JP3989803B2 - 食品腐敗菌の増殖抑制方法 - Google Patents
食品腐敗菌の増殖抑制方法 Download PDFInfo
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、飲食料品、加工食品、食用魚肉などの保存料や抗菌剤として、安息香酸、ソルビン酸、デヒドロ酢酸、サリチル酸などの合成化合物が一般に使用されてきた。しかしながら、これらは、抗菌効果には優れているものの、衛生上の安全性が懸念されるため、その使用量、使用範囲などが厳しく制限されている。また、これらは、極めて微量であっても毒性を有すため、人体に悪影響を及ぼさないとはいえ、体内に摂取するのは好ましいとはいえない。
【０００３】
そこで、近年、より安全性の高い天然由来の保存料や抗菌剤が注目されている（例えば、特許文献１から１２参照）。例えば、リゾチームは、主に卵白から抽出精製され、細菌の細胞壁溶解酵素として知られており、安全性が高いことから、惣菜類、米飯、麺類、生洋菓子、水産練製品等の保存剤や日持向上剤などに用いられている。
しかし、リゾチームは通常のグラム陽性菌に対しては有効であるものの、乳酸菌に対してはその作用が十分でないことがある。例えば、食品の腐敗を防止するために添加したリゾチームが、該食品に混入した乳酸菌の育成を促進してしまう、いわゆる菌交代現象を生ずるおそれがある。リゾチームは、天然由来の酵素で安全性が高いという利点を有するものの、食品中に混入した微生物、特にグラム陽性菌である乳酸菌に対する増殖抑制能が十分でないという問題がある。
【０００４】
一方、グレープフルーツやオレンジなどの柑橘類から抽出される柑橘類抽出物は、安全でしかも抗菌性を有する食品添加物及び広範囲な用途に使用可能な抗菌剤として知られている。前記柑橘類抽出物としては、柑橘類の種子、果実、果皮などからの抽出物が知られている。これらは、安全でしかも広範囲な用途に使用することができるという利点があるものの、食品中に混入した微生物、特にグラム陽性菌である乳酸菌に対し、安定した増殖抑制能が発揮できないという問題がある。
【０００５】
【特許文献１】
特開平６−１６５６３号公報
【特許文献２】
特開平９−４８９６９号公報
【特許文献３】
国際公開第００／１１９５６号パンフレット
【特許文献４】
特開昭５０−１５７５２０号公報
【特許文献５】
特公平５−７８３０１号公報
【特許文献６】
特開平２−２７６５４５号公報
【特許文献７】
特開平３−９０００８号公報
【特許文献８】
特公平６−４２８２２号公報
【特許文献９】
特開平５−５６７７３号公報
【特許文献１０】
特開平６−１１３８０１号公報
【特許文献１１】
特開平７−２５７６４号公報
【特許文献１２】
特開平１１−３０４３１２号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、従来における問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
前記課題を解決するために本発明者らが鋭意検討した結果、以下の知見を得た。即ち、安全性に優れた天然由来のリゾチームとグレープフルーツ、みかん等の柑橘類抽出物とを併用することにより、更には所定量どうしを併用することにより、微生物の増殖抑制の相乗的効果が得られるという知見である。
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段は、以下の通りである。即ち、
＜１＞ リゾチームと柑橘類抽出物とを併用することを特徴とする、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜２＞ ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック クレモリス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０８〜０．１２質量％であり、柑橘類抽出物の使用量が０．００８〜０．０１２質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜３＞ ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック デキストラニカム（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．０００３〜０．０００７質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜４＞ ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．１２質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．０００３〜０．０００７質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜５＞ ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．００３〜０．０１２質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜６＞ ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．００３〜０．００７％質量である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜７＞ ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス ゼアエ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｚｅａｅ）であり、リゾチームの使用量が０．０２〜０．１０質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．０００３〜０．００１２質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜８＞ 柑橘類抽出物がグレープフルーツ抽出物である前記＜１＞から＜７＞いずれかに記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜９＞ 柑橘類抽出物がみかん抽出物である前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜１０＞ 柑橘類抽出物が、柑橘類の果皮、果肉及び種子の少なくともいずれかから抽出された前記＜１＞から＜９＞のいずれかに記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
