JP4047230B2

JP4047230B2 - Skin preparation

Info

Publication number: JP4047230B2
Application number: JP2003165909A
Authority: JP
Inventors: 勉坂井田; 信彦小杉; 和寿大隅; 宏水谷; 悟中田
Original assignee: Nippon Menard Cosmetic Co Ltd
Current assignee: Nippon Menard Cosmetic Co Ltd
Priority date: 2003-06-11
Filing date: 2003-06-11
Publication date: 2008-02-13
Anticipated expiration: 2023-06-11
Also published as: JP2005002025A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、特定のシソ科に属する植物抽出物を含有することにより、老化防止と美白作用に優れた皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、生体成分を酸化させる要因として、フリーラジカルや活性酸素がとりあげられ、その悪影響が問題となっている。フリーラジカルや活性酸素は、生体内で生じ、コラーゲン等の生体組織を分解あるいは架橋し、また、油脂類を酸化して、細胞に障害を与える過酸化脂質をつくると言われている。この様な障害は、肌のシワやハリが低下する等の老化の原因になると考えられており、老化を防ぐ方法の一つにフリーラジカルや活性酸素を除去する抗酸化剤を配合する方法が知られている。従来、老化防止を目的として用いられるフリーラジカル消去剤にはアスコルビン酸（ビタミンＣ）、トコフェロール（ビタミンＥ）、３，５−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）等が用いられてきた。
【０００３】
皮膚は、表皮、真皮、皮下組織からなるが、中でも真皮は皮膚の構造維持に極めて重要であり、ヒアルロン酸、エラスチン、コラーゲン等から形成される真皮結合組織によって皮膚のハリが保たれている。この結合組織が収縮力を失い、さらに弾力性を失う結果として皮膚のシワやタルミが発生すると考えられている。
【０００４】
また、皮膚に紫外線が当たるとエラスターゼやコラゲナーゼ等のマトリックスメタロプロテアーゼが活性化される。これらの酵素は、真皮の主要成分であるエラスチンやコラーゲンを減少させることにより、皮膚のシワやタルミを促進すると言われている。また、ヒアルロニダーゼは、炎症時に活性化され、高分子のヒアルロン酸を低分子化することにより、皮膚のハリを低下させてシワ等の老化を引き起こすことが知られている。
【０００５】
近年、この皮膚のシワやタルミ等を防止する多くの化粧料が知られ、その有効成分としてレチノイン酸、α−ヒドロキシ酸、レチノール等が報告されている。しかしながら、これらの有効成分は皮膚刺激性や安定性に問題がある場合が多い。また、シワやタルミを防ぐ方法の一つに、ヒアルロニダーゼ、エラスターゼ、コラゲナーゼ阻害剤を配合することが知られている。しかし、これらの酵素の阻害作用を持つ植物原料として、本発明の植物は検討されていなかった。
【０００６】
一般にシミ、ソバカス、日焼け等に見られる皮膚の色素沈着は、ホルモンの異常や紫外線の刺激により、皮膚内に存在するメラニン色素生成細胞がメラニン色素を過剰に生成し、これが皮膚内に沈着することが原因と考えられている。このような色素沈着を防ぐ方法の一つに、メラニンの過剰な生成を抑制する方法が知られている。従来、色素沈着の治療にはハイドロキノンやアスコルビン酸（ビタミンＣ）等を外用する処置が行われてきた。
【０００７】
従来の技術として、コリウス・ブルメイの抽出物を用いた抗酸化剤が特許文献１に記載されている。これは、製剤の酸化を防止する目的であり、皮膚に与える効果に関する記載はない。
【特許文献１】
特開平９−７８０６２号
【０００８】
また、コリウス・スクテラリオイデスの抽出物を用いた化粧料が特許文献２に記載されている。しかしながら、美白効果に関する記載はない。本発明の範囲外であるが、コリウス・フォルスコリ（Ｃｏｌｅｕｓｆｏｒｓｋｏｈｌｉｉ）は皮膚の色素形成を促進させることが特許文献３に記載されており、本発明の植物抽出物とは全く正反対の活性を有する。よって、コリウスの中でもかなり有効成分が異なると考えられる。
【０００９】
【特許文献２】
特開平４−７８０６２号
【特許文献３】
特表平５−５０１１０８号
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
皮膚の老化防止又は抗酸化を目的として用いられるＳＯＤは不安定であり、製剤化が難しく、ビタミンＥも効果が充分であるとは言えない。また、合成化合物であるＢＨＴ等は安全性に問題があり、配合量に制限があることから、化学合成品ではなく、安定でかつ副作用の少ない天然原料が望まれている。同様に、安全で安定なヒアルロニダーゼ、エラスターゼ及びコラゲナーゼ阻害作用を有することが老化防止に好ましい。また、美白剤して用いられるアスコルビン酸は経時的に分解しやすい等の欠点があるため、同様に安定性が高く、効果の優れた天然物由来の皮膚外用剤が望まれている。
【００１１】
以上のことから、安全で安定性に優れ、老化防止及び美白作用に優れた皮膚外用剤が望まれている。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
