JP4050238B2 - Ｋｐｖトリペプチドジアミド誘導体の改良された合成方法 - Google Patents

Description

本発明は、リジン-プロリン-バリン(ＫＰＶ)トリペプチドのジアミド誘導体の改良された合成方法に関する。

(従来技術)
ペプチドの合成では、２つの主たる合成経路、つまり固相合成法と溶液合成法が区別される。
固相合成は、自由度が高く、既にオートメーションが存在しているといった利点を有する。生成物は、多くの場合、数ミリグラムから１００ミリグラムの範囲の研究室規模で一般的に合成される。その原理は、特に、収率を高めるために過剰の試薬での実施を可能にする精製の点で、利点が知られているサポートケミストリー(support chemistry)の原理をベースにしている。このような経路は、それらの活性をスクリーニングすることを視野に入れて、多数の化合物を合成するために一般に使用される。

溶液合成は、それが関与する限り、単一バッチで多量の生成物を調製することを可能にするという利点を有する。全ての反応が、前の場合のように樹脂に支持された如何なる試薬も使用しないで、溶液中で達成される。ペプチドの合成では、これが工業的合成のためには最も好ましい方法である。
天然のペプチドからの半合成(hemisynthesis)反応もまた挙げられる。それらは、天然に生じたペプチドを制限的に加水分解し(多くの場合は酵素経路を介する)、ペプチド性のペプチド断片混合物を生成し、これを分離した後、場合によっては誘導体化して、所望の化合物を得ることからなる。

(溶液合成)
本出願人の知る限りでは、一つの文献のみがＫＰＶトリペプチドのジアミド化合物の溶液合成を開示しており、例証されている化合物はＡｃ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２のみである(Eberleら, 1975)。
このような合成においては、リジン側鎖がＢｏｃ-Ｌｙｓ-ＯＨに導入されたＭＳＯＣ保護基により保護されて、Ｂｏｃ-Ｌｙｓ(ＭＳＯＣ)-ＯＨを形成する。Ｎ(α),Ｎ(ε)二保護リジンは、一般的なＤＣＣ／ＨＯＢｔ法により、Ｂｏｃ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２,ＨＣｌとカップリングされる。そして、Ｂｏｃ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２,ＨＣｌ反応物は、Ｂｏｃ-Ｐｒｏ-ＯＨ及びＢｏｃ-Ｖａｌ-ＮＨ_２から２工程で得られる。全収率は、Ｂｏｃ-Ｌｙｓ(ＭＳＯＣ)-ＯＨをベースにして算出して３３％である。全体的な合成反応式を、以下のスキーム(Ｉ)に例示する：

前記Ａｃ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２化合物(未特定塩)とジアセチル化されたＡｃ-Ｌｙｓ(Ａｃ)-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２のホモログの概略的かつ不完全な調製法は、欧州特許出願番号第０３１７５７３号(リプトン(Lipton))において述べられている。
他の文献、例えば国際公開第００５６３５３号(リプトン)には、Ａｃ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２化合物が記載されているが、それは合成方式を示しているのみである。「ペプチドを固相ペプチド合成法によって調製し、逆相高速液体クロマトグラフィーによって精製した」と述べられている。

固相
固相では、Ａｃ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２の合成について、全体的な収率が５６．１％でＬ系列のものが記載されている(Sawyer, 1981)。
今なお固相では、Staplesら(1985)の文献は、Ａｃ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２化合物を得ることが可能なペプチド合成法を開示しているが、構造に幾ばくかの矛盾があり、アミノ酸分析はグリシンの存在を示している。Sawyerが自身の論文(Sawyer, 1981)において使用した固相方法は、Ａｃ-ペプチド-ＮＨ_２ペプチド(Sawyer, 1982)の合成に一般化されてたが、Ａｃ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２トリペプチドは例証も記載もされていない。このような方法では(Sawyer, 1981；1982)、樹脂は、フッ化水素酸ＨＦにより樹脂ペプチドを分裂させた後、カルボキサミド形態(ＣＯ-ＮＨ_２)のものを良好な収率で直接得ることが可能なｐ-メチルベンズヒドリルアミン型樹脂である。アミノ酸はＢｏｃによるそのＮ-保護形態で導入され、一般的なＤＣＣ／ＨＯＢｔ法によりカップリングされる。リジンの場合では、Ｎ(α)Ｂｏｃ、Ｎ(α)-２,４-Ｃｌ２-Ｚ-Ｌｙｓ-ＯＨ形態で導入される。ペプチドを合成する場合、最後にカップリングされたアミノ酸のＮ(α)アミンの保護が脱保護され、末端アミノ酸が、樹脂の分裂前に、過剰のＮ-アセチルイミダゾールによりアセチル化される。このような方法により、以下のスキーム２：

に従い、全収率５６．１％で、Ａｃ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２トリペプチドが合成される(Sawyer, 1981)。

従来技術に開示された合成法の一般的原理
スキーム１において、ＫＰＶトリペプチドジアミド類を得るのを可能にする鍵となる中間体化合物はＢｏｃ-Ｌｙｓ(ＭＳＯＣ)-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２であり、双方の保護基は異なる操作条件で切り離される。(Ｂｏｃ)リジンのＮ(α)保護基の特異的な放出により、遊離のアミン官能基がアミド化され、ついでリジンのＮ(ε)アミン官能基が順に放出される。
より一般的には、(Ｉ)型誘導体の合成は、リジンのＮ(α)及びＮ(ε)アミン官能基の双方が、異なる操作条件で不安定な保護基により保護されている限りは、Ｈ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＯＨ(又はそれらの誘導体)トリペプチド合成の中間体化合物から意図されうる。

トリペプチドの二保護誘導体は従来技術に開示されている。
例えば、米国特許第５５８０８５５号(Ferreira)には、ＦＭＯＣをαアミン官能基の保護基として、また３つの異なるモノマーから合成されるポリメタクリルアミドポリマーを固相として使用する、Ｈ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＯＨトリペプチドの固相合成が開示されている。アミノ酸の導入が、対称的な無水形態下での活性化により生じる。リジンの場合では、Ｎ(ε)アミン官能基はＢｏｃにより保護される。合成完了時に、トリフルオロ酢酸を使用することにより、固体支持体からトリペプチドが放出され(Ｂｏｃ基も脱保護)、ＦＭＯＣは、ＤＭＦ中２０％のピペリジンにより予め放出される。

Ｈ-Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２中間体化合物(又はその塩)の調製は、特にSuli-Varghaら(1987)、Suli-Varghaら(1984)、Schwyzerら(1963)並びに欧州特許出願公開第７８１６７号に開示されている。
他の保護された中間体化合物としては、例えば、Ｈ-Ｌｙｓ(トシル)-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２(Hofmannら, 1960)、及びＨ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２(又はそれらの塩)(Yasutake及びPowers, 1981)、又はＺ-Ｌｙｓ(ホルミル)-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２(Suli-Varghaら, 1987)から調製されたＨ-Ｌｙｓ(ホルミル)-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２、ＨＣｌを挙げることができる。

先に記載したように、従来技術におけるＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体の合成方法には、次のような不具合がある：
(ａ)固相合成法により、満足のいく純度のＫＰＶペプチドジアミド誘導体を得ることができるが、これは数ミリグラムから数百ミリグラムと、少量の最終生成物を製造する場合のみに適しており、工業的需要には不適合であり；
(ｂ)溶液合成法は多量の最終生成物を調製することができるが、３３％のオーダーの、満足できない収率である。このような溶液合成法は、連続的に長時間かつ費用のかかる、最終生成物の精製工程を必要とし、未精製形態のものを精製形態にする場合にかなりの量の生成物が損失する。
従って、如何なる特定の精製工程も必要がなく、高収率で多量の最終生成物を直接得るための、ＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体の合成方法が、当該分野において必要とされている。

(本発明の要約)
ＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体を合成するためのこのような方法が、本発明において提供される。本発明の合成方法は、リジン(Ｋ)、プロリン(Ｐ)又はバリン(Ｖ)アミノ酸残基のそれぞれの立体異性体のいずれか一つで達成され得る。
本発明の目的は、生成されるアミノ酸の立体化学とは無関係に、次の式(Ｉ)：

[上式中：
ａ）Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は互いに独立して、水素原子、又は
− Ｏ又はＮ又はＳ又はＳｉ等のヘテロ原子が挿入されていてもよい直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２アルキル部分、
− Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
− 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２ポリフルオロアルキル又はペルフルオロアルキル部分、
− Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ又はＩ等の一又は複数のハロゲン原子、又は一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分により置換されていてもよいアリール部分、
− アラルキル部分、
を表すか、又は
− Ｒ_１及びＲ'_１はＣ(Ｒ''_１)と共に、一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分で置換されていてもよく、及び／又はＯ、Ｓ又はＮ等のヘテロ原子を含有していてもよい、３〜７の原子を有する飽和環を形成可能であり、
但し、Ｒ_１(Ｒ'_１)(Ｒ''_１)ＣＯ基はアミノ酸残基又はペプチド残基を表さず；
ｂ）Ｒ_２及びＲ_３は互いに独立して、水素原子、又は
− Ｏ又はＮ又はＳ又はＳｉ等のヘテロ原子が挿入されていてもよい直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２４アルキル部分、
− Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
− 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２ポリフルオロアルキル又はペルフルオロアルキル部分、
− Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ又はＩ等の一又は複数のハロゲン原子、又は一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分により置換されていてもよいアリール部分、
− アラルキル部分、
を表すか、又は
− Ｒ_２及びＲ_３は窒素原子と共に、一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分で置換されていてもよい、５又は６の原子を有する飽和環を形成可能であり、該飽和環はＯ、Ｓ等のヘテロ原子又は付加的な窒素原子を含有していてもよく、
但し、Ｎ(Ｒ_２)(Ｒ_３)基はアミノ酸残基又はペプチド残基を表さない]
で表されるＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体、又は該式(Ｉ)を有するその誘導体塩の溶液合成法を提供するものであり；
その方法は、次の工程：
ａ）次の式(ＩＩ)：