【０００８】
【発明の実施の形態】
（ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法）
本発明のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法は、リゾチームと、柑橘類抽出物とを併用し、目的に応じ更にその他の成分を使用する。
本発明によると、微生物の増殖を抑制することができ、食品の日持ちを、即ち該食品を安全に食することができる期間を、約１〜２日間程度延長可能な効果を有する。
【０００９】
−リゾチーム−
前記リゾチームとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、合成したものであってもよいし、天然物から分離精製したものであってもよいが、食品衛生の観点からは後者の方が好ましく、これらの中でも、卵白リゾチームが好ましい。
【００１０】
前記リゾチームの前記食品用日持向上剤における含有量としては、前記食品の種類、増殖抑制対象の微生物種などに応じて適宜選択することができるが、前記食品に対する添加量で、該食品全量に対し、例えば、前記微生物が乳酸菌である場合には、０．０２〜０．１２質量％程度である。
【００１１】
なお、前記乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌の場合には、０．０２〜０．１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓの場合には０．０８〜０．１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍの場合には０．０２〜０．０６質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓの場合には０．０２〜０．１２質量％が好ましい。
【００１２】
また、前記乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌の場合には、０．０２〜０．１０質量％が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉの場合には０．０２〜０．０６質量％が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔａｒｕｍの場合には０．０２〜０．０６質量％が好ましく、該Ｌａ ｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｚｅａｅの場合には０．０２〜０．１０質量％が好ましい。
【００１３】
−柑橘類抽出物−
前記柑橘類抽出物としては、特に制限はなく、公知の柑橘類抽出物の中から適宜選択することができ、例えば、みかん、甘夏、ハッサク、イヨカン、ブンタン、ライム、オレンジ、グレープフルーツ、レモン、ダイダイ、ネーブル、キンカン、ユズ、カラタチ、スダチ、カボス、ポンカンなどの抽出物が挙げられる。この中でも、グレープフルーツ抽出物、みかん抽出物が特に好ましい。
また、前記柑橘類抽出物としては、前記柑橘物の果皮、果実及び種子の少なくともいずれかの抽出物でもよいが、これらの中でも種子抽出物であるのが特に好ましい。
【００１４】
前記柑橘類抽出物の前記食品用日持向上剤における含有量としては、前記食品の種類、増殖抑制対象の微生物種などに応じて適宜選択することができるが、前記食品に対する添加量で、該食品全量に対し、例えば、前記微生物が乳酸菌である場合には、０．０００５〜０．０１質量％程度である。
【００１５】
なお、前記乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌の場合には、０．０００３〜０．０１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓの場合には０．００８〜０．０１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍの場合には０．０８〜０．１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓの場合には０．０００３〜０．０００７質量％が好ましい。
【００１６】
また、前記乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌である場合には、０．０００３〜０．０１２質量％が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉの場合には０．００３〜０．０１２質量％が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍの場合には０．００３〜０．００７％質量が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｚｅａｅの場合には０．０００３〜０．００１２質量％が好ましい。
【００１７】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００１８】
本発明は、各種食品に適用することができるが、該食品としては、例えば、食肉惣菜、中華惣菜、煮物、菓子、弁当、水産食品、発酵食品、飲料などが好適に挙げられる。
前記食肉惣菜としては、例えば、ハンバーグ、ミートボール、唐揚げ、メンチカツ、ナゲット、ソーセージなどが挙げられ、
前記中華惣菜としては、例えば、シュウマイ、餃子、春巻きなどが挙げられる。
前記煮物としては、例えば、牛丼の具、親子丼の具、肉じゃがなどが挙げられる。
前記菓子としては、例えば、カスタードクリーム、プリン、ゼリー、ババロアなどが挙げられる。
前記弁当としては、例えば、コンビニエンスストア等で販売される各種弁当などが挙げられる。
前記水産食品としては、例えば、かまぼこ、はんぺん、ちくわ、さつま揚げなどが挙げられる。
前記発酵食品としては、例えば、チーズなどが挙げられる。
前記飲料としては、例えば、清酒、ジュース、清涼飲料、ドリンク剤などが挙げられる。
【００１９】
【実施例】
以下、本発明の実施例を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００２０】
−食品用日持向上剤の調製−
前記リゾチームとして、卵白リゾチーム（エーザイ株式会社製）を用い、前記柑橘類抽出物として、グレープフルーツ種子抽出物（第一化成株式会社製）又はみかん種子抽出物（Ｍｅｄｈｅｒｂ，Ｃｏ．製）を用いて、これらを後述する実施例において示す所定量配合して実施例の食品用日持向上剤を調製した。