このような事情により、本発明者らは鋭意検討した結果、特定のシソ科に属する植物抽出物が優れた活性酸素消去作用、ヒアルロニダーゼ阻害、エラスターゼ阻害、コラゲナーゼ阻害及びメラニン生成抑制作用をもち、安定性においても優れていることを見出した。さらに、その抽出物を含有する皮膚外用剤が、安全で安定であり、老化防止及び美白作用に優れていることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
本発明に用いるシソ科の植物としては、シソ科ソレノステモン属、コリウス属などに属し、ソレノステモン・スクテラリオイデス（Ｓｏｌｅｎｏｓｔｅｍｏｎｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）、コリウス・ブルメイ（Ｃｏｌｅｕｓｂｌｕｍｅｉ）、コリウス・スクテラリオイデス（Ｃｏｌｅｕｓｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）、コリウス・ラビアタエ（Ｃｏｌｅｕｓｌａｂｉａｔａｅ）などがある。特に、ソレノステモン・スクテラリオイデス、コリウス・ブルメイは園芸品種「コリウス」として広く販売されている。コリウス・スクテラリオイデスは中国で彩葉草といわれている。
【００１４】
本発明に用いる特定のシソ科に属する植物抽出物とは、植物体の葉、茎、花、根等の植物体の一部又は全草から抽出したものである。好ましくは、植物体の葉、茎から抽出して得られるものが良い。その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。
【００１５】
抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【００１６】
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【００１７】
本発明の皮膚外用剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤等の成分を配合することができる。
【００１８】
本発明の皮膚外用剤は、化粧品、医薬部外品、医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、化粧水、クリ−ム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデ−ション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等の皮膚に適用されるものが挙げられる。
【００１９】
本発明に用いる上記抽出物の配合量は、本発明の皮膚外用剤全量に対し、固形物に換算して０．０００１重量％以上、好ましくは０．００１〜１０重量％の配合が良い。０．０００１重量％未満では十分な効果は望みにくい。１０重量％を越えて配合した場合、効果の増強は認められにくく不経済である。また、添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【００２０】
【実施例】
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の部とは重量部を、％とは重量％を示す。
【００２１】
製造例１ソレノステモン・スクテラリオイデスの熱水抽出物
ソレノステモン・スクテラリオイデス（Ｓｏｌｅｎｏｓｔｅｍｏｎｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）の全草の乾燥物２０ｇに精製水４００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してソレノステモン・スクテラリオイデスの熱水抽出物１を２．０ｇ得た。
【００２２】
製造例２ソレノステモン・スクテラリオイデスの５０％エタノール抽出物
ソレノステモン・スクテラリオイデス（Ｓｏｌｅｎｏｓｔｅｍｏｎｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）の全草の乾燥物１００ｇに５０％エタノール１Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、ソレノステモン・スクテラリオイデスの５０％エタノール抽出物を３．８ｇ得た。
【００２３】
製造例３ソレノステモン・スクテラリオイデスの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物
ソレノステモン・スクテラリオイデス（Ｓｏｌｅｎｏｓｔｅｍｏｎｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）の全草の乾燥物２０ｇに精製水２００ｍＬ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、ソレノステモン・スクテラリオイデスの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３８０ｇ得た。
【００２５】
製造例５コリウス・スクテラリオイデスの熱水抽出物
コリウス・スクテラリオイデス（Ｃｏｌｅｕｓｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）の全草の乾燥物２０ｇに精製水４００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してコリウス・スクテラリオイデスの熱水抽出物を１．８ｇ得た。
【００２６】