[上式中、Ｐ_１及びＰ_２は互いに異なっており、互いに独立して、保護基を表す]
を有する、無機又は有機塩基で塩化されていてもよい二保護リジン残基を、次の式(ＩＩＩ)：

[上式中、Ｐ_３は任意のＰ_１及びＰ_２保護基とは異なる保護基を表すか、又はＰ_３は溶媒中、活性化試薬又はカップリング試薬の存在下、ヒドロキシル基を表す]
を有する、無機又は有機塩基で塩化されていてもよいプロリン残基と反応させて、次の式(ＩＶ)：

[上式中、Ｐ_１、Ｐ_２及びＰ_３は上述した意味を有する]
の化合物を得、
ｂ）
１）Ｐ_３がＯＨを表す式(ＩＶ)の化合物のプロリン残基のＣ末端官能基に、次の式(Ｖ)：

[上式中、Ｒ_２及びＲ_３は上述した意味を有する]
を有するバリン化合物をカップリングさせて、Ｐ_１保護基を除去し、
２）次の式(ＶＩ-Ａ)又は(ＶＩ-Ｂ)：

を有する化合物により、リジン残基のＮ末端位にＮＨ_２(α)基をアミド化して、次の式(ＸＩＩ)：

[上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
を有する化合物を得、
ここで工程１）及び２）の順序はいずれであってもよく、
ｃ）式(ＸＩＩ)を有する化合物からＰ_２保護基を除去し、無機又は有機塩の形態であってもよい、式(Ｉ)を有する化合物を得ることを含むことを特徴とする。

式(Ｉ)において、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１置換基は同一又は異なっている。それらは、次の：
− 水素、
− Ｏ又はＮ又はＳ又はＳｉ等のヘテロ原子が挿入されていてもよい直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２アルキル部分、
− Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
− 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２ポリフルオロアルキル又はペルフルオロアルキル部分、
− Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ又はＩ等の一又は複数のハロゲン原子、又は一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル基により置換されていてもよいアリール、
− アラルキル部分、
であるか、
− Ｒ_１及びＲ'_１はＣ(Ｒ''_１)と共に、一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分で置換されていてもよく、及び／又はＯ、Ｓ又はＮ等のヘテロ原子を含有していてもよい、３〜７の原子を有する飽和環を形成可能である、
といった意味を有する。
これに対し、Ｒ_１(Ｒ'_１)(Ｒ''_１)ＣＯ基は、アミノ酸残基又はペプチド鎖を表してはならない。

式(Ｉ)において、Ｒ_２及びＲ_３置換基は同一又は異なっている。それらは、次の：
− 水素原子、
− Ｏ又はＮ又はＳ又はＳｉ等のヘテロ原子が挿入されていてもよい直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２４アルキル部分、
− Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
− 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２ポリフルオロアルキル又はペルフルオロアルキル部分、
− Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ又はＩ等の一又は複数のハロゲン原子、又は一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル基により置換されていてもよいアリール、
− アラルキル部分、
であるか、
− Ｒ_２及びＲ_３は窒素原子と共に、一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分で置換されていてもよい、５又は６の原子を有する飽和環を形成可能であり、該飽和環はＯ、Ｓ等のヘテロ原子又は付加的な窒素原子を含有していてもよい、
といった意味を有する。
これに対し、Ｎ(Ｒ_２)(Ｒ_３)基はアミノ酸残基又はペプチド鎖を表してはならない。

「アルキル」なる用語は、一つのヘテロ原子が挿入されていてもよい、直鎖状又は分枝状の脂肪族炭化水素基を意味し、アルキル基は非置換であるか、一又は複数の同一又は異なった置換基により炭素原子上において置換されているかのいずれかであり、該置換基はアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルオキシ、アラルキルオキシ部分から選択される。「分枝状の」アルキルなる用語は、アルキル直鎖と結合した低級アルキル、例えばメチル、エチル又はプロピル基を意味する。好ましいアルキル基は、１〜８の炭素原子を有する「低級アルキル」基を含む。アルキル基の例は、メチル、エチル、ｉ-プロピル、ｔ-ブチル、ヘプチル、デシル又はシクロヘキシルメチル基である。
「シクロアルキル」なる用語は、４〜１０の炭素原子を有する非芳香環を意味し、環状アルキル基は部分的に不飽和であってもよい。好ましくは、シクロアルキル類には、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、アダマンチル、オクタヒドロナフチル及びペルヒドロナフチル基が含まれる。
「アリール」なる用語は、５〜１０の炭素原子を有する芳香族炭素環式部分を意味する。アリール基はアルキル、アリール、アラルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、カルボキシ、アロイル、ハロ、ニトロ、トリハロメチル、シアノ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、カルバモイル、アルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル置換基を含む、同一でも異なっていてもよい一又は複数の置換基により置換されたフェニル又はナフチル、もしくは非置換のフェニル又はナフチルを含む。

「アルコキシ」なる用語は、アルキル基が先に定義したような、アルキル-Ｏ-基を意味する。アルコキシ基にはメトキシ、エトキシ、ｎ-プロポキシ、ｉ-プロポキシ、ｎ-ブトキシ及びヘプトキシ基が含まれる。
「アリールオキシ」なる用語は、アリール基が例えば上述したような、アリール-Ｏ-基を意味する。アリールオキシ基にはフェノキシ及びナフトキシ基が含まれる。
「アラルキル」なる用語は、一又は複数のアリール基で置換されたアルキル基を意味する。
「アラルキルオキシ」なる用語は、アラルキル基が例えば上述したような、アラルキル-Ｏ-基を意味する。アラルキルオキシ基にはベンジルオキシ基が含まれる。
「アルコキシカルボニル」なる用語は、-Ｏ-ＣＯ-、例えばメトキシ-及びエトキシカルボニル基を意味する。
「アリールオキシカルボニル」なる用語は、アリール-Ｏ-ＣＯ-基、例えばフェノキシ-及びナフトキシカルボニル基を意味する。
「ハロ」なる用語は、フッ素、塩素又は臭素原子を意味する。

本発明の方法により、特に塩化形態でそれらの誘導体を得ることができる。本発明の化合物の塩は、無機又は有機酸塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、リン酸塩、ヒドロゲノリン酸塩(hydrogenophosphate)、プロピオン酸塩又はコハク酸塩から選択される。
本発明の方法は、使用されるアミノ酸の立体化学が何であれ、数キログラムの重量があるＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体を生産するといった、工業的規模での用途においてさらなる利点を有する。
また本発明は、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３が同時には水素原子を表さない(式ＩＡ)という付加的条件で、上述した式(Ｉ)により表されるＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体にも関する。
このような誘導体は、特に上述したもののような塩として存在し得る。

(発明の詳細な記載)
本発明においては、特に、合成工程の特定の組合せ、及び保護基の特定の組合せを使用することにより、溶液合成法において公知の従来技術の方法で得られた収率よりも高い最終的収率でＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体、又はこのような化合物の塩を得ることが可能であり、このような方法はイオン交換クロマトグラフィー等を介するといった、如何なる最終的な精製工程も必要としないことが分かる。
また、使用される保護基、試薬、及び反応順序を適切に選択することで、溶液合成においてＡｃ-Ｌｙｓ-Ｐｒｏ-Ｖａｌ-ＮＨ_２の場合では、３３％(Eberleら, 1975)から７０％超まで、収率を増加させることができることも実証された。
試薬／保護基の組合せ及び反応工程順序は、式(Ｉ)の化合物の調製においては新規である。

さらに、本発明の合成方法は工業的規模で適用可能である。最終生成物の単離は容易で、如何なるクロマトグラフィーによる精製、又はイオン交換カラムを用いた精製をも必要としない。このような面倒な技術は合成のいずれの工程においても実施されない。本発明の方法の工程ｃ）の完了時に、非常に高純度のＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体が直接得られる。合成の終了時、単離された結晶化生成物の純度を高速液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)で測定すれば、純度は９５％より高くなる。
他方、化合物(Ｉ)が塩化された形態で得られる場合は、該塩化は、Ｐ_２保護基の除去を含む本方法の最終工程中の場で生じ、任意の付加的な工程又は任意の特定の実施を必要としない。