一方、ε-ポリリジン（チッソ株式会社製）を単独で、又は前記リゾチームと併用して、後述する比較例において示す所定量配合して比較例の食品用日持向上剤を調製した。
【００２１】
−培地と培養−
培地としては、ＧＹＰ培地を用いた。液体培養では、試験管に前記ＧＹＰ培地１０．０ｍｌを分注し、１２１℃、１５分滅菌して用いた。
培養は、１８時間前培養した菌液を培地量の１％になるように接種し、３０℃で静置培養した。
菌の生育は、ＭｉｎｉＰｈｏｔｏ（Ｔａｉｔｅｃ）を用いて経時的に吸光度（６６０ｎｍ）を測定することにより調べた。
【００２２】
−試験方法−
前記培地にＬｅｕｃｏｎｓｔｏｃ属乳酸菌として；（Ａ）Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｒｅｍｏｒｉｓ ＩＡＭ１０８７,（Ｂ）Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ ＩＡＭ１１２２，（Ｃ）Ｌｅｕｃｏｎｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅＩＦＯ３４２６をそれぞれ接種して培養し、また、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌として；（Ｄ）Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ＩＡＭ１０４５，（Ｅ）Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＩＡＭ１０４１，（Ｆ）Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓ ｚｅａｅ ＩＡＭ１２４７３をそれぞれ接種して培養した。
これらの各培養液に対し、実施例１〜１０の食品用日持向上剤及び比較例の食品用日持向上剤を添加して、その後の前記（Ａ）〜（Ｆ）の各乳酸菌（以下、（Ａ）〜（Ｆ）菌と略称する）の生育率を以下のようにして評価した。
【００２３】
−評価方法−
前記液体培養においては、前記食品用日持向上剤を添加しない時の生育量に対する、前記食品用日持向上剤を添加した時の生育量の割合を生育率（％）として、以下のように前記食品用日持向上剤の効果を評価した。
【００２４】
【数１】
【００２５】
算出した前記生育率について、以下の３段階に該当するものは、食品用日持向上剤として望ましい性能を有するものとして評価した。
増殖完全阻止能があるもの・・・・・生育率が３日間（７２時間）０％の時
増殖阻止能があるもの・・・・・・・生育率が３日間（７２時間）１０％未満増殖抑制能があるもの・・・１〜２日目において生育率が１０％以上であっても３日目に生育率が１０％未満
【００２６】
また、各食品用日持向上剤の添加濃度毎に、生育率に基づいて生育の程度を生育度として以下の６段階に分けて評価した。
生育率９０％以上である場合・・・・・・×
生育率６０％以上９０％未満の場合・・・▼
生育率４０％以上６０％未満の場合・・・▲
生育率１０％以上４０％未満の場合・・・△
生育率０％超１０％未満の場合・・・・・○
生育率０％・・・・・・・・・・・・・・◎
【００２７】
（実施例１及び比較例１）
―（Ａ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例１として、リゾチーム０．１質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．０１質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例１として、リゾチーム０．１質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．０１質量％、ポリリジン０．１質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．１質量％とポリリジン０．１質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ａ）菌（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｒｅｍｏｒｉｓ
ＩＡＭ１０８７）の生育率を試験し、その結果を表１に示した。
【００２８】
【表１】
表１中、「ＬＺ」は、リゾチームを表し、「ＧＦ」は、グレープフルーツ種子抽出物を表し、「ＰＬ」は、ポリリジンを表す。
【００２９】
（実施例２及び比較例２）
―（Ｂ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例２として、リゾチーム０．０４質量％及びみかん種子抽出物０．０００５％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例２として、リゾチーム０．０４質量％、みかん種子抽出物０．０００５質量％、ポリリジン０．０５質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．０４質量％とポリリジン０．０５質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｂ）菌（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ ＩＡＭ１１２２）の生育率を試験し、その結果を表２に示した。
【００３０】
【表２】
表２中、「ＬＺ」は、リゾチームを表し、「ＣＴＲ」は、みかん種子抽出物を表し、「ＰＬ」は、ポリリジンを表す。
【００３１】
（実施例３〜４及び比較例３）
―（Ｃ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例３として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。また、実施例４として、リゾチーム０．１質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例３として、リゾチーム０．０４質量％、リゾチーム０．１質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％、ポリリジン０．００１質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．１質量％とポリリジン０．００１質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｃ）菌（Ｌｅｕｃｏｎｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅ ＩＦＯ３４２６）の生育率を試験し、その結果を表３に示した。
【００３２】
【表３】