［製造方法］成分１〜６及び１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。
【００２７】
比較例１従来の化粧水
実施例１において、ソレノステモン・スクテラリオイデスの熱水抽出物を精製水に置き換えたものを従来の化粧水とした。
【００２８】

［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００２９】
比較例２従来のクリーム
実施例２において、ソレノステモン・スクテラリオイデスの５０％エタノール抽出物を精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。
【００３１】

［製造方法］成分２〜５と、成分１及び６〜１１をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製
品とする。
【００３２】

［製造方法］成分１〜１１を均一に溶解し製品とする。
【００３４】

［製造方法］成分１〜５を均一に混合し製品とする。
【００３５】

［製造方法］成分３〜６を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１、２及び７〜９を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００３６】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００３７】
実験例１活性酸素消去作用
製造例１及び２を試料として用い、活性酸素の一種であるスーパーオキシドの消去作用を測定した。陽性対照として、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）を用いた。また、試料の安定性を確認するために、試料を４０℃で２週間保存して同様に測定を行った。
【００３８】
各濃度の試料水溶液０．１ｍＬに０．４５ｍＬの発色試薬（０．２４ｍＭニトロブルーテトラゾリウム、０．４ｍＭキサンチンを含む０．１Ｍリン酸緩衝液；ｐＨ８．０）と０．４５ｍＬの酵素液（０．１Ｕ／ｍＬキサンチンオキシダーゼを含む０．１Ｍリン酸緩衝液；ｐＨ８．０）を加え、３７℃で２０分間反応させジホルマザンを生じさせた。この溶液に反応停止液（６９ｍＭドデシル硫酸ナトリウム水溶液）１．０ｍＬを加えた後、波長５６０ｎｍにおける吸光度を測定した。各試料の阻害作用は、次の式から求められる消去率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクとしてチロシナーゼの代わりに０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８．０）を用いた。
消去率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１００
Ａ：対照の５６０ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．５６０）
Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．５６０
Ｃ：試料のＯ．Ｄ．５６０
Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．５６０
これらの試験結果を表１に示した。その結果、ＳＯＤは４０℃で２週間の保存により、活性酸素消去作用が大きく減少したが、本発明の抽出物は消去作用に変化はなかった。以上のことから、本発明の抽出物は、安定で優れた活性酸素消去作用を示した。
【００３９】
【表１】

【００４０】
実験例２ヒアルロニダーゼ阻害作用
製造例１及び２を試料として用い、ヒアルロニダーゼ阻害作用をＭｏｒｇａｎ−Ｅｌｓｏｎ法を応用した方法〔食品衛生学雑誌，３１，３（１９９０）〕に準じて測定した。すなわち、試料液に０．１Ｍ酢酸バッファ（ｐＨ４．０）１７５μＬを加え、さらにヒアルロニダーゼの酵素活性を４００Ｕ／ｍＬ、ヒアルロン酸の濃度を０．４ｍｇ／ｍＬ、活性化剤のコンパウンド４８／８０を０．０６ｍｇ／ｍＬになるようにして全量を５００μＬに調整した後、ヒアルロニダーゼ反応を３７℃で４０分間実施した。反応後にｐ−ジメチルアミノベンズアルデヒド試薬を加えて発色させ、５８５ｎｍにおける吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクとしてヒアルロニダーゼの代わりに精製水を用いた。
阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１００
Ａ：対照の５８５ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．５８５）
Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．５８５
Ｃ：試料のＯ．Ｄ．５８５
Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．５８５
【００４１】
これらの実験結果を表２に示した。その結果、本発明の抽出物は優れたヒアルロニダーゼ阻害作用を示した。
【００４２】
【表２】

【００４３】
実験例３エラスターゼ阻害作用
製造例１及び２を試料として用い、エラスターゼ阻害作用を測定した。試料液５０μＬに酵素液として０．０２ｍｇ／ｍＬエラスターゼＴｙｐｅＩＩＩ（シグマ製）を含むトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）を５０μＬ加える。基質溶液として０．４５ｍｇ／ｍＬのＮ−Ｓｕｃｃｉｎｙｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−ρ−ｎｉｔｒｏａｎｉｌｉｄｅ（シグマ製）を含む０．２Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）を１００μＬ加えて混合した後、３７℃、１時間反応させ、４１５ｎｍにおける吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクとしてエラスターゼの代わりに０．２Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）を用いた。
阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１００
Ａ：対照の４１５ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．４１５）
Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．４１５
Ｃ：試料のＯ．Ｄ．４１５
Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．４１５
【００４４】
これらの実験結果を表３に示した。その結果、本発明の抽出物は優れたエラスターゼ阻害作用を示した。
【００４５】
【表３】

【００４６】
実験例４コラゲナーゼ阻害作用
製造例１及び２を試料として用い、コラゲナーゼ阻害作用を測定した。試料液５０μＬに酵素液として０．１ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼＴｙｐｅＩＶ（シグマ製）水溶液を５０μＬ加える。基質溶液として０．３９ｍｇ／ｍＬのＰｚ−ペプタイド（Ｐｚ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｒｇ−ＯＨ、シグマ製）を含む２０ｍＭ塩化カルシウム入りトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．１）を加えて混合し、３７℃、３分反応させた後、２５ｍＭクエン酸１ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチル５ｍＬを加えて抽出して、酢酸エチル層を３２０ｎｍの吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクとしてコラゲナーゼの代わりに２０ｍＭ塩化カルシウム入りトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．１）を用いた。
阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１００
Ａ：対照の３２０ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．３２０）
Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．３２０
Ｃ：試料のＯ．Ｄ．３２０
Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．３２０
【００４７】
これらの実験結果を表４に示した。その結果、本発明の抽出物は優れたコラゲナーゼ阻害作用を示した。
【００４８】
【表４】