本発明の目的は、生成されるアミノ酸の立体化学とは関係なく、次の式(Ｉ)：

[上式中：
ａ）Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は互いに独立して、水素原子、又は
− Ｏ又はＮ又はＳ又はＳｉ等のヘテロ原子が挿入されていてもよい直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２アルキル部分、
− Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
− 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２ポリフルオロアルキル又はペルフルオロアルキル部分、
− Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ又はＩ等の一又は複数のハロゲン原子、又は一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分により置換されていてもよいアリール部分、
− アラルキル部分、
を表すか、又は
− Ｒ_１及びＲ'_１はＣ(Ｒ''_１)と共に、一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分で置換されていてもよく、及び／又はＯ、Ｓ又はＮ等のヘテロ原子を含有していてもよい、３〜７の原子を有する飽和環を形成可能であり、
但し、Ｒ_１(Ｒ'_１)(Ｒ''_１)ＣＯ基はアミノ酸残基又はペプチド残基を表さず；
ｂ）Ｒ_２及びＲ_３は互いに独立して、水素原子、又は
− Ｏ又はＮ又はＳ又はＳｉ等のヘテロ原子が挿入されていてもよい直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２４アルキル部分、
− Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
− 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２ポリフルオロアルキル又はペルフルオロアルキル部分、
− Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ又はＩ等の一又は複数のハロゲン原子、又は一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分により置換されていてもよいアリール部分、
− アラルキル部分、
を表すか、又は
− Ｒ_２及びＲ_３は窒素原子と共に、一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分で置換されていてもよい、５又は６の原子を有する飽和環を形成可能であり、該飽和環はＯ、Ｓ等のヘテロ原子又は付加的な窒素原子を含有していてもよく、
但し、Ｎ(Ｒ_２)(Ｒ_３)基はアミノ酸残基又はペプチド残基を表さない]
を有するＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体、又は該式(Ｉ)を有するその誘導体塩の溶液合成法にあり；
該方法は、次の工程：
ａ）次の式(ＩＩ)：

[上式中、Ｐ_１及びＰ_２は互いに異なっており、互いに独立して、保護基を表す]
を有する、無機又は有機塩基で塩化されていてもよい二保護リジン残基を、次の式(ＩＩＩ)：

[上式中、Ｐ_３は任意のＰ_１及びＰ_２保護基とは異なる保護基を表すか、又はＰ_３は溶媒中、活性化試薬又はカップリング試薬の存在下、ヒドロキシル基を表す]
を有する、無機又は有機酸で塩化されていてもよいプロリン残基と反応させて、次の式(ＩＶ)：

[上式中、Ｐ_１、Ｐ_２及びＰ_３は上述した意味を有する]
の化合物を得、
ｂ）
１）Ｐ_３がＯＨを表す式(ＩＶ)の化合物のプロリン残基のＣ末端官能基に、次の式(Ｖ)：

[上式中、Ｒ_２及びＲ_３は上述した意味を有する]
を有するバリン化合物をカップリングさせて、Ｐ_１保護基を除去し、
２）次の式(ＶＩ-Ａ)又は(ＶＩ-Ｂ)：

を有する化合物により、リジン残基のＮ末端位にＮＨ_２(α)基をアミド化して、次の式(ＸＩＩ)：

[上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
を有する化合物を得、
ここで工程１）及び２）の順序はいずれであってもよく、
ｃ）式(ＸＩＩ)を有する化合物からＰ_２保護基を除去し、無機又は有機塩の形態であってもよい、式(Ｉ)を有する化合物を得ることを含むことを特徴とする。

工程ｃ）において、Ｐ_２保護基の除去は水素添加分解を介してなされる。水素添加分解が反応媒体中に含有される酸により実施される場合、該酸はそれにより放出されるリジンのアミン官能基の鉱化剤として作用する。最終的な塩は、好ましくは塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、リン酸塩、ヒドロゲノリン酸塩、プロピオン酸塩及びコハク酸塩から選択される。
本発明において、上述したような方法は、各リジン、プロリン又はバリンアミノ酸残基の立体異性体のいずれか一つで実施可能である。
好ましくは、本発明の方法においては、塩は対応する酸を導入することで、工程ｃ）中に得られる。
好ましくは、使用される酸は、酢酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、リン酸、ヒドロゲノリン酸、プロピオン酸又はコハク酸から選択される。
最も好ましくは、酸は酢酸又は塩酸である。

好ましい実施態様において、本発明の方法は、Ｐ_１及びＰ_２保護基が互いに独立して、Ａｄｏｃ(＝１-アダマンチルオキシカルボニル)、ＢＯＣ(＝ｔ-ブチルオキシカルボニル)、２-ブロモ-Ｚ(＝２-ブロモ-ベンジルオキシカルボニル)、又は２-クロロ-Ｚ(＝２-クロロ-ベンジルオキシカルボニル)又はＦｍｏｃ(＝９-フルオレニル-メトキシカルボニル)又はホルミル又はニコチノイル又は４-ニトロ-Ｚ(＝４-ニトロ-ベンジルオキシカルボニル)又はＴｆａ(＝トリフルオロアセチル)又はＴｏｓ(＝ｐ-トルエンスルホニル)又はＺ(＝ベンジルオキシカルボニル)又はａｄｐｏｃ(＝１-(アダマンチル)-１-メチルエトキシカルボニル)を表すことをさらに特徴としている。
溶液中で式(Ｉ)の化合物及び／又はその塩を調製するためには、ペプチド部分がＮ末端からＣ末端方向へ組み立てられるか、又はその逆でＣ末端からＮ末端方向へ組み立てられるかに応じていくつかの合成経路が考えられる。好ましくは、ペプチド鎖はＮ末端からＣ末端方向へ組み立てられる。

合成方法の出発物質は、次の構造：

[上式中、Ｐ_１及びＰ_２は異なっており、以下の保護基を表し、但しＰ_１はＰ_２と異なっており、Ｐ_１及びＰ_２は異なる操作条件で不安定であり：Ｐ_１、Ｐ_２＝Ａｄｏｃ＝(１-アダマンチルオキシカルボニル)、Ｂｏｃ(＝ｔ-ブチルオキシカルボニル)、２-ブロモ-Ｚ(＝２-ブロモ-ベンジルオキシカルボニル)、又は２-クロロ-Ｚ(＝２-クロロ-ベンジルオキシカルボニル)又はＦｍｏｃ(＝９-フルオレニルメトキシカルボニル)又はホルミル又はニコチノイル又は４-ニトロ-Ｚ(＝４-ニトロ-ベンジルオキシカルボニル)又はＴｆａ(＝トリフルオロアセチル)又はＴｏｓ(＝ｐ-トルエンスルホニル)又はＺ(＝ベンジルオキシカルボニル)又はＡｄｐｏｃ(＝１-(アダマンチル)-１-メチルエトキシカルボニル)であり、このリストは包括的なものではなく、単に具体例を付与するものである]
の、種々の操作条件で２つの不安定な保護基による二保護リジンである。
最も好ましくは、Ｐ_１及びＰ_２保護基は、異なる操作条件でそれぞれ除去されるように選択される。

ある場合には、式(ＩＩ)の化合物は、塩基、好ましくは有機塩基、さらに好ましくは有機アミン、例えばジクロロヘキシルアミン又はエチルジイソプロピルアミンで塩化可能である。好ましくは、構造(ＩＩ)を有する化合物は、Ｂｏｃ-Ｌｙｓ(Ｚ)-ＯＨ(Ｐ_１及びＰ_２は、それぞれＢｏｃ及びＺの意味を有する)である。
第２のアミノ酸の導入を可能にするペプチドカップリングは、構造(ＩＩＩＡ)(図１Ａ)を有するプロリン、又は構造(ＩＩＩＢ)(図１Ｂ)を有するプロリンのＣ保護誘導体のいずれかで生じ、化合物(ＩＩＩＡ)及び(ＩＩＩＢ)は、双方とも次の式(ＩＩＩ)：

を有する化合物である。
式(ＩＩＩ)の化合物は、無機又は有機酸で塩化されていてもよい。式(ＩＩＩ)の化合物は、Ｈ-Ｐｒｏ-ＡＭＣ、Ｈ-Ｐｒｏ-ｐ-ニトロベンジルエステル、Ｈ-Ｐｒｏ-ＯｔＢｕ、Ｈ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌ、Ｈ-Ｐｒｏ-ＯＭｅ、Ｈ-Ｐｒｏ-ＯＥｔ、好ましくはＨ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌ又はＨ-Ｐｒｏ-ＯＭｅ又はＨ-Ｐｒｏ-ＯＥｔから選択される。

