとともに、生体構成要素画素データの中心座標を取得する生体構成要素画素データ取得手段と、
前記隣接するフレーム画像データ同士について、一方のフレーム画像データで認識された該生体構成要素の前記中心座標から所定の範囲内にある生体構成要素を他方のフレーム画像データ内で検索することにより、前記同一の生体構成要素画素データの移動量を判定する移動量判定手段と、
前記移動量判定手段の判定結果、前記移動量が所定の範囲に含まれる生体構成要素画素データを取得し、前記隣接するフレーム画像データの時間差と該移動量とから、前記生体構成要素画素データの示す生体構成要素の速度を算出する速度算出手段と、
前記速度算出手段による算出結果に基づいて、前記生体構成要素の速度分布を生成する速度分布生成手段と、
を備えることを特徴とする生体構成要素速度測定装置。 - 前記生体構成要素速度測定装置は、さらに、
前記生体用高速レーザー共焦点顕微鏡を光軸方向にスキャンさせて焦点深度の異なるフレーム画像データ毎に、前記取得手段、前記除去低画素除去手段、前記生体構成要素画素データ取得手段、前記移動量判定手段、前記速度算出手段、及び前記速度分布生成手段を駆動させて、前記生体構成要素の速度の3次元的分布を生成する3次元分布生成手段、
を備えることを特徴とする請求項4に記載の生体構成要素速度測定装置。 - 前記生体構成要素は、赤血球、白血球、血小板、又はがん細胞であることを特徴とする請求項4または5に記載の生体構成要素速度測定装置。
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