【００４９】
実験例５メラニン生成抑制作用
製造例１及び２を試料として用い、メラニン生成抑制作用を測定した。対数増殖期にあるメラノーマをφ６０ｍｍｄｉｓｈに３×１０^４個の細胞を播種し、種々の濃度の海藻の抽出物あるいは陽性対照であるアスコルビン酸を含むＥａｇｌｅｓ’ＭＥＭ（１０％牛胎児血清含有）培地を加え、３７℃、５％ＣＯ_２の条件下にて培養した。また、試料の安定性を確認するために、試料の水溶液を２４時間室温で放置した液を使用して同様に評価を行った。培養５日後に細胞をｄｉｓｈから剥離し、細胞を超音波破砕した後、２ＮＮａＯＨを加え６０℃で２時間の処理を行い、分光光度計でＯ．Ｄ．４７５ｎｍを測定した。尚、超音波処理後の細胞破砕液をＬｏｗｒｙの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９３，２６５−２７５，１９５１）でタンパク定量し、タンパク量当りのメラニン量を比較することによって、メラニン生成抑制効果の指標とした。
【００５０】
これらの試験結果を表５に示した。本発明の本発明の抽出物は優れたメラニン生成抑制作用を示した。
【００５１】
【表５】

【００５２】
実験例６使用試験１
実施例１の化粧水、実施例２のクリーム、比較例１の従来の化粧水及び比較例２の従来のクリームを用いて、女性１０人（２１〜４６才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、肌のシワ、タルミの改善効果をアンケートにより判定した。
【００５３】
これらの試験結果を表６に示した。その結果、本発明の抽出物を含有する皮膚外用剤は優れたシワ、タルミの改善作用を示した。なお、試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。また、処方成分の劣化についても問題なかった。
【００５４】
【表６】

【００５５】
実験例７使用試験２
実施例１の化粧水、実施例２のクリーム、比較例１の従来の化粧水及び比較例２の従来のクリームを用いて、シミ、ソバカスに悩む女性１０人（２１〜４６才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、シミ、ソバカスの改善効果をアンケートにより判定した。
【００５６】
これらの試験結果を表７に示した。その結果、本発明の抽出物を含有する皮膚外用剤は、優れたシミ、ソバカスの改善作用を示した。なお、試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。また、処方成分の劣化についても問題なかった。
【００５７】
【表７】