二保護リジン(ＩＩ)とＣ保護プロリン(ＩＩＩ)のペプチドカップリングは、ペプチド合成における伝統的な活性化試薬又はカップリング試薬、例えばカルボジイミド類、例えばＤＣＣ(＝ジシクロヘキシルカルボジイミド)又はカルボジイミド類の水溶性形態のもの、例えばＥＤＣ(＝Ｎ-エチル-Ｎ'-(３-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミドヒドロクロリド)、ホスホニウム塩、例えばＢＯＰ(＝ベンゾトリアゾール-１-イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウム-ヘキサフルオロホスファート)、ＰｙＢＯＰ(＝(ベンゾトリアゾール-１-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウム-ヘキサフルオロホスファート)、ＰｙＢＲＯＰ(＝ブロモトリピロリジノホスホニウム-ヘキサフルオロホスファート)、ＰｙＣｌｏＰ(＝クロロトリピロリジノホスホニウム-ヘキサフルオロホスファート)、又はＰｙＣｌＵ(＝クロロ-Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'-ビス(テトラメチレン)ホルムアミジニウム-ヘキサフルオロホスファート)、Ｎ-ヒドロキシスクシンイミド、ＥＥＤＱ(＝１-エトキシカルボニル-２-エトキシ-１,２-ジヒドロキノリン)、ＣＤＩ(＝カルボニルジイミダゾール)等の試薬、又はクロロホルマート類、例えばクロロギ酸エチル又はクロロギ酸イソブチルにより生じる。カップリング試薬、例えばカルボジイミド類によりカップリングが生じる場合、ラセミ化を制限するために、添加剤、例えばＨＯＢｔ(＝１-ヒドロキシベンゾトリアゾール)又はＮ-ヒドロキシスクシンイミドを反応中に添加することができる。

図１Ａのスキームによれば、１-ヒドロキシベンゾトリアゾールが添加されてもされなくても、カルボジイミド類によりペプチドカップリングが生じることが好ましい。
図１Ｂのスキームによれば、Ｎ-ヒドロキシスクシンイミドでカップリングが生じることが好ましい。双方の場合とも、好ましい溶媒は、非プロトン性の両性溶媒、好ましくはジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)、Ｎ-メチルピロリドン(ＮＭＰ)、又は非プロトン性溶媒、例えば１,２-ジメトキシエタン(ＤＭＥ)、テトラヒドロフラン(ＴＨＦ)、ジオキサンの純粋物又は混合物である。

最後のペプチドカップリングは、無機又は有機酸により塩化されていてもよいＣアミド化バリン(Ｖ)(Ｒ_２及びＲ_３は既に記載した意味を有する)で生じ、例えば中間体化合物(Ｖ)はカルボン酸からのアミド合成法によりＢＯＣ-Ｖａｌ-ＯＨから順に調製される。

このように、中間体化合物(ＩＶ)は図２のスキーム、又は図３のスキームに従い、中間体化合物(Ｖ)とカップリングさせることができる。
同様に、中間体化合物(ＶＩＩ)は、図３のスキームに従い、(Ｖ)とカップリングさせることができ、ここで化合物(ＶＩＩ)は次の式：

を有するものである。

（本方法の工程ｂ）の第１の好ましい実施態様(図２)）
ＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体の合成方法の第１の好ましい実施態様では、ＫＰジペプチド(ＩＶ)はプロリン残基を有しており、そのカルボキシル基はＰ_３保護基で保護され、ＫＰジペプチド(ＩＶ)とバリン誘導体(ＩＩＩＡ)とのカップリングはＰ_１保護基が除去された後に生じ、続いて、このようにして放出されたリジン残基のＮＨ_２(α)遊離アミン官能基がアミド化される。この第１の好ましい実施態様は図２に例証されている。

このような好ましい実施態様では、上述したようなＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体を合成する方法は、工程ｂ）が、次の工程：
ｂ１）Ｐ_３が保護基を表す、式(ＩＶ)の化合物のＰ_１保護基を除去して、次の式(ＩＸ)：

[上式中、Ｐ_１は上述したものと同じ意味を有し、Ｐ_３は保護基を表す]
の化合物を得；
ｂ２）次の式(ＶＩ-Ａ)の化合物、又は次の式(ＶＩ-Ｂ)の化合物：

[上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は上述したものと同じ意味を有する]
で、式(ＩＸ)の化合物のリジン残基のＮＨ_２(α)基をアミド化して、次の式(Ｘ)：

[上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｐ_１は上述したものと同じ意味を有し、Ｐ_３は保護基を表す]
の化合物を得；
ｂ３）式(Ｘ)の化合物からＰ_３保護基を除去して、次の式(ＸＩ)：

[上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１及びＰ_２は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得；
ｂ４）無機又は有機酸で塩化されていてもよい、次の式(Ｖ)：

[上式中、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
のバリン化合物と、式(ＸＩ)の化合物とをカップリングさせ、次の式(ＸＩＩ)：

[上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得ることを含むことを特徴とする。

図２に例証される方法では、リジンのＮ(α)アミン官能基は、例えば使用されるＰ_１保護基の種類により決定されるような、所要の条件で放出される。例えば、Ｐ_１がＢＯＣ(＝ｔ-ブチルオキシカルボニル)基を表すならば、リジンのＮ(α)アミン官能基は、ジオキサン又はＴＨＦ等の非プロトン性溶媒、又はＴＨＦ-ＣＨ_２Ｃｌ_２又はジオキサン-ＣＨ_２Ｃｌ_２などの溶媒混合物で、塩酸水溶液等の無機酸で対応する化合物(ＩＶ)を処理することにより放出させることができる。ついで、−１０℃〜４０℃、好ましくは４℃〜３０℃の間で反応が生じる。次に、化合物(ＩＸ)のリジンのＮ(α)アミン官能基を通常の条件、例えば構造(ＶＩ-Ａ)を有する酸塩化物、又は構造(ＶＩ-Ｂ)を有する対称無水物、又は非対称無水物と反応させることによりアミド化するが、このようなリストは包括的なものではない。
好ましくは、反応は酸塩化物(ＶＩ-Ａ)又は無水物(ＶＩ-Ｂ)で生じる。溶媒は、好ましくは非プロトン性の両性溶媒、例えばＤＭＦ又はＮＭＰ、又は非プロトン性溶媒、例えばＴＨＦ、ジオキサンであり、これらの溶媒は純粋物又は混合物が使用され、混合溶媒は、例えばＣＨ_２Ｃｌ_２／水である。

化合物(ＩＸ)が塩化形態であるならば、反応媒体には、十分な量の有機塩基、例えばトリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、ブチルアミン、又は無機塩基、例えばＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｎａ_２ＣＯ_３、Ｋ_２ＣＯ_３、ＫＨＣＯ_３、ＮａＨＣＯ_３が添加される。
ついで、このようにして得られた化合物(Ｘ)のＣ末端酸官能基がＰ_３保護基の種類により決定されるような、所要の操作条件で放出される。例えば、Ｐ_３がＯＢｚｌベンジルエステルを表すならば、酸官能基は、無機又は有機塩基、好ましくは無機塩基、例えばＮａＯＨを化合物(Ｘ)に添加することにより放出させることができる。後者のケースにおいて、このような脱保護はエタノール又はメタノール等のアルコール媒体、又はヒドロアルコール媒体中、還流点から−５℃の温度、好ましくは＋４℃〜＋４０℃の温度で生じる。次いで、媒体を、好ましくは塩酸等の無機酸により酸性化した後、化合物(ＸＩ)が得られる。
次に、化合物(ＸＩ)と化合物(Ｖ)との間に最後のカップリングが生じ、ここで、後者は無機又は有機酸で塩化されていてもよい。

カップリング方法は、過去に開示されたものから選択される。好ましくは、カップリングはホスホニウム塩、例えばＢＯＰ又はＰｙＢＯＰ又はＰｙＢＲＯＰ又はＰｙＣｌｏＰ又はＰｙＣｌＵを使用して、又はウロニウム(uronium)塩、例えばＨＢＰｙＵ(＝Ｏ-(ベンゾトリアゾール-１-イル)-Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'-ビス(テトラメチレン)ウロニウムヘキサフルオロホスファート)、又はＨＢＴＵ(＝Ｏ-(ベンゾトリアゾール-１-イル)-Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート)、又はＨＡＴＵ(＝Ｏ-(７-アザベンゾトリアゾール-１-イル)-Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート)を使用することにより生じる。より好ましくは、カップリングは、ＢＯＰ又はＨＢＴＵにより生じる。このようなカップリングは非プロトン性の両性溶媒、例えばＤＭＦ又はＮＭＰ、又は非プロトン性溶媒、例えばＴＨＦ又はジオキサン中で生じる。反応は塩基性媒体で実施され、塩基は、好ましくは有機塩基、例えばトリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン又はブチルアミンであり、温度は、好ましくは−１０℃〜４０℃に設定される。それにより化合物(ＸＩＩ)が得られる。

（本方法の工程ｂ）の第２の好ましい実施態様(図３)）
ＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体の合成方法の第２の好ましい実施態様では、ＫＰジペプチドは、Ｐ_３保護基で保護されたプロリン残基のカルボキシル官能基を有しており、該Ｐ_３保護基がバリン化合物(Ｖ)とプロリンとのカップリングの前に除去され、ついでＰ_１保護基が除去され、リジン残基の遊離のＮＨ_２(α)官能基がアミド化される。本方法の第２の好ましい実施態様は図３に例証されている。

この第２の実施態様において、本明細書で一般的に定義されているＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体を合成する方法は、工程ｂ）が、次の工程：
ｂ５）Ｐ_３が保護基を表す、式(ＩＶ)の化合物のＰ_３基を除去して、次の式(ＶＩＩ)：