表３中、「ＬＺ（１）」は、リゾチーム（０．０４質量％）を表し、「ＬＺ（２）」は、リゾチーム（０．１質量％）を表し、「ＧＦ」は、グレープフルーツ種子抽出物を表し、「ＰＬ」は、ポリリジンを表す。
【００３３】
（実施例５〜６及び比較例４）
―（Ｄ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例５として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。また、実施例６として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．０１質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例４として、リゾチーム０．０４質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．０１質量％、ポリリジン０．０１質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．０４質量％とポリリジン０．０１質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｄ）菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ＩＡＭ１０４５）の生育率を試験し、その結果を表４に示した。
【００３４】
【表４】
表４中、「ＬＺ」は、リゾチームを表し、「ＧＦ（１）」は、グレープフルーツ種子抽出物（０．００５質量％）を表し、「ＧＦ（２）」は、グレープフルーツ種子抽出物（０．０１質量％）を表し、「ＰＬ」は、ポリリジンを表す。
【００３５】
（実施例７及び比較例５）
―（Ｅ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例７として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例５として、リゾチーム０．０４質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％、ポリリジン０．００５質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．０４質量％とポリリジン０．００５質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｅ）菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＩＡＭ１０４１）の生育率を試験し、その結果を表５に示した。
【００３６】
【表５】
表５中、「ＬＺ」は、リゾチームを表し、「ＧＦ」は、グレープフルーツ種子抽出物を表し、「ＰＬ」は、ポリリジンを表す。
【００３７】
（実施例８〜１０及び比較例６）
―（Ｆ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例８として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００１質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。実施例９として、リゾチーム０．０８質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．０００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。実施例１０として、リゾチーム０．０８質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００１質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例６として、リゾチーム０．０４質量％、リゾチーム０．０８質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．０００５質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．００１質量％、ポリリジン０．００５質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．０４質量％とポリリジン０．００５質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｆ）菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓ ｚｅａｅ ＩＡＭ１２４７３）の生育率を試験し、その結果を表６に示した。
【００３８】
【表６】
表６中、「ＬＺ（１）」は、リゾチーム（０．０４質量％）を表し、「ＬＺ（２）」は、リゾチーム（０．０８質量％）を表し、「ＧＦ（１）」は、グレープフルーツ種子抽出物（０．０００５質量％）を表し、「ＧＦ（２）」は、グレープフルーツ種子抽出物（０．００１質量％）を表し、「ＰＬ」は、ポリリジンを表す。
【００３９】
以上の実施例１〜１０より、本発明は、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌及びＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌に対する増殖阻止乃至抑制効果に優れていることが判った。
【００４０】
【発明の効果】
本発明は、食品に要求される程度の日持ちを向上可能であり、乳酸菌等の腐敗菌に対し特に有効である。
【発明の属する技術分野】
本発明は、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、飲食料品、加工食品、食用魚肉などの保存料や抗菌剤として、安息香酸、ソルビン酸、デヒドロ酢酸、サリチル酸などの合成化合物が一般に使用されてきた。しかしながら、これらは、抗菌効果には優れているものの、衛生上の安全性が懸念されるため、その使用量、使用範囲などが厳しく制限されている。また、これらは、極めて微量であっても毒性を有すため、人体に悪影響を及ぼさないとはいえ、体内に摂取するのは好ましいとはいえない。
【０００３】
そこで、近年、より安全性の高い天然由来の保存料や抗菌剤が注目されている（例えば、特許文献１から１２参照）。例えば、リゾチームは、主に卵白から抽出精製され、細菌の細胞壁溶解酵素として知られており、安全性が高いことから、惣菜類、米飯、麺類、生洋菓子、水産練製品等の保存剤や日持向上剤などに用いられている。