【００５８】
その他の実施例についても同様に使用試験を行ったところ、優れたシワ、タルミ、シミ、ソバカス等の改善作用を示した。
【００５９】
【発明の効果】
以上のことから、特定のシソ科に属する植物抽出物は、優れた活性酸素消去作用、ヒアルロニダーゼ阻害、エラスターゼ阻害、コラゲナーゼ阻害及びメラニン生成抑制作用を有し、安定性にも優れていた。さらに、これらの抽出物を含有する皮膚外用剤は、安全で優れた老化防止、及び美白作用を示した。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a skin external preparation excellent in anti-aging and whitening action by containing a plant extract belonging to a specific Lamiaceae.
[0002]
[Prior art]
In recent years, free radicals and active oxygen have been taken up as factors that oxidize biological components, and their adverse effects have become a problem. It is said that free radicals and active oxygen are generated in the living body, decompose or crosslink biological tissues such as collagen, and oxidize fats and oils to form lipid peroxides that damage cells. Such disorders are thought to cause aging such as wrinkles and firmness of the skin, and one method of preventing aging is to incorporate an antioxidant that removes free radicals and active oxygen. Are known. Conventional free radical scavengers used to prevent aging include ascorbic acid (vitamin C), tocopherol (vitamin E), 3,5-tert-butyl-4-hydroxytoluene (BHT), superoxide dismutase (SOD) Etc. have been used.
[0003]
The skin is composed of epidermis, dermis, and subcutaneous tissue. Among them, the dermis is extremely important for maintaining the structure of the skin, and the firmness of the skin is maintained by the dermal connective tissue formed from hyaluronic acid, elastin, collagen and the like. It is believed that this connective tissue loses its contractile force and further loses its elasticity, resulting in skin wrinkles and sagging.
[0004]
In addition, when the skin is exposed to ultraviolet rays, matrix metalloproteases such as elastase and collagenase are activated. These enzymes are said to promote skin wrinkles and tarmi by reducing elastin and collagen, which are the main components of the dermis. It is known that hyaluronidase is activated at the time of inflammation and lowers the high molecular weight of hyaluronic acid, thereby lowering the elasticity of the skin and causing aging such as wrinkles.
[0005]
In recent years, many cosmetics for preventing wrinkles, tarmi and the like of this skin are known, and retinoic acid, α-hydroxy acid, retinol and the like have been reported as active ingredients. However, these active ingredients often have problems with skin irritation and stability. In addition, it is known that hyaluronidase, elastase, and collagenase inhibitor are blended as one method for preventing wrinkles and tarmi. However, the plant of the present invention has not been studied as a plant material having an inhibitory action on these enzymes.
[0006]
In general, pigmentation of the skin seen in spots, buckwheat, sunburn, etc. is caused by excessive melanin pigment formation by melanin-producing cells present in the skin due to hormonal abnormalities or stimulation of ultraviolet rays, which deposits in the skin. Is considered to be the cause. As one method for preventing such pigmentation, a method for suppressing excessive production of melanin is known. Conventionally, treatments for applying pigment such as hydroquinone or ascorbic acid (vitamin C) have been performed for the treatment of pigmentation.
[0007]
As a conventional technique, Patent Document 1 describes an antioxidant using an extract of Coleus bloomei. This is for the purpose of preventing the oxidation of the preparation, and there is no description regarding the effect on the skin.
[Patent Document 1]
JP-A-9-78062 [0008]
Patent Document 2 discloses a cosmetic using an extract of Coleus scutellarioides. However, there is no description regarding the whitening effect. Although outside the scope of the present invention, it is described in Patent Document 3 that Coleus forskohlii promotes skin pigmentation, and has exactly the opposite activity as the plant extract of the present invention. Therefore, it is considered that the active ingredients are considerably different in Coleus.
[0009]
[Patent Document 2]
Japanese Patent Laid-Open No. 4-78062 [Patent Document 3]
Special table hei 5-501108 [0010]
[Problems to be solved by the invention]
SOD used for the purpose of preventing skin aging or anti-oxidation is unstable, difficult to formulate, and vitamin E is not effective enough. Moreover, since BHT etc. which are synthetic compounds have a problem in safety | security and there exists a restriction | limiting in compounding quantity, it is not a chemical synthetic product but the natural raw material which is stable and has few side effects is desired. Similarly, it is preferable for preventing aging that it has a safe and stable hyaluronidase, elastase and collagenase inhibitory action. In addition, since ascorbic acid used as a whitening agent has drawbacks such as being easily decomposed over time, a skin external preparation derived from natural products having high stability and excellent effect is also desired.
[0011]
From the above, a skin external preparation that is safe and excellent in stability, excellent in anti-aging and whitening action is desired.
[0012]
[Means for Solving the Problems]