[上式中、Ｐ_１及びＰ_２は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得；
ｂ６）有機無機酸で鉱化されていてもよい次の式(Ｖ)：

[上式中、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
のバリン化合物と、式(ＶＩＩ)の化合物とをカップリングさせて、次の式(ＸＩＩＩ)：

[上式中、Ｐ_１、Ｐ_２、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得；
ｂ７）式(ＸＩＩＩ)の化合物からＰ_１保護基を除去して、無機又は有機酸により塩化されていてもよい次の式(ＸＩＶ)：

[上式中、Ｐ_２、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得；
ｂ８）無機又は有機酸により塩化されていてもよい次の式(ＶＩ-Ａ)の化合物、又は次の式(ＶＩ-Ｂ)の化合物：

[上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は上述したものと同じ意味を有する]
で、式(ＸＩＶ)の化合物のリジン残基のＮＨ_２(α)基をアミド化して、次の式(ＸＩＩ)：

[上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得ることを含むことを特徴とする。

図３に例証される方法において、保護されたジペプチド(ＩＶ)は、炭酸ナトリウム等の無機塩基によりまず鹸化されて、誘導体(ＶＩＩ)を得る。(ＶＩＩ)とバリン誘導体(Ｖ)(又はその塩)とのペプチドカップリングは過去に開示された方法の一つ、好ましくはカルボジイミド類を使用する方法を用いることで生じる。より好ましくは、使用されるカルボジイミド類はＥＤＣである。ついで、非プロトン性両性溶媒、例えばＤＭＦ又はＮＭＰ、又は非プロトン性溶媒、例えばＴＨＦ、ジオキサン中、塩基性媒体で、トリエチルアミン又はエチルジイソプロピルアミン等の有機塩基を添加することにより反応を実施する。次に、このようにして得られたトリペプチド(ＸＩＩＩ)のＮ(α)アミン官能基は、塩酸等の酸性媒体に放出させることができる。このような脱保護は、例えばジオキサンジクロロメタンにＨＣｌ水溶液が入った混合物中で生じる。次いで、化合物(ＸＩＶ)を塩酸塩形態下で得る。塩化されたＮ(α)アミン官能基を、非プロトン性両性溶媒、例えばＤＭＦ又はＮＭＰ、好ましくはＤＭＦ中、塩基性媒体、例えばエチルジイソプロピルアミン又はトリエチルアミンの存在下、対称無水物(ＶＩ-Ｂ)と反応させることでアミド化し、トリペプチド(ＸＩＩ)に至らしめることができる。

（本方法の工程ｂ）の第３の好ましい実施態様(図４)）
方法の第３の好ましい実施態様では、ＫＰジペプチドＫＰ(ＸＩＩ)のプロリン残基のカルボキシル官能基は保護されず(Ｐ_３＝ＯＨ)、Ｐ_１保護基は除去され、リジンのＮＨ_２(α)基は、得られた化合物がバリン(ＩＩＩ)残基とカップリングする前に、アミド化される。本発明の方法の前記第３の実施態様を図４に例証する。

この第３の好ましい実施態様では、本明細書で一般的に定義されているＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体を合成する方法は、工程ｂ）が、次の工程：
ｂ９）式(ＶＩＩ)の化合物からＰ_１保護基を除去して、有機又は無機塩基で塩化されていてもよい次の式(ＸＶ)：

[上式中、Ｐ_２は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得；
ｂ１０）次の式(ＶＩ-Ａ)の化合物、又は次の式(ＶＩ-Ｂ)の化合物：

[上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は上述したものと同じ意味を有する]
で、式(ＸＶ)の化合物のリジン残基のＮＨ_２(α)基をアミド化して、有機又は無機塩基で塩化されていてもよい次の式(ＸＩ)：

[上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得；
ｂ１１）無機又は有機酸で塩化されていてもよい次の式(Ｖ)：

[上式中、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
のバリン化合物と、式(ＸＩ)の化合物とをカップリングさせて、次の式(ＸＩＩ)：

[上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
の化合物を得ることを含むことを特徴とする。

図４に例証する方法において、誘導体(ＶＩＩ)のＮ(α)アミン官能基は、酸性媒体、例えば塩酸中に放出される。このような脱保護は、ジオキサン-ジクロロメタンの混合物において、例えばＨＣｌ水溶液により実施され、塩化された化合物(ＸＶ)に至る。ついで、Ｎ(α)アミン官能基は図３のようにしてアミド化され、誘導体(ＸＩ)に至らしめることができる。
バリン誘導体(Ｖ)(又はその塩)と(ＸＩ)のペプチドカップリングは過去に開示された方法の一つ、好ましくホスホニウム塩を使用する方法を用いることで実施される。より好ましくは、選択されるホスホニウム塩はＢＯＰである。非プロトン性両性溶媒、例えばＤＭＦ又はＮＭＰ、又は非プロトン性溶媒、例えばＴＨＦ又はジオキサン中、塩基性媒体で、例えばトリエチルアミン又はエチル-ジイソプロピルアミン等の有機塩基を添加することにより反応が実施される。

（本方法の工程ｃ）の好ましい実施態様）
本方法の工程ｃ）において、Ｐ２保護化合物を式(ＸＩＩ)の化合物から除去し、塩の形態であってよい式(Ｉ)のＫＰＶから誘導されるジアミド誘導体が得られる。本方法の工程ｃ）を図５に例証する。
図２、３又は４に例証された任意の実施態様に従って得られた化合物(ＸＩＩ)は、一つの工程で容易に変形させて、対応する式(Ｉ)の化合物に至らしめることが可能で、この工程は、図５に例証しているように、リジンのＮ(ε)アミン官能基の脱保護である。
好ましくは、Ｎ(ε)アミン官能基はベンジルオキシカルボニル(Ｚ)基により保護され、脱保護は、パラジウム炭(palladium on coal)による水素化触媒を介して実施される。より好ましくは、反応は、１〜５当量の有機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、酢酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、リン酸、ヒドロゲノリン酸、プロピオン酸又はコハク酸が存在するエタノール等のアルコール媒体中、１〜３バールの範囲の水素圧下で実施される。
水素化は、好ましくは５℃〜５０℃、より好ましくは１０℃〜３０℃で生じる。ついで、化合物(Ｉ)が、塩化された形態で直接得られる。

（本方法の好ましい一般的な技術的特徴）
好ましくは、本発明の方法は、式(ＩＩ)の化合物において、Ｐ_１保護基がｔ-ブチルオキシカルボニル(Ｂｏｃ)であり、Ｐ_２保護基がベンジルオキシカルボニル(Ｚ)であることを特徴としている。
好ましくは、本発明の方法は、式(ＩＩＩ)の化合物において、Ｐ_３保護基がベンジルエステルＯＢｚｌ基であることを特徴としている。
好ましくは、本発明の方法は、式(Ｉ)の化合物において、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１基がそれぞれ水素原子を表すことを特徴としている。
好ましくは、本発明の方法は、式(Ｉ)の化合物において、Ｒ_２及びＲ_３基がそれぞれ水素原子を表すことを特徴としている。
好ましくは、本発明の方法は、Ｐ_１保護基がｔ-ブチルオキシカルボニル(Ｂｏｃ)であり、Ｐ_２保護基がベンジルオキシカルボニル(Ｚ)であり、Ｐ_３保護基がベンジルエステルＯＢｚｌであることを特徴とする。

（本発明の方法の最も好ましい実施態様）
最も好ましくは、式(Ｉ)のＫＰＶトリペプチドから誘導されるジアミド類は、Ｐ_１がｔ-ブチルオキシカルボニル基(Ｂｏｃ)を表し、Ｐ_２がベンジルオキシカルボニル基(Ｚ)を表す化合物(ＩＩ)、及び酸性官能基がベンジルエステルで保護されており、対応する化合物(ＩＩＩ-Ａ)が好ましくはｐ-トルエンスルホン酸で鉱化されている化合物(ＩＩＩ-Ａ)から得られるものであることが好ましい。
このような化合物は、式(Ｉ)のＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体を得るために、図１Ａ、ついで図２(本方法の工程ｂの第１の好ましい実施態様)、ついで図５に例証した連続的な経路順序に応じて、好ましく実施される。
Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３置換基の種類に応じて、好ましい経路順序により、中間体化合物の単離及び／又は精製をする必要なく、実行することが可能になる。例えばＲ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３＝Ｈであると、最も好ましい方法は、図６に記載したような試薬及び操作条件で実施される。
図６に例証したＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体の合成方法の実施態様において、中間体化合物(ＩＩＩ)、(ＩＶ)及び(ＩＸ)は精製されておらず、例えば次の工程を含む。このような方法では、任意のクロマトグラフィーよるカラム精製又はイオン交換は実施されない。それは、全ての特許請求の範囲に記載の塩に適用される。最終生成物の純度はＨＰＬＣにより測定される。
より有利には、操作条件はラセミ化を最小限にするようになされる。