しかし、リゾチームは通常のグラム陽性菌に対しては有効であるものの、乳酸菌に対してはその作用が十分でないことがある。例えば、食品の腐敗を防止するために添加したリゾチームが、該食品に混入した乳酸菌の育成を促進してしまう、いわゆる菌交代現象を生ずるおそれがある。リゾチームは、天然由来の酵素で安全性が高いという利点を有するものの、食品中に混入した微生物、特にグラム陽性菌である乳酸菌に対する増殖抑制能が十分でないという問題がある。
【０００４】
一方、グレープフルーツやオレンジなどの柑橘類から抽出される柑橘類抽出物は、安全でしかも抗菌性を有する食品添加物及び広範囲な用途に使用可能な抗菌剤として知られている。前記柑橘類抽出物としては、柑橘類の種子、果実、果皮などからの抽出物が知られている。これらは、安全でしかも広範囲な用途に使用することができるという利点があるものの、食品中に混入した微生物、特にグラム陽性菌である乳酸菌に対し、安定した増殖抑制能が発揮できないという問題がある。
【０００５】
【特許文献１】
特開平６−１６５６３号公報
【特許文献２】
特開平９−４８９６９号公報
【特許文献３】
国際公開第００／１１９５６号パンフレット
【特許文献４】
特開昭５０−１５７５２０号公報
【特許文献５】
特公平５−７８３０１号公報
【特許文献６】
特開平２−２７６５４５号公報
【特許文献７】
特開平３−９０００８号公報
【特許文献８】
特公平６−４２８２２号公報
【特許文献９】
特開平５−５６７７３号公報
【特許文献１０】
特開平６−１１３８０１号公報
【特許文献１１】
特開平７−２５７６４号公報
【特許文献１２】
特開平１１−３０４３１２号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、従来における問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
前記課題を解決するために本発明者らが鋭意検討した結果、以下の知見を得た。即ち、安全性に優れた天然由来のリゾチームとグレープフルーツ、みかん等の柑橘類抽出物とを併用することにより、更には所定量どうしを併用することにより、微生物の増殖抑制の相乗的効果が得られるという知見である。
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段は、以下の通りである。即ち、
＜１＞ リゾチームと柑橘類抽出物とを併用することを特徴とする、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜２＞ ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック クレモリス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０８〜０．１２質量％であり、柑橘類抽出物の使用量が０．００８〜０．０１２質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜３＞ ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック デキストラニカム（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．０００３〜０．０００７質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜４＞ ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．１２質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．０００３〜０．０００７質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜５＞ ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．００３〜０．０１２質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜６＞ ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．００３〜０．００７％質量である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜７＞ ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス ゼアエ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｚｅａｅ）であり、リゾチームの使用量が０．０２〜０．１０質量％で、柑橘類抽出物の使用量が０．０００３〜０．００１２質量％である前記＜１＞に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜８＞ 柑橘類抽出物がグレープフルーツ抽出物である前記＜１＞から＜７＞いずれかに記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜９＞ 柑橘類抽出物がみかん抽出物である前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
＜１０＞ 柑橘類抽出物が、柑橘類の果皮、果肉及び種子の少なくともいずれかから抽出された前記＜１＞から＜９＞のいずれかに記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法である。
【０００８】
【発明の実施の形態】
（ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法）
本発明のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法は、リゾチームと、柑橘類抽出物とを併用し、目的に応じ更にその他の成分を使用する。
本発明によると、微生物の増殖を抑制することができ、食品の日持ちを、即ち該食品を安全に食することができる期間を、約１〜２日間程度延長可能な効果を有する。
【０００９】
−リゾチーム−
前記リゾチームとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、合成したものであってもよいし、天然物から分離精製したものであってもよいが、食品衛生の観点からは後者の方が好ましく、これらの中でも、卵白リゾチームが好ましい。
【００１０】
前記リゾチームの前記食品用日持向上剤における含有量としては、前記食品の種類、増殖抑制対象の微生物種などに応じて適宜選択することができるが、前記食品に対する添加量で、該食品全量に対し、例えば、前記微生物が乳酸菌である場合には、０．０２〜０．１２質量％程度である。
【００１１】