Under these circumstances, as a result of intensive studies, the present inventors have found that plant extracts belonging to specific Lamiaceae have excellent active oxygen scavenging action, hyaluronidase inhibition, elastase inhibition, collagenase inhibition and melanin production inhibition action, and are stable. It was found that it is excellent also in sex. Furthermore, it discovered that the skin external preparation containing the extract was safe and stable, and was excellent in anti-aging and whitening effect, and came to complete this invention.
[0013]
The Labiatae plant used in the present invention belongs to the genus Solenostemon, Coleus, etc., and includes Solenostemon scutellarioides, Coleus blumei, and Coleus scutellarioides. And Coleus labiatae. In particular, Solenostemon scutellarioides and Coleus bulmay are widely sold as garden varieties "Coleus". Coleus scutellarioides is said to be a foliage in China.
[0014]
The plant extract belonging to the specific Lamiaceae used in the present invention is extracted from a part of the plant body such as leaves, stems, flowers, roots or the whole plant. Preferably, those obtained by extraction from leaves and stems of plants are good. The extraction method is not particularly limited, and for example, it may be a heat extraction or a room temperature extraction.
[0015]
Examples of the solvent to be extracted include water, lower alcohols (methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, etc.), liquid polyhydric alcohols (1,3-butylene glycol, propylene glycol). , Glycerin, etc.), ketones (acetone, methyl ethyl ketone, etc.), acetonitrile, esters (ethyl acetate, butyl acetate, etc.), hydrocarbons (hexane, heptane, liquid paraffin, etc.), ethers (ethyl ether, tetrahydrofuran, propyl ether) Etc.). Preferred are polar solvents such as water, lower alcohols and liquid polyhydric alcohols, and particularly preferred are water, ethanol, 1,3-butylene glycol and propylene glycol. These solvents may be used alone or in combination of two or more.
[0016]
The extract may be used as it is, or may be used after concentration, dilution and filtration treatment, decolorization with activated carbon, deodorization treatment, or the like, if necessary. Further, the extracted solution may be subjected to a treatment such as concentration to dryness, spray drying, freeze drying, etc., and used as a dried product.
[0017]
In the external preparation for skin of the present invention, the above extract may be used as it is, and within the range not impairing the effect of the extract, oils and fats, waxes, hydrocarbons, fatty acids which are components used in the external preparation , Alcohols, esters, surfactants, metal soaps, pH adjusters, preservatives, fragrances, moisturizers, powders, UV absorbers, thickeners, pigments, antioxidants, whitening agents, chelating agents, etc. These components can be blended.
[0018]
The external preparation for skin of the present invention can be used for any of cosmetics, quasi drugs, and pharmaceuticals. Examples of the dosage form include skin lotions, creams, emulsions, gels, aerosols, essences, Examples include packs, cleaning agents, bath preparations, foundations, dusting powders, lipsticks, ointments, and poultices applied to the skin.
[0019]
The amount of the extract used in the present invention is 0.0001% by weight or more, preferably 0.001 to 10% by weight in terms of solid matter, based on the total amount of the external preparation for skin of the present invention. If it is less than 0.0001% by weight, a sufficient effect is hardly expected. When the blending amount exceeds 10% by weight, the effect is hardly recognized and it is uneconomical. In addition, the addition method may be added in advance or during the production, and may be appropriately selected in consideration of workability.
[0020]
【Example】
Next, in order to describe the present invention in detail, examples of producing the extract used in the present invention, formulation examples and experimental examples of the present invention will be given as examples, but the present invention is not limited thereto. In the examples, the part of the amount is part by weight, and% is% by weight.
[0021]
Production Example 1 Solenostemon scutellarioides hot water extract 400 ml of purified water was added to 20 g of a dried product of the whole plant of Solenostemon scutellarioides, extracted at 95-100 ° C. for 2 hours, and then filtered. The filtrate was concentrated and freeze-dried to obtain 2.0 g of hot water extract 1 of Solenostemon scutellarioides.
[0022]
Production Example 2 Solenostemon scutellarioides 50% ethanol extract Solenostemon scutellarioides whole plant 100 g was added to 1 g of 50% ethanol, extracted at room temperature for 7 days, and then filtered. The filtrate was concentrated to dryness to obtain 3.8 g of a 50% ethanol extract of Solenostemon scutellarioides.
[0023]
Production Example 3 Solenostemon scutellarioides 50% 1,3-butylene glycol extract Solenostemon scutellarioides whole plant 20 g of purified water 200 mL and 1,3-butylene glycol 200 mL In addition, extraction was performed at room temperature for 7 days, followed by filtration to obtain 380 g of a 50% 1,3-butylene glycol extract of Solenostemon scutellarioides.
[0025]
Production Example 5 Hot Water Extract of Coleus scutellarioides 400 mL of purified water was added to 20 g of a dried product of the whole plant of Coleus scutellarioides, extracted at 95-100 ° C. for 2 hours, and then filtered. The filtrate was concentrated and freeze-dried to obtain 1.8 g of a hot water extract of Coleus scutellarioides.
[0026]