（本発明の新規化合物及び新規組成物）
本発明の他の目的は、次の式(ＩＡ)：

[上式中：
ａ）Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は互いに独立して：
− Ｏ又はＮ又はＳ又はＳｉ等のヘテロ原子が挿入されていてもよい直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２アルキル部分、
− Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
− 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２ポリフルオロアルキル又はペルフルオロアルキル部分、
− Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ又はＩ等の一又は複数のハロゲン原子、又は一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキルにより置換されていてもよいアリール部分、
− アラルキル部分、
を表すか、又は
− Ｒ_１及びＲ'_１はＣ(Ｒ''_１)と共に、一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分で置換されていてもよく、及び／又はＯ、Ｓ又はＮ等のヘテロ原子を含有していてもよい、３〜７の原子を有する飽和環を形成可能であり、また
− 水素を表し、
但し、Ｒ_１(Ｒ'_１)(Ｒ''_１)ＣＯ基はアミノ酸残基又はペプチド残基を表さず、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１の少なくとも一が水素とは異なり；
ｂ）Ｒ_２及びＲ_３は互いに独立して、水素原子を表す、又は
− Ｏ又はＮ又はＳ又はＳｉ等のヘテロ原子が挿入されていてもよい直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２４アルキル部分、
− Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
− 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２ポリフルオロアルキル又はペルフルオロアルキル部分、
− Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ又はＩ等の一又は複数のハロゲン原子、又は一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル基により置換されていてもよいアリール部分、
− アラルキル部分、
を表すか、又は
− Ｒ_２及びＲ_３は窒素原子と共に、一又は複数の直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_４アルキル部分で置換されていてもよい、５又は６の原子を有する飽和環を形成可能であり、該飽和環はＯ、Ｓ等のヘテロ原子又は付加的な窒素原子を含有していてもよく、
但し、Ｒ_２又はＲ_３残基の少なくとも一は水素とは異なり、Ｎ(Ｒ_２)(Ｒ_３)基はアミノ酸又はペプチド残基を表さない]
のＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体又は誘導体塩である。

好ましくは、上述したＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体の塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、リン酸塩、ヒドロゲノリン酸塩、プロピオン酸塩及びコハク酸塩から選択される。
好ましくは、上述したＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体塩は、リジン、プロリン又はバリンアミノ酸残基が、このような残基のそれぞれにおける任意の立体異性体とすることができることを特徴とする。

また本発明は、生理学的に許容可能な媒体に、例えば上述したような式(ＩＡ)のＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体を含有せしめてなる組成物に関する。
第１の有利な実施態様では、上述した組成物は、媒体が化粧用媒体であり、誘導体(ＩＡ)が１０^−８〜１０^−３ｇ／１００ｇの範囲の含有量で存在していることを特徴とする。
第２の有利な実施態様では、上述した組成物は、媒体が製薬用媒体であり、誘導体(ＩＡ)が５ｘ１０^−４ｇ／１００ｇより多い含有量で存在していることを特徴とする。

また本発明は、化粧用組成物中における、又は乾燥肌及び／又は敏感肌の処置のための又はこれを予定した製薬用組成物の製造のための、例えば上述したような誘導体(ＩＡ)の使用に関する。

本発明を次の実施例によりさらに例証するが、これは本発明を何ら制限するものではない。
実施例
種々の塩の形態でのＫＰＶトリペプチドジアセチル誘導体の合成
Ｉ．ＴｏｓＯＨ、Ｈ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌ(ＩＩＩ)の調製
Dean-Stark製の不活性で攪拌可能な熱安定反応器に、５０．２２ｇのｐ-トルエンスルホン酸一水和物(１．１当量)及び１４０ｍｌのトルエンを２０℃で導入する。媒体を溶解するまで攪拌し、７４．５ｍｌのベンジルアルコール(３当量)、続いて２７．６３ｇのＨ-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＨ(２４０ｍｍｏｌ)を添加する。混合物を２５０-３００ミリバールの真空下で１６時間還流する。反応の完了をＣＣＭ制御する。媒体を、それ以上できなくなるまで真空濃縮する。
このようにして得られた生成物を何ら精製することなく使用する。

ＩＩ．Ｂｏｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌ(ＩＶ)の調製
先の工程の残渣を、８３ｍｌのＤＭＦにより回収し、８７ｇのＢｏｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-ＯＨ(１当量)、続いて３５ｇのＨＯＢｔ、１Ｈ_２Ｏ(１当量)を添加する。混合物を１０℃で冷却し、この温度を維持し、５４．７７ｇのＥＤＣ(２８６ｍｍｏｌ、１．２５当量)、続いて５９ｍｌのエチルジイソプロピルアミン(３４２．９６ｍｍｏｌ、１．５当量)を添加する。ついで、温度を２０℃に到達せしめ、溶液を２〜２０時間攪拌する。反応の完了をＣＣＭ制御する。
反応媒体を１１０ｍｌのジクロロメタン及び２２０ｍｌの水に注いで１５分間攪拌し、デカントして、再度有機相を、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液２ｘ２２０ｍｌで再度洗浄する。８３ｍｌのジクロロメタンを用い、水相を再度カスケード抽出する。有機相を集め、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、４６０ｍｌに調節する(濃縮又は希釈)。
このようなＢｏｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌ溶液を次の工程で使用する。

ＩＩＩ．ＨＣｌ、Ｈ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌ(ＩＸ)の調製
不活性雰囲気下、先の溶液を５℃まで冷却し、ジオキサン(１８２８ｍｍｏｌ、８当量)に４ＮのＨＣｌが入ったもの４６０ｍｌ(１７容量)を添加する。室温まで戻した後、２〜３時間、攪拌し続ける。
反応の完了をＣＣＭ制御する。
ついで、反応媒体を攪拌しつつ、２７０ｍｌの水と２７０ｇの氷の混合物に注ぐ。混合物をデカントし、有機相を次の工程で使用する。

ＩＶ．Ａｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌ(Ｘ)の調製
先に得られたＨＣｌ、Ｈ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌのクロロメチレン溶液を５℃まで冷却し、１３５ｍｌの水、ついで３２．３ｍｌの無水酢酸(１．５当量)を添加する。ついで、３０分から１時間以内に、５ＮのＮａＯＨをｐＨ１０になるように添加する(９０〜１３０ｍｌが必要とされる)。
媒体を室温で２時間３０分から３時間攪拌し、反応の完了をＣＣＭ制御する。
媒体をデカントし、有機相を水、ついでＮａＣｌ飽和水溶液(各時、１１０ｍｌ、４容量)で洗浄する。有機相をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、真空濃縮する(最大４０℃、最大５０ミリバール)。
残渣を次の工程で使用する。

Ｖ．Ａｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＨ(ＸＩ)の調製
先の工程で得られたＡｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＢｚｌ化合物(理論値：２３０ｍｍｏｌ)を、３１３ｍｌのメタノールと混合し、１ＮのＮａＯＨ(３１３ｍｍｏｌ、１．３６当量)を３１３ｍｌ添加し、室温で一晩攪拌する。反応の完了をＣＣＭ制御する。
その後、ジイソプロピルエーテルを添加し(３１３ｍｌ、１１容量)、媒体をデカントし、３ｘ１５０ｍｌのジイソプロピルエーテルを用い、水相を再度３回抽出する。ついで、水相を、ジクロロメタン５４０ｍｌと、４ＮのＨＣｌ水溶液(１．２当量)７０ｍｌとの混合物に注ぐ。混合物を１５分攪拌し、デカントする。分離した有機相を水、ついでＮａＣｌ飽和水溶液(各時、１１０ｍｌ、４容量)で洗浄する。有機相をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、真空濃縮する(最大４０℃、最大５０ミリバール)。このようにして得られた生成物９４．２５ｇは泡の形態である(関与したＢｏｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-ＯＨに基づき算出して、収率＝９８％)。

ＶＩ．Ａｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２(ＸＩＩ)の調製
機械式攪拌機を具備する不活性な熱安定反応器に、９４．２５ｇのＡｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-ＯＨ(ＸＩ)(２２４．７ｍｍｏｌ)、続いて４７０ｍｌのＤＭＦを導入し、３２．５８ｇのＨＣｌ、Ｈ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２(Ｖ)(２１３．５ｍｍｏｌ、０．９５当量)及び８５．２２ｇのＨＢＴＵ(１当量)を添加する。媒体を５℃まで冷却し、９６．６ｍｌのエチルジイソプロピルアミン(２．５当量)を１５分以内に滴下する。再度、０℃まで到達せしめたところ、１時間３０分から２時間後、強い結晶化が観察される。反応の完了をＣＣＭ制御する。ついで、反応媒体を２３５０ｍｌのＡｃＯＥｔに注ぎ、１５分攪拌し、濾過し、４７０ｍｌのＡｃＯＥｔ及び４７０ｍｌのジイソプロピルエーテルで連続的に洗浄する。誘導体(ＸＩＩ)を２５℃で真空乾燥させる。このようにして、１０７．２ｇ(９２％)のＡｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２が得られる。