なお、前記乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌の場合には、０．０２〜０．１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓの場合には０．０８〜０．１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍの場合には０．０２〜０．０６質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓの場合には０．０２〜０．１２質量％が好ましい。
【００１２】
また、前記乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌の場合には、０．０２〜０．１０質量％が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉの場合には０．０２〜０．０６質量％が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔａｒｕｍの場合には０．０２〜０．０６質量％が好ましく、該Ｌａ ｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｚｅａｅの場合には０．０２〜０．１０質量％が好ましい。
【００１３】
−柑橘類抽出物−
前記柑橘類抽出物としては、特に制限はなく、公知の柑橘類抽出物の中から適宜選択することができ、例えば、みかん、甘夏、ハッサク、イヨカン、ブンタン、ライム、オレンジ、グレープフルーツ、レモン、ダイダイ、ネーブル、キンカン、ユズ、カラタチ、スダチ、カボス、ポンカンなどの抽出物が挙げられる。この中でも、グレープフルーツ抽出物、みかん抽出物が特に好ましい。
また、前記柑橘類抽出物としては、前記柑橘物の果皮、果実及び種子の少なくともいずれかの抽出物でもよいが、これらの中でも種子抽出物であるのが特に好ましい。
【００１４】
前記柑橘類抽出物の前記食品用日持向上剤における含有量としては、前記食品の種類、増殖抑制対象の微生物種などに応じて適宜選択することができるが、前記食品に対する添加量で、該食品全量に対し、例えば、前記微生物が乳酸菌である場合には、０．０００５〜０．０１質量％程度である。
【００１５】
なお、前記乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌の場合には、０．０００３〜０．０１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓの場合には０．００８〜０．０１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍの場合には０．０８〜０．１２質量％が好ましく、該Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌がＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓの場合には０．０００３〜０．０００７質量％が好ましい。
【００１６】
また、前記乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌である場合には、０．０００３〜０．０１２質量％が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉの場合には０．００３〜０．０１２質量％が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍの場合には０．００３〜０．００７％質量が好ましく、該Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｚｅａｅの場合には０．０００３〜０．００１２質量％が好ましい。
【００１７】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００１８】
本発明は、各種食品に適用することができるが、該食品としては、例えば、食肉惣菜、中華惣菜、煮物、菓子、弁当、水産食品、発酵食品、飲料などが好適に挙げられる。
前記食肉惣菜としては、例えば、ハンバーグ、ミートボール、唐揚げ、メンチカツ、ナゲット、ソーセージなどが挙げられ、
前記中華惣菜としては、例えば、シュウマイ、餃子、春巻きなどが挙げられる。
前記煮物としては、例えば、牛丼の具、親子丼の具、肉じゃがなどが挙げられる。
前記菓子としては、例えば、カスタードクリーム、プリン、ゼリー、ババロアなどが挙げられる。
前記弁当としては、例えば、コンビニエンスストア等で販売される各種弁当などが挙げられる。
前記水産食品としては、例えば、かまぼこ、はんぺん、ちくわ、さつま揚げなどが挙げられる。
前記発酵食品としては、例えば、チーズなどが挙げられる。
前記飲料としては、例えば、清酒、ジュース、清涼飲料、ドリンク剤などが挙げられる。
【００１９】
【実施例】
以下、本発明の実施例を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００２０】
−食品用日持向上剤の調製−
前記リゾチームとして、卵白リゾチーム（エーザイ株式会社製）を用い、前記柑橘類抽出物として、グレープフルーツ種子抽出物（第一化成株式会社製）又はみかん種子抽出物（Ｍｅｄｈｅｒｂ，Ｃｏ．製）を用いて、これらを後述する実施例において示す所定量配合して実施例の食品用日持向上剤を調製した。
一方、ε-ポリリジン（チッソ株式会社製）を単独で、又は前記リゾチームと併用して、後述する比較例において示す所定量配合して比較例の食品用日持向上剤を調製した。
【００２１】
−培地と培養−
培地としては、ＧＹＰ培地を用いた。液体培養では、試験管に前記ＧＹＰ培地１０．０ｍｌを分注し、１２１℃、１５分滅菌して用いた。
培養は、１８時間前培養した菌液を培地量の１％になるように接種し、３０℃で静置培養した。
菌の生育は、ＭｉｎｉＰｈｏｔｏ（Ｔａｉｔｅｃ）を用いて経時的に吸光度（６６０ｎｍ）を測定することにより調べた。
【００２２】
−試験方法−
前記培地にＬｅｕｃｏｎｓｔｏｃ属乳酸菌として；（Ａ）Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｒｅｍｏｒｉｓ ＩＡＭ１０８７,（Ｂ）Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ ＩＡＭ１１２２，（Ｃ）Ｌｅｕｃｏｎｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅＩＦＯ３４２６をそれぞれ接種して培養し、また、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌として；（Ｄ）Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ＩＡＭ１０４５，（Ｅ）Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＩＡＭ１０４１，（Ｆ）Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓ ｚｅａｅ ＩＡＭ１２４７３をそれぞれ接種して培養した。