[Production method] Components 1 to 6 and 11 and components 7 to 10 are uniformly dissolved, and both are mixed and filtered to obtain a product.
[0027]
Comparative Example 1 Conventional lotion In Example 1, the hot water extract of Solenostemon scutellarioides was replaced with purified water.
[0028]

[Manufacturing method] Components 2 to 9 are heated and dissolved and mixed, and kept at 70 ° C to obtain an oil phase. Ingredients 1 and 11 to 14 are dissolved by heating and mixed, and kept at 75 ° C. to form an aqueous phase. The aqueous phase is added to the oil phase to emulsify, and the mixture is cooled while stirring. The component 10 is added at 45 ° C., and further cooled to 30 ° C. to obtain a product.
[0029]
Comparative Example 2 Conventional cream In Example 2, a 50% ethanol extract of Solenostemon scutellarioides was replaced with purified water to obtain a conventional cream.
[0031]

[Manufacturing method] Components 2 to 5 and components 1 and 6 to 11 are uniformly dissolved and mixed to obtain a product.
[0032]

[Production Method] Components 1 to 11 are uniformly dissolved to obtain a product.
[0034]

[Production method] Components 1 to 5 are uniformly mixed to obtain a product.
[0035]

[Production Method] Components 3 to 6 are dissolved by heating and mixed, and kept at 70 ° C. to obtain an oil phase. Ingredients 1, 2, and 7-9 are dissolved by heating and mixed, and kept at 75 ° C. to form an aqueous phase. The aqueous phase is added to the oil phase to emulsify, and the mixture is cooled to 30 ° C. with stirring to obtain a product.
[0036]
Next, experimental examples will be given to explain the effects of the present invention in detail.
[0037]
Experimental Example 1 Active oxygen scavenging action
Using Production Examples 1 and 2 as samples, the scavenging action of superoxide, which is a kind of active oxygen, was measured. Superoxide dismutase (SOD) was used as a positive control. In addition, in order to confirm the stability of the sample, the sample was stored at 40 ° C. for 2 weeks and measured in the same manner.
[0038]
0.15 mL of a sample aqueous solution of each concentration was added with 0.45 mL of a coloring reagent (0.24 mM nitroblue tetrazolium, 0.1 M phosphate buffer containing 0.4 mM xanthine; pH 8.0) and 0.45 mL of enzyme solution (0 0.1 M phosphate buffer containing 1 U / mL xanthine oxidase; pH 8.0) was added and reacted at 37 ° C. for 20 minutes to produce diformazan. After adding 1.0 mL of a reaction stop solution (69 mM sodium dodecyl sulfate aqueous solution) to this solution, the absorbance at a wavelength of 560 nm was measured. The inhibitory action of each sample was calculated by the erasure rate obtained from the following formula. For the control, purified water was used instead of the sample, and 0.1 M phosphate buffer (pH 8.0) was used instead of tyrosinase as a blank.
Erase rate (%) = [1- (C−D) / (A−B)] × 100
A: Absorbance at 560 nm (OD 560) of the control
B: O. D. 560
C: Sample O.D. D. 560
D: Sample blank O.D. D. 560
The test results are shown in Table 1. As a result, SOD significantly reduced the active oxygen scavenging action by storage at 40 ° C. for 2 weeks, but the extract of the present invention did not change the scavenging action. From the above, the extract of the present invention showed a stable and excellent active oxygen scavenging action.
[0039]
[Table 1]

[0040]
Experimental Example 2 Hyaluronidase inhibitory action
Production Examples 1 and 2 were used as samples, and the hyaluronidase inhibitory action was measured according to a method using the Morgan-Elson method [Food Hygiene Journal, 31, 3 (1990)]. That is, 175 μL of 0.1 M acetate buffer (pH 4.0) was added to the sample solution, the enzyme activity of hyaluronidase was 400 U / mL, the concentration of hyaluronic acid was 0.4 mg / mL, and compound 48/80 of the activator was 0. The total amount was adjusted to 500 μL so as to be 0.06 mg / mL, and then the hyaluronidase reaction was performed at 37 ° C. for 40 minutes. After the reaction, a p-dimethylaminobenzaldehyde reagent was added to develop color, and the absorbance at 585 nm was measured. Moreover, the inhibitory action of each sample was calculated by the inhibition rate calculated | required from the following formula. For the control, purified water was used instead of the sample, and purified water was used instead of hyaluronidase as a blank.
Inhibition rate (%) = [1- (C−D) / (A−B)] × 100
A: Absorbance at 585 nm of control (OD 585)
B: O. D. 585
C: Sample O.D. D. 585
D: Sample blank O.D. D. 585
[0041]
The results of these experiments are shown in Table 2. As a result, the extract of the present invention showed an excellent hyaluronidase inhibitory action.
[0042]
[Table 2]

[0043]
Experimental Example 3 Elastase inhibitory action
Using Production Examples 1 and 2 as samples, the elastase inhibitory action was measured. 50 μL of Tris-HCl buffer (pH 8.0) containing 0.02 mg / mL elastase Type III (manufactured by Sigma) is added to 50 μL of the sample solution. After adding 100 μL of 0.2 M Tris-HCl buffer (pH 8.0) containing 0.45 mg / mL N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-ρ-nitroanilide (manufactured by Sigma) as a substrate solution, the mixture was mixed at 37 ° C. The reaction was performed for 1 hour, and the absorbance at 415 nm was measured. Moreover, the inhibitory action of each sample was calculated by the inhibition rate calculated | required from the following formula. For the control, purified water was used instead of the sample, and 0.2 M Tris-HCl buffer (pH 8.0) was used instead of elastase as a blank.
Inhibition rate (%) = [1- (C−D) / (A−B)] × 100
A: Absorbance at 415 nm of control (OD 415)
B: O. D. 415
C: Sample O.D. D. 415
D: Sample blank O.D. D. 415
[0044]
The results of these experiments are shown in Table 3. As a result, the extract of the present invention showed an excellent elastase inhibitory action.
[0045]
[Table 3]