ＶＩＩ．ＡｃＯＨ、Ａｃ-Ｄ-Ｌｙｓ-Ｄ-Ｐｒｏ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２(Ｉ)の調製
最後の工程は、リジンのＺベンジルオキシカルボニル保護基の水素添加分解を含む。反応媒体に使用される酸が原因で、放出されたアミン官能基が塩化される。
１）酢酸塩形態での単離
１０７ｇのＡｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２を５３５ｍｌのＥｔＯＨに溶解し、ＡｃＯＨを２１４ｍｌ及びＰｄ／Ｃの１０％５０％水を２１．４ｇ添加する。１バールの水素圧下、２０℃で１６時間水素化を行う。反応の完了をＣＣＭ制御する。触媒を濾過し、濾液を、それ以上できなくなるまで真空濃縮する。残査を１０７ｍｌのＥｔＯＨで回収し、４３０ｍｌのｉＰｒＯＨを添加し、混合物を５０℃で加熱し、ついで１５００ｍｌのジイソプロピルエーテルを５０℃で滴下する。所望の生成物を結晶化する。媒体を２０℃まで冷却し、１時間攪拌する。固形物を濾過し、真空下、２５℃で乾燥させる前に、５００ｍｌのジイソプロピルエーテルで洗浄し、酢酸塩の形態で、７８．３ｇのＡｃ-Ｄ-Ｌｙｓ-Ｄ-Ｐｒｏ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２が得られる(収率８５．４％)。このようにして得られた生成物の純度をＨＰＬＣ制御する。
必要であるならば、生成物を０．５μ濾過で「再結晶」し、同様の条件で７１ｇのＡｃＯＨ、Ａｃ-Ｄ-Ｌｙｓ-Ｄ-Ｐｒｏ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２が得られる(精製収率＝９１％；Ｂｏｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-ＯＨに基づく全体的な収率、７４％)。

２）酒石酸形態での単離
酒石酸の存在下、Ｚベンジルオキシカルボニル基の水素添加分解を行い、酒石酸塩を得る。Ｌ酸及びＤ-酒石酸は双方とも、それに匹敵する塩(comparable salt)を得る。
５ｇのＡｃ-Ｄ-Ｌｙｓ(Ｚ)-Ｄ-Ｐｒｏ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２を２５ｍｌのＥｔＯＨに懸濁させ、Ｌ-(＋)-酒石酸(１．０２当量)を１．４８ｇ及びＰｄ／Ｃの１０％５０％水を０．５ｇ添加する。１バールの水素圧下、２０℃で１６時間水素化を行う。
反応の完了をＣＣＭ制御する。生成物を媒体中、部分的に結晶化する。ついで１０ｍｌの水を添加し、触媒を濾過し、濾液を、それ以上できなくなるまで真空濃縮する。残査を、５０℃に加熱された４０ｍｌのｉＰｒＯＨで回収し、５０℃で４０ｍｌのエタノールを滴下する。生成物を結晶化する。媒体を２０℃まで冷却し、４０ｍｌのｉＰｒＯＨ及び５０ｍｌのジイソプロピルエーテルを添加する前に１時間攪拌する。抽出された固形物を濾過し、真空下、２５℃で乾燥させる前に、５０ｍｌのジイソプロピルエーテルで洗浄し、４．１２ｇの酒石酸塩、Ａｃ-Ｄ-Ｌｙｓ-Ｄ-Ｐｒｏ-Ｄ-Ｖａｌ-ＮＨ_２が得られる(収率８０％)。このようにして得られた生成物をＨＰＬＣ制御する。必要であれば、次のようにして精製することができる。
得られた生成物を２容量のエタノール及び１容量の水に溶解させ、濾過し、４容量のイソプロパノールを添加する。溶液を濾過し、ついで１４容量の濾過されたジイソプロピルエーテルを添加する。形成された結晶をスピン乾燥させ、真空下、２０℃で乾燥させた後、９０％再結晶化され、濾過された生成物が得られる。

３）コハク酸塩又はクエン酸塩での単離
酒石酸で記載されたプロトコルが、コハク酸又はクエン酸でも再現することができる。
必要に応じて、生成物は、それぞれの塩を、１容量の水、続いて４容量の濾過されたイソプロパノール及び１４容量の濾過されたジイソプロピルエーテルが添加された２容量のエタノールに溶解させて、０．５μ濾過で精製することができる。

参考文献
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SULI-VARGHA H., JENEY A., LAPIS K., MEDZIHRADSZKY K., J. Med. Chem., 1987, 30(3),583-6。
SULI-VARGHA H., MEDZIHRADSZKY K., Int. J. Pept. Protein Res., 1984, 23(6), 650-6。
YASUTAKE A., POWERS J., Biochemistry, 1981, 20(13), 3675-9。
R. SCHWYZER, A. COSTOPANAGIOTIS, P. SIEBER, Helv. Chim. Acta, 1963, 46, 870-889。
K. HOFMANN, M. WOOLNER, H YAJIMA, G. SPUHLER, T. THOMPSON, E. SCHWARTZ, J.Am. Chem. Soc., 1958, 80, 6458。
K. HOFFMANN, T. THOMPSON, M. WOOLNER, G. SPUHLER, H. YAJIMA, J. CIPERA, E. SCHWARTZ, J. Am. Chem. Soc., 1960, 3721。
STAPLES D., SAWYER T., MAC HADLEY E., ENGEL M., DEVAUX A., AFFHOLTER J., DARMAN P., CODY W., WILKES B., HRUBY, V., Pept.：Struct. Funct., Proc. Am. Pept. Symp., 9th(1985), 691-4。
T. SAWYER, V. HRUBY, B. WILKES, M. DRAELOS, E. Mac HADLEY, M. BERGSNEIDER, J. Med. Chem., 1982, 25, 1022-1027。
T. SAWYER, Thesis, University of Arizona, 1981。

リジン残基とプロリン残基とのカップリング方法の実施態様を例証するものであり、プロリン残基のカルボキシル官能基はＰ_３保護基により保護されている。 リジン残基とプロリン残基とのカップリング方法の実施態様を例証するものであり、プロリン残基のカルボキシル官能基は遊離である(Ｐ_３＝ＯＨ)。 本発明の方法の工程ｂ）の第１の好ましい実施態様を例証するものである。 本発明の方法の工程ｂ）の第２の好ましい実施態様を例証するものである。 本発明の方法の工程ｂ）の第３の好ましい実施態様を例証するものである。 本発明の方法の工程ｃ）を例証するものである。 本発明のＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体の合成方法の最も好ましい実施態様の完全なスキームを表すものである。

Claims (25)

1. 生成されるアミノ酸の立体化学とは無関係に、次の式(Ｉ)：
   

   

   [上式中：
   ａ）Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は互いに独立して、水素原子、又は
   − 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２アルキル部分、
   − Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
   を表し、
   ｂ）Ｒ_２及びＲ_３は互いに独立して、水素原子、又は
   − 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２４アルキル部分、
   − Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分を表す]
   で表されるＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体、又は該式(Ｉ)を有する化合物の塩の溶液合成法において；
   次の工程：
   ａ）次の式(ＩＩ)：
   

   

   [上式中、Ｐ_１及びＰ_２は互いに異なっており、それぞれ互いに独立して、Ａｄｏｃ(＝１-アダマンチルオキシカルボニル)、ＢＯＣ(＝ｔ-ブチルオキシカルボニル)、２-ブロモ-Ｚ(＝２-ブロモ-ベンジルオキシカルボニル)、又は２-クロロ-Ｚ(＝２-クロロ-ベンジルオキシカルボニル)又はＦｍｏｃ(＝９-フルオレニルメトキシカルボニル)又はホルミル又はニコチノイル又は４-ニトロ-Ｚ(＝４-ニトロ-ベンジルオキシカルボニル)又はＴｆａ(＝トリフルオロアセチル)又はＴｏｓ(＝ｐ-トルエンスルホニル)又はＺ(＝ベンジルオキシカルボニル)又はＡｄｐｏｃ(＝１-(アダマンチル)-１-メチルエトキシカルボニル)から選択される保護基を表す]
   を有する、無機又は有機塩基で塩化されていてもよい二保護リジン残基を、次の式(ＩＩＩ)：
   

   

   [上式中、Ｐ_３はＰ_１及びＰ_２保護基のいずれとも異なる保護基を表すか、又はＰ_３はヒドロキシル基を表す]
   を有する、無機又は有機酸で塩化されていてもよいプロリン残基と、溶媒中にて、活性化試薬又はカップリング試薬の存在下で、反応させて、次の式(ＩＶ)：
   

   

   [上式中、Ｐ_１、Ｐ_２及びＰ_３は上述した意味を有する]
   の化合物を得、
   ｂ）
   １）Ｐ_３がＯＨを表す式(ＩＶ)の化合物のプロリン残基のＣ末端官能基に、次の式(Ｖ)：
   

   

   [上式中、Ｒ_２及びＲ_３は上述した意味を有する]
   を有するバリン化合物をカップリングさせて、Ｐ_１保護基を除去し、
   ２）次の式(ＶＩ-Ａ)又は(ＶＩ-Ｂ)：
   

   

   を有する化合物により、リジン残基のＮ末端位にＮＨ_２(α)基をアミド化して、次の式(ＸＩＩ)：
   

   