これらの各培養液に対し、実施例１〜１０の食品用日持向上剤及び比較例の食品用日持向上剤を添加して、その後の前記（Ａ）〜（Ｆ）の各乳酸菌（以下、（Ａ）〜（Ｆ）菌と略称する）の生育率を以下のようにして評価した。
【００２３】
−評価方法−
前記液体培養においては、前記食品用日持向上剤を添加しない時の生育量に対する、前記食品用日持向上剤を添加した時の生育量の割合を生育率（％）として、以下のように前記食品用日持向上剤の効果を評価した。
【００２４】
【数１】
算出した前記生育率について、以下の３段階に該当するものは、食品用日持向上剤として望ましい性能を有するものとして評価した。
増殖完全阻止能があるもの・・・・・生育率が３日間（７２時間）０％の時
増殖阻止能があるもの・・・・・・・生育率が３日間（７２時間）１０％未満増殖抑制能があるもの・・・１〜２日目において生育率が１０％以上であっても３日目に生育率が１０％未満
【００２６】
また、各食品用日持向上剤の添加濃度毎に、生育率に基づいて生育の程度を生育度として以下の６段階に分けて評価した。
生育率９０％以上である場合・・・・・・×
生育率６０％以上９０％未満の場合・・・▼
生育率４０％以上６０％未満の場合・・・▲
生育率１０％以上４０％未満の場合・・・△
生育率０％超１０％未満の場合・・・・・○
生育率０％・・・・・・・・・・・・・・◎
【００２７】
（実施例１及び比較例１）
―（Ａ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例１として、リゾチーム０．１質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．０１質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例１として、リゾチーム０．１質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．０１質量％、ポリリジン０．１質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．１質量％とポリリジン０．１質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ａ）菌（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｒｅｍｏｒｉｓ
ＩＡＭ１０８７）の生育率を試験し、その結果を表１に示した。
【００２８】
【表１】
【００２９】
（実施例２及び比較例２）
―（Ｂ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例２として、リゾチーム０．０４質量％及びみかん種子抽出物０．０００５％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例２として、リゾチーム０．０４質量％、みかん種子抽出物０．０００５質量％、ポリリジン０．０５質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．０４質量％とポリリジン０．０５質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｂ）菌（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ ＩＡＭ１１２２）の生育率を試験し、その結果を表２に示した。
【００３０】
【表２】
【００３１】
（実施例３〜４及び比較例３）
―（Ｃ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例３として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。また、実施例４として、リゾチーム０．１質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例３として、リゾチーム０．０４質量％、リゾチーム０．１質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％、ポリリジン０．００１質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．１質量％とポリリジン０．００１質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｃ）菌（Ｌｅｕｃｏｎｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｕｂｓｐ． ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅ ＩＦＯ３４２６）の生育率を試験し、その結果を表３に示した。
【００３２】
【表３】
【００３３】
（実施例５〜６及び比較例４）
―（Ｄ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例５として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。また、実施例６として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．０１質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例４として、リゾチーム０．０４質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．０１質量％、ポリリジン０．０１質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．０４質量％とポリリジン０．０１質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｄ）菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ＩＡＭ１０４５）の生育率を試験し、その結果を表４に示した。
【００３４】
【表４】
【００３５】
（実施例７及び比較例５）