[0046]
Experimental Example 4 Collagenase inhibitory action
Using Production Examples 1 and 2 as samples, the collagenase inhibitory action was measured. 50 μL of 0.1 mg / mL collagenase type IV (manufactured by Sigma) is added as an enzyme solution to 50 μL of the sample solution. As a substrate solution, a Tris-HCl buffer solution (pH 7.1) containing 20 mM calcium chloride containing 0.39 mg / mL Pz-peptide (Pz-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg-OH, manufactured by Sigma) was added. After mixing and reacting at 37 ° C. for 3 minutes, 1 mL of 25 mM citric acid was added to stop the reaction. Extraction was performed by adding 5 mL of ethyl acetate, and the absorbance of the ethyl acetate layer was measured at 320 nm. Moreover, the inhibitory action of each sample was calculated by the inhibition rate calculated | required from the following formula. For the control, purified water was used instead of the sample, and 20 mM calcium chloride-containing Tris-HCl buffer (pH 7.1) was used instead of collagenase as a blank.
Inhibition rate (%) = [1- (C−D) / (A−B)] × 100
A: Absorbance at 320 nm of control (OD 320)
B: O. D. 320
C: Sample O.D. D. 320
D: Sample blank O.D. D. 320
[0047]
The results of these experiments are shown in Table 4. As a result, the extract of the present invention showed an excellent collagenase inhibitory action.
[0048]
[Table 4]

[0049]
Experimental Example 5 Melanin production inhibitory action
Using Production Examples 1 and 2 as samples, the melanin production inhibitory action was measured. A melanoma in the logarithmic growth phase is seeded with 3 × 10 ⁴ cells in a diameter of 60 mm dish, and an Eagles'MEM (containing 10% fetal bovine serum) medium containing ascorbic acid as an extract of various concentrations of seaweed or a positive control is used. In addition, the cells were cultured under the conditions of 37 ° C. and 5% CO ₂ . Further, in order to confirm the stability of the sample, the same evaluation was performed using a solution in which the aqueous solution of the sample was allowed to stand at room temperature for 24 hours. After 5 days of culturing, the cells were detached from the dish, and the cells were sonicated and then treated with 2N NaOH for 2 hours at 60 ° C. D. 475 nm was measured. In addition, the protein quantification is performed for the cell lysate after sonication by Lowry's method (J. Biol. Chem., 193, 265-275, 1951), and the amount of melanin per amount of protein is compared to suppress melanin production. It was used as an effect index.
[0050]
The test results are shown in Table 5. The extract of the present invention of the present invention exhibited an excellent melanin production inhibitory action.
[0051]
[Table 5]

[0052]
Experiment 6 Use test 1
Using the lotion of Example 1, the cream of Example 2, the conventional lotion of Comparative Example 1 and the conventional cream of Comparative Example 2 for 10 women (21 to 46 years old) for 1 month use A test was conducted. After use, the effect of improving skin wrinkles and tarmi was determined by a questionnaire.
[0053]
The test results are shown in Table 6. As a result, the external preparation for skin containing the extract of the present invention showed an excellent wrinkle and tarmi improving action. During the test period, there was no skin problem and there was no problem with safety. There was also no problem with the deterioration of the prescription ingredients.
[0054]
[Table 6]

[0055]
Experiment 7 Use test 2
Using the lotion of Example 1, the cream of Example 2, the conventional lotion of Comparative Example 1 and the conventional cream of Comparative Example 2, targeting 10 women (21 to 46 years old) suffering from spots and freckles A one month use test was conducted. After use, the effect of improving spots and freckles was judged by a questionnaire.
[0056]
The test results are shown in Table 7. As a result, the external preparation for skin containing the extract of the present invention showed an excellent effect of improving spots and freckles. During the test period, there was no skin problem and there was no problem with safety. There was also no problem with the deterioration of the prescription ingredients.
[0057]
[Table 7]

[0058]
Was carried out using the test in the same manner for the other embodiments, shown excellent wrinkle, sagging, age spots, the improving effect such as freckles.
[0059]
【The invention's effect】
From the above, plant extracts belonging to specific Lamiaceae have excellent active oxygen scavenging action, hyaluronidase inhibition, elastase inhibition, collagenase inhibition, and melanin production inhibition action, and were also excellent in stability. Furthermore, the external preparation for skin containing these extracts showed safe and excellent anti-aging and whitening action.

Claims

An external preparation for skin containing an extract of Solenostemon scutellarioides with water or water-containing ethanol . Here, the ethanol concentration of hydrous ethanol is 0 to 50%.

A melanin production inhibitor characterized by containing an extract of water or hydrous ethanol of a plant selected from one or two types of Solenostemon scutellarioides and Coleus scutellarioides . Here, the ethanol concentration of hydrous ethanol is 0 to 50%.