   [上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
   を有する化合物を得、
   ここで工程１）及び２）の順序はいずれであってもよく、
   ｃ）式(ＸＩＩ)を有する化合物からＰ_２保護基を除去し、無機又は有機塩の形態であってもよい、式(Ｉ)を有する化合物を得る工程を含むことを特徴とする方法。
2. 塩が、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、リン酸塩、ヒドロゲノリン酸塩、プロピオン酸及びコハク酸塩から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
3. リジン、プロリン又はバリンアミノ酸残基が、該残基のそれぞれの立体異性体のいずれかとできることを特徴とする、請求項１又は２に記載の方法。
4. 塩が、対応する酸を導入することで、工程ｃ）中に得られることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の方法。
5. 酸が、酢酸又は塩酸又は臭化水素酸又は硫酸又はクエン酸又は酒石酸又は乳酸又はリン酸又はヒドロゲノリン酸又はプロピオン酸又はコハク酸であることを特徴とする請求項４に記載の方法。
6. 酸が酢酸又は塩酸であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
7. Ｐ_１及びＰ_２保護基が、異なる操作条件でそれぞれ除去されるように選択されることを特徴とする請求項１ないし６のいずれか１項に記載の方法。
8. 式(ＩＩ)の化合物が、有機塩基、好ましくは有機アミンで塩化されていることを特徴とする、請求項１ないし７のいずれか１項に記載の方法。
9. 式(ＩＩＩ)の化合物が、無機又は有機酸で塩化されていることを特徴とする、請求項１ないし８のいずれか１項に記載の方法。
10. 工程ａ）において、ペプチドカップリング反応が、クロロホルマート類、又は試薬、又はホスホニウム塩、カルボジイミド類の水溶性形態のもの、又はカルボジイミド類から選択される活性化又はカップリング試薬の存在下で生じることを特徴とする、請求項１ないし９のいずれか１項に記載の方法。
11. 工程ｂ）が、次の工程：
    ｂ１）Ｐ_３が保護基を表す、式(ＩＶ)の化合物のＰ_１保護基を除去して、次の式(ＩＸ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_１は請求項１と同じ意味を有し、Ｐ_３は保護基を表す]
    の化合物を得；
    ｂ２）次の式(ＶＩ-Ａ)の化合物、又は次の式(ＶＩ-Ｂ)の化合物：
    

    

    [上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は請求項１と同じ意味を有する]
    で、式(ＩＸ)の化合物のリジン残基のＮＨ_２(α)基をアミド化して、次の式(Ｘ)：
    

    

    [上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｐ_１は請求項１と同じ意味を有し、Ｐ_３は保護基を表す]
    の化合物を得；
    ｂ３）式(Ｘ)の化合物からＰ_３保護基を除去して、次の式(ＸＩ)：
    

    

    [上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１及びＰ_２は請求項１と同じ意味を有する]
    の化合物を得；
    ｂ４）無機又は有機酸で塩化されていてもよい、次の式(Ｖ)：
    

    

    [上式中、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
    のバリン化合物と、式(ＸＩ)の化合物とをカップリングさせ、次の式(ＸＩＩ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
    の化合物を得ることを含むことを特徴とする、請求項１ないし１０のいずれか１項に記載の方法。
12. 工程ｂ）が、次の工程：
    ｂ５）Ｐ_３が保護基を表す、式(ＩＶ)の化合物のＰ_３基を除去して、次の式(ＶＩＩ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_１及びＰ_２は請求項２と同じ意味を有する]
    の化合物を得；
    ｂ６）無機又は有機酸で塩化されていてもよい次の式(Ｖ)：
    

    

    [上式中、Ｒ_２及びＲ_３は請求項１と同じ意味を有する]
    のバリン化合物と、式(ＶＩＩ)の化合物とをカップリングさせて、次の式(ＸＩＩＩ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_１、Ｐ_２、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
    の化合物を得；
    ｂ７）式(ＸＩＩＩ)の化合物からＰ_１保護基を除去して、無機又は有機酸により塩化されていてもよい次の式(ＸＩＶ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_２、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
    の化合物を得；
    ｂ８）無機又は有機酸により塩化されていてもよい次の式(ＶＩ-Ａ)の化合物、又は次の式(ＶＩ-Ｂ)の化合物：
    

    

    [上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は請求項１と同じ意味を有する]
    で、式(ＸＩＶ)の化合物のリジン残基のＮＨ_２(α)基をアミド化して、次の式(ＸＩＩ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
    の化合物を得ることを含むことを特徴とする、請求項１ないし１０のいずれか１項に記載の方法。
13. 工程ｂ）が次の工程：
    ｂ９）Ｐ _３ 基がヒドロキシ基を示す式(ＶＩＩ)の化合物からＰ_１ 保護基を除去して、次の式(ＸＶ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_２は請求項２と同じ意味を有する]
    の化合物を得；
    ｂ１０）次の式(ＶＩ-Ａ)の化合物、又は次の式(ＶＩ-Ｂ)の化合物：
    

    

    [上式中、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は請求項１と同じ意味を有する]
    で、式(ＸＶ)の化合物のリジン残基のＮＨ_２(α)基をアミド化して、有機又は無機塩基で塩化されていてもよい次の式(ＸＩ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は上述したものと同じ意味を有する]
    の化合物を得；
    ｂ１１）無機又は有機酸で塩化されていてもよい次の式(Ｖ)：
    

    

    [上式中、Ｒ_２及びＲ_３は請求項１と同じ意味を有する]
    のバリン化合物と、式(ＸＩ)の化合物とをカップリングさせて、次の式(ＸＩＩ)：
    

    

    [上式中、Ｐ_２、Ｒ_１、Ｒ'_１、Ｒ''_１、Ｒ_２及びＲ_３は上述したものと同じ意味を有する]
    の化合物を得ることを含むことを特徴とする、請求項１ないし１０のいずれか１項に記載の方法。
14. 式(ＩＩ)の化合物において、Ｐ_１保護基がｔ-ブチルオキシカルボニル(ＢＯＣ)であり、Ｐ_２保護基がベンジルオキシカルボニル(Ｚ)であることを特徴とする、請求項１ないし１３のいずれか１項に記載の方法。
15. 式(ＩＩＩ)の化合物において、Ｐ_３保護基がＯＢｚｌベンジルエステル基であることを特徴とする、請求項１ないし１４のいずれか１項に記載の方法。
16. 式(Ｉ)の化合物において、Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１基がそれぞれ水素原子を表すことを特徴とする、請求項１ないし１５のいずれか１項に記載の方法。
17. 式(Ｉ)の化合物において、Ｒ_２及びＲ_３基がそれぞれ水素原子を表すことを特徴とする、請求項１ないし１３のいずれか１項に記載の方法。
18. Ｐ_１保護基がｔ-ブチルオキシカルボニル(ＢＯＣ)であり、Ｐ_２保護基がベンジルオキシカルボニル(Ｚ)であり、Ｐ_３保護基がＯＢｚｌベンジルエステルであることを特徴とする、請求項１ないし１３のいずれか１項に記載の方法。
19. 次の式(ＩＡ)：
    

    

    [上式中：
    ａ）Ｒ_１、Ｒ'_１及びＲ''_１は互いに独立して、水素原子、あるいは、
    − 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２２アルキル部分、
    − Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
    を表し、
    Ｒ _１、Ｒ'_１、Ｒ''_１の少なくとも一が水素とは異なり；
    ｂ）Ｒ_２及びＲ_３は互いに独立して、水素原子を表すか、又は
    − 直鎖状又は分枝状のＣ_１-Ｃ_２４アルキル部分、
    − Ｃ_４-Ｃ_１０シクロアルキル部分、
    を表し、
    Ｒ _２又はＲ_３残基の少なくとも一は水素とは異なる]
    により表されるＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体又は誘導体塩。
20. 塩が、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、リン酸塩、ヒドロゲノリン酸塩、プロピオン酸塩及びコハク酸塩から選択されることを特徴とする、請求項１９に記載のＫＰＶトリペプチドジアミド塩。
21. リジン、プロリン又はバリンアミノ酸残基が、このような残基のそれぞれの立体異性体のいずれかとできることを特徴とする、請求項１９又は２０に記載のＫＰＶトリペプチドジアミド誘導体又は誘導体塩。
22. 生理学的に許容可能な媒体に、請求項１９ないし２１のいずれか１項に記載の誘導体(Ａ)を含有せしめてなる化粧用又は製薬用組成物。
23. 媒体が化粧用媒体であり、誘導体(ＩＡ)が１０^−８〜１０^−３ｇ／１００ｇのＰ _３ 基がヒドロキシ基を示す式(ＶＩＩ)の化合物からＰ_１ 保護基を除去して範囲の含有量で存在していることを特徴とする請求項２２に記載の化粧用又は製薬用組成物。
24. 媒体が製薬用媒体であり、誘導体(ＩＡ)が５ｘ１０^−４ｇ／１００ｇより多い含有量で存在していることを特徴とする請求項２２に記載の化粧用又は製薬用組成物。
25. 化粧用組成物中における、又は乾燥肌及び／又は敏感肌の処置のための又はこれを予定した製薬用組成物の製造のための、請求項１９ないし２１のいずれか１項に記載の誘導体(ＩＡ)の使用。

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