―（Ｅ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例７として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例５として、リゾチーム０．０４質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．００５質量％、ポリリジン０．００５質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．０４質量％とポリリジン０．００５質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｅ）菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＩＡＭ１０４１）の生育率を試験し、その結果を表５に示した。
【００３６】
【表５】
【００３７】
（実施例８〜１０及び比較例６）
―（Ｆ）菌に対する増殖阻止乃至抑制効果―
実施例８として、リゾチーム０．０４質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００１質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。実施例９として、リゾチーム０．０８質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．０００５質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。実施例１０として、リゾチーム０．０８質量％及びグレープフルーツ種子抽出物０．００１質量％を配合した食品用日持向上剤を調製した。
また、比較例６として、リゾチーム０．０４質量％、リゾチーム０．０８質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．０００５質量％、グレープフルーツ種子抽出物０．００１質量％、ポリリジン０．００５質量％をそれぞれ単独で用いた食品用日持向上剤、及び、リゾチーム０．０４質量％とポリリジン０．００５質量％とを併用した食品用日持向上剤を調製した。
これらの食品用日持向上剤を用い、上述したようにして（Ｆ）菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓ ｚｅａｅ ＩＡＭ１２４７３）の生育率を試験し、その結果を表６に示した。
【００３８】
【表６】
【００３９】
以上の実施例１〜１０より、本発明は、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属乳酸菌及びＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属乳酸菌に対する増殖阻止乃至抑制効果に優れていることが判った。
【００４０】
【発明の効果】
本発明は、食品に要求される程度の日持ちを向上可能であり、乳酸菌等の腐敗菌に対し特に有効である。
Claims (9)
- リゾチームと柑橘類種子抽出物とを併用することを特徴とする、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
- ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック クレモリス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０８〜０．１２質量％であり、柑橘類種子抽出物の使用量が０．００８〜０．０１２質量％である請求項１に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
- ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック デキストラニカム（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類種子抽出物の使用量が０．０００３〜０．０００７質量％である請求項１に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
- ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌がロイコノストック メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．１２質量％で、柑橘類種子抽出物の使用量が０．０００３〜０．０００７質量％である請求項１に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
- ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類種子抽出物の使用量が０．００３〜０．０１２質量％である請求項１に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
- ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）であり、食品全量に対する、リゾチームの使用量が０．０２〜０．０６質量％で、柑橘類種子抽出物の使用量が０．００３〜０．００７％質量である請求項１に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
- ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌がラクトバチルス ゼアエ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｚｅａｅ）であり、リゾチームの使用量が０．０２〜０．１０質量％で、柑橘類種子抽出物の使用量が０．０００３〜０．００１２質量％である請求項１に記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
- 柑橘類種子抽出物がグレープフルーツ種子抽出物である請求項１から７いずれかに記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
- 柑橘類種子抽出物がみかん種子抽出物である請求項１から７のいずれかに記載のロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属乳酸菌又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の増殖抑制方法。
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